Unidad 3:

Estequiometra del crecimiento microbiano y

formacin de productos
En el biorreactor se produce la conversin de los
sustratos para obtener biomasa y productos de
inters industrial

Sustratos Biorreactor o
fermentador

Biomasa

Productos
El estudio de la estequiometra del crecimiento
microbiano permitir:

1. Formular adecuadamente un medio de cultivo.

2. Calcular rendimientos: saber cuanto producto es

posible obtener a partir de una cierta cantidad de
sustrato.

3. Realizar balances de materia y energa.

Darn cuenta de las transformaciones que se

estn llevando a cabo en un biorreactor 3
Para el estudio de la estequiometra es necesario
plantear el crecimiento microbiano como si fuera una
reaccin qumica comn:

Ej

aA +bB c C + d D + calor

Sustratos Productos
 Para el crecimiento microbiano se requiere un medio de cultivo que
contenga:

 Fuente de carbono y energa (FCE ej azcares).

 Fuente de nitrgeno (amonaco, nitrato).

Componentes  Oxgeno.
de un medio
 Fsoforo (PO43-), azufre (SO4=,), potasio, magnesio,
de cultivo
(nutrientes) calcio, hierro.
 Micronutrientes (Co, Cu, Mn, Zn, etc.).
 Factores de crecimiento: Vitaminas.

Clulas
Algn producto Los que sern los
Productos de sustratos de la
la reaccin CO2 reaccin
H2O
Considerando nicamente aquellos componentes del medio de
cultivo que se consumen en forma notoria , la ecuacin de
crecimiento microbiano ser:

FCE + Fte.de N + O2 biomasa + producto + CO2 + H2O + calor

Modelo de caja negra

Esquema del crecimiento celular segn el modelo de caja negra.

1. Frmula molecular de un microorganismo promedio:
Concepto de C-mol

Tomado de Principles of Fermentation Technology (Stanbury

P. F. y col.)
 Microorganismo promedio

Composicin elemental de cualquier microorganismo:

% p/p
C = 46,5
H = 6,94
O = 31
N = 10,85
Cont. de sales = 5

Frmula centecimal: C3,87H6,94 O1,93N0,775 - Frmula Mnima : C H1,79 O0,5 N0,2

C-mol de biomasa: cantidad de biomasa (g) que contiene 1 tomo gramo de

carbono

El peso molecular de 1 C-mol de 12 + 1,79 + 16 0,5 + 14 0,2

= 25,8 g
biomasa ser = 0,95

1 C-mol de biomasa = 25,8 g

C-mol de cualquier sustancia

1 C-mol de cualquier sustancia: cantidad de esa sustancia que

contiene un tomo gramo de carbono (12 g de carbono)

Ej:
glucosa: C6H12O6 PM= 180 g/mol

1 c-mol de glucosa: CH2O PM= 30 g/c-mol

Ej. Cuntos C-moles hay en 5 g de penicilina (C16H24O4N2S)?.

1 c-mol: 21,25 g/c-mol

5 g: 0,235 c-mol
2. Ecuacin de crecimiento microbiano generalizada
Ecuacin de crecimiento basada en un C-mol de fuente de carbono y energa:
CHa1Ob1Nc1 + a NH3 + b O2 yx/s CH1,79O0,5N0,2 + yp/s CHa2Ob2Nc2 + yco2/s CO2 + w H2O + q

Siendo:

a = moles de la FN consumida por cada C-mol de FCE consumida.

b = moles de la O2 consumido por cada C-mol de FCE consumida.

yx/s = C-moles de biomasa formada por cada C-mol de FCE consumida.

yp/s = moles de producto formado por cada C-mol de FCE consumida.

yCO2/s = moles de CO2 formado por cada C-mol de de FCE consumida.

q = Kcal produc./c-mol de FCE cons.

yx/s, yp/s, yCO2/s son los rendimientos expresados en C-moles.

Para calcular los coeficientes de rendimiento se deben medir todas las
variables del cultivo: biomasa, FCE, velocidad de consumo de oxgeno y
produccin de CO2, concentracin de producto.
3. Rendimientos

Rendimiento: se define como la relacin entre el producto obtenido

y el sustrato consumido (FCE).

Yx/s = x/
s (g de biomasa obtenida/g de FCE consumida)

Yp/s = p/
s (g de producto obtenido/g de FCE consumida)

Yo2/s = moles de oxgeno consumido/g de FCE consumida

Estos son los rendimientos experimentales y representan la cantidad

producto total formado respecto al sustrato total consumido.

Dan una medida de la eficacia de conversin del sustrato en biomasa

y productos.
4. Grado de reduccin

Grado de reduccin (): nmero de electrones que se transfieren al oxgeno

cuando se oxida 1 C-mol de un compuesto dado.

Combustin de 1 C-mol de diferentes compuestos en condiciones estndar y pH 7

(adaptado de J.A.Roels)
Comp. Reaccin q (Kcal/C-mol) q0 = q/

Metano CH4 + 2 O2 CO2 + 2 H2O 8 213,4 26,7

Etanol CH3O0,5 + 3/2 O2 CO2 + 3/2 H2O 6 163,8 27,3

Glucosa CH2O + O2 CO2 + H2O 4 111,0 28

Ac.frmico CH2O2 + O2 CO2 + H2O 2 61,0 30,5

Cada molcula de oxgeno capta 4 electrones, por lo tanto el nmero de

electrones que son transferidos al oxgeno ser:
= 4n
Siendo:
n = moles de oxgeno necesarios para oxidar 1 C-mol
de un compuesto completamente
 Clculo de
CHaObNc + n O2 g CO2 + w H2O + k NH3

Cada molcula de oxgeno capta 4 electrones, por lo tanto el nmero de

electrones que son transferidos al oxgeno ser:

= 4n

Haciendo balances de cada uno de los elementos (C, O, N, etc) se obtiene la

ecuacin general del grado de reduccin de cualquier compuesto:

NH3 = 4 n = 4 + a - 2 b 3 c

Ejmplo:
Biomasa CH1,8O0,5N 0,2 x = 4,19
Se ha encontrado que el contenido energtico de los compuestos orgnicos
est relacionado con el grado de reduccin.

Comp. Reaccin q (Kcal/C-mol) q0 = q/

Metano (CH4) CH4 + 2 O2 CO2 + 2 H2O 8 213,4 26,7

Etanol CH3O0,5 + 3/2 O2 CO2 + 3/2 H2O 6 163,8 27,3

Glucosa CH2O + O2 CO2 + H2O 4 111,0 28

Ac.frmico CH2O2 + O2 CO2 + H2O 2 61,0 30,5

q0: calor liberado por mol de electrones transferidos al oxgeno = constante

q0 = q/ = 27,5 Kcal/mol de e- transf. al o2

Esto implica que es una medida de la energa contenida en un compuesto

q. = . q0

As 1 C-mol de etanol brinda mas energa que 1 C-mol de glucosa.

 5. Balances de materia y energa

5.1. Balance de materia en la ecuacin de crecimiento

El crecimiento microbiano obedece a ley de conservacin de la materia.

Todos los C, H, O, N, consumidos durante el crecimiento se incorporan a las
nuevas clulas o se liberan como productos.

CHa1Ob1 + a NH3 + b O2 yx/s CH1,79O0,5N0,2 + yp/s CHa2Ob2Nc2 + yco2/s CO2 + w

H2O + q

Balance de carbono:

1 = yx/s + yp/s + yco2/s (ec.1)

Balance de nitrgeno:
a = yx/s . C1 + yp/s . C3 (ec.2)

Si la fuente de nitrgeno fuese urea ( NH2CONH2 ):

balance de C: 1 + a = yx/s + yp/s + yco2/s

balance de N: 2 a = yx/s . c1 + yp/s . c3

5.2. Balance de grado de reduccin

El nmero de electrones disponibles se conservan durante el metabolismo.

CHa2Ob2Nc2 + a NH3 + b O2 yx/s CHa1Ob1Nc1 + yp/s CHa3Ob3Nc3 + yco2/s CO2 + w

H2O + q

n de electrones a la izquierda = n de electrones a la derecha

s + a NH3 - 4 . b = x . yx/s + p . yp/x

Siendo NH3 = 0 y dividiendo por s se 4b

p
obtiene:
+ y x
+ y =1

s s
x/s

s
p/s

+ + = 1

Si multiplicamos y dividimos ambos miembros por q0 se obtiene que , y

representan la fraccin de energa (de la FCE) transferida al oxgeno, a la
biomasa y al producto respectivamente.
 Las ecuaciones de balance de carbono y grado de reduccin permiten
comprobar la consistencia de los datos experimentales y verificar si las
determinaciones han sido correctas.

En un cultivo microbiano, tanto el balance de carbono como el de grado de

reduccin tienen que dar 1.

Medidas realizadas en el laboratorio se deben encontrar dentro de los

intervalos:

0,94 yx/s + yp/s + yco2/s 1,06

0,93 + + 1,07

Si hay un producto y no se lo est midiendo los dos balances darn valores < 1.
6. Rendimientos mximos tericos

1 = yx/s + yp/s + yco2/s

Para obtener el mximo rendimiento para la produccin de biomasa se

puede considerar que no se forma producto ni CO2 por lo tanto a partir
del balance de carbono:

Del balance de carbono: yx/smt = 1

Del balance de grado de reduccin se puede considerar que todos los

electrones de la FCE van a para a la biomasa, es decir:

4b
p
+ x
y + y =1

s s
x/s

s
p/s

Del balance de grado

de reduccin: yx/smt = s/x
 mt = yx/smt = s/x
yx/s 1

De los dos rendimientos se usar aquel que sea menor, segn el valor
de s

a) Cuando:
s < x yx/smt = s/x

b) Cuando:
s > x yx/smt = 1
 7. Calor producido en un cultivo microbiano

Las clulas utilizan la energa qumica de manera bastante eficiente

pero, es inevitable el desprendimiento de calor.

El crecimiento de cultivos aerobios se puede representar por:

CHa2Ob2Nc2 + a NH3 + b O2 yx/s biom. + yp/s prod. + yco2/s CO2 + HR

HR = calor producido por cada c-mol de FCE consumida (asociado al

metabolismo celular). Diferencia de entalpa entre productos y reactivos.

En los procesos a gran escala, el calor desprendido durante la reaccin

puede causar la muerte de las clulas o la desnaturalizacin de las
enzimas si no se elimina rpidamente.
El principio de conservacin de la energa es aplicable a bioprocesos.
Realizando un balance de entalpa en la ecuacin de crecimiento microbiano:

CHa2Ob2Nc2 + a NH3 + b O2 yx/s biom. + yp/s prod. + yco2/s CO2 + HR

Hs = yx/s Hx + yp/s Hp + HR

Despejando HR = Hs - yx/s Hx - yp/s Hp

Recordando que el contenido energtico de los compuestos orgnicos est

relacionado con el grado de reduccin mediante la ecuacin qi = q0 . i sera:

Hs = qs = s q0 - Hx = qx = x q0 - Hp = qp = p q0

HR = s q0 - yx/s x q0 - yp/s p q0 (ec. I)

 4b
p
A partir del balance de grado de reduccin + yx
+ y =1

s s
x/s

s
p/s

Despejando 4 b y multiplicando ambos miembros por qo:

4 b q0 = s q0 - yx/s x q0 - yp/s p q0

Por analoga con la ec. I 4 b q0 = HR

En cultivos aerobios, la cantidad de energa desprendida durante la reaccin

(
HR) se puede calcular conociendo el valor de b.

En cultivos anaerobios: El calor de reaccin (

HR) se calcula mediante
el balance de entalpa:

HR = Hs - yx/s Hx - yp/s Hp
8. Balance de energa en un biorreactor
En los balances de energa de los fermentadores los efectos energticos
que se consideran son: el calor de reaccin y el trabajo mecnico.

Ws

Hp
Hs Fermentador
Hx

Q
E = Hs - Hp - Hx - Q + Ws

Hp = entalpa de producto.
Hx = entalpa de biomasa Siendo HR
Hs = entalpa de sustrato
E: representa el cambio total o acumulacin de energa en el sistema.
Ws: representa el trabajo mecnico.
Considerando que no se acumula calor en el sistema:

HR - Q + Ws = 0

Por similitud con la ec. que describe el calor de reaccin en un

bioproceso (HR) se obtiene:

Q = HR + Ws

Esta ecuacin permite determinar la cantidad de calor que debe

eliminarse de un fermentador (Q) para mantener las condiciones
ptimas de temperatura.