ESTUDIO DE CASO 1 (LAS ESTATINAS)

Las estatinas son un grupo importante de los medicamentos para bajar el colesterol que
actan como inhibidores enzimticos. El mercado de los medicamentos para bajar el
colesterol es el ms grande de los farmacuticos y el sector est dominado por las
estatinas, con sub- sustancial recompensa a las empresas que los producen. En 2002, la
Atorvastatina y Simvastatina registr unos ingresos de alrededor de $7 mil millones y
5.300 millones de dlares, respectivamente.
En este estudio de caso, examinaremos cmo estas drogas fueron descubiertos y cmo
interactan con su objetivo en el nivel molecular. En primer lugar, consideraremos el
papel del colesterol en la enfermedad coronaria y cmo la inhibicin de una enzima
puede disminuir los niveles de colesterol.
CS1.1 Colesterol y enfermedad coronaria
El colesterol es un componente importante de la celda membranas y tambin es el
precursor de la biosntesis de hormonas esteroides. Por tanto, es de vital importancia
para el normal funcionamiento de las clulas sanas y pueden ser obtenidos de la dieta y
la biosntesis de las clulas. Si surgen problemas demasiado colesterol est presente en
la dieta como esta puede conducir a la cardiovascular enfermedad.
Como el colesterol es una molcula grasa, no puede disolver en la sangre y por lo tanto
tiene que ser transportado alrededor del cuerpo por partculas conocidas como
lipoprotenas de baja densidad (LDL) o lipoprotenas de alta densidad (HDL). Ldl son
partculas de aproximadamente 22 nm de dimetro que tiene una masa de 3 millones de
Daltons. Cada partcula contiene una lipoprotena de 4536 restos de aminocidos que
rodea una gran variedad de cidos grasos, mantenindolos solubles en el medio acuoso
del suministro de sangre.
La partcula tambin contiene un cido graso polyunsatu- nominal llamado linoleato,
varios fosfolpidos, y un gran nmero de molculas de colesterol. Sirve para el transporte
de colesterol LDL y triglicridos desde el hgado hasta los tejidos perifricos. Cuando una
clula requiere colesterol produce receptores LDL, que se colocan en la membrana
celular. LDL se une a estos receptores y es entonces endocitado en la celda donde libera
el colesterol en el citoplasma.
Son partculas de lipoprotena HDL alrededor de 8-11 nm de dimetro que transportan
los cidos grasos y del colesterol de tis- sueos de vuelta al hgado, donde se elimina de
la sangre. Se les llama HDL porque con Retener una mayor proporcin de protenas de
las LDL. Cuando viajan alrededor del cuerpo, aumentando de tamao a medida que
recoger el colesterol de los tejidos.
La mortalidad por enfermedad coronaria ha demostrado estar asociada con niveles
elevados de LDL o niveles bajos de HDL. Inevitablemente, el LDL colesterol al transporte
arter- ies y, si el colesterol es retenido all, puede conducir a la formacin de placas de
grasa que estrecha las arterias, provocando un aumento en el riesgo de aterosclerosis. Si
se forma un cogulo y obstruye una arteria que irriga el musculo del corazn, conduce a
un ataque al corazn. Si el cogulo bloquea una arteria que sirve al cerebro, un golpe los
resultados.
Por lo tanto, bajar el nivel de LDL y/o aumento de HDL debera reducir el riesgo de
ataques cardacos y accidentes cerebrovasculares. Cuando el uso de estatinas fue
diseado por primera vez, el objetivo era reducir los niveles de colesterol que se
sintetiza en el cuerpo. Las estatinas ciertamente hacer esto, pero, como veremos ms
adelante, es de los efectos subsiguientes sobre los niveles plasmticos de LDL que son
ms importantes en su accin protectora contra la enfermedad cardiovascular.

El objetivo CS1.2 enzima

El colesterol es sintetizado dentro de las clulas, y una manera de bajar los niveles de
colesterol en la sangre es bloquear esta sntesis. Esto puede lograrse mediante la
bsqueda de un frmaco que inhibe una de las enzimas involucradas en la biosntesis de
colesterol.
Sin embargo, existen ms de 30 enzimas implicados en la va biosinttica, as que cmo
decidir cul de estas enzimas es el mejor destino? La eleccin puede ser reducido
mediante la seleccin de la enzima que cataliza el paso limitante de la velocidad para el
proceso global, ya que esto proporciona la manera ms eficaz de la inhibicin de la va
biosinttica.
La enzima cataliza la tasa- limitar el paso es una enzima reductasa llamado 3-hidroxi- 3-
methylglutaryl-coenzima A reductasa (HMGR o inhibidor de la HMG-CoA reductasa). La
reaccin es la conversin de 3-hidroxi-3-metil actividad glutaril Coenzima A (HMG-CoA)
para mevalonate con la ayuda de NADPH como cofactor (seccin 3.5.4) (Fig CS1.1).

HMGR consta de cuatro subunidades proteicas y es uno de los ms altamente regulado

enzimas conocidas. La actividad de la enzima puede ser disminuido en un nmero de
maneras si se produce demasiado colesterol. En primer lugar, altos niveles de colesterol
dentro de la clula desencadenar un proceso de transduccin de seales que activa una
protena quinasa responsable Gapdh y HMGR inactivar.
En segundo lugar, la velocidad a la que la enzima es sintetizada a travs de transcripcin
y la traduccin es controlada por los niveles intracelulares de colesterol. Por ltimo, la
tasa a la que se degrada la enzima parece estar influida por los niveles de colesterol.
Hay dos sitios activos presentes en su estructura tetramrica y cada uno est situado
entre dos de los monmeros. La porcin del sitio activo que une el sustrato de la HMG-
CoA es predominantemente en un monmero, mientras que la parte que une el cofactor
NADPH est situados de un monmero de vecinos.
En cuanto a la trayectoria de reaccin se refiere, implica un clivaje reductivo con dos
transferencias de hidruro (Fig. CS1.2). El hidruro es proporcionado por el cofactor NADPH
y as dos molculas de NADPH requerido para cada reaccin.
La HMGR enzima es altamente flexible en su estructura tridimensional y esto tiene un
papel importante que desempear en el enlace y actividad de las estatinas.
Los diferentes residuos aminocidos en el sitio activo tienen importantes papeles que
desempear en la
reaccin catalizada
por enzimas, ya sea
en el enlace el
sustrato o en el
mecanismo de la
reaccin.
En cuanto a la
encuadernacin va,
una lisina cargado
positivamente recibido (Lys-735) se forma un enlace inico con el grupo carboxilato
cargado negativamente de HMG-CoA. Otros residuos, como ser-684 y ASP-690
interactuar con el grupo de alcohol por parte de los puentes de hidrgeno, mientras que
la Lys-691 est implicado en un enlace de hidrgeno interaccin con el grupo carbonilo
(Fig. CS1.3). La coenzima fraccin tambin est obligado por diferentes interacciones en
una estrecha ranura hidrofbica dentro del sitio activo.
Otros aminocidos juegan un papel importante en el mecanismo de la reaccin
catalizada por enzimas (Fig
CS1.4). Un residuo de la
histidina (his-866) acta como
un catalizador cido y
proporciona el protn
requeridos por la coenzima A
apartarse como saliendo del
grupo.
Una mencin especial debe
hacerse de la funcin
obligatoria de Lys-691. Ya
hemos visto que esta forma
de hidrgeno al sustrato, sino
que tambin desempea un
papel particularmente
importante en la
estabilizacin de la carga negativa del oxgeno de mevaldyl-CoA mediante puentes de
hidrgeno y las interacciones inicas. Esto no slo contribuye a estabilizar el
 intermediario sino tambin estabiliza el estado de
transicin que conduce a l. En consecuencia, la
energa de activacin para el primer paso del
mecanismo es bajado, permitiendo que la
reaccin se produzca con mayor facilidad.
Descargado un residuo de cido glutmico (Glu-
559) tambin participa como un catalizador cido
y proporciona un protn de la etapa final donde se reduce a mevaldehyde mevalonate
(Fig. CS1.5).
Es bastante extrao que haya descargado un residuo de cido glutmico presente en el
sitio activo. La razn de que no es ionizado es que hay un vecino de residuo de aspartato
(ASP-767) que afecta al pka del cido glutmico residuo. El residuo de aspartato tambin
ayuda a estabilizar la forma inica de Lys-691 a travs de la red de enlace de hidrgeno
se muestra en la Fig CS1.6.

CS1.3 el descubrimiento de las estatinas

Una vez que la enzima HMGR fue identificado como un posible objetivo, los
investigadores se pusieron a buscar un compuesto de plomo que Se inhiben. Empezaron
por concentrar su atencin en compuestos producidos por microorganismos. Esto podra
parecer extrao, pero la razn fue que Los microorganismos participan constantemente
en qumica
La guerra unas con otras y, por tanto, un microorganismo que produce un producto
qumico que es txico a otro micro- organismo adquiere una ventaja en la lucha
interminable por la supervivencia (seccin 12.4.1.2). Parece probable que los
microorganismos pueden producir HMGR carente HMGR inhibidores que seran txicos
para los microbios que requieren HMGR en orden a producir importantes esteroles.
 (Mevastatin Compactin) (Fig CS1.7) fue la
primera estatina potente para encontrarse que
inhiban la HMGR, y puede ser considerado
como el compuesto de plomo para este grupo
de medicamentos. Es un producto natural que
fue aislada de Penicillium citrinum en la dcada
de los setenta, tras una investigacin de 6000
microbios por el cientfico farmacutico japons
Akira Endo.
Los estudios mostraron que era un muy potente
inhibidor y tena 10.000 veces mayor afinidad
por la enzima que el sustrato natural. A pesar de que entraron en los ensayos clnicos, el
medicamento
nunca lleg al
mercado. La razn
de esto nunca se
ha revelado
plenamente, pero
es probable que los
efectos txicos
adversos fueron
observados
durante estudios
preclnicos.
En 1978, Merck aisl una estrechamente relacionado llamado mevinolin estructura de los
caldos de fermentacin de Aspergillus terreus. Esto fue tambin un potente inhibidor y
ensayos clnicos comenzaron en 1980. El frmaco fue comercializado en 1987 como
lovastatina (Fig. CS1.7) y ha revolucionado el tratamiento de la hipercolesterolemia
(niveles altos de colesterol).
Pronto siguieron otras estatinas (Fig. CS1.7). La simvastatina es una estructura semi-
sinttico preparado de la lovastatina y fue aprobado por primera vez en 1988. La
pravastatina se deriva de compactin por biotransformacin y lleg al mercado en 1991.
Estas estatinas representan la primera generacin de estatinas y han sido clasificadas
como tipo I las estatinas. Todos ellos se derivan directa o indirectamente de metabolitos
de hongos, y comparten una estructura similar que contiene un polar 'cabeza' y un
grupo que incluye una fraccin hidrofbica bicicliclo decalina anillo (Fig. CS1.8).
Los lectores atentos notarn que las estructuras de lovastatina y simvastatina contienen
un anillo lactona, y no en el grupo de cabeza polar acclicos mostrada en la Fig. CS1.8.
Sin embargo, la lactona observado en estas estructuras es hidrolizado por las enzimas
en el cuerpo para producir el polar 'cabeza-grupo', y esta estructura representa la droga
activa. Lovastatina y simvastatina son, por lo tanto, llamar como profrmacos (seccin
14.6).
Aunque el tipo I Las estatinas han sido sumamente eficaces a bajar los niveles de
colesterol, no tienen efectos secundarios.
Tambin son difciles de sintetizar debido al nmero de centros asimtricos asociados
con la decalina anillo, y por lo tanto ms trabajo fue llevado a cabo para encontrar las
estatinas con mayor actividad y reducir los efectos secundarios, y que seran ms fciles
de sintetizar. Esto dio lugar a una segunda generacin de las estatinas conocidas como
el tipo II las estatinas.
CS1.3.1 Tipo II estatinas
En contraste con el tipo I, el tipo II las estatinas las estatinas son estructuras sintticas
que contienen diferentes (y ms grande) hydropho- fraccin bic de la decalina ring
system presente en tipo I estatinas (Fig CS1.9). Las fracciones hidrfobas presentes en el
tipo II las estatinas puede ser ms grande que el sistema decalina, pero son ms fciles
de sintetizar como no contienen asymmet- ric centros (simplificacin; vase la seccin
13.3.8). La fluvastatina fue comercializada en 1994, atorvastatina , cerivastatina en 1997
en 1998, y de la rosuvastatina en 2003.
Las estructuras comparten una serie de caractersticas estructurales comunes, y pueden
ser vistos como 'me demasiado' o 'Me' mejor droga (seccin 12.4.4.1). En 2001, la
atorvastatina se convirti en el ms vendido en la historia de drogas. Es el ms
comnmente recetados estatina y ha seguido siendo la droga de mayor venta en el
mundo durante varios aos, trayendo consigo a casi 10.000 millones de libras esterlinas
en ventas para Pfizer durante 2010 solamente.
De estas estructuras, la cerivastatina es la ms hidrofobos, mientras que la pravastatina
y rosuvastatina son las menos hidrofbico. Los estudios han demostrado que las
estatinas con un menor carcter hidrofbico son ms selectivas a las clulas del hgado,
donde la mayor parte de la sntesis del colesterol se lleva a cabo, y que tal las estatinas
tienen menos efectos secundarios.
Efectos secundarios se cree que es causada por la inhibicin de la HMGR en otros tejidos,
especialmente las clulas
musculares, donde una condicin
conocido como mialgia puede
ocurrir.
Este es un tipo de musculo de
dolor o debilidad que es
especialmente frecuente entre
personas que toman estatinas y
que ejercen vigorosamente. Una
forma severa de toxicidad
muscular es una condicin
conocida como rabdomilisis, que
puede ser fatal. De hecho,
cerivastatina fue retirado en
2001, tras un gran nmero de
presuntos casos de rabdomiolisis,
que inclua 50 fatalidades
causadas por insuficiencia renal.
La estatina ms potente disponible actualmente es rosuva- estatina. Esta estructura
contiene un grupo sulfonamida que fue introducido para reducir el carcter hidrofbico
del frmaco. Coincidentemente, la introduccin de este grupo gener una mayor
interaccin vinculante tal como se describe ms adelante.
La selectividad asociada con menos hidrfoba estatinas es un resultado de la forma en
que acceden a las clulas. Al menos hidrofbicas estatinas no difunden fcilmente a
travs de las membranas de las clulas y protenas de transporte requieren alcanzar
niveles efectivos dentro de las clulas (vanse tambin las secciones 2.7.2 y 14.1). Las
clulas del hgado poseen una protena de transporte que pueden llevar las estatinas a
travs de la membrana celular, mientras que las clulas musculares no.
Mecanismo de accin de CS1.4 estatinas-farmacodinamia
Los trabajos por las estatinas actan como inhibidores competitivos (seccin 7.1.1). Ellos
imitan el sustrato natural y completo con ella con el fin de enlazar con el sitio activo. A
diferencia El sustrato natural, que no sean objeto de una reaccin catalizada por enzima-
y se unen ms fuertemente. Cmo podemos explicar todo esto?
Tanto el grupo de cabeza polar y la moie hidrfobo- tes son importantes para la accin
de las estatinas. Todas las estatinas comparten el mismo grupo de cabeza polar y este es
el grupo que imita el substrato
natural (HMG-SCoA). Esto puede
verse ms claramente si
dibujamos la estructura de HMG-
SCoA como se muestra en la Fig.
CS1.10 y compararla con una
estructura general de las
estatinas.
El jefe del grupo de las estatinas, por lo tanto, puede imitar el sustrato natural y enlazar
con el sitio activo utilizando el mismo enlace inter- acciones. Ahora tenemos que explicar
por qu las estatinas enlazar ms fuertemente que el substrato natural y porqu son
resistentes a la reaccin catalizada por enzimas.
En primer lugar, las estatinas contienen una regin hidrofbica extra que puede formar
interacciones hidrfobas adicionales con un enlace hidrofbico regiones presentes en la
enzima. Esto permite que las estatinas para enlazar con ms fuerza.
En segundo lugar, las estatinas son resistentes a la enzima- como reaccin catalizada
por la coenzima fraccin en el Sustrato (que acta como un saliendo del grupo) ha sido
sustituido por un grupo hidrofbico que puede actuar como saliendo del grupo.
Hay otra caracterstica interesante acerca de las estatinas. En realidad son ms
parecidos a los de la primera intermedia en el mecanismo
catalizado por enzimas-mevaldyl CoA- que el sustrato (Fig.
CS1.11). Suponiendo que el meval- dyl CoA es menos
estable que el sustrato, esto implica que las estatinas
tienen cierta semejanza con el estado de transicin que
conduce a mevaldyl CoA.
 Por lo tanto, tendran que tener un enlace ms fuerte interaccin que el sustrato natural
y probablemente estn actuando como estado de transicin anlogos (seccin 7.4).
Procederemos ahora a examinar con mayor detalle en el enlace las interacciones de las
estatinas.
Enlace CS1.5 interacciones de las estatinas
Las interacciones vinculantes del sustrato con la enzima han sido estudiados por
cristalografa de rayos x, as como las interacciones vinculantes de las estatinas* (vase
tambin la seccin de 13.3.11).
El grupo de cabeza polar de las estatinas se une en un similar la moda al sustrato, como
se describe anteriormente (Fig. CS1.3). En cuanto a la regin hidrofbica se refiere,
podramos estar tentados a pensar que se unira a la Misma regin del sitio activo como
coenzima A.
Sin embargo, los estudios realizados sobre el complejo enzima-sustrato muestran que el
Pocket vinculante para la coenzima A es estrecho y no poda acomodar los abultados
grupos hidrofbicos que estn presentes en las estatinas. Tambin no hay Ninguna otra
regin hidrofbica en que las estatinas podran enlazar y as debe ser realmente
compuestos inactivos.
* Estos estudios se llevan a cabo efectivamente mediante la parte cataltica de la enzima
HMGR en lugar de toda la enzima El hecho de que no se unen a la enzima refleja una
notable flexibilidad que es inherente a la enzima.
Volvamos a mirar ms de cerca cmo el sub- au se une a la HMGR. Cuando el sustrato
se une, un alfa- seccin helicoidal de la protena se pliega sobre el sitio activo,
protegindolo del agua y la creacin de una fila- nar vinculantes para la regin
hidrofbica coenzima una porcin del sustrato. Cuando se enlaza una estatina, la
enzima altera la forma de una manera diferente.
Movimiento de flexible C-terminal alfa hlices expone un shal- baja, pero diferentes,
regin enlace hidrofbico junto al sitio activo que puede acomodar la fraccin hidrofbica
presentes en la estatina. Por lo tanto, las estatinas son inhibidores eficaces porque
pueden tomar ventaja de la enzima y esencialmente la flexibilidad de crear su propio
sitio de enlace.
Comparando el enlace interacciones de tipo I y tipo
II las estatinas con la enzima, se encontr que el
grupo metil- etilo en el tipo II las estatinas se une a
la misma parte de la regin hidrofbica superficial
como la decalina anillo tipo I de las estatinas. Tipo II
Las estatinas tienen interacciones adicionales que
incluyen van der Waals interacciones hidrfobas
con las cadenas laterales de aminocidos, como
leucina, valina y alanina. Particularmente
importante interaccin involucra la fluorophenyl
grupo de estatinas tipo II y un residuo de Arginina
en la regin de unin (Fig. CS1.12).
En primer lugar, hay una interaccin entre este residuo polar y el sustituyente de
fluoroscopia. En segundo lugar, el grupo guanidinium planar del residuo se apilan sobre
el anillo fenilo permitiendo adicio- nal de las interacciones.
Atorvastatina y rosuvastatina puede formar un enlace de hidrgeno extra la interaccin
con la enzima que no ocurre con otras estatinas. Esto implica una serina resi- debido que
acta como donante de hidrgeno con el tomo de oxgeno carbonilo de atorvastatina
(Fig. CS1.12) o al sul- telfono oxgeno de la rosuvastatina.
La rosuvastatina es la nica entre las estatinas en tener un enlace adicional de
interaccin entre el grupo sulfona del frmaco y arg-568, el ms fuertemente atados
estatina.
CS1.6 otros mecanismos de accin de las estatinas
La accin de las estatinas no es puramente a la inhibicin de la HMGR. Ciertamente, la
inhibicin provoca una
disminucin en el nivel de
mevalonate y colesterol, pero
esto, a su vez, conduce a una
regulacin de la transcripcin
y traduccin de los procesos
que conducen a nuevos HMGR
que deberan contrarrestar la
inhibicin. El hecho de que las
estatinas son eficaces es
consecuencia de otros
factores. En particular, la reduccin de colesterol niveles en las clulas del hgado
produce un aumento en el synthesis heptica de receptores LDL que son incorporados
en la membrana celular. Estos receptores son responsables
Intenta encontrar los medicamentos para bajar el colesterol estudi la inhibicin de las
enzimas catalizar los pasos posteriores en la va biosinttica. Hay en este sentido, ya que
la inhibicin de una enzima en una tarde biosynthesis es probable que tengan una
accin ms selectiva.
En otras palabras, los niveles del producto final son bajados sin afectar la biosntesis de
otros compuestos que comparten la misma va biosinttica.
Si bien los inhibidores son eficaces, que dio lugar a una acumulacin de sustrato no
utilizados que result insoluble y txicos. Cuando de la HMG-CoA reductasa est inhibida,
el sustrato es soluble en agua y fcilmente metabolizada. Por lo tanto, no se acumula a
niveles txicos.
Las estatinas tambin han sido utilizadas en combinacin con medicamentos que
protenas diana no directamente involucrados en la biosntesis de colesterol. Por
ejemplo, Vytorin es una preparacin que incluye la simvastatina y un inhibidor de la
absorcin de colesterol llamados ezetimiba (Fig. CS1,13). sta disminuye los niveles de
colesterol absorbido desde la parte gastrointestinal.
Otro enfoque actualmente estudiadas es inhibir la protena de transferencia de colesterol
esterificado (CETP). Esta es una protena plasmtica que favorece la transferencia de
colesterol y triglcyerides entre LDL y HDL. Estudios sobre los inhibidores de la CETP
indican que estos pueden elevar los niveles de HDL y reducir los niveles de LDL en la
presencia de las estatinas. Anacetrapib (Fig. CS1.13) es un inhibidor de tales sometidas a
ensayos clnicos.