ESPECTROSCOPIA RAMAN APLICADA S CINCIAS FARMACUTICAS: REVISO

DE LITERATURA
Borio, V.G.C. , Machado,N.C.S.S 1, Ceclio,R.A,F.1, Nicolau, R.A. 2, Silveira Jr, L. 3
1

1
Mestrado Engenharia Biomdica, Universidade do Vale do Paraba, SJC,Brasil,
Av. Shishima Hifumi, 2911- Urbanova, 12244-000, Fone/Fax:+55 12 3947 9999
2
Laboratrio de Biomodulao Tecidual, Universidade do Vale do Paraba,
12244-000, Fone:+5512 3947 1135, Fax: +55 12 3947 9999
3
Laboratrio de Espectroscopia Biomolecular, Universidade do Vale do Paraba,
122444-000, Fone: +55 12 3947 1124 Fax: +55 12 3947 9999
vborio@univap.br, rani@univap.br, landulfo@univap.br

Resumo- A Espectroscopia Raman tem sido amplamente utilizada em anlises farmacuticas com
substanciais vantagens em relao aos mtodos clssicos. As duas maiores tecnologias usadas para
coletar o espectro Raman so: Raman Dispersivo e Fourier Transform Raman (FT-Raman). O material
utilizado para a realizao do presente trabalho foi obtido atravs de buscas por trabalhos cientficos j
existentes na literatura. O objetivo foi realizar uma reviso das principais aplicaes desta tcnica na rea
de Farmcia na ltima dcada. Muitas aplicaes da Espectroscopia Raman como a investigao da
estrutura fundamental, anlises quantitativas, interao drogaexcipiente, formulaes, limite de deteco,
espcies dependentes de pH, possibilidade de efetuar anlises em frascos, determinao de misturas
lquidas, diferenciao de medicamentos falsos dos genunos, entre outras so apresentadas.

Palavras-chave: Espectroscopia Raman, Farmcia

rea do Conhecimento: IV- Cincias da Sade

Introduo Metodologia

A Espectroscopia Raman (ER) tem sido O material utilizado para a realizao do

empregada em anlises farmacuticas
apresentando inmeras vantagens em relao a
mtodos convencionais, principalmente pelo fato
de ser uma tcnica rpida e no destrutiva.
Permite identificar ativos farmacuticos, assim
como outras substncias presentes nas
formulaes, sem necessidade de tratamento
prvio das amostras (DE BEER et al., 2007). O
interesse por tcnicas confiveis e mais geis, na
determinao de teores em frmacos, uma
constante na rea (VINHA JR. et al., 2002).
As duas maiores tecnologias usadas para
a obteno do espectro Raman so: Raman
Dispersivo e Fourier Transform Raman (FT-
Raman). A diferena entre as duas est no laser
utilizado e na maneira como o espalhamento
Raman detectado e analisado. Cada tcnica
tem vantagens nicas e a escolha do mtodo
ideal depende da amostra em questo. Muitas
formas farmacuticas j foram estudadas pela
ER, como: comprimidos, tabletes, cpsulas,
solues, suspenses, injetveis, entre outros
(VANKEIRSBILCK et al., 2002).
O objetivo do presente trabalho foi
realizar uma reviso literria das principais
aplicaes desta tcnica na rea de Farmcia na
ltima dcada, em que a tecnologia trouxe
melhorias instrumentais espectroscopia.
presente trabalho foi obtido atravs de pesquisa
bibliogrfica e buscas por trabalhos cientficos
nos bancos de dados Medline, Science Direct,
Scielo, Bireme, Web of Science. Foram
selecionadas as referncias que continham as
palavras: Espectroscopia, Raman, Farmcia.
Resultados e Discusso
O mtodo ideal de controle de qualidade
para produtos farmacuticos deve ser capaz de
testar medicamentos de forma no destrutiva. A
espectroscopia Raman Dispersiva no
Infravermelho (IV) tem sido utilizada de forma
direta na determinao do contedo de cpsulas,
ou atravs do blister original. Niemczyk et al.
(1998) determinaram a dosagem de Bucindolol
pelas duas formas e observaram espectros
idnticos, porm com menor intensidade no
espectro obtido atravs do blister devido a perdas
por reflexo da radiao incidente sobre as
curvaturas da parede do invlucro. Segundo
Minjung et al. (2007) a possibilidade de
determinao de ativos atravs dos prprios
frascos plsticos ou de vidro pode ser
problemtica devido s variaes entre as
paredes dos mesmos, alm do posicionamento
de cada frasco no experimento. Para isto,
propuseram uma estratgia: a Wide Area

XI Encontro Latino Americano de Iniciao Cientfica e 1684

VII Encontro Latino Americano de Ps-Graduao Universidade do Vale do Paraba
Illumination (WAI). Os autores quantificaram a
Povidona em solues oftlmicas atravs da WAI
associado a um padro externo, comparando ao
sistema Raman convencional. Constataram que o
WAI somado ao padro externo aumentou a
reprodutibilidade e confiabilidade das anlises
atravs de frascos.
A gua apresenta um fraco espalhamento
Raman, no causando alteraes significativas
no espectro. Em conseqncia disso, medies
em meios aquosos se tornaram mais atrativas
(DE BEER et al., 2004). Os mesmos
determinaram o contedo do Acetato de
Medroxiprogesterona (MPA) pelo espectro FT-
Raman da amostra e em seguida por HPLC.
Concluram que o FT-Raman mais confivel na
quantificao do MPA em suspenso aquosa do
que o HPLC, visto que este ltimo requer o
preparo das amostras e conhecimento do volume
exato da suspenso e sua densidade, o que pode
induzir a erros.
De acordo com esta propriedade da
gua, o Diclofenaco de Sdio (DS) foi
quantificado em diversas diluies pelo sistema
Raman Dispersivo de bancada e pelo sistema
porttil. A tcnica mostrou-se fiel devido s
intensidades dos espectros obtidos estarem
correlacionadas s concentraes do DS de cada
diluio. Comparando-se o sistema porttil com o
de bancada, obteve-se semelhana de
resultados, mesmo com a utilizao do cateter de
fibra ptica pelo sistema porttil (SILVEIRA et al.,
2000).
Segundo Mazurek et al. (2006), no
comum encontrar estudos de quantificao de
frmacos por ER quando a concentrao dos
mesmos encontra-se inferior a 10%. Da mesma
forma, estudos de solues injetveis so
especialmente raros, visto que necessitam ser
realizados nos recipientes originais. Os autores
determinaram atravs de FT-Raman a nos picos do espectro, devido ocorrncia de
quantificao de solues comerciais injetveis
contendo 2,4% de DS e 2,4% de Aminofilina.
Utilizaram o mtodo PLS para quantificar as
amostras baseado no espectro FT-Raman obtido.
Concluram que o mtodo proposto tem potencial
para quantificar ativos em solues injetveis de
forma rpida e confivel.
Nesta mesma linha de pesquisa, Mazurek
et al. (2006) testaram o potencial da FT-Raman
em sistemas contendo menos de 10-20% da
substncia ativa. Utilizaram tabletes de
Prednisolona e Captopril, inicialmente fazendo
um modelo de calibrao multivariada com base
no espectro sem normalizao. Aps
acrescentou-se um padro interno s amostras e
o espectro normalizado por esta intensidade de
banda selecionada foi utilizado para construo
de modelos de calibrao. Confirmou-se o
potencial da Espectroscopia FT-Raman
XI Encontro Latino Americano de Iniciao Cientfica e
VII Encontro Latino Americano de Ps-Graduao Universidade do Vale do Paraba
combinada com modelo de calibrao
multivariado encontrando concentraes de
acordo com aquelas obtidas pelos mtodos
farmacopicos.
Em relao ao Controle de Qualidade,
Vinha Jr. et al. (2002) desenvolveram um estudo
sobre a ER na quantificao de Paracetamol no
Tylenol gotas 200mg/ml. Os resultados foram
analisados em relao aos parmetros de
linearidade, exatido, preciso, determinao de
limites de deteco (LOD) e quantificao (LOQ).
O frmaco foi diludo em polietilenoglicol e
placebo de Tylenol gotas em vrias
concentraes, e apenas com o Paracetamol
diludo a 200mg/ml em placebo do Tylenol gotas
que se obteve boa linearidade e exatido.
Nenhuma situao atendeu preciso, nem aos
critrios de LOD e LOQ.
Assim como o anterior, Orkoula et al.
(2006) compararam FT-Raman com HPLC em
relao aos requisitos de validao de mtodos
analticos: linearidade, exatido, preciso, LOD e
LOQ. Quantificaram o Hidrocloridrato de
Difenidramina (DPH) no Benadryl (elixir). O
resultado obtido com as duas tcnicas foi
praticamente o mesmo. A diferena foi que o
HPLC apresentou menor LOD, mas em
compensao o FT-Raman mostrou-se superior
em no necessitar de preparo de amostra e de
analisar o elixir de forma no-destrutiva.
Concluram que a tcnica FT-Raman uma
ferramenta atrativa para a indstria na
determinao e monitorizao da presena do
princpio ativo.
Zhihong et al. (2004) estudaram o
espectro Raman de solues supersaturadas de
boratos durante acidificao/alcalinizao e
diluio, a fim de conhecer profundamente o
comportamento qumico dos sais em solues
aquosas. Demonstraram a influncia da diluio
polimerizao/despolimerizao. Demonstraram
ainda os picos relativos a cada grupamento
qumico, mostrando a clara influncia do pH na
formao ou dissoluo de sais. Concluram que
a ER vlida na verificao do comportamento
qumico de compostos em soluo.
Muitos estudos Raman quantitativos tm
sido aplicados na determinao de misturas
lquidas. Berr et al. (2004) mostraram a
necessidade de introduzir uma expresso
matemtica para relacionar a intensidade de um
determinado sinal Raman com a respectiva
concentrao do frmaco em lquidos puros ou
em misturas, tornando possvel a anlise
quantitativa. Misturas de 2, 3, 4 e 5 solventes
foram analisadas. Na mistura de 2 ou 3
solventes, os resultados foram bons, porm,
quando misturou-se 4 ou 5 o desvio padro j foi
maior. Este fato ocorreu devido a interaes
1685
qumicas entre as substncias, mas no a
problemas com a ER ou com o modelo
matemtico em si.
Mifune et al. (2006) salientam que
durante as anlises podem ocorrer alteraes
com os frmacos, como modificaes cristalinas
ou nas fases, interaes com excipientes, ou
ainda alteraes por aquecimento e/ou mudanas
na presso do sistema. Alm disso, os processos
utilizados atualmente para este fim so
destrutivos. Utilizaram FT Raman para examinar
o estado de algumas substncias em vrias
amostras: tabletes de Alacepril, tabletes, ps e
nanopartculas de Esparfloxacina, partculas de
Sulfato de Quinidina e Cafena. Indicaram que
nos tabletes de Alacepril, e nos grnulos de
cafena e Sulfato de Quinidina, as substncias
ativas no apresentaram alterao aps o
processo de produo. Todavia, o estado da
Esparfloxacina em nanopartculas modificou-se,
ao contrrio do que se verificou na produo de
tabletes e ps da mesma substncia. Estes
resultaram mostraram que FT-Raman pode ser
utilizado no controle de qualidade de preparaes
farmacuticas cristalinas.
Segundo De Beer et al. (2007), dentre as
formas farmacuticas j analisadas pela ER, as
menos estudas so as pomadas e os cremes.
Alm disso, o tamanho das partculas influencia a
intensidade do sinal Raman, o que pode resultar
em concluses errneas sobre a quantidade das
substncias. Os autores compararam o cido
Saliclico (AS) utilizado no preparo de pomadas
por diferentes farmacuticos, com aquele
utilizado no desenvolvimento de um modelo de
calibrao. A seguir determinaram o contedo do
AS em todas as pomadas pelo mtodo de
referncia (HPLC) e pelo FT-Raman. Concluram
que FT-Raman confivel na determinao de
AS em pomadas, mas a repetibilidade, embora
aceitvel, no superou a obtida pelo mtodo de
referncia. Ficou claro que para um bom
resultado, o tamanho da partcula do ativo
presente nas amostras deve ser semelhante
quele utilizado no preparo dos padres.
A ER foi utilizada por Cuffini et al. (2007)
na caracterizao fisicoqumica do Deflazacort,
sabendo que, embora seja bastante
comercializada em suspenses e tabletes, as
caractersticas deste esteride no estado slido e
sua cristalizao so pouco conhecidas. Os
autores objetivaram determinar
caractersticas utilizando vrios mtodos: FT-
Raman no IV, Espectroscopia Raman Dispersiva,
Termogravimetria, e Ressonncia Nuclear
Magntica. Cada uma das tcnicas contribuiu na
determinao de um parmetro fsico-qumico.
Os autores concluram que a Espectroscopia
Raman trouxe informaes adicionais sobre as
XI Encontro Latino Americano de Iniciao Cientfica e
VII Encontro Latino Americano de Ps-Graduao Universidade do Vale do Paraba
interaes intermoleculares dos cristais do
Deflazacort.
A famlia dos flavonides apresenta
semelhana estrutural e baixo peso molecular.
Um destes compostos a 3-Hidroxiflavona, a
qual foi analisada pela ER convencional e pela
Surface Enhanced Raman Scattering (SERS),
cuja inveno facilitou a deteco de molculas
de muito baixa concentrao. O espectro SERS
foi obtido sobre um eletrodo de Ag (sob aplicao
de vrios potenciais) e sobre um colide de Ag
(vrios pH). A principal diferena entre SERS e
ER normal foi a intensidade das bandas na regio
de 1600cm-1 devido as ligaes carbonila,
hidroxila e a ligao dupla contida no anel
(WANG et al. 2007).
Um problema crescente na indstria
farmacutica so as falsificaes de
medicamentos at mesmo nos pases
desenvolvidos. De Veij et al (2007) testaram a ER
na diferenciao de medicamentos genunos dos
adulterados, comparando o mtodo com Anlise
colorimtrica e LC-MS. Concluram que a ER
til para diferenciar tabletes antimalricos
genunos dos falsificados, e pode ainda
determinar a impresso digital dos diferentes
tipos de adulterantes.
Concluso
Nesta reviso pode ser observada a
versatilidade da Espectroscopia Raman em
relao s aplicaes na rea de farmcia, como
a sua extrema valia na determinao qualitativa,
semi-quantitativa e quantitativa de frmacos em
diversas formas farmacuticas, na caracterizao
das suas formas cristalinas, entre outras
aplicaes. Foi constatada a existncia de
algumas tcnicas que podem ser associadas
ER, a fim de melhorar a eficincia do sistema,
contornando eventuais dificuldades.
Por fim, de acordo com os trabalhos
analisados, pode ser verificado o aprimoramento
da tcnica nesta ltima dcada, e principalmente
que a ER tornou-se uma ferramenta de grande
potencial na indstria farmacutica. Ao utiliz-la,
deve-se, porm considerar as caractersticas
individuais das amostras, desde a possibilidade
de proceder a anlise no prprio frasco do
medicamento at a necessidade da utilizao de
tcnicas auxiliares.
estas
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