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TESIS PROFESIONAL
ASESORES:
MC. DORA LETICIA VAZQUEZ COUTURIER
MC. ALFREDO ARROYO LARA
MC. NICOLS A. DE MIGUEL VALERA
A mis padres: Gaudencio Morales Ypez y Ortensia Domnguez Pascual; por haberme
trado al mundo y ser parte fundamental de mi formacin como persona y de mi
educacin. Por apoyarme siempre en todo momento. Les debo mi vida. A mi hermano;
Gerardo Morales Domnguez, por ser mi inigualable compaero y amigo desde la niez
y un gran ser humano.
Mil gracias. Los amo.
A toda mi familia:
Mis tos: los cuales me apoyaron durante el transcurso de mi carrera en momentos
claves. Muchas gracias.
A todos mis primos: por todo el apoyo brindado durante mis estudios y por los buenos
momentos que hemos vivido juntos.
AGRADECIMIENTOS
A la MC. Dora Leticia Vzquez Couturier, por darme la oportunidad de realizar este
trabajo y por su apoyo brindado durante la realizacin del mismo.
Al MC. Nicols A. De Miguel Valera, por invertir gran parte de su tiempo para la
realizacin de este trabajo, por brindarme su amistad y confiar en m. Tambin por
compartir parte de sus conocimientos.
Resumen--------------------------------------------------------------------1
Introduccin----------------------------------------------------------------2
Infeccin bacteriana----------------------------------------------------2
Fuentes de infeccin----------------------------------------------------2
Bacterias de importancia en aves-------------------------------------3
Antecedentes---------------------------------------------------------------6
Justificacin----------------------------------------------------------------8
Objetivo general-----------------------------------------------------------8
Objetivos especficos-----------------------------------------------------8
Hiptesis-------------------------------------------------------------------8
Material y mtodos-------------------------------------------------------9
Datos generales del mpo. de Zentla----------------------------------9
Resultados-----------------------------------------------------------------12
Cloacas y faringes---------------------------------------------------13
Muestreo del agua---------------------------------------------------15
Conclusiones--------------------------------------------------------------16
Bibliografa----------------------------------------------------------------17
Anexos
1----------------------------------------------------------------------------19
2----------------------------------------------------------------------------20
3----------------------------------------------------------------------------22
1
Resumen
Con el propsito de conocer la problemtica que afecta el estado sanitario de las aves de
traspatio y haciendo nfasis en los problemas de tipo bacteriano, se llev a cabo un
estudio en tres comunidades de la colonia Manuel Gonzlez que es cabecera municipal
de Zentla en el estado de Veracruz. De cada una de las comunidades se seleccionaron
seis casas y se tomaron muestras de tres aves por cada una de ellas, mediante hisopos se
tomaron muestras de orofaringe y cloaca, para microbiologa mdica. El agua de bebida
fue analizada por microbiologa sanitaria. A los habitantes de las comunidades se les
impartieron plticas de ndole higinico sanitario para disminuir la carga bacteriana en
sus animales y agua de bebida, adems se les entreg unos manuales para lograrlo.
Posteriormente se hizo un segundo muestreo al agua de bebida para demostrar el
cambio de actitud. Los agentes bacterianos determinados pertenecen a la microbiota de
las vas respiratorias y digestivas, pero algunos son agentes potencialmente patgenos,
como Pasteurella sp., Staphylococcus aureus, Streptococcus zooepidemicus y Arizona
hinshawii. En dos de las comunidades estudiadas, las personas adoptaron las
recomendaciones impartidas.
2
INTRODUCCIN
Las familias campesinas obtienen de esta actividad protenas para su dieta alimenticia.
Igualmente obtienen un ingreso adicional como resultado de la venta de huevos y carne
en la misma comunidad.
INFECCIN BACTERIANA
FUENTES DE INFECCIN
Portadores recuperados.- Las aves portadoras son aquellas que se han restablecido en
apariencia de una infeccin clnica, pero que todava retienen al microorganismo
infeccioso en alguna parte de su cuerpo. Aunque en apariencia son sanas, el patgeno
infeccioso contina multiplicndose en su cuerpo y eliminndose hacia el ambiente. (5)
Casi toda persona presenta algn tipo de infeccin por S.aureus durante su vida, que
vara en gravedad desde intoxicacin alimentaria o infecciones cutneas menores hasta
infecciones graves potencialmente mortales. (4)
ANTECEDENTES
Coriza infecciosa.- Es una enfermedad que afecta el aparato superior de las aves, todas
las edades son susceptibles. El agente causal es la bacteria Avibacterium (Haemophilus)
paragallinarum. En Mxico la enfermedad se remonta a los aos 60, un mtodo para
controlar la enfermedad se basaba en la diseminacin de la enfermedad entre la parvada,
para lo cual utilizaban el exudado seroso de las aves afectadas y lo diseminaban en agua
de bebida, para que de esta manera se infectaran una gran parte de la parvada y
posteriormente tratar la parvada con un antimicrobiano. (8)
Es un hecho desafortunado que la higiene del pollo sea considerada la causa ms comn
de intoxicaciones alimenticias en las personas. Para ver como podemos reducir el
nmero de E. coli, primero debemos conocer ms sobre las bacterias que deseamos
controlar. Hay muchos serotipos de E. coli, actualmente conocemos 170 serotipos y no
todos ellos son peligrosos. (7)
Salmonelosis.-Las epidemias de infeccin intestinal por Salmonella spp son uno de los
problemas ms comunes en todo el mundo, principalmente en instituciones de pases en
desarrollo.
En Mxico, en los aos 1994 a 1998, las notificaciones de casos por salmonelosis
registran un incremento de 100 342 casos, en 1994, a 215 155, en 1998 (tasa de 111.21
y 223.53 por 100 000 habitantes, respectivamente), con una mayor incidencia en los
grupos de 15 a 24 aos, de 25 a 44 aos y de 45 a 64 aos, siendo el segundo el grupo
ms afectado. En cuanto a frecuencia con relacin a los meses del ao sta se intensifica
a partir de los meses de abril y mayo alcanzando un pico en julio, con una disminucin
en septiembre y octubre. Los estados ms afectados han sido Tabasco, Coahuila,
Chiapas y Quintana Roo. (18)
8
JUSTIFICACIN
Debido a la problemtica y actual necesidad de conocer el estado sanitario y las causas
ms probables de las muertes de las aves domsticas criadas en traspatio y destinadas al
consumo humano; se propone realizar el siguiente estudio para as tener en claro la
calidad microbiana de las aves, que a su vez forman parte de la dieta de las familias de
algunas zonas rurales y marginadas del municipio de Zentla, Veracruz.
OBJETIVO GENERAL
Determinar la calidad y cantidad de la carga microbiana en el agua de bebida y en
orificios naturales de las aves de traspatio, dando a conocer a la gente de las
comunidades la importancia de mantener a sus aves sanas para evitar diseminacin de
enfermedades en su regin y posibles enfermedades que ellos puedan contraer debido al
mal estado sanitario que puedan tener estas.
OBJETIVOS ESPECFICOS
a) Determinar la presencia (calidad y cantidad) de mesfilos y coliformes en el
agua de bebida y comparar los resultados con un segundo muestreo, despus de
haber capacitado a los habitantes de esas comunidades para tener un adecuado
manejo del agua de bebida de las aves.
b) Determinar la presencia de la flora bacteriana de orificios naturales de las
gallinas (cloaca y orofaringe).
HIPTESIS
Las condiciones sanitarias de las aves domsticas en traspatio de algunas zonas rurales y
marginadas del municipio de Zentla, Veracruz, no son favorables para tener una buena
produccin de huevo y carne, libre de bacterias que puedan ser nocivas a las personas de
las comunidades.
9
MATERIAL Y MTODOS
Est regado por el ro Xicuintla el cual es tributario del ro Jamapa. Su clima es semi-
clido con una temperatura promedio de 26 C; su precipitacin pluvial media anual es
de 1,650 mm. La flora del municipio la componen su vegetacin de tipo bosque alto
perennifolio y bosque tropical caducifolio. La fauna del municipio esta compuesta por
una gran variedad de animales silvestres, entre los que se encuentran: venado,
armadillo, tuza, zorra, teterete, conejo, iguana, zopilote, cardenal, vboras y una gran
variedad de insectos, entre otros.
Zentla es un pueblo prehispnico que conserva sus ruinas. Como ciudad Totonaca, su
arquitectura tiene semejanza con Zempoala y seguramente su esplendor correspondi a
la etapa renacentista, es decir despus de 1155. Posteriormente cay en el dominio de la
triple alianza, pero ms concretamente de los seores de Texcoco.
El decreto nmero 27 de 12 de octubre de 1894 declar a la colonia Manuel Gonzlez,
cabecera del municipio de Zentla. Por acuerdo de 9 de enero de 1926 se declara
cabecera del municipio de Zentla, al pueblo del mismo nombre. (20)
Principales Localidades
Toma de muestras.
Muestreo en las aves.- Recurriendo a hisopos estriles, se tomaron dos muestras por
ave, una de orofaringe y otra de cloaca, haciendo un total de tres aves por familia, y en
total seis familias por comunidad. Las muestras de orofaringe se tomaron introduciendo
el hisopo en la cavidad bucal del ave y sin tocar las paredes internas del pico. Las
muestras de cloaca se tomaron despejando las plumas que estn alrededor de la cloaca
para que el hisopo no las tocara. Tomada la muestra, dichos hisopos se introdujeron en
tubos con medio de transporte de Stuart para la conservacin de las muestras, los tubos
se identificaron con cinta adhesiva y su respectivo No. de muestra. Se transportaron al
laboratorio en una hielera con refrigerantes (4-6C) para mantener una ptima
conservacin durante el transporte.
Muestreo del agua.- se analizaron en total 18 bebederos (seis por comunidad). Por cada
bebedero de las aves, se tomaron 20 ml de muestra, colectados con recipientes de
plstico con tapn de rosca previamente esterilizados. La muestra se tom abriendo el
recipiente y recolectando el agua sin revolver el bebedero; se taparon, se identific cada
frasco y se metieron a la hielera.
Siembra en masa de las muestras de agua.- para sembrar se ocuparon cajas de petri
estriles en las cuales se deposit 1mL de la dilucin de las muestras y se les aadi 20
mL de agar en fase de sol. Los agares utilizados fueron: agar cuenta estndar
(mesfilos) y agar bilis y rojo violeta (coliformes). El procedimiento para la realizacin
de esto se hizo en base a las NOM-092-SSA-1994 y NOM-113-SSA1-1994.
Una vez que se aadi el agar en las placas, stas se agitaron mediante 15 movimientos
circulares a favor de las manecillas del reloj y otro tanto en contrasentido; se dejaron
gelificar y despus se llevaron a incubar a la estufa de cultivo durante 24 hrs. a una
temperatura de 37 C. La lectura de las cajas se hizo utilizando un contador de colonias.
Anlisis de resultados. Los resultados se procesaron con el programa Epi Info del CDC
de Atlanta, Georgia. Con el mtodo de Ji-cuadrada. (19)
12
RESULTADOS
Fueron seleccionadas las comunidades de Matlaluca, Agua Escondida y el Ejido La
Pia, del municipio de Zentla, Ver., debido a las condiciones de marginacin. Se
analizaron 54 animales que representaron 108 muestras (orofaringe y cloaca), y 36
muestras de agua.
Microbiologa mdica. Las bacterias que se aislaron con mayor frecuencia de la cloaca
fueron E. coli y S. aureus; mientras que en la orofaringe las bacterias predominantes
fueron S. aureus, Corynebacterium sp., Citrobacter sp. y Pasteurella multocida.
Microbiologa sanitaria. Bajo este aspecto se hicieron dos muestreos del agua de
bebida de las aves, con un espacio de tiempo en donde se instruy a las personas de las
comunidades mediante plticas y folletos describiendo las actividades higinico-
sanitarias necesarias para disminuir la carga bacteriana. Se observ que en dos de las
comunidades las personas adoptaron de buena manera las recomendaciones pues las
cuentas bacterianas disminuyeron considerablemente para el segundo muestreo.
Bacteria Frecuencia %
Escherichia coli 57 36.8
Staphylococcus aureus 33 21.3
Corynebacterium sp. 14 9.0
Citrobacter sp. 11 7.1
Pasteurella sp 8 5.2
Serratia sp. 6 3.9
Actinomyces sp. 4 2.6
Yersinia pestis 2 1.3
Streptococcus zooepidemicus 2 1.3
Enterobacter cloacae 2 1.3
Acinetobacter sp. 2 1.3
Proteus sp. 2 1.3
Pseudomonas fluorescens 2 1.3
Arizona hinshawii 2 1.3
Flavobacterium sp. 2 1.3
Aeromonas sp. 1 0.6
Morganella morganii 1 0.6
Proteus mirabilis 1 0.6
Proteus vulgaris 1 0.6
Klebsiella rhinoscleromatis 1 0.6
Klebsiella ozaenae 1 0.6
155
Bacteria Frecuencia %
E.coli 18 51.4
S.aureus 5 14.3
Citrobacter sp 3 8.6
Corynebacterium spp 3 8.6
Proteus sp 2 5.7
Actinomyces sp 2 5.7
Klebsiella rhinoscleromatis 1 2.9
S.zooepidermicus 1 2.9
35
Bacteria Frecuencia %
S.aureus 10 34.5
Corynebacterium spp 5 17.2
Pasteurella sp. 2 6.9
Arizona hinshawii 2 6.9
Serratia sp 2 6.9
Flavobacterium sp. 2 6.9
Actinomyces sp 2 6.9
Pseudomona fluorescens 1 3.4
Acinetobacter sp 1 3.4
Klebsiella ozaenae 1 3.4
Enterobacter cloacae 1 3.4
29
Bacteria Frecuencia %
E.coli 18 66.7
S.aureus 4 14.8
Aeromonas sp. 1 3.7
Morganella morganii 1 3.7
S.zooepidermicus 1 3.7
Citrobacter sp. 1 3.7
Corynebacterium spp 1 3.7
27
Cuadro 4. Bacterias encontradas en cloacas de aves de la comunidad de Agua Escondida.
14
Bacteria Frecuencia %
S.aureus 6 27.3
Pasteurella sp 6 27.3
E.coli 3 13.6
Yersinia pestis 2 9.1
Corynebacterium spp 2 9.1
Enterobacter sp. 1 4.5
Proteus mirabilis 1 4.5
Acinetobacter 1 4.5
22
Cuadro 5. Bacterias encontradas de orofaringes en la comunidad de Agua Escondida.
Bacteria Frecuencia %
E.coli 16 69.6
S.aureus 3 13.0
Citrobacter sp. 2 8.7
Serratia sp. 1 4.3
Proteus vulgaris 1 4.3
23
Cuadro 6. Bacterias encontradas en cloacas de la comunidad de Ejido la Pia.
Bacteria Frecuencia %
Citrobacter sp. 5 26.3
S.aureus 5 26.3
Serratia sp. 3 15.8
Corynebacterium spp 3 15.8
Pseudomonas fluorescens 1 5.3
E.coli 2 10.6
19
Cuadro 7. Bacterias encontradas en orofaringes de la comunidad Ejido la Pia.
15
Muestreo de agua.
CONCLUSIONES
Se encontraron 19 gneros de los cuales Escherichia coli, Staphylococcus aureus,
Corynebacterium sp., Citrobacter sp. y Pasteurella sp, fueron los ms frecuentes, tambin
aparecen Arizona hinshawii y Streptococcus zooepidemicus. De los gneros aislados, son
potencialmente patgenas Pasteurella sp., y Staph. aureus, Str. Zooepidemicus y Arizona
hinshawii.
Por lo tanto se concluye que el agua no cuenta con la calidad microbiolgica adecuada
para mantener niveles ptimos de salud en las aves y adems esto contribuye a elevar la
mortalidad temprana de las aves.
17
BIBLIOGRAFA
4. Brooks Geo. F., Batel Janet S., Stephen A. Morse, 1999. Microbiologa mdica. 16a
edicin. Manual moderno. Mxico D. F.
6. Hitchner C. B. S., Domermuth Charles H., Graham Purchase H., Williams James E.
1980. Isolation and identification of avian pathogens. The American Association of
Avian Pathologists. Second edition. p.9-10
9. Smith-Palmer, A.; W.C. Stewart, H. Mather, A. Greig, J.M. Cowden, W.J. Reilly.
2003. Epidemiology of Salmonella enterica serovars Enteritidis and Typhimurium
in animals and people in Scotland between 1990 and 2001. The veterinary record.
vol. 153. (17) p 517-520
15. http://bvs.insp.mx/rsp/articulos/articulo.php?id=001624
18
16. http://www.imbiomed.com/1/1/articulos.php?method=showDetail&id_
articulo =12964&id_seccion=200&id_ejemplar=1332&id_revista=45
17. http://respyn.uanl.mx/especiales/ee-5-2004/cartel_epidemilogia_juany/02.htm
18. http://bvs.insp.mx/rsp/articulos/articulo.php?id=000564
19. Programa Epi Info. CDC, Atlanta GA. USA Programa de computadora de dominio
pblico para estudios epidemiolgicos.
20. http://www.e-local.gob.mx/work/templates/enciclo/veracruz/municipios/30200a.htm
19
ANEXOS
Anexo 1
Material de laboratorio utilizado:
- tubos de ensayo con tapn de rosca
- tubos de ensayo sin tapn de rosca
- cajas de petri desechables y estriles
- mechero de gas
- hisopos
- nevera de unicel
- bolsas de plstico
- estufa
- matraz de 50 y 100 ml
- pipetas 1, 2, 5, y 10 ml
- agitador
- medios de cultivo
- reactivos
- autoclave
- portaobjetos
- microscopio
- medidor de pH
- cuentacolonias
- recipientes de plstico con tapn de rosca
- vasos de precipitado.
- Gradillas
Soluciones:
- SSF
- Agua destilada
- Lugol
- Alcohol-acetona
- Urea
- Agua peptonada
- Reactivo Kovac
- Safranina
- Azul de metileno
Medios de cultivo:
- medio de transporte de Stuart
- agar bilis y rojo violeta
- agar cuenta estndar
- agar citrato de Simmons
- agar TSI
- agar Bordet Gengou
- agar XLD
- medio SIM
- caldo urea
- caldo tetrationato
20
Anexo 2
Foto 6. Material de
laboratorio utilizado para
sembrar las muestras
Foto 7. Siembra
bacteriana
22
Anexo 3
Algunas recomendaciones para las aves criadas en traspatio.
Para mejorar la calidad microbiolgica del agua se debern seguir algunos pasos
sencillos:
1. El bebedero deber ser de plstico, para facilitar y garantizar su limpieza.
2. Se debe lavar todos los das con detergente o jabn y enjuagarse correctamente.
3. El agua a utilizar deber ser potable. Si es agua de pozo se le puede adicionar
unas 5 gotas de cloro por 1 litro de agua.
4. Instalar el bebedero en un lugar donde el piso no tenga arena suelta o basura.
5. La altura del bebedero deber ser la aproximada al cuello del ave.
6. Las aves debern tener agua fresca y limpia todos los das.