Documenti di Didattica
Documenti di Professioni
Documenti di Cultura
Alaguero Calero M1, Gutirrez Garca TJ 2, Rosado Mara C1, Costa Garca A2
1 Servicio de Farmacia. Hospital Universitario Central de Asturias. Oviedo.
2 Departamento de Qumica Fsica y Analtica. Universidad de Oviedo.
OBJETIVO
INTRODUCCIN
En la cromatografa lquida, la fase mvil es un lquido que fluye a travs de una columna
que contiene a la fase fija. La separacin cromatografa en HPLC es el resultado de las
interacciones especficas entre las molculas de la muestra en ambas fases, mvil y
estacionaria.
PROCEDIMIENTO
El mtodo cromatogrfico desarrollado emplea como fase mvil una mezcla de acetonitrilo
y tampn Na2HPO4 0,1% de pH=6. La duracin del anlisis es de 25 minutos y el flujo
utilizado es de 1,5 mL/min.
El equipo de cromatografa utiliza un detector Visible-UV Simadzu SPD-10AV y la longitud
de onda que detecta durante el anlisis es de 215nm. La columna seleccionada es una
Kromasil C-18 (5m, 25cm x 4,6mm) y se mantiene una temperatura de 30C.
El tratamiento de las muestras de plasma de los pacientes se realiza mediante una
extraccin en fase slida utilizando cartuchos C18.
MATERIALES Y REACTIVOS (Fichas de Seguridad, Ver Anexo)
Equipo cromatogrfico
Detector Visible-UV Simadzu SPD-10AV
Columna a Kromasil C-18
1,5 mL de metanol
Acetonitrilo
Tampn Na2HPO4 0,1%
DIAGRAMA DE FLUJO
RESULTADOS
Las rectas de calibrado se elaboraron siguiendo el mtodo del estndar interno (Figura 3).
Todos los frmacos determinados mostraron una respuesta lineal en un rango de
concentraciones entre 0,05 y 20 g/mL (Tipranavir hasta 50 g/mL).
ACETONITRILO
Cianuro de metilo
Cianometano
Etanonitrilo
C2H3N/CH3CN
Masa molecular: 41.0
Punto de ebullicin: 82C
Punto de fusin: -46C
Densidad relativa (agua = 1): 0.8
Solubilidad en agua, g/100 ml a 20C: 1390 (muy elevada)
Presin de vapor, kPa a 25C: 9.9
Densidad relativa de vapor (aire = 1): 1.4 Densidad relativa de la mezcla vapor/aire a 20C
(aire = 1): 1.04
Punto de inflamacin: 2C c.c.
Temperatura de autoignicin: 524C
Lmites de explosividad, % en volumen en el aire: 3.0-17
Coeficiente de reparto octanol/agua como log Pow: -0.3
CONCLUSIONES
Bibliografa
http://www.quiminet.com/articulos/que-es-la-cromatografia-liquida-de-alta-eficiencia-hplc-
14764.htm
http://www.hca.es/huca/web/contenidos/websdepartam/farmacia/HPLC%20Poster.pdf