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NTE INEN 2141 (1998) (Spanish): Conservas

vegetales. Determinacin cualitativa y
cuantitativa del cido benzico y benzoatos
alcalinos
 INSTITUTO ECUATORIANO DE NORMALIZACIN
Quito - Ecuador

NORMA TCNICA ECUATORIANA NTE INEN 2 141:98

CONSERVAS VEGETALES. DETERMINACIN CUALI-

TATIVA Y CUANTITATIVA DEL CIDO BENZICO Y
BENZOATOS ALCALINOS.

Primera Edicin

CANNED VEGETABLES. QUALITATIVE AND QUANTITATIVE DETERMINATION OF BENZOIC ACID AND ALKALI
BENZOATES.

First Edition

DESCRIPTORES: Productos agroindustriales, conservas vegetales, anlisis qumico, determinacin del contenido de cido
benzico, mtodo cualitativo, anlisis por volumetra, absorcin espectromtrica molecular.
AL 02.01-329
CDU: 664.1.635:547.581.2:543.42
CIIU:3113
ICS: 67.080.20
CDU: 664.1.635:547.581.2:543.42 CIIU: 3113
ICS: 67.080.20 AL 02.01-329

Norma Tcnica CONSERVAS VEGETALES. NTE INEN

Ecuatoriana DETERMINACIN CUALITATIVA Y CUANTITATIVA 2 141:98
Voluntaria DEL CIDO BENZICO Y BENZOATOS ALCALINOS 1998-07

1. OBJETO

1.1 Esta norma establece los mtodos de ensayo para determinar cualitativa y cuantitativamente el cido
benzico y benzoatos alcalinos de los productos elaborados a partir de frutas y vegetales.

2. ALCANCE

2.1 Los mtodos son aplicables a productos elaborados de frutas y vegetales que contienen cido
benzico y benzoatos alcalinos, especialmente a jugos de frutas, salsa y concentrado de tomate, jaleas y
mermeladas, que contengan o no sal, y a productos preservados con cido lctico y vinagre.

3. MTODO CUALITATIVO

3.1 Fundamento y resumen

a) Fundamento. El mtodo se basa en la reaccin del cido benzico con el cloruro frrico, dando un
precipitado de color rojizo que indica la presencia de cido benzico.

b) Resumen. El mtodo consiste en la homogeneizacin del producto, seguido de una dilucin y

acidificacin de la porcin de ensayo; extraccin del cido benzico mediante ter etlico y posterior
evaporacin de la capa etrea; se alcaliniza con amonaco, se elimina el exceso de amonaco y se
agrega cloruro frrico.

3.2 Reactivos o materiales

3.2.1 Solucin (1 + 3) de cido clorhdrico.

3.2.2 ter etlico, grado reactivo.

3.2.3 ter de petrleo, fraccin que destila abajo de 60C.

3.2.4 Solucin acuosa neutra al 0,5 % de cloruro frrico.

3.2.5 Solucin (1 + 9) de hidrxido de amonio.

Para la prueba de Mohler:

3.2.6 Solucin aproximadamente al 10% de NaOH.

3.2.7 cido sulfrico concentrado, obtenida por dilucin de 2 volmenes de cido sulfrico concentrado, 20
= 1,84 g/cm3, con un volumen de agua.

3.2.8 Nitrato de potasio cristalizado.

3.2.9 Todos los reactivos deben ser de pureza analtica reconocida, y el agua usada debe ser destilada.

(Contina)
_________________________________________________________________________________________________________
DESCRIPTORES: Productos agroindustriales, conservas vegetales, anlisis qumico, determinacin del contenido de cido benzico, mtodo
cualitativo, anlisis por volumetra, absorcin espectromtrica molecular.

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NTE INEN 2 141 1998-07

3.3 Equipo
3
3.3.1 Embudo de decantacin, de 250 cm ,
3
3.3.2 Probeta, de 50 cm ,

3.3.3 Cpsula de porcelana,

3.3.4 Bao Mara,

3.3.5 Centrfuga,

3.3.6 Instrumental de laboratorio,

Para la prueba de Mohler:

3.3.7 Bao de glicerina.

3.4 Procedimiento

3.4.1 Preparacin de la muestra.

3.4.1.1 Lquidos no alcohlicos. Muchos lquidos pueden ser sometidos directamente a la extraccin segn
3.4.2, sin ningn tratamiento adicional.

Si durante la extraccin se forman emulsiones difciles de separar, transferir con una pipeta volumtrica
100 cm3 de la muestra a un matraz volumtrico de 250 cm3, agregar aproximadamente 5 g de cloruro de
sodio, agitar hasta dilucin completa de la sal, ajustar el volumen con alcohol etlico de 95% (v/v), volver a
agitar vigorosamente, dejar reposar durante 10 minutos, agitando ocasionalmente, filtrar y luego tratar una
alcuota del filtrado de acuerdo a lo indicado en 3.4.1.2.

3.4.1.2 Lquidos alcohlicos. A un volumen de 200 cm3 de la muestra alcalinizar en presencia de papel
indicador, mediante la adicin de una solucin aproximadamente al 10% de hidrxido de sodio; luego
evaporar en bao de Mara hasta que el volumen se reduzca aproximadamente a 1/3 del volumen original
y volver con agua destilada al volumen original de 200 cm3, filtrar si es necesario.

3.4.1.3 Sustancias slidas y semislidas. Moler y homogeneizar bien la muestra, transferir una cantidad
conveniente de 50 a 200 g de acuerdo a la consistencia de la muestra a un matraz volumtrico de 500
cm3, agregar agua destilada hasta un volumen aproximadamente de 400 cm3 y agitar hasta lograr una
mezcla homognea. Agregar de 2 a 5 g de CaCl2 y agitar hasta que se disuelva. Alcalinizar en presencia
de papel indicar con una solucin aproximadamente al 10% de hidrxido de sodio; diluir con agua hasta la
marca, agitar vigorosamente, dejar en reposo durante no menos de 2 h agitando ocasionalmente y luego
filtrar.

3.4.2 Procedimiento analtico

3
3.4.2.1 Colocar en el embudo de decantacin 50 cm de la muestra original o un volumen equivalente del
extracto acuoso preparado como se indic en 3.4, agregar 1/10 de dicho volumen de la solucin (1 + 3) de
cido clorhdrico y extraer con 50 cm3 de ter etlico, agitar nuevamente y luego dejar decantar hasta
separacin en dos capas.

3.4.2.2 Si la mezcla se emulsifica, agregar de 10 a 15 cm3 de ter de petrleo y agitar. Si este tratamiento
no rompe la emulsin, centrifugar o dejar reposar hasta que una porcin considerable de la capa acuosa se
separe; se elimina esta ltima, agitar vigorosamente y dejar separar otra vez.
3
3.4.2.3 Lavar dos veces la capa de ter con porciones de 5 cm de agua, cada vez, eliminando sta
despus de cada lavado; luego transferir la fase etrea a la cpsula de porcelana, la cual se coloca en
bao de Mara, cuando se haya separado la mayor parte del ter, retirar y dejar evaporar el resto a
temperatura ambiente.

(Contina)

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3.4.2.4 Si hay cantidades apreciables de cido benzico, ste se cristaliza en forma de hojitas las cuales
producen un olor caracterstico con el calentamiento. El residuo cristalino disolver en agua caliente y dividir
en dos porciones, en las que se realizan las pruebas siguientes:

1. Prueba con cloruro frrico. Una de las porciones de 3.4.2.4 alcalinizar con pocas gotas de hidrxido de
amonio, expeler el exceso de amonio por evaporacin y luego disolver el residuo en pocos centmetros
cbicos de agua caliente, filtrar si es necesario y agregar pocas gotas de la solucin al 0,5% de cloruro
frrico. Un precipitado color rojizo de benzoato frrico indica la presencia de cido benzico.

2. Prueba modificada de Mohler. Esta prueba se realiza cuando la muestra contiene fenolftaleina, la cual
interfiere en la prueba con cloruro frrico. En este caso se procede de la siguiente manera:

a) A la otra porcin de 3.4.2.4 agregar de 1 a 2 gotas de una solucin aproximadamente al 10% de

NaOH y evaporar hasta sequedad.

b) Al residuo agregar 5 a 10 gotas de H2SO4, un pequeo cristal de KNO3 y calentar durante 10

minutos en un bao de glicerina a una temperatura de 120 a 130C; cuidar que el bao no
sobrepase la temperatura de 130C.
3
c) Dejar enfriar, agregar 1 cm de agua caliente, aadir amonaco hasta completa alcalinidad y hervir
la solucin para descomponer el NH4NO2 que puede formarse.

d) Enfriar y agregar unas gotas de solucin incolora, recin preparada de (NH4)2S, teniendo cuidado de
que no se mezclen las dos capas de lquido, la formacin de un anillo caf rojizo entre las dos capas
lquidas indica la presencia de cido benzico.

NOTA. Al mezclar las dos capas el color se difunde a travs de la solucin y al calentar cambia a un color amarillo verdoso; ste cambio de
coloracin, debido a la presencia de cido benzico no se produce cuando se trata de cido saliclico o de cido cinmico, ya que estos dos
cidos forman compuestos coloreados que no se destruyen por el calentamiento.

4. MTODO CUANTITATIVO POR VOLUMETRA

4.1 Fundamento y resumen

a) Fundamento. El mtodo se basa en la dosificacin del cido benzico por alcalimetra.

b) Resumen. Consiste en extraer el cido benzico en medio cido con cloroformo, eliminacin del
solvente por calentamiento, disolucin del residuo en alcohol neutro y titulacin del mismo con solucin
normalizada de hidrxido de sodio.

NOTA. La presencia de vainillina interfiere con ste mtodo, dando resultados errneos.

4.2 Reactivos y materiales

4.2.1 Cloruro de sodio pulverizado

4.2.2 Lechada de cal, suspencin acuosa de hidrxido da calcio, preparada con xido de calcio
recientemente apagado, suspencin 1 en 3.

4.2.3 Solucin al 10% de hidrxido de sodio

4.2.4 Solucin saturada de cloruro de sodio

4.2.5 Solucin (1 + 3) de cido clorhdrico

4.2.6 Cloroformo

(Contina)

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4.2.7 Alcohol neutralizado a la fenolftaleina

4.2.8 Solucin alcohlica al 0,1 % de fenolftaleina

4.2.9 Solucin 0,05 N de hidrxido de sodio

4.3 Equipo

4.3.1 Balanza analtica, con sensibilidad 0.1 mg

4.3.2 Pipetas volumtricas de 100 cm3

4.3.3 Matraz volumtrico, de 500 cm3

4.3.4 Varillas de vidrio

4.3.5 Cpsulas de porcelana

4.3.6 Erlenmeyer de 300 cm3

4.3.7 Desecador, con cido sulfrico concentrado

4.4 Procedimiento

4.4.1 Preparacin de la muestra

4.4.1.1 Mtodo general

a) Mezclar perfectamente la muestra, moler si es slida o semislida y transferir 150 cm3 o 150 g al
matraz volumtrico de 500 cm3.

b) Agregar suficiente cloruro de sodio pulverizado para saturar el agua presente en la muestra.

c) Alcalinizar al papel tornasol con la solucin al 10% de hidrxido de sodio o con la lechada de cal y diluir
a 500 cm3 con la solucin saturada de cloruro de sodio.

d) Agitar perfectamente y dejar en reposo por lo menos durante 2 horas agitando peridicamente y luego
filtrar.

NOTA 1. Si la muestra contiene grandes cantidades de grasa que puede contaminar el filtrado, agregar a ste una pequea cantidad de la
solucin al 10% de NaOH y extraer con ter etlico antes de proceder como se indica en 4.4.2.

NOTA 2. Si la muestra contiene alcohol, proceder como se indica en 4.4.1.4.

4.4.1.2 Salsa de tomate

a) A 150 g de la muestra agregar 15 g de cloruro de sodio pulverizado y transferir la mezcla al matraz

3
volumtrico de 500 cm enjuagando el recipiente donde se hizo la pesada con aproximadamente 150
3
cm de la solucin saturada de cloruro de sodio.

b) Alcalinizar ligeramente al papel tornasol con la solucin al 10% de hidrxido de sodio y completar al
volumen con la solucin saturada de cloruro de sodio.

c) Dejar en reposo por lo menos 2 horas, agitando frecuentemente, luego pasar a travs de una bolsa de
muselina gruesa ejerciendo cierta presin, el lquido escurrido filtrar a travs de papel filtro.

(Contina)
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4.4.1.3 Jaleas y mermeladas

a) Digerir 150 g de muestra en aproximadamente 300 cm3 de solucin saturada de cloruro de sodio.

b) Agregar 15 g de cloruro de sodio pulverizado y luego alcalinizar al papel tornasol con lechada de cal.
3
c) Transferir al matraz volumtrico de 500 cm y completar el volumen con la solucin saturada de cloruro
de sodio.

d) Dejar en reposo durante no menos de 2 horas, agitando frecuentemente, luego centrifugar si es

necesario y filtrar por papel filtro.

4.4.1.4 Productos conteniendo alcohol, tales como sidra, vinos y similares

3
a) A 250 cm de muestra alcalinizar al papel tornasol con la solucin al 10% de NaOH y evaporar en un
bao de Mara hasta aproximadamente un volumen de 100 cm3.

b) Transferir a un matraz volumtrico de 250 cm3, agregar 30 g de cloruro de sodio pulverizado, agitar
3
hasta que se disuelva y diluir al volumen de 250 cm con la solucin saturada de NaCl.

c) Dejar en reposo durante no menos de 2 horas agitando frecuentemente y luego filtra en papel filtro.

4.4.2 Procedimiento analtico

4.4.2.1 Transferir por medio de una pipeta, una alcuota de 100 a 200 cm3 del filtrado preparado de
acuerdo a lo indicado en 4.4 al embudo de decantacin y neutralizar al papel tornasol con la solucin (1 +
3) de cido clorhdrico, agregando 5 cm3 de exceso.

4.4.2.2 Extraer cuidadosamente con cloroformo, usando porciones sucesivas de 70, 50, 40 y 30 cm3. Para
evitar la formacin de una emulsin agitar cuidadosamente despus de cada adicin, aplicndole un
movimiento rotativo; por lo general, la capa de cloroformo se separa rpidamente despus de dejarlo
reposar unos pocos minutos.

NOTA. Si se forma emulsin, se puede romper sta mediante una de las siguientes maneras:

a) Por agitacin de la capa de cloroformo con una varilla de vidrio.

b) Pasando la emulsin a un segundo embudo de decantacin y dndole a ste 1 2 movimientos bruscos de uno a otro extremo del
embudo; o bien,

c) Por centrifugacin durante unos pocos minutos.

4.4.2.3 Debe tenerse cuidado al drenar la solucin de cloroformo que est lo ms clara posible despus de
cada extraccin sucesiva; es decir, no debe drenarse ninguna porcin de emulsin con la capa de
cloroformo. Si se toma esta precaucin el extracto de cloroformo no necesita ser lavado.

4.4.2.4 Transferir los extractos combinados a una cpsula de porcelana, lavar el embudo de decantacin
varias veces con una pequea cantidad de cloroformo, y evaporar a sequedad a la temperatura ambiente
en una corriente de aire seco.
3
NOTA. El extracto tambin puede transferirse del embudo de dacantacin a un Erlenmeyer de 300 cm , lavando el embudo con 3 porciones de 5
3
a 10 cm cada una de cloroformo, luego destilar muy lentamente a baja temperatura hasta un volumen aproximado a 1/4 del volumen original,
3
transferir el residuo a la cpsula de porcelana, lavando el matraz con 3 porciones de 5 a 10 cm de cloroformo, y finalmente evaporar a sequedad
a la temperatura ambiente en una corriente de aire seco.

4.4.2.5 Secar el residuo durante la noche o hasta que ningn olor de cido actico se pueda detectar
cuando se trate de una muestra de salsa de tomate, colocando la cpsula en un desecador que contenga
cido sulfrico.

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4.4.2.6 Disolver el residuo de cido benzico en 30 a 50 cm3 de alcohol neutralizado a la fenolftaleina,

agregar aproximadamente 1/4 de su volumen de agua destilada, una o dos gotas de la solucin indicadora
de fenolftaleina y titular con la solucin 0,05 N de NaOH.

4.4.2.7 Esta determinacin efectuar por duplicado.

5. CLCULOS

5.1 El contenido de cido benzico y benzoatos alcalinos en la muestra se expresa como benzoato de
sodio anhidro, en porcentaje en masa, y se obtiene de acuerdo a la siguiente frmula:

0,144 x V x N V1
Ab = x - x 100
m V2

En donde:

Ab = Porcentaje en masa de cido benzico y benzoatos alcalinos, expresado como benzoato

de sodio anhidro.

V = Volumen de la solucin de NaOH, gastado en la titulacin, en cm3

V1 = Volumen del filtrado final en la preparacin de la muestra, en cm3, ver 4.4. Los valores
son los siguientes:

- mtodo general, (ver 4.4.1.1), V1 = 500

- salsa de tomate, (ver 4.4.1.2), V1 = 500

- jaleas y mermeladas, (ver 4.4.1.3), V1 = 500

- sidra, vinos y similares, (ver 4.4.1.4), V1 = 250

V2 = Alcuota tomada para el ensayo, en cm3, ver 4.4.2.1

N = Normalidad de la solucin de NaOH

m = Masa de la muestra original, en gramos

NOTA 1. En el caso de lquidos alcohlicos, numeral 4.4.1.4, este factor en vez de ser la masa de la muestra original, es el volumen de la
3
muestra original, en cm . En este caso, Ab es porcentaje en masa sobre volumen.
3
NOTA 2. 1 cm de solucin 0,05 N de hidrxido de sodio equivale a 0,0072 g de benzoato anhidro.

5.2 Repetibilidad

5.2.1 La diferencia entre los resultados de dos determinaciones realizadas simultneamente o en rpida
sucesin por el mismo analista, no deber se mayor del 5% del valor medio.

5.2.2 El resultado final ser la media aritmtica de las dos determinaciones, siempre que el requisito de
repetibilidad se haya cumplido.

(Contina)

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6. MTODO DE ABSORCIN ESPECTROMTRICA MOLECULAR

6.1 Alcance. Este mtodo es aplicable con un contenido de cido benzico superior a 200 mg por litro o
kilogramo de producto, y en particular, a jugos de frutas, pur o pasta de tomate, salados o no y a
productos preservados con vinagre o cido lctico.

6.2 Resumen. El mtodo consiste en la extraccin del cido benzico de una muestra de ensayo
acidificada usando ter dietlico, nitracin seguida de reduccin, y reaccin de Moholer modificada con
hidrocloruro de hidroxilamina. Medida espectromtrica de la absorbancia del complejo rojo obtenido.

6.3 Reactivos. Todos los reactivos deben ser de calidad analtica reconocida y el agua a usarse debe ser
destilada.

6.3.1 cido benzico, solucin estndar que corresponde a 1 g de cido benzico por litro.
3
Pesar, con aproximacin de 0,0001 g, 100 mg de cido benzico. Disolver en 25 cm de una solucin de
3
hidrxido de sodio 0,1 mol/l y diluir a 100 cm con agua.

1 cm3 de sta solucin estndar contiene 1 mg de cido benzico.

6.3.2 Solucin de nitracin.

Disolver 23 g de nitrato de potasio en 250 cm3 de cido sulfrico concentrado (20 = 1,84 g/cm3).

6.3.3 Hidrocloruro de hidroxilamina, 20 g/l de solucin.

6.3.4 Solucin de amonaco, concentrado (20 = 0,910 g/cm3).

6.3.5 Solucin de fenolftalena. Disolver 1 g de fenolftalena en 100 cm3 de alcohol al 60 % (v/v).

6.3.6 Hidrxido de sodio, 1 mol/l de solucin.

6.3.7 Hidrxido de sodio, 0,1 mol/l de solucin.

6.3.8 cido sulfrico, solucin al 25 % (m/m).

6.3.9 Solucin Carrez I. Disolver 150 g de ferrohexacianuro II potsico trihidratado [K4Fe(CN)6.3H2O] en

agua y diluir a 1000 cm3.

6.3.10 Solucin Carrez II. Disolver 300 g de sulfato de zinc heptahidratado (ZnSO4.7H2O) en agua y diluir a
1000 cm3.

6.3.11 ter dietlico, recientemente destilado.

6.4 Equipo

Equipo usual de laboratorio, y en particular

6.4.1 Embudos de separacin, de 200 cm3 de capacidad, ajustado con tapones.

3
6.4.2 Pipetas, de 1,2,5,10,25 y 50 cm de capacidad.
3 3
6.4.3 Pipeta, de 2 cm de capacidad, graduada en divisiones de 0,1 cm .

6.4.4 Matraces volumtricos, de 10 y 100 cm3 de capacidad, ajustado con un tapn de vidrio.

6.4.5 Bao de agua caliente.

(Contina)

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6.4.6 Tubos de ensayo, de 1,5 o 2,0 cm de dimetro.

6.4.7 Estufa, capaz de ser controlada 103 2 oC.

6.4.8 Bao de agua, capaz de ser controlado a 20 2 oC.

6.4.9 Bao de agua, capaz de ser controlado a 60 2 oC.

6.4.10 Espectrmetro, adecuado para efectuar medidas a una longitud de onda de 533 nm, con celdas de
trayectoria ptica de 10 mm de longitud.

6.5 Procedimiento

6.5.1 Preparacin de la muestra de ensayo

6.5.1.1 Productos lquidos, mezclar completamente la muestra de laboratorio.

6.5.1.2 Productos semi-densos (pur, etc), mezclar completamente la muestra de ensayo. Prensar una
parte de la muestra a travs de cuatro capas finas de gasa, rechazar las primeras gotas de lquido y usar el
remanente para la determinacin. (Seguir las instrucciones dadas para productos lquidos).

6.5.1.3 Productos espesos, mezclar completamente la muestra de laboratorio.

6.5.2 Porcin de ensayo

6.5.2.1 Productos lquidos, tomar, con una pipeta (6.4.2), 10 cm3 de la muestra de ensayo y transferir a un
embudo de separacin de 200 cm3 (6.4.1).

6.5.2.2 Productos espesos

a) Pesar, con aproximacin de 0,01 g, 10 g de la muestra de ensayo.

b) Clarificacin de la porcin de ensayo, aadir una pequea cantidad de agua a la porcin de ensayo y
alcalinizar aadiendo la solucin de hidrxido de sodio (6.3.6) en presencia de la solucin de
fenolftalena (6.3.5); colocar por 30 min en el bao de agua caliente (6.4.5); despus de enfriar,
transferir a un matraz volumtrico de 100 cm3 , aadir 2 cm3 de la solucin Carrez I (6.3.9) y 2 cm3 de
la solucin Carrez II (6.3.10) y diluir hasta la marca con agua. Dejar en reposo por 30 min y luego
centrifugar o filtrar. Usar esta solucin clarificada para la extraccin (6.5.3).

6.5.3 Extraccin y purificacin de cido benzico

3
6.5.3.1 Productos lquidos. Aadir 2 cm de la solucin de cido sulfrico (6.3.8) a la porcin de ensayo en
el embudo de separacin. Aadir 25 cm3 de ter dietlico (6.3.11), agitar y dejar en reposo hasta
separacin de la fase etrea. Repetir esta extraccin agitando una vez mas con 25 cm3 de ter dietlico.
combinar las dos fases etreas.

Extraer el cido benzico de la fase etrea sin lavar con agua, aadiendo 2 cm3 de la solucin de hidrxido
de sodio (6.3.6) en presencia de una gota de solucin de fenolftalena (6.3.5) y agitando por 5 min. Separar
la fase alcalina. Luego extraer dos veces agitando con 2 cm3 de la solucin de hidrxido de sodio (6.3.7).
3
Recolectar los extractos alcalinos en un matraz volumtrico de 10 cm (6.4.4) y diluir hasta la marca con
agua.

6.5.3.2 Productos espesos. Aadir 50 cm3 de la solucin de cido sulfrico (6.3.8) a 50 cm3 de la solucin
obtenida despus de la clarificacin (b). Aadir 50 cm3 de ter dietlico (6.3.11), agitar y dejar en reposo
3
hasta separacin de la fase etrea. Repetir esta extraccin dos veces ms agitando con 50 cm de ter
3
dietlico. Combinar las fases etreas en un embudo de separacin de 200 cm (6.4.1).

(Contina)

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3 3
Aadir 5 cm de agua, agitar y rechazar la fase acuosa. Aadir 2 cm de la solucin de hidrxido de sodio
(6.3.6) a la fase etrea y agitar (hasta aqu se habr formado benzoato de sodio). Separar la fase alcalina.
Luego extraer dos veces agitando con 2 cm3 de la solucin de hidrxido de sodio (6.3.7). Recolectar los
extractos alcalinos en un matraz volumtrico de 10 cm3 (6.4.4) y diluir hasta la marca con agua.

6.5.4 Determinacin

6.5.4.1 Desarrollo del color

3
De acuerdo con el contenido de cido benzico esperado, transferir 0,5 a 1,0 cm del extracto alcalino a un
tubo de ensayo (6.4.6) y evaporar hasta sequedad en el bao de agua caliente (6.4.5). Transferir a la
estufa (6.4.7) y deshidratar por 15 min a 103 2 oC.

Dejar enfriar, aadir 1 cm3 de la solucin de nitracin (6.3.2) y colocar en el bao de agua caliente por 20
min, (es recomendable agitar al tubo de ensayo durante los primeros minutos).

Transferir al bao de agua (6.4.8), manteniendo a 20 2 oC por el tiempo de 15 min. Cuidadosamente

aadir 2 cm3 de agua y dejar 15 min adicionales. Aadir 10 cm3 de la solucin de amonaco (6.3.4),
aadiendo los primeros 5 cm3 en fracciones de 0,5 cm3 y el resto en fracciones de 1 cm3. Dejar en el bao
de agua por 15 min, tener cuidado que la temperatura del bao de agua no exceda de 20 2 oC. Aadir 2
3
cm de la solucin de hidrocloruro de hidroxilamina (6.3.3) y colocar en el bao de agua (6.4.9), mantener
la temperatura a 60 2 oC por 5 min.

6.5.4.2 Medicin espectromtrica

Enfriar el tubo de ensayo, llenar una celda espectromtrica con la solucin y medir la absorbancia a 533
nm en los siguientes 30 min por medio del espectrmetro (6.4.10).

6.5.5 Preparacin de la curva de calibracin

6.5.5.1 Preparacin de los juegos de soluciones estndar

En una serie de cinco tubos de ensayo, transferir por medio de la pipeta (6.4.3), los volmenes de la
solucin estndar de cido benzico (6.3.1) indicados en la tabla.

TABLA

Volumen Correspondencia
de la solucin estndar de en masa de cido benzico
cido benzico
3
cm mg

0,6 0,6
0,8 0,8
1,0 1,0
1,2 1,2
1,4 1,4

6.5.5.2 Desarrollo del color

Transferir los tubos al bao de agua caliente (6.4.5) y evaporar hasta sequedad. Transferir los tubos a la
estufa (6.4.7) y deshidratar por 15 min a 103 2 oC.

Continuar conforme a lo descrito en 6.5.4.1, desde el segundo prrafo que empieza con las palabras
"[Dejar enfriar, aadir 1 cm3 de la solucin de nitracin (6.3.2)..."].

(Contina)

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NTE INEN 2 141 1998-07

6.5.5.3 Mediciones espectromtricas. Proceder conforme a lo explicado en 6.5.4.2.

6.5.5.4 Trazado de la curva. Trazar la curva teniendo, por ejemplo, en las abcisas los juegos de soluciones
estndar de cido benzico, en microgramos, y en las ordenadas los valores correspondientes de la
absorbancia.

6.5.6 Nmero de determinaciones

Efectuar dos determinaciones en porciones de ensayo tomadas de la misma muestra de ensayo (6.5.1).

6.6 Expresin de los resultados

6.6.1 Mtodo de clculo y frmula

6.6.1.1 Productos lquidos

El contenido de cido benzico, expresado en miligramos por litro, se calcula mediante la expresin:

m x V2
C = x 1000
V1 x V3

En donde:

C = contenido de cido benzico, en mg/l;

m = masa del cido benzico, leda desde la curva de calibracin, en mg;

V1= volumen de la porcin de ensayo, en cm3, es decir 10 cm3 (ver 6.5.2.1);

V2= volumen del extracto alcalino, en cm3, es decir 10 cm3 (ver 6.5.3);

V3= volumen del extracto alcalino tomado para el desarrollo del color, en cm3 (ver 6.5.4.1).

6.6.1.2 Productos espesos

El contenido de cido benzico, expresado en miligramos por kilogramo, se calcula mediante la expresin:

m2 x V1 x V3
C = x 1 000
m1 x V2 x V4

En donde:

C = contenido de cido benzico, en mg/kg;

m1= masa de la porcin de ensayo, en g;

m2= masa del cido benzico, leda desde la curva de calibracin, en mg;

V1= volumen de la solucin clarificada preparada, en cm3, (ver 6.5.2.2);

V2= volumen de la solucin clarificada tomada para la extraccin, en cm3, es decir 50 cm3 (ver
6.5.3.2);

(Contina)

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NTE INEN 2 141 1998-07

V3= volumen del extracto alcalino, en cm3, es decir 10 cm3 (ver 6.5.3);
3
V4= volumen del extracto alcalino tomado para el desarrollo del color, en cm (ver 6.5.4.1).

6.6.2 Repetibilidad

6.6.2.1 La diferencia entre los resultados de dos determinaciones (6.5.6), realizadas simultneamente o en
rpida sucesin por el mismo analista, no deber exceder 10 mg de cido benzico por litro o por
kilogramo de producto.

6.7 Nota del procedimiento

6.7.1 La presencia de cido frmico y cido srbico no interfiere con la determinacin de cido benzico.

6.8 Reporte del ensayo

6.8.1 El reporte del ensayo debe mostrar el mtodo usado y los resultados obtenidos, adems debe
mencionar cualquier condicin de operacin no especificada en la presente norma, as como cualquier
circunstancia que pueda haber influido en los resultados.

6.8.2 El reporte del ensayo debe incluir todos los detalles necesarios que permitan la completa
identificacin de la muestra.

(Contina)

-11- 1997-035
NTE INEN 2 141 1998-07

APNDICE Z

Z.1 DOCUMENTOS NORMATIVOS A CONSULTAR

Esta norma no requiere de otras para su aplicacin.

Z.2 BASES DE ESTUDIO

Norma ICAITI 34 003 h26 Productos elaborados a partir de frutas y hortalizas. Determinacin cualitativa y
cuantitativa del cido benzoico y benzoatos alcalinos. Instituto Centroamericano de Investigacin y
Tecnologa Industrial ICAITI, Guatemala 1975.

International Standard ISO 6560. Fruit and vegetable products. Determination of benzoic acid content
(benzoic acid contents greater than 200 mg per litre or per kilogram). Molecular absorption spectrometric
method. Geneva 1983

-12- 1997-035
 INFORMACIN COMPLEMENTARIA

Documento: TITULO: CONSERVAS VEGETALES. DETERMINACIN Cdigo:

NTE INEN 2 141 CUALITATIVA Y CUANTITATIVA DEL CIDO BENZICO Y AL 02.01-329
BENZOATOS ALCALINOS.
ORIGINAL: REVISIN:
Fecha de iniciacin del estudio: Fecha de aprobacin anterior por Consejo Directivo
1996-07-18 Oficializacin por Acuerdo No. de
publicado en el Registro Oficial No. de

Fecha de iniciacin del estudio:

Fechas de consulta pblica: de a

Subcomit Tcnico: Salsa de tomate

Fecha de iniciacin: 1997-01-10 Fecha de aprobacin: 1997-06-13
Integrantes del Subcomit Tcnico:

NOMBRES: INSTITUCIN REPRESENTADA:

Dra. Armanda Coronel Rivera (Presidente) INSTITUTO DE HIGIENE Y MEDICINA

TROPICAL-GUAYAQUIL
Dra. Rosario Barrera F. INSTITUTO DE INVESTIGACIONES
TECNOLGICAS DE LA E.P.N.
Ing. Helmut Nickel Garaicoa LA PORTUGUESA S.A.
Ing. Juan Miniguano COMNACA
Michelle O. Fried TRIBUNA ECUATORIANA DE
CONSUMIDORES Y USUARIOS
Dra. Lucia Navas INSTITUTO NACIONAL DE HIGIENE - QUITO
Dr. Hernan Riofro DIRECCIN MUNICIPAL DE HIGIENE
Ing, Ramiro Valarezo NESTLE ECUADOR S.A.
Sr. Rodolfo Philco ALISA
Dra. Susana Snchez de Rojas ECUAVEGETAL S.A.
Dr. Guido Martnez DACA
Ing. Jorge Arturo Gmez NESTLE ECUADOR S.A.
Ing. Bolvar Cano (Secretario Tcnico) INEN

P.V.P. S/. 4 500,oo

Otros trmites:

CARCTER: Se recomienda su aprobacin como: OPCIONAL

Aprobacin por Consejo Directivo en sesin de Oficializada como: VOLUNTARIA

1998-05-28 como: Voluntaria Por Acuerdo Ministerial No. 290 de 1998-06-23
Registro Oficial No. 363 de 1998-07-17
Instituto E c u a toria no d e N orma liz a c in, IN E N - B a q u e rizo Mor e no E 8-29 y A v. 6 d e Dic ie mb r e
C a silla 17-01-3999 - T e lfs: (593 2)2 501885 a l 2 501891 - F ax: (593 2) 2 567815
Dir e c c in G e n e r a l: E-Ma il:furr e st a @ in e n.g ov.e c
r e a T c nic a d e N orma liz a c in: E-Ma il:norma liz a c ion @ in e n.g ov.e c
r e a T c nic a d e C e rtific a c in: E-Ma il:c e rtific a c ion @ in e n.g ov.e c
r e a T c nic a d e V e rific a c in: E-Ma il:v e rific a c ion @ in e n.g ov.e c
r e a T c nic a d e S e rvic ios T e c nol gic os: E-Ma il:in e n c a ti @ in e n.g ov.e c
R e gion a l G u a y a s: E-Ma il:in e n g u a y a s @ in e n.g ov.e c
R e gion a l A zu a y: E-Ma il:in e n c u e n c a @ in e n.g ov.e c
R e gion a l C himb or a zo: E-Ma il:in e nrio b a mb a @ in e n.g ov.e c
U RL:w w w.in e n.g ov.e c