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Evaluacin del proceso fermentativo utilizando


clulas libres e inmovilizadas para la
elaboracin de hidromiel
Andrs Mauricio Martnez Hoyos, Giordan Vivas Espitia, Marta Cecilia Quicazn

Como alternativa al uso de clulas libres est el uso de


clulas inmovilizadas; tcnica que consiste en encerrar la
RESUMEN clula en una matriz brindndole proteccin a la vez que
El objetivo de esta investigacin es comparar el efecto que ofrece diversas ventajas tcnicas y econmicas, que
presenta el uso de clulas libres y clulas inmovilizadas durante solucionan la mayora de los inconvenientes presentados en la
el proceso de elaboracin de una bebida alcohlica a partir de fermentacin tradicional con clulas libres [3].
miel conocida como hidromiel. Se conoce que el uso de clulas
inmovilizadas puede favorecer los procesos de fermentacin Una de las matrices ms utilizadas en la inmovilizacin son
logrando una mayor estabilidad celular, bajos costos de los geles de Alginato; sin embargo existen otro tipo de
recuperacin, reutilizacin de la biomasa y proteccin de las materiales que pueden ser utilizados como soporte para la
clulas contra el estrs del ambiente, as como un incremento de inmovilizacin de clulas tales como pellets de gluten, pectato
la productividad y el rendimiento del producto. En este trabajo
tambin se evaluar la viabilidad de reutilizar las clulas en y carragenina [2][4]. El uso de clulas inmovilizadas en la
nuevas fermentaciones y sus efectos bajo parmetros de calidad, produccin de hidromiel ha sido estudiado con matrices tales
productividad y rendimiento. como geles de pectato de calcio[5], alginato de calcio [6] y
alginatoquitosano [7].

Palabras Clave alginato de sodio, carragenina, miel. Con base en lo anterior, el presente proyecto de
investigacin pretende contribuir al conocimiento del proceso
de fermentacin alcohlica de la miel, realizando una
I. INTRODUCCIN comparacin entre el uso de clulas libres y clulas
inmovilizadas de levadura Saccharomyces cerevisiae mediante
L a hidromiel es el producto resultante de la fermentacin de
miel diluida que alcanza una concentracin entre el 8% y
el 18 % v/v de etanol, esta bebida se elabora normalmente
la evaluacin de parmetros fisicoqumicos y sensoriales en el
proceso de fermentacin y de igual manera aportar al
de manera artesanal, por lo que la informacin exsitente desarrollo y crecimiento de la cadena apcola en Colombia.
respecto a las condiciones de su produccin es limitada y
existen vacos de conocimiento relacionados con la II. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
formulacin apropiada y optimizacin de su proceso [1]. El proceso de produccin de la hidromiel con uso de clulas
libres puede presentar inconvenientes como la falta de
Tradicionalmente este tipo de fermentacin se realiza uniformidad en el producto final, retraso y detenimiento de las
mediante el uso de clulas libres, mtodo que consiste en fermentaciones e incluso produccin de malos sabores por
inocular el mosto (miel diluida en agua) directamente con la parte de las levadura [8]. Estos problemas se asocian
levadura; este tipo de proceso presenta algunos inconvenientes principalmente con la incapacidad de adaptacin de las cepas
tales como riesgos de contaminacin, dificultad de separacin de levadura a las condiciones y factores del medio, por
de las clulas al finalizar el proceso, alto costo del reciclaje ejemplo el estrs ambiental el cual disminuye el crecimiento y
microbiano, prdida de biomasa y una respuesta adversa por la la productividad del proceso, generando mayores costos de
variacin ambiental [2]. produccin [9].

La fermentacin del hidromiel tambin se puede desarrollar


mediante el uso de clulas inmovilizadas; existen diferentes
materiales de soporte y tecnologas de inmovilizacin para la
Andrs Mauricio Martnez Hoyos: ammartinezh@unal.edu.co, Estudiante
de Maestra en Ciencia y Tecnologa de Alimentos, Universidad Nacional de produccin de bebidas alcohlicas que ayudan a mejorar el
Colombia. proceso de produccin y a solucionar algunos de los
Giordan Javier Vivas Espitia: gjvivase@unal.edu.co, estudiante de problemas generados utilizando clulas libres [3]; sin embargo
Ingeniera Qumica, Universidad Nacional de Colombia. respecto a la produccin de hidromiel el uso de clulas
Marta Cecilia Quicazan: mcquicazand@unal.edu.co, Profesora asociada,
Instituto de Ciencia y Tecnologa de Alimentos, Universidad Nacional de inmovilizadas es un campo poco estudiado. Con base en lo
Colombia. anterior, este trabajo de investigacin pretende contribuir al
conocimiento de los procesos de fermentacin alcohlica a
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partir de miel comparando el uso de clulas libres y clulas las caractersticas de forma, resistencia al tacto y su
inmovilizadas mediante parmetros de calidad, productividad, estabilidad en contacto con el mosto de fermentacin. Una vez
rentabilidad y la capacidad de estas ltimas para ser encontrada la concentracin ms adecuada ser utilizada como
reutilizadas en nuevas fermentaciones. biocatalizador en el proceso fermentativo.

III. HIPOTESIS Reutilizacin de clulas en nuevas fermentaciones


Los estudios a realizar en el presente proyecto estn Terminada la primera fermentacin, las clulas
dirigidos a determinar si existen diferencias fisicoqumicas y inmovilizadas sern reutilizadas en nuevas fermentaciones. En
sensoriales en el proceso de elaboracin de hidromiel cada fermentacin se realizar seguimiento de los parmetros
utilizando clulas libres o clulas inmovilizadas. de rendimiento y productividad. Hacia el final de cada lote el
lquido de fermentacin ser separado y el biocatalizador se
lavar con agua destilada para reutilizarse en una nueva
IV. METODOLOGIA
fermentacin [14].
Este trabajo se desarrollar en la planta piloto de vegetales y
en el laboratorio de anlisis de alimentos del Instituto de Evaluacin del proceso de fermentacin
Ciencia y Tecnologa de Alimentos (ICTA) de la Universidad Se llevar a cabo una cintica de la fermentacin del mosto,
Nacional de Colombia sede Bogot. analizando las concentraciones de azcares (glucosa, fructosa,
sacarosa) y de etanol. La determinacin del azcar se realizar
Materias primas con el mtodo AOAC 977.20 [15]. Adems, se realizar un
La miel y el polen sern adquiridos en apiarios del seguimiento a los parmetros de pH, acidez titulable, acidez
municipio de San Mateo del departamento de Boyac. Se voltil, cidos orgnicos y grado alcohlico a lo largo del
realizarn los anlisis fisicoqumicos necesarios para el proceso de fermentacin y un anlisis sensorial del producto
cumplimiento de la normatividad vigente [10], [11]. Se final.
utilizar levadura Saccharomices cerevisiae, raza fisiolgica
bayanus usada en procesos de fermentacin para la obtencin V. RESULTADOS ESPERADOS
de bebidas alcohlicas y licores tipo vino. Como matrices para
el proceso de inmovilizacin se trabajar con dos tipos de Se espera que al finalizar la presente investigacin se pueda
polisacridos: carragenina y alginato de sodio. determinar si existen diferencias en los parmetros de
rendimiento, productividad o calidad sensorial al comparar los
Proceso de fermentacin procesos fermentativos con clulas libres o clulas
La miel y el Mielato sern diluidos en agua hasta una inmovilizadas en alginato o carragenina durante la elaboracion
concentracin de 24 Brix, posteriormente se agregar polen de hidromiel.
como fuente de nitrgeno en relacin de 4g/l; esta mezcla ser
sometida a un proceso de pasterizacin a 65C durante 20 VI. IMPACTO DEL PROYECTO
minutos y a un proceso de enfriamiento rpido para lograr la El desarrollo de esta investigacin busca sentar bases de
destruccin de la flora natural presente en la mezcla. Todos los conocimiento en lo relacionado con los procesos de
recipientes y utensilios utilizados sern previamente elaboracin de una bebida alcohlica tipo vino a partir de la
esterilizados. La activacin de la levadura se realizar en un miel. Los resultados obtenidos permitirn futuras
volumen igual al 10 % del mosto usando una concentracin de investigaciones relacionadas con el mejoramiento del proceso
levadura de 0.5 g/l del mosto final. Las temperaturas o el escalamiento de los mtodos utilizados en esta
manejadas durante el proceso de fermentacin correspondern investigacin.
a 25 y 30 C.
AGRADECIMIENTOS
Procesos de inmovilizacin Al Instituto de Ciencia y Tecnologa de Alimentos - ICTA
Para la inmovilizacin en alginato se preparar una solucin de la Universidad Nacional de Colombia sede Bogot, a la
de alginato de sodio al 3% m/v a la cual se le adicionar una Direccin de Investigacin de la Universidad Nacional sede
suspensin de levaduras activada previamente en un 5 % del Bogot -DIB y al Departamento Administrativo de Ciencia,
volumen final del mosto, consiguiendo una mezcla al 1.5% Tecnologa e Innovacin, Colciencias.
m/v de alginato de sodio y una concentracin de levadura de
0.5 g/l de mosto. Esta mezcla se har gotear con ayuda de una
REFERENCIAS
bomba peristltica sobre una solucin esterilizada de cloruro
de calcio 0.05 M para obtener las esferas con las clulas
encapsuladas dejndose en refrigeracin durante 24 horas con [1] T. Gomes, Produo de hidromel: efeito das
el fin de que adquirieran consistencia y mayor estabilidad condies de fermentao, Tesis de Maestria.
[12]. Posteriormente, las esferas se lavarn con agua destilada Instituto politecnico Escola Superior Agrria de
y se adicionarn a los fermentadores correspondientes. Braganca, Braganca, 2010.

Para el proceso de inmovilizacin con carragenina se [2] S. J. Sarma, M. Verma, and S. Brar, Industrial
evaluarn distintas concentraciones de carragenina y sal de Fermentation for Production of Alcoholic Beverages,
cloruro de potasio [13]. A las esferas formadas se les evaluar in Fermentation Processes Engineering in the Food
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Industry, C. R. Soccol, A. Pandey, and C. Larroche, [13] J. C. T. Dias, R. P. Rezende, and V. R. Linardi,
Eds. CRC Press, 2013, pp. 299322. Biodegradation of acetonitrile by cells of candida
guilliermondii ufmg-y65 immobilized in alginate , -
[3] Y. Kourkoutas, A. Bekatorou, I. . Banat, R. Marchant, carrageenan and citric pectin, Brazilian J. Microbiol.,
and A. Koutinas, Immobilization technologies and vol. 31, pp. 6166, 2000.
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production: a review, Food Microbiol., vol. 21, no. 4, [14] Y. Kourkoutas, M. Komaitis, A. A. Koutinas, A.
pp. 377397, Aug. 2004. Kaliafas, M. Kanellaki, R. Marchant, and I. M. Banat,
Wine production using yeast immobilized on quince
[4] J. Tampion and M. D. Tampion, Immobilized Cells: biocatalyst at temperatures between 30 and 0 C,
Principles and Applications, Cambridge University Food Chem., vol. 82, pp. 353360, 2003.
Press, 1987, pp. 135162.
[15] AOAC, Official Method 977.20, Separation of
[5] M. Navrtil, E. turdk, and P. Gemeiner, Batch and Sugars in Honey, Liquid Chromatographic Method,
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977982, 2001.

[6] N. Qureshi and D. V. Tamhane, Production of mead


by immobilized whole cells of Saccharomyces
cerevisiae, Appl. Microbiol. Biotechnol., vol. 21, pp.
280281, Mar. 1985.

[7] A. P. Pereira, A. Mendes-Ferreira, J. Oliveira, L.


Estevinho, and A. Mendes-Faia, Effect of
Saccharomyces cerevisiae cells immobilisation on
mead production, LWT - Food Sci. Technol., vol. 56,
pp. 2130, Apr. 2014.

[8] A. P. Pereira, T. D. Dias, J. Andrade, E. Ramalhosa,


and L. Estevinho, Mead production: Selection and
characterization assays of Saccharomyces cerevisiae
strains, Food Chem. Toxicol., vol. 47, pp. 2057
2063, 2009.

[9] A. Mendes-Ferreira, F. Cosme, C. Barbosa, V. Falco,


A. Ins, and A. Mendes-Faia, Optimization of honey-
must preparation and alcoholic fermentation by
Saccharomyces cerevisiae for mead production., Int.
J. Food Microbiol., vol. 144, no. 1, pp. 193198, Nov.
2010.

[10] Ministerio de la proteccin social, Resolucion 1057.


Colombia, 2010.

[11] ICONTEC, NTC 1273. Miel de abejas. Instituto


Colombiano de Normas Tcnicas y Certificacin,
Bogota D.C, 2007.

[12] L. A. Caicedo M, Estudio comparativo de la


generacin de CO2 en fermentaciones con clulas
libres e inmovilizadas de zymomonas mobilis, Rev.
Ing. e Investig., p. 23, 1996.

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