CERULOPLASMIN
DETERMINAZIONE QUANTITATIVA IMMUNOTURBIDIMETRICA della CERULOPLASMINA su SIERO
con Analizzatore MINDRAY BS-300. Tracciabile allERM 470 (CRM 470)
200 tests (2 x 20 mL)
DESTINAZIONE D'USO
La Ceruloplasmina una proteina principalmente coinvolta nel
trasporto del rame nel corpo. In particolare gestisce la fornitura di
rame ad enzimi Cu-dipendenti ( citocromo C ossidasi, tirosinasi) e
lomeostasi del rame; anche il catalizzatore della ossidazione
del ferro, per permettere il legame tra transferrina e ferro
ionizzato.
La Ceruloplasmina pu usare la sua moderata attivit ossidativa
per prevenire la perossidazione lipidica indotta dal ferro e dal
rame ionizzati.
La Ceruloplasmina una proteina della Risposta alla Fase Acuta
ed aumenta durante il processo infiammatorio, le infezioni gravi,
le neoplasie, la leucemia ed linfoma di Hodgkin.
Valori diminuiti di Ceruloplasmina possono essere ritrovati in
elevato numero di pazienti con la malattia di Wilson, una rara e
grave alterazione del metabolismo del rame, con depositi nel
cervello, rene, fegato e cornea.
Valori leggermente ridotti si possono ritrovare nelle nefrosi e nella
denutrizione.
PRINCIPIO
La determinazione quantitativa della Ceruloplasmina avviene
mediante un metodo immunoturbidimetrico automatizzabile o
manuale.
L' aggiunta di un campione contenente un preciso Antigene ad
una soluzione contenente il rispettivo Antisiero (Anticorpo), in un
preciso rapporto, provoca la formazione di una torbidit; l'impiego
del campione intero pu richiedere il bicromatismo.
Usando il nostro calibratore multipunto, tracciabile allo standard
internazionale CRM 470, possibile preparare una curva di
calibrazione cui fare riferimento, che generalmente non
rettilinea e non passa per l'origine. Riportando sulla medesima i
valori di assorbanza e le concentrazioni dei singoli punti, si
possono determinare le concentrazioni dei singoli campioni.
PRECAUZIONI D'USO
1. Questo prodotto stato formulato per uso diagnostico in vitro.
2. Una variazione proporzionale dei volumi di reazione non
modifica il risultato.
3. NON miscelare tra loro Reagenti da diversi lotti di produzione.
4. Per concentrazioni di Ceruloplasmina maggiori del valore
massimo del calibratore ( CALPRO1), diluire il campione 1:5
con fisiologica, ritestare e moltiplicare il risultato x 5.
5. Oltre alle eventuali indicazioni di rischio, il Reagente contiene
conservanti (sodio azide o altri), la cui concentrazione totale
inferiore ai limiti riportati nelle Dir. 67/548/CEE e 88/379/CEE e
relative modifiche per la classificazione, etichettatura ed
imballaggio di preparati pericolosi (Reagenti). Tuttavia si
raccomanda di manipolare i reagenti con cautela, evitandone
lingestione ed il contatto con gli occhi, la pelle e le mucose; di
seguire quindi le norme di buona pratica di laboratorio nellutilizzo
di questi materiali. Nelle schede di sicurezza vengono descritte le
procedure operative per la manipolazione di questo prodotto. Le
schede di sicurezza vengono fornite su richiesta.
ATTENZIONE!
A) Le applicazioni su analizzatori di routine possono essere
totalmente diverse da quanto sviluppato come determinazione
manuale; inoltre le procedure sono specifiche per ciascun
analizzatore.
Ver. 2012.08
CE3292
B) Elevata attenzione deve essere data alle sostanze interferenti:
alcuni farmaci ed altre sostanze potrebbero influenzare i livelli od
il dosaggio di Ceruloplasmina (cfr Bibliografia 2).
C) Il Reagente deve essere impiegato SOLO per luso indicato,
da personale esperto e addestrato, seguendo le norme della
buona pratica di laboratorio.
D) La diagnosi clinica non pu essere fatta correttamente usando
il risultato di un solo test, ma deve essere fatta integrando
criticamente i risultati di diversi test di laboratorio con differenti
dati clinici.
E) Una serie di fattori, quali la temperatura ambientale, la
temperatura dei reagenti di lavoro, l'accuratezza dei lavaggi e il
tipo di spettrofotometro, possono influire sulle prestazioni del test.
F) La curva di calibrazione deve essere sempre ripetuta ad ogni
cambio di lotto del Reagente e/o del calibratore.
G) Per la manipolazione dei Reagenti devono essere osservate
le precauzioni normalmente adottate in laboratorio.
Tutti i calibratori e controlli vanno considerati come campioni
umani, quindi potenzialmente infettivi; devono quindi essere
adottate tutte le misure di protezione adeguate allo scopo di
evitare ogni tipo di potenziale rischio biologico.
REAGENTI
Composizione del kit: CE3292
R1 - Anti-CER 2 x 20 mL
anti-Ceruloplasmina (capra) in PBS >25 mmol/L
NaN3 < 0.1%
STABILIT: i Reagenti chiusi sono stabili fino alla data di
scadenza indicata sulle etichette, se conservati nel loro
contenitore primario integro, a 2-8C se non esposti a fonti
termiche e/o variazioni di pressione. In caso di danneggiamento
del contenitore primario provvedere allo smaltimento.
REAGENTI AUSILIARI PER IL CONTROLLO QUALIT
To grant the right performances use following kits (see the relative
information for use (IFU)):
- PLASMAPROTEINS CALIBRATOR 5 concentrations CALPRO1
- PLASMAPROTEINS CALIBRATOR elevated level CALPRO45
- PLASMAPROTEINS NORMAL CONTROL liquid PRONOR
- PLASMAPROTEINS ELEVATED CONTROL liquid PROEL
La curva di calibrazione deve essere sempre ripetuta ad ogni
cambio di lotto del Reagente e/o del calibratore.
PREPARAZIONE DEL REAGENTE DI LAVORO
Pronto per l'uso. Mescolare gentilmente e portare i Reagenti alla
temperatura di lavoro prima delluso.
Chiudere immediatamente dopo limpiego. I prodotti vanno
manipolati in modo adeguato, tale da evitare ogni
contaminazione.
Luso non competente ci sollever da ogni responsabilit.
STABILIT DOPO L'APERTURA
Il prodotto stabile 4 mesi dalla prima apertura se conservato a
2-8C.
MATERIALI RICHIESTI MA NON FORNITI
Normale attrezzatura da laboratorio.
Micropipette in grado di erogare da 3 a 500 L.
Puntali monouso per micropipette.
Provette in vetro trasparente per la diluizione dei campioni.
Soluzione fisiologica, Calibratori e Controlli.
Spettrofotometro od analizzatore automatico di chimica clinica.
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 CERULOPLASMIN

CAMPIONI PRESTAZIONI ANALITICHE

Siero fresco non emolizzato. (validate su MINDRAY BS300)
Raccolta dei campioni in accordo con CLSI (NCCLS) (cfr Le prestazioni del Reagente CERULOPLASMIN sono state
Bibliografia 3). sperimentate con un analizzatore MINDRAY BS300. I dati, pur
I campioni possono essere conservati fino a 6 giorni a 2-8C rappresentando le caratteristiche del prodotto, potrebbero variare
(cfr.Bibliografia 1). per ogni singolo laboratorio e per i diversi analizzatori.
SMALTIMENTO DEI MATERIALI Limitazioni del metodo: non sono conosciute limitazioni.
Per lo smaltimento dei rifiuti attenersi alle regolamentazioni locali Linearit del metodo: il test lineare fino a 170 mg/dL.
vigenti. Tuttavia, per concentrazioni di Ceruloplasmina maggiori del
PROCEDURA ANALITICA su valore massimo del calibratore, si raccomanda di diluire il
SPETTROFOTOMETRO MANUALE campione 1:5 con fisiologica, ritestare e moltiplicare il risultato
x 5.
Lunghezza donda: 340 nm (prim.) 700 nm (sec.)
Cammino ottico: 1 cm Sensibilit del metodo (LoD) : il limite di sensibilit, ovvero la
Lettura: contro bianco reagente concentrazione minima che pu essere distinta dallo zero
0.3 mg/dL.
Temperatura: 37C
Metodo : end-point Interferenze: cfr Bibliografia punto 2.
Reazione: 20 secondi Precisione nella serie: determinata su 20 replicati di due
Rapporto campione/reagente: 1/50 campioni.
Portare i reagenti alla temperatura di lavoro prima delluso. I risultati ottenuti sono i seguenti:
Campione Media (mg/dL) 2s CV%
Pipettare in una provetta o in una cuvetta cos etichettata:
Umano 1 24.7 1.2 2.4
R/B: bianco reagente, S: campione, ST: calibratore:
Umano 2 51.4 0.6 0.6
R/B S ST
R1 - Anti-CER 500 L 500 L 500 L Precisione tra le serie: determinata per 5 giorni su 20 replicati al
Campione ---- 10 L ---- giorno per due campioni.
Calibratore ---- ---- 10 L I risultati ottenuti sono i seguenti:
Miscelare attentamente ed attendere 20 secondi. Leggere Campione Media (mg/dL) 2s CV%
lassorbanza del calibratore (Ast) e del campione (As) contro il Umano 1 24.2 1.2 2.5
bianco reagente. Leggere entro breve tempo. Umano 2 50.9 1.6 1.5
ATTENZIONE! Accuratezza: un gruppo di 20 sieri stato testato con questa
Il kit sperimentato per spettrofotometro manuale e per procedura ed usando un reagente simile disponibile in
sistemi HITACHI, COBAS e MINDRAY. commercio. Il confronto ha dato i seguenti risultati:
Le applicazioni su analizzatori automatici possono essere Regressione lineare y = 1.0377x - 4
totalmente diverse da quanto sviluppato come Coefficiente di correlazione r = 0.9920 n = 20
determinazione manuale.
BIBLIOGRAFIA
VALORI DI RIFERIMENTO (cfr Bibliografia 1) 1.Textbook of Clinical Chemistry, Ed. by N.W. Tietz,
Valori normali Ceruloplasmina: 20-60 mg/dL. W.B. Saunders Co., Philadelphia (1999).
Poich i valori normali dipendono dall'et, dal sesso, dalla dieta, 2.Young D.S., Effect of drugs on Clinical Lab. Test,
dall'area geografica e da altri fattori, ogni laboratorio deve 5th Ed. AACC Press (2000).
stabilire i propri valori normali per questa procedura. 3.CLSI(NCCLS) C49-A/H56-A: Collection, Handling, Transport
and Storage for Body Fluids. Quick Guide.
CALCOLO
Riferire ogni valore trovato alla curva di calibrazione.

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 CERULOPLASMIN
CERULOPLASMIN QUANTITATIVE IMMUNOTURBIDIMETRIC ASSAY on SERUM with MINDRAY BS-300 Analyser.
Traceable to ERM 470 (CRM 470)
200 tests (2 x 20 mL)
INTENDED USE
Ceruloplasmin is a protein mainly involved in the copper transport
in the body. Particularly it manages the supply of copper to
enzymes Cu-dependent ( cytochrome C oxidase, tyrosinase) and
the copper homeostases; it is also the catalyst of iron oxidation,
to permit the link between transferrin and ionized iron.
Ceruloplasmin may use its weak oxidative activity to prevent the
lipidic peroxidation induced by ionized iron and copper.
Ceruloplasmin is a protein of the Acute phase response and
increases during inflammatory process, severe infections,
neoplasia, leukaemia and Hodgkin lymphoma.
Reduced values of Ceruloplasmin may be found in elevated
numbers of patients with the Wilson disease, a rare and severe
copper metabolism alteration, with deposits in brain, kidney, liver
and cornea. A little reduced value may be found in malnutrition
and in nephrosis.
PRINCIPLE
Quantitative determination of Ceruloplasmin may be done by an
immunoturbidimetric method, by automatic analysers or in
manual.
Mixing a sample with a precise Antigen to a solution having the
corresponding anti-serum (Antibody), in a well-defined ratio, it is
possible to have turbidity; the use of undiluted sample may
require bichromatism.
Using our multipoint Calibrator, traceable to the CRM 470
International Standard, it is possible to prepare a Calibration
Curve to refer, generally not rectilinear and not crossing the
origin.
Plotting on the Calibration Curve absorbance values and
concentration for each single sample, may be determined the
concentration of each sample.
PRECAUTIONS FOR USE
1. This product has been formulated for in vitro diagnostic use.
2. A proportional variation of the reaction volumes does not
change the result.
3. DO NOT mix Reagents from different Production lots.
4. For concentration of Ceruloplasmin higher than the maximum
value of the Calibrator ( CALPRO1), dilute the sample 1:5
with saline solution, repeat the determination and multiply the
result by 5.
5. In addition to the possible risk indications, the Reagent can
contain preservatives (as sodium azide or others), which total
concentration is lower than the limits mentioned in Dir.
67/548/CEE e 88/379/CEE and following modifications regarding
classification, labelling and packaging of dangerous preparations
(Reagents). However it is recommended to handle the reagents
carefully, avoiding ingestion and contact with eyes, mucous
membranes and skin; to use reagents according to good
laboratory practice. On the material safety data sheet are detailed
the operating procedures for the manipulation of this product.
Material safety data sheet should be supplied on request.
ATTENTION!
A) Applications on routine analysers may be totally different from
what developed as manual determination; in addition the
procedures are specific for each analyser.
B) Very deep attention must be given to interfering substances:
certain drugs and other substances are able to influence levels of
Ceruloplasmin (see References 2).
C) The reagent must be used ONLY for the intended destinations
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by expert and trained people and in according to good laboratory
practice.
D) The clinical diagnosis cannot be done correctly using the result
of only one test, but have to be done integrating critically the
results of different laboratory tests and clinical data.
E) A lot of factors, as ambient temperature, the working reagent
temperature, wash accuracy and the type of spectrophotometer,
may affect the tests performances.
F) The calibration curve has to be always repeated at each
change of the lot of the Reagent and/or calibrator.
G) All the precautions normally used in the laboratory must be
respected for reagents handling.
All the calibrators and controls must be considered as human
sample, so potentially infectious; all the protection actions must
be applied to avoid any potential biological risk.
REAGENTS
Components of the kit: C3F3206
R1 - Anti-CER 2 x 20 mL
anti-Ceruloplasmin (goat) in PBS >25 mmol/L
NaN3 < 0.1%
STABILITY: the Reagents are stable up to the expiry date
mentioned on the labels, stored at 2-8C, if closed and kept in
their intact primary container; if not exposed to heat sources
and/or pressure variations.
In case of damaging of the primary container organize the waste
disposal.
AUXILIARY REAGENTS FOR QUALITY CONTROL
To grant the right performances use following kits (see the relative
information for use (IFU)):
- PLASMAPROTEINS CALIBRATOR 5 concentrations CALPRO1
- PLASMAPROTEINS CALIBRATOR elevated level CALPRO45
- PLASMAPROTEINS NORMAL CONTROL liquid PRONOR
- PLASMAPROTEINS ELEVATED CONTROL liquid PROEL
The calibration curve have to be always repeated at each change
of the lot of the Reagent and/or calibrator.
PREPARATION OF THE WORKING REAGENT
Ready-to-use. Mix kindly before use and let the reagent reach the
room temperature before use. Close immediately after handling.
The Reagents have to be used correctly, to avoid contamination.
An incompetent handling relieves us from any responsibility.
STABILITY AFTER THE FIRST OPEN
The product is stable 4 months after the first open if stored at
2-8C.
MATERIAL REQUIRED BUT NOT PROVIDED
Normal laboratory equipment.
Micropipettes to deliver from 3 to 500 L.
Disposable micropipettes tips .
Transparent glass tubes for sample dilution.
Saline solution. Calibrators and controls.
Spectrophotometer or automatic analyser for Clinical Chemistry.
SAMPLES
Not haemolysed fresh serum.
Samples collection incompliance with CLSI (NCCLS)
(see References 3).
The sample can be stored at 2-8C, up to 6 days.
(see References 1).
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WASTE DISPOSAL ANALYTICAL PERFORMANCES

Observe all federal, state and local environmental regulations for (Validate on MINDRAY BS300)
waste disposal. The performances of the Reagent CERULOPLASMIN have been
tested with a MINDRAY BS300 analyser. The data, while
ANALYTICAL PROCEDURE ON MANUAL representing the characteristics of the product, could be different
SPECTROPHOTOMETER for each laboratory and for different analysers.
Wavelength: 340 nm (prim.) 700 nm (sec.) Method Limitations: are not know limitations.
Pathlength: 1 cm Method Linearity: the test is linear up to 170 mg/dL.
Reading: against blank reagent
However, for Ceruloplasmin concentrations higher than the
Temperature: 37C
maximum value of the calibrator, it is recommended to dilute the
Method: end-point
sample 1:5 with saline solution, test again and multiply the
Reaction: 20 seconds
result x 5.
Sample/reagent: 1/50
Method Sensitivity (LoD): the sensitivity limit, that is the
Let reagents reach the working temperature before use.
minimum concentration that can be distinguished by zero,
Pipette in a test tube or cuvette so labelled:
is 0.3 mg/dL.
R/B: Reagent Blank, ST: Calibrator, S: Sample
R/B S ST Interferences: see References 2.
R1 - Anti-CER 500 L 500 L 500 L Within-run Precision: determined on 20 replications of 2
Sample ---- 10 L ---- samples.
Calibrator ---- ---- 10 L The results obtained are following:
Mix carefully and wait 20 seconds. Measure the absorbance of Sample Mean (mg/dL) 2s CV %
calibrator (Ast) and of the sample (As) against blank reagent. Human 1 24.7 1.2 2.4
Read within a short time. Human 2 51.4 0.6 0.6
ATTENTION! Run-to-run Precision: determined for 5 days with 20 replications
The kit is tested for a manual spectrophotometer and for for each days, for two samples.
HITACHI, COBAS and MINDRAY systems. The applications The results obtained are the following:
on automatic analysers could be completely different by Sample Mean (mg/dL) 2s CV %
what has been developed as manual determination.
Human 1 24.2 1.2 2.5
REFERENCE VALUES (see References 1) Human 2 50.9 1.6 1.5
Normal Values Ceruloplasmin: 20-60 mg/dL.
Accuracy: a group of 20 sera has been tested using this
Since the normal values depend on age, sex, diet, geographic procedure and using a similar reagent available on the market.
area and other factors, each laboratory should establish its own The comparison gave these results:
normal values for this procedure.
Linear regression equation y = 1.0377x - 4
CALCULATION Correlation coefficient r = 0.9920 n = 20
Plot each values found to the calibration curve.
REFERENCES
1.Textbook of Clinical Chemistry, Ed. by N.W. Tietz,
W.B. Saunders Co., Philadelphia (1999).
2.Young D.S., Effect of drugs on Clinical Lab. Test,
5th Ed. AACC Press (2000).
3.CLSI(NCCLS) C49-A/H56-A: Collection, Handling, Transport
and Storage for Body Fluids. Quick Guide.

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