E-IJD - ORIGINAL ARTICLE

Year : 2015 | Volume : 60 | Issue : 3 | Page : 321

Study of the distribution of malassezia species in patients

with pityriasis versicolor in Kolar Region, Karnataka

Banur Raju Archana1, Paravangada Madappa Beena1, Shiva Kumar2

1
Department of Microbiology, Sri Devaraj Urs Medical College, Tamaka, Kolar, Karnataka, India
2
Department of Dermatology and Venereology, Sri Devaraj Urs Medical College, Tamaka, Kolar,
Karnataka, India

Abstract

Context: Pityriasis versicolor is a superficial, chronically recurring fungal infection caused

by Malasseziaspecies. Recently it has been revised taxanomically into 14 species, in that only 7
species have been well studied in relation to pityriasis versicolor. Aims: To
identify Malassezia species isolated from patients with pityriasis versicolor and to find out any
correlation between the species with clinical presentation of lesions. Settings and
Design: Prospective study comprising of 100 clinically diagnosed cases of pityriasis versicolor
attending Dermatology Outpatient Department over a period of 1 year. Materials and
Methods: The clinical specimens were collected under aseptic precautions and subjected to
culture on Sabouraud's Dextrose Agar overlaid with olive oil and modified Dixon agar. The
isolates were identified by biochemical tests. Statistical Analysis Used: Statistical analysis was
done using proportion, mean and chi-square test. Results: Of the 100 cases, 73% were males,
26% were females and predominant age group was 21-30 years. Out of 100 samples, 70 yielded
growth. The most common isolate was M. sympodialis (50%), followed by M.
furfur (32.86%), M. globosa (14.28%) and M. slooffiae (2.86%). Among 100 cases, 74% had
hypopigmented and 26% had hyperpigmented lesions. M. sympodialis and M. furur were
predominantly isolated from hypopigmented lesions and M. globosa and M. slooffiae were found
to be more common in hyperpigmented lesions. Conclusions: M. sympodialis was the most
common isolate, followed by M. furfur, M. globosa and M. slooffiae. There was no significant
difference in distribution of different species in patients with hypo or hyper pigmented lesions

Keywords: Hyperpigmentation, hypopigmentation, Malassezia, pityriasis versicolor

How to cite this article:

Archana BR, Beena PM, Kumar S. Study of the distribution of malassezia species in patients
with pityriasis versicolor in Kolar Region, Karnataka. Indian J Dermatol 2015;60:321

How to cite this URL:

Archana BR, Beena PM, Kumar S. Study of the distribution of malassezia species in patients
with pityriasis versicolor in Kolar Region, Karnataka. Indian J Dermatol [serial online] 2015
[cited 2016 Nov 12];60:321. Available from: http://www.e-ijd.org/text.asp?
2015/60/3/321/156436

What was known?

World wide it is believed that the causative agent of the common disease pityriasis versicolor is
M globosa then M furfur.

Introduction
Pityriasis versicolor (PV) is a superficial, chronically recurring fungal infection of stratum
corneum. The lesions are characterized by scaly, hypo or hyper pigmented irregular macules,
most often seen on lipid-rich areas of the body, including upper part of trunk, neck, face and
upper aspect of arms. [1] Clinically, the disease is asymptomatic, usually patient seeks medical
attention for cosmetic purposes. [1] It has a worldwide distribution, though it is more frequent in
tropical region (40%) due to relatively high temperature and humidity. [2],[3],[4]

The etiological agents of this superficial surface infection belong to the genus Malassezia.
The Malassezia is lipophilic dimorphic fungus, occurs as yeast form in culture media and mycelia
forms in the skin lesions. [5] It has been recognized as a member of normal skin flora as well as
organisms involved with superficial cutaneous infections. [6] Under the influence of certain
exogenous and endogenous factors, the commensal yeasts transform into filamentous pathogenic
forms. [7] The normal human skin flora consists predominantly the yeast phase where as mycelia
phase predominates in skin lesions. [8] Pathological specimens consists predominantly hyphae
with clusters of spherical yeasts described as "spaghetti and meat ball" appearance. [9]

Malassezia species have been associated with diverse dermatological lesions like pityriasis
versicolor, seborrheic dermatitis, atopic dermatitis, pityrosporum folliculitis, psoriasis,
onychomycosis and blepharitis. Though generally associated with very mild superficial infection,
it is emerging as an opportunistic fungal pathogen in immunocompromised patients and as
nosocomial pathogen in patients with central line vascular catheter, particularly in low birth
weight neonates who receive lipid emulsions. [10]

Currently genus Malassezia includes 14 species, namely M. furfur, M. sympodialis, M. globosa,

M. restricta, M. slooffiae, M. obtusa, M. dermatis, M. japonica and M. yamatoensis associated
with normal human flora and can cause skin lesions, M. pachydermatis, M. nana, M. equina, M.
caprae and M. cuniculi are associated with animals. [11],[12]

Although there is evidence to suggest variation in geographical distribution of different species,

not much data is available from our country. Therefore, this study was undertaken to study the
distribution of different Malassezia species in Kolar region, Karnataka.
 Materials and Methods

This study comprises of 100 clinically diagnosed cases of PV attending Dermatology Outpatient
Department over a period of 1 year at R. L. Jalappa Hospital and Research Centre, Kolar,
Karnataka. A detailed history with reference to name, age, sex, place and clinical details like site
of lesion and whether hypo or hyperpigmented were recorded. All patients clinically diagnosed as
PV showing positive for presence of yeast in KOH (Potassium Hydroxide) mount were included
in the study. Patients who have already received topical antifungal therapy within last 3 months
and oral therapy within the last 6 months were excluded.

[10]
After taking informed consent skin scrapings from affected area are collected. Those samples
that showed the typical "spaghetti and meat balls" appearance on 10% KOH examination were
subjected to culture. The samples were inoculated into SDA (Sabourad's Dextrose Agar) slant
overlaid with sterile olive oil, plain SDA and MDA (modified Dixon agar) plates and all the
cultures were incubated at 32C. The culture plates and slants were examined every day for
growth and culture negatives were discarded only after 3 weeks of incubation. [4],[13]

The morphological features like budding pattern, shape of yeast cell were studied by observing
Gram's stained smears on 5 th day after colonies were noticed on culture media. S peciation
of Malassezia was done using catalase test, esculin hydrolysis and assimilation of Tween 20, 40,
60 and 80. [3],[14],[15],[16] Statistical analysis was done with descriptive tools like proportion and
mean. Proportional difference observed within groups was being compared using the Chi-square
test.

Results

Of the 100 cases of PV, (73%) were males and (27%) were females, with a high male
preponderance. The age of the patients with PV ranged from 15 to 60 years. Majority of them
were in the age group of 21-30 years (57%), followed by 31-40 years (27%), 11-20 years (10%),
41-50 years (4%) and 51-60 years (2%). Seventy-four (74%) had hypopigmented lesions and 26
(26%) had hyperpigmented lesions.

Distribution of PV lesions on diferent sites of the body showed that chest and trunk (30%) was
the most common site involved, followed by back (27%), multiple sites (21%), these patients
showed involvement of two or more sites, neck (12%), arm (8%) and axilla (2%).

Among 100 samples only 70 yielded growth on both SDA with olive oil and MDA. None of them
showed any growth on plain SDA. The growth on SDA with olive oil appeared after 8 to 10 days
of inoculation and on MDA within 5 days of inoculation.

Of the 70 culture positives, 35 (50%) yielded M. sympodialis, 23 (32.86%) M. furfur, 10

(14.28%) M. globosa, 2 (2.86%) M. slooffiae. The isolation of M. sympodialis is significantly
(P < 0.001) higher than the isolation of other species.

Distribution of different species on different sites of the body shown in [Table 1]. M.
sympodialis and M. furfurwas isolated predominantly from lesions on the back, M. globosa from
the chest and trunk, M. slooffiae was isolated from chest and trunk and also from lesions on neck
and arm.

Table 1: Isolation of Malassezia species from different sites of the body

Of the 70 culture-positive patients, 52 (74.27%) had hypopigmented lesions and 18 (25.71%) had
hyperpigmented lesions. Different species isolated with respect to type of lesion is shown [Figure
1]. M. sympodialis and M. furur were predominantly isolated from hypopigmented lesions and M.
globosa and M. slooffiae were found to be more common in hyperpigmented lesions.
Figure 1: Distribution of Malassezia species in patients with hypo and hyper pigmented lesions

Discussion
Yeasts of the genus Malassezia cause various skin lesions, among which PV is the most common
and worldwide in occurrence. [4] The genus Malassezia has undergone several taxonomic
revisions. In the last reclassification, 14 distinct species are recognized, in that only 7 species
have been well studied in relation to PV. [11],[12]

The incidence of PV was more common in males (73%) than in females (27%). Similar to our
study Gosh et al., Rao et al. and Krishnan et al. also found male predominance. [1],[2],[17] The
higher incidence of PV in males may be due to their outdoor activities. [18]

Hypopigmented lesions were seen in 74% and hyperpigmented lesions in 26% of patients. Other
studies from India, Gosh et al. (81% hypopigmented), Rao et al. (75% hypopigmented) and
Krishnan et al. (84% hypopigmented) also showed predominance of hypopigmented lesions in
PV. [1],[2],[17] In general, PV is thought to have a tendency to be hypopigmented in dark skinned
individuals and hyper pigmented in fair skinned individuals. However, Aljabre et al. studied
pigmentary changes in patients and concluded that PV is not necessarily hypopigmented in dark-
skinned individuals and there is no correlation between pigment variation and the type of skin,
sex and age of patient and site of lesion. [19]

The occurrence of PV was more common in adult age group than in the pediatric age group. In
adults it was found to be more common in 21-30 year age group (57%). This association was
found to be statistically significant with P < 0.001. A similar finding was also reported by Rao et
al. (21-30yr), Krishnan et al. (15-29yr), Dutta et al. (11-30yr) and Tarazooie et al. (20-30yr). [2],[17],
[20],[21]
In contrast, el-Hefnawi et al.reported highest prevalence in the third and fourth decade of
life. [22] In the study by Akapata et al.it was found that majority of cases occurred during
adolescence. [23] This was believed to be due to hormonal changes and increase in sebum secretion
duing this period. [23]

The most common site of involvement was chest and trunk, followed by back, multiple sites
involving two or more sites, neck, arm and axilla. Similar findings are also noted by Dutta et al.,
Rao et al. and Tarazooie et al.with chest and trunk, back and neck as most commonly involved
sites. Possibly because of the distribution of sebaceous glands is higher in these areas. [2],[20],[21]

The isolation rate of Malassezia species in patients with pityriasis versicolor in the current study
is 70%, which is comparable to that of Kindo et al. (68.57%) from south India. In contrast to our
study it is higher in Chaudhary et al. (96.66%) from central India and Shokoshi et al. (88.4%)
from Iran. [13],[15],[24] The growth on ordinary media like SDA with olive oil appeared after 8 to 10
days of inoculation and growth on special media like MDA appeared early, within 5 days of
inoculation. Preparation of these special media is difficult and they are expensive when compared
to SDA. Use of simple media like SDA overlaid with olive oil for isolation of lipid-
dependent Malassezia species is cost effective and can be used in any routine diagnostic
laboratory. [3]

The distribution of Malassezia species varies with different geographical locations. In the present
study, the most common Malassezia species isolated was M. sympodialis. Kindo et al. from South
India also reports M. sympodialis as the predominant species. [15] Similar reports also available
from other parts of world such as Canada and Indonesia, where they found M. sympodialis as
predominant species in PV. [3],[8],[25] In contrast, Chaudhary et al. from Central India and Dutta et
al., Kaur et al. from North India reported M. globosa as the most common isolate. [4],[13],[20]M.
furfur was the second most frequent species isolated from PV in this study, which is comparable
to Dutta et al. [20] Our study showed M. globosa as third common isolate, which is contrary to
other studies from India which report it as the most common species causing PV. [13],[20] In our
study M. slooffiae was isolated from two (2.86%) cases of PV which is almost similar to
Tarazooie et al. (4%) from Iran; however, none of the other Indian studies have isolated M.
slooffiae from PV. [21] M. globosa and M. restricta are predominant species isolated in non culture
based epidemiological studies. [26]

Distribution of Malassezia species in lesions from different sites of the body showed that M.
sympodialis and M. furfur were more common in lesions on the back, M. globosa from lesions on
the chest and trunk, M. slooffiaewas isolated from chest and trunk and also from lesions on neck
and arms.

In our study, M. sympodialis and M. furur were predominantly isolated from hypopigmented
lesions, whereas M. globosa and M. slooffiae were found to be more common in hyperpigmented
lesions. But this distribution is statistically not significant, may be because of lower sample size.

Use of simple media like SDA overlaid with olive oil for isolation of lipid
dependent Malassezia species is cost effective and can be used in any routine diagnostic
laboratory. [3] Speciation of Malassezia is based on simple biochemical tests such as catalase
reaction, esculin hydrolysis and Tween assimilation. These tests are simple to perform and cost
effective and can be used in routine diagnostic laboratory. Molecular methods such as RFLP
(restriction fragment length polymorphism), nested-PCR (polymerase chain reaction) or PCR-
REA (polymerase chain reaction-restriction endonuclease analysis) are being developed to hasten
the identification process and resolve the difficulty in interpretation of some physiological
patterns. Although molecular techniques are most sensitive methods for identification, they are
expensive and technically demanding. [13]

Penelitian Mengenai Distribusi Spesies Malassezia pada Pasien dengan Pitiriasis Versikolor
di Daerah Kolar, Karnataka
Banur Raju Archana, Paravangada Madappa Beena, Shiva Kumar

Abstrak
Konteks: Pitiriasis versikolor merupakan infeksi jamur superfisial yang bersifat berulang secara
kronis yang disebabkan oleh spesies Malassezia. Barubaru ini spesies ini telah direvisi secara
taksonomi kedalam 14 spesies, yang mana hanya 7 yang telah dipelajari dengan baik terkait
dengan pitiriasis versikolor. Tujuan: Untuk mengidentifikasi spesies Malassezia yang diisolasi
dari pasien penderita pitiriasis versikolor dan untuk menemukan apakah terdapat hubungan antara
spesies dengan tampilan klinis lesi. Setting dan Rancangan Penelitian: Penelitian prospektif
yang terdiri atas 100 kasus yang telah didiagnosis secara klinis sebagai pitiriasis versikolor yang
mendatangi Departemen Rawat Jalan Dermatologi selama periode 1 tahun. Materi dan Metode:
Spesimen klinis dikumpulkan dibawah tindakan aseptik dan diperlakukan kultur pada Agar
Saborraud Dextrose yang dilapisi dengan minyak zaitun (olive oil) dan agar Dixon modifikasi.
Isolat diidentifikasi dengan uji biokimia. Analisis statistik yang digunakan: Analisis statistik
digunakan dengan menggunakan uji proporsi, rerata dan chi-square. Hasil: Dari 100 kasus, 73%
adalah pria, 26% adalah perempuan dan kelompok usia yang mendominasi adalah kelompok usia
21-30 tahun. Dari 100 sampel, 70 sampel menunjukkan adanya pertumbuhan. Isolat yang paling
sering yang ditemukan adalah M.sympodialis (50%), diikuti dengan M.furfur (32.86%),
M.glabrosa (14.28%) dan M.slooffiae (2.86%). Diantara 100 kasus, 74% kasus menunjukkan lesi
hipopigmentasi dan 26% menunjukkan lesi hiperpigmentasi. M.sympodialis dan M.furfur adalah
isolat yang mendominasi lesi hipopigmentasi dan M.globosa dan M.slooffiae ditemukan lebih
sering pada lesi hiperpigmentasi. Kesimpulan: M.sympodialis adalah isolat yang paling sering
ditemukan, diikuti dengan M.furfur, M.globosa dan M.slooffiae. Tidak terdapat perbedaan yang
signifikan dalam hal distribusi spesies yang berbeda pada pasien yang menunjukkan lesi
hipopigmentasi atau hiperpigmentasi.

Kata kunci: Hiperpigmentasi, hipopigmentasi, Malassezia, pitiriasis versikolor

Pendahuluan
Pitiriasis versikolor (PV) adalah infeksi jamur superfisial, yang bersifat berulang secara kronis di
stratum korneum. Lesi ini ditandai dengan makula hipopigmentasi atau hiperpigmentasi irreguler
berskuama, yang paling sering terlihat pada area tubuh yang kaya akan lipid, meliputi badan
bagian atas, leher, wajah, dan aspek atas lengan.[1] Secara klinis, penyakit ini bersifat
asimptomatik, biasanya pasien mencari perhatian medis untuk tujuan kosmetik. [1] Penyakit ini
menyebar di seluruh dunia, meskipun lebih sering ditemukan di daerah tropis (40%) dikarenakan
suhu dan kelembaban yang relatif tinggi.[2],[3],[4]
Agen etiologi dari infeksi permukaan superfisial ini termasuk dalam genus Malassezia.
Malassezia adalah jamur dimorfik lipofilik, yang muncul dalam bentuk ragi pada media kultur
dan dalam bentuk miselium pada lesi di kulit.[5] Jamur ini telah dikenal sebagai anggota flora
normal kulit serta sebagai organisme yang terlibat dengan infeksi kulit superfisial. [6] Dibawah
pengaruh faktor eksogen dan endogen tertentu, ragi komensal ini bertransformasi menjadi bentuk
filamen yang patogen.[7] Flora normal kulit manusia didominasi terutama oleh fase ragi dimana
fase miselium lebih banyak ditemukan di lesi pada kulit.[8] Spesimen patologi terdiri terutama
oleh hifa dengan kelompok ragi yang berbentuk bola yang digambarkan sebagai tampilan
spaghetti and meat ball.[9]

Spesies Malassezia telah dikaitkan dengan berbagai lesi dermatologi seperti pitiriasis versikolor,
dermatitis seboroik, dermatitis atopik, folikulitis pitirosporum, psoriasis, onikomikosis dan
blefaritis. Meskipun umumnya berkaitan dengan infeksi superfisial yang sangat ringan, penyakit
ini muncul sebagai suatu patogen jamur oportunistik pada pasien yang mengalami kelemahan
sistem imunitas dan sebagai patogen nosokomial pada pasien dengan kateter jalur vena sentral,
terutama pada neonatus dengan berat badan lahir rendah yang mendapatkan emulsi lemak.[10]

Saat ini ini genus Malassezia terdiri atas 14 spesies, yaitu M.furfur, M.sympodialis, M.globosa,
M.restricta, M.slooffieae, M.obtutosa, M.dermatitis, M.japonica, dan M.yamatoensis yang terkait
dengan flora normal manusia dan dapat menyebabkan lesi kulit, dan M.pachydermatis, M.nana,
M.equina, M.caprae, dan M. Cuniculi yang terkait dengan hewan.[11,12]
Meskipun terdapat bukti yang menunjukkan bahwa terdapat variasi distribusi geografis spesies
yang berbeda, data di negara kami masih belum tersedia dalam jumlah yang cukup. Oleh karena
itu, penelitian ini dilakukan untuk meneliti distribusi beberapa spesies Malassezia yang berbeda
di Regio Kolar, Karnataka.

Materi dan Metode

Penelitian ini terdiri atas 100 kasus yang didiagnosis PV secara klinis yang diambil dari pasien
yang mendatangi Departemen Dermatologi Rawat Jalan selama jangka waktu 1 tahun di Rumah
Sakit dan Pusat Penelitian R.L. Jalappa, di Kolar, Karnataka. Dilakukan pencatatan terhadap hasil
anamnesis pasien yang dilakukan secara rinci dengan mengacu pada nama, usia, jenis kelamin,
rincian tempat dan keadaan klinis seperti tempat lesi dan apakah lesinya berupa lesi hipo atau
hiperpigmentasi. Semua pasien yang didiagnosis secara klinis sebagai PV dan menunjukkan hasil
yang positif untuk keberadaan ragi pada pemeriksaan sediaan basah KOH (Kalium hidroksida)
diikutsertakan dalam penelitian. Pasienpasien yang telah mendapatkan terapi antijamur topikal
dalam waktu 3 bulan terakhir dan terapi antijamur oral dalam 6 bulan terakhir dieksklusikan dari
penelitian.

Setelah mendapatkan persetujuan, dilakukan pengumpulan hasil kerokan kulit dari area yang
terkena.[10] Sampel-sampel yang menunjukkan tampilan khas spaghetti and meat balls pada
pemeriksaan KOH 10% ditumbuhkan dalam media kultur. Sampel diinokulasikan dalam agar
miring SDA (Agar Sabourad Dextrose) yang dilapisi dengan minyak zaitun steril, dan pada pelat
SDA dan MDA polos atau murni (agar Dixon modifikasi), dan setelah itu semua kultur diinkubasi
pada suhu 32oC. Kultur pada pelat dan agar miring diperiksa setiap hari untuk melihat
pertumbuhan mikroorganisme dan kultur yang menunjukkan hasil negatif dihentikan setelah
inkubasi selama 3 minggu.[4],[13]

Gambaran mofologi seperti pola tunas dan bentuk sel ragi diteliti dengan mengamati sediaan
apusan pewarnaan Gram pada hari kelima setelah koloni terlihat di media kultur. Penentuan
spesies Malassezia dilakukan dengan menggunakan uji katalase, hidrolisis esculin dan asimilasi
dengan agar Tween 20, 40, 60, dan 60.[3], [14,[15],[16]
Analisis statistik dilakukan dengan sarana
deskriptif seperti proporsi dan rerata. Perbedaan proporsi yang teramati didalam kelompok
dibandingkan dengan menggunakan uji Chi square.

Hasil
Dari 100 kasus PV, sebanyak (73%) adalah laki-laki dan (27%) adalah perempuan, dengan
tingginya dominasi laki-laki. Usia pasien penderita PV berkisar dari 15 hingga 60 tahun. Sebagian
besar dari mereka berada dalam kelompok usia 21-30 tahun (57%), diikuti dengan kelompok usia
31-40 tahun (27%), 11-20 tahun (10%), 41-50 tahun (4%) dan 51-60 tahun (2%). Tujuh puluh
empat pasien (74%) menunjukkan lesi hipopigmentasi dan 26 pasien (26%) menunjukkan lesi
hiperpigmentasi.
Distribusi lesi PV pada tempat berbeda di dalam tubuh menunjukkan bahwa dada dan badan
merupakan tempat yang paling sering terlibat (30%), diikuti dengan punggung (27%), beberapa
tempat secara bersamaan (21%) yang mana pasien-pasien ini menunjukkan keterlibatan dua atau
lebih tempat, leher (12%), lengan (8%) dan aksila (2%).

Dari 100 sampel hanya 70 sampel yang menunjukkan adanya pertumbuhan baik pada SDA
dengan minyak zaitun maupun pada MDA. Tidak ada satupun dari sampel yang menunjukkan
adanya pertumbuhan pada SDA polos atau murni. Pertumbuhan pada SDA dengan minyak zaitun
muncul setelah inokulasi selama 8 hingga 10 hari dan pada MDA muncul setelah inokulasi
selama 5 hari.

Dari 70 sampel yang menunjukkan hasil kultur positfif, 35 sampel (50%) adalah M.sympodialis,
23 (32.86%) adalah M.furfur, 10 (14.28%) adalah M.Globosa, dan 2 (2.86%) adalah M.slooffiae.
Isolasi M.sympodialis secara signifikan (p<0.001) lebih tinggi daripada isolasi spesies lainnya.

Distribusi keragaman spesies pada bagian tubuh yang berbeda disajikan dalam [Tabel 1].
M.sympodialis dan M.furfur diisolasi sebagian besar dari lesi yang ditemukan di punggung,
M.globosa dari lesi pada dada dan badan, M.slooffieae diisolasi pada dada dan badan serta dari
lesi di leher dan lengan.

Tabel 1: Isolasi spesies Malassezia dari bagian tubuh yang berbeda

Spesies Tempat (%) Total

 Dada Punggung Beberapa Leher Lengan Axilla
dan tempat
Badan
M.sympodiali 6(17.14) 14(40) 8(22.85) 2(5.71) 5(14.28) - 35
s 5(21.74) 8(34.78) 5(21.74) 5(21.74) - - 23
M.Furfur 6(60) 1(10) 1(10) 1(10) - 1(10) 10
M.globosa 1(50) - 1(50) - - - 2
M.Slooffiae

Dari 70 pasien yang menunjukkan hasil kultur positif, 52 pasien (74.27) memiliki lesi
hipopigmentasi dan 18 pasien (25.71%) memiliki lesi hiperpigmentasi. Keragaman spesies yang
diisolasi berkenaan dengan jenis lesi disajikan dalam [gambar 1]. M.sympodialis dan M.furfur
sebagian besar diisolasi dari lesi hipopigmentasi dan M.glabosa dan M.slooffiae ditemukan lebih
sering pada lesi hiperpigmentasi.

Gambar 1. Distribusi spesies Malassezia pada pasien dengan lesi hipopigmentasi dan
hiperpigmentasi.

PEMBAHASAN
Ragi dari genus Malassezia menyebabkan berbagai lesi kulit, diantara lesilesi ini, PV merupakan
kejadian yang paling sering ditemukan dan terdistribusi di seluruh dunia. [4] Genus Malessezia
telah menjalani beberapa revisi taksonomi. Pada klasifikasi ulangan yang terakhir, sebanyak 14
spesies yang berbeda telah diakui, dari 14 spesies ini, hanya 7 spesies yang telah dipelajari
dengan baik terkait dengan PV.[11],[12]

Insidensi PV lebih tinggi pada laki-laki (73%) dibandingkan pada perempuan (27%). Serupa
dengan penelitian yang kami lakukan, Gosh dkk., Rao dkk. dan Krishnan dkk juga menemukan
dominasi laki-laki berkenaan dengan insidensi penyakit ini.[1],[2],[17] Insidensi pada laki-laki yang
lebih tinggi mungkin disebabkan oleh aktivitas di luar ruangannya yang lebih besar dibandingkan
perempuan.[18]

Lesi hipopigmentasi terlihat pada 74% pasien dan lesi hiperpigmentasi pada 26% pasien. Pada
penelitian lain dari India, Gosh dkk. (81% hipopigmentasi), Rao dkk. (75% hipopigmentasi) dan
Krishan dkk. (84% hipopigmentasi) juga menunjukkan adanya dominasi lesi hipopigmentasi pada
PV.[1],[2],[17] Secara umum, PV diyakini memiliki kecenderungan untuk terlihat berupa lesi
hipopigmentasi pada individu berkulit gelap dan menjadi hiperpigmentasi pada individu berkulit
terang. Namun, Aljabre dkk meneliti perubahan pigmentasi pada pasien-pasien dan
menyimpulkan bahwa PV tidak selalu bersifat hipopigmentasi pada individu berkulit gelap dan
tidak terdapat hubungan antara variasi pigmen dan jenis kulit, jenis kelamin dan usia pasien dan
tempat lesi.[19]

Kejadian PV lebih sering terjadi pada kelompok usia dewasa daripada kelompok usia anak. Pada
orang dewasa penyakit ini ditemukan lebih sering pada kelompok usia 21-30 tahun (57%).
Hubungan ini terbukti signifikan secara statisitik dengan nilai p <0.001. Temuan yang sama juga
dilaporkan oleh Rao dkk. (21-30 tahun), Krishnan dkk (15-29 tahun), Dutta dkk. (11-30 tahun),
dan Tarazooie dkk (20-30 tahun).[2],[17],[20],[21] Sebaliknya, el-hefnawi dkk. melaporkan prevalensi
yang tertinggi pada dekade ketiga dan keempat kehidupan.[22] Dalam penelitian oleh Akapata dkk
ditemukan bahwa sebagian besar kasus terjadi selama masa remaja. [23] Hal ini diyakini disebabkan
oleh perubahan hormonal dan perubahan sekresi sebum selama periode ini. [23] Tempat yang paling
sering terlibat adalah dada dan badan, diikuti dengan punggung, beberapa tempat secara
bersamaan yang melibatkan dua tempat atau lebih, leher, lengan, dan aksila. Temuan yang sama
juga ditekankan oleh Dutta dkk. Rao dkk. dan Tarazooie dkk dengan dada dan badan, punggung
dan leher sebagai tempat yang paling sering terlibat. Hal ini kemungkinan dikarenakan distribusi
kelenjar sebasea lebih tinggi pada area ini.[2],[20],[21]

Angka isolasi spesies Malassezia pada pasien dengan pitiriasis versikolor dalam penelitian ini
adalah 70%, yang sebanding dengan penelitian yang dilakukan oleh Kindo dkk. (68.57%) dari
India Selatan. Berbeda dengan penelitian kami, Chaudhari dkk menemukan angka yang lebih
lebih tinggi (96.66) di India Pusat dan Shokoshi dkk yang menemukan angka sebesar (88.4%) di
Iran.[13],[15],[24] Pertumbuhan pada media biasa seperti SDA dengan minyak zaitun terlihat setelah
inokulasi selama 8 hingga 10 hari dan pertumbuhan pada media khusus seperti MDA muncul
lebih cepat, yaitu setelah inokulasi selama 5 hari. Penyiapan media khusus ini cukup sulit dan
mahal jika dibandingkan dengan SDA. Menggunakan media sederhana seperti SDA yang dilapisi
dengan minyak zaitun untuk isolasi spesies Malassezia yang bergantung pada lipid bersifat hemat
dan dapat digunakan dalam tiap laboratorium diagnostik rutin.[3]

Distribusi spesies Malassezia berbeda-beda sesuai dengan lokasi geografis yang berbeda pula.
Pada penelitian kali ini, spesies Mallasezia yang paling sering diisolasi adalah M.sympodialis.
Kindo dkk dari India selatan juga melaporkan M.sympodialis sebagai spesies yang mendominasi.
[15]
Laporan yang serupa juga ditemukan dari bagian dunia lainnya seperti Kanada dan Indonesia,
dimana mereka menemukan M.sympodialis sebagai spesies yang mendominasi pada PV.[3],[8],[25]
Sebaliknya, Chaudhari dkk dari India Pusat dan Dutta dkk, Kaur dkk dari India Utara melaporkan
M.globosa sebaga isolat yang paling sering ditemukan. [4],[13],[20] M.furfur merupakan isolat kedua
tersering yang terisolasi dari PV dalam penelitian ini, yang sejalan dengan penelitian oleh Dutta
dkk.[20]

Penelitian kami menunjukkan M.globosa sebagai isolat ketiga yang paling sering ditemukan,
yang bertentangan dengan penelitian-penelitian lain dari India yang melaporkannya sebagai
spesies tersering yang menyebab PV.[13],[20] Dalam penelitian kami M.slooffiae berhasil
diisolasikan dari dua sampel (2.86%) PV yang hampir mirip dengan penelitian oleh Tarazooie dkk
(4%) dari Iran; Namun, tidak ada penelitian lain yang dilakukan di India yang telah berhasil
mengisolasikan M.slooffiae dari pasien PV.[21] M.globosa dan M.restricta merupakan spesies yang
paling sering terisolasi pada penelitian epidemiologi yang tidak berbasis kultur.[26]

Distribusi spesies Malassezia pada lesi yang berasal dari bagian tubuh yang berbeda
menunjukkan bahwa M.sympodialis dan M.furfur lebih sering ditemukan pada lesi di punggung,
M.globosa dari lesi di dada dan badan, dan M.slooffieae dapat terisolasi dari lesi yang terdapat di
dada dan badan serta dari lesi yang terdapat di leher dan lengan.

Dalam penelitian kami, M.sympodialis dan M.furfur merupakan spesies yang mendominasi lesi
hipopigmentasi, sementara M.globosa dan M.slooffiae ditemukan lebih sering pada lesi
hiperpigmentasi. Namun distribusi ini secara statistik tidak signifikan, yang mungkin dikarenakan
ukuran sampel yang kecil.

Penggunaan media sederhana seperti SDA yang dilapisi dengan minyak zaitun untuk isolasi
spesies Malassezia yang bergantung terhadap lipid bersifat hemat dan dapat digunakan pada
laboratorium diagnostik rutin.[3] Penentuan spesies Malassezia didasarkan oleh uji biokimia
sederhana seperti reaksi katalase, hidrolisis eskulin, dan asimilasi dengan agar Tween. Uji ini
sangat sederhana untuk dilakukan dan bersifat hemat serta dapat digunakan di laboratorium
diagnostik rutin. Metode hingga tingkat molekuler seperti RFLP (retriction fragment length
polymorphism), nested-PCR (polymerase chain reaction) atau PCR-REA (polymerase chain
reaction-restriction endonuclease analysis) sedang dikembangkan untuk mempercepat proses
identifikasi dan mengatasi kesulitan dalam interpretasi sebagian pola fisiologis. Meskipun teknik
molekuler merupakan metode yang paling sensitif untuk melakukan identifikasi spesies ini,
teknik ini bersifat mahal dan memiliki tuntutan secara teknis.[13]

References
1. Gosh SK, Dey SK, Saha I, Barbhuiya JN, Ghosh A, Roy AK. Pityriosis versicolor: A
clinico-mycological and epidemiological study from a tertiary care hospital. Indian J
Dermatol 2008;53:182-5.
2. Rao GS, Kuruvilla M, Kumar P, Vinod V. Clinicoepidemiological studies on Tinea
versicolor. Indian J Dermatol Venereal Leprol 2002;68:208-9.
3. Erchiga VC, Gueho E. Superficial diseases caused by Malassezia species. In: Merz WG,
Hay RJ, Editors. Topley and Wilson's Microbiology and microbial infections - Medical
Mycology, 10 th ed. London: Edward Arnold; 2005. p. 202-19.
4. Kaur M, Narang T, Bala M, Gupte S, Aggarwal P, Manhas A. Study of the Malassezia
species in patients with pityriasis versicolor and healthy individuals in Tertiary care hospital,
Punjab. Indian J Med Microbiol 2013;31:270-4.
5. Bhattacharyya T, Edward M, Cordery C, Richardson MD. Colonization of living skin
equivalents by Malassezia furfur. Med Mycol 1998;36:15-9.
6. Gueho E, Midgley G, Guillot J. The genus Malassezia with description of four new species.
Antonie Van Leeuwenhoek 1996;69:337-55.
7. Faergemann J. Pityriasis versicolor. SeminDermatol 1993;12:276-9.
8. Gupta AK, Kohli Y. Prevalence of Malassezia species on various body sites in clinically
healthy subjects representing different age groups. Med Mycol 2004;42:35-42.
9. Inamadar AC, Palit A. The genus Malassezia and human disease. Indian J Dermatol
Venereal Leprol 2003;69:265-70.
10. Chander J. Malassezia infections. In: Text book of Medical Mycology, 3 rd ed., New Delhi:
Mehta Publishers; 2009. p. 92-105.
11. Gonzalenz A, Sierra R, Cardens ME, Grajales A, Restrepo S, Gracia MC, et al.
Physiological and molecular characterization of atypical isolates of M furfur. J Clin
Microbiol 2009;47:48-53.
12. Cabanes FJ, Vega S, Castlla G. Malassezia cuniculi sp. Nov., a novel yeast species isolated
from rabbit skin. Med Mycol 2011;49:40-8.
13. Chaudhary R, Singh S, Banerjee T, Tilak R. Prevalence of different Malassezia species in
Central India. Indian J Dermatol Venereol Leprol 2010;76:159-64.
14. Kaneko T, Makimura K, Abe M, Shiota R, Nakamua Y, Kano R, et al. Revised cultue-based
system for identification of Malassezia species. J Clin Microbiol 2007;45:3737-42.
15. Kindo AJ, Sophia SK, Kalyani J, Anandan S. Identification of Malassezia species. Indian J
Med Microbiol 2004;22:179-181.
16. Sohnle PG, Collis-Lech C. Cell-mediated immunity to Pityrosporum orbiculare in
Tineaversicolor. J Clin Invest 1978;62:45-53.
17. Krishnan A, Thapa DM. Mophological and pigmentary variation in tineaversicolor in south
 Indian patients. Indian J Dematol 2003;48:83-6.
18. Vijaya D, Nagarathnamma T, Anand Kumar BH, Rajesh R, Satish N, Savitha G, et al. Study
of Pityriasisversicolor. The Antiseptic 1998;95:133.
19. Aljebre SH, Alzayir AA, Abdulghani M, Osman OO. Pigmentary changes of tineaversicolor
in dark-skinned patients. Int J Dermatol 2001;40:273-5.
20. Dutta S, Bajaj AK, Basu S, Dikshit A. Pityriasis versicolor: Socioeconomic and clinic-
mycologic study in India. Int J Dermatol 2002;41:823-4.
21. Tarazooie B, Kordbacheh P, Zaini F, Zomorodian K, Saadat F, Zeraati H, et al. Study of
distribution of Malassezia species in patients with pityriasisversicolor and healthy
individuals in Tehran, Iran. BMC Dermatol 2004;4:1-6
22. el-Hefnawi H, el-Gothamy Z, Refai M. Studies on pityriasis versicolor in Egypt: I.
Incidence. Mycoses 1971;14:225-231.
23. Akapata LE, Gugnani HC, Utsalo SJ. Pityriasisversicolor in school children in cross river
state of Nigeria. Mycoses 1990;33:549-51.
24. Shokohi T, Afshar P, Barzgar A. Distribution of Malassezia species in pityriasis versicolor in
Northern Iran. Indian J Med Microbiol 2009;27:321-4.
25. Gupta AK, Kohli Y, Faegemann J, Summerbells RC. Epidemiology of Malassezia yeasts
associated with pityriasis versicolor in Ontario, Canada. Med Mycol 2001;39:199-206.
26. Gaitanis G, Magiatis P, Hantschke M, Bassukas ID, Velegraki A. The Malassezia genus in
skin and systemic diseases. ClinMicrobiol Rev 2012;25:106-41.