PATOGENOS OPORTUNISTAS POR TRANSMISION FECAL-ORAL EN CUYES REPRODUCTORES INTRODUCIDOS AL DISTRITO DE SAN MARCOS PATHOGENIC OPPORTUNISTS FOR FECAL-ORAL TRANSMISSION IN BREEDING GUINEA PIGS INTRODUCED TO THE DISTRICT OF SAN MARCOS. Siever Morales C.'? RESUMEN EI objetivo del presente trabajo fue determinar la frecuencia de patégenos potenciales de transmisién fecal-oral en los animales incorporados al distrito de San Marcos, regién Ancash; asi como identificar el patron de sensibilidad a antibacterianos, que permita tener altemativas terapéuticas _especificas y eficientes, a través de estudios bacteriologicos de hisopados rectales de los reproductores incorporados y pruebas de Kirby Bauer, respectivamente. Para ello se utilizaron 38 animales en etapa reproductiva y se hizo un muestreo por hisopadosrectales, que fue transportadoen medio Stuard (Merck) a una temperatura de 4 °C, hasta su procesamiento convencional. Se obtuvieron frecuencias de aislamiento variable, desde un 21,7% (13/60) para Citrobacter sp. hasta valores menores como 1,7% (1/60), en el caso de Arizona y Pseudomona sp. Lo mas resaltante, por la implicancia epidemiologica, es el 16,7% (10/60) de aislados de Salmonella typhimurium, que muestran buenas _altemativas terapéuticas por la sensibilidad a diversos antibacterianos. Palabras clave: cuyes, aislamiento, prueba de sensibiidad, Salmonella typhimurium ‘Lasorarono oF ves SLasonaronio of MicRosioo Mayon a Saw Mascos, La ABSTRACT The aim of the present work it was to determine the frequency of pathogenic potentials of fecal - oral transmission in the animals incorporated into the district of San Marcos, region Ancash. As well as of sensibility identifies to antibacterial that allows to have alternatives specific and efficient therapeutics; across bacteriological studies of rectal hissop of the breeding animals and you try Kirby Bauer's respectively. For which 38 animals were in use in reproductive stage, sampling for rectal hissop, being transported in Medio Stuard (Merck) to a temperature of 4°C, up to his conventional processing. Proving with frequencies of variable isolation, from (13/60) 21.7 % for Citrobacter sp. up to minor values as (1/60) 1.7 % in case of Arizona and Pseudomona sp. Where the most important for the epidemiological implication, it is 16.7 % (10/60) of isolated of Salmonella Typhimurium, which show good therapeutic altematives for the sensibility to diverse antibacterial Key words: Guinea pigs, isolation, test of sensibility, Salmonella Typhimurium. ni, Faucao be Moen VETERNARA y ZoorEent, Unwenond GENTEEA 98. Sut, LAM-PER Parasro.ocik VETERNARA, FACUXTIO OF MEDIONA VETERNAR, UNNERSIDAD NACIONA Cientitica 8 (1), 2012ARTICULOS ORIGINALES| Siever Morales C. INTRODUCCION El cuy (Cavia porcellus) es un mamifero roedor originario de la regién andina de ‘América, que constituye ancestralmente la base proteica animal de la dieta de los pobladores andinos, se caracterizan por su gran rusticidad, capacidad de adaptacién a diferentes ecosistemas, corto ciclo biolégico y buena fertilidad. Estas ventajas han favorecido su explotacién y generalizado su consumo, especialmente en Pert, Colombia, Ecuador y Bolivia (Salinas, 2002). El Pert es el pais de mayor poblacién y consumo de cuyes. Segin datos del Ministerio de Agricultura (INIA, 2003), para el 2003 se estimé una poblacién de 23 240 846 animales, que equivalen a 17 600-18 700 tm de came (Chauca, 1997). Su crianza es una altemativa viable para incrementar el consumo de proteina animal, generar empleo, disminuir la migracién de la poblacién de la zona andina a las grandes ciudades y reducir la extrema pobreza en el pais; sin embargo, este sistema de crianza de cuyes atin enfrenta problemas de inadecuado manejo productivo y deficiente control sanitario (Morales et al., 2007). EI cuy, como cualquier especie, es susceptible de suftir enfermedades bacterianas, virales, parasitarias y/o metabélicas que afectan negativamente la produccién de la granja y ocasionan serias pérdidas econémicas, EI inadecuado manejo de la temperatura, humedad, corrientes de aire, sobredensidad, limpieza en camas o dietas mal balanceadas pueden predisponer al animal a padecer de eventos de estrés que generen una inmunodepresién que incremente la vulnerabilidad a diferentes enfermedades. Estudios realizados en nuestro pais han encontrado que la enfermedad mas importante que afecta al cuy es la salmonelosis, que se presenta como un problema patolégico sistémico y provoca brotes de mortalidad severa y abortos con indices mayores al 65% de presentacion (Morales et al., 2007). La Salmonella enterica se reporta como el microorganism patégeno aislado mas frecuentemente. En un estudio realizado en Ancash, se encontré un 61.5% de prevalencia (Matsuura et al, 2010), similar al porcentaje del 65.5% reportado por Ramirez en el afio 1972. Existen otros agentes —_bacterianos ‘comprometidos en diversos.sindromes’ respiratorios, digestivos, reproductivos, nerviosos, etc. Entre dichos procesos, los més comunes en cuyes son neumonias, bronconeumonias, enteritis, pseudotuberculosis y infadenitis, causados por muchos microorganismos habitantes normalesdelas respectivasmucosas, como Bordetella bronchiseptica, Diplococcus pneumoniae, Yersinia pseudotuberculosis, Streptococcus pyogenes, Pasteurella spp; Escherichia coli, Clostridium sp., Shigella sp., Streptococcus zooepidermicus, etc (Morales et al, 2007). ‘Segiin un tltimo estudio en el distrito de San Marcos (Siever Morales, datos no publicados), se encontré un cero (0%) de presencia de salmonelosis en muestras procedentes de centros de crianza familiar comercial, y en condiciones de no reporte de la enfermedad se hace prioritaria la evaluacién de todo animal a ser ingresado por representar un riesgo mayissculo en la introduccién de alguna enfermedad a la region. Las consecuencias del ingreso de enfermedades emergentes son devastadoras en las areas virgenes por su explosiva capacidad de diseminacion e impacto patogénico. 34 Clentitica 9(1), 2012Patégenos oportunistas por transmisién fecal-oral en cuyes reproductores introducidos al distrito de San Marcos MATERIALES Y METODOS LUGAR DE ESTUDIO EI estudio se realizé en animales mejorados, como parte de un programa de mejoramiento genético de centros de crianza familiar-comercial de la provincia de San Marcos, en el periodo de julio 2010. Para el analisis bacteriolégico se remitieron las muestras al Laboratorio de Microbiologia e Inmunologia Veterinaria de la Universidad Cientifica del Sur, en Lima. Se colecté las muestras a través de hisopados rectales de especimenes aparentemente sanos, sin expresién de sintomatologia alguna, con un desarrollo organico importante aptos para empadre y con un peso superior a 900 g Para la toma de muestras se utiliz6 el medio de transporte bacteriano Stuard (Merck) a 4 °C, hisopos estériles y fichas de toma de muestra, en las que se registraron los datos de los animales. La siembra de los hisopados se realizé en medios de cultivo general y selectivo, agar sangre y Mc Conkey, respectivamente, que permiten identificar bacterias patégenas potenciales; y los medios de enriquecimiento _selectivo como el caldo tetrationato (CT) y agar salmonella shigella (SS), respectivamente, replicandose colonias sospechosas en medios especificos como el agar xilosa- lisina-desoxicolato (XLD) para su cultivo por 24 horas a 37 °C. Las colonias con caracteristicas compatibles a las bacterias en estudio se identificé a traves de pruebas bioquimicas convencionales como fermentacién de glucosa y lactosa; produccién de acido de la glucosa (rojo de metilo); produccién de ureasa, catalasa, oxidasa, Vorges Proskauer, feni-alanina, — movilidad, —_utiizacion de malonato y citrato de Simmons; descarboxilacion de arginina, lisina y omitina; oxidacién del acido glucénico y produccién de sulfhidrico. Los resultados positivos a salmonella, fueron llevados a tipificacién serolégica de las muestras utilizando el esquema de Kauffmann- White, y fnalmente se realizé la prueba de sensibilidad antimicrobiana por el método de Kirby Bauer para cada cepa positiva. Las cepas aisladas e identificadas se suspendieron en una solucién salina fisiolégica ajustandolas a una turbidez de 05 de escala de Mc Farland, a través de la cual se establecié la susceptibilidad a los antibacterianos en base a un protocolo de difusién del disco en agar: técnica de Kirby Bauer. Los criterios de seleccién de los antibacterianos a ser probados fueron su eficacia, disponibilidad para la especie, toxicidad, costo, etc. Se probaron colistina (10 ug), cloranfenicol (30 1g), doxicictina (30 41g), enrofloxacina (6 4g), neomicina (30 1g), amoxicilina (25 lig), oxitetraciclina (30 yg), gentamicina (10 ig), sulfatrimetoprim (25 ig), estreptomicina (10 yg), fosfomicina (200 ig) y furazolidona (100 ug). RESULTADOS Y DISCUSION Se evaluaron muestras de hisopados rectales de la totalidad de animales reproductores machos (n = 38) a ser introducidos con objetivos de mejora genética en el distrito de San Marcos, y se obtuvo una distribucién principalmente de bacterias miembros de la familia Enterobacteriaceae (Tabla 1). Se aislaron 60 cepas bacterianas, las cuales fueron debidamente identificadas a través del estudio de caracteristicas morfolégicas, metabolicas y serolgicas (Bergey and Holt, 2001), con una distribucién variable: Citrobacter sp. _(21,7%), Salmonella typhimurium (16.7%), Escherichia coli (13,3%), bacilos no fermentadores (13,3%), levaduras (11,7%), Proteus sp. (10,0%), Enterobacter sp. (6,7%), Shigella sp. (3:3%), Arizona sp. (1.7%) y Pseudomona 9. (1,7%). Cientitica 8 (1), 2012 35ARTICULOS ORIGINALES| Siever Morales C. 250 & % de aislados bacterianos (n=60) me ee LEE} Fours 1. DISTRRUCION PORCENTUAL OE AISLADOS BACTERIANOS A PARTIR DE HSOPADOS RECTALES DE CUYES REPRODUCTORES (N = 38) 1909 900. 800 70 600 500. a0 300 | oo 100 Vitis if? Senses Fioura 2, DIsTRBUCION PORCENTUAL 3E LA SENSIBLIOAD DE AISLAGOS BACTERIANOS A ANTIEACTERINOS [EN REPRODUCTORES NACHOS EN EL PERIONO JULIO 2010, EN EL DISTRITO DE San MaRcos, ANCaSH, Esta presentacion de aislados de diferentes géneros bacterianos e incluso el aislado de Salmonella spp. se da como parte componente de la flora bacteriana normal; y pueden comportarse también como bacterias patégenas oportunistas, condicién que se presenta favorecida por eventos de estrés que causan problemas de inmunodepresién en el animal y condicionan una mayor vulnerabilidad a enfermedades. Dicha condicion de oportunista se muestra con diferente indice de presentacién en los reportes anteriores y diagnésticos ocasionales encontrados en centros de produccion intensiva, semiintensiva y/o familiar. Por ello, se presenta un perfil de sensibilidad de todos los aistados frente a diferentes antibacterianos usualmente recomendados en el tratamiento de las mismas, que muestra una variedad importante de alternativas : 63,6% (7/11) con fad, y una esperada eficiencia en el control de la infeccién o enfermedad establecida en los animales (Grafico 2). Los resultados de la tipficacién serolégica de las muestras positivas a Salmonella enterica, utlizando el esquema de Kauffmann-White (Popoff, 2001), mostré la identificacion de Salmonella typhimurium (04, 12: 1,2). 36 Clentitica 9(1), 2012Patégenos oportunistas por transmisién fecal-oral en cuyes reproductores introducidos al distrito de San Marcos 1s Sentes Ficura 3. DIsTRIBUCION DE LA SENSIOWIOAD (%4) A ANTACTERNOS OE SMLAONELLA TYPPIMURIUM NSLKDA DE CUYES REPRODUCTORES DURANTE EL PERIODO JULIO 2010, EN EL pisrarro De San Marcos, ANcASt Siendo la salmonelosis la enfermedad més importante, causante de importantes indices de morbilidad y mortalidad, y distribucién a nivel de todo el pais, es_necesario establecer diagnésticos definitivos y tratamientos especificos, por lo cual se muestra en el grafico 3 el perfil de susceptibilidad cuya mayor relevancia es tener en cuenta las alternativas de tratamiento para la region en estudio, como son estreptomicina, amoxicilina y neomicina, cuyos indices superan el 85% (Grafico 3). Otros estudios reportan a la etapa de recria como la mas afectada (52.5%), seguida de los adultos (32.5%), mientras que los lactantes representaron el 15% de los animales positivos a Salmonella enterica (Siever Morales, datos no Publicados). Ademds, en relacién al sexo, las hembras fueron el grupo mas afectado (75%). El presente estudio reporta caracteristicas de presentacién fen machos de edad reproductiva con indices de 16,7% (10/60), porcentaje bajo que sigue el mismo comportamiento de anteriores estudios, por la edad, el desarrollo del sistema inmunolégico, el tipo de alimentacién y el sexo. CONCLUSION La sensibilidad de a Salmonella typhimurium a la estreptomicina, la amoxiciina y la neomicina, asi como al sulfatrimetroprim, la__gentamicina y la oxitetraciclina hacen de estos antibacterianos buenas alternativas de eleccién para el tratamiento de nuevos brotes relacionados con salmonelosis en las granjas bajo estudio. Citrobacter sp. fue el microorganismo mas frecuentemente aislado en cuyes reproductores introducidos en el distrito de San Marcos durante el periodo de julio de 2010. AGRADECIMIENTOS A CARE Perti, por el apoyo y financia- miento del presente estudio. Cientitica 8 (1), 2012 37ARTICULOS ORIGINALES| Siever Morales C. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS Bergey DH, Holt JG. Bergey's Manual of Systematic Bacteriology. 2da. ed. EE.UU.: Springer, 2001 Chauca L. Produccién de cuyes (Cavia porcellus). Estudio FAO Produccién y sanidad animal 138. Roma: FAO, 1997. Instituto Nacional de Investigacién Agraria. Proyectos de la DNI de crianzas 2003. Disponible en: http://www portalagrario.gob pe Politicalinia2_kAnrexoll. pdf (acceso 6 de julio de 2005). Matsuura A, Morales S, Calle S. Susceptibilidad a antibacterianos in vitro de Salmonella enterica aislada de cuyes de crianza familiar-comercial en la provincia de Carhuaz, Ancash. Rev. Inv. Vet. Pert 2010; 21(1): 93-9. Morales S, Mattos J, Calle S. Efecto de la muta (Satureja parvifolia) en la dinamica de la infeccién por Salmonella enterica en cobayos. En: XXX Reunién Cientifica Anual Asociacién Peruana de Produccién Animal. Cusco: APPA, 2007. Popoff MY, Antigenic formulas of the Salmonella serovars 7th revision. WHO collaborating Centre for Referente and Research on Salmonella. Paris: Institut Pasteur, 2001. 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