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Microbiologa
La Microbiologa es una rama de la Biologa que
estudia a los microbios o microorganismos,
organismos microscpicos:
aunque incluyen formas acelulares,
generalmente son unicelulares.
el pequeo tamao que presentan, les permite:
elaborar una gran cantidad de sustancias
con mayor rapidez que en animales y
vegetales.
una mayor facilidad de intercambio de
sustancias con el entorno, lo que se traduce
en una elevada supervivencia.
multiplicarse rpidamente
Microbiologa
PIONEROS DE LA MICROBIOLOGA
Microbiologa
ESTERILIZACIN
Es la condicin de estar libre de microorganismos en cualquiera de sus
formas puede realizarse por mtodos fsicos y qumicos.
FISICOS QUMICOS
VAPOR A PRESION:
ms utilizado y ms seguro: todo tipo de
material de laboratorio (medios,
instrumental, ropa, etc)
Instrumentos para Medir
Masa
Los instrumentos que se emplea para medir
masas son las BALANZAS.
Existen distintos tipos de balanzas como las
balanzas electrnicas, balanzas de precisin,
balanzas automticas; etc.
Instrumentos para Medir Masa
Balanzas Electrnicas
Ventajas:
Tara automtica
Rpida y fcil uso
Desventajas:
Interferencia por radiacin
electromagntica
Problemas en pesadas de
materiales ferromagnticos
Efecto de flotacin Bouyancy
Esptulas
Se utiliza para tomar muestras de slidos.
Pesada por Diferencia
Pesadas directas
Se tara el envase dnde se aadir el
slido.
Aada el slido directamente al
envase.
Anote el peso o imprima.
Pesada Directa
Pesadas de Material
Lquido
Se tara el envase donde se va a verter el
lquido.
Flama amarilla
describe la
combustin
incompleta.
o Porosidad
Fast- usados para precipitados gelatinosos y precipitados
cristalinos.
Medium- requiere un perodo largo de filtracin pero retiene
partculas pequeas; ms utilizados.
Slow- precipitados bien finos; ejemplo: silica.
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Volumen
Pipeta y Bulbo
Pipeta Volumtrica
Transfiere y mide una
cantidad exacta de
volumen de un lquido.
Pipeta Graduada
Transfiere y mide una
cantidad variable de
volumen de un lquido.
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Instrumentos para Medidas
de Volumen
Rotulacin de una pipeta
Fabricant Temperatura a la
e que se calibr la
Divisiones de pipeta
volumen
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Advertencias al tomar
alcuotas
Nunca llene la pipeta con la boca.
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Buretas
Descargar volmenes variables con
exactitud conocida.
Mayormente utilizada en titulaciones.
Posee una vlvula para liberar solucin.
Precisin Bureta > Precisin Pipeta.
Importante numero de cifras
significativas en la lectura.
Limpieza luego de usar, uso de
lubricantes puede causar contaminacin
y tapones. 44
Buretas
Bureta: descarga un volumen
variable de lquido.
Bureta
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Titulacin utilizando una bureta
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Cepillos
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Microbiologa
ESTERILIZACIN: CALOR HMEDO AUTOCLAVE
Elimina microorganismos
por la desnaturalizacin
de sus protenas.
Para ello intervienen:
Presin, Vaco,
Humedad, Vapor
Saturado y Temperatura.
Etapas de la
Esterilizacin:
Elevacin de temperatura
Exposicin o Esterilizacin
Microbiologa
ESTERILIZACIN: CALOR HMEDO AUTOCLAVE
Vlvula de drenaje
VAPOR DE AGUA
PUERTA
Medio de cultivo
Fuente de calor
121C: 30 min
132-134C: 3 min (vapor
saturado)
Esterilizacin casera de frascos en olla a
presin:
Se llena de agua la olla hasta 1/3 del alto de
lo que se vaya a esterilizar
Se colocan los frascos bien lavados
se tapa la olla y se deja a fuego vivo
Cuando pita se saca el aire para que quede
slo vapor de agua.
Se deja volver a pitar y se baja el calor a
bajo
Se dejan cuentan de este momento en
adelante 15 minutos.
Se puede apagar el fuego y dejar enfriar
antes de sacar el material
Microbiologa
ESTERILIZACIN: CALOR SECO
Radiaciones ionizantes:
Son los rayos X y Gamma, y
los radiostopos Co60 y Cs137
Efectos son letales y
mutagnicos
Muy penetrantes
Radiaciones no ionizantes.
Son los rayos UV
Cambios en el ARN o en
protenas
Poco penetrantes
Material general en el Laboratorio de Microbiolog a.
Asa y Aguja de siembra Esterilizacin del asa de siembra Diferentes tipos de Horno Pasteur
-Calor seco: Se usa para esterilizar material de vidrio debidamente preparado. Las placas Petri de vidrio
se envuelven juntas en papel manila.Tubos de ensayo, probetas y matraces Erlenmeyer se taponan con
algodn graso. Las pipetas se envuelven en papel manila despus de colocar en la boquilla un trocito de
algodn, que acta como filtro impidiendo la contaminacin del material absorbido con los
microorganismos del operador y, a la vez, acta como protector de ste, evitando la llegada del l quido
a la boca.
-Calor hmedo: Autoclave. Se emplea para la esterilizacin de medios de cultivo.
Medio a esterilizar
Embudo
Pinza de sujeccin
Filtro de celulosa
Vacio
Plataforma de vidrio
Medio estril
Microscopio ptico: partes principales. A) Base. B) Fuente
de iluminacin. C) Diafragma. D) Brazo. E) Platina. F)
Macro y Micromtrico. G) Condensador. H) Objetivos. I)
Ocular
Microbiologa
ESTERILIZACIN: AGENTES QUMICOS
DESINFECTANTES MS USADOS:
1. Alcoholes
H 2 O2 )
3. Agentes surfactantes
4. Derivados fenlicos
5. Aldehdos
6. Oxido de etileno
Microbiologa
ESTERILIZACIN: AGENTES QUMICOS
Tratamiento de aguas
Desinfeccin de superficies ambientales en general
Perxido de hidrgeno
Derivados fenlicos
Mecanismo de accin: Alteracin de la membrana y
coagulacin de protenas
Nivel intermedio
Usos:
Descontaminacin ambiental
Antispticos:
Hexaclorofeno
Triclosan
Microbiologa
ESTERILIZACIN: AGENTES QUMICOS
Oxido de etileno
ANTISPTICOS
Clorhexidina
Efecto antiplaca
Triclosn Accin antigingivitis
Hexetidina
Sanguinarina
Fluoruro de estao
Cloruro de cetilpiridonio
Aceites esenciales (timol, eucaliptol)
Microbiologa
PASTEURIZACIN
Tipos:
Generales
Selectivos
colocar el componente
registrar la a pesar
lectura
Disolver con agua destilada: hidratar
disolver
Regular pH: pHmetro
Fraccionamiento de
medio lquido
Fraccionamiento de
medio slido
(en caliente)
Acondicionado
para esterilizar
Esterilizar en autoclave
Siembra Dilucin
Incubacin
Microbiologa
TECNICA DE SIEMBRA POR ESTRIAS
Microbiologa
TECNICA DE SIEMBRA POR ESTRIAS
1. Medios enriquecidos:
sangre para que crezca
Hemofilus.
2. Medios diferenciales:
1. EMB (eosina azul de
metileno vemos los que
aprovechan lactosa de
los que no;
2. medio McConky (rojo
neutro);
3. Medios selectivos:
1. Cristal violeta: slo
crecen Gram-;
2. Maltosa: Slo crecen los
que tengan la enzima
maltasa;
3. Penicilina: slo crecen
eucariotas
Bacterias
HISTORIA
Endospora
Estructura de supervivencia.
Resistente a:
Calor
Disecacin
Radiacin
cidos
Desinfectantes
Qumicos fuertes
Presente en bacterias del suelo
Su descubrimiento ayud al desarrollo de mtodos y
tcnicas adecuadas de esterilizacin
Bacterias
CARACTERISTICAS
Inclusiones celulares
Lugares de almacenaje
Vacuola
Granulos de almidn
TRANSFORMACION
intercambio gentico
producido cuando una
bacteria es capaz de
captar fragmentos de
ADN, de otra bacteria que
se encuentran dispersos
en el medio donde vive.
Bacterias
REPRODUCCIN
CONJUGACIN
una bacteria donadora
F+ transmite a travs de
un puente o pili, un
fragmento de ADN, a otra
bacteria receptora F-. La
bacteria que se llama F+
posee un plsmido,
adems del cromosoma
bacteriano.
Bacterias
REPRODUCCIN
TRANSDUCCIN
Mrfologa
Bacterias
CLASIFICACIN
Morfologa y crecimiento de las colonias
Las colonias son masas visibles de clulas que se forman por divisin de una o varias clulas.
El desarrollo de colonias sobre superficies de agar permite al microbilogo identificar las bacterias porque las especies
forman a menudo colonias con una forma y aspecto caracterstico.
El tamao, forma, textura y color de una colonia es propio de cada organismo.
La morfologa de la colonia de una bacteria puede variar segn el medio en que crezca la bacteria.
Colonias de bacterias
Serratia marcescens
Cultivada en Agar
MaConkey
Pseudomonas aeruginosa
Cultivada en
Agar Tripticasa-soja
Shigella flexneri
Cultivada en
Agar MacConkey
Colonias de Bacillus subtilis que han crecido en
medios con pocos nutrientes
Bacterias
TINCIN
GRAM Bacteria Gram + Bacteria Gram -
Pared celular simple Pared celular
compleja
Capa de Capa de
peptidoglucano peptidoglucano fina
gruesa
No capa externa de Capa externa de
lipopolisacridos lipopolisacridos
Esterilizacin
Destruccin o remocin de todo ser vivo
Desinfeccin
Matanza, inhibicin o remocin de orgasnismos
patognicos
Usualmente en superficies
No es esterilizacin
Sanitacin
Reduccin de poblaciones microbianas a niveles
aceptables de salud pblica
Bacterias
CONTROL DE REPRODUCCIN
Antispticos
Agentes qumicos aplicados a tejido vivo para impedir
crecimiento microbiano.
Desinfectante
Agentes qumicos aplicados sobre superficies para
impedir crecimiento microbiano.
Antibitico
Medicamento que mata o inhibe el crecimiento
bacteriano.
Ejemplo: Penicillina
Estreptomicina
VIRUS
DEFINICIN
Son parsitos intracelulares
obligados que utilizan
metabolismo y reproduccin del
husped.
Poseen una sola hebra de ADN
ARN y una envoltura proteica que
rodea el cido nucleico.
Son metablicamente inertes y
carecen de maquinara para
generar energa o sintetizar
molculas.
Fuera del husped no tienen vida,
sin embargo dentro de la
clula..
VIRUS
CARACTERISTICAS
Keiko Shirai:
Ss una hebra, ds doble hebra
UAM-Iztapalapa
A. Lesiones causadas por virus del mosaico del tabaco
B. Cambios en las hojas de orquidea, causadas por el virus del
mosaico del tabaco.
A B
Fuente: Lim, 1998. Microbiology. Ed. McGraw-Hill, Estados Unidos.
Virus de Animales
Virus que contienen ADN
Parvoviridae N 22 ADN lineal ss Kilham de la
rata
Adenoviridae N 70-90 ADN lineal ds Adenovirus
humano
Iridoviridae N 130-300 ADN lineal ds Tipula
iridescent
Hepadnaviridae E 42 ADN circular Hepatitis B
ds
Papovaviridae N 45-55 ADN circular Polyoma
ds
Herpesviridae E 150-200 ADN lineal ds Herpes
simplex
Poxviridae E 200-390 ADN lineal ds Sarampin
1. Adsorcin
El virus se fija o se adhiere a componentes de la superficie celular que
actan como receptores especficos, por lo tanto un determinado virus slo
puede infectar un nmero limitado de clulas, solamente aquellas que
contengan el receptor especfico para ese virus.
2. Inyeccin del material gentico viral
Despus de la adsorcin, se produce un cambio conformacional en las
protenas de la placa basal, algunas de las cuales tienen actividad
enzimtica y producen un poro en la membrana citoplasmtica de la clula.
La vaina del fago se contrae y el material gentico viral ingresa en la clula,
mientras que el cpsido queda en el exterior.
VIRUS
BACTERIOFAGO T4
3. Replicacin del material gentico viral
El material gentico viral ingresa en una clula contiene bases modificadas que
evitan la degradacin por nucleasas bacterianas. Esta modificacin consiste en la
glicosilacin y/o metilacin de algunas determinadas bases. Para lograr una
efectiva replicacin del genoma viral se deben sintetizar algunas protenas
tempranas que reparan el poro de la membrana citoplasmtica por donde
ingres el genoma viral, degradan el ADN bacteriano lo que proporciona una
fuente de precursores de los genomas virales, evita la sntesis de ARN y
protenas bacterianas y proporciona ribosomas para sntesis de protenas del
fago. La forma de replicacin del genoma viral depende del tipo de material
gentico de la clula huesped, es decir, si contiene ARN o ADN y si es simple o
de doble cadena.
4. Sntesis y ensamble de envolturas proteicas
las protenas de la envoltura (cpsido, vaina, fibras, etc.) son protenas tardas
que se sintetizan despus de iniciada la replicacin del material gentico, la
sntesis de cada componente proteico se realiza separadamente; todas las
protenas de la envoltura se ensamblan para formar una partcula viral capaz de
infectar a otra clula cuando sea liberada.
VIRUS
BACTERIOFAGO T4
Replicacin ARN
a. Virus con una hebra de ARN se replican tomando como templados
ARN.
b. En retrovirus, el ARN viral sirve como templado para la sntesis de
ADN por transcripcin reversa. El ADN es copiado para formar una
doble hebra la cual es transcrita a ARN viral.
LOS PROTOZOOS: amebas, ciliados y flagelados
Animacin de Coanoflagelados
Los flagelados
Masa Volumen
g/mg L/mL
Instrumento Instrumentos
Balanza Probeta
Pipeta
Bureta
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AUTO-EVALUACIN
1. Cual es el instrumento diseado
para medir masa?
Balanza
147
2. Menciona los instrumentos que se
utilizan para calentar.
PROBETA
149
4. Cual instrumento transfiere una
cantidad exacta de volumen?
Pipeta Volumtrica
150
5. Cul instrumento descarga una
cantidad variable de volumen?
Bureta
151
6. Cual es el volumen de la probeta?
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