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Ao de la consolidacin del Mar de Grau

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS


ESCUELA ACADMICO PROFECIONAL DE MEDICINA VETERINARIA

ARTICULO CIENTFICO
TRANSGNICOS EN PLANTAS Y ANIMALES

Asignatura : Gentica y mejoramiento animal

Profesora : Lavalle Pea Guido

Integrantes :

Ciclo : IV ciclo

Seccin : I

Semestre acadmico : 2016 I

LIMA PER
RESUMEN
En los ltimos aos se ha comprobado por experimentacin hecha en animales y
plantas en la gran importancia que tienen ciertos elementos minerales, que en
cantidades pequesimas son indispensables para la salud de diversas especies.
Tras diversos avances en la biotecnologa ha sido de mucha utilidad , ya sea
en el campo de la industria ,sobre todo haciendo transgnesis en animales
como es el caso de los porcinos, peces y ratones , donde los dos primeros se
basan en la industria , y su primordial inters comercial es el de reducir
costos y aumentar eficacia ya sea por los genes recombinantes durante la
reimplantacin de estos para sacar nuevos seres transgnicos, en cambio en
el caso de los ratones se utiliza ms que todo en la medicina como es en el
caso de encontrar cura a ciertas enfermedades.

Palabras clave: Industria, Biotecnologa, Animales, Plantas, Transgnicos.

ABSTRACT
In recent years it has been verified by experiment done in animals and plants
in Great importance certain mineral elements, which are tiny amounts are
essential for health of various species. After several advances in
biotechnology has been very useful , even in the food Industry , mostly doing
transgenesis in animals as in the case of pigs , fish and mice , which are the
two Prime itself of based on industry and do primary interest is commercial to
reduce costs and increase Effectiveness also recombinant genes during
reimplantation of these paragraph Remove New transgenic Beings , while in
the case of mice are using in medicine like in the case of a certain cure
diseases .
Keywords: Industry, Biotechnology, Animals, Plants, Transgenic.

INTRODUCCIN
A lo largo de los siglos se han producido animales con nuevas
combinaciones de genes, utilizando mtodos tradicionales de reproduccin,
mediante la seleccin cuidadosa de determinados animales. Sin embargo, el
nmero de nuevas combinaciones de genes que se pueden conseguir de
esta forma es limitado ya que slo pueden combinarse genes de individuos
que pertenezcan a la misma especie o a especies muy parecidas. La
transgnesis es una tecnologa radicalmente nueva que altera las
caractersticas de los animales al cambiar directamente el material gentico.
Como el ADN contiene un cdigo gentico universal que es comn a todos
los organismos vivos, en principio puede transferirse entre organismos que
no pertenezcan a la misma especie para producir organismos con
caractersticas particulares y tiles que de otro modo no podran darse.
Actualmente se han caracterizado muchos genes diferentes y sus funciones.
Gracias a este conocimiento se abre la posibilidad de buscar mtodos para
cambiar los genes para que sean tiles; por ejemplo, para curar
enfermedades o introducir genes deseables en un animal por diversas
razones.TRANSGNESIS DE ANIMALES

La transgnesis se puede definir como la introduccin de ADN extrao en un


genoma, de modo que se mantenga estable de forma hereditaria y afecte a
todas las clulas en los organismos multicelulares. Generalmente, en
animales, el ADN extrao, llamado transgen, se introduce en zigotos, y los
embriones que hayan integrado el ADN extrao en su genoma, previamente
a la primera divisin, producirn un organismo transgnico; de modo que el
transgn pasar a las siguientes generaciones a travs de la lnea germinal
(gametos). Por lo tanto, daremos a conocer transgnesis en tres especies
diferentes y estas son:
Transgnesis en peces: Para poder realizar una buena transgnesis en
peces tenemos que hacer un buen uso adecuado de la biotecnologa, debido
que es una opcin para obtener nuevos compuestos tiles para la industria,
esto se da por la demanda creciente de pescado para el consumo humano
junto al agotamiento progresivo de recursos pesqueros por sobreexplotacin
de las cuales se desencadena la necesidad de cultivar especies pisccolas
de inters comercial. Para la produccin de peces transgnicos se basa en
un gen recombinante que producir las caractersticas deseadas y estos se
pueden dividir en diferentes grupos: El primer grupo es llamado Genes
informativos o descriptores, que contienen cloranfenicol aceltitransferasa,
beta galactosidasa y lusiferasa. En el segundo grupo son los llamados
Genes del mejoramiento gentico de las cuales estos son diseados para
aumentar o aadir funciones a los organismos genticamente modificados,
por ejemplo, tenemos a la GH (Hormona del crecimiento) y el factor de
crecimiento tipo insulina y aparte hay otros genes que codifican tenemos
como: para la lisosima que incrementa la resistencia a enfermedades, las
hormonas prolactinas estimulan la osmorregulacin, comportamiento, desove
y metabolismo general. En el tercer grupo tenemos a los genes que codifican
las protenas con propiedades y caractersticas particulares en los peces, por
lo tanto, tenemos los que codifican a las siguientes protenas son:
Metalothioneina de Salmn y Trucha, ActinaB de carpa, Histona de Salmon,
Prostamina y los genes que codifican las protenas anticongelantes como
son las llamadas Glicoprotenas que interactan con los cristales de hielo y
reduce el punto de congelacin en la sangre de los peces. Por lo tanto, al
introducir estos genes en peces es para incrementar los lmites de tolerancia
al fro en espacios de cultivo tales como es el caso del Salmon. En el cuarto
grupo son aquellos genes que intervienen en la expresin de los genes del
organismo, estos inciden en la prdida de funciones, sin embrago no ha sido
probado en peces, pero potencialmente pueden ser probados para la
generacin de lneas resistentes a enfermedades de las cuales es muy
importante en la acuicultura. Luego de haber seleccionado y construido el
gen recombinante se desea introducir el genoma al organismo blanco, para
ello hay mtodos que se emplean para la transferencia de genes en
animales, entre estos tenemos: Microinyeccin, Electroporacin (formacin
de poros en la membrana celular por exposicin a corrientes de alto voltaje),
Lipofeccin y el uso de Retrovirus, pero el mtodo ms comn es por
microinyeccin donde se transfiere el ADN individualmente a cada huevo.
Generalmente el huevo y el esperma son combinados en un recipiente con
agua y algunos medios mecnicos para asegurar la fertilizacin. Los equipos
que utilizan para inyectar el ADN son un microscopio de diseccin
estereoscpico y dos micromanipuladora, uno con aguja de microscopa de
cristal y el otro con una micropipeta para sujetar el huevo fertilizado. La
cantidad inyectada es de 10 a la sexta y 10 a la octava.
Los embriones de los peces sus ADN son inyectados en el citoplasma ya que
los proncleos de los huevos fertilizados son invisibles y los huevos opacos
en la mayora de especies de peces, en algunos peces el corin a veces es
duro y eso hace difcil la micro inyeccin.
Salmon transgnico: El inters principal de acuicultores es tener el mximo
de biomasa en menor costo posible, su creacin de peces transgnicos
como sper salmones se da por la velocidad, talla que alcanzaran en
periodos cortos, tambin fueron creados para resolver los problemas que se
presentaba en la industria de Canad durante el invierno, pues en una gran
parte de las zonas costeras, el agua alcanza temperaturas de muy bajas de
1.8c debido que estas temperaturas son letales para el cultivo de Salmn ,
pero algunos peces como el lenguado y el abadejo ocenico , producen unas
protenas anticongelantes . Para poder resolver la problemtica en el cultivo
de salmn, se encontr el gen del abadejo de la cual contiene la protena del
gen anticongelante luego se construy el gen recombinante y un gen
estructural que codificara a la hormona de crecimiento del Salmn del
atlntico, despus de haber cruzado los organismos transgnicos con
organismos silvestres se obtuvieron salmones que expresaban las hormonas
de crecimiento entre 2 a 6 veces ms rpido que los salmones normales.
Pez cebra transgnico: La creacin de peces brillantes fluorescentes a
cargo de la Universidad Nacional de Taiwn por haber inyectado genes que
producen protenas fluorescentes de la medusa abisal y del coral en vulos
fertilizados. Se obtuvieron peces que emitan colores verdes (GFP) y rojo
(RFP) en la oscuridad estos genes producen protenas fluorescentes en sus
msculos unidos con el gen mylz2, pero para poder evitar un aumento
indeseado de estos peces, eran estilizados siendo manipulados
genticamente.Pero con el tiempo se pudo constatar tras diversas
investigaciones por parte de la Universidad Nacional Federico Villa Real que
los peces tenan otra coloracin que sus lneas eran blanco y gris, pero esta
coloracin se daba durante la luz del da. El pez cebra puede vivir entre 2
aos y 3 aos y medio.
Transgnesis en ratones
Perspectiva Histrica: Originariamente se utiliz a ratones, pero con el
tiempo su uso se extendi en otras especies de esta manera se crea un
organismo que adquieres en forma definitiva una formacin gentica que no
le ha llegado por los canales de la evolucin. Los primeros trabajos fueron
realizados infectando embriones con retrovirus: se trata de la microinyeccin
de SV40 en blastocitos de ratn realizada por Ridodf Jaenich en 1974. La
primera produccin exitosa de ratones transgnicos utilizando la tcnica de
microinyeccin directa de ADN en el proncleo de vulo fertilizado fue
reportada por el cientfico Jhon Gordon y sus colaboradores en 1980.
Gordon y sus colegas introdujeron un plsmido recombinante que portaba al
gen de la tirosina quinasa del virus herpes conjuntamente con la regin
promotora del virus SV40. Una vez inyectados los huevos fertilizados fueron
trasplantados a una hembra receptora y luego evaluados al nacimiento por
tcnicas de hibridacin de ADN, obtenindose pruebas inequvocas del ADN
microinyectado. Estos experimentos aclararon que los genes clonados de
cualquier origen podan ser incorporados en forma permanente al genoma de
un embrin de mamfero. En 1982 al primer cambio fenotpico, en ratones
transgnicos portadores del gen estructural de la hormona de crecimiento de
la rata. Con la aparicin de esta tcnica, la gentica del ratn y de la rata de
laboratorio ha cambiado drsticamente.
Consideraciones generales: Las tcnicas de laboratorio que nos permiten
obtener embriones del tracto reproductivo de una hembra gestante,
cultivados in vitro y reimplantacin en otra hembra receptora. Estas tcnicas
constituyen la base sobre la manipulacin gentica de los embriones, como
puede ser: el desarrollo de quimeras, el trasplante de ncleos, la
transgnesis, los cultivos de clulas embrionarias pluripotenciales y
clonaciones.
Obtencin de embriones y superovulacin: Para comenzar a trabajar en
la manipulacin de embriones en ratn se debe tomar en cuenta varios
factores como una buena lnea consangunea presentando vulos resistentes
a la manipulacin y en el caso de utilizar superovulacin es necesario contar
con una lnea que responda bien al tratamiento hormonal. La lnea ms
utilizada es la FVB/N ya que es la nica en varios aspectos relacionados a la
produccin, como su promedio natural de cras en la camada es cercano a
10 y produce embriones cuyo proncleo masculino es muy grande y fcil de
visualizar para la microinyeccin y finalmente el porcentaje de embriones
inyectados que sobreviven y producen ratones vivos en mucho ms alto. Las
hembras que han ovulado naturalmente o en forma inducida deben recibir el
servicio de un macho frtil para producir los embriones que sern utilizados
para la microinyeccin. Aquellos machos que han sido previamente probados
con otras hembras y han demostrado un buen ndice de formacin de tapn
vaginal, sern los ideales para este propsito. Para obtener resultados
ptimos se debe mantener un macho y una hembra por jaula y una vez
comprobado el servicio dejar descansar al macho por dos o tres das antes
de colocarlo con otras hembras. Normalmente, la maana siguiente al
servicio se sacrifica a la hembra se extraen los oviductos, se realiza un
lavado de los mismos y se recogen los embriones en una placa Petri con
medio de cultivo adecuado. Luego se separan los embriones entre si y se
libera de las pegajosas clulas del cmulo para dejarlos aislados en
microgotas. Finalmente, se los vuelve a colocar en medio de cultivo limpio,
se los evala al microscopio ptico y se los deja en incubacin hasta el
momento de la microinyeccin del ADN.
Transferencia de embriones: Una vez mantenido los embriones en cultivo,
estamos en condiciones de colocarlos en el tracto reproductivo de una
hembra receptora que ha sido cruzada con un macho estril con el fin de que
los embriones se desarrollen a trmino. Las hembras receptoras se
anestesian y se exteriorizan los oviductos para proceder con la transferencia.
Las consideraciones para elegir este vientre sustituto deben involucrar
solamente los aspectos reproductivos y no los genticos a los recin nacidos
no aportan material gentico a los recin nacidos. Las hembras receptoras
deben tener un buen funcionamiento reproductivo y un comportamiento
maternal adecuado. Para este propsito se utiliza hembras provenientes de
grupos exocrino y todos los derivados de la familia Swiss Webster o hbridos
entre lneas consanguneas estndar. Otra consideracin a la hora de elegir
la hembra receptora de los embriones es la posibilidad de que el investigador
pueda distinguir las cras provenientes del trasplante embrionario de posibles
cras naturales de esa hembra. Esto se solucionar muy fcilmente con la
eleccin de pelaje adecuado.
Induccin de pseudopreez: La induccin de estado de pseudopreez es
fundamentalmente debido a que los roedores a diferencia de los primates,
necesitan el estmulo del acto sexual para preparar el tracto reproductivo
para la implantacin de los embriones. Este estimulo genera cambios
hormonales que alteran el ciclo estral de la hembra y llevaran la preez a
trmino. Se le llama pseudopreez al estado cuando tiene lugar una
estimulacin sexual exitosa, pero sin posterior implantacin de embriones. La
pseudopreez se debe lograr por medio del servicio de un macho estril o a
travs del uso de aparatos de masturbacin, aunque el servicio natural es
mucho ms eficiente.
Transgnesis en porcinos
Fecundacin in vitro: En 1974, Motlik y Fulka consiguieron fecundar in vivo
ovocitos porcinos que haban sido madurados in vitro y cuatro aos ms
tarde, Iritani 1978 lograron la primera MIV-FIV en porcino, utilizando
espermatozoides incubados en tractos reproductivos aislados de hembras.
Nagai 1984 fueron los primeros en capacitar in vitro espermatozoides
porcinos con xito. Un ao despus Cheg 1985 obtuvo el nacimiento de cras
a partir de ovocitos MIV y FIV. La posibilidad de predecir la capacidad
fecundante de un eyaculado mediante los anlisis in vitro es un problema
que hasta la fecha no ha sido resuelto adecuadamente (Hammerstedt, 1996).
Algunos autores proponen como causa de la inconsistencia de los resultados
conseguidos, la evaluacin de un nmero relativamente reducido de clulas,
la gran influencia de la subjetividad del observador y la alta variabilidad que
presentan muchos anlisis seminales (Graham y cols., 1980; Evenson y
cols., 1994; Saacke y cols., 1994). Adems, el nmero de espermatozoides
aplicados en cada inseminacin es un factor muy importante a la hora de
evaluar la fertilidad y su relacin con los parmetros de calidad seminal
(Saacke, 1984; Saacke y cols., 1988; Fearon y Wegener, 2000).
Factores que afectan la capacidad espermtica y fecundacin in vitro.
-Procedencia de espermatozoides: En muchos laboratorios, el semen
eyaculado no congelado es la principal fuente de espermatozoides utilizada
como rutina en los estudios de FIV porcina. Pero el semen refrigerado, es
decir, semen fresco eyaculado diluido en medio de conservacin y mantenido
a 15 16 c permite la utilizacin de verracos que no son de laboratorio,
donde se va a realizar la fecundacin in vitro, sin necesidades de que el
semen tenga que ser congelado.
-Preincubacin espermtica: La estructura del medio en el que se
preincuba a los espermatozoides afecta a los parmetros de la fecundacin.
En ausencia de PFF (pig folicular fluir), se observ que la Preincubacin
estimulaba la capacitacin y aumentaba las tasas de penetracin y
poliesperma. Sin embrago al aadir PFF durante la Preincubacin, se
obtiene que se estimulaba la capacitacin de acrosoma, de modo que
durante la FIV se reduca la proporcin de espermatozoides capacitados y la
incidencia de poliesperma.
-Concentracin espermtica: La concentracin de espermatozoides
presentes durante el cultivo con los ovocitos afecta a la penetracin y la
poliesperma, ya que a mayor concentracin de semen se va a capacitar un
mayor nmero de espermatozoides. Sin embrago, la disminucin de estos
atrae consigo bajas tasas de penetracin.
-Tiempo de Cocultivo de los ovocitos en el semen: La duracin ptima del
Cocultivo de los ovocitos con el semen va a depender de las condiciones a
las que sean sometidos los espermatozoides. De modo que el tiempo ptimo
de Cocultivo va a depender de las caractersticas de cada estudio, ya que un
Cocultivo por encima de las 6horas o incrementa la tasa de penetracin, pero
si aumenta la poliesperma, en cambio si Cocultivo es de 3 horas los
procesos se invierten.
Maduracin in vitro: El proceso de maduracin del ovocito se suele dividir
en maduracin nuclear y citoplasmtica. El ovocito maduro a nivel nuclear
puede ser claramente identificado como aqul que reanuda la meiosis y
alcanza el estadio de MII; mientras que la maduracin citoplasmtica,
trmino que abarca una serie de acontecimientos no directamente
relacionados con la progresin de la meiosis pero que van a preparar al
ovocito para la fecundacin y el desarrollo embrionario posteriores
(Abeydeera, 2002), se ha de estimar de un modo indirecto.
Factores que afectan a la calidad de los ovocitos
Condiciones de transporte de los ovarios al laboratorio:
La duracin y temperatura del transporte al que son expuestos los ovarios
desde que son recogidos en el matadero hasta que se comienzan a procesar
en el laboratorio puede influir en la calidad de los ovocitos, una de estas
consecuencias es una disminucin en la maduracin del ovocito.
Presencia de cuerpos lteos y folculos qusticos en el ovario:
La presencia de cuerpos lteos en los ovarios afecta a la calidad de los
ovocitos recuperados, por lo que es conveniente no utilizar ovarios con
cuerpos lteos en los protocolos de PIV de embriones porcinos. As mismo,
es recomendable desechar aquellos ovarios que presentan folculos
qusticos.
Tamao del folculo:
El tamao del folculo determina la capacidad de desarrollo del ovocito, es
por eso que los ovocitos medianos (entre 3-7 mm) son utilizados en la
produccin de embriones.
Sistemas de maduracin in vitro de los ovocitos: Condiciones de
cultivo y medios de maduracin: Las condiciones fsicas especficas del
ambiente en el que se maduran los ovocitos, as como la mayor o menor
definicin del medio de maduracin utilizado (suero, clulas somticas, etc.)
van a influir en la maduracin de los ovocitos.
Cultivo de Embriones: En los primeros estudios sobre cultivo in vitro de
embriones porcinos, no se logr sobrepasar el estadio de 4 clulas a partir
de embriones de una clula obtenidos in vivo (Davis, 1985). Pero
posteriormente se consigui superar el bloqueo en 4 clulas gracias al uso
de Oviductos de ratn en cultivo (Kriser et al., 1989).
En estudios ms recientes, ms del 70% de los embriones porcinos
obtenidos in vivo y cultivados in vitro se han desarrollado hasta el estadio de
blastocisto en diferentes medios como medio Whittens modificado
(Beckmann y Day, 1993), medio NCSU23 (North Carolina State University 23;
Petters y Wells, 1993), medio Iowa State University (Youngs et al., 1993) y
medio BECM-3 (Beltsville Embryo Culture 3; Dobrinsky et al., 1996). Sin
embargo, al comparar la eficacia de estos medios para soportar el desarrollo
embrionario de embriones MIV-FIV se encontr un amplio rango (desde 5% a
30%) en la proporcin de blastocitos obtenida con cada uno de ellos
(Abeydeera et al., 1999a).
Condiciones del cultivo en embriones influyen diversos factores
como:
Tensin del oxgeno
Relacin: embriones/volumen de medio
Se ha demostrado que el cultivo de embriones en volmenes reducidos de
medio o en grupos incrementa significativamente el desarrollo a blastocito.
Medios de cultivo en embriones: Empleando diversos medios se obtuvo en
varios de ellos un desarrollo del 70% pero arrojaron un amplio rango de
resultados. Es por eso que hasta ahora el NCSU23 es el medio de eleccin
para el cultivo de embriones MIV-FIV. De otro lado esto no afirma que este
medio le proporcione al embrin un ambiente beneficioso, sino que refleja la
capacidad de tolerar ciertas condiciones artificiales.
Morfologa y calidad de los embriones producidos in vitro: La PIV de
porcinos ha tenido notables avances, pero difiere de los embriones obtenidos
in vivo, ya que el nmero de clulas obtenido en PIV es menor que lo
obtenido en in vivo. Otra diferencia es en la morfologa y filamentos de actina
de in vivo que en los blastocitos presentan una masa celular interna ms
prominente y los blastmeros de los embriones tempranos tienen un aspecto
ms definido que los obtenido in vitro.
Transgnesis en porcinos
Mtodos para la produccin de animales transgnicos
Vectores virales
Microinyeccin pronuclear
Transferencia de clulas pluripotenciales (ES)
Transferencia mediada por espermatozoides
Transferencia de Ncleos transfectados
Produccin Animal
Alterar la composicin corporal
Mejorar la produccin
Crear animales resistentes a enfermedades
Reducir las prdidas embrionarias.
Cerdos transgnicos en situacin actual
Alterar la composicin de la carne
Gen para la Delta 12 cido graso desaturasa (hfat-1; Saeki y cols, 2004)
Mejorar la produccin animal
Incorporacin del gen para la hormona de crecimiento (GH1; Hammer, 1985)
Incorporacin del gen para factores de crecimiento (IGF1; Pursel y cols,
1999) Produccin -lactoalbumina bovina en leche (Bleck y cols, 1998)
Crear animales resistentes a enfermedades
Resistencia frente a Influenza (Brenig y cols, 1990)
Knock-out del gen que codifica receptor intestinal de E. Coli K88 (Edfords y
cols, 1986)
Reducir las prdidas embrionarias
Crear animales mejor adaptados al ambiente
Obtencin de cerdos destinados a aumentar la asimilacin del fsforo y
reducir la concentracin de este elemento en las heces
Obtencin de rganos y tejidos compatibles con el ser humano:
Xenotransplantes
Conclusiones
Tenemos algunos riesgos en el caso del salmn transgnicos y estos
son:
Los salmones modificados genticamente comen tres veces ms en el
laboratorio que los no modificados pero es menos cuidadoso con sus
depredadores.
El salmn modificado genticamente puede cruzarse con los salvajes
liberando sus genes de la hormona del crecimiento a las poblaciones
salvajes con resultados impredecibles.
La industria porcina tiene un alto nivel de competitividad con respecto a
la reproduccin de reducir costos e incrementar la eficacia.
La concentracin espermtica cumple un papel importante para la penetracin y
la poliespermia.
As mismo el tiempo de co-cultivo genera diversos resultados para la
fecundacin in vitro.
El xito del desarrollo de una fecundacin in vitro no es necesariamente dada
por el medio que se obtiene si no de la capacidad de adaptacin que tiene el
embrin ante su entorno.
La transgnesis en porcinos ha logrado tal xito que han sido empleados en
Xenotrasnplantes a humanos.
La clonacin en porcinos si bien al comienzo no tuvo resultados favorables, con
el empleo de diversos medios se ha logrado un mejoramiento en la clonacin de
dicha especie.

Bibliografa
http://www.tdx.cat/bitstream/handle/10803/9902/munoz.pdf;jsessionid=8
28BACF7041A0BDF3944A472CE747974.tdx1?sequence=1
http://es.slideshare.net/leslie1821/biotecnologia-aplicada-a-la-
acuicultura
http://www.argenbio.org/adc/uploads/pdf/Biotecnologia%20y
%20acuicultura.pdf
http://repository.udca.edu.co:8080/jspui/bitstream/11158/216/1/202442.p
df

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