Informe del cuarto laboratorio de Microbiologa Sanitaria I hidrlisis del

almidn fermentacin de carbohidratos

Profesor :

TELLO CEBREROS JORGE GILBERTO

Alumnos :

CHURA COPAJA RICARDO

2016 II
 1) HIDRO
LISIS
DEL
ALMID
ON
INDICE-----------------------------------------------------------------------------------------1
2) OBJETIVOS-----------------------------------------------------------------------------------
2
3) FUNDAMENTO TEORICO----------------------------------------------------------------2
4) METODOLOGA---------------------------------------------------------------------------11
4.1) MATERIALES-------------------------------------------------------------------------11
4.2) PROCEDIMIENTOS----------------------------------------------------------------12
5) RESULTADOS-----------------------------------------------------------------------------13
6) DISCUSIONES-----------------------------------------------------------------------------15
7) CONCLUSIONES--------------------------------------------------------------------------16
8) RECOMENDACIONES-------------------------------------------------------------------16
9) BIBLIOGRAFIA-----------------------------------------------------------------------------17
10)ANEXOS-------------------------------------------------------------------------------------18

FERMENT 1. OBJETIVOS--------------------------------------------------
ACION DE ---------------------------------2
2. FUNDAMENTO

CARBOHI
DRATOS
TEORICO----------------------------------------------------------------2
3. METODOLOGA---------------------------------------------------------------------------11
4.1) MATERIALES-------------------------------------------------------------------------11
4.2) PROCEDIMIENTOS----------------------------------------------------------------12
4. RESULTADOS-----------------------------------------------------------------------------13
5. DISCUSIONES-----------------------------------------------------------------------------15
6. CONCLUSIONES--------------------------------------------------------------------------16
7. RECOMENDACIONES-------------------------------------------------------------------16
8. BIBLIOGRAFIA-----------------------------------------------------------------------------17
9. ANEXOS-------------------------------------------------------------------------------------18

2. OBJETIVOS:

HIDRLISIS DEL ALMIDN

Saber si se llega a utilizar o no el almidn

Comprobar que las amilasas producidas por semillas de maz hidrolizan al

almidn, dando como producto final unidades de maltosa siendo este uno de los
mecanismos que la semilla utiliza para obtener energa necesaria para
germinar.

Imagen 1. Placa Petri con colonia para verificar si se llega al almidon

3. FUNDAMENTO TEORICO:

Almidon:

El almidn es una sustancia de reserva muy importante en la dieta humana.

Adems las mltiples aplicaciones prcticas en la industria de esta
molcula hacen revalorizan ms todava su inters econmico a nivel
mundial. El almidn es una macromolcula que es el principal compuesto
de las reservas de energa de los vegetales, esto hace que sea el principal
aporte de caloras a la dieta de todos los animales, incluyendo el ser
humano. Es el compuesto principal de todas las harinas (arroz, trigo, maz,
patata, etc.).

El almidn est formado por 2 tipos de molculas, la amilosa y la

amilopectina (20% y 80% respectivamente), que se pueden unir una con
otra mediante enlaces glucosdicos 1->4. Dependiendo de la especie
vegetal las proporciones de una y otra pueden variar.

La primera de ellas, la amilosa, est formada por repeticiones del orden de

cientos a miles de D-glucopiranosa (se denominan as los azucares que
forman una estructura en anillo con sus 5 carbonos y un oxgeno, en el
caso del almidn se refiere a la forma cclica de la glucosa), unidas por
enlaces glucosdicos alfa 1->4, formando largas cadenas sin ramificar o con
algunas pocas ramificaciones en los enlaces alfa entre los carbonos 1 y 6
(1->6). De estas ramificaciones se pueden llegar a crear macromolculas
de hasta un milln de Da. Tridimensionalmente se condensa formando une
hlice (con 6 glucosas por vuelta) y forma alrededor del 25% del almidn,
los almidones comerciales ricos en amilosa pueden llegar a contener una
proporcin de entre el 50 y el 75% de amilosa y se extraen del maz. En el
interior de la hlice se encuentran los tomos de hidrgeno haciendo la
regin interior altamente hidrofbica y es una regin donde se suelen
asociar lpidos de carcter polar. En los cereales el porcentaje de lpidos en
el almidn ronda entre el 0,5 y el 1%.
 La amilopectina es el componente mayoritario del almidn,
aproximadamente un 75%, tambin est formado por ramificaciones de
glucosa, salvo que en este caso estn altamente ramificado, cada 20 o 30
molculas de glucosa mediante un enlace a-D glucopiranosa (1->6). La
amilopectina no forma hlices y puede alcanzar un peso molecular muy
elevado hasta unos 200 millones de Da. Algunos almidones estn
compuestos de forma exclusiva por amilopectina y se denominan creos. El
almidn est formado qumicamente por regiones cristalinas, propias de la
amilopectina, y regiones no cristalinas que se alternan. En el caso de la
amilopectina depatata se encuentran, en ocasiones, enlaces de tipo ster
fosfato en la posicin O-6 o menos frecuentemente en el oxgeno O-3 de
los que salen las ramificaciones propias de esta molcula.

Estudios realizados a principios del siglo XXI parecen demostrar que el

almidn tuvo un papel crucial en el xito evolutivo del Homo sapiens.
Respecto a sus familiares primates ms cercanos, el ser humano cuenta
con hasta 3 veces ms amilasa, la enzima encargada de degradar el
almidn vegetal. Esta mayor eficacia en su dieta vegetal podra haber sido
crucial para el desarrollo del cerebro humano, que consume grandes
cantidades de azcar.

a. Hidrlisis enzimtica del almidn:

Los carbohidratos o polisacridos son compuestos que tienen importantes

funciones estructurales y de energa en los seres vivos. Tanto su digestin como
movilizacin (degradacin de polisacridos de almacenamiento) comportan una
ruptura secuencial de unidades de monosacridos de los extremos no reductores
de los polmeros de glucosa. El metabolismo de los carbohidratos se produce de
maneras diferentes, por ejemplo en las plantas no se produce una digestin (con
pocas excepciones), las plantas sintetizan tanto monosacridos como
polisacridos de almacenamiento de energa mediante la fotosntesis, mientras
que en los animales obtienen carbohidratos al ingerirlos de la dieta, tambin los
animales pueden sintetizar carbohidratos como el glucgeno (polisacrido de
almacenamiento de energa) a partir de sus unidades monomericas de glucosa.
La digestin de los carbohidratos comienza una vez que los alimentos son
introducidos en la boca, aqu comienza un proceso llamado hidrlisis el cual se
lleva a cabo mediante la divisin de una molcula de agua del medio por medio de
un cido. El hidrgeno del agua se une al oxigeno del extremo de una de las
molculas de azcar; el OH se une al carbono libre del otro residuo de azcar.
Como resultado de esta reaccin, se tiene la liberacin de un monosacrido. Este
proceso es realizado por las enzimas amilasas de la saliva (tambin encontradas
en tejidos vegetales y jugos pancreticos), ya que producen un acido que es el
que causa la ruptura de la molcula de agua logrando as reducir los polisacridos
hasta unidades ms simples como oligosacaridos y monosacaridos, a
continuacin estos pasan al intestino donde se produce otra hidrlisis de los
carbohidratos restantes por las amilasas pancreticas que tienen una actividad
mayor que las amilasas de la saliva cuya actividad es limitada por su rpida
inactivacin por la acidez gstrica, como productos se obtienen ms
monosacridos que pasan a travs la pared intestinal, para posteriormente llegar
al torrente sanguneo para finalmente ingresar al interior celular por medio de
protenas que se localizan en la membrana celular. Este proceso es aplicable
generalmente para muchos polisacridos por la accin de los cidos diluidos
producto de las enzimas.

El almidn es el carbohidrato de reserva ms abundante en los tejidos vegetales.

Se encuentran en grandes cantidades de tubrculos y semillas de cereales y
leguminosas. Este polisacrido contiene alrededor de un 20% de una fraccin
insoluble en agua llamada amilosa y un 80% de una fraccin soluble denominada
amilopectina. Ambas fracciones estn constituidas por unidades de -D-glucosa
su diferencia estructural es que la primera est formada por cadenas lineales de
glucosa con enlaces (14) y la segunda son cadenas lineales (14) y
ramificadas (16) de glucosa.

En los animales la digestin del almidn empieza en la boca con la accin de la

-amilasa que se secreta en la saliva. Esta enzima cataliza la hidrlisis de la
cadena lineal (amilosa) y la ramificada (amilopectina) del almidn, rompiendo
enlaces -(14) interiores (endoamilasa) para formar una mezcla de dextrinas
(oligosacaridos entre estos estn la amilodextrina, eritrodextrina, acrodextrina y
maltodextrina), Sin embargo esta enzima solo degrada parcialmente la
amilopectina, porque no es capaz de romper los enlaces (16) que se
encuentran en los puntos de ramificacin (la amilosa es transformada totalmente
mientras que la amilopectina se conserva en un 40-45% sin hidrolizar). Para
continuar su degradacin en el intestino es necesaria la accin de una enzima
desramificante, la (16)-glucosidasa esta tiene la accin de exponer un grupo
nuevo de ramificaciones con enlaces (14), que pueden ser atacadas por la -
amilasa, hasta alcanzar una nueva serie de ramificaciones con enlaces (16).
El resultado final de la accin secuencial de estas dos enzimas es la degradacin
completa del almidn obteniendo glucosa

En los vegetales se encuentra tambin -amilasa y -amilasa (en granos de

cereales), esta enzima ataca enlaces (14) pero no puede catalizar la hidrlisis
de los enlaces (16) y por lo tanto no cataliza la hidrlisis completa de la
amilopectina.

Es igual de importante mencionar que la -amilasa requiere un activador como el

cloruro sdico y es sensible a pH cidos, es inactiva a un pH aproximadamente de
3.3, su rango optimo de accin es a pH entre 5-7, por otro lado la -amilasa no
requiere de un activador, y es menos estable al calor que la primera, su pH optimo
es de 4.5.

La hidrlisis del almidn se puede demostrar por la aparicin de D-glucosa (azcar

reductor), el cual puede ser detectado con los reactivos de Benedict, Fehling y
otros el reactivo de Benedict est constituido por una disolucin de sulfato de
cobre II, citrato de sodio y carbonato de sodio. Al tratar al azcar con estos
reactivos experimentan una reaccin de oxidacin. El cobre II en disolucin
acuosa, de color azul se reduce a cobre I, el cual precipita como oxido de cobre I
de color rojo. Otra manera de demostrar la hidrlisis del almidn es por la
desaparicin del color azul caracterstico de la prueba del yodo-yoduro
 Imagen 2. Proceso de hidrolisis de almidn

4. METODOLOGIA:

4.1. Materiales

Tubos de ensayo
 Imagen 3. Tubos de ensayo

Placas Petri

Imagen 4. Placas Petri

Lugol

Imagen 5. Lugol

4.2. Procedimiento:

Primero preparamos los medios en el cual colocaremos dos tipos de bacterias

el cual las vamos a separar para ver cual de estos tipos de bacterias utiliza el
almidn.
 Luego las placas petri las cuales contienen las bacterias los dejaremos un
tiempo determinado.

En nuestro caso los dejamos por 48 3 horas y luego a esas dos muestras las
cuales los hemos separado en las zonas A y B le agregamos lugol y
tomaremos nota de lo que suceda.

5. RESULTADOS

PLACA HIDRLISIS
COLONIA A COLONIA B

GRUPO N1 Si hay hidrolisis Si hay hidrolisis

ESTANQUE FAUA
GRUPO N2 Si hay hidrlisis Si hay hidrlisis
BAO FIA HOMBRES
GRUPO N3 Si hay hidrlisis Si hay hidrlisis
BAO FIA HOMBRES
GRUPO N4 Si hay hidrlisis Si hay hidrolisis
BAO FIA HOMBRES
GRUPO N5 Si hay hidrolisis No hay hidrolisis
BAO FIC HOMBRES

6. DISCUSIONES
7. CONCLUSIONES
 Podemos concluir que en la hidrlisis del almidn cuando no hay
hidrlisis hay almidn

El lugol es importante para saber si es que hay hidrlisis o si hay

almidn

8. RECOMENDACIONES

Deberamos de hacer un estudio para el segundo

experimento ya que no sabemos qu tipos de bacterias
podemos encontrar.

9. BIBLIOGRAFIA

http://biologia.laguia2000.com/bioquimica/que-es-el-almidon

https://www.academia.edu/11796751/Hidrolisis_enzim
%C3%A1tica_del_almid%C3%B3n

ANEXOS
 FERMENTACION DE CARBOHIDRATOS

1. OBJETIVOS:

El objetivo principal del laboratorio en la parte de la

fermentacin de carbohidratos es determinar la capacidad de
un microorganismo de fermentar un carbohidrato especifico
incorporado en un medio base

Otro objetivo ya es a nivel econmico, el beneficio industrial

primario de la fermentacin es la conversin del mosto en vino,
cebada en cerveza y carbohidratos en dixido de carbono para
hacer pan y como nos damos cuenta todo esto por lo tanto nos
da ms comodidades para nuestra vida.

2. FUNDAMENTO TEORICO

La fermentacin es un proceso catablico de oxidacin incompleta, totalmente

anaerbico, siendo el producto final un compuesto orgnico. Estos productos
finales son los que caracterizan los diversos tipos de fermentaciones.
Fue descubierta por Louis Pasteur, que la describi como la vie sans lair (la vida
sin el aire). La fermentacin tpica es llevada a cabo por las levaduras. Tambin
algunos metazoos y protistas son capaces de realizarla.
El proceso de fermentacin es anaerbico ya que se produce en ausencia de
oxgeno; ello significa que el aceptor final de los electrones del NADH producido
en la gluclisis no es el oxgeno, sino un compuesto orgnico que se reducir para
poder reoxidar el NADH a NAD +. El compuesto orgnico que se reduce
(acetaldehdo, piruvato) es un derivado del sustrato que se ha oxidado
anteriormente.

Fermentacin lctica
La fermentacin lctica es una ruta metablica anaerbica que ocurre en
el citosol de la clula, en la cual se oxida parcialmente la glucosa para obtener
energa y donde el producto de desecho es el cido lctico.
Este proceso lo realizan muchas bacterias (llamadas bacterias lcticas), hongos,
algunos protozoos y muchos tejidos animales; en efecto, la fermentacin lctica
tambin se verifica en el tejido muscular cuando, a causa de una intensa actividad
motora, no se produce una aportacin adecuada de oxgeno que permita el
desarrollo de la respiracin aerbica. Cuando el cido lctico se acumula en las
clulas musculares produce sntomas asociados con la fatiga muscular. Algunas
clulas, como loseritrocitos, carecen de mitocondrias de manera que se ven
obligadas a obtener energa por medio de la fermentacin lctica; por el contrario,
el parnquima muere rpidamente ya que no fermenta, y su nica fuente de
energa es la respiracin aerbica.

Aplicaciones de la fermentacin lctica

Un ejemplo de este tipo de fermentacin es la acidificacin de la leche. Ciertas
bacterias (Lactobacillus, Streptococcus), al desarrollarse en la leche utilizan la
lactosa (azcar de leche) como fuente de energa. La lactosa, al fermentar,
produce energa que es aprovechada por las bacterias y el cido lctico es
eliminado. La coagulacin de la leche (cuajada) resulta de la precipitacin de las
protenas de la leche, y ocurre por el descenso de pH debido a la presencia de
cido lctico. Este proceso es la base para la obtencin del yogur. El cido lctico,
dado que otorga acidez al medio, tiene excelentes propiedades conservantes de
los alimentos. Ejemplos de esto ltimo son el chucrut y el ensilado de granos para
forraje.
 3. METODOLOGIA:

3.1. MATERIALES:

3.2. FERMENTACIN DE CARBOHIDRATOS:

Primero tenemos que preparar los medios de cultivo necesario para el

experimento.

Una vez realizado esto, echamos una bacteria del experimento anterior y
agregamos un tubito para ver si asi se forma los microorganismos

En este caso los tubos que dejamos fue por 24 horas y notamos
crecimiento de microorganismos, formndose un agua enturbiada y otros
mas para eso tambin tomaremos nota de lo sucedido.

En la fermentacin de carbohidratos encontramos la bacteria ms conocida

la escherichia de coli, este tipo de proceso es una reaccin anaerobia.
 Imagen 6. Tubos de
ensayo con escherichia
coli

4. RESULTADOS:

No hay crecimiento
No hay pelicula GAS: No hay
Cultivo "A" No hay sedimento pH: 6
GRUPO #1
No hay crecimiento
No hay pelicula GAS: No hay
Cultivo "B" No hay sedimento pH: 6

Sin crecimiento
Sin pelicula GAS: No hay
Cultivo "A"
Sin sedimento pH: 6
GRUPO #2
Sin crecimiento
Sin pelicula GAS: No hay
Cultivo "B"
Sin sedimento pH: 6

No hay crecimiento
Sin pelicula GAS: No hay
Cultivo "A"
Sin sedimento pH: 6
GRUPO #3
No hay crecimiento
Sin pelicula GAS: No hay
Cultivo "B"
Sin sedimento pH: 6

No hay crecimiento
Sin pelicula GAS: No hay
Cultivo "A"
Sin sedimento pH: 6
GRUPO #4
No hay crecimiento
Sin pelicula GAS: No hay
Cultivo "B"
Sin sedimento pH: 6
 No hay crecimiento
Sin pelicula GAS: No hay
Cultivo "A"
Sin sedimento pH: 6
GRUPO #5
No hay crecimiento
Sin pelicula GAS: No hay
Cultivo "B"
Sin sedimento pH: 6

5. CONCLUSIONES:

En la fermentacin de carbohidratos necesitbamos usar un pequeo tubo o

cristal para que haya formacin de microorganismos

Tambin con esto sabremos que en esta formacin encontraremos la bacteria

conocida como la escherichia de coli

Podemos llegar a la conclusin ya que lo hemos demostrado que el Ph de

cada tubo es igual a 7

6. RECOMENDACIONES:
 Deberamos de hacer un estudio para el segundo experimento ya que no
sabemos qu tipos de bacterias podemos encontrar.

7. BIBLIORAFIA:

https://es.scribd.com/doc/241111178/Fermentacion-de-Carbohidratos