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ESTIMACIN DE LA INCERTIDUMBRE DE LA MEDICIN EN ENSAYOS DE AGUAS RESIDUALES A

PARTIR DE LOS GRFICOS DE CONTROL DE LA AMPLITUD

J. Gutirrez Navarrete1, Y. Len Hernndez1, Y. lvarez Llaguno1, X. Rodrguez Petit1, O. Correa Senciales1 y
M. C. Espinosa Llorns1

1
Departamento de Estudios sobre Contaminacin Ambiental, Direccin de Medio Ambiente, Centro Nacional de
Investigaciones Cientficas. Ave. 25 y Calle 158. Cubanacn, Playa, Ciudad de La Habana, Cuba. E-mail:
maria.espinosa@cnic.edu.cu

REA TEMTICA.REQUISITOS TCNICOS

RESUMEN. El objetivo de este trabajo es probar la
utilidad de la estimacin de la incertidumbre de la
medicin, a partir de los resultados de la aplicacin de los
grficos de control de la amplitud (R-chart) empleados en
el control de la calidad interno del laboratorio, para
aquellos mtodos de ensayo en que se haya demostrado que
el sesgo no es significativo, as como comparar estos
resultados con los que se han establecido por la
metodologa bottom-up.
Se demostr que la metodologa de estimacin de la
incertidumbre de la medicin en esos mtodos de ensayo, a
partir de resultados de grficos de amplitud, resulta una
alternativa viable para los laboratorios que aplican esta
herramienta de control de la calidad analtico,
racionalizando los recursos y el tiempo necesario para
cumplir con este requisito.
En el caso particular de las aguas residuales esta
alternativa permite adems, cuando se aplica a muestras
reales, considerar la fuente de incertidumbre asociada a la
heterogeneidad de las muestras.
PALABRAS CLAVE. incertidumbre, grficos de control,
sesgo, heterogeneidad, ensayos de aguas residuales.
1.- Introduccin
El Departamento de Estudios sobre Contaminacin
Ambiental, perteneciente a la Direccin de Medio
Ambiente, del Centro Nacional de Investigaciones
Cientficas de Cuba, tiene establecido un Sistema de
Gestin de la Calidad desde hace ms de 10 aos,
encontrndose actualmente en su adecuacin a la NC
ISO/IEC 17025:2006 Requisitos generales para la
competencia de los laboratorios de ensayo y calibracin
(ONN, 2006).
Esta norma hace especial nfasis en la necesidad de
estimar la incertidumbre de la medicin de los resultados
de los ensayos, lo cual se refuerza con los requerimientos
de la Poltica de Incertidumbre del rgano de Acreditacin
de la Repblica de Cuba (ONARC, 2007). Hoy en da se
reconoce la importancia de que los resultados vayan
acompaados del valor de la incertidumbre de la medicin,
ya que ella proporciona una medida de su calidad,
indicando cunto pueden alejarse de los valores verdaderos.
A lo largo del tiempo, han existido diferentes
aproximaciones para la estimacin de la incertidumbre de
la medicin.
En 1993, la ISO public una metodologa para la
estimacin de la incertidumbre de la medicin (ISO, 1993)
en mtodos fsicos, la cual se basa en identificar y calcular
los aportes de las diferentes fuentes a la incertidumbre total
del mtodo. Este mtodo es conocido como bottom-up.
Posteriormente, la EURACHEM public una adaptacin de
la metodologa a mtodos qumicos (EURACHEM/CITAC,
1995) la cual, en la mayora de los casos, resulta costosa e
inviable (Maroto, 2002).
Estas dificultades trataron de ser superadas por otras
aproximaciones desarrolladas en los aos posteriores, como
la top-down del Analytical Methods Comittee, basada en
el empleo de los datos generados en estudios
interlaboratorios (lo cual puede traer dificultades si todos
los laboratorios participantes no emplean el mismo mtodo
normalizado) y la de la NMKL en 1997 (Nordic Committee
for Food Analysis), que adapt la metodologa top-down
a un laboratorio. Con posterioridad se sucedieron otras
aproximaciones que empleaban los datos de estudios de
validacin de un laboratorio, lo que fue considerado por la
EURACHEM (2000) en la segunda edicin de su gua.
En todos estas aproximaciones queda claro que la
estimacin de la incertidumbre debe considerar tanto los
errores aleatorios como los sistemticos, si estos son
significativos en el resultado al cual se encuentra asociada.
El DECA ha tenido en cuenta la importancia particular de
la estimacin de la incertidumbre en los resultados de los
ensayos que realiza, (caracterizacin de aguas residuales),
dado su empleo con el objetivo de establecer el
cumplimiento de valores establecidos en las normas que
regulan la disposicin al medio ambiente de efluentes,
revirtindose en la calidad de la informacin que se entrega
a los clientes.
Para ello, este Departamento ha venido dando
cumplimiento a este requisito, en un inicio aplicando las
indicaciones iniciales que aparecan en los Mtodos
Normalizados para Anlisis de Aguas y Aguas Residuales,
publicados por APHA, que constitua un modelo de caja
negra y, con posterioridad, empleando los resultados de

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los datos de precisin, como repetibilidad o Lmite de Control (LC), aplicando las siguientes
reproducibilidad, obtenidas de los procesos de validacin o ecuaciones:
verificacin de los ensayos que realiza. Ulteriormente se
aplic el mtodo conocido como bottom-up, R = D2*DE (1)
identificando, estimando y combinando las contribuciones
de las fuentes de incertidumbre asociadas al resultado donde,
analtico, siempre que fuera posible, y teniendo en cuenta R = Amplitud media
los criterios para evaluar la significacine estadstica de las D2 = Factor para convertir la DE en amplitud: 1,693 para
contribuciones (EURACHEM/CITAC, 2000; ONN, 1998). triplicados.
Por otra parte, el DECA tiene establecida la ejecucin de
los grficos de control de la amplitud o rango (tambin LC = D4*R (2)
conocidos como R-chart), entre las herramientas que aplica
para el aseguramiento de la calidad de los resultados de donde,
ensayos y aprovechando que realiza todos sus ensayos por LC = Lmite de control
triplicado. Este hecho le permite un monitoreo continuo de
la precisin de los resultados (Mayar et al, 2000), al LA = 2/3*D4*R (3)
aplicar estos grficos a muestras reales, de acuerdo con la
ejecucin diaria de los trabajos de servicio. donde,
El objetivo de este trabajo es probar la utilidad de la LA = Lmite de alarma
estimacin de la incertidumbre de la medicin, a partir de D4 = Factor para convertir la amplitud media: 2,575 para
los resultados de la aplicacin de los grficos de control de triplicados.
la amplitud (R-chart) empleados en el control de la calidad Se tuvieron en cuenta los valores de los coeficientes de
interno del laboratorio, para aquellos ensayos en que se ha variabilidad (CV) mximos permisibles, determinados en la
demostrado que el sesgo no es significativo, y comparar prctica, de acuerdo con las condiciones del laboratorio
estos resultados con los que se han establecido por la Posteriormente, al procesar los datos obtenidos durante dos
metodologa bottom-up. aos, se confeccionaron histogramas de frecuencia para
seleccionar los intervalos del analito, donde se tuvieran 20
ms datos y garantizando que la concentracin menor del
2.- Materiales y Mtodos intervalo no mostrara diferencias significativas con el valor
mayor. En los intervalos seleccionados se calcul el R
Los mtodos de ensayo estudiados aparecen en la Tabla 1, promedio ( ), es decir, el valor promedio de las diferencias
los cuales se encuentran incluidos entre las mediciones entre rplicas en ese intervalo.
obligatorias dentro de la norma cubana de vertimiento de Para el clculo de la incertidumbre a partir de los datos
aguas residuales (NC 27:1999). Se emplearon los mtodos anteriores se emplearon las siguientes ecuaciones:
descritos en APHA (1998).
r = 1,693* (4)
Tabla 1. Mtodos de ensayo estudiados
donde,
Ensayo Mtodo
r = lmite de repetibilidad del mtodo.
Demanda Bioqumica de Oxgeno (DBO) Volumtrico
pH Potenciomtrico directo (5)
Nitrgeno Total (Nt) Kjeldahl, volumtrico
Slidos totales (ST) Gravimtrico De acuerdo con lo anterior, se tendra:

Se utilizaron los datos obtenidos durante dos aos, (6)

calculndose la media ( ), la desviacin estndar (DE) y el
coeficiente de variacin (CV, %) de los ensayos por Si se asume que la incertidumbre es:
triplicado de cada muestra.
Los mtodos de ensayo que se encuentran en el alcance U = 2*sr (7)
acreditado del DECA tienen garantizada su trazabilidad. Se
ha demostrado (mediante el empleo de materiales de y que, segn Horwitz y Richard (1997)
referencia internos, MRI, o certificados, MRC) que en las
sr =0.66* sR, (8)
condiciones del laboratorio, dichos mtodos no poseen un
sesgo significativo (Espinosa et al, 2007; Mayar et al, entonces quedara:
2004).
Para la confeccin de los grficos de amplitud se convirti sR= 1,5* sr (9)
la desviacin estndar (DE) en amplitud (R), siguiendo las y, por lo tanto, tendramos que la incertidumbre sera:
indicaciones dadas por APHA (1998), calculndose las
(10)
lneas de Recorrido (R), Lmite de Advertencia (LA) y

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Para tener un estimado de la incertidumbre, independiente Posteriormente, se calcularon las contribuciones de

de la concentracin se estim la incertidumbre relativa aquellas fuentes que fueron posibles, en forma de
(Urel), segn: desviaciones estndar, a partir de las cuales se calcul la
incertidumbre estndar combinada, transformndola en
incertidumbre expandida empleando un factor de cobertura
*100 (11)
k=2 (para un 95% de confianza).
Los valores de incertidumbre (expandida y relativa)
Tambin se obtuvieron los estimados de incertidumbre de
obtenidos mediante esta aproximacin aparecen en la Tabla
los ensayos estudiados, aplicando la metodologa bottom-
2.
up descrita en EURACHEM (2000), con el objetivo de
comparar los valores obtenidos a partir de ambas Tabla 2. Valores de la incertidumbre de la medicin de los resultados de
aproximaciones. los ensayos estimados a partir de la metodologa bottom-up
Se utilizaron los diagramas de Ishikawa (causa-efecto) 1 U1 U relativa
Ensayo Observaciones
como herramienta grfica complementaria para el anlisis (k=2, 95%) (%)
DBO 186 38 20,4 Empleando MRC
de los datos.
Para la deteccin de posibles valores anmalos se aplic pH 8,9 0,04 0,45 Empleando MRC
el criterio estadstico de Grbbs, utilizando las reglas Nt 49 4 8,2 Empleando MRI
ST 1806 50 2,8 Empleando MRC
descritas en ISO 5725-3 (ISO, 1994). 1
expresados en mg/L, excepto pH
Se emplearon las hojas de clculo de Microsoft Excel y el
paquete estadstico Statgraphics versin 5.1 (2000).
Este tipo de aproximacin le permiti al laboratorio, en
determinado estado de su desarrollo contar con valores de
3.- Resultados y Discusin la incertidumbre de la medicin de los ensayos que
realizaba.
Al aplicar la metodologa bottom-up descrita en En el proceso de estimacin de la incertidumbre de la
EURACHEM, en primer lugar se identificaron todas las medicin de los mtodos de ensayo cuyos resultados se
posibles fuentes de incertidumbre, ubicndolas mediante un muestran en la Tabla 2, se haba evaluado la contribucin
diagrama de causa-efecto. En las figuras 1 y 2 se muestran, del sesgo a la incertidumbre, demostrndose que dicha
como ejemplo, los diagramas respectivos de los ensayos de fuente no era significativa, cumplimentando lo establecido
DBO y ST, en los que se pueden observar la gran cantidad en el SG del DECA (DECA/PG/21) como se observa en la
de fuentes que contribuyen a la incertidumbre total de los Tabla 3 (datos tomados de los registros DECA/RG/21/01 y
resultados de dichos mtodos de ensayo, las cuales no 02).
siempre es posible cuantificar, en la prctica. Para ello se tuvieron en cuenta tanto el criterio dado por
EURACHEM (2000) de que toda fuente de incertidumbre
cuya contribucin fuera menor del 20% de la incertidumbre
total se podra considerar despreciable, y el criterio
estadstico para la evaluacin de la veracidad, teniendo en
cuenta la estimacin del sesgo y su significacin
(mg/L) estadstica, que aparece en ONN (1998), de acuerdo con el
cual si el intervalo de confianza del sesgo contiene el
valor de 0, entonces el sesgo no es significativo y el
mtodo es tan exacto como se precisa.

Tabla 3. Evaluacin de la significacin estadstica del sesgo en los

Fig. 1. Diagrama causa-efecto de las fuentes de incertidumbre del mtodo mtodos de ensayo objeto de estudio
de ensayo de Demanda Bioqumica de Oxgeno (DBO)
Valor Sesgo rel. Int Sup Int Inf
Ensayo 1
Sesgo1
terico1 (%) Sesgo1 Sesgo1
DBO 186 189,72 -3,72 -2,0 0,396 -7,836
pH 8,9 8,89 0,008 0,09 0,182 -0,166
Nt 49 48 0,88 1,8 1,784 -0,034
ST 1806 1815 -9,05 -0,5 26,43 -44,52
1
expresados en mg/L, excepto pH
rel.: relativo; Int Sup/ Int Inf: valor superior o inferior del intervalo de
confianza del sesgo.

Sin embargo, como puede observarse en la Tabla 2, la

experimentacin realizada para evaluar la incertidumbre
asociada a los resultados de estos ensayos, emple
Fig. 2. Diagrama causa-efecto de las fuentes de incertidumbre del mtodo materiales de referencia internos (MRI) o materiales de
de ensayo de Slidos Totales (ST) referencia certificados (MRC), los cuales no permiten tener

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en cuenta el alto grado de heterogeneidad y variabilidad en
composicin de las aguas residuales que el laboratorio
evala, ya que estn constitudos por soluciones verdaderas
de reactivos qumicos puros.
Como ya se ha planteado por otros investigadores (Reyes
y Cerezo, 2009) no es lgico obtener unos datos de
incertidumbre que, en realidad, no estn valorando el error
analtico de los resultados obtenidos con unos criterios en
el procedimiento de validacin y que, al mismo tiempo, en
los controles de calidad internos se estn utilizando otros
criterios.
Es por ello que resulta conveniente mantener una
actualizacin de los valores de la incertidumbre de la
medicin, que reflejen las condiciones actuales del
laboratorio y los resultados del control de la calidad interno
de los resultados, ya que debe existir una estrecha relacin
entre validacin y evaluacin de la calidad de los ensayos,
as como de sus criterios de aceptacin, si se pretende
utilizar la incertidumbre correctamente. De estos criterios
parti la decisin que dio origen a este trabajo.
A continuacin se analizarn los resultados obtenidos al
emplear los resultados de los grficos de amplitud.
Evaluando los datos de dos aos del empleo de esta
herramienta de control de la calidad interno en el
laboratorio y aplicando las ecuaciones (10) y (11) que
aparecen en Materiales y Mtodos, se alcanzaron los
resultados que se muestran en la tabla 4.
Tabla 4. Valores de la incertidumbre de la medicin de los resultados de
los ensayos estimados a partir de los datos de grficos de amplitud del
rango (R-chart)
1 U1
Mtodo de ensayo
(k=2, 95%))
DBO 30 4,20 15,1
DBO 107 12,95 46,5
pH 7,6 0,09 0,31
pH 8,4 0,06 0,22
Nt 30 1,98 7,1
ST 887 20,86 74,9
1
expresados en mg/L, excepto pH
Para los mtodos de DBO y pH se evaluaron los
resultados en dos intervalos, pudiendo observarse que, en el
caso de DBO, la incertidumbre fue menor en la
concentracin mayor y viceversa, en correspondencia con
lo planteado por Horwitz (1997).
Si se comparan los resultados de Urelativa mostradas en las
tablas 2 y 4 para los mismos ensayos, se observa (figura 3)
que los valores estimados mediante el mtodo bottom-
up, fueron menores, respectivamente, que los valores
correspondientes obtenidos mediante la aproximacin R-
chart, lo cual pudiera deberse a que en el primer caso no se
tiene en cuenta el efecto de la heterogeneidad de la muestra
(ya que se trabaja con MR o MRC). De aqu se deriva que
esta pudiera resultar una contribucin importante a la
incertidumbre de la medicin en los ensayos de indicadores
globales de contaminacin en aguas residuales, que se
analizan directamente, sin un proceso de extraccin o
pretratamiento de las muestras.
4
Debe tenerse en cuenta que, en el caso de las aguas
residuales, el trmino heterogeneidad no slo puede estar
asociado desde el punto de vista fsico a la presencia, por
ejemplo, de slidos en suspensin, sino desde el punto de
vista qumico, a la existencia de una amplia gama de
compuestos, cuyo comportamiento puede ser diferente en
los mtodos de ensayo que se le aplican. Por ltimo, suelen
ser tambin heterogneas en su composicin (fsica o
qumica) las muestras que se analizan en el laboratorio, al
proceder de diferentes procesos agrcolas, industriales,
biotecnolgicos, etc.
El empleo de los resultados de los grficos de control de
la amplitud, confeccionados a partir de las muestras de
aguas residuales que el laboratorio caracteriza, s tiene en
cuenta este factor de heterogeneidad al confeccionarse con
los datos de la aplicacin a muestras reales de aguas
residuales. Es decir, que se tiene en cuenta la contribucin
debida al error aleatorio que se produce al aplicar el
procedimiento a esas muestras. Es por ello que dichos
resultados se ajustan ms a las condiciones reales de
trabajo en el laboratorio.
45
40
35
30
25
Urel (%)
20
15
U relativa 10
(%) 5
50,9 0
DBO pH Nt ST
43,4 Urel (%) bottom-up Urel (%) R-chart
4,0 Fig. 3. Comparacin de los resultados de Incertidumbre Relativa (%) de
2,7 los mtodos de ensayo estudiados, calculados segn las metodologas
bottom-up y R-chart
25,4
8,5 O sea, que la alternativa de empleo de los resultados de
los grficos de amplitud para la estimacin de la
incertidumbre es una va atractiva a aplicar en aquellos
ensayos que tengan un sesgo despreciable, ya que no
requiere procedimientos costosos y que consumen tiempo,
considerando que muchos laboratorios, especialmente
aquellos de pases en desarrollo, tienen dificultades con la
estimacin de la incertidumbre de la medicin asociada con
los mtodos analticos que emplea (Dabalus Islam et al,
2008).
De acuerdo con estos resultados y, a los efectos de
comprobarlos, sera conveniente que el laboratorio
incluyera la herramienta de adicin de estndar (con
diferentes niveles de concentracin) a muestras reales, en el
control de la calidad interno, para estudiar con rigurosidad
la contribucin del factor de heterogeneidad de las
muestras de aguas residuales, en la incertidumbre de los
mtodos de ensayo que realiza, en la medida en que se
cuente con los recursos necesarios, dada la gran variedad
de muestras de diferentes orgenes que el laboratorio
analiza.
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4.-Conclusiones
Se demostr que la metodologa de estimacin de la
incertidumbre de la medicin en mtodos de ensayo con un
sesgo despreciable, a partir de resultados de grficos de
amplitud, resulta una alternativa viable para los
laboratorios que aplican esta herramienta de control de la
calidad analtico, racionalizando los recursos y el tiempo
necesario para cumplir con este requisito.
En el caso particular de las aguas residuales esta
alternativa permite adems, cuando se aplica a muestras
reales, considerar la fuente de incertidumbre asociada a la
heterogeneidad de la matriz.
Los resultados alcanzados permiten ilustrar el riesgo de
realizar la validacin/verificacin de ensayos de
indicadores globales de contaminacin en aguas residuales,
slo empleando MR o MRC.
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