PRECIPITACION, SEPARACION Y PUNTO ISOELECTRICO DE PROTEINAS

Seccin 2. Grupo 3FM2

Integrantes del equipo: Arellano Juarez Rodolfo
Hernndez Valdez Paola PROTEINAS
PRECIPITAD POSITIVO PRESENCIA
Profesora: Elizabeth Navarrete
O 2 Ramrez DE
PROTEINAS

Introduccin:
La solubilidad de la mayor parte de
las protenas se debe a la
interaccin hidrofilica de las
molculas polares del agua y los
grupos ionizados de las protenas.
Los agentes que modifiquen esta
interaccin, afectaran, por lo tanto, TABLA 2. PRECIPITACION POR
la solubilidad de las protenas. Los EFECTO DEL PH Y SOLVENTES.
factores principales que afectan la
TUBO NO. 1 2 3
solubilidad de las protenas son: La CLARA DE 3 3 3
fuerza inica, el Ph, la temperatura HUEVO DIL.
1:3 (Ml)
y la constante dielctrica del HCL 0.1N 1
disolvente. La modificacin de estos (ML)
NaOH 0.1N 1
parmetros a soluciones proteicas (ML)
heterogneas, permite purificarlas REGULADOR 1
en virtud de su diferente solubilidad. DE
ACETATOS
0.1M, PH
Objetivos: 4.7 (ML)
OBSERVACI NO SE SE NO SE
Analizar el efecto que produce la ONES SOLUBILI SOLUBILI SOLUBILI
ZA ZA ZA
modificacin de factores
ETANOL 96 3 3 3
fisicoqumicos sobre la solubilidad (ML)
de las protenas. OBSERVACI PRECIPIT NO PRECIPIT
ONES A PRECIPIT A
A
Determinar el punto isoelctrico
de la insulina, basndose en sus
propiedades de solubilidad a TABLA 3. PRECIPITACION POR
diferentes valores de Ph. METALES PESADOS.
Resultados: TUBO NO. 1 2 3 4 5 6
Clara de 1 1 1 1 1 1
TABLA 1. RESULTADOS DE SALTING- huevo
filtrada
OUT diluida 1:3
(ml)
BIURET INTERPRETA Cloruro 0.2
CION Mercrico 5
FILTRADO1 POSITIVO PRESENCIA 5% (ml)
DE Nitrato de 0.2
Plata 2% 5
PROTEINAS (ml)
PRECIPITAD POSITIVO PRESENCIA Acetato 0.2
O1 DE de Plomo 5
PROTEINAS 5% (ml)
FILTRADO 2 NEGATIVO NO HAY Cloruro de 0.2
 Bario 5% 5 Tubo No.2
(ml)
Cloruro de 0.2
Sodio 5% 5
cido actico
(ml)
Agua (ml) 0.2 0.2M0.25ML
5 = [0.12]
Observaci + + + X0.15ML
ones
+ Se observa precipitacin. Acetato de Sodio
No se observa precipitacin. 0.2M0.25ML
=
X0.10ML [0.08]

TABLA 4. DETERMINACION DE
PUNTO ISOELECTRICO DE LA
INSULINA. Tubo No. 3

TUB ACIDO ACETAT INSULIN pH OBSERVACIO cido actico

O ACETI O DE A* NES
NO. CO
0.2M
SODIO
0.2M
40U/ML 0.2M0.25ML
(ML) (ML) = [0.04]
1 0.23 0.02 6U 3.6 X0.05ML
(0.06ML 7
) Acetato de Sodio
2 0.15 0.10 6U 4.5
(0.06ML 6
3 0.05 0.20 6U 5.3
0.2M0.25ML
(0.06ML 4 =
4 0.01 0.24 6U Se observa X0.20ML [0.16]
(0.06ML precipitacin.
5 0.00 0.25 6U
(0.06ML

Clculos:
Para determinar el pH en la tabla 4.
Tubo No.1
cido actico
0.2M0.25ML
=
X0.23ML [0.184]
Acetato de Sodio
0.2M0.25ML
=
X0.02ML [0.016]