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PARTE 4

COMPARTIMIENTOS INTRACELULARES Y CLASIFICACION DE PROTENAS

Introduccin
Compartimentos celulares

Las bacterias o clulas procariontes no tienen organoides, presentan un solo


compartimento que est rodeado por la membrana plasmtica; de modo que todos los procesos
suceden en el mismo lugar. As por ejemplo, la duplicacin del ADN en las bacterias se realiza en
el mismo sitio que la traduccin: la matriz del citoplasma de la clula. A diferencia de las bacterias,
las clulas eucariontes estn subdividas en compartimentos intracelulares, stos se
encuentran limitados por las endomembranas que permiten la divisin de trabajo por lo que el
metabolismo se torna ms complejo. Un ejemplo de ello lo constituyen los organoides y el ncleo
separados del resto de la matriz del citoplasma.
A pesar de las diferencias estructurales entre una clula eucariota y procariota, existen
notables semejanzas entre ellas. La matriz citoplasmtica de una clula eucariota contiene el
mismo tipo de componentes moleculares que una bacteria, es decir, molculas de ARN, protenas
globulares, enzimas, etc.
Las clulas eucariotas poseen organoides y estructuras que surgieron durante el proceso
evolutivo representados por los elementos citoesquelticos y por las membranas intracelulares o
endomembranas. Estas ltimas comprenden el sistema vacuolar o endomembranoso y los
organoides de membrana: mitocondrias, cloroplastos y peroxisomas. En consecuencia, en la
clula eucariota aparecen diversos compartimientos entre los que sobresale el ncleo como
compartimiento.
Cada organoide es un compartimento rodeado por una membrana biolgica (o dos) en el
cual ocurren procesos metablicos distintos a los de otros compartimentos. Cada compartimento
tiene sus propios grupos de enzimas, protenas y otras molculas especializadas, adems de un
sistema de transporte y distribucin de productos que lo comunican con otros organoides y con la
matriz citoplasmtica.
Para comprender el funcionamiento y la estructura de la clula eucarionte debemos imaginar
que hay distintas estaciones de trabajo que son los organoides y el ncleo y que hay medios de
comunicacin entre un compartimento y otro por el cual se transfieren, entre ellos, distintas
molculas.
Las protenas son las que juegan un papel central en la compartimentalizacin de la clula ya
que las enzimas, que son protenas, catalizan las reacciones que ocurren en cada organoide,
transportan molculas hacia dentro o hacia afuera de cada organoide y actan como marcadores
de superficie de cada organoide. Ese marcador sirve para que las protenas distingan a cada
organoide y puedan ir selectivamente a uno u otro.
Debemos recordar que en una clula de mamfero hay aproximadamente cerca de 10 billones de
molculas de protenas de 10 mil tipos distintos y todas estas protenas se sintetizan en el citosol.
Luego que es sintetizada tiene que ir a algn lugar especfico que le corresponda, como a las
mitocondrias, al retculo endoplsmico, al Aparato de Golgi o a un lisosoma. Dicho destino lo
alcanzan porque la protena tambin lleva una seal que le indica donde tiene que ir. Esta seal
se combina con el marcador del destino y el mecanismo hace que cada protena vaya al lugar que
le corresponde. Esta hiptesis, llamada Hiptesis de la Seal, permite explicar el destino de gran
cantidad de molculas dentro de la clula.
El citoplasma, puede ser subdividido en dos espacios principales: 1- el interior del sistema
de organoides y estructuras membranosas, y 2- el exterior de los organoides, representado por la
matriz citoplasmtica o citosol, verdadero medio interno de la clula que rellena todos los espacios
no ocupados por el sistema de endomembranas, las mitocondrias y peroxisomas.

Todas las clulas eucariontes tienen el mismo juego de compartimentos, todos rodeados por
membranas.

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EL CITOSOL O MATRIZ CITOPLASMATICA
EL RETICULO ENDOPLASMICO LISO , GRANULAR y SECTOR INTERMEDIO o DE
TRANSICION
APARATO DE GOLGI
LISOSOMAS
PEROXISOMAS
ENDOSOMAS
NUCLEO
MITOCONDRIAS
ENDOSOMAS TARDIOS y TEMPRANOS

Vista general de los compartimentos

La MATRIZ CITOPLASMATICA O CITOSOL es ms o menos la mitad del volumen de una


clula o sea que es abundante, es el sitio donde se fabrican las protenas y el sitio donde
ocurren la mayora de procesos metablicos.
El retculo endoplsmico LISO Y GRANULAR abarca la mitad de la cantidad de membrana
que tiene una clula.
El APARATO DE GOLGI se caracteriza por estar organizado como pilas de membranas ,
recibe lpidos y protenas del retculo endoplsmico y despus las enva a distintos destinos ,
al mismo tiempo que modifica todos esos productos que recibe , usualmente en forma
covalente mientras van en su ruta al destino.
Los LISOSOMAS que tienen enzimas digestivas y que se ocupan de digerir partculas
fagocitadas o lo que se incorporan por pinocitosis o sea partculas endocitadas
En su camino hacia los lisosomas, las partculas que fueron endocitadas pasan por otro
compartimento que se llama ENDOSOMAS .
Otro compartimento son los MICROCUERPOS O PEROXISOMAS que actan en reacciones
de oxidacin.
Las MITOCONDRIAS producen energa
El NUCLEO guarda la informacin gentica que hace que todo funcione

Todos estos organoides en general hacen la misma funcin en cualquier clula pero una clula
difiere de otra en la cantidad que tiene de organoides. Por ejemplo: si una clula se ocupa
fundamentalmente de procesos que requieren de mucha energa tendr muchas mitocondrias.

Distribucin de los compartimentos


Estos organoides o compartimentos no estn distribuidos al azar. En la mayora de las clulas,
el Golgi est cerca del ncleo mientras que el retculo endoplsmico se encuentra irradiando hacia
todas las direcciones, desde el ncleo. Esta distribucin caracterstica depende de la interaccin
entre cada organoide y el citoesqueleto; por ejemplo: la localizacin del retculo endoplsmico y
del Aparato del Golgi depende de los microtbulos , si los microtbulos se destruyen en una
clula, el Golgi se dispersa, se desconcentra y el retculo endoplsmico se colapsa y queda
ubicado en el centro de la clula .

Evolucin de los compartimentos

Las relaciones entre los distintos organoides o compartimentos pueden ser explicadas desde su
origen a travs de la evolucin. De sta forma se puede suponer como fue originada la
mitocondria, el retculo endoplsmico, el Golgi a partir de una clula primitiva o procarionte que
careca de ellas

La clula procarionte primitiva o arquibacteria pudo haber aparecido hace ms de 3000 millones
de aos, tiene ADN fijo unido a la membrana plasmtica y tambin tiene ribosomas unidos por
ARN mensajero. Aparentemente sta clula en algn momento determinado sufri un proceso de

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invaginacin de la membrana plasmtica que dio origen al MESOSOMA y entonces sta clula se
transforma en eubacteria La invaginacin se profundiza y termina envolviendo al ADN con lo cual
queda formado el ncleo, con sus poros y lminas nucleares; el ADN siempre est unido a la
envoltura nuclear como se sabe actualmente.
El retculo endoplsmico es la misma membrana invaginada que qued en relacin con la E.N con
los ribosomas unidos a la membrana del retculo endoplsmico. El origen de la mitocondria se
explica a travs de la hiptesis de la simbiosis original que supone que la clula primitiva fagocito
una bacteria la cual quedo convertida en mitocondria.

El citosol
En promedio el citosol representa el 50 % del volumen del citoplasma, y el pH es de 7,2, En
el citosol se producen la mayora de las funciones citoplasmticas. La matriz citoplasmtica
contiene: agua, iones, metabolitos de bajo peso molecular y protenas como las enzimas que
intervienen en la gluclisis anaerbica, sntesis y degradacin del glucgeno, y adems toda la
maquinaria para la sntesis de protenas: ARN mensajero, ARN transferencia, ARN ribosmico,
chaperonas, elementos del citoesqueleto, proteosomas.
El citosol de muchas clulas presenta inclusiones, son grnulos no limitados por membrana,
acmulos de molculas. Molculas transitorias no esenciales para la vida detectable al MO. Por
ejemplo, las clulas musculares y los hepatocitos contienen grnulos de glucgeno, un polmero
de glucosa con funcin de almacenamiento de energa celular utilizable, llamados glicosoma.
Cuando la disponibilidad de glucosa se eleva la glucgeno sintetasa citoslica elabora
grandes polmeros ramificado de glucgeno. Los hepatocitos constituyen un tipo nico en el
sentido de que no acumulan glucgeno para su propio uso sino para enviar glucosa hacia la
sangre a fin de mantener en ella una concentracin constante de glucosa (glucemia) aun despus
de varias horas de ayuno.
El citosol de adipositos contiene grandes gotas de triacilgliceroles casi puros, una forma de
almacenamiento de cidos grasos. En los adipocitos de del tejido conectivo.
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En algunos tipos celulares el citosol contiene pigmentos es decir sustancias con color
propio- que son producidas en la misma clula o que provienen del exterior. El mas difundido es la
lipofucsina de color marrn, compuesta por fosfolpidos combinados con protenas. Debido a que
aumenta con la edad, se lo conoce como pigmento de desgaste.
Finalmente, algunas clulas contienen en el citosol cristales de protenas, de significado
generalmente desconocido.

En el citosol los ribosomas sintetizan protenas


El ADN genmico que es considerado como el conjunto de instrucciones que dirigen todas
las actividades celulares. Estas instrucciones se llevan a cabo por medio de la sntesis de ARN y
protenas. El comportamiento de una clula est determinado no solo por el conjunto de genes
que ha heredado sino tambin por cuales de estos genes se expresan en un momento
determinado.
Las clulas musculares y hepticas, por ejemplo, contienen los mismos genes; la funcin de
estas clulas est determinada no por la diferencias de sus genomas, sino por patrones regulados
de expresin gnica que dirigen el desarrollo y la diferenciacin.
El primer paso de la expresin de un gen, la transcripcin del ADN a ARN, es el nivel
primario de regulacin de la expresin gnica en procariotas y eucariotas. En las clulas
eucariotas los ARNs son modificados de varias formas por ejemplo, eliminando intrones por
corte y empalme- para transformar el transcripto primario en su forma funcional. Los distintos tipos
de ARN tienen diferentes funciones en las clulas, el ARNm sirve de molde para la sntesis de
protenas, los ARNr y el ARNt participan de la traduccin del ARNm.
La sntesis de protenas es la etapa final de la expresin gnica. Sin embargo, la traduccin
del ARNm es slo el primer paso en la construccin de una protena funcional. La cadena
peptdica se debe plegar en una conformacin tridimensional adecuada.
LE 17-3

DNA
TRANSCRIPTION

mRNA
Ribosome
TRANSLATION

Polypeptide

Prokaryotic cell

Nuclear
envelope

DNA
TRANSCRIPTION

Pre-mRNA
RNA PROCESSING

mRNA

Ribosome
TRANSLATION

Polypeptide

Eukaryotic cell

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Resumen de las etapas que conducen desde el gen hasta las protenas. Todas las protenas
que se sintetizan en los ribosomas (excepto unas pocas elaboradas en las mitocondrias) se
fabrican en el citosol, pero solo una parte permanece en l. Las restantes se dirigen al ncleo, al
sistema de endomembranas, a las mitocondrias y a los peroxisomas.

Ribosomas o Grnulos de Palade


Los ribosomas o grnulos de Palade son organoides descubiertos a partir del Me debido a
que son muy pequeos. Pueden encontrarse en las clulas solas o unidas entre s por una
molcula de ARNm formando polirribosomas, o unidos a la membrana del RE formando el RER o
REG.
Se caracterizaron como partculas subcelulares y normalmente se los designa de acuerdo a
su coeficiente de sedimentacin: 70S para los ribosomas procariotas y 80S para los ribosomas de
clulas eucariotas, los cuales son de mayor tamao. Tanto los ribosomas procariotas como
eucariotas estn formados por dos subunidades distintas, compuesta por protenas y por ARNr.
Protenas y ARNr unidos por interacciones hidrofbica no por uniones covalentes. Se
autoensamblan. La subunidad mayor del ribosoma es capaz de catalizar la formacin de enlace
peptdico.
Durante la sntesis de protenas un ribosoma se desplaza a lo largo de la cadena de ARNm,
mientras interacta con diversos factores proteicos y el ARNt,
En la subunidad menor algunas protenas forman dos reas una al lado de la otra-
denominadas sitio P (por peptidil) y sitio A (por aminoacil). La subunidad mayor las protenas
ribosmicas formaran un tnel por el que saldra la cadena polipeptdica a medida que se
sintetiza.
ARNr DE LOS RIBOSOMAS
El ARNr tiene actividad enzimtica o cataltica o sea que realiza reacciones qumicas como las
enzimas. Esta caracterstica se considera fundamental en la evolucin de la vida sobre la tierra, ya
que permiti el origen de las primeras clulas y su evolucin.
La letra S indica "unidades Svedberg del coeficiente de sedimentacin. Es una medida que es
proporcional al peso y tamao de la partcula y que permite tener una idea de sus dimensiones,
expresarlas fcilmente y poder compararlas con otras. Si, en cambio, quisiramos decir el peso o
el tamao de los ribosomas, tendramos que expresar nmeros muy largos, difciles de recordar;
por ese motivo se utilizan las unidades "S".
Composicin qumica: ARN 50 % y protenas 50 %

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Cada ribosoma eucaritico est compuesto por dos subunidades una mayor y otra menor-
identificadas con las siglas 40S y 60S. Los nmeros hacen referencia a los coeficientes de
sedimentacin de las subunidades. Juntas la subunidades 40S y 60S forman la unidad 80S que
representa al ribosoma completo.
Cada unidad ribosmica est integrada por una o ms molculas de ARNr ms un
determinado nmero de protenas. As, la subunidad mayor contiene los ARNr 28S, 5,8S y 5S ms
50 protenas denominadas L1....L50; y la subunidad menor contiene el ARNr 18S mas 33
protenas S1...S33. Dado que las 83 protenas ribosmicas se construyen a partir de otros tantos
ARNm, puede decirse que en la formacin del ribosoma intervienen 85 genes (83 corresponden a
las protenas, uno al ARNr 45S y otro al ARN 5S)

Funcin: interviene en la sntesis de protenas, siendo el lugar donde se ordenan todos los
componentes que actan en la misma. Es la "fabrica" donde se encuentran todas las maquinarias
biosintticas de las protenas. Slo necesita al ARNm que le lleva el cdigo de cmo tiene que ser
la secuencia de aminocidos y el ARNt que trae cada uno de los aminocidos a medida que se
van necesitando. El ARNm sera el "director " de la fabrica y el ARNt el que trae la "materia prima,
que son los aminocidos.
ARN de transferencia: Durante la traduccin, cada uno de los 20 aa debe ser alineado con
su correspondiente codn del ARNm molde. Todas las clulas contienen distintas molculas de
ARNt que sirven como adaptadores en este proceso.
Los ARNt tienen una longitud de 70 a 80 nucletidos con una estructura en forma de hoja de
trbol y horquilla debida a la complementariedad de bases entre las distintas regiones de la
molcula.
Los ARNt para poder actuar como adaptadores necesitan dos regiones distintas, una
secuencia CCA en su extremo 3`al cual los aa se unen covalentemente, en concreto a la ribosa de
la adenosina. La secuencia del ARNm es reconocido por el lazo del anticodn, localizado en el
extremo de la molcula del ARNt plegada el cual se une al codn adecuado mediante
complementariedad de bases

Los ribosomas han sido considerados durante mucho tiempo estructuras pasivas en las cuales
ocurre la elongacin de la cadena de protena, sin embargo actualmente se considera que son
participantes activos en la biosntesis de protenas.

COMPARTIMIENTOS INTRACELULARES Y TRFICO DE PROTENAS

A diferencia de las bacterias, que generalmente constan de un nico compartimiento rodeado


de membrana plasmtica, las clulas eucariotas estn dividas en compartimientos rodeados de m
que son funcionalmente distintos. Cada compartimiento u orgnulo contiene su propia coleccin
de enzimas, molculas especializadas, y un mecanismo de distribucin que transporta
especficamente los compuestos de un compartimiento a otro.
Para que una clula funcione de manera adecuada, cada una de sus numerosas protenas
debe estar ubicada en la membrana o el compartimiento acuoso celular indicado.
Unas pocas protenas, codificadas por el DNA de las mitocondrias y los cloroplastos, se
sintetizan en los ribosomas de estos organoides y se incorporan directamente a compartimientos
dentro de ellas. No obstante, la mayora de las protenas de las mitocondrias y los cloroplastos,
todas las de las otras organelas, partculas y membranas de una clula eucarionte son codificadas
por el ADN nuclear, se sintetizan en los ribosomas del citosol y se distribuyen hacia sus destinos
correctos a travs de diferentes mecanismos.
Figura: los principales compartimientos de una clula eucariota son: el ncleo contiene el
genoma y es el lugar de la sntesis de ADN y ARN. El citoplasma que lo circunda consiste en
citosol y organelas citoplasmticas. El citosol constituye la mitad del volumen celular. El RE
presenta ribosomas adheridos a su superficie citoplasmtica, los cuales sintetizan protenas

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integrales de membrana, protenas solubles destinadas a la secrecin o a su transporte a otros
organoides. Tambin produce los lpidos. El complejo de Golgi, una serie de compartimientos en
sacos o cisternas, recibe los lpidos y protenas del RE y las distribuye hacia diferentes destinos
intracelulares modificndolas o a la membrana plasmtica.
.

Figura B: Las protenas pueden desplazarse entre compartimientos de diferentes maneras.


Los cloroplastos y las mitocondrias generan la mayor parte del ATP que se requiere. Los
lisosomas con sus enzimas digestivas que degradan tanto orgnulos celulares muertos o
desgastados como macromolculas captadas del exterior de las clulas por endocitosis y
fagocitosis. Primero deben pasar por compartimientos como los endosomas. Los peroxisomas,
son pequeas vesculas que contienen enzimas oxidativas. La distribucin de los organoides no
es al azar e intervienen los elementos del citoesqueleto.
El primer acontecimiento clasificatorio tiene lugar durante el crecimiento inicial de las cadenas
polipeptdicas nacientes en ribosomas del citosol. Para entender los principios generales de est
sistema de seales de clasificacin es importante distinguir tres sistemas diferentes mediante los
cuales las protenas se desplazan:
el trfico de protenas entre el citosol y el ncleo a travs de los poros nucleares (NPC) los
cuales actan como puertas selectivas que pueden transportar molculas especficas y
ensambles de macromolculas y difusin de molculas pequeas: transporte por puerta
(gate transport).
transporte de transmembrana: es este caso las protenas atraviesan la membrana
directamente y se meten al interior de las mitocondrias, peroxisomas, RE y plstidos. Esto lo
hacen por translocacin debido a protenas translocadoras especficas que hay en la
superficie de estos organoides formando canales o translocones. La protena transportada
usualmente tiene que estar desplegada, y tener estructura primaria para poder entrar a/t de
la membrana desde el citosol hacia un espacio topolgico diferente.

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Transporte vesicular: las vesculas de
transporte cargan protenas de un
compartimiento a otro. A medida que la
membrana produce vesculas por
gemacin se cargan de molculas del
lumen del compartimiento. Tras el
transporte, por fusin con la m del
compartimiento diana, estas vesculas
descargan su cargamento en el interior
del otro compartimiento.

Las seales especficas, secuencias orientadoras, pueden hacer que las protenas vayan
directamente a su destino, como por
ejemplo el ncleo, RE, mitocondrias o
peroxisomas. Pero tambin las protenas
pueden tener una seal que las mande a
una estacin intermedia que es el RE. Del
RE esa seal les puede indicar tambin
que tienen que seguir y pasar al Golgi que
es otra estacin intermedia de
clasificacin y del Golgi van a los
endosomas, de ah a los lisosomas o a las
vesculas de secrecin, finalmente de las
vesculas de secrecin las protenas
pueden salir de la clula.

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Las seales pueden ser de dos tipos:
PEPTIDO SEAL
Es un segmento de la protena situado en la punta o en el medio de la misma A veces despus
que la protena alcanz su destino es eliminado por una enzima que es la PEPTIDASA de
SEAL. Los pptido seal se utilizan para el trfico de protenas del citosol a
retculo endoplsmico
mitocondrias
peroxisomas
ncleo
Tenemos entonces que cuando el lugar que hay que alcanzar es por transporte transmembrana o
por puertas se utiliza un PEPTIDO SEAL.

PARCHE SEAL
Consiste en una estructura tridimensional formada por varios pedacitos de la protena
relacionados. En ste caso los aa. que forman el parche se encuentran en distintas partes de la
protena. En general no son eliminados despus que la protena alcanz su destino a diferencia
del pptido seal. Se utilizan cuando las protenas tienen que ir a:
aparato de Golgi
lisosomas.
La sntesis de todas las dems protenas codificadas por el ncleo se completan en los ribosomas
citoslica libres; y las protenas terminadas son liberadas hacia el citosol.

Plegamiento y modificacin de las cadenas polipeptdica


En la ltima fase de la sntesis de protenas, la cadena polipeptdica naciente se pliega (accin de
las chaperonas) y modifica hasta obtener su forma biolgicamente activa, hecho que puede
comenzar durante la sntesis o luego de producida sta. No obstante, algunas protenas no
obtienen su conformacin biolgica activa hasta despus de haber sufrido una o ms reacciones
de modificacin o maduracin, denominadas modificaciones post-traduccionales. Entre ellas
pueden consignarse:

SINTESIS DE PROTEINAS PARA MITOCONDRIAS, MECANISMOS PARA SU LLEGADA


La mitocondria requiere para su normal funcionamiento la incorporacin de lpidos y protenas
sintetizadas en el citosol, un proceso que ocurre de manera continua durante el perodo de
interfase del ciclo celular. Conforme las organelas aumentan de tamao, una o ms organelas
hijas se desprenden por brote de un modo similar a como lo hacen las clulas bacterianas durante
su divisin.
Las protenas recin elaboradas en los ribosomas citoslicos, pasan al citosol y luego son
captadas de manera especfica por la organela adecuada, mediante la unin a protenas
receptoras en la superficie de la organela que reconocen secuencias de orientacin-captacin
especfica.

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Estas protenas se asocian a
chaperonas de la familia hsp70,
que se encargan de mantenerlas
desplegadas para que pueden
llegar a la mitocondria y atravesar
sus membranas. Al contactar con
la membrana mitocondrial externa
se asocia a una nueva hsp70,
perdiendo a la anterior. Esto
incorpora a la protena a la
mitocondria con gasto de energa
(ATP). Una vez ingresada en la
matriz, la protena se despliega
con la colaboracin de las
chaperonas hsp60. Todas las
protenas importadas del citosol
incluyen en el extremo amino de
sus molculas un pptido seal de 25 aminocidos. Dada la informacin contenida en el pptido
seal, apenas las protenas surgen del ribosomas son conducidas a las mitocondrias en cuyas
membrana hay un receptor para el pptido. Si la protena est destinada a la matriz, una proteasa
escinde el pptido seal y la molculas e libera en la matriz, por su parte las protenas destinadas
a las membranas poseen seales adicionales que las retienen en la bicapa lipdica de la
membrana apropiada.
Para atravesar las membranas interna y externa se valen de translocones que atraviesan estas
membranas y se encuentran unidos a este nivel

SINTESIS DE PROTEINAS PARA PEROXISOMAS,


MECANISMOS PARA SU LLEGADA A DESTINO
Es un mecanismo poco conocido. Tras ser liberadas
desde los ribosomas citoslicos, las protenas
peroxismicas recin sintetizadas, a diferencia de las
protenas mitocondriales y de los cloroplastos, por lo
general se pliegan hacia su conformacin madura en el
citosol, antes de su importacin hacia la organela. Esta
importacin requiere la hidrlisis de ATP. Muchas
protenas de la matriz peroxismica utilizan una
secuencia orientadora SKL (de tres aminocidos),
ubicada en el extremo C-terminal que no se separa tras
la importacin. Esta secuencia requiere del
reconocimiento de una protena receptora citoslica-
peroxina- PTSR1; que lo acompaa hasta entrar al
organoide y luego en la luz del mismo se disocia,
volviendo al citosol para captar otra protena destinada al
peroxisoma.

Herencia de los organoides

Por ltimo mencionamos con respecto a los compartimentos celulares que la clula no hace sus
organoides de novo (de nuevo; a partir de componentes nuevos) sino que se necesita informacin
que se encuentra en los mismos organoides; entonces los organoides se fabrican a partir de otros
organoides.
Cuando la clula se reproduce por mitosis tiene que duplicar todos sus organoides primero, para
lo cual los agranda y los divide en organoides hijos que van a ir a cada una de las clulas hijas
que heredan de su madre un juego completo de organoides. Esta herencia es esencial sino la
clula hija no puede fabricar organoides. De sta manera vemos que la informacin que se
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requiere para construir un organoide no est en el ADN sino que est en el mismo organoide y
esto es lo que se llama INFORMACION O HERENCIA EPIGENETICA o tambin se llama
HERENCIA NO MENDELIANA O HERENCIA MATERNA. Esta informacin epigentica es
esencial para la propagacin de una clula a la otra de los organoides as como la informacin
gentica es esencial para la herencia de las protenas. En el caso de la fecundacin, la mayora
de los organoides los aporta el ovulo , ya que los tiene en el citoplasma . Por lo tanto el cigote y a
posteriori el nuevo individuo hereda los organoides solo de la madre y no del padre, con algunas
excepciones.

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PARTE 5
TRAFICO VESICULAR MEDIANTE LAS RUTAS SECRETORAS Y ENDOCTICAS
MECANISMOS DE SECRECION
Generalidades: ahora dirigiremos nuestra atencin hacia la clase muy grande de protenas que
se sintetizan y clasifican en la VA SECRETORA. Segn con lo que acabamos de describir el
interior celular se encuentra compartimentalizado de un modo tal que la sntesis proteica, la
sntesis lipdica, la secrecin se lleva a cabo en compartimientos distintos. Dentro de los
compartimientos se encuentra el sistema de endomembranas, llamado antiguamente sistema
vacuolar citoplasmtico, cuya gnesis se atribuye a un proceso de invaginacin de la mp a
modo de horquilla la que ulteriormente perder el istmo que lo comunica con el medio extracelular.
Los componentes del Sistema de Endomembranas son:
Envoltura nuclear
Retculo endoplsmico
Aparato de Golgi
Lisosoma
Endosomas
Vesculas.
Estos componentes no deben ser considerados como entidades separadas e independientes, se
encuentran formando una unidad funcional de amplia intercomunicacin entre s
Cada uno de estos componentes est formado por una membrana biolgica similar a la
membrana plasmtica, que forma estructuras cerradas conteniendo en su interior distintas
molculas. Estas estructuras o sacos pueden ser:
Vesculas o vacuolas son bolsas esfricas ms chicas o mas grandes.
Cisternas, son sacos aplanados.
Tbulos son cilindros alargados, irregulares.

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Los organelos del sistema de endomembrana son parte de una red dinmica integrada en la
que los materiales se envan y regresan de una parte de la clula a la otra. Casi en su totalidad los
materiales se trasladan entre los organelos en pequeas vesculas de transporte limitadas por
membrana que se desprenden de un compartimiento donador de membrana, se mueven por el
citoplasma en forma dirigida, a menudo tiradas por protenas motoras que operan sobre rieles
formados de microtbulos. Cuando llegan a su destino, las vesculas se fusionan con la
membrana del compartimiento receptor, el cual recibe el cargamento soluble de la vescula as
como su envoltura membranosa.
Ya se han identificado varias vas: biosinttica y secretora en la que se sintetizan protenas en
el retculo endoplasmtico, se modifican en el Golgi y se transportan desde el Golgi a varios
destinos, como la membrana plasmtica, un lisosoma, o se descargan (secretan) de la clula ya
sea por secrecin constitutiva o secrecin regulada. En esta ltima los materiales se almacenan
en paquetes y se descargan solo como respuesta a un estmulo apropiado. La va endoctica a
travs de la cual los materiales se mueven de la superficie externa de la clula a los
compartimientos, como los endosomas y lisosomas que se localizan dentro del citoplasma.

Retculo endoplasmtico (ER)


Al ser observado al ME se comprob que se
extenda a travs del citoplasma naciendo en la
envoltura nuclear, cmo una continuidad de la misma.
Est compuesto por una red tridimensional de tbulos
y sacos aplanados interconectados. A pesar de su
extensin y de su intrincada morfologa, constituye un
organoide indiviso, ya que posee una membrana
continua y una sola cavidad. Est dividida en una serie
de laberintos con tubulos que se ramifican y sacos
aplanados que se llaman cisternas, todos
intercomunicados de modo que el interior del retculo
endoplsmico o espacio intraluminal, forma una
continuidad que encierra un solo espacio; ese espacio es llamado tambin luz del retculo
endoplsmico. Ocupa el 50% del total de membranas y 10% del volumen celular. El citoesqueleto
se encarga de mantener a sus componentes en posiciones ms o menos fijas dentro del
citoplasma.
El ER juega un papel muy importante en la biosntesis celular, su membrana es el lugar de la
sntesis de todas las protenas de transmembrana y lpidos de la mayora de los organoides
celulares, incluyendo el propio ER, complejo de Golgi, lisosomas, endosomas, vesculas
secretoras y mp. La membrana del ER tambin contribuye a la formacin de membrana en
mitocondrias, peroxisomas y cloroplastos al
sintetizar lpidos de membrana. Participa en la
produccin de esteroides, metabolismo del
glucgeno, destoxificacin y secuestro de
Ca++.
En su porcin ms cercana a la envoltura
nuclear, este retculo posee en su superficie
que contacta con el citosol unas estructura
ricas en ARN y protenas, los ribosomas, y en
su extremo mas distal carece de los mismos.
Basndonos en esta caracterstica se clasific
al ER en Retculo Endoplsmico Rugoso y
Retculo Endoplsmico Liso, segn la
presencia o no de los ribosomas. Si bien esta
divisin es sumamente til a los fines didcticos, es menester sealar que ER existe uno solo y
posee dos porciones: una porcin con ribosomas (rugoso) y una porcin carente de ellos (liso).
Cada una de las porciones adems de poseer caractersticas morfolgicas, difiere tambin en
cuanto a sus funciones.

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Por qu los ribosomas no se adhieren al REL y si a la envoltura nuclear externa?
Cules son las principales diferencias morfolgicas entre el RER y el REL? las principales
diferencias funcionales?
Cules son las tres protenas que se esperara encontrar como componentes integrales de la
membrana del RER y que estaran ausentes de la del REL? Cules son las dos protenas del
REL que no estn presentes en el RER?

Retculo endoplasmtico rugoso (RER)


El RER se encuentra conformado por una trama tridimensional de cisternas, sacos aplanados
dispuestos en capas, paralelas que se originan en la envoltura nuclear con ribosomas adheridos
en su cara citoslica.
Los ribosomas adheridos a las membranas definen al RE rugoso (RER o REG)
El proceso de sntesis de cualquier protena comienza en el ncleo celular con la activacin del
gen respectivo, cuya informacin se transcribe (se copia) a una molcula de ARNm, informacin
correspondiente para la sntesis de una determinada protena. Vale decir que lo que sale del
ncleo, no es el ADN sino la informacin gnica. Este mensaje gnico es interpretado en el citosol
mediante un proceso llamado traduccin por la accin conjunta de ribosomas, ARNt que
transportan los diferentes aminocidos y una multitud de enzimas.
La sntesis de pptidos a partir de la informacin del RNA comienza siempre en los ribosomas
libres del citosol. Se ha comprobado que a medida que la sntesis progresa, la cadena
polipeptdica crece y asoma al citosol, aqu caben dos caminos
El proceso contina en los ribosomas libres hasta completarse la sntesis de la protena y
los ribosomas no se unen al RE.
El pptido es reconocido con seal, y todo el conjunto (pptido mas ribosomas) es
transferido a la membrana del RER. Este es el mecanismo del pptido seal, cuya
secuencia es reconocida por una partcula llamada partcula de reconocimiento de la
seal o PRS.

Por lo tanto existen en el citosol dos poblaciones de ribosomas separadas espacialmente: los
ribosomas unidos a membrana, unidos a la cara citoslica del ER y los ribosomas libres. Ambos
son estructuralmente y
fisiolgicamente idnticos. Difieren
solo en la protena que estn
fabricando en un momento dado.
Cuando un ribosoma comienza a
sintetizar una protena con pptido
seal, la propia seal conduce a todo
el conjunto (pptido mas ribosoma) a
la m del ER, este es el mecanismo del
pptido seal, cuya secuencia es
reconocida por la partcula de
reconocimiento de la seal o PRS.
Dado que muchos ribosomas pueden
unirse simultneamente a una misma
molcula de ARN mensajero,
normalmente forma un polirribosoma

Cada uno de los ribosomas


asociados a una molcula de ARNm
puede volver al citosol cuando termina
la traduccin cerca del extremo 3 de
la molcula de ARNm.

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El pptido seal es quien dice al ribosoma cuando debe unirse al ER y si no hay pptido seal
permanecer libre en el citosol.

Una vez que los ribosomas que sintetizan estas protenas se unen al ER rugoso, las protenas
penetran o atraviesan la membrana del ER de manera cotraduccional, o sea durante su sntesis.
Las protenas solubles de esta clase primero se ubican en la luz del ER y luego son enviadas a la
luz de otras organelas, o se secretan de la clula. Del mismo modo, las protenas integrales de m
de esta clase primero se insertan en la membrana del ER rugoso durante su sntesis; algunas
permanecen all, pero muchas al final llegan a ubicarse en la membrana plasmtica o en las
membranas del ER liso, el complejo de Golgi, los endosomas o los lisosomas.

Translocacin de protenas de secrecin a travs de la membrana del ER

Recordemos que las protenas del RER pueden ser:


De transmembrana, que solo son translocadas parcialmente a travs de la m del ER y por
lo tanto se mantienen unidad a ella, mantenerse en el ER o estar destinadas a las m de
otros organoide o a la membrana plasmtica.
Protenas solubles o de exportacin: que son completamente translocadas a travs de la m
del ER y liberadas en el lumen, pasan al REL, luego al Golgi quien les otorga membrana.
Las protenas se ubican ahora en el interior de vesculas de secrecin que las transportarn
hasta la membrana plasmtica y alcanzar el medio extracelular. Distinto es el caso de las
protenas lisosomales, que emergen como una vescula del aparato de Golgi y se fusiona
con los endosomas para alcanzar a los lisosomas.

Dado que la protena de importacin al ER no es liberada al citosol, porque la sntesis se


detiene hasta que el polirribosama alcance la m del ER, no es necesaria la ayuda de chaperonas,
no existe peligro que se pliegue antes de alcanzar el translocador de la membrana.

Entrada de protenas al RE: Los pptidos seal fueron descubiertos por primera vez en
protenas importadas al ER
A principios de los aos 70 fue postulada la hiptesis de la seal la cual postulaba que la
secuencia lder acta de pptido seal dirigiendo la
protena de secrecin hacia la membrana del ER, una
vez en ella y antes de que la cadena polipeptdica
est completa, el pptido es hidrolizado por una
peptidasa seal de la membrana del ER. La
secuencia de seal N-terminal emerge del ribosoma
slo cuando el polipptido alcanza una longitud de 70
aa, porque cerca de 30 aa permanecen ocultos en el
ribosoma.
El pptido seal es dirigido a la membrana del
RE por lo menos mediante dos componentes: una
partcula de reconocimiento de la seal PRS o SRP,
que se une al pptido seal por medio de una
protena adaptadora NAC; y viaja en forma cclica
entre la membrana del ER y el citosol, y un receptor
de PRS conocido como protena de desembarcadero
(docking) presente en la membrana del ER. A su vez
el ribosoma se apoya sobre otra molcula que es
receptora para la subunidad mayor, llamada riboforina. Esta protena es la responsable del
anclaje del ribosoma a la cara citoslica del ER. La unin ribosoma- riboforina determina la
apertura de una estructura proteica en forma de tnel denominada translocn, por donde la
protena se introduce al lumen del ER.
La PRS es una ribonucleoprotena formada por 6 protenas y ARN pequeo citoslico. La
PRS y el receptor de SRP estn presentes en todas las clulas eucariotas. Una de las protenas
de la PRS (P54) puede unirse a secuencias seal para el ER. Otras protenas de la PRS (o

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dominios) detienen la sntesis del polipptido en el ribosoma, hasta que el complejo (ARNm;
ribosoma, aa-ARNt; polipeptido naciente y SRP) contacta con la superficie citoslica del ER donde
la SRP es reconocida por una protena receptora de SRP o protena anclaje.
La PRS y su receptor slo inician la transferencia de la cadena reciente a/t de la membrana
el ER; luego se disocian de la cadena, la cual es transferida a un conjunto de protenas de
transmembrana llamadas translocn que atraviesa la membrana del ER como si fuera un tnel.

El
complejo ha quedado dispuesto sobre le RE de tal forma que se favorece su interaccin con otra
protena integral de la m del ER, situada en posicin vecinal al PRS-R. Esta nueva protena se
llama protena receptora de ribosoma o riboforina, porque su misin es la de reconocer la
subunidad mayor del ribosoma que forma parte del gran complejo y, mediar en la entrada del
polipptido naciente al interior del ER, efectuando un papel como poro de la membrana. En la
riboforina se abre un canal de translocacin que permite la entrada en el lumen de la cadena
polipeptdica creciente. De ah el nombre de translocasa para la riboforina. Para De Robertis la
riboforina es una protena receptora del ribosoma que se encuentra vecina al translocn. En
levaduras y clulas de mamferos, los canales de translocacin que atraviesan la membrana del
ER estn constituidos por tres protenas transmembrana denominadas Sec61.
Normalmente la seal peptdica queda enganchada en la pared del translocn y se forma un
asa que a medida que la protena se va volcando se hace mas grande. Ahora acta una
enzima la peptidasa seal la cual corta al pptido seal y lo degrada, ya no le hace falta.
La cadena de aa sigue fabricndose sin ninguna traba hacia el interior del ER. Una vez que
la protena estn fabricadas y dentro del RER, se pliega gracias a las chaperonas hsp 60.
Se desarma el sistema, el ribosoma se separa y se cierra el poro del translocn.

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Muchas protenas en las levaduras, as como algunas protenas en las clulas de mamferos son
sintetizadas en ribosomas citoslicos libres, y su incorporacin postraduccional al RE no
requiere de PRS. En su lugar, su secuencia seal es reconocida por protenas receptoras
diferentes (el complejo Sec 62/63) asociadas al complejo Sec 61 en la membrana del RE. Se
requiere de chaperonas citoslica para mantener las cadenas polipeptdicas en una
conformacin desplegada para que puedan entrar por el canal Sec 61; y se requiere otra
chaperona en el RE (denominada BiP) para tirar de la cadena peptdica a travs del canal y
hacia adentro del RE.

Insercin de protenas de membrana en la membrana del ER


Lo anterior ocurre en el caso de protenas solubles, ya que en protenas de transmembrana, es
decir destinadas a permanecer en la membrana es ms complejo, ya que algunas zonas de las
protenas o cadena polipeptdica son translocadas a travs de la bicapa lipdica y otras no
(translocacin parcial).
Un pptido seal amino terminal inicia la translocacin, igual que para el caso de
protenas solubles, pero un segmento adicional hidrofbico de la cadena polipeptdica frena
el proceso de transferencia antes de que toda la cadena haya sido translocada (seal de
anclaje o stop o secuencias topognicas, detencin de la transferencia. Cuando esta
segunda secuencia entra al canal de translocacin (Sec 61), el canal libera lateralmente a la
protena en la bicapa lipdica, y la secuencia amino terminal es cortada, por la peptidasa
seal, dejando a la protena transmembrana insertada en la membrana. La sntesis de la
protena del lado citoslico contina hasta completarse.
Un pptido seal interno reconocido por la SRP, permanece en el interior de la bicapa
lipdicas como hlice alfa que atraviesa la membrana, la cadena naciente se alarga y la
porcin del lado C-terminal de la secuencia seal pasa a travs del translocn hacia la luz
del ER. Una vez completada la sntesis de la protena, la secuencia interna de seal y
fijacin se mueve desde el translocn hacia la bicapa lipdica, y se forma la protena de
transmembrana de unipaso.

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La protena de multipaso como la GLUT1: la hlice N-terminal acta como una secuencia
seal y fijacin no escindida, que dirige la unin de la cadena polipeptdica naciente a la m
del ER rugoso y el comienzo de la insercin cotraduccional. En este paso intervienen tanto
la SRP como el receptor de PRS. Tras la sntesis de la hlice 2, que acta como secuencia
de detencin de transferencia y fijacin a la m, la salida de la cadena hacia la luz del ER a/t
del translocn se detiene. Entonces, las dos primeras hlices salen del translocn hacia la
bicapa lipdica de la m del ER. El terminal C de la cadena naciente sigue creciendo en el
citosol. Asas helicoidales subsiguientes podrn insertarse de manera semejante, aunque
la SRP y su receptor slo se necesitan para la insercin de la primera secuencia de seal y
fijacin. De Robertis propone que las seales adicionales que actan como pptidos seal
seran dirigidas hacia la membrana del RER por sucesivas PRS y todas abordaran la
membrana por el mismo translocn. Para ello a medida que ingresan nuevas seales en el
translocn, las precedentes salen por un costado y se ubican entre los fosfolpidos de la
bicapa.
Estas protenas que quedan atravesadas en la membrana del RE pueden seguir varias
vas: quedarse en la membrana del ER, pasar a la membrana de otro compartimiento del
sistema de endomembranas, o pasar a la membrana plasmtica.

Modificaciones postraduccionales y control de calidad en el RER


Los polipptidos sintetizados en la membrana y la luz del ER rugoso pasan por modificaciones
antes de llegar a su destino:
Formacin de enlaces disulfuro entre cadenas laterales de los residuos de cistena.
Plegamiento adecuado
Adicin y procesamiento de carbohidratos (primeras etapas de Glicosidacin)
Con respecto a la 1 y 2, el ER contiene varias protenas que aceleran el plegamiento de las
protenas como ser la protena disulfuro isomerasa PDI, es uno de los catalizadores de
plegamiento, las Hsp 70 la cual se une de forma transitoria a la protena e impide que se
plieguen mal, las lecitinas, etc.
Slo las protenas correctamente plegadas son transportadas desde el ER rugoso hacia el
complejo de Golgi. Las protenas de secrecin y de m mal plegadas a menudo se degradan
una o dos horas despus de su sntesis en el ER, pero se ha comprobado que se transportan
desde la luz del ER, en sentido retrogrado a/t de un translocn, hacia el citosol, donde son
degradadas.
Otro aspecto del control de calidad del ER es la retencin en la luz del ER de las protenas
residentes solubles como las Hsc 70 y la PDI, que catalizan el plegamiento de las protenas
recin elaboradas.

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Cmo? La respuesta est en una secuencia C-terminal especfica que hay en las
protenas residentes del ER y en un receptor que reconoce esta secuencia. La PDI, la Hsc 70
luminal y muchas otras protenas residentes en el ER poseen una secuencia de cuatro aa, KDEL,
en su terminal C. Este receptor se encuentra principalmente en el cis Golgi y en las vesculas de
transporte de ER a Golgi; su funcin ms importante es unirse a protenas con la secuencia de
reconocimiento KDEL y retornarlas hacia el ER.
Glucosidacin de las protenas en el ER
La mayor parte de las protenas que se sintetizan en el ER lo hacen en forma de
glucoprotenas, lo que significa que a la secuencia aminoacdica se le agrega un grupo
glucdico. Este agregado se lleva a cabo en el RER mismo, y consiste en la adicin de un
glcido de 14 monosacridos preformados por un complejo mecanismo que incluye una
enzima que transfiere la cadena de monosacridos a los grupos aminos de los aa asparagina.
Posteriormente este grupo ser modificado en su camino hacia la mp, en el Golgi.
Los oligosacridos de las protenas tienen varias funciones dependiendo de la protena.
Pueden proteger a la protena de la degradacin, retenerla en el ER hasta que se haya
plegado correctamente o ayudar a guiarla hasta el orgnulo apropiado actuando como seal
de transporte, como en el caso de las protenas lisosomales. Cuando se colocan en la
superficie celular, los oligosacridos forman el glucocaliz y pueden participar en el
reconocimiento de una clula por otra. En el ER, los azcares son aadidos al dolicol
fosfato, un fosfolpido que es el que transfiere al oligosacrido a la protena que es
translocada a travs de una enzima la oligosacrido transferasa u oligosacriltransferasa.
Funciones del RER
- Sntesis de protenas en los ribosomas. Todas estas protenas tienen como destino:
ser secretadas
quedar en el RER
ir a los endosomas , lisosomas y complejo de Golgi
quedar en la membrana plasmtica como pasaje simple y mltiple
plegarse. Este plegamiento es controlado por las protenas chaperonas hsp 70. Si
reconocen tramos de protenas incorrectamente plegadas los asisten para que se plieguen
bien, si no lo logran, las protenas mal plegadas se degradan en el propio RER o salen al
citosol.
Recibir el agregado de oligosacridos, proceso que comienza en el RER y termina en el
Golgi.
sintetizar de proteoglicanos, glicoprotenas formadas por la unin de protenas con GAG,
polisacridos complejos constituidos por una sucesin de unidades disacridas

Retculo endoplasmtico liso (REL)


Es un sistema laberntico irregular y no de cisternas paralelas como se describe el RER. El REL
se halla libre de ribosomas. En la gran mayora de las clulas estas regiones son escasas y solo
existe una pequea regin del ER que es lisa parcialmente y parcialmente rugosa, que se
denomina elementos transicionales porque de ella emergen las vesculas que transporten
protenas y lpidos recin sintetizados hacia el Golgi. El REL es el lugar donde se sintetizan los
fosfolpidos de membrana, en el lado citoslico de la bicapa. Una vez fabricados deben cambiar al
lado luminal y para ello tienen translocadores fosfolipdicos llamados flipasas que mueven esas
molculas de la cara citoslica a la cara luminal. El REL colabora en la fabricacin de triglicridos.
Sntesis de lpidos, fosfolpidos, esteroide y triglicridos
No obstante en determinadas clulas especializadas el REL es abundante, por ejemplo:
En las clulas pertenecientes a las gnadas y a las glndulas suprarrenales, el REL tiene
varias enzimas que intervienen en la sntesis de hormonas esteroides a partir del colesterol

19
(por ejemplo las clulas de Leydig secretora de testosterona de los testculos humanos, las
clulas granulosas del ovario secretan estrgenos, progesterona.
Los hepatocitos son otro ejemplo, principal lugar de produccin de partculas lipoproteicas
para la exportacin. Las enzimas que sintetizan los componentes lipdicos de las
lipoprotenas se localizan en la membrana del REL, como tambin las enzimas que
catalizan una serie de reacciones de detoxificacin de drogas liposolubles provenientes del
exterior y compuestos producidos por el metabolismo que resultan perjudiciales. Las
reacciones de detoxificacin ms estudiadas estn catalizadas por las enzimas de la
familia de citocromos P450, los cuales junto a otras enzimas, convierten las sustancias
txicas en molculas hidrosolubles que salen de la clula con facilidad.
Desfosforilacin de la glucosa 6-fosfato. En la membrana del REL de los hepatocitos se
encuentra la enzima glucosa 6-fosfatasa que tiene por funcin extraer el fosfato de la
glucosa 6-fosfato, que se convierte en glucosa libre. A diferencia de la glucosa 6-fosfato, la
glucosa libre puede abandonar la clula y pasar a la circulacin sangunea para ser
utilizada como fuente de energa por los tejidos. Debe sealarse que la glucosa 6-fosfato
proviene de la glucosa 1-fosfato, esta ltima surge de la degradacin del glucgeno
depositado en el citosol de los hepatocitos en forma de inclusiones.
El REL es el principal depsito de Ca++ de la clula. La concentracin de Ca++ en el
citosol es muy inferior a la existente en el lquido extracelular y en la cavidad del RE. Las
diferencias se deben a la actividad de sendas bombas de Ca++ localizadas en la
membrana del REL y en la membrana plasmtica. Ambas remueven el Ca++ del citosol,
que pasa al REL o al lquido extracelular. El traslado del ion en sentido inverso es pasivo,
pues se produce por canales inicos. En las clulas en general los canales de Ca++ se
abren mediante un ligando, el IP3. En cambio, en las clulas musculares estriadas los
canales de Ca++ del retculo sarcoplasmtico (una forma especializada del REL) son
dependiente de voltaje, ya que se abren cuando se modifica el potencial de membrana.
Esta liberacin y posterior recaptacin del Ca++ por el retculo sarcoplasmtico median la
contraccin rpida y la relajacin de las miofibrillas durante cada ciclo de la contraccin
muscular.
Aclaracin: es interesante mencionar que esta capacidad de destoxificacin es modificable por
determinados compuestos llamados inductores enzimticos, los que tienen la capacidad de
aumentar el nmero de complejos enzimticos, tambin como consecuencia de esto se observa al
Me un aumento en el nmero de cisternas del REL. Drogas inductoras enzimticas son por
ejemplo el alcohol etlico, el fenobarbital, etc. Esto es la base por el cual un bebedor asiduo puede
tomas ms alcohol que una persona normal y mantenerse de pie an, dado que posee mayor
cantidad de enzima encargada de degradar el alcohol ingerido, por lo que sus efectos se notan
con una ingesta etlica mayor. El trmino destoxificacin hay que manejarlo con mucho cuidado
dado que en ciertas ocasiones, un compuesto de toxicidad despreciable es modificado en el REL
y origina un metabolito ms txico que el compuesto original. Es lo que ocurre por ejemplo en la
intoxicacin con alcohol metlico donde el compuesto en el REL se metaboliza dando por
resultado el cido frmico, quien puede desencadenar un deceso rpido y eficaz. El tratamiento
para estos pacientes es paradjicamente inhibir el sistema de destoxificacin del Rel.
Otro ejemplo de efecto no positivo es el del compuesto relativamente inocuo el benzol pireno que
se forma cuando se requema la carne puesta en parrilla se convierte en un potente carcingeno
por efecto de las enzimas detoxicantes del REL.

20
PARTE 6
TRAFICO VESICULAR MEDIANTE RUTA SECRETORA Y ENDOCTICA
Complejo de Golgi
Introduccin:
Todas las clulas han de comunicarse con su entorno. En las clulas procariotas esta
comunicacin tiene lugar a travs de la membrana plasmtica, as por ejemplo, las enzimas son
secretadas hacia el exterior celular y los pequeos metabolitos generados por la digestin son
captados por protenas de transporte presentes en la mp.
Por lo contrario, en clulas eucariotas han adquirido un sistema membranoso interno que les
permite captar las macromolculas por un proceso denominado endocitosis y ponerlas en
contacto con enzimas digestivas que se almacenan intracelularmente en lisosomas, como
consecuencia de ello, a medida que se van produciendo, los metabolitos de la digestin van
saliendo de los lisosomas directamente hacia el citosol.
Adems de proporcionar un sistema de regulacin de la digestin de macromolculas mediante la
va endoctica, el sistema membranoso interno permite que la clula eucariota pueda regular la
liberacin al exterior de las protenas y glcidos acabados de sintetizar. Todas esta molculas que
viajan por la va biosinttica y secretora pasan por numerosos compartimientos, por lo que la
clula puede modificar estas molculas en varios pasos, almacenarlos hasta que se los necesite y
entonces descargarlo en un dominio de la superficie de la clula mediante un proceso llamado
exocitosis.

La va biosinttica o secretora va hacia fuera desde el ER al Golgi, y a la superficie celular, con


un va o ruta lateral que va a lisosomas va endosomas tardos
La via endoctica va hacia adentro, desde la mp a endosomas y lisosomas.
Para poder cumplir con su funcin, cada vescula de transporte que emerge de un compartimiento
debe tomar solo las protenas apropiadas y nicamente ha de fusionarse con la membrana diana
apropiada. Todos estos fenmenos de reconocimiento dependen de protenas asociadas a las m
de las vesculas de transporte que viajan entre organelas.
Transporte del ER al Complejo de Golgi
La va que va desde el ER al Golgi y a mp o superficie celular se llama ruta por defecto y parece
que las protenas no necesitan presentar determinadas seales para seguirla: cualquier protena
que entre al Er y que est correctamente plegada ser transportada automticamente a /t del
Golgi a la superficie celular a menos que contenga seales que o bien las detengan o las desven
hacia lisosomas o vesculas de transporte. Las vesculas destinadas al Golgi emergen desde

21
regiones especializadas del RE llamadas elementos transicionales cuya membrana no tiene
ribosomas adheridos. Se cree que estas vesculas no son selectivas
El complejo de Golgi
En los ltimos aos del siglo XIX, un bilogo italiano, Camillo Golgi, invent nuevos
procedimientos de tincin para revelar la organizacin de las clulas nerviosas dentro del sistema
nervioso central. En 1898, Golgi descubri una red teida de oscuro localizada cerca del ncleo
celular. Esta red, que ms tarde se identific en otros tipos celulares y se llam Complejo de
Golgi, llev a su descubridor a obtener el Premio Nobel en 1906. El complejo de Golgi permaneci
como controversia durante decenios entre los que crean que el organelo exista en las clulas
vivas y los que pensaban que era un artefacto, es decir una estructura artificial formada durante la
preparacin para el estudio microscpico. No fue sino hasta que el complejo de Golgi se identific
con claridad en clulas sin fijacin, preparadas por congelamiento fractura que se comprob su
existencia ms all de cualquier duda razonable.
Ubicacin del Golgi
Se localiza normalmente cerca del ncleo celular y en una clula animal cerca del centrosoma o
centro celular. Est formado por una serie de cisternas de tres a 8, limitadas por membrana y de
forma aplanada con bordes dilatados, que se parecen a una pila de platos, llamado en conjunto
dictiosoma (unidades funcionales). Habitualmente existe un solo dictiosoma, pero algunas
clulas, como hepatocitos y neuronas, tienen ms de uno, aunque siempre con un complejo de
Golgi. Muchas vesculas estn asociadas a los dictiosomas del Golgi agrupadas en la cara
contigua al RE y a lo largo de los anillos dilatados de cada cisterna. Es un organoide intermediario,
recibe y enva sustancias. Estas sustancias que lo atraviesan suelen ser modificadas.

Describe los pasos que ocurren conforme


una protena secretora soluble como las
enzimas digestivas de una clula
pancretica se desplaza entre de las
cisternas del Golgi, y desde el trans Golgi al
exterior de la membrana plasmtica.
El aparato de Golgi posee una
polarizacin cis-trans. La cara cis se
encuentra formada por un tramo de
vesculas y pequeos tbulos denominados
red del cis Golgi, la cual converge en una
cisterna llamada cisterna cis. La red cis se
forma por el adosamiento de vesculas
provenientes del RE. Hay dos modelos, el
transporte vesicular o el modelo de
maduracin cisternal. Hasta mediados de

22
1980 se aceptaba en general que las cisternas del Golgi eran estructuras transitorias. Se
presupona que las cisternas del Golgi formaban la cara cis de la pila mediante la fusin de los
portadores membranosos desde el retculo endoplasmtico y el ERGIC y que cada cisterna se
mova fsicamente desde el extremo cis al trans de la pila y cambiaba de composicin conforme
avanzaba. Esto se conoce como modelo de maduracin de cisternas porque de acuerdo con el
modelo cada cisterna madura en la siguiente pila. Conforme ocurre esta progresin cisternal,
muchas protenas luminales y de membrana sufren modificaciones, principalmente en sus
cadenas de oligosacridos asociados. Algunas protenas permanecen en las cisternas del trans-
Golgi, mientras que otras se mueven hacia la superficie celular o los lisosomas a travs de
pequeas vesculas.
De mediados del decenio de 1980 a mitad de la dcada de 1990, el modelo de maduracin del
movimiento del Golgi casi se abandon y se sustituy por un modelo alternativo que propona que
las cisternas de una pila de Golgi permanecan en su sitio como compartimientos estables. En
este ltimo modelo que se conoce como modelo de transporte vesicular, el cargamento (protenas
secretores, lisosmicas y de membrana) se lanzan a travs de la pila de Golgi, desde la RCG
hasta la RTG, en vesculas que se desprenden de un compartimiento de membrana y se fusionan
con el compartimiento contiguo mas avanzado en la pila. Esto depende de dos tipos de
observaciones:
1. cada una de las diversas cisternas de Golgi de una pila tiene una poblacin distinta de
enzimas residentes cmo podran las diversas cisternas tener propiedades tan
diferentes si cada cisterna diera origen a la que le sigue en la lnea, como lo sugera el
modelo de maduracin de cisternas
2. se pueden reconocer grandes cantidades de vesculas que se desprenden de los
bordes de las cisternas de Golgi.
Aunque ambos modelos de la funcin de Golgi an tienen sus defensores, el consenso de opinin
regres al modelo de maduracin de cisternas. Dos de las principales razones para este cambio
son las siguientes:
1. se puede demostrar que ciertos materiales que se producen en el retculo endoplasmtico
y viajan por el complejo de Golgi permanecen en las cisternas de Golgi y nunca aparecen
dentro de vesculas de transporte relacionadas con el complejo de Golgi.
2. hasta mediados de 1990 se asumi que las vesculas de transporte siempre se movan en
sentido antergrado (adelante), esto es, de un origen cis a un destino mas trans. No
obstante, una gran cantidad de evidencia indic que las vesculas pueden moverse en
sentido retrgrado (hacia atrs), es decir, de una membrana donadora trans a una
membrana receptora cis.

23
Describir el papel de las vesculas recubiertas de clatrina y las recubiertas por protenas no de
clatrina que se forman en el trans Golgi.
En ciertos tipos celulares, neuronas, acinares pancreticas, algunas protenas solubles se
almacenan en vesculas de secrecin y se liberan recin despus de que la clula recibe una
seal nerviosa u hormonal adecuada (secrecin regulada) por ejemplo: enzimas digestivas,
protenas de la leche, insulina, endorfina encefalinas. En todas las clulas ciertas protenas se
mueven hacia la superficie celular en vesculas de transporte y se secretan de manera continua
(secrecin constitutiva) por ejemplo: la secrecin de colgeno por fibroblastos, protena srica por
hepatocitos. Lo mismo que las protenas solubles, las protenas integrales de m se desplazan a
travs de vesculas de transporte desde el ER rugoso hacia el cis-Golgi y luego desde all hacia su
destino final.
Cul es el papel de las vesculas de transporte en el modelo de maduracin cisternal de la
funcin del aparato de Golgi?
Conforme ocurre esto, las protenas de m y de la luz se recuperan de manera constante desde
las cisternas finales del Golgi hacia las iniciales, por medio de vesculas de transporte retrgrado.
Mediante este proceso enzimas y protenas residentes del Golgi llegan a liberarse en la cisterna
adecuada. En un momento se crey que las protenas se movan del cis-Golgi a las cisternas
intermedias y desde all al trans-Golgi a travs de vesculas de transporte.
Funciones del Golgi
Agregacin de hidratos de carbono a Lpidos y protenas (glucosidacin que comenz en el
ER)
Como vimos el esqueleto polipeptdico de la glucoprotena es sintetizado sobre los ribosomas
unidos a la membrana del ER por el mecanismo de pptido seal. Dentro del RER el ncleo
oligosacrido es transferido a la protena. En el Golgi existen monosacridos especialmente
manosa y se agregan cadenas laterales de galactosa, N-acetil galactosomina y N-acetil
neuramnico (NANA) o cido silico por varias enzimas, las glucosiltransferasas. Adems se
agregan grupos fosfatos, sulfatos, cidos grasos. Este proceso da lugar a miles de oligosacridos
especficos para cada tipo de protena que otorga a cada una un sello. Los proteoglicanos se
originan en el Golgi, agregando a los GAGs protenas.
Especializacin de los sectores del Golgi
El compartimiento cis probablemente sea el
responsable de la fosforilacin de la manosa del
oligosacrido precursor.
El compartimiento medial tambin remueve
manosa, pero agrega residuos de N-acetil
glucosamina al oligosacrido.
El compartimiento trans agrega galactosa, cido
silico o N-acetil neuramnico. El sector de
salida clasifica, ordena empaqueta las vesculas
y se las manda a diferentes destinos.
Describir los pasos que aseguran que una enzima
lisosmica se dirija a un lisosoma y no a una vescula
secretoria.
Los residuos de manosa 6-fosfato dirigen las protenas hacia los lisosomas
Otra funcin de los oligosacridos ligados es dirigir u orientar las enzimas lisosmicas hacia los
lisosomas e impedir su secrecin. En el cis-Golgi, uno o ms residuos de manosa en el
oligosacrido Man GlcNac resultante se fosforila. Los muchos residuos de M6P que se forman,
luego se unen a receptores de manosa 6 fosfatos en el retculo trans-Golgi. Desde el cual se
desprenden por brote vesculas con el receptor de M6P y enzima lisosmica unida, que luego se
fusiona con un organelo de distribucin, el endosoma tardo, que tiene un pH interno de 5,5. Como

24
los receptores de M6P pueden fijar manosa 6-fosfato en el pH ligeramente cido (6,5- 7) del
retculo trans Golgi pero no en un pH menor a 6, dentro de los endosomas tardos las enzimas

lisosmicas fijadas se liberan. Adems dentro de los endosomas tardos una fosfatasa suele
extraer el fosfato de las enzimas lisosmicas, lo que impide que se vuelvan a unir al receptor M6P.
Dos tipos de vesculas
brotan desde los
endosomas tardos. Un
tipo contiene enzimas
lisosmicas pero no el
receptor M6P, una vez que
estas vesculas han
brotado de los endosomas
tardos, se fusiona con los
lisosomas y as entregan
las enzimas lisosmicas a
su destino final. El otro tipo
de vescula recicla el
receptor de M6P al
devolverlo al retculo trans-
Golgi, o a veces a la m
celular.
Las enzimas
lisosmicas de las que
hemos hablado hasta
ahora son en realidad precursores o proenzimas catalticamente inactivas, posteriormente cambia
su conformacin y se vuelve activa. Esto ocurre en el endosoma tardo o en los lisosomas. Todo
esto es un mecanismo de proteccin de la accin degradativa de las enzimas hidrolasas cidas.
Clasificacin de protenas
Como se mencion antes, en todas las clulas eucariotas ciertas protenas de secrecin se
mueven a travs de vesculas de transporte desde el trans-Golgi hacia la mp, en donde se
secretan de manera continua por ejemplo: el colgeno por fibroblastos y las inmunoglobulinas por
plasmocitos. En cambio, ciertas clulas secretoras especializadas almacenan algunas protenas
de secrecin en vesculas y las secretan slo cuando son activadas por un estmulo especfico. Un
ejemplo de secrecin regulada es la que se lleva a cabo en las clulas B de los islotes
pancreticos, que almacenan insulina recin elaborada en vesculas de secrecin especiales y
slo la secretan en respuesta a una elevada concentracin de glucosa en sangre (otros ejemplos:
clulas endocrinas que liberan hormonas, clulas de los cinos pancreticos que liberan enzimas
digestivas y en las clulas nerviosas que liberan neurotransmisores. Estas y muchas otras clulas
utilizan en forma simultnea dos clases diferentes de vesculas para mover las protenas desde el
trans-Golgi hacia la superficie celular: vesculas de secrecin para la secrecin regulada y de
transporte para la secrecin continua. En algunas de estas clulas, los materiales se almacenan
en grandes grnulos secretorios densos y delimitados por membrana. Indicios morfolgicos
sugieren que la distribucin hacia la va regulada es controlada por una cubierta en las vesculas,
de clatrina, una protena fibrosa y contener un centro compuesto por protena de secrecin
aglomerada

25
RUTAS DE ENDOCITOSIS
ENDOSOMAS
Representan los centros de distribucin a lo largo de la va endoctica. Son organoides
formados por una membrana en forma de saco redondeado o vescula con un pH=6 (intermedio
entre el del citosol y el del lisosoma) El compartimiento endosomal es cido debido a la presencia
en la membrana del endosoma de bombas dirigidas por ATP que bombean H+ al lumen desde el
citosol. Se los ubica entre la membrana plasmtica y el Golgi. Hay dos tipos de endosomas:
Temprano o primario, se los encuentra cerca de la membrana plasmtica
Secundarios o tardos cerca del Golgi.
Antes de analizar las funciones de los endosomas conviene describir el proceso de
endocitosis
En temas anteriores
hemos estudiado la
permeabilidad de la
membrana celular y vimos
que los solutos atraviesan la
membrana plasmtica por
transporte activo o pasivo e
ingresan a la clula. Tambin
hemos estudiado que las
macromolculas y partculas
entran mediante un
mecanismo denominado
endocitosis, que de acuerdo
al tamao y propiedades
fsicas del material que se va
a incorporar, este mecanismo
es llamado: Pinocitosis o
fagocitosis.
Las clulas puede
introducir sustancias del entorno por fagocitosis, un proceso mediado por actina, en la cual las
clulas envuelven partculas grandes y luego la internalizan. Son relativamente pocas las clulas
que realizan.
Clulas fagocticas especializadas pueden ingerir grandes partculas
En protozoos la fagocitosis constituye un sistema de alimentacin: las grandes partculas
atrapadas por los fagosomas acaban en los lisosomas y los productos de los procesos digestivos
pasan al citoplasma donde son utilizados como alimento. En mamferos existen dos tipos de
glbulos blancos que actan como fagocitos con propsitos distintos a la nutricin: los macrfagos
(que adems de encontrarse en la sangre estn distribuidos por los tejidos) y los neutrfilos. Estos
dos tipos de clulas nos defienden contra las infecciones mediante la ingestin de
microorganismos invasores.
Para que una partcula sea fagocitada, primero ha de unirse a la superficie del fagocito los
cuales tienen una gama de receptores de superficie. La fagocitosis a diferencia de la Pinocitosis
es un proceso regulado en la que los receptores activados transmiten la seal al interior de la
clula inicindose la respuesta.
Los reguladores mejores caracterizados de este proceso son los anticuerpos o
inmunoglobulinas (producidos por los linfocitos B diferenciados en plasmocitos, al reconocer a los
antgenos) que nos protegen contra microorganismos infecciosos unindose a la superficie
formando una cubierta en la que las colas de los anticuerpos llamadas regiones FC, se hallan
expuestas al exterior. Esta cubierta de anticuerpos es reconocida por los receptores FC de la
superficie de macrfagos y de los neutrfilos. La unin de partculas recubiertas de anticuerpos a

26
estos receptores induce a la clula fagoctica a extender sus seudpodos que engullen la partcula
formando fagosoma.
El fluido y las macromolculas son captadas por Pinocitosis
Prcticamente todas las clulas eucariotas ingieren continuamente zonas de su mp en forma de
pequeas vesculas pinocticas que posteriormente retornan a la superficie celular. La velocidad a
la que se internaliza la mp en este proceso de pinocitosis vara de un tipo celular a otro.
Normalmente la parte endoctica de este ciclo comienza en regiones especializadas de
membrana llamadas depresiones revestidas de clatrina, que ocupan un 2 % del rea total de
la membrana. Aparecen como invaginaciones de la mp revestidas en su superficie citoslica
por clatrina. La vida media de estas depresiones es corta, un minuto despus de haber sido
formadas, se invaginan hacia el interior de la clula y se separan de la membrana formando
las vesculas revestidas de clatrina. Segundos ms tarde se despojan de su revestimiento y
se fusionan con los endosomas tempranos. En este proceso se incorpora cualquier lquido
(con sustancias que vienen con el lquido o en el lquido) y se llama pinocitosis de fase
fluida. El objetivo de la pinocitosis inespecfica o endocitosis a granel es:
incorporar lquido y recuperar membrana
En la mayora de las clulas animales, las depresiones y vesculas revestidas de clatrina
proporcionan una ruta eficiente para captar macromolculas especficas del fluido
extracelular, un proceso llamado endocitosis mediada por receptor o pinocitosis regulada.
Las macromolculas se unen a un receptor complementario de la superficie celular (protena
de transmembrana) se acumulan en depresiones revestidas y entran a la clula en forma de
complejos receptor macromolcula en vesculas revestidas de clatrina. El proceso es muy
similar al empaquetamiento de las hidrolasas lisosomales en el complejo de Golgi. Las
molculas que han de ser transportadas tambin se unen a un receptor especfico de la
membrana, la cual se va invaginando, interviene el mismo sistema de reciclado del receptor
una vez que ya fue utilizada.
Este mecanismo de endocitosis mediado por receptor sirve para captar selectivamente
macromolculas disueltas en fluidos extracelulares y es altamente eficiente ya que selecciona
dentro de todas las macromolculas las que la clula necesita captar aunque estn mezcladas
con otras.
Un ejemplo conocido es la endocitosis
del colesterol
Muchas clulas animales captan el
colesterol por endocitosis mediada por
receptores y as adquieren la mayor parte
del colesterol que necesitan para la
sntesis de membrana. La mayor parte del
colesterol se transporta en sangre unida a
protena formando una partcula conocida
como lipoprotenas de baja densidad
(LDL). Su superficie externa es una
monocapa de fosfolpidos y colesterol, en
el interior hay steres de colesterol (no
polar).
Cuando la clula necesita colesterol
produce una protena receptora de LDL y
las inserta en la mp, una vez all los
receptores de LDL difunden hasta
asociarse con depresiones revestidas de
clatrina que se hallan en proceso de
formacin. Dado que las depresiones
revestidas se separan constantemente en
la membrana plasmtica (mp) formando

27
vesculas revestidas, cualquier partcula de LDL que se halle unida a los receptores en las
depresiones revestidas es rpidamente internalizada. Despus de desprenderse de su cubierta de
clatrina, las vesculas de endocitosis liberan su contenido en los endosomas tempranos.
De all el LDL pasa al endosoma tardo donde debido al pH cido hacia que la mayor parte de los
receptores y ligandos se disocien, y los receptores vuelven a travs de vesculas de transporte a
mp. De los endosomas tardos pasan a los lisosomas, donde se hidrolizan los steres de
colesterol dando lugar al colesterol libre el cual queda a disposicin de la clula para la biosntesis
de membrana. Si se acumula demasiado colesterol libre en la clula, sta detiene tanto la sntesis
de colesterol como la sntesis de la protena receptora de LDL, con lo que la clula produce y
absorbe menos colesterol.
Hipercolesterolemia: trabajo grupal.
Esta va regulada para la absorcin de colesterol est perturbada en algunos individuos que
heredan unos genes defectuosos para la produccin de protenas receptoras de LDL y por
consiguiente sus clulas no pueden captar el LDL de la sangre.
El compartimiento endosomal primario acta como la principal estacin de clasificacin en la ruta
endoctica, tal como lo hace la red del trans Golgi en la va biosinttica y secretora. En el ambiente
cido del endosoma temprano muchos receptores internalizados cambian su conformacin y
liberan su ligando los cuales estn predestinados a ser destruidos en los lisosomas conjuntamente
con los otros contenidos del endosoma no unidos a membrana, no obstante algunos ligandos
endocitados permanecen unidos a sus receptores y comparten su destino.
El destino del receptor y de algunos ligando unidos a ellos- vara segn el tipo de receptor de que
se trate:
La mayora de ellos retornan al mismo dominio de la membrana plasmtica de donde
proceden. Por ej. El receptor de LDL, se disocia de su ligando LDL en el endosoma y es
reciclado hacia la membrana plasmtica para su reutilizacin mientras que el LDL
descargado es transportado a los lisosomas.
Algunos viajan hasta los lisosomas donde son degradados. Ej. : la ruta que sigue el
receptor que se une al factor de crecimiento epidrmico EGF, una pequea protena que
estimula la divisin de las clulas epidrmicas. Estos receptores se acumulan en
depresiones despus que han unido EGF. Adems muchos de ellos no se reciclan sino que
son degradados en los lisosomas con los EGF.
Transcitosis las sustancias que llegaron a los endosomas tempranos por pinocitosis van
hacia otra parte de la membrana plasmtica (otro dominio) y son eliminadas por exocitosis.
En este caso los endosomas actan como un sistema de transporte de molculas que para
pasar de un lado a otro atraviesan toda la clula. En captulos anteriores se dijo que en los
tejidos epiteliales las uniones oclusivas imponen diferencias en la composicin de la
membrana plasmtica en las regiones apical y basolateral de las clulas. Tales diferencias
parecen ser necesarias para la Transcitosis. El ejemplo mas difundido de Transcitosis
corresponde a las clulas endoteliales de los vasos sanguneos, ya que son atravesados
por las macromolculas que pasan de la sangre a los tejidos. Otros ejemplos de
Transcitosis se registran en las clulas secretoras de las glndulas lagrimales y en las
mucosas de algunos rganos de los tractos digestivo, respiratorio y urinario. A travs de
ellas, ciertos anticuerpos las inmunoglobulinas A (IgA) pasan del tejido conectivo a la luz de
estos rganos citados,
donde ejercen sus
funciones defensivas.
Durante la lactancia se
produce un fenmeno
semejante en las
clulas secretorias de
las glndulas
mamarias. Aqu las
IgA se transfieren

28
hacia la luz glandular, es decir, la leche.
Existe un flujo unidireccional de vesculas transportadoras para transferir el material endocitado
desde la membrana plasmtica al endosoma primario y desde ste al endosoma secundario o
tardo. Para algunos autores existe una sola clase de endosoma que reside, alternadamente, en
las cercanas de la membrana plasmtica, donde adquiere material endocitado, y en las cercanas
del aparato de Golgi, donde recibe las enzimas hidrolticas. Esta organizacin requiere que el
endosoma realice incesantes traslados de ida y vuelta entre ambos puntos.
La relacin entre endosomas tempranos y tardos es incierta.
El transporte desde los endosomas tempranos a los tardos tiene lugar mediante grandes
vesculas de transporte endosomal, las cuales contienen grandes cantidades de membrana
invaginada que o bien se desplazan hacia el interior celular a medida que maduran o bien como
compartimiento de transporte diferente. Su movimiento tiene lugar mediante microtbulos.
Finalmente los endosomas tardos se convierten en lisosomas.

Funcin en la fagocitosis: las vesculas originadas en la fagocitosis se unen con vesculas


originadas por endosomas tardos para formar lisosomas.

Lisosomas
Se encuentran en las clulas animales, estn limitados por una nica membrana y su funcin es
degradar determinados componentes que pasaron a ser obsoletos para la clula o el organismo.
En algunos casos las sustancias incorporadas en la clula
por endocitosis o fagocitosis tambin se degradan en los
lisosomas.
Los lisosomas se forman a partir de los endosomas que
han recibido dos clases de vesculas transportadoras, una
con material endocitado y otras con enzimas hidrolticas.
La caracterstica mas saliente de los lisosomas en su
heterogeneidad o polimorfismo, no slo porque poseen
aspectos y tamaos dismiles, sino tambin por la
irregularidad de sus componentes. La causa del
polimorfismo es doble, por un lado se debe a la diversidad
del material endocitado y por el otro al hecho de que cada
clase de lisosoma posee una combinacin singular de
enzimas hidrolticas de las que existen alrededor de 50
diferentes (proteasas, lipasas, nucleasas, glucosidasas, fosfolipasas, fosfatasas, sulfatasas).
Todas ellas son hidrolasas cidas, cuya actividad ptima se expresa a un pH = 5, dicho pH se
mantiene dentro del lisosoma gracias a una bomba de H presente en la membrana del lisosoma,
heredada del endosoma secundario.

29
La membrana del lisosoma se halla protegida del efecto destructor de las enzimas hidrolticas
porque su cara luminal contiene una enorme cantidad de glicoprotenas. Por otro lado, si la
membrana del lisosoma se rompiera, las enzimas escapadas no afectaran a los dems
componentes celulares debido a que se inactivaran al tomar contacto con el citosol, cuyo pH =
7,2.
En el interior de los lisosomas las protenas y los hidratos de carbono endocitados son digeridos a
dipptido y monosacridos. Esos y otros productos de la degradacin atraviesan la membrana
lisosmica y pasan al citosol, donde terminan de digerirse o se aprovechan para construir nuevas
molculas. Por su parte, culminadas sus funciones, las enzimas lisosmicas tambin pasan al
citosol, donde son degradadas por los proteosomas. Finalmente, libre de las enzimas y del
material digerido, los lisosomas se reconvertiran en endosomas.
Algunas sustancias endocitadas no terminan de digerirse y permanecen en los lisosomas, que por
ello adquieren el nombre de cuerpos residuales. En ocasiones, las sustancias no digeridas son
expulsadas de la clula mediante un proceso comparable con la exocitosis. Si esto no ocurre,
con el tiempo se convierten en pigmentos de desgaste depositados en el citosol.
Los materiales son transportados hasta los lisosomas por varias rutas.
En general los lisosomas son puntos de encuentro donde convergen diversas corrientes del trfico
intracelular. Las enzimas digestivas son descargadas a ellos mediante una ruta que va por el ER y
el complejo de Golgi, mientras que las sustancias que deben ser digeridas llegan a ellos por
diferentes vas: endocitosis: fagocitosis, pinocitosis y endocitosis mediada por receptores.
Podra existir una cuarta ruta de degradacin proteica que condujese a los lisosomas: algunas
protenas poseen ciertas seales en su superficie llamadas secuencias KFERQ, que son
responsables de su seleccin para ser descargadas en los lisosomas y degradadas. Hay dos
posibilidades, que las secuencias KFERQ unan estas protenas a determinados organelos que
vayan a ser auto fagocitados, de manera indirecta seran destruidas; o podra existir un
transportador especfico en la membrana del lisosoma que reconozca estas seales y transfiera
estas protenas a travs de la membrana lisosomal. El lisosoma cuenta con un receptor que
reconoce la seal, llamado LGP 96.
Autofagosomas. Los endosomas adems pueden recibir enzimas del Golgi pero en lugar
de incorporar material extracelular, reciben componentes propios de la clula que estn
deteriorados o en exceso. Estos, primero son rodeados por membranas del REL. Al
lisosoma que se forma se llama autofagosoma y al fenmeno autofagia. Por ejemplo las
clulas del tero luego del embarazo. Estos autofagosomas pueden convertirse en cuerpos
residuales (digestin incompleta) o endosomas (digestin completa). En algunas clulas los
lisosomas son capaces de efectuar un proceso de digestin extracelular, sus enzimas
pueden ser expulsadas al exterior, solo se da en casos especiales ya que las enzimas solo
pueden actuar a pH = 5. Ejemplo: en clulas osteoclastos del hueso
Trabajo de investigacin: enfermedades producidas por alteraciones lisosmicas: enfermedad de
Tay.Sachs; enfermedad de Gaucher, enfermedad de Niemann-Pick y enfermedad de las clulas I.
Tay-Sachs: algunas neuronas aparecen repletas de un ganglisido. El defecto se debe a la
ausencia de la enzima hexosaminidasa A, que cataliza la hidrlisis parcial del glicolpido. Por
consecuencia, ste se acumula en las neuronas, lo que lleva a graves alteraciones neurolgicas.
Gaucher: se caracteriza por la acumulacin de glucocerebrsido en varios tipos celulares debido a
la ausencia de la glicosidadsa que cataliza la hidrlisis del glicolpido en ceramida y glucosa.
Niemann-Pick: muestra una acumulacin de esfingomielina en varios tipos celulares a
consecuencia de la falta de la esfingomielinasa, que es la enzima que hidroliza al
esfingofosfolpido en ceramida y foforilcolina.
De la clula I: a causa de trastornos genticos los fibroblastos no poseen N-acetilglucosamina
fosfotransferasa, de modo que no se forman manosas 6 fosfato en las enzimas hidrolticas
destinadas a los endosomas. Por consecuencia las vesculas que transportan esta enzimas se
dirigen hacia la membrana plasmtica y se secretan al medio extracelular. La falta de enzimas en

30
los endosomas impide la digestin de sustancias endocitadas, las cuales pasan al citosol y
pueden acumularse en inclusiones.
VESCULAS TRANSPORTADORAS
Mecanismos moleculares de transito vesicular
Tanto en la va secretora como en la va endoctica la comunicacin se hace a/t de vesculas las
que brotan de la membrana de una organela progenitora y se fusiona con la membrana de la
organela diana.
Cul es el mecanismo por el que se forman las vesculas de transporte? Por qu ciertas
protenas luminales solubles y protenas integrales de membrana se incorporan
selectivamente en estas vesculas y otras no lo hacen?
Cul es la seal molecular en una vescula de transporte particular que hace que slo se una
a un tipo particular de membrana de organela? Cmo sabe por ejemplo, una vescula con
contenido de protenas de secrecin del ER rugoso que tiene que moverse del cis-golgi y
fusionarse con l y no con las membranas del trans-Golgi?
Cul es el mecanismo por el que las membranas de una vescula de transporte y de la
organela objetivo se fusionan entre s?
Por lo menos tres tipos de cubierta transportan protenas de una organela a otra
Todas las clulas eucariotas contienen vesculas limitadas por membrana. Son organoides
formados por una membrana con aspecto de saco que se caracteriza por estar revestida en el
lado citoslico por una cubierta proteica durante su formacin, denominndose a stas vesculas
iniciales vesculas recubiertas. Luego pierden la cubierta y quedan formadas las vesculas
transportadoras maduras.
Las cubiertas de protena tienen por lo menos dos funciones distintas: a) acta como dispositivo
mecnico que hace que la membrana se curve y forme una vescula desprendible; b)
proporcionan un mecanismo para seleccionar los componentes que transporta la vescula
Los componentes seleccionados incluyen: a) cargamento consistente en protenas secretoras,
lisosmica y de membranas y b) la estructura necesaria para dirigir y conectar la vescula con la
membrana receptora.
Existen tres clases de cubiertas. Cada tipo de vescula transporta protenas desde organelas
progenitoras particulares hacia organelas de destino particulares. Pe las vesculas cubiertas de
clatrina se forman a partir de la membrana plasmtica y del trans Golgi, y se mueven hacia los
endosomas tardos. Tambin participaran en la secrecin regulada. Las vesculas con cubierta
COP II transportan protenas desde el ER rugoso hacia el Golgi. Por ltimo, las vesculas con
cubierta COP I transportan protenas en sentido retrgrado, entre las cisternas del Golgi y entre el
cis-Golgi de retorno hacia el ER rugoso. Todava no se han identificado las protenas de las
cubiertas que rodean muchos tipos de vesculas de transporte, como las que se mueven desde los
endosomas tardos hacia los lisosomas o las vesculas de secrecin constitutiva que mueven
protenas desde el trans Golgi hacia la mp.
El esquema general de brote vesicular que se presenta es vlido para los tres tipos de vesculas
con cubierta. Durante la formacin de estas vesculas, las subunidades proteicas de la cubierta
polimerizan alrededor de la cara citoslica de una vescula en un proceso de brotacin, con lo cual
contribuyen a que sta se separe de la organela progenitora. Algunas subunidades de protena de
cubierta o protenas adaptadoras asociadas seleccionan que protenas solubles y de membrana
entrarn en las vesculas de transporte como carga proteica,
Las vesculas cubiertas de clatrina median varios tipos de transporte intracelular
Habamos dicho que las clulas que realizan mucha endocitosis (hepatocitos, fibroblastos) poseen
gran cantidad de fositas revestidas de clatrina en la cara citoslica de su mp. La formacin de
estas fositas requiere diversas protenas adaptadoras lo mismo que clatrina y su superacin final
necesitan de una protena fijadora de GTP llamada dinamina.

31
Clatrina: La cubierta de clatrina se forma por la asociacin de un nmero variable de unidades
proteica llamadas trisqueliones. El trisquelin posee tres brazos flexibles doblados hacia un mismo
lado. Est integrado por tres cadenas polipeptdicas grandes y tres pequeas. Para generar una
vescula, los trisqueliones se ensamblan entre s hasta formar un poliedro con aspecto de canasta.
La presencia de los trisqueliones sobre la cara citoslica de una membrana le confiere la fuerza
mecnica que provoca su evaginacin, inicialmente se forma una fosita, esta se convierte en
vescula que se desprende de la membrana y se libera al citosol.

Protenas adaptadoras: entre la clatrina fibrosa y la membrana de la fosita cubierta hay un


espacio de 20 nm que contiene partculas de armado (adaptinas) las que se unen al dominio
globular de la cadena de clatrina en el trisquelin y promueven la polimerizacin de los
trisqueliones para formar jaulas. Al unirse tambin a la cara citoslica de protenas de membrana,
las partculas de armado determinan qu protenas especficas se incluyen o excluyen de las
vesculas de transporte en proceso de brote. Debido a que los dominios citoslicos de los
receptores son distintos entre s y todos los trisqueliones son iguales, para conectarse con stos
utilizan unas molculas intermediarias llamadas adaptinas. Las adaptinas son protenas
heterodimricas que poseen dos dominios funcionales, uno para el trisquelin y otro para el
receptor. Obviamente el primero es igual en todas las adaptinas.
Dinamina: indispensable para la formacin completa de una fosita
cubierta de clatrina, la dinamina es una protena citoslica que se
fija y luego hidroliza GTP. Despus que las subunidades de
dinamina se polimerizan alrededor del cuello de una fosita, se cree
que la hidrlisis del GTP regula la contraccin de la dinamina
polimrica hasta que la vescula se separa.
Despolimerizacin de las cubiertas de clatrina
Las vesculas cubiertas de clatrina son estables en la composicin
inica y pH del citosol celular. Las vesculas normalmente pierden
su cubierta de clatrina y las partculas de armado, poco despus de
su formacin. Se cree que las hsp 70 citoslica, una protena
chaperona que se encuentra en todas las clulas eucariontes,
catalizan la despolimerizacin de la cubierta de clatrina hasta sus
trisqueliones constitutivos, stos sern reutilizados para la
formacin de otras fositas y vesculas.
Las vesculas revestidas de clatrina no son todas iguales, las que participan del trnsito del Golgi
a los endosomas tardos son ricas en receptores M6P, otras, las que participan en la ruta desde la
mp a los endosomas tempranos son ricas en receptores de componentes extracelulares como
LDL- pareciera que el revestimiento de clatrina es el mismo, lo que vara es la adapatina.
La cubierta de coatmeros se construye a partir de protenas COP
La cubierta de coatmero se forma cuando numerosos complejos moleculares, cada uno
compuesto por varias protenas llamadas COP se colocan sobre la cara citoslica de una
membrana plana. Estos complejos proteicos llevan el nombre de coatmeros..

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Para el brote de vesculas de transporte con COP hace falta varias protenas: una pequea
protena fijadora de GTP en el citosol, llamada ARF, libera GDP que tiene unido y fija GTP es
promovido por una protena perteneciente a la propia membrana llamada GRP

Es preciso sealar que adems de anclarse a la membrana por medio de la ARF, los coatmeros
se ligan a ella directamente, ya que se conectan con el dominio citoslico del receptor
membranoso especfico de la molcula que va a ser transportada. Esto es posible porque ese
dominio es igual en todos los receptores, adecuado para interactuar con las COP. A medida que
se construye la cubierta de coatmero, succiona la membrana hacia el citosol, lo cual genera
primero una fosita y luego una vescula. Una vez que las vesculas de COP son liberadas por la
membrana donante, la cubierta de COP se despolimeriza y se disocia. La salida de la cubierta se
produce porque el GTP de las ARF es hidrolizado por accin de una protena citoslica llamada
GAP (GTPasa activating protein). Existen varias clases de COP y ARF.
Las vesculas cubiertas de COP I median el transporte retrgrado dentro del Golgi y desde
ste de regreso hacia el RE
Investigaciones revelaron que las vesculas de COP I median el transporte de protenas desde el
ER rugoso hacia el Golgi, pero su principal papel se relaciona con el transporte retrgrado de
protenas entre las cisternas del Golgi y desde el Cis-Golgi de regreso al ER rugoso. Transportan
con selectividad protenas luminales y de membrana desde el trans-Golgi hacia las cisternas
intermedias, mientras que dejan atrs otras protenas en las cisternas del trans-Golgi; de modo
similar mueven protenas selectivamente desde las cisternas intermedias hacia el cis-Golgi

Las vesculas cubiertas con COP II median el transporte desde el ER hacia el Golgi
Su formacin es similar a las de COP I, en lugar de ARF las Sar 1, tambin contienen una familia
de protenas de membrana que fijan con selectividad protenas solubles en el ER destinadas a ser
transportadas al Golgi
Al contrario que las cubiertas de clatrina, las de coatmeros no se autoensamblan, sino que
necesitan de ATP que dirija su formacin y en lugar de separarse en cuanto la vescula se
desprende de la membrana dadora, la cubierta de coatmero se mantiene hasta que la vescula
alcanza la membrana diana.
Cuando la vescula revestida de coatmero alcanza la membrana destino, una protena especfica
de la membrana diana activadora de GTP asa activa la ARF para que hidrolice al GTP a GDP lo
que provoca un cambio en la conformacin de ARF de manera que la cadena de cidos graso se
desprende de la membrana causando el desensamblaje del revestimiento y permitiendo que se
produzca la fusin con la membrana.
Marcadores proteicos de orgnulos llamados SNARE colaboran en la direccin del trnsito
vesicular.
Las vesculas de transporte sean o no selectiva al tomar la carga del compartimiento dador ha de
ser altamente selectivas en cuanto a la membrana diana con la que se fusionan. Esto sugiere que
todos los tipos de vesculas de transporte de la clula han de expresar marcadores de superficie
que las identifiquen segn su origen y su carga, y que sean reconocidos por receptores de las
membranas dianas.

33
A pesar de la gran variedad de protenas de cubierta que median la formacin de vesculas de
transporte, la fusin de todas las vesculas con su membrana objetivo tiene varias caractersticas
comunes. En todos los casos la fusin se produce cuando la cubierta se ha despolimerizado, y en
ello intervienen un conjunto de protenas que median:
La orientacin de la vescula hacia la pareja de fusin adecuada.
El propio proceso de fusin.
La despolimerizacin de las cubiertas de las vesculas pone al descubierto un tipo singular de
protenas de membrana llamadas V- SNARE que se incorpor a una vescula cuando sta brot
de una organelas donante. La V-SNARE especfica en cada tipo e vescula de transporte dirige a
sta hacia la pareja de fusin de membrana correcta. La membrana diana de cada tipo de
organela pose una protena integral de membrana T-SNARE que acta de forma cooperativa para
unirse de manera especfica a un tipo particular de V-SNARE.

Se cree que las protenas Rab aseguran la especificidad de la unin de las vesculas, es decir que
la unin entre una V-SANARE y su t-SNARE complementaria depende de una protena llamada
Rab, que acta sobre ambas. Se han identificado cerca de 30 protenas Rab diferentes, una para
cada pareja de v-SN ARE/t-SNARE. Las protenas Rab pertenecen a una familia de protenas
monomricas GTPasa, cuando una vescula encuentra la membrana diana adecuada, la unin de
la v-SNARE y t-SNARE permite que la vescula permanezca unida durante el tiempo necesario
para que las protenas Rab hidrolice su GTP lo cual bloquea a la vescula en la membrana diana
preparndola para su fusin posterior, se inactiva, y se separa de la membrana del
compartimiento donante. En el proceso de fusin intervienen protenas fusgenas: SNAP y NSF.

Caveolas: las vesculas con caveolina no son estrictamente vesculas recubiertas ya que la
caveolina se encuentra incluida en la bicapa lipdica. Podran actuar en la potocitosis, que es un
pinocitosis pero con un mecanismo molecular de ligando receptor distinto. La fuerza mecnica
depende de estas protenas ubicadas en la bicapa lipdica. No hay certidumbre en cuanto a su
funcin: internalizar solutos- y su posterior ingreso sin formar vescula: POTOCITOSIS. Estn
relacionadas con la contraccin muscular en msculo liso (bombas de Ca++)
Para ciertos autores van a endosomas especiales, caveosomas. Otros proponen que algunas
caveolas forman vesculas e internalizan material que se transporta a travs de la clula y se
libera en otro lado transcitosis. Algunos receptores en caveolas participan del sistema de seal
como segundo mensajeros.

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