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Farmacognosia I PRACCA N4 UNMSM | 2017

Tamizaje Fitoqumico

Alvarado, Fernanda1; Granados, Linsay1; Ortiz, Antonieta1; Rojas Candia, Giordano1

Gorriti-Gutirrez, Arilm2; Crdova-Rivera, Augusta2; Retuerto-Figueroa, Mnica2, Sixto Gonzlez


Elera, Soto Huaringa, Karina2
1
Alumnos de la Facultad de Farmacia y Bioqumica, UNMSM
2
Docentes de la ctedra de Farmacognosia y Medicina Tradicional

RESUMEN

Los metabolitos secundarios son subproductos de rutas metablicas normales que ocurren en ciertas
especies, siendo particulares dentro de un grupo taxonmico, estado de vida o tejido presentando una
distribucin restringida dentro del Reino Vegetal dando origen a la quimio taxonoma. El
reconocimiento de metabolitos secundarios se realiza por medio de pruebas fotoqumicas preliminares,
las cuales son una prueba qumica de caracterizacin consistente en una reaccin qumica que produce
alteracin rpida en la estructura molecular de un compuesto. Entre las diferentes pruebas para
azucares (Mollish, Antrona, Fheling), flavonoides y taninos (shinoda, Rosenheim, cloruro frrico,
gelatina), Antraquinonas y triterpenoides (Bomtranger, Liberman Burchardat), Aminoacidos
(Nihidrina), Alcaloides (Dragendorff, Mayer, Bertrand, Sonnenschein), GLICOSIDOS
(Hidroxilamina), Saponimas, Cumarinas (Vainillin); El tamizaje fitoqumico en los frutos (almendras)
de Euterpe precatoria se obtuvo resultados positivo para Alcaloides (Dragendorff), azucares
reductores (Fehling), Fenoles (cloruro frrico), Flavonoides (Shinoda), Glicsidos (Molish); segn
Sotero debi dar un resultado leve para saponinas (en nuestro caso no se dio, pero esto se explica ya
que el mtodo decosin no es el adecuado generando falsos positivos como es el caso de la
reaccin de Mayer y Dragendorff). 4
Palabras clave: Tamizaje fitoqumico, Euterpe precatoria
ABSTRACT

Secondary metabolites are byproducts of normal metabolic pathways that occur in certain species,
being particular within a taxonomic group, state of life or tissue presenting a restricted distribution
within the Plant Kingdom giving rise to chemo taxonomy. The recognition of secondary metabolites is
performed by means of preliminary photochemical tests, which are a chemical characterization test
consisting of a chemical reaction that produces a rapid alteration in the molecular structure of a
compound. Among the different tests for sugars (Mollish, Antrona, Fheling), flavonoids and tannins
(shinoda, Rosenheim, ferric chloride, gelatin), Anthraquinones and triterpenoids (Bomtranger,
Liberman Burchardat), Aminoacids (Nihidrina), Alkaloids (Dragendorff, Mayer, Bertrand ,
Sonnenschein), GLICOSIDOS (Hydroxylamine), Saponimas, Coumarins (Vainillin); Phytochemical
screening in Euterpe precatoria fruits produced positive results for Alkaloids (Dragendorff), reducing
sugars (Fehling), Phenols (ferric chloride), Flavonoids (Shinoda), Glycosides (Molish); According to
Sotero should have given a slight result for saponins (in our case was not given, but this is explained
since the '' decosin '' method is not appropriate generating false positives as is the case of the Mayer
and Dragendorff reaction).

Keywords: Phytochemical screening, Euterpe precatoria


ciertas especies, siendo particulares dentro de
I. INTRODUCCIN un grupo taxonmico, estado de vida o tejido
presentando una distribucin restringida
dentro del Reino Vegetal dando origen a la
Los metabolitos secundarios son subproductos quimio taxonoma. Su ocurrencia depende de
de rutas metablicas normales que ocurren en condiciones externas tales como ataques de

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patgenos, predadores, cambios trmicos o Por el mtodo de decoccin se hirvi


lumnicos, deficiencias nutricionales o agua 100C y luego se verti las
presencia de otros organismos intra o semillas trituradas, luego se hace
interespecficos. El metabolismo secundario hervir durante 5min, despus se enfra
es una caracterstica fundamental de la
y por ltimo se filtra el lquido.
especializacin, es decir que el compuesto
resultante, puede no ser importante para la MARCHA FITOQUMICO
clula pero s para el organismo como un
todo. Los metabolitos secundarios pueden ser ANALISIS PRELIMINAR DE
bioactivos, pero no jugar un papel esencial en AZUCARES
los procesos fisiolgicos del organismo.
Prueba de Mollish: agregar 0.5 ml de
Algunos metabolitos secundarios son
residuos bioqumicos, es decir, productos de M.P. + V gotas de reactivo de Mollish
actividad enzimtica de substratos no A (afta naftol) + X 10 gotas de
apropiados o productos de Destoxificacin o reactivo Mollish B (H2SO4)
desecho de importancia para la supervivencia (reaccin positiva: amarillo violeta
y la buena condicin de los organismos. Con en la interfase, presencia de
pocas excepciones, los metabolitos carbohidratos).
secundarios pueden clasificados dentro de Prueba de antrona: agregar 0.5 ml de
cinco grupos, de acuerdo con su base M.P. + V gotas de reactivo de Antrona
biosintticas: fenilpropanos, acetogeninas, (reaccin positiva: anillo verde
terpenoides, esteroides y alcaloides.1 azulado en la interfase, presencia de
El reconocimiento de metabolitos secundarios carbohidratos).
se realiza por medio de pruebas fitoqumicas Prueba de Fehling: agregar 0.5 ml de
preliminares, las cuales son una prueba M.P. + V gotas de reactivo de Fehling
qumica de caracterizacin consistente en una A + V gotas de reactivo de Fehling
reaccin qumica que produce alteracin B y colocarlo en un bao Mara por
rpida en la estructura molecular de un 10 min. (Reaccin positiva:
compuesto, por ejemplo, la modificacin de precipitado rojo ladrillo, presencia de
un grupo funcional, la apertura de un sistema azucares reductores)
anular, la formacin de un aducto o un
complejo, lo cual da por resultado una ANALISIS PRELIMINAR DE
manifestacin sensible como el cambio de un FLAVONOIDES Y TANINOS
color, la formacin de un precipitado o el
desprendimiento de un gas, dndonos indicios Prueba de Shinoda : agregar 0.5 ml de
de la presencia o ausencia de un metabolito M.P. + mg de Mg metlico + III gotas
secundario en particular.2 de reactivo de HCl cc (reaccin
positiva : coloracin roja a salmn ,
presencia de flavanoles, flavonas,
II. PARTE EXPERIMENTAL
flavononoles, y flavononas ;
METODOLOGA coloracin amarilla indica presencia
Se pes 20 gramos de semillas de de isoflavonas; isoflavononas,
Euterpe Petrarca previamente lavadas. catequinas, auronas, y chalconas no
dan reaccin )
Reduccin de tamao de partcula Prueba de Rosenheim: agregar 0.5 ml
de M.P. + III gotas de reactivo de
Se procedi a triturar las semillas en
Rosenheim (reaccin positiva:
un molino de cuchillas
precipitado rojo pardo, presencia de
Preparacin del extracto flavonoides cateticos y antocianinas)

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Prueba de cloruro frrico: agregar 0.5 Prueba de Mayer: agregar 0.5 ml de


ml de M.P. + III gotas de reactivo de M.P. + V gotas de HCl 10% + V gotas
FeCl3 (reaccin positiva: coloracin de reactivo de Mayer (reaccin
verde es predominio de flavonoides; positiva: precipitado blanco)
coloracin azul es predominio de Prueba de Bertrand: agregar 0.5 ml de
taninos) M.P. + V gotas de HCl 10% + V gotas
Prueba de gelatina: agregar 0.5 ml de de reactivo de Bertrand (reaccin
M.P. + III gotas de reactivo de positiva: precipitado blanco lechoso)
Gelatina (reaccin positiva: Prueba de Sonnenschein: agregar 0.5
precipitado blanco lechoso, presencia ml de M.P. + V gotas de HCl 10% + V
de taninos). gotas de reactivo de Bertrand
(reaccin positiva: precipitado verde
ANALISIS PRELIMINAR DE azulado)
ANTRAQUINONAS Y
TRITERPENOIDES PRUEBA PRELIMINAR DE
GLICOSIDOS
Prueba de Borntranger: agregar 0.5 ml
de M.P. + III gotas de reactivo de Prueba de Hidroxilamina: agregar 0.5
Borntranger (reaccin positiva ml de M.P. + III gotas de reactivo de
coloracin rojiza, presencia de Hidroxilamina (reaccin positiva:
antraquinonas) precipitado rojiza)
prueba de Lieberman Burchardat :
agregar 0.5 ml de M.P. + X gotas de PRUEBA PRELIMINAR DE
reactivo de Lieberman Burchardat SAPONINAS
A (cloroformo ) + X gotas de Prueba de saponinas: agregar 0.5 ml
reactivo de Lieberman Burchardat de M.P. + ml de agua destilada, agitar
B (anhdrido actico ) + gotas vigorosamente el tubo por 15
reactivo de Lieberman Burchardat segundos y dejar en reposo por 1 min
C (H2SO4) (reaccin positiva : (reaccin positiva: formacin de
coloracin verde azulada es espuma por ms de 1 cm y sea
predominio de esteroides , coloracin resistente)
pardo anaranjado es predominio de
triterpenoides) PRUEBA PRELIMINAR DE
CUMARINAS
ANALISIS PRELIMINAR DE
AMINOACIDOS Prueba de vainillin sulfrico: agregar 0.5 ml
de M.P. + V gotas de reactivo de vainillin
Prueba de Nihidrina: agregar 0.5 ml sulfrico A (vainillin) + X gotas de
de M.P. + V gotas de reactivo de reactivo vainillin sulfricoB (H2SO4)
Ninhidrina (reaccin positiva: (reaccin positiva: anillo rojo pardo en la
coloracin violeta) interfase)

III. RESULTADOS
ANALISIS PRELIMINAR DE
ALCALOIDES
Prueba Reaccin positiva Resultado
Prueba de Dragendorff: agregar 0.5 Prueba de Anillo violeta en +
ml de M.P. + V gotas de HCl 10% + V Molish la interface
Prueba de Anillo verde +
gotas de reactivo de Dragendorff
Antrona azulado en la
(reaccin positiva: precipitado
interface
naranja)

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Prueba de Precipitado rojo + en una planta y, a partir de all, orientar la


Fehling ladrillo extraccin y/o fraccionamiento de los
Prueba de Coloracin verde + extractos para el aislamiento de los grupos de
FeCl3 (flavonoides) mayor inters.3 El tamizaje fitoqumico
Coloracin azul consiste en la extraccin de la planta con
(taninos) solventes apropiados y la aplicacin de
Prueba de Precipitado + reacciones de coloracin, el uso de distintos
Gelatina blanco lechoso mtodos de extraccin con distintos solventes
Prueba de Coloracin roja a ++ de extracciones pueden afectar los resultados
Shinoda salmn de identificacin en nuestro tamizaje, por
Prueba de Precipitado rojo + ejemplo en un estudio de Tamizaje
Rosenhei pardo fitoqumico, actividad antiinflamatoria y
m toxicidad aguda de extractos de hojas de
Prueba de Coloracin rojiza + Annona squamosa L. se prepar una
Bomtrage decoccin al 30 % (30 g de hojas frescas
r picadas finamente en 100 mL de agua
Prueba de Coloracin verde ++ destilada), en ebullicin, durante 5 min, en
Liberman o azulada recipiente de cristal tapado y un extracto
- (esteroides) fluido de hojas secas con etanol al 30 %
Burchard Coloracin pardo mediante el mtodo de repercolacin donde se
at anaranjado encontraron diferencias en la composicin de
(triterpenoides) ambos siendo los compuestos fenlicos,
Prueba de Coloracin - cumarinas y compuestos lactnicos,
Ninhidrin violeta aminocidos y azcares reductores comunes
a en ambos, pero el extracto fluido present
Prueba de Precipitado + adems flavonoides, quinonas y
Dragendo naranja antocianidinas en su composicin. Esta
rff diferencia pudiera explicarse, principalmente
Prueba de Precipitado + por la desigualdad de polaridad del etanol al
Mayer blanco 30 % respecto al agua; as como, a que el
Prueba de Precipitado + extracto fluido, preparado por repercolacin,
Bertrand lechoso blanco tiene mayor poder extractivo que la decoccin
Prueba de Precipitado verde + o a que en sta las concentraciones presentes
Sonnensc azulado no fueron suficientes para ser identificadas
hein por los mtodos cualitativos de Shinoda para
Prueba de Precipitacin + flavonoides, de Bortrager para quinonas y
Hidroxila rojiza de Rosemhein para las antocianidinas.4
mina
Prueba de Formacin de - El tamizaje fitoqumico en los frutos
Saponinas espuma por ms (almendras) de Euterpe precatoria se obtuvo
de 1 minuto resultados positivo para Alcaloides
Prueba de Anillo rojo pardo +++ (Dragendorff), azucares reductores (Fehling),
Vainillin- en la interface Fenoles (cloruro frrico), Flavonoides
sulfurico (Shinoda), Glicsidos (Molish); segn Sotero
debi dar un resultado leve para saponinas (en
nuestro caso no se dio, pero esto se explica ya
IV. DISCUSIN que el mtodo decosin no es el adecuado
El tamizaje fitoqumico o screening generando falsos positivos como es el caso de
fitoqumico es una de las etapas iniciales de la la reaccin de Mayer y Dragendorff). 5
investigacin fitoqumica, que permite
determinar cualitativamente los principales Los frutos maduros son cosechados y
grupos de constituyentes qumicos presentes consumidos crudos y/o cocidos, tambin son
utilizados para la preparacin de bebidas y la

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extraccin de aceite, el extracto de los frutos Disponible en:


es utilizado contra la malaria.6 http://scielo.sld.cu/scielo.php?
script=sci_arttext&pid=S1028-
V. CONCLUSIONES 47962006000100002
5. Balslev H. Grandez C. Paniagua N.
De acuerdo al tamizaje fitoqumico de se
Palmas ( Areacaceae) tiles enlos
observ que destacan las siguientes familias
qumicas: Triterpenos y esteroides, azucares alrededores de Iquitos, Amazonia
reductores, fenoles y flavonoides. Peruana. Rev. peru. biol. 15(suppl.
1): 121- 132 (November 2008)
VI. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS 6. Sotero V. Maco M. Caracterizacin
qumica y evaluzacion antioxidantes
1. Domnguez A. Xorge. 1979 Mtodos de frutos y races de Euterpe oleracea
de Investigacin Fitoqumica. y Euterpe precatoria. Rev Soc Qum
Editorial Limusa, Mxico. Per. 79 (3) 2013
2. Evans, W. C. "Farmacognosia. Trease-
Evans". 13a Ed. Interamericana
McGraw Hill,Madrid-Auckland-
Bogot, 1991.
3. Sharapin N. Fundamento de
tegnologa de productos
fitoteraputicos. 1era ed. Bogota:
COOPERACIN
IBEROAMERICANA; 2000.
4. Tamizaje fitoqumico, actividad
antiinflamatoria y toxicidad aguda de
extractos de hojas de Annona
squamosa L. Victoria Amador M.

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