Introduo aos Mtodos

Espectroanalticos

A radiao eletromagntica e suas

interaes com o meio material
 Radiao Eletromagntica
Forma de energia transmitida atravs do espao a
velocidades
enormes

Princpio da Dualidade

Carter ondulatrio

Carter corpuscular
Radiao Eletromagntica
Carter ondulatrio

Comprimento de onda ()
Amplitude (A)
Perodo (p): s
Freqncia (): s-1 ou Hz
Velocidade (v)
v=
(velocidade da radiao no
vcuo) 2,99792x108 m/s
Freqncia  fonte
(invariante)
Nmero de onda (1/)
 Radiao Eletromagntica

Carter corpuscular

Energia do fton

(E = h; h = 6,63x10-34 J s)
Espectro Eletromagntico
Espectro Eletromagntico
Interaes da RE com a matria

Difrao, Transmisso, Reflexo,

Espalhamento, Polarizao

Absoro e Emisso da Radiao

Postulados da teoria quntica

M + h  M*
Emisso de Radiao
Absoro de Radiao
 Aspectos Quantitativos da
Absoro de Radiao
Radiao absorvida X Concentrao
b

Po P
c

Transmitncia (T): T %= P/Po x 100

Absorbncia (A): A = -log T

Lei de Beer (Lei de Lambert-Beer):A = abc

b= comprimento do percurso ptico, cm
c= concentrao, g L-1 , mol L-1
a= constante de proporcionalidade (absortividade), L g-1 cm-1,
L mol-1 cm-1 ( absortividade molar)
 Detalhamento da lei

Dentro de uma camada infinitesimal a diminuio de energia

(dP) proporcional energia incidente (P), concentrao
das espcies (c) e a espessura da seo (dx).


dP = - kPc.dx ou


=

- = - =

= ou log =

= =
Lei de Beer

Aditividade das Absorbncias

Absortividade:

varivel intensiva

depende do comprimento da radiao, do

ndice de refrao; da temperatura e da
composio da soluo;
Limitaes da Lei de Beer

Relao linear entre A e
concentrao:
Desvios Reais:;
Lei limite (c<0,01 mol/L)
capacidade de absoro da espcie.
Desvios
Desvios Aparentes:
*Desvios Qumicos:
Espcie em equilbrio; polimerizao
*Desvios Instrumentais:
Radiao monocromtica
 Espectro de Absoro

Grfico que estabelece a relao entre a
absorbncia e o comprimento de onda.

Absoro Atmica

Interao com tomos

Espectro de linhas

Absoro Molecular

Interao com espcies moleculares

Espectros de bandas
Diagramas de energia
 Absoro Molecular

Transies
eletrnicas,
vibracionais e
rotacionais

E = Eeletrnica + Evibracional + Erotacional

Medida da Absoro Molecular
 Espectrofotometria de Absoro
Molecular no UV-visvel

Absoro de energia por uma espcie depende do no e
do arranjo dos eltrons presentes nas molculas ou ons
absorventes.

1. eltrons internos
(no contribuem para absoro)
Classificao 2. eltrons ligaes covalentes simples
Dos (ligaes )
Eltrons 3. eltrons no ligantes ( eltrons n)
4. eltrons ligaes covalentes mltiplas
(ligaes )
Absoro de radiao
Absoro de radiao

Transies:

-*:

grande energia; UV-distante (vcuo)

n-*:

requer menor energia (:150-250 nm)

-*

n-*

Menor energia (:200-700 nm)

 Absoro de radiao

Compostos orgnicos
Transies * alta energia (UV) pouco
utilizvel
Metano (C-H) transio em 125 nm
Etano (C-C) transio em 135 nm (fora C-C < C-H E < )

Compostos insaturados com grupos absorventes

Transies *
cromforos ou cromforos conjugados
Compostos orgnicos saturados com heterotomos
Transies ns* ou Transies n*
Grupos Cromforos
 Absoro de radiao

Compostos Inorgnicos
Absoro de Espcies Inorgnicas

1. Transies n  *
NO3- (313 nm) CO32- (217 nm)
Absoro de radiao

Compostos Inorgnicos

Transies n  *

NO3- (313 nm) e CO32- (217 nm)

Complexos Metlicos

Excitao do on metlico

Excitao do ligante

Transferncia de carga
 1. Elementos de Transio

Fe2+

Transies envolvendo
eltrons d
Co2+
Absoro no visvel
Bandas largas e
fortemente influenciadas
pelo ambiente qumico Ni2+

(ligantes, solvente, etc.)

Cu2+
 2. Lantandos e Actindios

Transies UV-Vis envolvendo eltrons f

Orbitais pouco influenciados pelos ligantes
bandas finas e discretas, sem influncia do solvente
 Teoria do campo cristalino desdobramento de energia
dos orbitais d devido formao de complexos (M-ligante)
 3. Absoro de transferncia de carga

Processos com altos valores de

Transio entre um nvel eletrnico de um componente
doador para um nvel de outro componente (receptor) da
mesma molcula

Ex: Fe(SCN)3
transferncia ligante (SCN-) metal (Fe3+)
espcie excitada formada por Fe2+ e SCN
Componentes pticos dos
Instrumentos

Espectrofotometria de Absoro
Molecular UV-visvel
Componentes do Instrumento

Cubetas 1cm

Os materiais pticos
(clulas, janelas, lentes, espelhos e elementos de seleo
de comprimento de onda)
no devem absorver radiao na regio de comprimento de
onda que est sendo investigada.
 Fontes de Radiao
suficientemente intensa e
rendimento constante

Fontes contnuas (a)

emitem radiao com
larga faixa de

Fontes de linhas (b)

abrangem uma regio
muito limitada de
Sero discutidas posteriormente
Fontes Contnuas para a
Espectroscopia ptica
 Fontes Contnuas para absoro
molecular no UV-visvel

Lmpada de Tungstnio/halognio ou
lmpadas de quartzo halgenas:

Permite a operacao com T mais elevadas

Maior intensidade

Opera na regiao UV prximo

Maior tempo de vida

Lmpada de deutrio

Espectro contnuo em toda regiao do UV
 Seletores de comprimento de
onda

restringem a radiao emitida pela fonte

melhoram seletividade e sensibilidade

minimizam os desvios instrumentais na Lei de Beer

Monocromadores: Espectrofotmetros
(prisma ou rede de difrao)

Filtros: Fotmetros
Filtros

Operam atravs
do fenmeno de
absoro de toda
a radiao,
excetuando-se a
radiao de
interesse.

Filtros de
interferncia
(UV-visvel)

Filtros de
absoro
(visvel) so
mais robustos e
de baixo custo
 Monocromadores

Isola banda de muito mais estreita que o
filtro

Fenda de Entrada: produzir o feixe
estreito

Lentes e espelhos: produzir um feixe
paralelo

Elemento dispersante: Prisma ou rede de
difrao

Fenda de sada
Monocromadores

Largura de banda efetiva ou banda de passagem
espectral corresponde a faixa de comprimento de
onda selecionada por um monocromador (1 20 nm)

Tamanho e qualidade do elemento dispersante

Largura das fendas

Distncia focal

Possibilidade de varredura espectral

Maior velocidade das anlises

Monocromadores-Prisma
 Monocromadores-Prisma
 Prisma: separao da radiao por refrao.

 O ndice de refrao depende do

comprimento de onda

 Comprimentos de onda mais curtos so mais

refratados do que comprimentos de onda
maiores
Monocromadores-Rede
Monocromadores-Rede

Disperso da radiao ocorre por
difrao.

Superfcie plana (3-10 cm) polida com

grande nmero (300 2000) de
ranhuras prximas e paralelas.

Redes Echelle, Echellete, Hologrficas

 Monocromadores-Rede

Rede Echellette mais comum

faces de reflexo
relativamente largas

Difrao eficiente

Disperso da radiao linear

ao longo do plano focal
 Monocromadores
Redes X Prisma

disperso da
radiao linear
ao longo de todo o
plano focal

largura da banda
efetiva menor

apresentam poder
de resoluo muito
melhor do o prisma
Detectores/Transdutores

Detectores: dispositivos que indicam a

existncia de algum fenmeno fsico.

Transdutores: dispositivos que

convertem a quantidade detectada em
sinais eltricos.
Detectores/Transdutores

Condies Ideais:

Devem responder rapidamente a baixos nveis de

energia radiante em uma ampla faixa de
comprimento de onda

Devem produzir um sinal eltrico facilmente
amplificado e com baixo nvel de rudo.

Sinal eltrico gerado diretamente proporcional a
potncia radiante do feixe
Tipos de Detectores
Tubos Fotomulplicadores
Espectrofotmetro de feixe simples
Espectrofotmetro de duplo feixe
Espectrofotmetro Multicanal
Aplicaes da
Espectrofotometria UV-visvel

Anlise Qualitativa: mtodo
comparativo, deteco de grupos
cromforos. Complementada com
outras evidncias

O efeito do solvente

O efeito da largura da fenda

O efeito da radiao espria
Aplicaes da
Espectrofotometria UV-visvel

Anlises Quantitativas: ampla aplicabilidade

Desenvolver condies que produzam uma relao
reprodutvel (linear) entre absorbncia e
concentrao do analito.

Seleo do comprimento de onda: max para aumentar a
sensibilidade

Controlar variveis como: natureza do solvente, pH, T,
interferentes, concentrao de eletrlitos.

Realizar a construo de curvas analticas (mtodo normal
de calibrao ou mtodo das adies padres)

Operar em uma faixa de concentrao onde o erro
fotomtrico seja mnimo: 10 a 80% T (1,5 a 0,1 A)
Aplicaes da
Espectrofotometria UV-visvel

Exemplo 1: Uso direto da Lei de Beer

Uma massa de 101.3 mg de um determinado

medicamento foi dissolvida e diluda em balo volumtrico
de 100.0 mL. Da soluo preparada no balo foi retirada
uma alquota de 10,00 mL e diluda em um segundo balo
volumtrico de 100.0 mL. Uma terceira diluio foi
realizada, utilizando-se tambm um fator 1:10. O padro
foi preparado de forma semelhante a amostra, utilizando
100.4 mg. Considerando-se as absorbncias do frmaco e
da amostra como sendo 0.525 e 0.537, respectivamente,
calcule o teor do frmaco na amostra.
Aplicaes da
Espectrofotometria UV-visvel

Exemplo 2: Mtodo da Curva Analtica

Os dados na tabela que se segue foram obtidos durante a

determinao colorimtrica de glicose em soro sanguneo.
Sabendo que uma amostra de soro forneceu uma absorbncia
de 0.350, calcule a concentrao de glicose na amostra.
Concentrao de glicose, Absorbncia, A
mmol.L-1
0.0 0.002
2.0 0.150
4.0 0.294
6.0 0.434
8.0 0.570
10.0 0.704
Aplicaes da
Espectrofotometria UV-visvel

Exemplo 3: Mtodo de Adio Padro de Ponto nico

Uma alquota de 25,00 mL de amostra de uma

soluo aquosa de quinina aps ser diluda para 50.0
mL, gerou um sinal de absorbncia de 0.832 a 348
nm quando medida em uma clula de 2,00 cm. Uma
segunda alquota de 25,0 mL foi misturada com 10,0
mL de uma soluo contendo 23,4 mg.L-1 de quinina,
aps diluio para 50,0 mL, esta soluo gerou uma
absorbncia de 1,220 (em uma clula de 2,0 cm).
Calcule a concentrao em mg.L-1 de quinina na
amostra.
Aplicaes da
Espectrofotometria UV-visvel

Exemplo 4: Mtodo da Curva de Adio Padro

Alquotas de 10.00 mL de uma amostra de gua natural foram

pipetados para frascos de 50,00 mL. Exatamente 0.00; 5.00;
10.00; 15.00 e 20.00 mL de uma soluo padro contendo 11,1
mg/L de Fe3+ foram adicionados em cada frasco seguidos da
adio de um excesso de on tiocianato para formar formar o
complexo Fe(SCN)2+. Aps completar-se o volume, as
absorbncias das 5 solues foram medidas em um fotmetro
equipado com filtro verde sendo encontrados os seguintes
valores: 0.240; 0.437; 0.621; 0.809 e 1.009, respectivamente.
Calcule a concentrao de ferro na amostra de gua.
 Aplicaes da
Espectrofotometria UV-visvel
ANLISE DE MISTURAS

quando existe mais de uma espcie absorvedora (X,Y,Z)

soma das absorbncias das vrias espcies

A = xb[X] + Yb[Y] + zb[Z] + ...

Aplicaes da
Espectrofotometria UV-visvel

Exemplo 5: Anlise de misturas

Paldio e ouro podem ser determinados simultaneamente pela

reao com metiomeprazina (C19H24N2S2). O mximo de
absoro para paldio ocorre em 480nm, enquanto que para o
complexo de Au est a 635 nm. Os dados de absortividade
nesses comprimentos de onda so:
Complexo de Pd: 3,55x103 (480nm) e 5,64x102 (635nm)
Complexo de Au: 2,96x103 (480nm) e 1,45x104 (635 nm)
Uma amostra de 25,0 mL foi tratada com excesso de
metiomeprazina e subseqentemente diluda para 50,0 mL.
Calcular as concentraes molares de Pd e Au na amostra, se a
soluo diluda apresentar uma absorbncia de 0,533 a 480 nm
e 0,590 a 635 nm.
Aplicaes da
Espectrofotometria UV-visvel
Titulaes Fotomtricas

Ex.:S2O32-/I3-
Ex.: I-/IO3-
Aplicaes da
Espectrofotometria UV-visvel

Exemplo 6: Titulao fotomtrica.

Desenhe uma curva de titulao

fotomtrica de Sn2+ com MnO4-. A
radiao empregada nessa titulao
deve ser de qual cor? Explique.
Cuidados Prticos

Diluies

Calibrao do aparelho

Branco

Uso das cubetas

Caractersticas Gerais da
Espectrofotometria UV-visvel

Ampla aplicabilidade

Alta sensibilidade: baixos LD (10-4 a 10-5
mol/L)

Seletividade moderada a alta: eliminao
prvia do interferente desnecessria.

Boa exatido: 1 a 5%

Facilidade e convenincia: rapidez,
segurana, baixo custo.

Necessidade de padres de referncia:
desvios da lei de Beer.