Distribucin de la Sulfacetamida Sdica en rata

Bautista Robles Ilse Pamela, Martnez Ramos Lizbeth Mariana, Romero Iturbe
Sergio, Zamora Snchez Berenice. Laboratorio de Farmacologa L-202, Facultad
de Estudios Superiores Zaragoza, UNAM. Av. Guelatao 66, Col. Ejrcito
de Oriente, 09230, Mxico D.F

RESUMEN
La distribucin estudia el transporte del
frmaco dentro del compartimiento
sanguneo y su posterior penetracin en
los tejidos. El paso de los frmacos a los
distintos tejidos es muy variable. Los
frmacos pasan desde la sangre al
lquido intersticial a travs de los
capilares de difusin pasiva, si son
sustancias liposolubles, o por filtracin si
son sustancias hidrosolubles.
concentracin que se alcanza en el
lquido intersticial depende de la unin
del frmaco a las protenas del plasma,
pues habitualmente difunde slo la
fraccin plasmtica libre. Un frmaco se
adapta al modelo monocompartimental
cuando se distribuye rpida
uniformemente por todo el organismo, y
ste se comporta como un nico
compartimiento central. Se observa
entonces un paralelismo entre las
concentraciones plasmticas y los
efectos farmacolgicos. En esta prctica
se aplic este modelo, para poder
determinar el perfil de distribucin en el
corazn, cerebro, pulmn, rin, bazo,
duodeno, hgado, msculo esqueltico,
calculando la concentracin de la
sulfacetamida sdica administrada por la
va intraperitoneal, en cada uno de estos
rganos, por medio de la determinacin
colorimtrica de BrattonMarshall.
ABSTRACT
The distribution studies the transport of
the drug into the blood compartment and
its subsequent penetration into the
tissues. The passage of the drugs to the
different tissues is very variable. Drugs
pass from the blood to the interstitial fluid
through passive diffusing capillaries, if
they are liposoluble substances, or by
La filtration if they are water soluble
substances. The concentration that is
reached in the interstitial fluid depends
on the binding of the drug to plasma
proteins, since it usually diffuses only the
free plasma fraction. A drug adapts to the
monocompartmental model when it is
y distributed rapidly and evenly throughout
the organism, and it behaves as a single
central compartment. There is a parallel
between plasma concentrations and
pharmacological effects. In this practice,
this model was applied to determine the
distribution profile in the heart, brain,
lung, kidney, spleen, duodenum, liver and
skeletal muscle, calculating the
concentration of sodium sulfacetamide
administered intraperitoneally in each
one of these organs by means of the
Bratton-Marshall colorimetric
determination.
INTRODUCCIN
Para que un frmaco produzca sus efectos teraputicos, debe alcanzar un intervalo
preciso de concentraciones en la biofase, es decir, en el medio en que interacta con sus
receptores. Debajo de este intervalo, no se observar ningn efecto farmacolgico o ste
ser su teraputico, mientras que, por encima, el efecto puede ser excesivo o pueden
aparecer otros efectos no deseados.
La concentracin de un frmaco que se alcanza en su lugar de accin es la consecuencia
de los procesos de absorcin, distribucin y eliminacin.
La distribucin es el proceso mediante el cual un frmaco difunde o es transportado desde
el espacio intravascular hasta los tejidos y clulas corporales.

MARCO TERICO
La farmacocintica estudia el curso temporal de las concentraciones y cantidades de los
frmacos, y de sus metabolitos, en los lquidos biolgicos, tejidos y excreciones, as como
su relacin con la respuesta farmacolgica y construye modelos adecuados para
interpretar estos datos.
La distribucin de un frmaco se lleva a cabo para que ste llegue primero del lugar de
absorcin a la circulacin sistmica y desde ella hasta los tejidos. Para que el frmaco
alcance desde su lugar de absorcin su lugar de accin, debe atravesar diversas
membranas para llegar a la sangre y para pasar de sta al lquido intersticial y, en su
caso, al interior de las clulas e, incluso, de estructuras intracelulares. La distribucin del
frmaco dentro del cuerpo puede variar de acuerdo con el flujo sanguneo o la
vascularizacin regional de cada tejido u rgano, y la cantidad que cada tejido reciba
depende de la concentracin del frmaco en la sangre. A su vez, la magnitud del efecto
vara por la velocidad con la que el frmaco penetra al tejido hasta alcanzar niveles
suficientes.
Para que una sustancia atraviese las membranas celulares es condicin esencial que se
encuentre en forma libre, es decir, que no est unida a otras molculas. En la sangre, la
albmina representa una protena con mltiples sitios de unin para frmacos. Mientras
stos se mantengan unidos a la albmina no podrn abandonar el torrente sanguneo y,
por lo tanto, no llegarn a sus sitios de accin. Por otra parte, los frmacos, a su vez,
competirn con otras molculas endgenas contenidas en la sangre por los sitios de
transporte.
El paso de frmacos a travs de las barreras biolgicas est condicionado por las
caractersticas fisicoqumicas de la sustancia. En particular, del tamao o peso molecular;
grado de ionizacin (carga elctrica) y liposolubilidad (capacidad de disolverse en las
grasas). As, una sustancia pequea, poco ionizada y muy liposoluble atraviesa
rpidamente las membranas celulares.
La transferencia de frmacos a travs de barreras biolgicas puede realizarse por
filtracin, difusin, transporte activo, pinocitosis o fagocitosis. La diferencia de estos
procesos depende del tamao de la molcula que se transporte, su solubilidad y la
necesidad de acarreadores membranales.
Es necesario considerar la biodisponibilidad, entendida como la facilidad con la que un
frmaco se incorpora a sus sitios de accin. Aqu se incluye la presentacin farmacutica
en la que se ofrece el medicamento.
En relacin con la distribucin del frmaco, una vez que alcanza el espacio
intravascular, es necesario tomar en cuenta su volumen aparente de distribucin (Vd), o
sea, el volumen fluido en el que el frmaco se distribuye, puesto que es un ndice de la
compartimentalizacin de la sustancia. Un frmaco con V d elevado es una sustancia que
se almacena o secuestra en algn compartimiento del organismo, por lo que tendr un
potencial de toxicidad por acumulacin. El Vd es diferente entre nios y adultos, y entre
sujetos sanos y enfermos.
La distribucin de un frmaco determinar en parte la latencia, intensidad y duracin de la
actividad biolgica del frmaco.

OBJETIVO
Calcular experimentalmente la concentracin de sulfacetamida sdica en
diferentes rganos y lquidos corporales de la rata, despus de haberla
administrado por va intraperitoneal para determinar el perfil de distribucin

HIPTESIS
Si la distribucin del frmaco depende de la irrigacin sangunea se espera que
haya mayor concentracin en los rganos ms irrigados.
METODOLOGA
a) Material biolgico:
6 Ratas hembra Wistar

b) Cristalera y equipo:
Espectrofotmetro
Centrifuga
Balanza
Bscula
1 jeringa de 3 mL
1 jeringa de 1 mL
10 tubos de ensaye de 13x100mm
10 tubos de ensaye de 15x150mm
10 pipetas volumtricas de 1 mL
3 pipetas volumtricas de 1 mL
2 vasos de precipitados de 20 mL
Algodn
Papel parafilm
 c) Reactivos
Sulfacetamida sdica (disolucin al 10%)
Hidrxido de sodio al 0.1 N
cido tricloroactico al 25%
Nitrito de sodio al 0.5%
Sulfamato de amonio al 0.5%
N-naftiletilendiamina al 0.05%
ter etlico

d) Desarrollo experimental
Preparacin del material biolgico y administracin
del frmaco
Pesar a la rata para poder determinar cul ser la dosis
que se le administrar tomando en cuenta que sta ser
de 0.1 g/ Kg de peso. Administrar mediante la va de
administracin intraperitoneal. Colocar a la rata en una
jaula metablica para colectar una muestra de orina. S la
rata no orin antes del siguiente paso, se debe estimular al
animal a que lo haga.
Toma de muestras
Anestesiar a la rata con ter y extraer una muestra de sangre por puncin cardiaca.
Posteriormente sacrificar a cada rata a los tiempos de: 5, 15 30, 60, 90 y 120 minutos
respectivamente. Una vez sacrificada la rata abrir la cavidad abdominal para obtener
muestras de 0.5 g de los siguientes rganos:
- Hgado - Corazn
- Rin - Pulmn
- Bazo - Musculo esqueltico
- Duodeno - Cerebro

Preparacin de las muestras

Las muestras se pesan en portaobjetos y posteriormente son trituradas en un mortero.

Inmediatamente se colocan en tubos de ensayo con un volumen de 5 mL de hidrxido de
sodio, se dejan reposar para despus centrifugar.

Determinacin colorimtrica de BrattonMarshall

Tomar 2 mL de sobrenadante y seguir la tcnica de

Bratton-Marshall descrita para llevar a cabo la reaccin
colorimtrica. Leer las absorbancias en el
espectrofotmetro a 540 nm.

Tratamiento de datos
Interpolar el valor de la lectura en la curva patrn y calcular la concentracin de la
sulfacetamida sdica considerado las diluciones realizadas.

RESULTADOS

t vs C/mL
60
50
40
30
20
10
0
0 20 40 60 80 100 120 140
- Duodeno

Tabla 1. Resultado duodeno

TIEMPO C /mL ABC ABC
10 5.4147 24.5392 1760.45
69
15 4.401 428.277
30 52.7026 567.784
5
45 23.002 275.846
2
60 13.7775 174.732
75 9.5201 289.278
120 3.3367 Kp=2.43
05

t vs mg/mL
50

40

30

20

10

0
0 20 40 60 80 100 120 140
- Bazo
 Tabla 2. Resultados Bazo
TIEMPO C ABC ABC
(mg/mL)
5 9.976 49.48 1971.155
10 9.816 510.64
30 41.248 484.912
5
45 23.407 550.17
75 13.271 375.952
5
120 3.438 Kp=2.72
14

t vs mg/mL
50
40
30
20
10
0
0 20 40 60 80 100 120 140
- Rin

Tabla 3. Resultados Rin

TIEMPO C(mg/ ABC ABC
mL)
0 2587.397
5
10 10.83 573.49
30 46.519 1237.44
60 35.977 373.155
75 13.777 403.3125
120 4.148 Kp=3.752
2
 t vs (g/mL)
60
50
40
30
20
10
0
0 20 40 60 80 100 120 140
- Cerebro

Tabla 4. Resultados Cerebro

TIEMP C (g/mL) ABC ABC
O
0 2218.003
5
10 2.88 13.125
15 2.37 429
30 54.83 1329.3
60 33.79 283.8
75 4.05 162.77
85
120 3.1846 Kp=
3.0622

- Corazn t vs
(mg/mL)
Tabla 5. Resultados Corazn
TIEMP C (mg/ml) ABC ABC
O
5 0.3387 3.894 150.192
15 0.4401 43.0935
30 5.3057 57.0825
45 2.3053 46.122
75 0.7695 Kp=0.20
73

- Musculo esqueltico

t vs
(mg/mL)
 Tabla 6. Resultados musculo
esqueltico
TIEMP C (mg/ml) ABC ABC
O
5 1.5551 11.6762 361.502
5 5
10 3.1154 99.644
30 6.849 194.796
75 1.8086 55.386
120 0.653 Kp=0.49
90

t vs (g/mL)
25

20

15

10

0
0 10 20 30 40 50 60 70 80
- Sangre

Tabla 7. Resultados Sangre

TIEMPO C (g/mL) ABC ABC
724.312
5 2.8805 15.6697 4

10 3.3874 20.7382
266.596
15 4.9079
5
248.476
45 12.8652
5
172.831
60 20.265
5
75 2.7792 Kp=1
 t vs g/mL
60
50
40
30
20
10
0
0 20 40 60 80 100 120 140
- Hgado

Tabla 8. Resultados Hgado

TIEMP C ABC ABC
O (g/mL)
5 7.5067 1540.76
653
10 3.97569 20.5089
875
15 4.227905 428.499
788
30 52.9054 490.544
678
45 12.50055 155.729
7 265
60 8.263345 126.976
755
75 8.666889 318.507
053
120 5.48898 Kp=2.12
72

t vs g/mL
60
50
40
30
20
10
0
0 20 40 60 80 100 120 140
- Pulmn
 Tabla 9. Resultados Pulmn
TIEMP C (g/mL) ABC ABC
O
5 6.49784 2459.207
45
10 3.47126 17.3563
15 3.47126 447.0375
9
30 56.13375 594.9616 ANALISIS DE RESULTADOS
2 88 Despus de administrar la sulfacetamida
45 23.19447 642.1123 sdica se logra observar que las
3 95 mayores concentraciones se efectan a
75 19.61302 757.7394 los 30 minutos siendo el rin (3.7522)
75 el rgano donde se identific la mayor
120 14.06429 Kp=3.39 concentracin. Como se puede observar
52 los Kp en duodeno(2.4305),
bazo(2.7214), pulmn (Kp=3.3952), cerebro(3.0622) e hgado(2.1272), dan un valor
mayor al de la sangre, lo cual es errneo, pues el Kp en sangre indica la mayor
biodisponibilidad del frmaco que se encuentra en el plasma dando un valor de 1 y los
valores obtenidos en distintos tiempos, debi de ser menor a este, como fue el caso del
corazn ( Kp= 0.2073) y del musculo esqueltico (0.4990).Segn la literatura la
concentracin sangunea debe ser la que presente mayor concentracin del frmaco
debido a la biodisponibilidad, sin embargo, en esta prctica no se obtuvo esto; es
importante considerar que los valores de Kp de cada rgano son el promedio de todos los
equipos.
Una de las causas posible se puede deber a que hubo un error al no realizar las
diluciones como lo indica el mtodo, afectando directamente las absorbancias al momento
de leer en el espectrofotmetro, y eso puede ser vlido, pues al ser realizadas las
determinaciones por varias personas de distintos equipos, aumenta considerablemente la
probabilidad de aumentar el error ocasionado por los analistas
Es importante mencionar que el tiempo de 90 minutos, que fue el realizado por el equipo,
fue descartado completamente, ya que al ser ledas las absorbancias en el
espectrofotmetro, este arrojaba lecturas muy bajas, debido a que se aadieron todos
los reactivos una sesin previa a la lectura, provocando que estos mismos se
deteriorarn.

CONCLUSIONES
Una vez concluida la prctica se puede identificar que los rganos con la mayor
distribucin de la Sulfacetamida sdica son los riones (Kp= 3.7522) y los pulmones
(Kp=3.3953) principalmente, seguidos del cerebro (Kp= 3.0622), bazo (Kp= 2.7214),
hgado (Kp=2.1272) y duodeno (Kp=2.4305), rganos que estn ampliamente irrigados.
Aunque los valores que se obtuvieron no pueden considerarse como vlidos, debido a
que las Kp de los rganos blanco antes mencionados resultaron ser mayores a 1, lo que
no puede ser correcto, pues segn la literatura, se esperaba que la determinacin
obtenida de la sangre fuera la que tuviera el mayor Kp y los dems rganos obtuvieran
valores inferiores a esta, por lo que los resultados obtenidos no son confiables y se
recomienda realizar una nueva determinacin.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
- Velasco M., Fernndez L., Molina J., Trelles F. Velsquez. Farmacologa. 16
edicin. Madrid: Interamericana Mc Graw-Hill, 1993. pp 38-52.
- Kalant M, Roschlao. Walter H. Principios de farmacologa mdica. 6ta ed. Oxford
University Press. Mxico 1998.
- Mark H, Beers M. El manual de Nerck de diagnstico y tratamiento. 10 ed.
Harcout. Espaa. 1999.