UNIVERSIDAD AUTNOMA DE CHIAPAS

Facultad de ciencias qumicas

Extensin Ocozocoautla

ASIGNATURA: Bacteriologa I

DOCENTE: Mtra. Alejandra Mauricio Reyna

SEMESTRE: 5

TEMA DE INVESTIGACIN: Medios de cultivo

NOMBRE DEL ALUMNO: Domnguez Muoz Deyanira Anah

Ocozocoautla de Espinoza, Chiapas; a 16 de Enero de 2017.

NDICE.
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Un poco de
historia. 3
Medios de
cultivo.4
Tipos bsicos de medios de cultivo..
..8
Medios de cultivo ms
comunes..10
Referencias
bibliogrficas...11

MARCO TERICO.

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UN POCO DE HISTORIA.

La primera noticia de la utilizacin de medios de cultivo nos llega del miclogo

Brefeld, que consigui aislar y cultivar esporas de hongos en medios slidos
realizados a base de gelatina. Sin embargo este sistema no era adecuado para las
bacterias (por su menor tamao) y no fue hasta el ao 1878 cuando Lister
populariz un mtodo enfocado al cultivo puro basado en diluciones seriadas en
un medio lquido. Koch realiz sus investigaciones utilizando en un primer
momento rodajas de patata como soporte nutritivo slido, pero no tard en recurrir
al caldo de carne lquido, diseado por Loeffler, al que, en 1881, aadi gelatina,
logrando un medio slido transparente ideal para la observacin de la morfologa
macroscpica de las colonias microbianas. En el ao 1882 tiene lugar uno de los
grandes avances de la microbiologa en relacin con los medios de cultivo: el
mdico alemn Walter Hesse introduce el agar-agar (polisacrido extrado de
algas rojas) como solidificante. En 1887 un ayudante de Koch llamado Petri,
comienza a utilizar placas de cristal planas, que se llaman desde entonces placas
de Petri, para sustituir a las clsicas bandejas de vidrio cubiertas con campanas
que se usaban hasta entonces. Beijerinck y Winogradsky, que desde de 1888
realizaron sus investigaciones sobre las bacterias quimioauttrofas (utilizacin de
nitrgeno y azufre sobre todo) tuvieron gran importancia en el desarrollo de los
medios selectivos y de enriquecimiento. Disearon este tipo de medios de tal
forma que su especial composicin qumica favoreca el crecimiento de ciertos
tipos de microorganismos que, en funcin de sus procesos metablicos, eran los
nicos capaces de utilizar para su desarrollo ciertos nutrientes del medio. En 1892
Wrtz impuls el uso de los medios diferenciales, incorporando indicadores de pH
a la composicin de ciertos medios con lo cual se poda observar la produccin de
cidos en la fermentacin en ciertos microorganismos.

MEDIOS DE CULTIVO.

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Uno de los sistemas ms importantes para la identificacin de microorganismos es
observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el
laboratorio. El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el
Medio de Cultivo y el crecimiento de los microorganismos es el Cultivo. Se han
preparado ms de 10.000 medios de cultivo diferentes.

Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial

debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y
presin de oxgeno adecuados, as como un grado correcto de acidez o
alcalinidad. Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de
crecimiento necesarios y debe estar exento de todo microorganismo
contaminante. Segn lo que se quiera hacer crecer, el medio requerir unas u
otras condiciones. La base de muchos medios de cultivo es una infusin de
extractos de carne y Peptona a la que se aadirn otros ingredientes. La
composicin general de los medios de cultivo son: macronutrientes,
micronutrientes o elementos traza y factores de crecimiento.

MACRONUTRIENTES
Elemento Forma normal del Forma suministrada en el
nutriente en el ambiente cultivo
C CO2, compuestos Glucosa, malato, acetato,
orgnicos piruvato, aminocidos,
extractos compuestos.
H H2O, compuestos H2O, compuestos
orgnicos orgnicos
O H2O, O2, compuestos H2O, O2, compuestos
orgnicos orgnicos
N NH3, NO3, N2, Inorgnico: NH4Cl,
compuestos orgnicos (NH4)2SO4, KNO3, N2
nitrogenados
P PO4-3 KH2PO4, Na2HPO4
2-
S H2S, SO4 , compuestos Na2SO4, Na2S2O3Na2S,
orgnicos, sulfuros csteina y otros
metlicos compuestos orgnicos
azufrados.

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K K+ en solucin o como KCl, KH2PO4
varias sales de K
Mg Mg2+ en solucin o como MgCl2, MgSO4
varias sales de Mg
Na Na+ en solucin, NaCl o NaCl
como otras sales de
sodio
Ca Ca+ en solucin, CaSO4 o CaCl2
como otras sales de Ca
Fe Fe2+, Fe3+ en solucin, FeCl3, FeSO4, varias
FeS, Fe(OH)3 o como soluciones de hierro
otras sales de Fe quelado.

MICRONUTRIENTES
Elemento Funcin celular
Cr Requerido en los mamferos para el
metabolismo de la glucosa. Se
desconoce si los microorganismos lo
requieren.
Co Vit. B12, transcarboxilasa (bacterias del
cido propinico)
Cu En la respiracin, citocromo c oxidasa,
en fotosntesis, plastocianina y en
algunas superxido dismutasas
Mn Activador de muchas enzimas,
presentes en algunas superxido
dismutasas, y en la enzima que rompe
el agua en fototrofos oxigenicos
Mo Algunas enzimas que contienen
flavinas, nitrogenasas, nitrato
reductasa, sulfito reductasas y algunas
formato deshidrogenasas
Ni La mayora de las hidrogenasas,
Coenzima F430 de metangenos,
deshidrogenasa del monxido de
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 carbono y ureasa
Se Formato deshidrogenasa, algunas
hidrogenasas y el aminocido
seleniocsteina
W Algunas formato deshidrogenasas y
oxotransferasas de los hipertermfilos
V Vanadio nitrogenasa, bromo
peroxidasa
Zn Anhidrasa carbonica, alcohol
deshidrogenasa, RNA y DNA
polimerasa y muchas protenas que se
unen al DNA.
Fe Citocromos, catalasas, peroxidasas,
protenas con hierro y azufre, oxidasas
y todas las nitrogenasas.

FACTORES DE CRECIMIENTO
Vitamina Funcin
cido p-aminobenzoico Precursor del cido flico
cido flico Metabolismo de compuestos de un
carbono, transferencia de grupos
metilo
Biotina Biosntesis de cidos grasos, -
descarboxilaciones; algunas
reacciones de fijacin de CO2
Cobalamina B12 Reduccin y transferencia de restos
monocarbonados, sntesis de
desoxirribosa
cido lipoico Transferencia de grupos acilo en la
descarboxilacin del piruvato y -
cetoglutarato
Niacina Precursor del NAD
cido pantotnico Precursor de la coenzima A, activacin
del acetilo y derivados acilados
Gpo vitamina K Transporte de electrones, sntesis de

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 esfingolipidos

El agar es un elemento solidificante muy empleado para la preparacin de medios

de cultivo. Se lica completamente a la temperatura del agua hirviendo y se
solidifica al enfriarse a 40 grados. Con mnimas excepciones no tiene efecto sobre
el crecimiento de las bacterias y no es atacado por aquellas que crecen en l. La
Gelatina es otro agente solidificante pero se emplea mucho menos ya que
bastantes bacterias provocan su licuacin.

Los constituyentes habituales de los medios de cultivo son:

Agentes gelificantes: agar.

Extractos: levadura, carne, hgado, semillas.
Peptonas: soja, carne, gelatina, casena
Sistemas amortiguadores: fosfatos.
Indicadores de pH: rojo neutro, cristal violeta, rojo fenol.
Agentes reductores: microaerofilia, anaerofilia
Agentes selectivos: sales biliares, antibiticos.

Los hidratos de Carbono se adicionan por dos motivos fundamentales: para

incrementar el valor nutritivo del medio y para detectar reacciones de fermentacin
de los microorganismos que ayuden a identificarlos. El suero y la sangre completa
se aaden para promover el crecimiento de los microorganismos menos
resistentes. Tambin se aaden colorantes que actan como indicadores para
detectar, por ejemplo, la formacin de cido o como inhibidores del crecimiento de
unas bacterias y no de otras (el Rojo Fenol se usa como indicador ya que es rojo
en pH bsico y amarillo en pH cido. La Violeta de Genciana se usa como
inhibidor ya que impide el crecimiento de la mayoria de las bacterias
Grampositivas.

Un medio de cultivo adecuado para la investigacin microbiolgica ha de contener,

como mnimo, carbono, nitrgeno, azufre, fsforo y sales inorgnicas. En muchos
casos sern necesarias ciertas vitaminas y otras sustancia inductoras del
crecimiento. Siempre han de estar presentes las sustancias adecuadas para

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ejercer de donantes o captadores de electrones para las reacciones qumicas que
tengan lugar.

TIPOS BSICOS DE MEDIOS DE CULTIVO

Dependiendo su estado fsico:

Solidos y liquido

Los medios de cultivo slidos y los medios de cultivo lquidos o tambin llamados
caldos. cul es la diferencia?.pues la diferencia radica en la presencia de una
sustancia que se llama Agar o Agar-Agar y que es la encargada de darle la
solidez y consistencia al medio. Esta sustancia proviene, principalmente, de un
alga llamada Gelidium, aunque muchos otros gneros pueden servir como fuente
de este polisacrido (es decir, un azcar grande formado por la unin de azcares
pequeos). Y cmo se obtiene del alga?Se toman sus semillas, se lavan, se
secan, se realizan procesos de extraccin, filtracin, purificacin y desecacin
para que queden hojuelas o polvo y luego si adicionarla al medio de cultivo.

Fue, Robert Koch, mdico alemn dedicado al estudio de los microorganismos y

considerado uno de los autores de la teora microbiana, quien empez a cultivar
y aislar microorganismos. Koch, buscando mejorar la tcnica utilizada hasta ese
momento, decidi solidificar los medios de cultivo aadindoles gelatina. Sin
embargo, y a sugerencia de una ayudante, introdujo el agar. Tiene alguna ventaja
el uno sobre el otro, pues la ventaja fundamental de usar un medio de cultivo
lquido, es que permite que crezcan bacterias que se encuentran en muy poca
cantidad, es decir, cuya concentracin es muy baja en la muestra que estemos
analizando. Para el caso del medio de cultivo slido, la ventaja radica en que
permite detectar los diferentes tipos de bacterias que puedan encontrarse en una
sola muestra... el usar uno u otro medio de cultivo depender de lo que
busquemos o queramos.

Medios semislidos

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Se preparan a partir de los medios lquidos, agregando a stos un agente
solidificante en una proporcin menor que para preparar medios slidos. Uno de
sus usos es la investigacin de la movilidad de las bacterias.

Segn su utilizacin:

Medios comunes
Medios de enriquecimiento
Medios selectivos
Medios inhibidores
Medios diferenciales
Medios de identificacin
Medios de multiplicacin
Medios de conservacin
Medios de transporte

Atendiendo su composicin:

Complejos
Sintticos
Semisinteticos

Segn su origen:

Naturales
Sintticos
Semisintticos

MEDIOS DE CULTIVO MS COMUNES.

Agar nutitivo: es un medio de cultivo usado normalmente como rutina para

todo tipo de bacteria. Es muy util porque permanece solido incluso a
relativas altas temperaturas. Adems, el crecimiento bacteriano en este
agar lo hace en la superficie, por lo que se distinguen mejor las colonias
pequeas.
Agar sangre: Es un medio enriquecido que se utiliza adems para la
investigacin de los diversos tipos de hemlisis(, gamma ). Se utiliza
para el crecimiento de estreptococos.
Agar chocolate: El agar chocolate se obtiene calentando la sangre antes de
adicionarla al medio base. Por esta razn el agar chocolate contiene

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 hemoglobina, que aporta al medio un importante elemento para el
crecimiento: el factor X o hemina termoestable. El agar chocolate es un
medio destinado principalmente al aislamiento de Neisserias (gonococos
ymeningococos) y Haemophilus, pero en l pueden crecer muchos otros
microorganismos exigentes.
Agar Levine o EMB: El Agar Eosina y Azul de Metileno es un medio utilizado
para el aislamiento y diferenciacin de bacilos entricos Gram negativos.
Este medio tambin es conocido como Agar EMB por sus siglas en ingls.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS.

Medina, M. et al. (2012). Medios de cultivo en un laboratorio de microbiologa.

Recuperado el 14 de enero de 2017 de
https://libroslaboratorio.files.wordpress.com/2012/09/medios-de-cultivo-en-un-
laboratorio-de-microbiologc3ada.pdf

Domnech, A. Medios de cultivo. Recuperado el 14 de enero de 2017 de

www.ulb.cat/depart/dba/microbiologia/seminarios/1%20medios%20de
%20cultivo.pdf

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