U N I V E R S I D A D D E

SAN MARTIN DE PORRES

FACULTAD DE MEDICINA
SEMINARIO DE BIOLOGA
CELULAR

2015 - II

INTEGRANTES :
Cornetero Salazar, Antonia
Gil Merino, Sharon
Nuez Saravia, Flavio
Palacios Pardo, Percy
Samame Laura, Lucero

DOCENTE :
Dra. Rosario Soto

TEMA : Membrana Celular

 USMP - Facultad de Medicina Humana

COMPOSICIN LIPDICA DE LA MEMBRANA MITOCONDRIAL INTERNA

DEL MSCULO DE Ascaris suum

RESUMEN

Las protenas y los lpidos juegan un rol importante en la estructura y funcin de

las membranas celulares y subcelulares. Diversos investigadores han estudiado
acerca de los lpidos que componen la membrana mitocondrial de muchos
organismos y han encontrado principalmente fosfolpidos (cardiolipina,
fosfatidiletanolamina, fosfatidilserina) y colesterol. La composicin lipdica de la
membrana mitocondrial interna (mmi) de ningn helminto se ha determinado
hasta ahora. Ascaris suum, parsito helminto que habita el intestino delgado del
cerdo y metaboliza los carbohidratos hasta cidos grasos de cadena corta en
condiciones anaerbicas, ha sido utilizado como modelo en estudios de
bioqumica comparativa. En este estudio, se aisl mediante centrifugacin
diferencial en sacarosa, la fraccin mitocondrial del msculo de Ascaris y luego
se separ la mmi por centrifugacin en presencia de fosfato de potasio 10mM. La
fraccin de lpidos de la mmi fue extrada por el mtodo de Folch y aplicada en
cromatoplacas para Cromatografa en Capa Fina (CCF). Mediante ensayos
enzimticos para la determinacin indirecta de colesterol y triacilglicridos, y con
CCF se encontr que colesterol, fosfolpidos y otro lpido no identificado, estn
presentes en la membrana interna de la mitocondria del parsito. La fraccin de
fosfolpidos separada por CCF fue extrada de la slica gel con cloroformo:
metanol: H2O (30:50:20) y analizada en Cromatografa de Gases (CG) para
determinar su composicin en cidos grasos. Los cidos oleico, palmtico,
linoleico y esterico se encontraron en: 8,38; 7,98; 6,39 y 6,28%,
respectivamente. Otros cidos como el linolnico y mirstico, estaban en menor
proporcin (1,65 y 0,50%, respectivamente), similar a lo reportado en otras
investigaciones referidas a la composicin lipdica mitocondrial de otros
organismos, lo que sugiere un papel importante de estos cidos grasos para la
funcin mitocondrial.

MATERIAL BIOLGICO

Se utiliz Ascaris suum como animal de experimentacin. Los helmintos fueron

obtenidos del intestino delgado de cerdos procesados en los mataderos del Tuy
(Santa Teresa de Tuy, Edo. Miranda) y de Caracas (carretera vieja de Los
Teques, Edo. Miranda). Se mantuvieron en solucin salina isotnica durante su
traslado al laboratorio y en un perodo no mayor de 24 horas se les extrajo el
tejido muscular mediante diseccin en fro.

Aislamiento de la fraccin mitocondrial

La fraccin mitocondrial proveniente de 41,6 g de msculo de Ascaris se obtuvo

por el mtodo de centrifugacin diferencial en sacarosa, segn describe Saz y
Lascure [23].

Obtencin de la membrana mitocondrial interna

Seminario de Fsica Mdica

 USMP - Facultad de Medicina Humana

Para obtener la fraccin de membrana mitocondrial interna se utiliz una

modificacin del procedimiento descrito por Comte y Gantheron [7].

La fraccin mitocondrial proveniente de 20 g de msculo del parsito se

resuspendi en Buffer fosfato de K+ 10 mM, pH: 7,4 y se llev a un volumen final
de 4 mL, sta se dej por 20 minutos a 0C. Se homogeniz y centrifug a
105.000 g durante 1 hora en una ultracentrfuga Beckman rotor Ty65, para
separar la membrana mitocondrial externa y el espacio intermembranal, de la
membrana mitocondrial interna contenida en el sedimento.

CONCLUSIONES

La mmi de Ascaris suum contiene colesterol y fosfolpidos, componentes que

estn presentes en la membrana mitocondrial de otros organismos, lo que indica
que dicha composicin se ha mantenido a travs de la evolucin.

La composicin lpidica encontrada en la mmi de Ascaris se asemeja a los lpidos

reportados por otros investigadores, en la mmi de diversas clulas del cerdo,
hospedador mamfero de este parsito.

BIBLIOGRAFA
1. GRAY, G.M.; YARDLEY, H.J. Mitochondria and nuclei of pig and human
epidermis: isolation and lipid composition. J. Invest. Dermatol. 64: 423-430.
1975.
2. BROWN, D. Structure and function of membrane rafts. Int. J. Med.
Microbial. 291(6-7): 433-437. 2002.
3. COMTE; J.; GANTHERON, D.C. Preparation of outer membrane from pig heart
mitochondria. Methods Enzynol. 55:98-104. 1979.

Seminario de Fsica Mdica