Laboratorio 4: AMINOCIDOS: CURVAS DE TITULACIN.

CARDENAS CAMACHO JESSICA1, CRUZ PARRADO KAREN YELITZA2, HURTADO SENZ

ANDRES AUGUSTO2
1 Universidad de los Llanos, Facultad de Ciencias Bsicas e Ingeniera,
Colombia. Grupo Bioqumica. Cod 164003410.
2 Universidad de los Llanos, Facultad de Ciencias Bsicas e Ingeniera,
Colombia. Grupo Bioqumica. Cod 164003308.
3 Universidad de los Llanos, Facultad de Ciencias Bsicas e Ingeniera,
Colombia. Grupo Bioqumica. Cod 164003415.

RESUMEN

En esta prueba de laboratorio se usaron 3 muestras de aminocidos (Lisina, Glicina y cido), a

cada aminocido se le realiz la prueba de titulacin; se tom 50 ml de cada aminocido y se
hall su respectivo pH inicial. Para esta prueba en particular se manej nicamente el cido
clorhdrico (HCl) como reactivo para las respectivas titulaciones de las muestras de
aminocidos. Una vez se realizaron los procedimientos se registraron los datos y se dise la
curva de titulacin a cada muestra de aminocido. Debido al resultado satisfactorio obtenido de
la primera titulacin, no hubo necesidad de realizar un duplicado a las pruebas. Con la titulacin
se obtuvo el punto isoelctrico de cada muestra usada, as como se evidenci la caracterstica
anfotrica de los aminocidos.
Palabras clave: aminocido, titulacin, Lisina, Glicina, cido, punto isolectrico, anftero.

INTRODUCIN

Aminocidos. Son moleculas que tienen como caracterstica general el hecho de poseer un
carboxilo libre y un grupo amino, situado en el carbono alfa con respecto al carboxilo. En todos
los aminocidos alfa que forman las protenas, el grupo amino-alfa es un grupo primario, es
decir que no tiene sustituyentes. La nica excepcin ocurre con la prolina, que es un
iminocido, ya que su grupo amino es secundario (monosustituido -NH-). Los aminocidos
difieren nicamente entre s por las caractersticas del resto de su molcula o cadena lateral (R)
(Pea et al 1988), de manera que su forma general es:
TITULACIN DE AMINOCIDOS: Como se muestra en la estructura anterior, un aminocido
presenta en su molcula, como mnimo, un grupo -amino y un grupo -carboxilo. Estos grupos
pueden protonarse o desprotonarse, dependiendo del pH del medio:
El grupo -carboxilo se desprotona a un pH alrededor de 2 (en este valor de pH, el grupo
amino se encuentra protonado).
El grupo -amino se desprotona a un pH alrededor de 9.

Para conocer con certeza el valor del pH al cual se desprotonan los dos grupos de un
aminocido, se utilizan los valores de las constantes de equilibrio para la ionizacin de la
molcula, esto es, la pKa respectiva para cada grupo. As, el pH al cual se desprotona el grupo
-carboxilo es el valor de la pKa, (o pK1), y el pH al cual se desprotona el grupo -amino es el
valor de la pKa2 (o pK2). Algunos aminocidos presentan grupos ionizables en su cadena lateral
R, como el -OH en la tirosina, el -COOH en el cido glutmico, el -NH2 en la lisina y el -SH en la
cistena; en estos casos, el pH al cual se desprotonan los grupos corresponde al valor de la
pKR. Siete de los veinte aminocidos tienen las cadenas laterales fcilmente ionizables. (ver
Anexo 1: tabla 4: aminocidos). (Quesada 2007).

Los valores de las pK de un aminocido pueden determinarse a partir de una curva de titulacin
cido-base. En una titulacin cido-base, se adiciona cido (o base) a un volumen determinado
de una solucin de concentracin conocida de base (o cido). La curva de titulacin se
construye al graficar el pH de la solucin resultante despus de cada adicin (en el eje de las
ordenadas) vs los ml agregados de cido o de base. (Quesada 2007).

Para el desarrollo del presente informe se realiz la titulacin a tres (3) aminocidos con el
propsito de comprobar el carcter anfotrico de los aminocidos y determinar mediante curvas
de titulacin; los valores de pK de los grupos ionizables y se hall el punto isolectrico de los
aminocidos. (Quesada 2007).

METODOLOGA

En un vaso de precipitados de 150 ml, se depositaron 50 ml de la solucin de aminocido (0,1

M). Para la medicin del pH se requiri de un pHmetro del cuel se calibr y determin el pH
inicial de la solucin (aminocido).
Para la titulacin se emple una bureta y como titulante se utiliz cido clorhdrico (HCl) (0.198
N). Desde la bureta se adicion cada vez 1 ml del cido a la solucin del aminocido y se
determin el pH por cada adicin. El procedimiento se continu con la adicin del cido hasta
que se alcanz un pH 1,5 aproximadamente. Los datos se registraron en computador y luego se
dise la grfica de los registros obtenidos.
Cada grupo de laboratorio realiz la titulacin con un aminocido diferente. Por lo que se realiz
la titulacin a 3 aminocidos Lisina, Glicina y cido. A partir de las curvas de titulacin
determin los valores de pK y se calcul los puntos isoelctricos.

Nota: El procedimiento para cada una de las soluciones a titular se requera de realizar una
titulacin duplicado. Sin embargo los resultados de la primera fueron satisfactorios por lo que se
obvi realizar el duplicado.
 RESULTADOS

Tabla No 1. Titulacin de aminocido: Lisina.

Volumen HCl (ml) pH 26,1 8,415 52 1,846
0 10,334 27 8,193 53 1,819
1 10,269 28,1 7,981 54 1,788
2 10,2 29 7,322 55 1,759
3 10,144 30 5,183 56 1,73
4,3 10,075 31 3,36 57 1,706
5 10,035 32 3,128 58 1,677
6 9,964 33 2,963 59 1,652
7 9,89 34,1 2,842 60 1,632
8 9,822 35 2,73 61 1,603
9,1 9,747 36 2,623 62 1,584
10,1 9,684 37,1 2,56 63,1 1,561
11,1 9,617 38 2,492 64 1,541
12,1 9,554 39,1 2,423 65,1 1,522
13,1 9,489 40 2,367 66 1,505
15 9,367 41 2,309 67,1 1,488
16 9,306 42 2,265 68 1,472
17,1 9,237 43 2,206 69,1 1,454
18,1 9,162 44 2,16 70 1,441
19,1 9,099 45 2,118 71 1,427
20 9,03 46 2,07 72 1,412
21 8,951 47 2,039 73 1,399
22 8,863 48,1 1,992 74 1,383
23 8,766 49 1,957 75 1,372
24 8,662 50 1,922
25 8,536 51 1,876
Observacin: Aunque el pH necesario para el procedimiento se alcanz al llegar a los 62 ml de
adicin del cido; se continu con el proceso con el objetivo de verificar el mnimo pH obtenido
al alcanzar los 75 ml del cido titulante
 12

10

0
0 10 20 30 40 50 60 70 80

Tabla No 2. Titulacin de aminocido: Glisina.

23 9,58 48 2,29
Volumen HCl (ml) pH
24 9,49 49 2,23
0 12,43 25 9,42 50 2,19
1 12,4 26 9,33 51 2,14
2 12,34 27 9,21 52 2,09
3 12,28 28 9,11 53 2,05
4 12,19 29 8,96 54 2
5 12,07 30 8,82 55 1,96
6 11,94 31 8,6 56 1,92
7 11,72 32 8,26 57 1,88
8 11,43 33 7,57 58 1,84
9 11,11 34 4,23 59 1,8
10 10,91 35 3,63 60 1,77
11 10,69 36 3,38 61 1,73
12 10,53 37 3,2 62 1,7
13 10,42 38 3,05 63 1,67
14 10,31 39 2,93 64 1,64
15 10,22 40 2,83 65 1,61
16 10,13 41 2,75 66 1,59
17 10,04 42 2,67 67 1,56
18 9,98 43 2,59 68 1,54
19 9,95 44 2,52 69 1,52
20 9,8 45 2,46 70 1,49
21 9,73 46 2,4 71 1,47
22 9,65 47 2,34 72 1,45
 pH
14

12

10

0
0 10 20 30 40 50 60 70 80

Tabla No 3. Titulacin aminocido: cido glutmico

Volumen HCl (ml) pH 23 9.373 48 3.879
0 12.270 24 9.286 49 3.803
1 12.217 25 9.197 50 3.728
2 12.140 26 9.094 51 3.649
3 12.057 27 8.976 52 3.565
4 11.948 28 8.841 53 3.477
5 11.806 29 8.648 54 3.381
6 11.617 30 8.396 55 3.280
7 11.315 31 7.876 56 3.185
8 10.988 32 6.135 57 3.088
9 10.722 33 5.518 58 2.997
10 10.539 34 5.224 59 2.908
11 10.392 35 5.029 60 2.821
12 10.269 36 4.877 61 2.745
13 10.166 37 4.752 62 2.674
14 10.077 38 4.650 63 2.604
15 9.985 39 4.560 64 2.537
16 9.907 40 4.473 65 2.481
17 9.930 41 4.394 66 2.427
18 9.753 42 4.318 67 2.371
19 9.679 43 4.241 68 2.322
20 9.604 44 4.168 69 2.273
21 9.529 45 4.099 70 2.224
22 9.454 46 4.026 71 2.183
47 3.954 72 2.141
 73 2.101 83 1.776 93 1.562
74 2.059 84 1.750 94 1.546
75 2.025 85 1.726 95 1.530
76 1.975 86 1.702 96 1.515
77 1.959 87 1.676 97 1.500
78 1.920 88 1.654 98 1.481
79 1.888 89 1.636 99 1.469
80 1.859 90 1.617 100 1.458
81 1.828 91 1.599
82 1.800 92 1.580

pH
14.000

12.000

10.000

8.000

6.000 pH

4.000

2.000

0
0 20 40 60 80 100 120

DISCUSIN

Los puntos en la curva de titulacin en los cuales no se produce un cambio de pH, a pesar del
aumento en la concentracin, indican los valores de pK. En estos puntos el aminocido tiene su
mayor capacidad amortiguadora.

Asimismo, en la curva de titulacin es posible indicar el punto isoelctrico, valor de pH en el que

la carga neta del aminocido es cero. En este punto, pequeos cambios en la concentracin de
equivalentes cidos o bsicos en la solucin ocasionan cambios bruscos de pH; por tanto, el
aminocido no tiene capacidad amortiguadora.

Esta caracterstica de los aminocidos de ceder o aceptar protones (comportarse como cidos o
bases, de acuerdo con el pH en que se encuentren) hace que se denominen sustancias
anfteros. Los pptidos y las protenas, por estar integrados por aminocidos, tambin son
anfteros.

CONCLUSIONES

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

ANEXOS