Curso de Microbiologa

General
de Enrique Iez

ACCIN DE LOS AGENTES

QUMICOS SOBRE LAS
BACTERIAS

NDICE:
1. CONCEPTOS GENERALES

2. DESINFECTANTES Y ANTISPTICOS

2.1. FACTORES QUE AFECTAN LA POTENCIA DE UN DESINFECTANTE

2.2. DETERMINACIN DE LA POTENCIA DE UN DESINFECTANTE

3. TIPOS DE DESINFECTANTES

3.1. AGENTES QUE DAAN LA MEMBRANA

3.2. AGENTES DESNATURALIZANTES DE PROTEINAS

3.3. AGENTES MODIFICADORES DE GRUPOS FUNCIONALES

 BARRA DE EXPLORACIN: Microbiologa General

1. CONCEPTOS GENERALES
Existen ciertas sustancias qumicas que influyen negativamente sobre
las bacterias, pudiendo ejercer dos tipos de efectos diferentes:

bacteriostticos: cuando impiden el crecimiento bacteriano;

bactericidas: cuando destruyen (matan) las bacterias.

En general, si no slo nos referimos a las bacterias, sino a cualquier

tipo de microorganismos, hablamos respectivamente de agentes
microbiostticos y microbicidas. Ahora bien, para una misma
sustancia qumica, la lnea de demarcacin entre un efecto
microbiosttico y otro microbicida depende muchas veces de la
concentracin de dicha sustancia y del tiempo durante el que acta.

)Cmo podemos saber que un microorganismo est "muerto"? El

nico criterio vlido es la prdida irreversible de la capacidad de
divisin celular, es decir, de la prdida de viabilidad, y se suele
comprobar empleando tcnicas con placas de Petri (es decir,
confirmando que no crecen en medios slidos adecuados). (Pero ni
siquiera esto es garanta de que una bacteria "no viable" est
"muerta": hay bacterias viables pero no cultivables. Como se ve,
demostrar que una bacteria est "muerta" es algo bastante
complicado).

Antes de proceder al estudio de las diversas molculas que pueden

afectar el crecimiento y/o la viabilidad de los microorganismos,
veamos unas cuantas definiciones bsicas.

Agentes esterilizantes son aquellos que producen la inactivacin

total de todas las formas de vida microbiana (o sea, su "muerte" o
prdida irreversible de su viabilidad). (Tambin existen agentes
fsicos esterilizantes, como ya vimos en los dos captulos
anteriores).
Agentes desinfectantes (o germicidas) son agentes (sobre todo
qumicos) antimicrobianos capaces de matar los microorganismos
patgenos (infecciosos) de un material. Pueden (y en muchos casos
suelen) presentar efectos txicos sobre tejidos vivos, por lo que se
 suelen emplear slo sobre materiales inertes.
Agentes antispticos son sustancias qumicas antimicrobianas que
se oponen a la sepsis o putrefaccin de materiales vivos. Se trata
de desinfectantes con baja actividad txica hacia los tejidos vivos
donde se aplican.
Quimioterpicos son compuestos qumicos con actividad
microbicida o microbiosttica, con una toxicidad suficientemente
baja como para permitir su administracin a un organismo superior,
en cuyos fluidos corporales y tejidos permanece estable un cierto
tiempo a concentraciones tales que los hace eficaces como
antimicrobianos dentro del organismo. (Estudiaremos los
quimioterpicos de sntesis y los antibiticos en el tema 20).

2. DESINFECTANTES Y ANTISPTICOS
Como se recordar cuando tratamos el tema del calor como agentes
esterilizante, la muerte de una poblacin bacteriana se poda
representar como una curva exponencial, expresin de la cintica de
primer orden. Este tipo de cintica tambin es aplicable a la muerte
microbiana cuando se aplica un agente qumico a una concentracin
suficientemente alta:

Sin embargo, cuando se aplican menores concentraciones del agente,

se pueden encontrar cinticas diferentes, expresables como curvas
sigmoidales:

Como se ve, hay un margen en el que la curva sigue una cintica de

primer orden, pero dicha cintica no se puede extrapolar: obsrvese
que a tiempos prolongados la curva se hace casi paralela al eje de
abscisas, lo cual indica que queda una fraccin de clulas viables.

2.1. FACTORES QUE AFECTAN LA POTENCIA DE UN DESINFECTANTE

Concentracin del agente y tiempo de actuacin

La concentracin para obtener un determinado efecto, as como el

rango de concentraciones en que se puede demostrar un
determinado efecto, dependen de:

tipo qumico del desinfectante,

tipo de microorganismos a eliminar,
mtodo de ensayo del efecto.
Existe una estrecha relacin entre la concentracin del agente y el
tiempo necesario para matar una determinada fraccin de la
poblacin bacteriana, segn la siguiente expresin:

Cn t = K,

Donde C es la concentracin del agente, n es el coeficiente de

dilucin (una constante), y t es el tiempo de actuacin

Esta ecuacin nos dice qu relacin existe entre la variacin de la

concentracin del agente y el tiempo para matar una fraccin de la
poblacin microbiana.

Por ejemplo:

los fenoles poseen un coeficiente de dilucin n=5 6; ello implica

que aun pequeos cambios en la concentracin provocan cambios
muy acentuados en el tiempo para lograr un mismo efecto: as, si
reducimos la concentracin de fenol desde un valor dado a su
mitad, necesitamos emplear 64 veces ms de tiempo para
conseguir matar una misma proporcin de bacterias.
En cambio, los hipocloritos (constituyentes de las lejas) tienen
coeficiente n=1, lo que se refleja en que pequeos cambios en la
concentracin requieren pequeos cambios en el tiempo de
aplicacin.

Finalmente, y refirindonos al tiempo, no todas las bacterias mueren

al mismo tiempo, ni siquiera cuando se aplica un exceso del agente
(repsense los grficos anteriores).

pH

El pH afecta tanto a la carga superficial neta de la bacteria como al

grado de ionizacin del agente. En general, las formas ionizadas de
los agentes disociables pasan mejor a travs de las membranas
biolgicas, y por lo tanto son ms efectivos.

los agentes aninicos suelen ser ms efectivos a pH cidos;

los agentes catinicos muestran ms eficacia a pH alcalinos.

Temperatura

Normalmente, al aumentar la temperatura aumenta la potencia de los

desinfectantes. Para muchos agentes la subida de 10 grados supone
duplicar la tasa de muerte. Pero con el fenol, la subida de 10 grados
representa multiplicar por 5 o por 8 la eficacia.

Naturaleza del microorganismo y otros factores asociados a la

poblacin microbiana
 Segn la especie empleada: p. ej., el bacilo tuberculoso resiste los
hipocloritos mejor que otras bacterias;
Segn la fase de cultivo;
Dependiendo de la presencia de cpsulas o de esporas (suelen
conferir ms resistencia);
Nmero de microorganismos iniciales.

Presencia de materiales extraos

La existencia de materia orgnica en el material a tratar (p.

ej., sangre, suero, pus) afecta negativamente a la potencia de
los desinfectantes de tipo oxidante (como los hipocloritos) y
de tipo desnaturalizante de protenas, hasta el punto que
pueden llegar a hacerlos inactivos en cuanto a su poder
desinfectante y/o esterilizante.

Los principales mecanismos por los que se pierde actividad

son:

adsorcin (o sea, absorcin superficial) del desinfectante a coloides

de protenas;
formacin de complejos inertes o poco activos;
unin de grupos activos del desinfectante a protenas extraas.

Ejemplos:

los agentes mercuriales se inhiben por sustancias que lleven grupos

sulfhidrilo (-SH).
las sales cuaternarias de amonio se inhiben en presencia de jabones
y lpidos.

Por lo tanto, para el empleo eficaz de muchos desinfectantes

hay que contar con este factor, determinando previamente el
gasto de materia orgnica inerte, o calculando la potencia
neta del desinfectante en presencia de la materia orgnica.

2.2 DETERMINACION (EVALUACION) DE LA POTENCIA DE UN

DESINFECTANTE

La determinacin de la actividad desinfectante de un

determinado agente es necesaria para conocer su posible
eficacia. El mtodo primario que se viene empleando desde
hace muchos aos es comparar la potencia del compuesto a
ensayar con la de un desinfectante-tipo o estndar, que por
motivos histricos es el fenol.
Coeficiente fenol o coeficiente fenlico: consiste en la
siguiente relacin

mxima dilucin del desinfectante que mata a un

microorganismo en 10 min, pero no en 5'

-------------------------------------------------------------------------------------
----------------------------

mxima dilucin del fenol que mata a ese microorganismo en

10 min, pero no en 5 min.

En los EEUU, la Administracin Federal de Alimentos y

Medicamentos (F.D.A.= Food and Drug Administration)
emplea un test oficial para desinfectantes en condiciones
normalizadas, usando una serie de cepas bacterianas
concretas, cuya susceptibilidad al fenol se conoce
exactamente:

una cepa concreta de Salmonella typhimurium

una cepa de Staphylococcus aureus
una cepa de Pseudomonas aeruginosa

El mtodo consiste, en esencia, en lo siguiente:

1. un cultivo de una de estas cepas se diluye 10 veces

(1/10) en sucesivas diluciones del desinfectante
problema, y se dejan a 20 minutos;

2. de cada una de las diluciones se siembran alcuotas, a

los 5 y a los 10 minutos, en placas de Petri provista con
un medio de cultivo adecuado;

3. se determina el coeficiente fenol segn la frmula que

hemos expuesto;

4. una vez determinado, se recomienda usar

concentraciones 5 veces superiores a las indicadas por
el coeficiente fenol.

Limitaciones de este mtodo:

El coeficiente fenol slo es indicativo cuantitativamente en

desinfectantes qumicamente similares al fenol, y que tengan
coeficientes de dilucin (n) parecidos.
Aun cuando conozcamos el coeficiente fenol de un compuesto, su
valor indicativo se limita a las diluciones que se hayan empleado en
la determinacin.
Hay que atender a las condiciones de valoracin, ya que como
dijimos antes, la presencia de materia orgnica supone una merma
 del poder real de desinfeccin.

Para solucionar algunos de estos inconvenientes se han

puesto a punto otros mtodos de valoracin:

Prueba de la concentracin equivalente

Consiste en determinar la concentracin del desinfectante a

ensayar que ejerce el mismo efecto sobre la bacteria de
referencia que otra concentracin de un desinfectante-tipo
(estndar).

Determinacin de la toxicidad del desinfectante

Como se coment anteriormente, no todos los agentes

esterilizantes son aptos como desinfectantes de tejidos, ya
que pueden presentar efectos txicos. Por ello, siempre que
se intenta introducir el uso de un nuevo compuesto
desinfectante, hay que evaluar su potencial txico, mediante
el llamado ndice de toxicidad, que es el cociente entre el
poder desinfectante y el poder txico

3. TIPOS DE DESINFECTANTES
Se suelen clasificar de acuerdo con su mecanismo de accin:

A) AGENTES QUE DAAN LA MEMBRANA

1) Detergentes

a) catinicos

b) aninicos

c) no inicos

2) Compuestos fenlicos
a) fenol

b) cresoles

c) difenilos halogenados

d) alquilsteres del para-hidroxibenzoico

e) aceites esenciales de plantas

3) Alcoholes

a) etanol

b) isopropanol

B) AGENTES DESNATURALIZANTES DE PROTEINAS

1) Acidos y bases fuertes

2) Acidos orgnicos no disociables

C) AGENTES MODIFICADORES DE GRUPOS FUNCIONALES

1) Metales pesados

a) mercuriales

b) compuestos de plata

c) compuestos de cobre
2) Agentes oxidantes

a) halgenos

b) agua oxigenada

c) permanganato potsico

d) cido peractico

3) Colorantes

a) derivados de la anilina

b) derivados de la acridina (flavinas)

4) Agentes alquilantes

a) formaldehido

b) glutaraldehido

c) xido de etileno

d) -propionil-lactona

3.1. AGENTES QUE DAAN LA MEMBRANA CELULAR

Los solventes orgnicos (fenoles, alcoholes) y los

desinfectantes tensioactivos (detergentes) daan la
integridad estructural de la membrana (es decir, la
disposicin ordenada de lpidos y protenas), de modo que
interfieren con su funcin, ejerciendo un efecto neto de
 Interferencia con procesos de transporte y metabolismo energtico;
Salida de pequeas molculas de la clula.

3.1.1 Detergentes (= desinfectantes tensioactivos o surfactantes)

Los detergentes sintticos, al igual que los jabones, contienen

una porcin hidrofbica (normalmente una larga cadena
lipfila) y una porcin hidrfila (un grupo polar), lo cual les
permite formar micelas en solucin acuosa, as como formar
capas que cubren y solubilizan molculas hidrfobas.

Segn sea la porcin hidrfila, los detergentes se pueden

clasificar en:

detergentes inicos:

detergentes catinicos (grupo activo con carga positiva)

detergentes aninicos (grupo activo con carga negativa)

detergentes no inicos (no suelen tener actividad

antimicrobiana).

3.1.1.1 Detergentes catinicos

Son los detergentes ms potentes en cuanto a su actividad

desinfectante, siendo activos contra bacterias Gram-positivas
y Gram-negativas. Los principales son los llamados
compuestos de amonio cuaternario:

Sales de amonio cuaternario, sobre todo aquellas que van

como cloruros o bromuros. Su frmula general se puede
representar as:

Los cuatro sustituyentes (R1 a R4) del N son cadenas de

hidrocarburos variados. Las sales de amonio cuaternario ms
activas son aquellas que tienen tres grupos alqulicos cortos y
un grupo alqulico largo: cloruro de cetilpiridinio, cloruro de
benzalconio

Mecanismo de accin: La porcin hidrfoba penetra en las

membranas, mientras que el grupo polar catinico se asocia
con los fosfatos de los fosfolpidos, provocando alteraciones
en dichas membranas, reflejadas en la prdida de su
semipermeabilidad, con salida de metabolitos de N y P desde
el citosol. Es entonces cuando el detergente puede entrar al
interior celular, con un efecto secundario de desnaturalizacin
de protenas. Su actividad se mejora a pH alcalino.
Son rpidamente bactericidas a concentraciones muy bajas
(del orden de una parte por milln, 1 ppm), siempre que en el
material a tratar no exista materia orgnica.

Usos, ventajas e inconvenientes: Tienen baja toxicidad, por lo

que se pueden emplear como desinfectantes y antispticos de
la piel. Se emplean igualmente en la desinfeccin de material
de industrias alimentarias.Su actividad se ve neutralizada por
jabones y fosfolpidos, precipitando en su presencia.

3.1.1.2. Detergentes aninicos

Con grupos carboxilo como porcin hidrfila:

jabones
saponinas
sales biliares
cidos grasos disociables

Con grupos sulfato como porcin hidrfila:

dodecilsulfato sdico (SDS), tambin llamado laurilsulfato sdico

sulfonato de alquilbenceno

Mecanismo: Provocan una gran disrupcin de membranas, con

efectos de lisis. Son activos sobre todo a pH cido,
prefentemente sobre bacterias Gram-positivas, pero poco
sobre Gram-negativas, ya que stas quedan ms protegidas
por la barrera del lipopolisacrido de la membrana externa.

Usos: Cuando los detergentes aninicos se combinan con

cidos, se logran desinfectantes sanitarios muy potentes
(debido al efecto sinrgico de ambos componentes) y de
rpida actuacin (unos 30 segundos).

3.1.1.3. Detergentes no inicos

No tienen actividad antimicrobiana, pero algunos tienen

empleo en otros campos de la Microbiologa: los steres del
cido oleico (bajo nombres comerciales como CarbowaxJ,
Tween-80J) pueden adicionarse a medios de cultivo para
evitar la formacin de grumos y favorecer el crecimiento
disperso de ciertas bacterias (como Mycobacterium
tuberculosis); adems el oleico puede estimular el
crecimiento.

3.1.2. Fenoles

Son rpidamente bactericidas a bajas concentraciones,

causando:

daos a membranas, con prdida de constituyentes citoplsmicos;

inactivacin irreversible de oxidasas y deshidrogenasas de
membrana;
desnaturalizacin de protenas.

Tienen baja solubilidad en agua, por lo que se emplean en

frmulas que incluyen agentes emulsificadores (jabones) que,
adems, aumentan su actividad.

3.1.2.1. Fenol

El fenol o cido carblico, histricamente uno de los primeros

desinfectantes en usarse, slo se emplea en la actualidad
como patrn para ensayar el poder desinfectante de otros
compuestos.

A partir del fenol se pueden lograr desinfectantes con mayor

actividad antibacteriana y con menor toxicidad sustituyendo
hidrgenos del anillo bencnico por radicales alqulicos o por
halgenos. H aqu algunos ejemplos:

3.1.2.2. Cresoles

Son los alquil-fenoles. El radical alqulico puede estar en

posicin orto, meta o para, dando respectivamente el orto-
cresol, el meta-cresol y el para-cresol. Normalmente se
emplea la mezcla de los tres, denominada tricresol.
Se obtienen por destilacin del alquiltrn de carbn, y se
emplean como emulsiones de jabn verde bajo los nombres
comerciales de LysolJ y CreolnJ.

Se usan como desinfectantes de material de desecho

bacteriolgico y como desinfectantes de la piel.

3.1.2.3. Difenilos halogenados

El hexaclorofeno (hexacloro-orto-difenilmetano) es
bacteriosttico a bajas concentraciones (sobre todo contra
cocos Gram-positivos), incluso incorporado en jabones, pasta
de dientes y cosmticos.

Algunas marcas comerciales incluan hace unos aos este

compuesto, hasta que se comprob que su absorcin por la
piel, sobre todo inflamada, puede causar neurotoxicidad e
incluso, toxicidad sistmica, por lo que en la actualidad ha
dejado de usarse.

3.1.2.4. Alquilsteres del para-hidroxibenzoico

Actan de forma similar a los alquilfenoles, pero no son

txicos, debido a que al ser ingeridos, se hidrolizan
rpidamente, dando el inocuo para-hidroxibenzoato.

Se emplean como conservantes de alimentos y de productos

farmacuticos.

3.1.2.5. Ciertos aceites esenciales de origen vegetal

Desde la antigedad, y de modo emprico, se vienen usando

algunos aceites esenciales de plantas aromticas como
conservantes y antispticos, ya que como se ha podido
comprobar, contienen varios compuestos fenlicos:

el timol (de Thymus, los tomillos);

el eugenol se emplea en odontologa como antisptico.
3.1.3. Alcoholes

Los alcoholes desorganizan las bicapas lipdicas penetrando

en la regin hidrocarbonada de los lpidos. No afectan a las
endosporas, por lo que no son esterilizantes. Su accin
desinfectante mejora conforme aumenta la longitud de la
cadena aliftica de los alcoholes, hasta aquellos con 8 a 10
tomos de carbono (C8-C10), ya que los alcoholes de cadenas
ms largas de C10 tienen una baja solubilidad en agua.

3.1.3.1. Etanol (CH3-CH2OH)

Se emplea en desinfeccin de la piel antes de inyecciones

cutneas, as como en desinfeccin de los termmetros
clnicos, siempre que se deje el tiempo suficiente de contacto.
Es ms efectivo en soluciones acuosas entre 50-70%, ya que
para su mejor accin se implica la intervencin del agua. A
100% de pureza es poco efectivo.

3.1.3.2. Isopropanol

Es menos voltil y ms efectivo que el etanol. Se emplea

igualmente en desinfeccin de termmetros. Sin embargo, su
efecto txico (narctico) es mayor y ms duradero que aquel.

3.2. AGENTES DESNATURALIZANTES DE PROTEINAS

3.2.1. Acidos y lcalis fuertes

Son activamente bactericidas, debido a sus grupos H+ y OH-

disociados, respectivamente. En principio, su actividad es
proporcional al grado de disociacin, pero algunos hidrxidos
son ms potentes de lo sugerido por su mero grado de
disociacin, debido a la accin txica directa que puede
ejercer el catin metlico.

Existen ciertas especies bacterianas que resisten

relativamente bien la accin de bases fuertes. Tal es el caso
del bacilo tuberculoso. Esto se aprovecha para aislarlo y
purificarlo: se lica un esputo de enfermo sospechoso en una
solucin 1M de sosa (NaOH) y se deja 30 minutos antes de
sembrar. Bajo estas condiciones, prcticamente slo
sobrevive el Mycobacterium tuberculosis.

3.2.2. Acidos orgnicos

Los cidos orgnicos, que son poco disociables, ejercen su

efecto en cuanto molculas intactas (sin disociar), que
penetran a la clula.

El cido benzoico y el cido srbico se usan ampliamente

como conservantes alimentarios.

Ciertos cidos (como el actico, lctico, propinico) aparecen

en alimentos fermentados, actuando como conservantes
naturales. Estos mismos, as como el ctrico se pueden aadir
a otros tipos de alimentos, para prolongar el periodo de
posible almacenamiento de los productos.

3.2.3. El cido brico se ha usado como conservante (a veces

ilegal) de alimentos, as como en oftalmologa.

3.3. AGENTES MODIFICANTES DE GRUPOS FUNCIONALES DE

PROTEINAS Y DE ACIDOS NUCLEICOS

Esta amplia clase de agentes se caracteriza, en general, por

los siguientes efectos:

alteran grupos que forman parte de los centros activos de enzimas

y otras protenas;
alteran grupos funcionales de cidos nucleicos, componentes de
pared y de membrana.

Como ya vimos en la clasificacin de agentes desinfectantes,

dentro de este grupo se distinguen a su vez:

1. metales pesados

2. agentes oxidantes

3. tinturas de colorantes

4. agentes alquilantes
3.3.1. Metales pesados

Las sales solubles de Hg, As, Ag, Cu, etc, "envenenan" la

actividad enzimtica formando mercptidos con los grupos
-SH de la cistena. Tambin interaccionan con -NH2, -COOH y
radicales fosfato.

Los ms efectivos son los derivados del mercurio y de la plata

(actan a menos de 1 ppm).

3.3.1.1. Mercuriales. Se vienen usando desde antiguo en

Medicina.

Cloruro de mercurio (HgCl2). En solucin al 0,1% fue muy

usado como desinfectante potente, pero es muy txico, y
apenas se emplea en la actualidad.

Compuestos orgnicos de mercurio (como el MercurocromoJ,

la MercrominaJ, el Mertiolato): No son totalmente fiables
como desinfectantes y presentan cierta (aunque baja)
toxicidad, pero se emplean mucho como antispticos de la
piel y de heridas.

Sales de fenilmercurio. Son potentes inhibidores no slo de

bacterias, sino de levaduras, hongos y algas. Se usan
especialmente en el control de posibles contaminantes
microbianos (p.ej., bacterias oportunistas del gnero
Pseudomonas) en productos farmacuticos, cosmticos y
oftalmolgicos.

3.3.1.2. Compuestos de plata.

Bien sea en forma de sales solubles, o en preparaciones

coloidales, los compuestos de plata se usan ampliamente
como antispticos, aunque estn restringidos, al tener
efectos irritantes y custicos.

Nitrato de plata (AgNO3). Es muy bactericida frente al

gonococo (Neisseria gonorrhoeae), y por ello se usa
habitualmente para prevenir la oftalmia gonoccica del recin
nacido.
Coloides orgnicos de plata. En ellos los iones Ag+ se van
liberando lentamente. Tienen efectos bacteriostticos, y
encuentran su principal aplicacin en oftalmologa.

Cremas de nitrato de plata y sulfodiazina de plata. Usadas

para el tratamiento de quemaduras, han reducido
notablemente la mortalidad derivada de las grandes
quemaduras.

3.3.1.3. Sales y compuestos de cobre.

No tienen aplicacin en Bacteriologa Mdica, pero se

emplean en Agricultura para el control de hongos y algas.

3.3.2. Agentes oxidantes

Los efectos de los agentes oxidantes que se tratan a

continuacin son la inactivacin de protenas enzimticas
(convitiendo los radicales -SH en disulfuros -S-S-). Adems,
los ms potentes tambin atacan radicales amino, el grupo
indol (presente en el triptfano), y la tirosina.

3.3.2.1. Halgenos.

Son bactericidas muy tiles y muy potentes. El iodo no tiene

parangn como desinfectante de la piel, y el cloro no tiene
igual en el tratamiento de aguas.

Yodo: Aparte de su efecto oxidante, se combina

irreversiblemente con residuos de tirosina de las protenas.
Sus principales presentaciones son la tintura de iodo y los
iodforos.
Tintura de iodo: es una mezcla de 2% de I2 + 2% de IK en
alcohol de 70%. Su mximo efecto bactericida lo tiene a
pH<6. Es un magnfico antisptico de la piel, de hecho el
mejor de los conocidos, pero tiene un efecto doloroso y
custico en heridas abiertas.

Iodforos: son mezclas de iodo con agentes tensioactivos

(detergentes), en los que stos actan como portadores del
iodo, al que van liberando lentamente, sin provocar irritacin.
Tambin se emplean en desinfeccin de instalaciones de
industrias alimentarias.

Cloro. El cloro fue uno de los primeros antispticos en usarse

(antes de conocerse su mecanismo, e incluso antes de que se
supiera el autntico papel de los microorganismos en las
enfermedades infecciosas). Holmes (Boston, 1835) y
Semmelweiss (Viena, 1847) lo introdujeron en la prctica de
los mdicos y matronas para impedir la transmisin de la
sepsis puerperal, que era contagiada de mujer a mujer por las
manos de los doctores y de las parteras, y que era una
notable causa de mortalidad de mujeres durante muchos
siglos.

El cloro se presenta bajo las formas de Cl2 (gaseoso),

hipocloritos y cloraminas. El efecto desinfectante se debe a la
liberacin de cloro libre (Cl2); a su vez, el Cl2 reacciona con el
agua para dar cido hipocloroso, que a pH cido o neutro es
un oxidante fuerte:

Cl2 + H2O ---------> ClOH + H+ + Cl-

(ClO)2Ca + H2O ----> Ca++ + H2O + 2 ClO-

(ClO)2Ca + 2H2O ---> Ca(OH)2 + 2 ClOH

La disociacin del cido hipocloroso depende del pH (se

realiza a pH<7)

ClOH -------> H+ + ClO-

Cloro gaseoso: a 1-3 ppm se usa en la cloracin de aguas para bebida y de aguas de piscinas. Su actividad

se ve muy influida (mermada) por la presencia de materia orgnica; por ello, se suele determinar la

demanda de cloro del agua a tratar. Descontada dicha demanda, el cloro gaseoso mata rpidamente (15-30

segundos) a slo 1 ppm.

Soluciones de hipocloritos: hipocloritos de sodio, de calcio o de litio. A 200 ppm de cloro se usan

ampliamente, ya como lquidos (lejas), o en polvo, en industrias alimentarias y lcteas (para desinfectar el

equipamiento y maquinaria que ha de entrar en contacto con los alimentos a procesar), en restaurantes,

hoteles, hospitales, etc.

3.3.2.2. Agua oxigenada.

El perxido de hidrgeno (H O ), en solucin al 3%, se us en otro tiempo como desinfectante, pero est
2 2
actualmente en desuso, debido a que algunas bacterias son resistentes, por la posesin de catalasas y

peroxidasas. Adems, en desinfeccin de heridas abiertas su efecto es muy pobre, porque el agua

oxigenada es descompuesta por la catalasa tisular.

Se emplea en la desinfeccin de lentillas blandas, dejando tiempo suficiente de actuacin. Tambin, en

desinfeccin de superficies inertes y equipos quirrgicos.

3.3.2.3..Permanganato potsico (K MnO ).

3 4

Al 1%, se usa como antisptico uretral.

3.3.2.4.. Acido peractico (CH -CO-O-OH).

3

Es un fuerte agente oxidante. En forma de vapor se usa en la esterilizacin de cmaras de cra de animales

libres de grmenes.

3.3.3..Tinturas de colorantes bsicos

Algunos colorantes derivados de la destilacin del alquitrn de carbn, sobre todo los trifenilmetanos y las

acridinas, no slo tien las bacterias (recurdense las prcticas), sino que tambin actan como

antibacterianos, incluso a pequeas concentraciones. Los colorantes bsicos son los ms efectivos.

En general, su mecanismo depende de su afinidad hacia los grupos fosfato (cidos) presentes en las

nucleoprotenas.
Encuentran su uso como antispticos de lesiones dermatolgicas, infecciones de la piel y pequeas

heridas.

Su principal inconveniente es que muchos de ellos se inactivan en presencia de suero y otras protenas.

3.3.3.1. Colorantes de trifenilmetano:

son derivados de la anilina. Entre ellos se encuentran el verde brillante, el verde malaquita, el violeta de

genciana, el violeta cristal y la fuchsina bsica.

Son muy selectivos hacia bacterias Gram-positivas, sobre las que son efectivos a slo 0,2-2 ppm. En

cambio, las Gram-negativas suelen ser resistentes, debido a su membrana externa.

El efecto antibacteriano se debe a la pseudobase, que es ms lipfila que el respectivo catin, y bajo esa

forma accede al interior celular, donde se une a los grupos fosfato de los cidos nucleicos.

3.3.3.2. Colorantes derivados de la acridina (llamados flavinas, por su color amarillento -Lat: flavus-)

Los ejemplos tpicos son la acriflavina, la proflavina y la tripoflavina. Interfieren en la biosntesis de cidos

nucleicos (intercalndose en la doble hlice del ADN) y protenas. Son bactericidas y bacteriostticos sobre

una gran diversidad de bacterias.

A diferencia de las anilinas, ejercen su accin tambin en presencia de materiales como suero, pus, etc.

Su uso principal es la antisepsia de heridas.

3.3.4. Agentes alquilantes

Son agentes esterilizantes, activos tanto sobre clulas vegetativas como sobre esporas, que ejercen su

efecto letal por su accin alquilante de protenas y cidos nucleicos.

3.3.4.1..Formaldehido (HCHO).

La alquilacin la produce reemplazando hidrgenos lbiles de ciertos grupos qumicos (-NH , -OH, -COOH y
2
-SH), produciendo:

hidroximetilaciones
condensaciones (entrecruzamientos).
Usos comerciales:

como gas, en la descontaminacin de habitaciones;

como formalina (solucin acuosa al 35%);
como paraformaldehido (polmero slido de 91-99% de pureza).
La formalina se emplea para preservar tejidos, en lquidos de embalsamamiento, y al 0,2-0,4% en la

preparacin de vacunas de virus.

3.3.4.2.Glutaraldehido.

Es menos txico y ms potente que el formaldehido, y no se afecta por materiales con protenas.Cada vez

se emplea ms como esterilizante fro de instrumental quirrgico. Es el nico recomendado para esterilizar

equipamiento de terapia respiratoria.

3.3.4.3. Oxido de etileno.

Tiene un efecto similar al del formaldehido: Sustituciones y entrecruzamientos irreversibles en grupos

amino, sulfhidrilo, etc., de protenas. Tambin reacciona con grupos fosfato y anillos nitrogenados de los

cidos nucleicos.

Es un agente empleado como esterilizante gaseoso, aunque es de accin lenta. Se emplea cuando no se

puede recurrir a la esterilizacin por calor: esterilizacin de material de plstico, drogas, ciertos productos

biolgicos, equipamiento electrnico. La operacin se realiza en cmaras parecidas al autoclave. Sin

embargo, es un mtodo caro y exhibe ciertos riesgos: presenta accin vesicante y toxicidad para el hombre

(mutgeno y carcingeno).

3.3.4.4. -propionil-lactona.

Es 25 veces ms activa que el formaldehido. Acta como gas en presencia de 80-90% de humedad relativa,

aunque es poco penetrante.

BIBLIOGRAFIA

FRANKLIN, T.J., G.A. SNOW (1989): Biochemistry of antimicrobial action (4th edition). Chapman and Hall,

Londres. Para los contenidos del presente tema, se recomienda el captulo 3.

MAURER, I.M. (1969): A test for stability and long-term effectiveness in disinfectants. Pharm. J. 203: 529-

534.

MYERS, T. (1988): Failing the test: germicides or use dilution technology? ASM News 54: 1921.

actualizado el 17 de agosto de 1998

1998 ENRIQUE IAEZ PAREJA. Prohibida su reproduccin, salvo con fines educativos.

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