Determination of disinfection byproducts utilizing solid-based microextraction methods and

gas chromatography with flame-ionization and mass-spectrometry detection

1.- Presente de un modo razonado la optimizacin llevada a cabo, las decisiones tomadas, y el
conjunto de condiciones consideradas como ptimas. Cul es/son la/s variable/s estudiada/s que
ejerce/n una mayor influencia en el mtodo?

En esta prctica se pretende realizar una micro - extraccin en fase slida en espacio de cabeza
(HF-SPME). En SPME y, en particular, en HF-SPME los parmetros que puede influir en la extraccin
son: (a) naturaleza y grosor de la fase activa; (b) tiempo de extraccin, (c) temperatura, (d) volumen
de muestra, (e) pH y fuerza inica, (f) volumen de la muestra, (g) fuerza de la agitacin. Teniendo en
cuenta que la fase activa proporcionada es una fibra CAR/PDMS (Carboxen/Polidimetilsiloxano) y
que el volumen de muestra se fija a 10 mL, los parmetro que se debe optimizar son tiempo de
extraccin, temperatura de extraccin y fuerza inica de la muestra.

Fuerza inica

El primer parmetro que se pretende estudiar es la fuerza inica de la muestra, para ello se preparan
tres disoluciones estndares con diferentes concentraciones de cloruro sdico: al 5%, al 12% y al
20%. Como no se han todava optimizado temperatura y tiempo de extraccin, se fijan un valor
intermedio de temperatura y un tiempo lo suficientemente corto para acelerar esta etapa de
optimizacin pero tambin lo suficientemente largo como para que ocurra una extraccin que permita
un anlisis de los resultados. Para ello se eligi una temperatura de 40C y un tiempo de extraccin
de 10 minutos.

Al realizar la extraccin se analizan los analito por GC con detector FID. Cabe destacar que el mtodo
utilizado es de estndar interno, es decir que todo los valores de la seal presentados en este informe
corresponden a la seal de analito dividida por la seal del estndar interno (fluorobenceno).

En el Grfico 1 se encuentran los resultados de esta primera etapa de optimizacin. Los cuatro
analitos estudiados son TCM (cloroformo), BDCM (bromodiclorometano), DBCM
(dibromoclorometano) y TBM (bromoformo). Observando el Grfico 1 se puede afirmar que:

1) A baja fuerza inica (columna azul) la extraccin en menos efectiva, llegando a ser un 35% menor
que la extraccin a mayor fuerza inica.

2) Dependiendo del analito, puede ser ms eficaz una fuerza inica intermedia o ms alta, aunque
la diferencia entre ambas no es tan marcada.

1
Por estos motivos se elige, como fuerza inica, una concentracin de cloruro sdico igual al 12%.
Por una parte no hay una elevada diferencia siendo, por ejemplo, para los analitos DBCM y TBM
prcticamente igual; por otra parte si se eligiera una fuerza inica mayor, el consumo se cloruro
sdico no se compensara con la mejor en la tcnica.

FUERZA INICA
5% 12% 20%
0,565
0,491

0,368
0,300

0,274

0,259
0,258

0,258
0,200

0,198
0,193
0,121
TCM BDCM DBCM TBM

Grfico 1

Temperatura

Una vez optimizada la fuerza inica se elige comprobar la temperatura que ms favorezca la
extraccin de los analitos de 10 mL de muestra. Como ya se tienen los resultado de la extraccin a
40C con un tiempo de extraccin de 10 minutos y una fuerza inica al 12% en cloruro sdico, se
elige realizar un experimento a una temperatura de extraccin de 30C. Por falta de tiempo no se ha
realizado un ensayo a una temperatura mayor.

En el Grfico 2 se observa claramente que la extraccin a una temperatura de 30C es mucho ms

efectivo que a mayor temperatura para todos los analitos. De hecho, la optimizacin de la
temperatura es una etapa indispensable sobre todo si se trabaja en HF-SPME en donde la
volatilizacin de los analito es un proceso fundamental.

Para realizar una optimizacin ms profunda se hubiese tenido que realizar una serie de ensayos
cruzados, es decir a diferentes temperaturas en mltiples fuerza inicas, pero el largo trabajo
requerido para estos ensayo no ha permitido realizar dichos ensayos.

2
 TEMPERATURA DE EXTRACCIN
40 C 30 C

0,581
0,491

0,467
0,368

0,304
0,259

0,231
0,193
TCM BDCM DBCM TBM

Grfico 2

Tiempo

Se han preparado estndares con un 12% de cloruro sdico y se ha realizado la extraccin a 30C a
diferentes tiempos: 10, 15, 20, 25 y 30 minutos. En el Grfico 3 se observa que todos los analitos
siguen la misma tendencia: extracciones que duren entre 15 y 20 minutos son menos efectivas que
las que se realizan en 10 minutos o en tiempos mayores que 20 minutos. El tiempo elegido como
ptimo es 10 minutos.

TIEMPO DE EXTRACCIN
DBCM TCM TBM BDCM

0,7

0,6

0,5

0,4

0,3

0,2

0,1

0
0 5 10 15 20 25 30 35

Grfico 3

3
En la Tabla 1 se resumen los parmetros elegidos como ptimos para la extraccin de los cuatro
trihalometanos.

Tabla 1

Fuerza inica Temperatura Tiempo Volumen de muestra

12% NaCl 30C 10 min 10 mL

4- A qu tiempos, qu espectros de MS, y con qu probabilidad, fueron identificados los analitos

sealados usando el software adecuado de GC-MS?

Compuesto (probabilidad) Tiempo de retencin Pureza Fragmentos ms importantes

Ion molecular: 173
1-Nitronaftaleno (93,77%) 17,733 minutos 869 Pico base: 127
Otros: 115
Ion molecular: 218
1-Hidroxipireno (72,43%) 28,795 minutos 895 Pico base: 218
Otros: 189; 95