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Autopista Ezeiza - Cauelas Km: 1.62 - Ezeiza - Provincia de Buenos Aires - CP: 1802 - Repblica Argentina - Tel:
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RESUMEN
En el presente trabajo se estudi la optimizacin del mtodo de extraccin por Microondas, para lograr una mejor
recuperacin en la determinacin de Pesticidas Organoclorados en suelos, desarrollando la misma en trminos de
evaluacin del porcentaje de recuperacin en funcin del tiempo y la temperatura de extraccin. Para ello, se llevaron a
cabo ensayos por triplicado a tres tiempos y a tres temperaturas de extraccin. Establecidas las condiciones ptimas de
operacin, se compar este mtodo de extraccin con el mtodo Soxhlet. La metodologa estudiada result ser un
mtodo de preparacin rpido, eficiente, econmico y aplicable a muestras provenientes de sitios contaminados.
Palabras Clave: Pesticidas organoclorados, extraccin por microondas, optimizacin del mtodo, disminucin de
costos, sitio contaminado.
1
INTRODUCCION
Estudiar la optimizacin del mtodo de extraccin por microondas, para lograr una mejor recuperacin en la
determinacin de once pesticidas organoclorados en suelos. Comparar este mtodo de preparacin de muestras con el
mtodo Soxhlet. Evaluar su aplicabilidad en muestras provenientes de un sitio contaminado.
El mtodo de extraccin por microondas, es un procedimiento para extraer compuestos orgnicos insolubles o
ligeramente solubles en agua, de matrices slidas (suelos, arcillas, sedimentos, lodos y residuos slidos). El proceso
utiliza energa de microondas proveniente de dos magnetrones independientes con difusor rotatorio logrando una
distribucin homognea de las microondas para producir condiciones de presin y temperatura elevadas en recipientes
cerrados que contienen la muestra y la mezcla de solventes adecuada. Esto facilita la rpida disolucin de los analitos de
inters en la mezcla de solventes mencionada, con una alta eficiencia de recuperacin.
Una vez extrados los analitos en el solvente adecuado, se est en condiciones de proceder a su anlisis, siendo la
Cromatografa Gaseosa, el mtodo instrumental utilizado en esta aplicacin.
METODOLOGA EMPLEADA
Desarrollo
En la extraccin por microondas, se hace necesario establecer las condiciones de temperatura de trabajo y tambin el
tiempo de extraccin, razn por la cual se plante la optimizacin del mtodo por microondas en los siguientes
trminos:
-Evaluacin del porcentaje de recuperacin en funcin del tiempo de extraccin
-Evaluacin del porcentaje de recuperacin en funcin de la temperatura de extraccin
Evaluacin del porcentaje de recuperacin en funcin del tiempo de extraccin. Se procedi a esta evaluacin, a
tres tiempos de extraccin (5, 10 y 20 minutos) y en cada caso con ensayos por triplicado, manteniendo la temperatura
de extraccin fija a 120 C (temperatura tentativa).
Para ello, se prepararon blancos fortificados slidos (BFS), consistentes cada uno en: 5 g. de arena adicionada con los
analitos de inters mezclada con 5 g. de sulfato de sodio anhidro, con 30 ml. de mezcla de solventes de extraccin
calidad grado pesticida (acetona : hexano 1:1), lo que es colocado en los vasos de extraccin. La arena fue muflada a
450 C durante 4 horas y el sulfato de sodio a 650 C durante toda la noche. A cada vaso de extraccin, se le agrega una
barra de agitacin magntica, dado que un adecuado mezclado de la muestra con la mezcla de solventes, ayuda a una
mejor y ms rpida extraccin.
Terminado el proceso de extraccin, se deja enfriar por lo menos tres horas y se procede a la filtracin con sulfato de
sodio para retener algn vestigio acuoso, enjuagando el residuo del vaso de extraccin con dos porciones de 5 ml. de la
misma mezcla de extraccin y filtrando estos enjuagues a travs del sulfato de sodio. Este extracto se recoge en tubo
graduado y en un evaporador Kuderna - Danish y se concentra bajo corriente de nitrgeno a volumen deseado.
La mezcla de solventes consta de hexano, que es un solvente insoluble en agua, y de acetona que es un solvente miscible
en agua. El propsito de usar un solvente miscible en agua es el de facilitar la extraccin de slidos hmedos
permitiendo que la mezcla de solventes penetre la capa de agua de la superficie de las partculas slidas. El solvente
inmiscible en agua extrae compuestos orgnicos con polaridad similar. La polaridad de la acetona puede tambin ayudar
a extraer analitos polares en los sistemas de mezclas de solventes. (Tabla 1 y Figura 1).
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TABLA 1: Evaluacin del porcentaje de recuperacin en funcin del tiempo de extraccin
100
Porcentaje de recuperacin
80
60
40
20
Analitos
5 minutos 10 minutos 20 minutos
Al aumentar el tiempo de extraccin, se produjo un incremento de las recuperaciones. Si bien el orden del incremento en
las recuperaciones es mayor al pasar de 5 a 10 de extraccin que al pasar de 10 a 20, a este ltimo tiempo se alcanzan
las mejores recuperaciones para 10 de los 11 analitos en estudio.
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TABLA 2: Evaluacin del porcentaje de recuperacin en funcin de la temperatura de extraccin
100
90
Porcentaje de recuperacin
80
70
60
50
40
30
20
10
0
A nalitos
80C 120C 140C
Para los analitos hubo un incremento de las recuperaciones al aumentar la temperatura de extraccin de 80 a 120 C,
con incrementos que van desde un 3% (4,4-DDD; 4,4-DDE; Hept. Epx.) a un 7 % (Metoxicloro, Endrin). Por el
contrario, se produjo una disminucin en la recuperacin, al aumentar la temperatura de 120 a 140 C, con prdidas que
van desde un 9 % (Metoxicloro, Endosulfn I) hasta un 17 - 18 % (Aldrin, Lindano).
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almacenar hasta 20 programas con posibilidad de asignar valores diferentes a los parmetros operativos en cada paso
del proceso de extraccin. (Foto 1).
Posteriormente, se procedi a la evaluacin de algunos aspectos, a fin de comparar dos metodologas de preparacin de
muestras: Microondas y Soxhlet. Este ltimo mtodo de preparacin de muestras, tiene el mismo alcance que el mtodo
de microondas, y es ampliamente usado en laboratorios.
Se observaron las siguientes ventajas del mtodo microondas frente al mtodo Soxhlet:
Se determinaron los Lmites de Deteccin Metodolgicos (L.D.M.), para ambos mtodos de preparacin de muestras.
Los L.D.M. fueron calculados sobre siete rplicas (siete blancos fortificados slidos con igual nivel de adicin de los
analitos de inters), siguiendo las recomendaciones de la E.P.A. (Appendix A: Definition and Procedure for the
Determination of the Method Detection Limit, July 1982). (Ecuacin 1 y Tabla 3).
Clculo:
Siendo:
L.D.M.: Lmite de Deteccin Metodolgico.
t(n-1, 1- = .99): el valor Student apropiado para un nivel de confianza del 99% y una desviacin estandar estimada con n-1
grados de libertad.
S: desviacin estandar de los anlisis rplicas.
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TABLA 3: Comparacin de los lmites de deteccin
Para el mtodo Soxhlet, la extraccin se llev a cabo con el agregado de 300 ml. de la misma mezcla de solventes de
extraccin, siendo el tiempo de extraccin de 18 horas.
Los valores de sensibilidad alcanzados por ambos mtodos fueron similares para la mayora de los analitos, pero el
nmero de las interferencias provenientes de los reactivos resultaron mayores para el mtodo Soxhlet.
Menor costo de operacin, debido fundamentalmente al menor volumen de solvente de extraccin a usar (10 veces
menos).
Menor tiempo de proceso de extraccin, siendo del orden de por lo menos un cuarto del tiempo total del necesario
para la extraccin Soxhlet.
Mayor cantidad de muestras a procesar por proceso de extraccin.
Automatizacin, lo que implica una independencia en el control de operacin por parte de los analistas.
Menor exposicin de los analistas a los solventes de extraccin (menor cantidad y tiempo de exposicin).
Mayor seguridad al medio ambiente por el menor consumo de mezcla de solventes.
APLICACIN
6
120
Concentracin g./Kg.
100
80
60
40
20
0
I II
Ubicacin de muestras
7
Response_
589.D\ECD1A
4.5e+07
15.35
4e+07
3.5e+07
3e+07
10.70
7.80
2.5e+07 15.24
8.64
8.14
2e+07 10.11 11.17
11.56
1.5e+07 12.06
13.12
13.54
1e+07
7.40
6.11
5000000 7.217.94 9.13 13.27
13.93
14.82 16.20
16.65 18.03
14.18
14.36
6.00 7.00 8.00 9.00 10.00 11.00 12.00 13.00 14.00 15.00 16.00 17.00
Time
Abundance
TIC: 928.D
10.87
11.09 15.25
14.55
18000
11.16
16000
10.38
Figura 6: Cromatograma de blanco fortificado con once pesticidas organoclorados. CG/MS-SIM. TIC
(Cromatograma de Iones Totales)
8
Abundance
Figura 7: Cromatograma de blanco fortificado con once pesticidas organoclorados. GC/MS-SIM. EIC
(Cromatograma de Iones extrados: 235, 237, 165 - p,p-DDT)
Abundance
2800
2600
2400
2200
2000
165
1800
1600
1400
1200
1000
800
600
152
400
200
227
0
145150155160165170175180185190195200205210215220225230235240
Figura 8: Cromatograma de blanco fortificado con once pesticidas organoclorados. GC/MS-SIM. Espectro de
masas correspondiente al p,p-DDT
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CONCLUSIONES
Esta metodologa de extraccin sobre la que se llev a cabo la optimizacin, demostr ser un proceso de preparacin de
muestras rpido, eficiente, econmico, ofreciendo adems mayor seguridad para los operadores y para el ambiente,
debido al menor consumo de solvente. Asimismo result ser una herramienta til de diagnstico en la evaluacin de
contaminacin de muestras slidas.
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:
Manual de Operador Ethos 1600 - Milestone Srl.
Method 3540 C: Soxhlet Extraction (Rev. 3, Dec. 1996). Test Methods for evaluating solid waste, physical/chemical
methods (E.P.A. SW - 846).
Method 3546: Microwave Extraction (Rev. 0, Nov. 2000). Test Methods for evaluating solid waste, physical/chemical
methods (E.P.A. SW - 846).
Method 8081 B: Organochlorine Pesticides By Gas Chromatography (Rev. 2, Nov. 2000). Test Methods for evaluating solid
waste, physical/chemical methods (E.P.A. SW - 846).
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