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NCLEO BOLVAR
ESCUELA DE CIENCIAS DE LA SALUD
DR. FRANCISCO VIRGILIO BATTISTINI CASALTA
DEPARTAMENTO DE PARASITOLOGA Y MICROBIOLOGA
INDICE
INTRODUCCIN................................................................................................................ 4
JUSTIFICACIN............................................................................................................... 15
OBJETIVOS...................................................................................................................... 16
Objetivo General............................................................................................................ 16
Objetivos Especficos....................................................................................................16
METODOLOGA................................................................................................................ 17
Tipo de estudio.............................................................................................................. 17
rea de estudio.............................................................................................................. 17
Universo........................................................................................................................ 17
Muestra.......................................................................................................................... 17
Criterios de Inclusin:.......................................................Error! Marcador no definido.
Recoleccin de Datos....................................................................................................17
Estudio serolgico. Procedimiento....................................Error! Marcador no definido.
ACTIVIDADES PREPARATORIAS.......................................Error! Marcador no definido.
INSTITUCIONES Y PERSONAL PARTICIPANTE................Error! Marcador no definido.
CALENDARIO Y HORARIO DE ACTIVIDADES...................Error! Marcador no definido.
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS..................................................................................35
3
DEDICATORIA
4
DEDICATORIA
5
AGRADECIMIENTOS
RESUMEN
INTRODUCCIN
al., 1996; Humbert et al., 2000), artritis reactiva (Bethel, 1981; Rayes y Lambertucci, 2001)
y angioedema (Magnaval et al., 2001).
Los mecanismos patognicos en la infeccin por Toxocara siguen tres vas: el
alojamiento de larvas en los tejidos, la secrecin de antgenos al medio extracelular y la
respuesta inmunitaria que recibe el parsito por parte de los sistemas de defensa del
hospedador (Ausina y Moreno, 2006).
La liberacin de antgenos forma parte de los mecanismos de evasin
desarrollados por el parsito. Resulta que no solo los antgenos liberados son capaces de
estimular la respuesta inmunitaria, sino que las protenas antignicas de la superficie del
parsito adulto tambin tienen esta capacidad. Se cree que la respuesta involucrada en
esta infeccin es la celular, mediada por los linfocitos T CD4, Th2, siendo caracterstica la
acumulacin de eosinfilos en los tejidos por donde pasan las larvas. La interleucina (IL)
implicada en mayor medida es la IL-5, aunque otra sustancias quimiotcticas como el
leucotrieno B4 o el factor activador plaquetario (PAF) contribuyen en este proceso (Ausina
y Moreno, 2006).
El diagnstico diferencial incluye otras entidades causantes de eosinofilia como
reacciones a drogas, otras helmintiasis como ascarosis, estrongiloidosis y fasciolosis
(Huapaya et al., 2009; Roldn et al., 2010). En Venezuela se ha planteado que el
diagnstico diferencial debe no solo incluir otras helmintosis, sino tambin casos como
patologa granulomatosa, no parasitarias como tuberculosis, paracoccidiodomicosis y la
leucemia eosinoflica. Desde el punto de vista ocular, el diagnstico diferencial se
establece con tumores de la retina como retinoblastoma y otras causas de coroiditis,
como la toxoplasmosis (Delgado y Rodrguez, 2009).
El diagnstico definitivo de la toxocariosis en seres humanos se logra mediante los
antecedentes personales, la clnica del paciente y resultados hematolgicos, la
demostracin de las larvas en tejido, imagenologa y serologa. Con relacin a los dos
primeros, una historia de exposicin a suelos contaminados por heces de cachorros
infectados y geofagia suelen ser antecedentes epidemiolgicos de importancia. En el caso
del SLMV, los hallazgos de laboratorio ms consistentes son eosinofilia, leucocitosis y
disminucin de la relacin albmina/globulina, deben tomarse en cuenta para establecer
un diagnstico presuntivo (Delgado y Rodrguez, 2009). Debido a que el parsito queda
restringido a su forma larvaria, no es posible utilizar mtodos coproparasitolgicos para
detectar huevos en las heces (Roldn et al., 2010).
12
- Evitar que los nios coman tierra o introduzcan objetos sucios a la boca (Center
for Disease Control an Prevention, 2013).
El Sndrome de Larva Migrans Visceral fue descrito inicialmente en el sur de los
Estados Unidos, pero ha sido reconocido en diferentes lugares de ese pas incluyendo
Hawai, y en otras latitudes como Europa, El Caribe, Filipinas, Australia, Sudfrica, as
como Amrica Latina, en pases como Mxico, Argentina, Brasil, Colombia y Venezuela
(Delgado y Rodrguez, 2009).
En Colombia, se identific una seroprevalencia contra T. canis, en estudiantes de
dos escuelas del 13,5% (Rodrguez et al., 1986). Otros investigadores colombianos
apuntaron una cifra de prevalencia ms alta (42,1%) en una poblacin escolar (Mendoza-
Meza et al., 2010). En el ao 2000, Alonso et al., demostraron un 39,3% de
seropositividad para T. canis sin diferencias estadsticamente significativas con relacin a
la edad y al gnero. En Brasil, se ha identificado una seroprevalencia en nios del 26,9%
(Muradian et al., 2005), mientras que en Estados Unidos es de un 3,9% (Won et al.,
2008). En Per, Espinoza et al., (2008) determinaron una seroprevalencia anti Toxocara
canis de un 32,4%, con una proporcin significativa para el gnero masculino y entre los 5
a 10 aos de edad.
Lpez et al., (2005) investigaron los aspectos inmunolgicos y clnicos de la
infeccin infantil por T. canis en un rea subtropical de Argentina. Realizaron exmenes
paraclnicos, encuestas epidemiolgicas y determinacin de IgG e IgM anti-T. canis por el
mtodo de ELISA, confirmando los sueros positivos por el mtodo de Western Blot. Del
total de la muestra 122 (67%) resultaron seropositivos. Del grupo anterior 28,8% no
contaba con agua potable en su domicilio; 91,1% haba tenido contacto con perros y/o
gatos; 30,0% tenan antecedentes de geofagia y 86,7% viva en zona de calles sin
pavimento. Se determin un 77,8% de casos asintomticos, como Sndrome de Toxocara
Ocular en 6,7% y con Sndrome de Larva Migrans Visceral en 15,5%.
Gtaz et al., (2007) en Lima, Per estudiaron la relacin entre toxocariosis y asma
mediante un estudio prospectivo que incluy a 75 nios asmticos y 75 nios no
asmticos, de 2 a 13 aos, atendidos en el Hospital Nacional Cayetano Heredia. Se aplic
un cuestionario para evaluar los factores asociados a toxocariosis y a asma,
respectivamente; y la seroprevalencia de T. canis fue determinada mediante la prueba
ELISA IgG para T canis. La seroprevalencia de toxocariosis fue de 16%, no se encontr
una asociacin significativa entre la seropositividad para T. canis y el asma. Sin embargo
se observ una relacin estadsticamente significativa entre una mayor frecuencia de
15
crisis de sibilancia nocturna y una serologa positiva para T. canis. Los factores asociados
a la toxocariosis fueron el contacto intenso con perros, particularmente con cachorros y
una ausencia de grado de instruccin universitario de los padres.
Martin et al., (2008) realizaron en Argentina un estudio en un total de 100 nios
con diagnstico presuntivo de Toxocariosis provenientes de un hospital regional de la
provincia de Santa Fe, el rango de edad fue entre 2 a 6 aos para ambos sexos. Del total
de la muestra el 59% result positivo al test de ELISA usando antgenos de excrecin-
secrecin de la larva; No se encontr asociacin entre la presencia de infeccin y el sexo.
La dificultad respiratoria se present ms frecuentemente en pacientes con ELISA
positiva, considerados como infectados. Se hall eosinofilia en el 100% de los infectados
y en el 85,2% de los no infectados y la tenencia de canes en los domicilios no fue
significativamente mayor entre los casos positivos que entre los negativos. En Paraguay,
igualmente en una poblacin peditrica, se inform una seroprevalencia de 78 % de
toxocariosis (Rivarola et al., 2009).
En Venezuela, particularmente en Caracas, Pifano et al. (1988) describieron un
66,6% de positividad, en nios de 2 a 7 aos en la comunidad de El Valle, empleando un
Antgeno de Excresin/Secrecin de T. canis. Garca-Pedrique et al., (2004) determinaron
la prevalencia de infeccin por Toxocara en pre-escolares de una comunidad educativa de
El Mojn, Estado Zulia, en el cual se examinaron 73 muestras de suero de nios de
ambos sexos, en edades entre 4 y 6 aos. La determinacin de anticuerpos anti-Toxocara
se realiz a travs de la tcnica de ELISA, utilizando un kit comercial (Toxocara Microwell
Serum ELISA Carlsbed, CA. 92008). La prevalencia general de infeccin fue de 9,72% y
el mayor porcentaje (50%) de sta se observ en nios de 4 aos, aprecindose
diferencias estadsticamente significativas entre las edades, pero no con relacin al sexo.
Determinando as una correlacin inversa entre la edad y la positividad de ELISA.
Cazorla et al., (2004) demostraron mediante un estudio descriptivo y transversal, la
contaminacin por huevos de Toxocara spp. en suelos de 38 parques pblicos de la
ciudad de Coro, Estado Falcn. Se evalu parasitolgicamente las muestras de suelos
mediante la tcnica de flotacin con NaCl (Willis-Molloy modificado). Los resultados
revelaron la presencia de huevos de Toxocara spp. en el 63,16% de los parques
estudiados. De inters fue que no se detect una relacin significativa y directa entre la
textura, salinidad y pH de los suelos y el aislamiento de huevos de Toxocara spp. Gmez
(2004) realiz un estudio en la localidad del barrio Nueva Toledo de El Pen, estado
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JUSTIFICACIN
OBJETIVOS
Objetivo General
Objetivos Especficos
METODOLOGA
Tipo de estudio
Se realiz un estudio de tipo transversal, de campo y descriptivo, que consisti en
la toma de muestras sanguneas para determinar la presencia de anticuerpos anti-
20
rea de estudio
La U.E.E.B. Blanca Sosa de Vargas se ubica en la Parroquia Catedral,
urbanizacin Medina Angarita, calle los nsperos, al lado del gimnasio Boris Planchart. La
matrcula para el ao escolar 2012-2013 fue de 483 alumnos. El horario de
funcionamiento de la escuela es de 7 am a 3pm. La institucin est incluida en una
comunidad con condiciones socio sanitarias deficientes, pero que no son precarias.
Universo
El universo estuvo representado por todos los 483 nios de la U.E.E.B Blanca
Sosa de Vargas matriculados para el periodo 2012-2013.
Muestra
La muestra la comprendi 100 nios, seleccionados aleatoriamente de cada grado
y seccin, cuyos padres o representantes aceptaran por escrito que los nios participaran
en la investigacin. Para ello, firmaron el consentimiento informado respectivo (Apndice
A).
Recoleccin de Datos.
Se colectaron datos de identificacin, clnicos y epidemiolgicos de inters en una
ficha diseada para tal fin (Apndice B). La misma se llenar mediante interrogatorio
individual tanto al nio como al representante. El estudio de las condiciones
sociosanitarias y econmicas de los escolares se realiz mediante el mtodo de Graffar
modificado para Venezuela (Mndez-Castellano et al., 1986).
Primera incubacin
Despus de introducir suficiente cantidad de suero en los pocillos de las
microplacas se pipetearon respectivamente 100 l de los sueros diluidos y de los
controles (Control (-) y Control (+)) a los pocillos correspondientes y se incubaron durante
15 minutos a temperatura entre 20 25 C. Se determin por duplicado el control
negativo
Lavados
Las cavidades se vaciaron a un recipiente de desechos con hipoclorito para la
desinfeccin. Posteriormente se sacudi la placa sobre un papel absorbente para eliminar
los restos de humedad. Seguidamente se lav 5 veces con 300 l de buffer de lavado en
23
Anlisis de datos
24
Con la informacin obtenida se construy una base de datos con el programa SPSS
10.0 para Windows. Los datos se presentaron en tablas y se analizaron segn sus
frecuencias relativas. Para el anlisis de los factores asociados a seropositividad y para
establecer la relacin con los estratos sociosanitarios se emple la prueba Ji al cuadrado
(2) con un margen de seguridad del 95%.
RESULTADOS
25
En todos los grados hubo nios reactores, aunque los de 4to grado fueron ms
afectados en trminos absolutos pero sin diferencias estadsticamente significativa (2
=7,73 g.l.: 5 p>0,05) (Tabla 4). Con relacin a algunos factores relacionados a la
infeccin por Toxocara, se encontraron diferencias estadsticamente significativas
respecto a las variables jugar con perros y vivir en casas con patios de tierra. Es decir
aquellos nios que juegan con perros y que tienen patios de tierra resultaron ms
seropositivos. Con relacin a otros factores, si bien no tuvieron significancia estadstica,
se observo que en trminos absolutos, la mayora de los seropositivos tenan perros en
casa, visitaban parques y jugaban con tierra. Cabe destacar que si bien la geofagia se
identifico en 14 casos y que 11 de ellos resultaron seropositivos (78,57%), no hubo
diferencia con relacin a los que no practicaban la geofagia (64,55%) (Tabla 5).
De los que dijeron tener perros en casa, 42 (51,80%) trataban con antiparasitarios
a sus mascotas. Sin embargo, el 28,40% de ellos result con serologa positiva contra T.
canis (Tabla 6). Con relacin al estrato socioeconmico (Graffar modificado), los
evaluados pertenecan solo a los estratos III y IV y todos los reactores preceden de estos
mismos estratos, sin diferencias estadsticamente significativas (Tabla 7).
TABLA 1
26
Grupo Gnero
de Femenino Masculino Total
edades No. % No. % No. %
6-7 9 9,68 13 13,98 22 23,66
8-9 18 19,36 14 15,05 32 34,41
10-11 18 19,36 16 17,20 34 36,56
12-13 02 2,14 03 3,23 05 5,37
Total 47 50,54 46 49,46 93 100,0
27
TABLA 2
Prevalencia de anticuerpos anti-Toxocara, segn grupos de edad en escolares.
U.E.E.B. Blanca Sosa de Vargas. Ciudad Bolvar, estado Bolvar. Mayo-Junio 2013
Anticuerpos Anti-Toxocara
Grupo de edades Reactores No Reactores Total
(Aos) No. % No. % No. %
6-7 14 63,6 8 36,4 22 23,7
8-9 24 75,0 8 25,0 32 34,4
10-11 20 58,8 14 41,2 34 36,5
12-13 4 80,0 1 20,0 5 5,4
Total 62 66,7 31 33,3 93 100,0
2 =2,43 g.l.: 1 p>0,05
28
TABLA 3
Prevalencia de anticuerpos anti-Toxocara, segn gnero en escolares. U.E.E.B.
Blanca Sosa de Vargas. Ciudad Bolvar, estado Bolvar. Mayo-Junio 2013
Anticuerpos Anti-Toxocara
Gnero Reactores No Reactores Total
No. % No. % No. %
Femenino 27 57,4 20 42,6 47 50,5
Masculino 35 76,1 11 23,9 46 49,5
Total 62 66,7 31 33,3 93 100
p >0,05
29
TABLA 4
Prevalencia de anticuerpos anti-Toxocara, segn grado del escolar. U.E.E.B.
Blanca Sosa de Vargas. Ciudad Bolvar, estado Bolvar. Mayo-Junio 2013
Anticuerpos Anti-Toxocara
Grado Reactores No Reactores Total
No. % No. % No. %
1 9 75,0 3 25,0 12 12,9
2 9 56,2 7 43,8 16 17,2
3 10 83,3 2 16,7 12 12,9
4 16 76,2 5 23,8 21 22,6
5 11 68,8 5 31,2 16 17,2
6 7 43,8 9 56,2 16 17,2
Total 62 66,7 31 33,3 93 100,0
2
=7,33 g.l.: 5 p>0,05
30
TABLA 5
Escolares reactores y no reactores para Toxocara, segn factores asociados.
U.E.E.B. Blanca Sosa de Vargas. Ciudad Bolvar, estado Bolvar. Mayo-Junio 2013
Factores Escolares
asociados Reactores No reactores TOTAL Significancia
No. % No. % No. % estadstica
Perros en casa NS
SI 52 70,3 22 29,7 74 79,6
NO 10 52,6 9 47,4 19 20,4
Jugar con perros S
SI 48 76,2 15 23,8 63 67,7
NO 14 46,7 16 53,3 30 32,3
Visitar parques NS
SI 30 71,4 12 28,6 42 45,2
NO 32 62,7 19 37,3 51 54,8
Patios de tierra S
SI 47 74,6 16 25,4 63 67,7
NO 15 50,0 15 50,0 30 32,3
Jugar con tierra NS
SI 34 73,9 12 26,1 46 49,5
NO 28 59,6 19 40,4 47 50,5
Geofagia NS
SI 11 78,6 3 21,4 14 15,1
NO 51 64,6 28 35,4 79 84,9
NS: No Significativo S: Significativo
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TABLA 6
Relacin entre el tratamiento antiparasitario a los perros y la prevalencia de
anticuerpos anti-Toxocara. U.E.E.B. Blanca Sosa de Vargas. Ciudad Bolvar,
estado Bolvar. Mayo-Junio 2013
TABLA 7
Relacin del estrato socioeconmico de los escolares y la seropositividad para
Toxocara. U.E.E.B. Blanca Sosa de Vargas. Ciudad Bolvar, estado Bolvar. Mayo-
Junio 2013
Anticuerpos Anti-Toxocara
Estrato Reactores No Reactores Total
No. % No. % No. %
Estrato III 35 64,8 19 35,2 54 58,1
Estrato IV 27 69,2 12 30,8 39 41,9
Total 62 66,7 31 33,3 93 100
2
=0,65 g.l.: 1 p> 0,05
33
DISCUSION
Los animales que con mayor frecuencia se encuentran en hogares urbanos son los
perros y los gatos, los cuales son mantenidos generalmente como mascotas. El contacto
con los animales produce un vnculo afectivo y ayuda a los nios en su desarrollo
emocional (Robertson et al., 2000). Sin embargo, esta convivencia puede poner a los
nios en riesgo de contraer alguna infeccin zoontica debido al estrecho contacto que
tienen con las mascotas en sus hogares, parques o escuela (Mocetti et al., 2011).
Algunos autores como Acero et al., (2000) sostienen que a medida de aumenta la
edad se observa mayor porcentaje de seropositivos contra T. canis, debido al mayor
tiempo de exposicin que ha tenido la persona. Esto se observa en esta investigacin,
donde se demuestra que el 80% de los reactores se encuentra en el grupo de 12 a 13
aos de edad, coincidiendo con los resultados de otros estudios (Garca-Pedrique et al.,
2004; Houda y Salvador, 2007; Espinoza et al., 2008; Rivarola et al., 2009; Acevedo y
Angel, 2010; De Abreu et al., 2011; Lizardi y Madrid, 2014). En Ciudad Bolvar, Cardenas
y Carvallo (2014) identificaron un mayor nmero de escolares seropositivos entre los 6 y 7
aos de edad. Algunos autores sostienen que la posibilidad de adquirir la infeccin es
mayor a temprana edad (Alonso et al., 2000; Campos Junior et al., 2004) y de hecho la
prevalencia puede ser elevada incluso a los 4 aos (Garca-Pedrique et al., 2004).
34
Como sucedi en otros estudios (Alonso et al., 2004; Garca-Pedrique et al., 2004;
Houda y Salvador, 2007; Fernndez et al., 2009) la seropositividad tampoco tuvo relacin
con el gnero de los nios. En estudios previos se ha encontrado un discreto predominio
de uno u otro gnero pero en general sin significancia estadstica coincidiendo con el
presente resultado (Maestrini, 1995; Acero et al., 2001; De Abreu et al., 2011) tambin
observaron una mayor frecuencia de seroprevalencia en el gnero masculino, aunque sin
diferencias estadsticamente significativas. Esas discretas diferencias suelen atribuirse al
hecho de que los varones juegan ms fuera de casa (calle) a diferencia de las nias
(Conde et al., 1989).
por ello que se debe fomentar el hbito de lavarse las manos en los nios; pues ellos se
convierten en una poblacin vulnerable de contraer esta zoonosis, por la misma razn de
tener contacto con materia fecal en los parques, en los jardines y en las calles al jugar con
arena o tierra lo que, favorece la transmisin de la infeccin (Ramrez-Barrios et al., 2004;
Devera et al., 2008). Se estima que un gramo de excremento de un animal infectado
puede albergar unos 10 mil huevos de T. canis, mientras que una hembra canina puede
expulsar al ambiente hasta 200 mil huevos diarios. Los huevos larvados pueden sobrevivir
hasta diez aos en el medio ambiente, gracias a su alta resistencia. El examen del suelo
de parques y campos de juego de distintas ciudades de Canad, Estados Unidos,
Argentina, Per, Brasil, Venezuela y varios pases de Europa han demostrado la
presencia de huevos de T. canis (Garca-Pedrique et al., 2004; Cazorla Perfetti et al.,
2007; Ramrez-Barrios et al., 2004; Devera et al., 2008).
Otro factor que ha sido identificado en otros estudios como asociado a una mayor
seropositividad en la geofagia (Alonso et al., 2004; Espinoza et al., 2008; Gallardo et al.,
2012), la cual a pesar de encontrarse presente entre los estudiados no se consider un
factor asociado a una mayor seropositividad entre los nios evaluados.
Los resultados obtenidos muestran una elevada seropositividad. Esto sugiere que
la poblacin est siendo expuesta a elevadas cargas de contaminacin fecal canina con
huevos del parasito, lo cual es factible si se considera la gran cantidad de perros con y sin
dueo existentes en la ciudad y en los sectores donde viven los escolares evaluados. Lo
anterior obliga a tomar medidas preventivas tendientes a cortar la cadena de transmisin
de la infeccin; pues esta situacin se est observando en los escolares evaluados como
parte de este proyecto de investigacin.
36
CONCLUSIONES
RECOMENDACIONES
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
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45
APNDICES
47
APNDICE A
Consentimiento Informado
UNIVERSIDAD DE ORIENTE
NCLEO BOLVAR
ESCUELA DE CIENCIAS DE LA SALUD
Dr. Francisco Virgilio Battistini Casalta
DEPARTAMENTO DE PARASITOLOGA Y MICROBIOLOGA
CONSENTIMIENTO INFORMADO
APNDICE B
Ficha de recoleccin de datos
UNIVERSIDAD DE ORIENTE
NCLEO BOLVAR
ESCUELA DE CIENCIAS DE LA SALUD
Dr. Francisco Virgilio Battistini Casalta
DEPARTAMENTO DE PARASITOLOGA Y MICROBIOLOGA
FICHA DE CONTROL
DATOS DE IDENTIFICACIN:
APELLIDOS Y NOMBRE:_____________ ___________________________________
EDAD: _____ GNERO: F ___ M ___
GRADO. ____ SECCIN: _____
DATOS CLNICOS ACTUALES: Cuales ______
Es asmtico?
Frecuencia de las crisis?
DATOS EPIDEMIOLGICOS:
Perros pequeos en casa: Si __ NO ___ Cuantos?
Juega (contacto) con ellos Si __ NO ___ Estn en control con veterinario? Si __ NO ___
Ultima vez que los desparasito________ Les han realizado exmenes para parsitos?
Si __ NO ___
Come tierra? Si __ NO ___ Juega con tierra Si __ NO ___
Donde? Casa __ Plaza o parque ___ Otro___
(Cual?)
Tiene problemas Visuales? Si __ NO ___ Usa Lentes?
Razn:
Tiene patios de tierra? SI___ NO__
OBSERVACIONES:
50
SEROLOGIA:
IgG anti-Toxocara canis: Reactivo___________
No Reactivo________