CIDO RICO Liquiform
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Instrues de Uso
Finalidade . Sistema enzimtico para determinao do cido rico
por reao de ponto final em amostras de sangue, urina e lquidos
(amnitico e sinovial).
[Somente para diagnstico in vitro]
Princpio . O cido rico determinado de acordo com as seguintes
reaes:
Uricase
cido rico + O2 + H2O Alantona + CO2 + H2O2
Peroxidase
2H2O2 + DHBS + 4-aminoantipirina Antipirilquinonimina + 4 H2O
O cido rico oxidado pela uricase a alantoina e perxido de hidrognio.
O perxido de hidrognio, na presena da peroxidase, reage com o DHBS
e a 4-aminoantipirina, formando o cromognio antipirilquinonimina. A
intensidade da cor vermelha formada diretamente proporcional
concentrao do cido rico na amostra.
Caractersticas do sistema . A dosagem de cido rico
utilizando a reao de Trinder caracteriza-se por ser um mtodo direto, de
fcil aplicao em sistemas automticos, que tem a especificidade da
uricase. Muitos produtos utilizam o fenol como reagente de acoplamento.
Entretanto, a baixa sensibilidade do fenol e a incompatibilidade de pH
timo entre a uricase de origem animal e a peroxidase criam srios
obstculos confiabilidade do mtodo.
A Labtest, com o sistema cido rico Liquiform, supera estas
dificuldades substituindo o fenol pelo cido 3,5-dicloro-2-hidroxibenzeno
sulfonato (DHBS), que 4 vezes mais sensvel, permitindo uma relao
adequada entre amostras e reagentes, possibilitando obter uma
sensibilidade tima em relao a baixa concentrao do analito.
O reagente disponibilizado sob a forma lquida e distribudo em dois
reagentes permitindo a sua utilizao em sistemas automticos,
facilitando a eliminao da ao de interferentes.
A metodologia monorreagente pode ser aplicada utilizando um Reagente
de Trabalho que estvel at a data de expirao dos reagentes que o
compe, quando mantido entre 2 e 8 C. O Reagente de Trabalho obtm
desempenho adequado mesmo em situaes de baixas demandas do
teste. O sistema permite ainda preparar o volume de Reagente de
Trabalho necessrio para uma medio da concentrao do cido rico. um teste, misturar 0,8 mL do Reagente 1 e 0,2 mL do Reagente 2.
A linearidade do mtodo de 20 mg/dL, o que diminui a necessidade de
efetuar diluies em um nmero significativo de amostras.
O reagente foi desenvolvido com um conjunto especial de surfactantes
que promovem a clarificao de turbidez ocasionada por lpides, o que
reduz significativamente a interferncia causada por hiperlipmia na
determinao da concentrao de cido rico.
01 Portugus - Ref.: 140
Ref.
MS 10009010071
O mtodo proposto facilmente aplicvel maioria dos analisadores
automticos e semi-automticos capazes de medir uma reao de ponto
final entre 490 e 540 nm.
Metodologia . Enzimtico - Trinder
Reagentes
1. 1 - Reagente 1 - Armazenar entre 2 - 8 C
Contm tampo 155 mM, 4-aminoantipirina 0,1 mM, peroxidase
1000 U/L, azida sdica 0,02% e surfactantes.
2. 2 - Reagente 2 - Armazenar entre 2 - 8 C
Contm tampo 155 mM, DHBS 2,5 mM, uricase 300 U/L, azida
sdica 0,02% e surfactantes.
3. - Padro - Armazenar entre 2 - 8 C
Contm cido rico 6,0 mg/dL. Armazenar bem vedado para evitar
evaporao.
Os reagentes no abertos, quando armazenados nas condies
indicadas, so estveis at a data de expirao impressa no rtulo.
Durante o manuseio, os reagentes esto sujeitos contaminao de
natureza qumica e microbiana que podem provocar reduo da
estabilidade.
Preparo do reagente de trabalho . O conjunto de um frasco de
Reagente 1 e um frasco de Reagente 2 permite preparar o Reagente de
Trabalho. Transferir o contedo de um frasco de Reagente 2 para um
frasco de Reagente 1 e homogeneizar suavemente. Identificar o frasco do
Reagente de Trabalho e anotar a data de expirao.
Estudos demonstram que o reagente de trabalho apresenta elevada
estabilidade. Aps o preparo, deve-se considerar que a data de expirao
do reagente de trabalho a mesma dos reagentes que o compe, desde
que mantido entre 2 e 8 C, em recipiente fechado e quando no houver
contaminao qumica ou microbiana. O desenvolvimento de colorao
levemente rsea no Reagente de Trabalho normal e no afeta o seu
desempenho.
Opcionalmente, pode-se preparar menor volume do Reagente de
Trabalho utilizando a proporo 4 volumes do Reagente 1 e 1 volume do
Reagente 2. Para preparar o volume de reagente necessrio para realizar
Para preservar seu desempenho, o reagente deve permanecer fora da
geladeira somente o tempo necessrio para se obter o volume a ser
utilizado. Evitar exposio luz solar direta.

Precaues e cuidados especiais
No utilizar o Reagente quando sua absorbncia medida contra gua em
505 nm for igual ou maior que 0,300 ou quando se mostrar turvo e com
sinais de contaminao.
Os cuidados habituais de segurana devem ser aplicados na
manipulao do reagente. Os reagentes contem azida sdica que txica.
No ingerir e, no caso de contato com os olhos deve-se lavar
imediatamente com grande quantidade de gua e procurar auxlio
mdico. A azida pode formar compostos altamente explosivos com
tubulaes de chumbo ou cobre. Portanto, utilizar grande volume de gua
para descartar os reagentes.
Cuidados com o tempo de reao, temperatura de trabalho e pipetagens
so extremamente importantes para obteno de resultados corretos.
Os reagentes devem ser manuseados seguindo as boas prticas de
laboratrio que incluem evitar ingesto e contato com pele, mucosas e
olhos.
Material necessrio no fornecido
1. Banho-maria ou incubador mantido temperatura constante (37 C).
2. Fotmetro capaz de medir com exatido a absorbncia entre
490 e 540 nm.
3. Pipetas para medir amostras e reagentes.
4. Cronmetro.
Influncias pr-analticas . O cido rico est aumentado nas 24 Amostras: Soro, plasma (EDTA, Heparina), urina e lquidos (amnitico e
horas que sucedem a ingesto de lcool.
As concentraes sricas de cido rico apresentam grandes variaes Urina . Homogeneizar a urina, separar 10 mL, acertar o pH entre 7,0 e 9,0
no dia-a-dia e sazonais num mesmo indivduo. O cido rico se eleva com
o stress, estados de jejum prolongado e aumento de peso corporal.
O cido ascrbico (vitamina C), por ser uma substncia redutora,
consome o perxido de hidrognio, levando a obteno de resultados
falsamente diminudos. O paciente deve ser orientado a no ingerir
alimentos ou utilizar medicamentos contendo cido ascrbico at 48
12
horas antes da realizao do exame .
Amostra
Usar soro, plasma (EDTA, Heparina), urina e lquidos (amnitico e
sinovial). O analito estvel 3 dias entre 2 a 8 C e 6 meses a 10 C
negativos.
Deve ser criado um Procedimento Operacional Padro (POP) para
colheita, preparao e armazenamento da amostra. Enfatizamos que os
erros devidos amostra podem ser muitos maiores que erros ocorridos
durante o procedimento analtico.
Como nenhum teste conhecido pode assegurar que amostras de sangue
no transmitem infeces, todas elas devem ser consideradas como
potencialmente infectantes. Portanto, ao manuse-las, deve-se seguir as
normas estabelecidas para biossegurana.
02 Portugus - Ref.: 140
Para descartar os reagentes e o material biolgico sugerimos aplicar as
normas locais, estaduais ou federais de proteo ambiental.
Interferncias
A utilizao de plasma fluoretado leva a obteno de resultados
falsamente diminudos. Fluoreto atua como inibidor da uricase.
Metodologia birreagente considerar os seguintes valores para
interferentes:
Valores de bilirrubina at 5 mg/dL e hemoglobina at 200 mg/dL e
amostras com triglicrides at 1200 mg/dL no produzem interferncias
significativas.
Metodologia monorreagente considerar os seguintes valores para
interferentes:
Valores de bilirrubina at 5 mg/dL e hemoglobina at 50 mg/dL e
amostras com triglicrides at 1200 mg/dL no produzem interferncias
significativas.
Para avaliar a concentrao aproximada da hemoglobina em uma
amostra hemolisada pode-se proceder do seguinte modo: diluir 0,04 mL
da amostra em 2,0 mL de NaCl 150 mmol/L (0,85 %) e medir a
absorbncia entre 405 ou 415 nm acertando o zero com gua deionizada
ou destilada.
Hemoglobina (mg/dL) Absorbncia405 x 601
Hemoglobina (mg/dL) Absorbncia415 x 467
Procedimento
sinovial).
com NaOH 5% e aquecer 10 minutos a 56 C para dissolver os cristais de
urato e cido rico. Diluir a urina 1:10 (0,1 mL de urina + 0,9 mL de gua
destilada). Multiplicar o resultado obtido por 10.
Procedimentos para realizao do ensaio
Tomar 3 tubos de ensaio e proceder como a seguir:
Branco Teste Padro
Amostra 0,02 mL
Padro (N 3) 0,02 mL
Reagente de Trabalho 1,0 mL 1,0 mL 1,0 mL
Misturar e incubar em banho-maria a 37 C durante 5 minutos. O nvel
gua no banho deve ser superior ao nvel do reagente nos tubos de
ensaio. Determinar as absorbncias do teste e padro em 505 nm ou filtro
verde (490-540 nm) acertando o zero com o branco. A cor estvel por
30 min.
O procedimento sugerido para a medio adequado para fotmetros
cujo volume mnimo de soluo para leitura igual ou menor que 1,0 mL.
Deve ser feita uma verificao da necessidade de ajuste do volume para o
fotmetro utilizado. Os volumes de amostra e reagente podem ser
modificados proporcionalmente sem prejuzo para o desempenho do
teste e o procedimento de clculo se mantm inalterado.
Em caso de reduo de volumes fundamental que se observe o volume
mnimo necessrio para leitura fotomtrica. Volumes da amostra
menores que 0,01 mL so crticos em aplicaes manuais e devem ser
usados com cautela porque aumentam a impreciso da medio.
Clculos
Linearidade
O resultado da medio linear at 20 mg/dL. Quando for obtido um valor
igual ou maior que 20 mg/dL, diluir a amostra com NaCl 150 mmol/L
(0,85%), realizar nova medio e multiplicar o resultado pelo fator de
diluio.

Absorbncia do Teste Urina . Diluir a amostra (com pH entre 7,0 e 9,0 e aquecida 10 minutos a
cido rico (mg/dL) = x6 56 C) 1:20 ou 1:40 com gua destilada ou deionizada e repetir a
Absorbncia do Padro medio. Multiplicar o resultado obtido por 20 (vinte) ou 40 (quarenta),
conforme diluio previamente utilizada.
Exemplo

Absorbncia do Teste = 0,214

Controle interno da qualidade . O laboratrio deve manter um
Absorbncia do Padro = 0,163 programa de controle interno da qualidade que defina claramente os
regulamentos aplicveis, objetivos, procedimentos, critrios para
0,214 especificaes da qualidade e limites de tolerncia, aes corretivas e
cido rico (mg/dL) = x 6 = 7,9 registro das atividades. Materiais de controle devem ser utilizados para
0,163 avaliar a impreciso e desvios de calibrao.

O resultado tambm pode ser obtido utilizando o fator de calibrao. Sugere-se que as especificaes para o coeficiente de variao e o erro
9,10
total sejam baseadas nos componentes da variao biolgica (VB) .
6
Fator de Calibrao =
Sugere-se utilizar as preparaes estabilizadas da linha Qualitrol H -
Absorbncia do Padro
Labtest para controle interno da qualidade em ensaios de qumica clnica.
Exemplo
Intervalo de referncia . Os intervalos devem ser usados apenas
6 como orientao. Recomenda-se que cada laboratrio estabelea seus
Fator de Calibrao = = 36,8 prprios intervalos de referncia na populao atendida.
0,163

cido rico (mg/dL) = 0,214 x 36,8 = 7,9 Soro (mg/dL)

Homem 1,5 a 6,0
Crianas11
mg/dL x volume urinrio (mL) Mulher 0,5 a 5,0
Urina (mg/24 horas) = Homem 2,5 a 7,0
100 Adultos
Mulher 1,5 a 6,0

Calibrao
Urina . 250 a 750 mg/24 horas
Rastreabilidade do sistema
O padro rastrevel ao Standard Reference Material (SRM) 913 do Converso . Unidades convencionais (mg/dL) x 59,5 = Unidades SI
National Institute of Standards and Technology (NIST). (mol/L)

Calibraes manuais Caractersticas de desempenho13

Obter o fator de calibrao ao usar novo lote de reagentes ou quando o
controle interno da qualidade indicar. Estudo de recuperao . Em duas amostras com concentrao
de cido rico iguais a 5,9 e 6,3 mg/dL foram adicionadas quantidades
Sistemas automticos
diferentes do analito obtendo-se recuperaes entre 99,6 e 100,2%.
Branco de reagente: gua deionizada ou soluo de cloreto de sdio
150 mmol/L (0,85%);
O erro sistemtico total mdio obtido em uma amostra com valor de cido
Calibrador: usar calibrador protico. A concentrao de cido rico no
rico de 8,0 mg/dL foi igual 0,01 mg/dL ou 0,15%. O erro sistemtico total
calibrador Calibra H - Labtest rastrevel ao SRM 913 do NIST.
obtido menor que o erro sistemtico total da especificao desejvel
Intervalo de Calibraes baseada nos componentes da Variao Biolgica que 4,9%.
Quando o controle interno da qualidade indicar;
Quando utilizar o lote de um novo reagente; Estudo de comparao de mtodos . O mtodo proposto foi
Quando utilizar novo frasco de reagente de um mesmo lote, caso um nova comparado com outro produto de metodologia similar, sendo obtidos os
calibrao tenha sido realizada durante a utilizao do frasco anterior. seguintes resultados:

03 Portugus - Ref.: 140

 Mtodo Mtodo Significado clnico . Numerosas doenas, condies fisiolgicas,
Comparativo Labtest alteraes bioqumicas, fatores sociais e ambientais esto associados a
Nmero de amostras 40 40 elevaes na concentrao do urato plasmtico. Entre as etiologias da
Intervalo de concentraes hiperuricemia esto: insuficincia renal, cetoacidose, excesso de lactato,
1,92 - 15,79 1,99 - 16,27
(mg/dL) uso de diurticos e em todas as patologias em que a destruio de
Mtodo Labtest (mg/dL) = 1,0322 x nucleoprotenas est aumentada. O aumento de urato est positivamente
Equao da regresso
Comparativo - 0,0844 relacionado a hiperlipidemia, obesidade, arterosclerose, diabetes
Coeficiente de correlao 0,9995 mellitus e hipertenso, embora os mecanismos destas alteraes ainda
no sejam bem compreendidas.

O erro sistemtico total verificado nos nveis de deciso 2,0; 8,0 e
10,7 mg/dL foram iguais a 0,02; 0,17 e 0,26 ou 1,00; 2,17 e 2,43%,
respectivamente.
O erro sistemtico total obtido menor que o erro sistemtico total da
especificao desejvel baseada nos componentes da Variao
Biolgica que 4,9%.
Estudos de preciso . Os estudos de preciso foram realizados
utilizando 40 amostras com concentraes mdias iguais a 2,1; 8,6 e
11,7 mg/dL.
A gota, manifestao clnica da hiperuricemia, classificada como
primria, secundria ou idioptica. A gota secundria uma complicao
pouco comum quando relacionada frequncia de hiperuricemia.
importante mencionar que a colchicina, utilizadas no caso da gota
aguda, no modifica valores de cido rico.
So pouco frequentes as causas da hipouricemia ocorrendo na sndrome
de Fanconi, doena de Wilson, acromegalia, anemia perniciosa e
doenas malignas como linfoma de Hodgkin e carcinoma broncognico.
Observaes

Repetitividade - impreciso intra-ensaio 1. A limpeza e secagem adequadas do material utilizado so fatores

N Mdia DP CV (%) fundamentais para a estabilidade dos reagentes e obteno de resultados
Amostra 1 40 2,3 0,02 0,97 corretos.
Amostra 2 40 9,5 0,07 0,85
Amostra 3 40 11,1 0,09 0,82 2. O laboratrio clnico tem como objetivo fornecer resultados exatos e
precisos. A utilizao de gua de qualidade inadequada uma causa
potencial de erros analticos. A gua utilizada no laboratrio deve ter a
qualidade adequada a cada aplicao. Assim, para preparar reagentes,
Reprodutibilidade - impreciso total usar nas medies e para uso no enxgue final da vidraria, a gua deve ter
resistividade 1 megaohm.cm ou condutividade 1 microsiemens/cm e
N Mdia DP CV (%)
concentrao de silicatos <0,1 mg/L. Quando a coluna deionizadora est
Amostra 1 40 2,3 0,03 1,48
com sua capacidade saturada ocorre liberao de vrios ons, silicatos e
Amostra 2 40 9,5 0,09 1,14
substncias com grande poder de oxidao ou reduo que deterioram
Amostra 3 40 11,1 0,09 1,14
os reagentes em poucos dias ou mesmo horas, alterando os resultados
de modo imprevisvel. Assim, fundamental estabelecer um programa de
O erro total (erro aleatrio + erro sistemtico) estimado em controle da qualidade da gua.
concentraes iguais a 2,0; 8,0 e 10,7 mg/dL so iguais a 3,45%, 4,04%
e 4,32%, respectivamente. Referncias
Os resultados indicam que o mtodo atende a especificao desejvel
para o erro total ( 12,4%) baseada nos componentes desejvel da 1. Duncan PH, Gochman N, CooperT, Smith E, sayze D. Clin Chem
Variao Biolgica. 1982;28:284-290.

2. Elin RJ, Jonhson E, Chesler R. Clin Chem 1982;28:2089.

Sensibilidade metodolgica . Uma amostra no contendo cido
rico foi utilizada para calcular o limite de deteco do ensaio tendo sido 3. Inmetro - Boas Prticas de Laboratrio Clnico e Listas de Verificao
encontrado um valor igual a 0,02 mg/dL, equivalente a mdia de 10 para Avaliao, Qualitymark ed.,Rio de Janeiro, 1997.
ensaios mais trs desvios padro.
4. Kabasakalian P, Kalliney S, Westcott A. Clin Chem 1973;19:522.
Efeitos de diluio da matriz . Duas amostras com valores igual
a 24,9 e 23,2 mg/dL foram utilizadas para avaliar a resposta do sistema 5. Kageyama N. Clin Chem Acta 1971;31:421.
nas diluies da matriz com NaCl 150 mmol/L (0,85%). Usando fatores
6. Tonks DB. Quality Control in Clinical Laboratories, Wanner-Chilcott
de diluio que variaram de 2 a 16 foram encontradas recuperaes
Laboratories, Diagnostic Reagents Division, Scarborough, Canada,
mdias de 101%. O erro sistemtico total obtido menor que o erro
1972.
sistemtico total da especificao desejvel baseada nos componentes
da Variao Biolgica que 4,9%. 7. Trivedi RC, Rebar L, Berta E, Stong L, Clin Chem 1978;241908.

04 Portugus - Ref.: 140

8. Westgard JO, Barry PL, Hunt MR, Groth T. Clin Chem 1981,27:493- O nmero de testes em aplicaes automticas depende dos
501. parmetros de programao.

9. Ricos C, Desirable Specifications for Total Error, Imprecision, and Bias,
derived from intra- and inter-individual biologic variation. Disponvel
em: http://westgard.com/biodatabase1.htm (acesso em 10/08/2012).
10. Basques JC. Especificaes da Qualidade Analtica. Labtest
Diagnstica 2005.
11. Ferraz MHC, Delgado RB. Valores de Referncia para Exames
Laboratoriais. In: Leo E, Corra EJ, Viana MB, Mota JAC (Ed).
Pediatria Ambulatorial. 3a. edio Belo Horizonte: Coopmed, 1988:
837-848.
Esto disponveis as aplicaes para sistemas automticos.
Informaes ao consumidor
[Termos e Condies de Garantia]
A Labtest Diagnstica garante o desempenho deste produto dentro das
especificaes at a data de expirao indicada nos rtulos, desde que os
cuidados de utilizao e armazenamento indicados nos rtulos e nestas
instrues sejam seguidos corretamente.

12. Martinello F, Silva E.L. Interferncia do cido ascrbico nas Labtest Diagnstica S.A.
determinaes de parmetros bioqumicos sricos: estudos in vivo e CNPJ: 16.516.296 / 0001 - 38
in vitro. Jorn. Bras. Pat. Med. Lab, 2003;39:323-334. Av. Paulo Ferreira da Costa, 600 - Vista Alegre - CEP 33400-000
Lagoa Santa . Minas Gerais Brasil - www.labtest.com.br
13. Labtest: Dados de arquivo.
Servio de Apoio ao Cliente 0800 031 34 11 (Ligao Gratuita)
e-mail: sac@labtest.com.br

Apresentao
Edio: Abril, 2013 Copyright by Labtest Diagnstica S.A.
Produto Referncia Contedo Ref.: 280113 Reproduo sob prvia autorizao
1 1 x 80 mL
140-1/100 2 1 x 20 mL
cido rico 1 x 5 mL
Liquiform 1 1 x 200 mL
140-1/250 2 1 x 50 mL
1 x 5 mL

05 Portugus - Ref.: 140

 Smbolos utilizados com produtos diagnsticos in vitro
Smbolos usados con productos diagnsticos in vitro
Symbols used with ivd devices

Contedo suficiente para < n > testes Risco biolgico

Contenido suficiente para < n > tests Riesgo biolgico
Contains sufficient for < n > tests Biological risk

Data limite de utilizao (aaaa-mm-dd ou mm/aaaa) Marca CE

Estable hasta (aaaa-mm-dd o mm/aaaa) Marcado CE
Use by (yyyy-mm-dd or mm/yyyy) CE Mark

Material Calibrador Txico

Material Calibrador Txico
Calibrator Material Poison

Material Calibrador Reagente

Material Calibrador Reactivo
Calibrator Material Reagent

Limite de temperatura (conservar a) Fabricado por

Temperatura limite (conservar a) Elaborado por
Temperature limitation (store at) Manufactured by

Representante Autorizado na Comunidade Europeia Nmero do lote

Representante autorizado en la Comunidad Europea Denominacin de lote
Authorized Representative in the European Community Batch code

Consultar instrues de uso Controle

Consultar instrucciones de uso Control
Consult instructions for use Control

Nmero do catlogo Controle negativo

Nmero de catlogo Control negativo
Catalog Number Negative control

Adies ou alteraes significativas Controle positivo

Cambios o suplementos significativos Control positivo
Significant additions or changes Positive control

Produto diagnstico in vitro Controle

Dispositivo de diagnstico in vitro Control
In vitro diagnostic device Control

Liofilizado Corrosivo
Liofilizado Corrosivo
Lyophilized Corrosive

Perodo aps abertura

Perodo post-abertura Ref.: 201112
Period after-opening

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