DETERMINACIN DE INGREDIENTE ACTIVO EN PLAGUICIDAS UTILIZANDO LA TECNICA DE

CROMATOGRAFIA GAS-LIQUIDO (CGL)

OBJETIVO

Describir el procedimiento para la determinacin cuantitativa de ingredientes activos en plaguicidas, ya sea por
el mtodo de estndar interno o externo, mediante la tcnica de Cromatografa gas - lquido (CGL).

1. DESCRIPCIN

El personal a cargo de la implementacin del mtodo debe estar familiarizado con conocimientos
bsicos de Qumica Analtica cualitativa y cuantitativa en el campo de la Cromatografa y
conocimientos de instrumental de Cromatografa gas-lquido (CGL). As mismo debe conocer las
medidas indicadas en las fichas de Seguridad, tanto de los productos, solventes y otras sustancias
qumicas involucradas en el procedimiento y usar los elementos de proteccin (EPP) indicados.

La CGL es una tcnica en que la muestra se volatiliza y se inyecta en la cabeza de una columna
cromatogrfica. La elucin se produce por el flujo de una fase mvil de gas inerte el cual transporta el
analito a travs de la columna con una fase estacionaria determinada. La CGL utiliza como fase
estacionaria molculas de lquido inmovilizadas sobre la superficie de un slido inerte. La identificacin
y cuantificacin del analito se realiza por la comparacin de los tiempos de retencin en la columna de
los estndares y analitos utilizados y por la relacin de integracin de las reas de los picos
cromatogrficos obtenidos de los mismos.

Un cromatgrafo de gases consta de diversos componentes bsicos como el gas portador, el sistema
de inyeccin de muestra, la columna (dentro de un horno), el detector y el sistema de integracin y
registro de datos.

2. ALCANCE

Este procedimiento es aplicable para la determinacin de ingredientes activos por CGL en material
tcnico y formulaciones comerciales de plaguicidas comerciales que los contengan.

Las condiciones analticas y los ingredientes activos analizados bajo este mtodo son relacionados en
las tablas 1 y 2 de los anexos.

3. DEFINICIONES

Cabeza de columna: Espacio del inyector donde se produce la vaporizacin instantnea de la

muestra y su introduccin a la corriente del gas de arrastre.

Estndar: Sustancia patrn de comparacin con concentracin, composicin y pureza conocida, que
permite la identificacin cualitativa y cuantitativa de un analito desconocido.

Tiempo de retencin: Es el tiempo transcurrido desde la inyeccin de un compuesto hasta la

aparicin del mximo correspondiente al pico cromatogrfico de ese compuesto.

4. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS

4.1. Materiales.

Balones volumtricos de 25 mL
Columna capilar (tipo BP1; BP5; BPX50)
 Membrana para filtracin de solventes 0,45 m
Viales para inyeccin automtica de 1.5 mL de capacidad dotados de tapa y septo, a la medida
del Rack del auto muestreador. (Equipo SHIMADZU).
Microjeringa de 10 L graduada.

4.2. Reactivos.

Metanol grado cromatogrfico

Acetona grado cromatogrfico
Cloroformo grado cromatogrfico
Diclorometano grado cromatogrfico
Acetato de Etilo grado cromatogrfico
Hexano grado cromatogrfico
2-propanol grado cromatogrfico
Estndar analtico del ingrediente activo de pureza conocida
DBFT: Dibutilftalato; DMFT: Dimetilftalato; DCHFT: Diciclohexilftalato.

4.3. Equipos

Balanza analtica.
Cromatgrafo de gases Shimadzu GC 2010, equipado con detector de ionizacin de llama
(FID).
Bao ultrasnico.

5. PROCEDIMIENTO

5.1. Preparacin del estndar interno.

En un baln volumtrico pesar las cantidades necesarias para prepara una solucin al 1% de estndar
interno y diluir con metanol hasta volumen. Dependiendo del ingrediente activo se establece el patrn
interno a utilizar, (ver Tabla No.2 anexos).

5.2. Preparacin del estndar de plaguicida.

En balones volumtricos de 10 o 25 ml pesar las cantidades necesarias para preparar soluciones

estndar y diluir con solvente hasta volumen, se garantiza su completa disolucin con la ayuda del
bao ultrasnico. (Dependiendo del ingrediente activo se establece el rango de concentraciones y el
solvente adecuado, ver Tabla No.2 anexos)

NOTA: SI EL PROCEDIMIENTO SE REALIZA CON ESTANDAR INTERNO, A TODAS LAS

SOLUCIONES SE LES DEBE ADICIONAR LA MISMA CANTIDAD DE LA SOLUCION AL 1% DE
ESTANDAR INTERNO ANTES DE LLEVAR A VOLUMEN.

5.3. Preparacin de la muestra.

Pesar en la balanza analtica la muestra en balones volumtricos de 10 o 25 ml, teniendo en cuenta

que la concentracin final de la solucin se debe encontrar en el rango medio de las concentraciones
de los estndares preparados segn el ingrediente activo, (ver Tabla No.2 anexos), diluir con el
solvente adecuado y llevar a volumen, se garantiza su completa disolucin con la ayuda del bao
ultrasnico.

NOTA: SI EL PROCEDIMIENTO SE REALIZA CON ESTANDAR INTERNO, A TODAS LAS

SOLUCIONES SE LES DEBE ADICIONAR LA MISMA CANTIDAD DE LA SOLUCION AL 1% DE
ESTANDAR INTERNO ANTES DE LLEVAR A VOLUMEN.
 5.4. Condiciones del equipo y corrida cromatogrfica.

Verificar las presiones de entrada al equipo (manmetros) y girar las llaves para dar paso a los gases
nitrgeno, hidrogeno y aire. Encender el Cromatgrafo y seguido el computador. Dar inicio a la
aplicacin GC SOLUTION, un sonido indicara que se ha establecido la comunicacin entre el software
y el Cromatgrafo de gases. Establecer las condiciones de la corrida cromatogrfica en el Sistema de
Datos de Cromatografa GC SOLUTION SHIMADZU 2004, en su aplicacin GC Real Time Analysis
segn los datos consignados en la tabla N 2 de los anexos.

Bajo estas condiciones previas a la inyeccin, debe permitirse que el sistema cromatogrfico se
estabilice (presin y flujo constantes), lo que origina una lnea base estable.

Posteriormente se debe verificar la conformidad del sistema, se debe observar que la respuesta del
blanco (solvente de los estndares y de la muestra) no interfiera con la seal correspondiente al
tiempo de retencin del analito.

Se debe inyectar una muestra a fin de verificar la selectividad del sistema, es decir, que no exista
ninguna otra seal debida o otros ingredientes de la muestra a fin de que no interfieran con la seal
correspondiente al tiempo de retencin del ingrediente activo. (ver tabla N 2 del anexo).

Una vez verificada la selectividad del sistema introducir los datos de concentracin de los estndares,
peso de las muestras y factor de dilucin utilizados en la preparacin de las soluciones en el Sistema
de Datos de Cromatografa GC SOLUTION SHIMADZU 2004, en su aplicacin GC Real Time Analysis
y realizar la corrida cromatogrfica.

6. RESULTADOS Y ANALISIS

Los resultados por duplicado obtenidos en el anlisis no deben generar ms de un 3% de error relativo,
de lo contrario, se debe efectuar al menos una tercera determinacin.
La cuantificacin se realiza mediante la interpolacin del rea de la seal cromatogrfica
correspondiente al tiempo de retencin del ingrediente activo en la muestra, en la curva de calibracin
obtenida con los estndares. Estos resultados son dados por el Sistema de Datos de Cromatografa
GC SOLUTION SHIMADZU 2004, en su aplicacin GC Postrum en la generacin del reporte.

7. FORMAS

Consignar los datos correspondientes al proceso en cada uno de los formatos siguientes, esta
operacin se debe realizar en forma simultnea al proceso:

Control de uso de estndares de plaguicidas. FORMATO 3-202. VERSION 01.2009.

Seguimiento a soluciones de estndares. FORMATO 3-482. VERSION 01.2009.
Determinacin de densidad. FORMATO 3-205. VERSION 01.2009.
Hoja de clculos. FORMATO 3-739. VERSION 01.2009.
Determinacin de ingrediente activo por cromatografa de gases (CGL). FORMATO 3-726.
VERSION 01.2009.

8. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

Mtodo suministrado por el fabricante del producto.

CIPAC-handbook. Analysis of Technical Formulated Pesticides.

AOAC, 17th Edition.

 Manual de operacin del Cromatgrafo de gases GC 2010 Shimadzu.
9. ANEXOS

Tabla No.1 Condiciones Generales de los Equipos para Cromatografa de Gases

Flujo Gas de
Volumen de Flujo Flujo
Detector Columnas Split arrastre:
inyeccin Hidrogeno Aire
Nitrgeno
400
FID BP1; BP5; BPX50; 1L 10 1.0 ml/min 40 ml/min
ml/min

Tabla No.2 Condiciones Para Cromatografa de Gases

Concentracin Estndar Tr T T T
I. A. Solvente Tr (I.A.) E. I Columna
Interno (E.I.) (E.I) Columna inyector detector
Acibenzolar 1,8
Metanol BP-5 240 260 260
S- Metil 2,5
Ametrina Metanol 5,93 DCHFT 0,8 mL al 1% y se lleva a 25 mL 2,90 BP-5 300 320 330
Amitraz Metanol 1,99 DCHFT 0,8 mL al 1% y se lleva a 25 mL 3,32 BP-5 290 320 330
Metanol 2,12 DCHFT 2,5mL al 1% y se lleva a 25 mL 5,60 BP-5 260 310 320
Atrazina
Metanol 2,12 DBFT 2,5 mL al 1% y se lleva a 25 mL 2,46 BP-5 260 290 300
Azoxystrobin Metanol 5,93 DCHFT 0,8 mL al 1% y se lleva a 25 mL 2,90 BP-5 300 320 330
Benalaxil Metanol 3,12 DCHFT 1,7 mL al 1% y se lleva a 25 mL 3,49 BP-1 310 330 340
Bitertanol Metanol 3,99 DCHFT 1,7 mL al 1% y se lleva a 25 mL 3,50 BP-1 300 330 340
Buprofexin Metanol 3,07 DBFT 0,8 mL al 1% y se lleva a 25 mL 2,33 BP-5 270 300 310
Butaclor Metanol 3,46 DBFT 1,7 mL al 1% y se lleva a 25 mL 2,67 BP-5 250 280 290
Cadusafos Metanol 2,85 DMFT 2,5 mL al 1% y se lleva a 25 mL 2,19 BP-5 220 250 260
Captan Metanol 3,06 DBFT 0,8 mL al 1% y se lleva a 25 mL 2,46 BP-5 260 290 300
Carbofurano Metanol 2,67 DBFT 0,8 mL al 1% y se lleva a 25 mL 3,57 BP-5 230 260 270
Carbosulfan Metanol 3,31 DCHFT 1,7 mL al 1% y se lleva a 25 mL 3,52 BP-1 305 320 330
Carboxim Metanol 3,09 DBFT 0,8 mL al 1% y se lleva a 25 mL 2,27 BP-5 270 300 310
Carfentrazone
Metanol 2,70 BP-5 290 300 310
Etil
Cicloxidim Metanol 3,91 DBFT 0,8 mL al 1% y se lleva a 25 mL 3,48 BP-1 310 330 340
Clomazone Metanol 2,30 DBFT 3,3 mL al 1% y se lleva a 25 mL 2,72 BP-5 250 280 290
Clorotalonil Metanol 2,78 DBFT 0,8 mL al 1% y se lleva a 25 mL 3,07 BP-5 240 270 280
Clorpirifos Metanol 2,85 DMFT 0,2 mL al 1% y se lleva a 25 mL 1,82 BP-5 250 280 290
Cyhalofop-butil Metanol 3,38 DBFT 0,8 mL al 1% y se lleva a 25 mL 1,99 BP-5 290 320 330

Cyhalotrina 5,36
Metanol DCHFT 0,8 mL al 1% y se lleva a 25 mL 5,19 BP-5 300 320 330
Lambda 5,52
6,3
Cypermetrina
Metanol 8,0 BP-5 270 320 330
Alfa
8,4
Cypermetrina
Metanol 2,80 BP-5 310 320 330
Beta
Cyproconazol Metanol 2,57 DCHFT 1,7 mL al 1% y se lleva a 25 mL 3,29 BP-5 290 320 330
6,51 Rampa
Deltametrina Metanol 7,43 DCHFT 0,8 mL al 1% y se lleva a 25 mL 5,19 BP-5 250 a 320 330
7,67 300
Diazinon Metanol 2,54 DMFT 0,8 mL al 1% y se lleva a 25 mL 1,97 BP-5 240 270 280
Diclofuanid Metanol 4,71 DBFT 0,8 mL al 1% y se lleva a 25 mL 4,50 BP-1 230 260 270
Dicloran Metanol 1,85 DCHFT 1,7 mL al 1% y se lleva a 25 mL 3,29 BP-5 290 320 330
Diclorvos Metanol 2,13 DMFT 0,4 mL al 1% y se lleva a 25 mL 2,81 BP-5 190 230 240
Difeconazol Metanol 4,45 DCHFT 0,8mL al 1% y se lleva a 25 mL 2,66 BP-1 310 330 340
Diflubenzuron Metanol 4,45 DCHFT 0,8mL al 1% y se lleva a 25 mL 2,66 BP-1 310 330 340
Dimetoato Metanol 2,27 DBFT 0,8 mL al 1% y se lleva a 25 mL 2,68 BP-5 250 280 290
Epoxiconazol Metanol 3,52 DCHFT 3,3 mL al 1% y se lleva a 25 mL 3,90 BP-5 280 310 320
Etofenprox Metanol 2,64 DMFT 0,2 mL al 1% y se lleva a 25 mL 4,03 BP-5 290 310 320
Fenarimol Metanol 3,67 DCHFT 1,7 mL al 1% y se lleva a 25 mL 3,35 BP-1 315 330 340
Fenbuconazole Metanol 4,21 DCHFT 1,7 mL al 1% y se lleva a 25 mL 3,45 BP-1 305 320 330
Fenitrothion Metanol 3,68 DMFT 0,8 mL al 1% y se lleva a 25 mL 2,02 BP-5 230 260 270
Fenoxaprop- p-
Metanol 3,85 DCHFT 0,8 mL al 1% y se lleva a 25 mL 3,31 BP-5 290 320 330
etil
Fenpropratrin Metanol 3,35 DCHFT 3,49 BP-5 310 330 340
Fentoato Metanol 3,80 BP-5 250 300 300
7,20 Rampa
Fenvalerato Metanol 8,08 DCHFT 0,8 mL al 1% y se lleva a 25 mL 5,19 BP-5 250 a 320 330
8,31 300
Fluazipof-p-
Metanol 2,78 DBFT 1,7 mL al 1% y se lleva a 25 mL 2,94 BP-5 270 300 310
butil
Flusilasol Metanol 3,07 DBFT 0,4 mL al 1% y se lleva a 25 mL 2,33 BP-5 270 300 310
Forato Metanol 2,88 DMFT 0,4 mL al 1% y se lleva a 25 mL 2,17 BP-5 220 250 260
 Hexaconazol Metanol 2,43 DCHFT 1,7mL al 1% y se lleva a 25 mL 3,33 BP-5 290 320 330
Ioxinil
Metanol 2,50 BP-5 300 315 320
octanoato
Iprodione Metanol 2,87 DCHFT 0,8mL al 1% y se lleva a 25 mL 3,40 BP-1 310 320 330
Isoprotional Metanol 2,98 DBFT 0,8mL al 1% y se lleva a 25 mL 2,33 BP-5 270 300 310
Krexoxim metil Metanol 2,90 DCHFT 0,8 mL al 1% y se lleva a 25 mL 4,60 BP-5 270 300 310
Malathion Metanol 2,72 DMFT 1,7 mL al 1% y se lleva a 25 mL 1,83 BP-5 250 280 290
Metalaxil Metanol 4,38 DBFT 1,7 mL al 1% y se lleva a 25 mL 4,60 BP-1 230 260 270
Metamidofos Metanol 2,75 DMFT 1,7 mL al 1% y se lleva a 25 mL 3,55 BP-1 190 220 230
Metaldehido Metanol 2,69 DMFT 3,3 mL al 1% y se lleva a 25 mL 5,46 BP-1 160 190 200

Metil parathion Metanol 4,02 DCHFT 2 mL al 1% y se lleva a 25 mL 4,31 BP-5 260 290 300

Metolachor Metanol 3,88 DBFT 1,7 mL al 1% y se lleva a 25 mL 3,59 BP-5 250 280 290
Metribuzin Metanol 4,59 DBFT 0,8 mL al 1% y se lleva a 25 mL 5,18 BP-5 210 240 250
Myclobutanil Metanol 2,90 BPX50 300 320 330
Monocrotofos Metanol 3,56 DBFT 0,4 mL al 1% y se lleva a 25 mL 2,41 BP-5 200 230 240
Oxadiazon Metanol 2,55 DBFT 1,7 mL al 1% y se lleva a 25 mL 2,12 BP-5 280 310 320
Oxadixil Metanol 2,47 DCHFT 0,8 mL al 1% y se lleva a 25 mL 2,93 BP-5 300 320 330
Oxamyl Metanol 2,86 DMFT 0,4 mL al 1% y se lleva a 25 mL 2,67 BP-1 220 250 260
Oxyfluorfen Metanol 2,62 DBFT 0,8 mL al 1% y se lleva a 25 mL 2,17 BP-5 280 310 320
6,23
Permetrina Metanol DCHFT 0,8 mL al 1% y se lleva a 25 mL 5,19 BP-5 300 315 320
6,33
Penconazol Metanol 3,25 DBFT 1,7mL al 1% y se lleva a 25 mL 2,71 BP-5 250 280 290
Pendimethalina Metanol 3,20 DBFT 1,7 mL al 1% y se lleva a 25 mL 2,78 BP-5 250 280 290
Phoxim Metanol 2,00 DMFT 0,4 mL al 1% y se lleva a 25 mL 2,55 BP-5 200 230 240
Piperofos Metanol 3,20 BP-5 300 320 330
Pirimifos metil Metanol 3,57 DMFT 2,5 mL al 1% y se lleva a 25 mL 2,01 BP-5 230 260 270
Prochloraz Metanol 4,15 DCHFT 0,8 mL al 1% y se lleva a 25 mL 3,47 BP-1 310 330 340
Procimydone Metanol 2,67 DBFT 1,2 mL al 1% y se lleva a 25 mL 2,26 BP-5 270 300 310
Profenofos Metanol 2,60 DBFT 0,8 mL al 1% y se lleva a 25 mL 2,11 BP-5 280 310 310
Prometrina Metanol 2,28 DCHFT 1,7 mL al 1% y se lleva a 25 mL 4,73 BP-5 270 300 310
Propanil Metanol 3,60 DBFT 1,7 mL al 1% y se lleva a 25 mL 4,03 BP-1 250 280 290
Propargite Metanol 2,84 DBFT 1,7 mL al 1% y se lleva a 25 mL 2,01 BP-5 290 320 330
Propiconazol Metanol 2,82 DCHFT 0,8 mL al 1% y se lleva a 25 mL 3,33 BP-5 290 320 330
Sulfruramida Metanol 2,19 DMFT 0,8 mL al 1% y se lleva a 25 mL 3,18 BP-5 180 210 220
Tebuconazol Metanol 3,36 DCHFT 2,5 mL al 1% y se lleva a 25 mL 3,90 BP-5 280 310 320
Terbufos Metanol 2,89 DMFT 0,4mL al 1% y se lleva a 25 mL 2,08 BP-5 230 260 270
Tiabendazol Metanol 3,79 DBFT 1,7 mL al 1% y se lleva a 25 mL 3,28 BP-1 260 290 300
Tiobencarb Metanol 1,98 DCHFT 2,5mL al 1% y se lleva a 25 mL 2,92 BP-5 300 320 330
Tolclofos Metanol 3,57 DMFT 1,7 mL al 1% y se lleva a 25 mL 2,08 BP-1 230 260 290
Triadimefon Metanol 3,31 DBFT 1,7 mL al 1% y se lleva a 25 mL 3,01 BP-5 240 270 280
Triadimenol Metanol 2,63 DBFT 1,7 mL al 1% y se lleva a 25 mL 2,25 BP-5 270 300 310
Triciclazol Metanol 2,62 DCHFT 1,7 mL al 1% y se lleva a 25 mL 3,30 BP-5 290 320 330
Triclopyr Metanol 7,2 BPX50 210 250 250
Triflumizol Metanol 2,5 BP-5 250 270 280