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Proyecto de investigacin
Autor:
Valdiviezo Roque Lisbeth Antonella
Asesor:
Mgtr. Liz Elva Zevallos Escobar
Chimbote - Per
2016
1.- EFECTO ANTIINFLAMATORIO DE UN GEL ELABORADO A BASE
DE LAS HOJAS DEL Laurus nobilis (Laurel) EN Rattus rattus
2. INDICE
3 Introduccin...01
4 Planeamiento de la investigacin.02
2
4.1. Planteamiento del problema.03
5.1. Antecedentes.09
5.3. Hiptesis11
6.Metodologa...12
6.8. Matriz de
consistencia.20
6.9. Principios
ticos..21
7. Referencias
bibliogrficas.....22
3
3. Introduccin
4
4. Planteamiento de la Investigacin
Por su similitud organolptica con Laurus nobilis y su uso popular en alimentacin se utiliza
primordialmente para dar sabor a los alimentos, y los chefs de cocinas tnicas, especialmente en
la comida italiana y lo han empleado en la medicina, est indicado en el tratamiento de anorexia,
digestin lenta, espasmo gastrointestinal, meteorismo y bronquitis crnica. (22)
Las hojas de laurel se vienen utilizando desde hace siglos por sus propiedades culinarias, pero
probablemente no es nicamente por su aroma sino tambin por sus propiedades antioxidantes
que permiten preservar los alimentos del enranciamiento y de diversas contaminaciones. Se ha
comprobado, individuos con alergia conocida al laurel (Laurus nobilis), a sus componentes y a
las plantas relacionadas con la familia de las Laurceas, as como con la familia de las
Compuestas/Asterceas, no deben usar el laurel. Se han reportado dermatitis de contacto y asma
ocupacional.(15)
Los geles son preparados Fito qumicamente elaborados directamente administrados sobre la piel,
existen muchas formulaciones posibles, todas ellas adecuadas al tratamiento de alteraciones de la
estructura y del estado de la piel. La aplicacin tpica de geles tiene como objetivo proteger la
piel y tratar diversas afecciones dermatolgicas, como tambin los geles contienen cantidades
muy pequeas de buena absorcin y son ms fciles de aplicar y retirar. (23)
As mismo las plantas medicinales antiinflamatorias pueden ayudar a reducir la inflamacin que
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se produce por algn golpe, infeccin o lesin. Suelen tener unas propiedades que ayudan a
reducir el dolor, hinchazn, favorecer la circulacin de la sangre e irrigacin de los tejidos y la
zona afectada por la afliccin. De tal modo podemos curarnos antes de este problema. Por
ejemplo, para las lesiones, reducir la inflamacin puede ayudar a tratar antes la lesin en s, pues
cuando la inflamacin es muy grande, resulta complicado. Para hacer esto de la forma ms natural
posible tenemos a nuestra disposicin una amplia variedad de plantas medicinales
antiinflamatorias. (3)
De tal manera que el proceso de inflamacin produce una destruccin de las clulas del
parnquima y de las del estroma. El tejido lesionado se repara mediante tejido conectivo que va a
producir la fibrosis y la escarificacin, en estos procesos intervienen la formacin de nuevos
vasos sanguneos(angiognesis), la migracin y proliferacin de fibroblastos, el depsito de
matris extracelular y la maduracin y organizacin del tejido fibroso. As mismo la reparacin
empieza a las 24 horas tras la lesin. Los fibroblastos y las clulas del endotelio vascular
comienzan a proliferar formando el tejido de granulacin en el cual se forman nuevos vasos
angiognesis. (17)
Pg.02
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4.2 OBJETIVOS DE INVESTIGACIN
7
4.3 JUSTIFICACIN
La investigacin sobre el uso de plantas medicinales forma parte de la etnobotnica, que ha sido definida
como el estudio de las interrelaciones entre los grupos humanos y las planta, ya que son aquellos vegetales
que elaboran unos metabolitos secundarios, llamados principios activos, sustancias que ejercen una
accin farmacolgica, beneficiosa o perjudicial, sobre el organismo vivo. Su utilidad primordial, a veces
especfica, es servir como droga o medicamento que alivie las enfermedades o restablezca la salud perdida.
(18)
La Organizacin Mundial de la Salud (OMS) ha estimado que ms del 80% de la poblacin mundial utiliza,
rutinariamente, la medicina tradicional para satisfacer sus necesidades de atencin primaria de salud y que
gran parte de los tratamientos tradicionales implica el uso de extractos de plantas o sus principios activos.
De acuerdo a la OMS una planta medicinal es definida como cualquier especie vegetal que contiene
sustancias que pueden ser empleadas para propsitos teraputicos o cuyos principios activos pueden servir
de precursores para la sntesis de nuevos frmacos.(27)
Por otra parte, no existe suficiente informacin sobre la abundancia y distribucin de las plantas
medicinales en el trpico y, menos an, sobre los efectos de su extraccin en las poblaciones naturales. Es
necesario, entonces, hacer esfuerzos para evitar la prdida definitiva del conocimiento tradicional sobre
plantas medicinales, no solo para preservar esta herencia cultural, sino tambin para registrar la informacin
sobre ciertas especies tiles, que podran ser relevantes para el desarrollo de nuevas fuentes de
medicamentos y de otros beneficios para la humanidad, contribuyendo, al mismo tiempo, a proteger la
biodiversidad. Con base en estas consideraciones, en la presente revisin se analizan los objetivos y
enfoques actuales de la investigacin etnobotnica, as como las fases que debera cumplir cualquier
proyecto interdisciplinario de investigacin sobre plantas medicinales. (21)
La inflamacin es el proceso inflamatorio posee una serie de fenmenos que pueden ser desencadenados
por diversos estmulos como son agentes infecciosos, isquemia, interacciones antgeno-anticuerpo y
lesiones drmicas otra ndole. Cada tipo de estmulos desencadena un patrn caracterstico de la reaccin o
respuesta que constituye una variante relativamente mejor del mismo fenmeno. De tal manera las
respuestas inflamatorias surgen en tres fases diferentes y cada uno al parecer es mediada por mecanismos
distintos: una fase transitoria aguda que se caracteriza por la vaso dilatacin local y mayor permeabilidad;
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una fase sub agudatarda que se identifica ms bien por infiltracin de leucocitos y fagocitos, y una
faseproliferativa crnica en que se advierten en generacin y fibrosis tisulares. (20)
En este presente trabajo se justifica la importancia del Proyecto de Investigacin, queriendo optar por el
desarrollo e informacin de esta planta medicinal Laurus nobilis, conocida como (Laurel), Comnmente es
utilizada y se le atribuyen mltiples propiedades que le confieren versatilidad de uso a nivel culinario,
comercial y medicinal. Se comercializa en muchos lugares, aunque su identidad puede ser dudosa, ya que se
confa en las caractersticas organolpticas para asegurar la naturaleza de la misma. (14)
No obstante que puede afirmarse la realizacin de la elaboracin de un gel elaborado a base de Laus
nobilis, y determinar el efecto antiinflamatorio, hay muchas investigaciones que demostraron sus diferentes
efectos, este proceso fotoqumico donde naturalmente se quiere llegar y lograr objetivos del proyecto, es
poder demostrar la esencia de este trabajo de investigacin. As mismo favorecer el establecimiento de
una metodologa de control de calidad que permitir en el futuro, la utilizacin de este recurso natural como
herramienta teraputica dentro de los sistemas de salud, o bien su aprovechamiento como uso en gel
antinflamatorio.En la presente investigacin se enmarca en las nuevas responsabilidades profesionales en
campo natural de salud del farmacutico que exigen una actitud proactiva, que puede ser percibida,
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5. MARCO TEORICO
5.1 ANTECEDENTES
En un estudio conducido por, Kahan, Andrea. Demostr la actividad txica del aceite esencial de
laurel (Laurus nobilis L.) y del cineol, monoterpeno cclico considerado un aleloqumico puro,
sobre Brevicoryne brassicae L. en repollo (Brassica oleracea var. capitata L. Y utiliz dos tcnicas
de aplicacin: papeles impregnados y pulverizacin directa. A las 24 horas del tratamiento se
evalu el porcentaje de mortalidad. Los resultados se analizaron por ANOVA de dos vas y Test de
Tukey. Se encontraron diferencias significativas para los productos evaluados en todas las
concentraciones ensayadas. Las tcnicas de aplicacin no dieron diferencias significativas. La
mayor mortalidad correspondi a 52% para el aceite esencial de laurel y 27,5% para cineol a las
mayores concentraciones en ambos casos. Se concluye que los productos ensayados podran ser
una herramienta para el Manejo Integrado de Plagas para control de fidos en cultivos hortcolas.
(2)
Estudiaron la capacidad antifngica de los aceites esenciales de Laurel (Laurus nobilis) y Clavo
(Syzygium aromaticum) frente a Fusarium sambucinum aislado del arroz de Valencia. Emplearon
y utilizaron el aceite esencial en el medio de cultivo PDA. Se calcul la velocidad de crecimiento
del hongo (mm/da), el crecimiento medio radial diario (mm) y la inhibicin del crecimiento
miceliar (MGI). La velocidad de crecimiento del hongo fue de 6,60 mm/da en PDA, 4,85 mm/da
en Laurel y de 1,91 mm/da en clavo.. La adicin de estos aceites esenciales, podra ser una
alternativa de aplicacin prctica para el control de Fusarium sambucinum. (3)
Dentro de las propiedades del Laurus nobilis (laurel) que se encontraron, como metabolitos
voltiles terpeno que contienen, entre ellos varios norisoprenoides. En este estudio se obtuvieron
resultados que sugieren un papel de LnCCD1 en Laurus nobilis la biosntesis del sabor de la fruta.
Un ADNc de longitud completa que codifica una potencial dioxigenasa de escisin de
carotenoides (LnCCD1) fue aislado. El gen LnCCD1 se sobreexpresa en Escherichia coli, y la
protena recombinante se ensay para determinar su actividad de escisin con una variedad de
sustratos de carotenoides. Y los resultados sugieren un papel de LnCCD1 en Laurus nobilis la
10
biosntesis del sabor de la fruta. (4)
Planta aromtica Laurus nobilis L. Utilizada con frecuencia como una especia en la cocina
mediterrnea y como medicina tradicional para el tratamiento de varias enfermedades infecciosas.
Ramos C, realizo el estudio de efectos antibacterianas y antioxidantes del aceite de laurus nobilis
estudio cuyo tubo por objetivo caracterizar las actividades antibacterianas y antioxidantes del
aceite de laurel esencial (EO), del extracto etanlico (EE) y el extracto de fro / calor acuosa (AE).
Los componentes principales detectadas en la baha de laurel EO eran eucaliptol (27,2%), acetato
de -terpinenyl (10,2%), linalool (8,4%), metileugenol (5,4%), sabineno (4,0%) y carvacrol
(3,2%). El EO si demostr una fuerte actividad antibacteriana contra todo deterioro transmitidas
por los alimentos probados y bacterias patgenas, mientras que esta actividad fue menos
pronunciado o incluso inexistente en la EE y EA. Por el contrario, EO mostr una baja actividad
antioxidante en comparacin con los extractos (EX), y entre el EX, la AE caliente revel la ms
alta capacidad antioxidante. Finalmente los resultados demuestran que el laurel EO y su EX
tienen potencial como alternativas naturales a los conservantes de alimentos sintticos, con el fin
de mejorar la seguridad alimentaria y aumentar la vida til de los alimentos(5)
pg.05
Se realiz un estudio en el tipo de cncer de piel mas serio, llamado Melanoma maligno es un
tumor agresivo frecuentemente resistente a quimioterapia . Asi mismo se busc de nuevos
agentes para el tratamiento de las ITS es de gran importancia. La antiproliferativa contra
melanoma lneas celulares humanas de propensin de lauroside B (1), a Megastigmane glucsido
aislado de Laurus nobilis (laurel) en hojas. Este compuesto suprime la proliferacin de las tres
lneas celulares de melanoma humano, a saber, A375, WM115, y SK-Mel-28. La inhibicin 1
inducida de la proliferacin de clulas de melanoma humano era debido a la induccin de la
apoptosis, como se demostr por anlisis FACS con anexina V / tincin PI y confirmado por la
activacin de la caspasa-3 y por la escisin de poli (ADP-ribosa) polimerasa ( PARP). La
creciente evidencia implica NF-kB como un contribuyente importante a la metstasis y la quimio-
resistencia del melanoma Mayor. Se demostr la induccin de la apoptosis por 1 en lneas
celulares de melanoma humano en potencia agresiva tiene un alto valor biolgico. (6)
11
da (-1) ) durante 14 das respectivamente. En el caso de modelo de herida de incisin, grupo 3 y 4
animales fueron tratados con los extractos de Allamanda y Laurus respectivamente durante 10
das. Los efectos de los vehculos en la tasa de cicatrizacin de heridas se evaluaron por la
velocidad de cierre de la herida, periodo de epitelizacin, resistencia a la traccin, los pesos de
tejido de granulacin, el contenido de hidroxiprolina y la histopatologa del tejido de granulacin.
Finalmente el extracto acuoso de Allamanda promovieron la herida actividad de curacin
significativamente tanto en los modelos de heridas estudiadas. En Laurus nobilis animales
tratados, la tasa de contraccin de la herida, el peso del tejido de granulacin y el contenido de
hidroxiprolina fueron moderadamente alta. El estudio histolgico del tejido de granulacin de las
Laurus nobilis animales tratados mostr un mayor nmero de clulas inflamatorias, y menor de
colgeno en comparacin con el grupo tratado Allamanda de los animales. Sin embargo, fue
mejor que el grupo de control de animales. (8)
Se Present resultados del aceite esencial hojas de Laurus nobilis Linn . ( Lauraceae ) que fue
evaluado para actividades antinociceptivos y antiinflamatorios en ratones y ratas . El aceite
esencial exhibido : un efecto analgsico significativo en las pruebas de retirada de la cola y
formalina ; que obtuvo un efecto antiinflamatorio dependiente de la dosis en el edema inducido
por formalina y un efecto sedante moderado a las dosis antiinflamatorias. El efecto analgsico y
antiinflamatorio del aceite esencial fue comparable para hacer referencia a los analgsicos y
frmacos anti- inflamatorios no esteroides : como morfina y piroxicam . (9)
El estudio realizado por Sayyah M. del aceite esencial de hojas de Laurus nobilis Linn .
( Lauraceae ) ha evaluado para actividades antinociceptivos y antiinflamatorios en ratones y
ratas . Este aceite esencial exhibido : un efecto analgsico significativo en las pruebas de retirada
de la cola y formalina ; tiene un efecto antiinflamatorio dependiente de la dosis en el edema
inducido por formalina y un efecto sedante moderado a las dosis antiinflamatorias. De tal manera
el efecto analgsico y antiinflamatorio del aceite esencial fue comparable para hacer referencia a
los analgsicos y frmacos anti- inflamatorios no esteroides : morfina y piroxicam . (10)
Burga, Demostr la actividad antiinflamatoria del gel de opuntia ficus-indica tuna, Determinando
la eficacia antiinflamatoria haciendo una comparacin de eficacias de actividad antinflamatoria
de geles.
Utiliz un diseo experimental doble ciego, con muestra de 18 ratones, distribuidos en 6 grupos
de 3 ratones cada uno, a todos se les procedi a administrar va subcutnea 2ml estril estril en el
dorso 1 da antes y estuvieron 12 horas en ayuno, luego se dividieron en grupos de Control
Negativo, Control Positivo con Indometacina, Control con gel de cladodios de Opuntia ficus-
indica, Control con Carragenina al 2%, Grupo Experimental con Carragenina al 2% e
Indometacina y Grupo Experimental con Carragenina al 2% y gel de cladodios de Opuntia ficus-
12
indica. Posteriormente se midi la respuesta inflamatoria en base al recuento de clulas mediante
la tincin Wright. Posteriormente los resultados fueron tanto la tuna como la indometacina no
inducen respuesta por si solas. Concluyendo el gel de cladodios de Opuntia Ficus-indica, una
respuesta antinflamatoria eficaz para el tratamiento inflamatorio. (30)
Las sustancias naturales y productos de origen natural puros se definen por su estructura
qumica y son identificados por el anlisis qumico. Los productos Fito teraputicos tienen
composicin qumica variable, siendo fundamentalmente importante en la industrializacin. La
fitoterapia es la ciencia que estudia la utilizacin de los productos de origen vegetal con la
finalidad teraputica, ya sea para prevenir, para atenuar o para curar un estado patolgico. La base
de los fitofrmacos son los vegetales, Como el extracto estandarizado de una parte de la planta
medicinal utilizado en teraputica. Por otra parte, son aquellas sustancias responsables de la
accin farmacolgica es el principio activo. Por lo tanto debern ser convenientemente
preparados, dndoles la forma farmacutica ms adecuada para su administracin al paciente. (12)
La utilidad primordial, a veces especfica, es servir como droga o medicamento que alivie la
enfermedad o restablezca la salud perdida, es decir que tienden a disminuir o neutralizar el
desequilibrio orgnico que es la enfermedad. Constituyen aproximadamente la sptima parte de
las especies existentes. Las plantas en lo general tambin elaboran en su metabolismo los taninos,
vitaminas, sustancias antibiticos y concentran los elementos minerales. Es decir, que la planta
medicinal utiliza los cuatro elementos clsicos: Agua, tierra, aire, y fuego (energa solar = calor y
luz) para elaborar los principio inmediatos o alimenticios, prtidos, glcidos y lpidos, los cidos
orgnicos, vitaminas y todos los principios activos o medicinales, as como concentrar los
elementos minerales del suelo. (25)
As mismo las plantas medicinales antiinflamatorias pueden ayudar a reducir la inflamacin que
se produce por algn golpe, infeccin o lesin. Suelen tener unas propiedades que ayudan a
reducir el dolor, hinchazn, favorecer la circulacin de la sangre e irrigacin de los tejidos y la
zona afectada por la afliccin. De tal modo podemos curarnos antes de este problema. Por
ejemplo, para las lesiones, reducir la inflamacin puede ayudar a tratar antes la lesin en s, pues
cuando la inflamacin es muy grande, resulta complicado. Para hacer esto de la forma ms natural
posible tenemos a nuestra disposicin una amplia variedad de plantas medicinales
antiinflamatorias. (3)
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LAUREL
El Laurel (Laurus nobilis), Es un rbol (planta) perenne que se cultiva en muchas regiones clidas
del mundo, particularmente, en los pases del Mediterrneo. Las hojas secas y su aceite esencial
obtenido por destilacin poseen un aroma y sabor especial, que favorecen su uso en numerosos
productos alimenticios. Tambin tiene una larga historia de uso tradicional en poblacin las hojas
se utilizan en la cocina , enteras se utilizan a menudo y se trituran o las hojas de tierra pueden
ser utilizados para la fuerza adicional. (4)
En usos culinarios, el sabor de las hojas es amargo y muy aromtico, liberando un suave olor
balsmico al ser frotadas. En cocina, se usan generalmente las hojas secas, teniendo en cuenta que
por su potente aroma hay que dosificar bien su uso para que no encubra el resto de los sabores del
plato. Se utiliza en estofados, potajes, legumbres, salsas, platos de caza, platos de pollo, cerdo,
cordero o ternera, salazones, caldos de pescado, para aromatizar la salsa de la pasta, y es un
condimento especfico en la famosa sopa bullabesa o en el bouquet garni francs . (4)
Laurus nobilis es de porte arbustivo o arbreo, de 20 m de altura, dioico, con hojas perennes
alternas, enteras, elpticas, coriceas, con los bordes ligeramente ondulados y color verde oscuro,
brillante, de entre 6 y 12 cm de largo por 2,5 a 4 de ancho. Al ser frotadas entre los dedos o
machacadas, desprenden un aroma muy agradable. Las flores se agrupan en umbelas axilares de
pequeo tamao.(20)
Sus flores son dioicas ( flores individuales son ya sea hombre o mujer, pero slo uno de los sexos
es que se encuentran en cualquier planta por lo tanto deben ser cultivadas plantas masculinas y
femeninas si se requiere la semilla) y son polinizadas por plantas . Pequeos, agrupadas en la
axila de las hojas, reunidas en umbelas pedunculadas, florecen en primavera, son aromticas,
amarillentas, generalmente unisexuales . Frutos bayas, azul oscuro a negruzcas en la madurez.
Con nica semilla. (1)
14
SU CLASIFICACIN:
Los aceites esenciales de L. nobilis son de gran valor y se utilizan como materia prima de
perfumes, cosmticos, especias y productos de aromaterapia, fitoterapia y nutricin. Las hojas se
han utilizado para tratar diversas enfermedades, como la epilepsia, el parkinson y neuralgias;
adems, se ha mencionado que tiene propiedades antibacterianas, antifngicas, antivirales,
insecticidas y antioxidantes. (19)
COMPOSICIN QUMICA
Existen numerosos estudios sobre la composicin qumica de los aceites esenciales obtenidos a
partir de las hojas de L. nobilis de las regiones mediterrnea y europea (6, 7), en los cuales se
mencionan que los principales componentes del aceite esencial son cineol (44,12%), eugenol
(15,16%), sabineno (6,20%), 4-terpineol (3,60%), a-pineno (2,74%), metileugenol (2,48%), a-
terpineol (2,19%) y A-pineno (2,05%). Acidos Organicos tenemos: Actico, frmico, pelargnico,
propanoico(hojas), cinmico, lurico(frutas). Minerales : Mg, Ca+, K, P, Fe, Na, Zn.
15
El anlisis proximal de 100 g de hojas de Laurus nobilis contiene: 188 caloras, agua (45.2 g),
protenas (4.2 g), grasa (1.2 g), carbohidratos totales (47.1 g), fibra (4.6 g), ceniza (2.3 g), calcio
(187 mg), fsforo (70 g), hierro (5.3mg), carotenos (1050 g), tiamina (0.01 mg), riboflavina
(0.21 mg), niacina (1.3 mg) y cido ascrbico (46 mg). (14)
Muchas veces la rigidez en funcin del nmero de enlaces covalentes que contiene los geles
pueden presentar , densidad de uniones fsicas internas o simplemente, la cantidad de lquido que
los forme. Los polmeros formadores de geles dan lugar a productos con ndices variables de
rigidez, desde el estado de solucin hasta los mucilagos gele e hidrogeles, que son los ms
rgidos . En formacin de geles son ms utilizados en la actualidad para la elaboracin de
preparados de uso dermatolgico, son semislidos, transparentes u opacos, que contienen un alto
porcentaje de disolvente frente agente gelificante. En relacin del tamao de las partculas
dispersas pueden variar dentro de las medidas coloidales hasta cuerpo reconocibles con luz ptica,
macromolculas, cristales inicos o moleculares. As mismo estas partculas estn unidad entre si
y formar un soporte especial. (1)
La estructura de los geles est formada por un armazn compuesto de elemento de fase slida
que entran en contacto en diferentes lugares llamados puntos de adhesin que los mantienen
unidos entre s. La plasticidad o elasticidad de un gel depende en gran medida de la
concentracin y naturaleza de los componentes del coloide .(1)
INFLAMACION
La inflamacin es el proceso inflamatorio posee una serie de fenmenos que pueden ser
desencadenados por diversos estmulos como son agentes infecciosos, isquemia, interacciones
antgeno-anticuerpo y lesiones drmicas otra ndole. Cada tipo de estmulos desencadena un
patrn caracterstico de la reaccin o respuesta que constituye una variante relativamente mejor
del mismo fenmeno. De tal manera las respuestas inflamatorias surgen en tres fases diferentes y
cada uno al parecer es mediada por mecanismos distintos: una fase transitoria aguda que se
caracteriza por la vaso dilatacin local y mayor permeabilidad; una fase sub agudatarda que se
identifica ms bien por infiltracin de leucocitos y fagocitos, y una faseproliferativa crnica en
que se advierten en generacin y fibrosis tisulares. (20)
La inflamacin posee procesos de una serie de fenmenos que pueden ser desencadenados por
diversos estmulos como son agentes infecciosos, isquemia, interacciones antgeno-anticuerpo y
lesiones drmicas u otra ndole. Los estmulos desencadenan un patrn caracterstico de la
reaccin o respuesta que constituye una variante relativamente mejor del mismo fenmeno. A un
novel macroscpico, la respuesta por lo comn se acompaa de los conocidos signos clnicos
como eritema. Edema y dolor 8hiperalgia) a la palpitacin y espontaneo. Las respuestas
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inflamatorias surgen en tres frases diferentes y cada uno al parecer es mediada por mecanismos
distintos. Una fase transitoria aguda que se caracteriza por la vaso dilatacin local y mayor
permeabilidad, una fase sub agudatarda que se identifica mas bien por infiltracin de leucocitos
y fagocitos . (3)
De tal manera que el proceso de inflamacin produce una destruccin de las clulas del
parnquima y de las del estroma. El tejido lesionado se repara mediante tejido conectivo que va a
producir la fibrosis y la escarificacin, en estos procesos intervienen la formacin de nuevos
vasos sanguneos(angiognesis), la migracin y proliferacin de fibroblastos, el depsito de
matris extracelular y la maduracin y organizacin del tejido fibroso. As mismo la reparacin
empieza a las 24 horas tras la lesin. Los fibroblastos y las clulas del endotelio vascular
comienzan a proliferar formando el tejido de granulacin en el cual se forman nuevos vasos
angiognesis. (17)
GELES
En la actualidad, los ms utilizados para elaborar preparados de uso dermatolgico, son los geles,
que son semislidos, transparentes u opacos. Esta forma farmacutica que contiene un alto
porcentaje de disolvente frente al de agente gelificante. La relacin de tamao de las partculas
dispersas puede variar dentro de las mediadas coloidales hasta cuerpo reconocible con luz ptica,
macromolculas, cristales inicos o moleculares, unidos entre s y forman un armazn. (32)
Este tipo de geles con actividad antiinflamatoria utilizan por va tpica con el fin de aliviar
lesiones en tejidos blandos a los cuales puede llegarse directamente a travs de la piel, evitando
as los efectos colaterales indeseables. Actualmente se exige valorar la Biodisponibilidad como
criterio de calidad. Biodisponibilidad se define como la cantidad de frmaco que llega a sangre o
plasma despus de la administracin del medicamento que lo contiene y la velocidad a la cual este
proceso ocurre; esta determinacin de Biodisponibilidad no resulta til en el caso de
medicamentos que se administran a travs de la piel y no alcanzan circulacin sistmica; la
biodisponibilidad relativa o Bioequivalencia es la comparacin de las biodisponibilidades de dos
medicamentos para determinar si son similares en su comportamiento farmacocintico dentro del
organismo. (28)
As mismo pueden denominarse gomas hidrosolubles o hidrocoloides. Son aquellas
macromolculas polimricas, polosacridos y protenas, entrecruzadas para formar redes
intterconectadas, ya que se pueden disolver en exaceso de agua. Justamente tiene efectos
espesantes y bajo efectos fsicos (temperatura) o qumicos(presencia de iones). Tienen mucha
enfass en su viscosidad por aumento del medio acuoso para concentraciones bajas, menores al
1% , lo que implica un comportamiento no-newtoniano.
De tal manera estos polmeros son de peso molecular elevado. Segn su origen
Vegetal: de naturales glcido, polisacridos, carbohiratos compuestos por unidades de
17
monosacridos, molculas de un solo azcar: glucosa o fructosa
animal:naturaleza proteica.
Posteriormente la seleccin de estos agentes depende de la viscosidad o la fuerza del gel deseado,
las caracterstica reolgicas, ph, temperatura en el proceso, interaccin, apariencia y textura todos
estos puntos que estn dentro de las condiciones organolpticas. (35)
18
Se refiere a distintas fases de elaboracin de formas farmacuticas. Es el control de de materias
primas y materiales de acondicionamiento, control en proceso y control en producto terminado.
Hoy en da se considera que el sistema de control de calidad, por etapas sectorial, no es
suficiente. Cada producto terminado tiene como propsito determinar si una forma farmacutica
posee los atributos de calidad establecidos. (33)
5.3 HIPOTESIS
El gel elaborado a base de las hojas de Laurus nobilis (Laurel) tiene efecto inflamatorio
en Ratttus rattus.
19
6. METODOLOGIA
Los aceites esenciales se aislaran a partir de material vegetal fresco, por destilacin por arrastre
de vapor de agua en un aparato tipo Clevenger durante 3 a 4 h, se secarn sobre sulfato de sodio
anhidro y se almacenarn en oscuridad a 4 C. Los mismos se analizarn por Cromatografa
Gaseosa y Espectrometra de Masas. Los aceites esenciales de hojas se aislarn por
hidrodestilacin. Los bioensayos se realizarn a 28 2 C, 65% 5 H.R y en oscuridad. Se
utilizaron cajas de Petri de vidrio (5cm de dimetro), en sus bases se colocaron 50 L de los
aceites puros. La caja se cubri con una tapa plstica perforada que posee un tejido de hilo. (8)
20
Tradicionalmente el mtodo ms utilizado para realizar la determinacin del rendimiento del
aceite esencial la materia vegetal es el que prescriben la mayora de las farmacopeas, como la
Farmacopea Europea. Se basa en efectuar una hidrodestilacin de un peso conocido de material
vegetal con aparato tipo Clevenger y recoger el aceite esencial en el tubo graduado que se
encuentra en el colector de destilacin especialmente diseado para este tipo de anlisis. El
colector se acopla a un matraz que contiene el material vegetal a investigar y un cierto volumen
de agua, que se calienta mediante un sistema de potencia regulable para provocar la destilacin y
regular su velocidad. Tras la destilacin, se puede medir el volumen de esencia destilado y
fcilmente calcular el contenido, que se expresa en porcentaje volumen/peso (ml de aceite
esencial por 100g de material vegetal) (10)
INGREDIENTES
Carbopol NF 15g
MPB( Metilparabeno sdico 0.100g
PPB(Propilparabeno Sdico) NF 0.010g
TEA (trietanolamina) 20g
Agua 960ml
Aceite Esencial De Laurel 7g
pg.13
Proceso de preparacin del gel:
21
El control de calidad de los excipientes que son utilizadas para formular formas farmacuticas es
uno de todos los eslabones del sistema de Aseguramiento de calidad en la Industria Farmacutica.
EL Laboratorio de control de calidad, mediante tcnicas analticas validadas, debe certificar la
calidad de todos los frmacos y excipientes luego que stos a la bodega de materias primas.
De esta manera, el laboratorio de Control de Calidad podr liberar una partida de una sustancia
determinada, la cual slo puede ser utilizada en los diferentes procesos de produccin.
Control de calidad de los excipientes. (19)
22
6.3.3.5 Determinacin de la viscosidad del gel
Se tomar una muestra respectiva del gel
Se introducir en el viscosmetro.
Se someter a la accin del bao mara a 25C y
Se tomar el tiempo desde el punto d partida hasta la seal indicada en el viscosmetro. (9)
23
cloruros. EL papel de filtro con el residuo se transfiri al crisol inicial, se carboniz en un
quemador y luego se inciner en un homo mufla a 700_750 C durante 2 horas . Posteriormente
se coloc en un desecador y cuando alcance la temperatura ambiente se pesa. (11)
La droga vegetal (secay fresca) que servir como base para la preparacin del fitofrmaco debe
ser de excelente calidad y estar libre de bacteria, hongos, es por ellos que el anlisis
microbiolgico comprende una serie de pruebas que sirven para establecer la calidad
microbiolgica de una droga vegetal.
24
Se hemogeniz en un vortex, y el contenido de cada tubo en cajas Petri.
Se encub a 35 +/- 2 C por 48 horas.
Transcurrido este tiempo, se realiz la lectura.
Contndose las caloras que se desarrollan y se anota el resultado de las placas con mayor
nmero de colonias.
El nmero mximo por caja para una evaluacin no debe exceder de 300 colonia/caja. (17)
a) Prueba presuntiva
Se pes 25 g de droga cruda en un Erlenmeyer estril.
Se agreg 250 ml de agua peptonada al 0-1 % estril y homogenizar. De este modo se obtiene una
solucin 10
De este modo realizar otras diluciones. Se coloc 1 ml de cada una de las diluciones en 10 ml de
caldo lactosado.
Se incub por 24 horas a 35 +- 2C.
Observar si existe turbidez en el caldo lactosado o presencia de burbujas en la campana de
Durham (Fermentacin con formacin de gas) (33)
b) Prueba Confirmatoria
De los tubos positivos en caldo lactosado se tomo 2 a 3 asadas y se sembr en tubos de 10 ml de
caldo BRILLA .
Se incub por 24-48 horas 35+- 2 C
Observar si existe turbidez en el caldo lactosado o presencia de burbujas en l acampana de
Durham (Fermentacin con formacin de gas).
pg.16
El nmero de microorganismos aceptados para este tipo de material es:
0-100 NMP/g ACEPTABLE
Para Coliformes Fecales REGULAS ACEPTABLE
>460 NMP/g INACEPTABLE/RECHAZADO
Para Coliformes Fecales: <de 10 NMP/g ACEPTABLE
> De 10 NMP/g RECHAZADO
25
a) Prueba presuntiva
Se pes 25g de droga cruda en un Erlenmeyer estril.
Se agreg 250 ml de agua peptonada al 0.1% estril y homogenizar. De este modo se obtiene una
solucin 10, Se dej reposar 1 hora. De esta dilucin, se tom 1 ml y mezclar con 9 ml de agua
peptona al 0.1 % y obtener una dilucin
De este modo realizar otras diluciones. Se coloc 1 ml de cada una de diluciones en 10 ml de
caldo lactosado y presencia de burbujas en la campana de Durham (Fermentacin con formacin
de gas)
b) Prueba confirmatoria
De los tubos positivos en caldo lactosado se tom 2 a 3 asadas y sembr en tubos de 10 ml de
caldo EC.
Observa se existe turbidez en la caldo EC o presencia de burbujas en la campana de Durham
(Fermentacin con formacin de gas).
26
6.3.3.7.3 Evaluacin De La Actividad Antiinflamatoria
Procedimiento:
Aclimatacin mnimo dos das en jaulas metlicas con viruta de madera, en condiciones
estndares iluminacin y temperatura para eliminar el efecto del estrs, con alimentos y
agua a libertad. Se pueden utilizar otras cepas de ratas.
Se utilizaran ratas machos cepa Holzman con un peso promedio (210+-10g), las cuales
sern aleatorizadas, pesadas y marcadas, para formar grupos de seis animales cada uno
como indica el siguiente diseo.
27
6.3.3.7.4 Determinacin de sensibilidad e irritabilidad
Se realizar la evaluacin del potencial del producto a evaluar para producir irritacin cutnea en
un modelo animal pertinente como es Rattus rattus.
28
6.5. Definicin y operacionalizacin de variables
Definicin
Variables Definicin conceptual Indicador
operacional
-Dependiente:
Efecto antinflamatorio
del Gel elaborado a
Base de las hojas del EL mecanismo se atribuye para obtener un
Laurus nobilis efecto antiinflamatorio radicando el bloqueo
(Laurel). de sntesis de prostanglandina por inhibicin
de la enzima Ciclo-Oxigenasa. Este proceso
inhibe la COX-2, puesto a los efectos adversos
ms frecuentes podran estar causado por la Evaluar el
Test de edema
-Independiente: inhibicin de COX-1. Subplantar en control de
antiinflamatorio a
base del Laurus Son aquellas formas farmaceuticas de
29
6.6. Tcnicas e instrumentos de recoleccin de datos
30
31
6.8. Matriz de consistencia
32
6.9. Principios ticos
33
7.- REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS.
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