Toxicologa - Extraccin alcalina de txicos revelado por

cromatografa de capa fina

UNIVERSIDAD MARIA AUXILIADORA - UMA

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUMICA

Prctica numero N 6

Extraccin alcalina de txicos revelada por cromatografa de capa fina

CURSO: TOXICOLOGA

INTEGRANTE:
ALCEDO MORA, CARLOS

LIMA- PER
2016

I. INTRODUCCIN

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En esta prctica se hizo la cromatografa de capa fina con las muestras

biolgicas de hgado (metaminofox), sangre (carbofurano), estas
muestras ya estaban extradas anteriormente con cloroformo. Se trabaj
con el medio 19 de acetona) sali los resultados esperados. No se hall
el Rf porque el bombeador se malogro, no sala el fast blue para
revelarla muestra.

II. OBJETIVOS

Identificar con el reactivo de cloruro de paladio manchas amarilla

Identificar con el reactivo fax blue manchas fucsia.

Identificar los txicos cidos por el mtodo de cromatografa d

capa fina.

III. MARCO TERICO

La cromatografa

Es una tcnica para separacin de los distintos componentes de una

mezcla, permite la separacin de trozos de impurezas o bien de las
fracciones importantes. El fundamento de la cromatografa es la
separacin de diferentes tipos de molculas cuando desciende por una
columna o atraviesa una delgada capa de material inerte.
En ambos casos, existe una sustancia que proporciona una superficie
elevada y que interacciona fsicamente con el compuesto a analizar. Si
las molculas son adsorbidas por la superficie, el fenmeno se llama
cromatografa de adsorcin, y si se disuelven en una delgada superficie
lquida, cromatografa de reparto.
El nacimiento de la cromatografa de absorcin se remonta a 1903,
cuando el botnico ruso Mikhail S. Tswett estableci los primeros
fundamentos. Este cientfico observ que filtrando soluciones que
contenan pigmentos vegetales a travs de una columna de carbono de
calcio en polvo fino, los pigmentos quedaban retenidos.
Haciendo pasar por la columna otro disolvente puro se consegua la
separacin de los pigmentos, los cuales aparecan en la columna en
varias zonas de diferente color que se distanciaban cada vez ms una

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de la otra, mientras el disolvente atravesaba la columna, la vistosa

cromatografa, que realmente ha sido poco afortunada, ya que en la
actualidad se emplea esta tcnica para separar fraccin es incoloras en
la mayora de los casos.

Es un procedimiento fsico-qumico que consiste en separar los

componentes o sustancias integrantes de una mezcla en movimiento por
medio de reparto o adsorcin sobre una superficie estacionaria o
inmvil. La razn por la que es posible conseguir separaciones difciles
de lograr por otros mtodos estriba en que, pequeas diferencias en el
coeficiente de reparto o en la adsorcin desorcin de cada uno de los
componentes se va multiplicado a lo largo del sistema.

Se pueden establecer dos mecanismos:

1. Reparto o participacin: Es la distribucin de una sustancia o
mezcla de sustancias entre la fase mvil y la fase estacionaria soportada
sobre un slido adecuado.
2. Adsorcin: Fenmeno de superficie que consiste en el aumento de
concentracin de una sustancia en la superficie de un slido. El proceso
inverso, o sea la separacin de las molculas adsorbidas en la superficie
del slido, se denomina desorcin.
La fuerza con que se adsorbe un compuesto aislado depende de la
polaridad de la molcula, de la actividad del adsorberte y de la polaridad
del solvente.

PARTES DE UN SISTEMA CROMATOGRAFICO

1. Fase mvil: Lo constituyen los solventes, que son sustancias fluidas

de diferente polaridad, ejemplo: metanol, cloroformo, etanol, etc. La
polaridad de la fase mvil est relacionada con su capacidad de elucin
o desorcin. Los solventes deben tener elevado grado de pureza.
2. Fase estacionaria o soporte: Lo constituyen las sustancias
adsorbentes que generalmente se depositan sobre la placa de vidrio o
columna de vidrio, en el caso de la C. en papel, el papel Whatman. Debe
ser insoluble en el disolvente que se va a utilizar para la separacin y no
debe reaccionar con las sustancias que se van a separar.
3. Cmara de saturacin: que es un recipiente con una tapa que cierra
hermticamente donde se realiza el cromatograma.
4. Reveladores: Si todos los compuestos son coloreados, bastar la
inspeccin ocular para distinguir las manchas, pero en la mayora de los
casos, los compuestos son incoloros y por ello no visibles en el
cromatograma, siendo necesario utilizar mtodos

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fsicos (Luz UV) o qumicos, como los vapores de Iodo, u otros reactivos
especiales que permitan hacer visible.
5. Aplicadores: son micropipetas utilizadas en la aplicacin o
sembrado de las sustancias o cromatografiar.

Rf: emplea el Rf (Retention factor), el cual se define como el cociente de

dividir el recorrido de la sustancia por el disolvente, esto es, la distancia
media desde el origen hasta el centro de la mancha (X) dividida por la
distancia que media desde el origen hasta el frente del disolvente.

IV. MATERIALES

Cmara de saturacin

Reactivos

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Plancha de slice gel

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V. METODOLGIA DE PROCEDIMIENTO

1 Se hizo la seleccin de las muestras quienes son del grupo

carbofurano (muestra biolgica sangre, metaminofox (muestra
biolgica de hgado).

2 Se sembr en la placa de la slice gel las muestras, estndar de

carbofurano, muestra de rgano fosforado, muestra rgano de
carbofurano, estndar de rgano fosforado.

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3 Se prepar el medio 19

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4 Se introdujo la plancha de slice gel ya sembrado

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5 Se esper un tiempo hasta que la fase estacionario suba una

distancia adecuada para revelarlo en la cmara de aluminio.

6 Revelamos primero con el reactivo de cloruro de paladio.

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7 Luego seguimos con el reactivo fast blue, y finalmente le

agregamos vainillina luego lo llevamos a una cocina elctrica para
secarlo y observar un color fucsia.

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VI. OBSERVACIONES

se tuvo los reactivos adecuados para trabajar en la prctica.

El medio 19 fue de gran ayuda para solucionar estos problemas de
reactivos en la prctica anterior.

VII. CONCLUSIONES

Si se observ las manchas amarillas con el reactivo de cloruro de

paladio, tambin mancha con el reactivo fax blue (manchas fucsia) pero
por goteo ya se malogro el bombeador. Nos falta hallar el Rf por el
inconveniente de la ltima etapa de revelado por el reactivo fast blue.

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VIII. BIBLIOGRAFA

A. Khoo SH, Bond J, Denning DW. Administering arnphotericin B-a

practica1 approach. J Antimicrob Chemother 1994;33:203-13.

B. A.I. Vogel; A.R. Tatchell; B.S. Furnis; A.J. Hannaford; P.W.G.

Smith. Vogel's Textbook of Practical Organic Chemistry (5
edicin)

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