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IV
1-MICROBIOLOGA y BIOTECNOLOGA
1. CONCEPTO DE MICROORGANISMO
CLASES DE MICROORGANISMOS
Eucariotas Protozoos
Algas microscpicas
Hongos microscpicos
2. LAS BACTERIAS
CLASIFICACIN, MORFOLOGA,
FISIOLOGA Y ECOLOGA BACTERIANAS
* Vibrios, que son muy cortos y curvados, en forma de coma. Ejemplo: Vibrio
cholerae.
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membrana externa.
TINCIN DE GRAM.
La mayor parte de las bacterias son hetertrofas y deben tomar el alimento orgnico
sintetizado por otros organismos. La obtencin del alimento la hacen por diversos
caminos:
* Las bacterias de vida libre suelen ser saprfitas, viven sobre materia orgnica
muerta.
* Muchas viven en relacin estrecha con otros organismos. De ellas, la mayora son
comensales y no causan daos ni aportan beneficios a su husped; algunas son
parsitas (producen enfermedades) y otras son simbiontes (establecen relaciones con
otros organimos con beneficio mutuo).
capaz de captar fragmentos de ADN de otra Fig. 15 Conjugacin entre una bacteria F+
bacteria que se encuentran dispersos en el y otra F-. El factor F (crculos pequeos) pasa
medio donde vive. Slo algunas bacterias a travs de un pili.
pueden ser transformadas. Las que pueden
serlo se dice que son competentes.
Fago
F- F+ F- Hfr
Cepa S
F+ F+
Cepa R
Informacin: Las bacterias donadoras son las que poseen, adems del cromosoma bacteriano, pequeas
cadenas de ADN de doble hlice y circulares, denominadas episomas o factores F. Estas bacterias se denomi-
nan F+ cuando el factor F est separado del cromosoma; pero, en ocasiones, este factor puede integrarse en
el cromosoma, que se abre y se transforma en una cadena lineal, con lo que la bacteria F+ queda convertida
en Hfr (alta frecuencia de recombinacin). Las bacterias receptoras carecen de episomas y se denominan F- .
Durante la conjugacin uno de los factores F de una bacteria F+ pasa a travs de las fimbrias a una
bacteria F- , que se cambia en F+ y adquiere la capacidad de formar estos pili sexuales, mientras que la
bacteria F+, como posee varias copias del episoma no pierde su condicin de donadora.
Las bacterias Hfr, sin embargo, pueden transferir la totalidad o parte de su ADN cromosmico a travs de las
fimbrias a una bacteria F- . Para ello, previamente, deben duplicar su ADN cromosmico, junto con el episoma
que lleva integrado, y una de las copias del cromosoma puede trasladarse a una bacteria F- (generalmente
slo pasan fragmentos cromosmicos debido a la fragilidad de las fimbrias).
El factor F suele permanecer en la bacteria Hfr, ya que se encuentra inserto en la regin terminal del
cromosoma que casi nunca circula a travs de las fimbrias, porque stas se destruyen antes de que les de
tiempo a pasar. Los genes que han logrado atravesar el pili se integran en el cromosoma de la bacteria F-, que
de esta forma adquiere caracteres de la Hfr (se producen fenmenos de sobrecruzamiento y recombinacin
gnica entre el cromosoma y los fragmentos).
Las partculas vricas, llamadas tambin viriones, estn constituidas por una
molcula de ADN o ARN, nunca los dos en un mismo virus, contenida en el interior
de una cpsula proteica y, en ocasiones, una envoltura membranosa.
Informacin: En realidad, los virus pueden considerarse como fragmentos independizados del genoma celular
que han adquirido los genes necesarios para rodearse de una envoltura protectora y poseen la capacidad de
desplazarse de una clula a otra. Mientras que los transposones son genes que se desplazan de un sitio a otro
del cromosoma de una clula , los virus representaran a otro grupo de genes similares, pero que por haber
adquirido la cpsula protectora se aventuraron a dar "saltos" mayores.
La destruccin celular es la consecuencia de la infeccin provocada por el virus, y las repercusiones para el
organismo dependen de la importancia del tejido lesionado; as, mientras el virus de la gripe causa la des-
truccin de clulas de la mucosa respiratoria y " no reviste gravedad", el virus de la rabia, sin embargo,
destruye neuronas y puede ser mortal si alcanza los centros vitales del encfalo; otros, como el virus del SIDA,
destruyen el sistema inmunitario, y el organismo queda expuesto a todo tipo de infecciones oportunistas que
terminan por causar la muerte.
Como ya se ha dicho, todo virus est formado por una envuelta proteica: la cpsida
y por un cido nucleico; adems, algunos virus ms complejos pueden tener una
envoltura membranosa de lpidos y protenas.
Los virus son muy pequeos y slo son visibles mediante microscopa electrnica.
Su tamao oscila desde los 10 nm, en los pequeos virus de la poliomielitis, hasta
los 300 nm en el virus de la viruela, el mosaico del tabaco -TMV- y otros. Se
diferencian entre ellos, adems de por el tamao, por las caractersticas estructurales
de la cubierta (la cpsida), por la naturaleza de su cido nucleico, el modo de
penetracin en la clula hospedadora y el mecanismo de replicacin.
Todos los virus presentan, sin excepcin, una envoltura proteica, denominada,
cpsida, compuesta por el ensamblaje de una o varias subunidades proteicas llamadas
capsmeros, dispuestas a menudo en varias capas concntricas.
La geometra de la cpsida es uno de los criterios que permite clasificar los virus
en cuatro grupos: icosadricos, helicoidales, complejos y con envoltura.
Es el componente esencial del virus y puede ser ADN monocatenario, por ejemplo,
en el fago O-X-174, o ADN bicatenario, como el fago T4 y los adenovirus; pero
tambin existen virus con ARN bicatenario (los reovirus) y otros portadores de ARN
monocatenario, como es el caso de los virulentos retrovirus, entre los que se
encuentran el de la gripe, el sarampin, la rabia, el SIDA y determinados virus onc-
genos causantes de ciertos tipos de cncer (sarcoma de Rous, determinadas leuce-
mias, etc.). Este ltimo grupo contiene, adems de los otros componentes
mencionados, un enzima particular llamado retrotranscriptasa o transcriptasa inversa,
que le va a permitir transcribir su ARN en un ADN dentro de la clula infectada.
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Informacin: El VIH ataca preferentemente a los linfocitos T4. Las fases de este proceso son:
10) Contacto entre las espculas de su envoltura membranosa y los receptores de la clula hospedadora. Estas
permiten la fusin de membranas, introduciendo en su interior la cpside con el material gentico.
20) Una vez en el interior, el virus se despoja de su cpsida protica y quedan libres las hebras de ARN y la
enzima retrotranscriptasa que transporta.
30) La retrotranscriptasa, tambin llamada transcriptasa inversa, primero hace una copia en ADN de la cadena
de ARN, es decir, invierte el proceso normal de transcripcin de ADN a ARN, originando una hlice hbrida
ARN-ADN.
40) La hlice hbrida ARN-ADN es utilizada por la misma enzima para generar una doble hlice de ADN (previa
degradacin del ARN).
50) Las dobles cadenas de ADN vricas entran en el ncleo y se insertan en el cromosoma celular, donde
puede permanecer en estado latente en forma de provirus durante un tiempo ms o menos prolongado.
60) Finalmente se transcriben y se traducen utilizando la maquinaria metablica de la clula y origina nuevas
copias de ARN vrico, protenas de la cpsida y de la envoltura y enzimas retrotranscriptasas.
70) Estos componentes se ensamblan, y...
80) los virus abandonan la clula mediante un proceso de gemacin que les permite adquirir de nuevo su
recubrimiento membranoso.
Todos estos procesos pueden ser lentos, originando tan slo un descenso de la actividad metablica del
hospedador, o rpidos, con lo que la salida masiva de virus termina con la lisis de la clula.
i) Ciclo ltico.
1) Fijacin y entrada: El bacterifago fija su cola a receptores espec ficos de la pared de la bacteria, donde una enzima localizada
en la cola del virus debilita los enlaces de las molculas de la pared. A continuacin, el fago contrae la vaina helicoidal, lo que
provoca la inyeccin del contenido de la cabeza a travs del eje tubular de la cola del fago: el cido nucleico del virus penetra en
la clula.
2) Multiplicacin: Una vez dentro, el ADN del virus, utilizando nucletidos y la enzima ARNpolimerasa de la bacteria, dirige la
sntesis de gran cantidad de ARNm viral. Este ARNm viral sirve de base para la snte sis de protenas del virus (capsmeros,
endonucleasas, endolisinas). El ADN vrico, utilizando los complejos enzimticos de la bacteria, se replica muchas veces. Tanto los
cidos nucleicos replicados como el resto de los componentes vricos que se han sintetizado se ensamblan, dando lugar a nuevos
virus.
3) Lisis y liberacin. En una bacteria pueden formarse unos 100 bacterifagos, que salen al exterior debido a la accin de la
endolisina, enzima que lisa la pared bacteriana. Debido a ello, se produce la ruptura de la pared bacteriana y la muerte de la
LOS PRIONES: De estos "organismos" sabemos an menos. Se descubren en 1983 como agentes causantes
de afecciones neuronales espordicas. Ahora aumenta su inters debido al mal de las vacas locas.
Es una partcula infecciosa protenica (protena patolgica). Las pruebas obtenidas hasta el momento
parecen indicar que el prin carece de cido nuclico.
Se conocen dos enfermedades causadas por priones: La Tembladera, una alteracin neurolgica de ovejas y
cabras, conocida desde el siglo XVII y la enfermedad de Creutzfeld-Jacob, una rara demencia humana. Los
priones tambin se consideran agentes probables de otras enfermedades humanas que afectan al sistema
nervioso: el Kuru, observado slo en tribus de Nueva Guinea, asocindose al canibalismo tradicional (la
enfermedad fue desapareciendo conforme cesaban las prcticas necrfagas).
La enfermedad de Creutzfeld-Jacob en individuos menores de 35 aos se relacion con el consumo de
subproductos de vacas enfermas, que estaban alimentadas con piensos fabricados con restos de ovejas con
tembladera.
La infeccin por priones no provoca una respuesta inmunitaria, debido a que el prin est dentro de nuestras
propias clulas. El agente causante es una protena propia de la membrana plasmtica de las neuronas. Se
sabe que est codificada por un gen del cromosoma 20. Esta protena sufre una alteracin que la convierte en
patolgica (prin) Las protenas defectuosas actan como agentes infecciosos que cambian las protenas
normales en defectuosas. La aparicin de la demencia es consecuencia de que se acumulan cristalizadas en las
neuronas provocando su destruccin y muerte.
Comparando las dos protenas, normal y patolgica, se comprueba que tienen la misma secuencia de
aminocidos (estructura primaria), pero tienen un plegamiento distinto.
Se han encontrado casos de transmisin hereditaria de la enfermedad, debido a una mutacin puntual que
implica modificacin en la estructura primaria de la protena, sustituyndose una prolina por una leucina.
Los criterios bsicos de clasificacin son el tipo de cido nucleico que contienen, el tipo de cpsida, la
posesin de envolturas membranosas y el tipo de clula a la que parasita. Segn este ltimo criterio
existen virus animales, virus vegetales y virus bacterianos o bacterifagos. Las caractersticas ms
frecuentes de cada grupo ya se han visto en la pgina .
3 Herpesviridae ADN-bc lineal Envueltos Virus de herpes simple I Grietas en los labios y
(Herpesvirus) y II herpes genital
Los virus animales pueden clasificarse por su material gentico y por la forma de sintetizar su ARN
mensajero.
Grupo I: Tienen como material gentico ADN de cadena doble (hebras + y -). La hebra (-) se transcribe en
un ARNm. Ejemplo: virus del herpes.
Grupo II: Tienen como material gentico ADN de cadena simple (+ -). La hebra de ADN sintetiza una
molcula complementaria de ADN formndose un ADN de cadena doble. De estas dos hebras, la hebra (-) se
transcribe en un ARNm. Ejemplo: Parvovirus.
Grupo III: Tienen como material gentico ARN de cadena doble (hebras + y -). De estas dos hebras, la hebra
(-) sirve de molde para la sntesis de un ARNm complementario. Ejemplo: Reovirus.
Grupo IV: Tienen como material gentico ARN de cadena simple (hebra +). Esta hebra de ARN sintetiza una
molcula complementaria de ARN: hebra (-) que sirve de molde para sintetizar un ARNm complementario.
Ejemplo: Virus de la polio de los primates.
Grupo V: Tienen como material gentico ARN de cadena simple (hebra -). Esta hebra de ARN sirve de molde
para sintetizar un ARNm complementario. Ejemplo: Gripe.
Grupo VI: Tienen como material gentico ARN de cadena simple (hebra +). Esta hebra de ARN sirve de
molde para sintetizar un ADN complementario: hebra (-) que a su vez sirve de molde para sintetizar un ADN
+. Se forma as un ADN de doble cadena (+ y -). La hebra de ADN (-) se transcribe formndose un
ARNm+. Ejemplo: Retrovirus.
I- Herpes
II- Parvovirus
III- Reovirus ADN
IV- Polio de los ARN
primates
V- Gripe Lnea fina,
cadena que no
VI- V.I.H. se transcribe
Fig. 24
PROTOZOOS
cil
vp Mn
Son organismos formados por una sola mn vp
Se reproducen asexualmente por divisin simple. Se Los protozoos con flagelos: flagelados.
han observado procesos sexuales (conjugacin) en los * Plasmodium, que produce en el hombre la
cuales dos paramecios se unen por el citostoma y a enfermedad de la malaria o paludismo. Se
travs de l realizan un intercambio de material nuclear, introduce en la sangre mediante la picadura de la
separndose despus. Aunque en este proceso no hembra del mosquito Anopheles , quien a su vez
haya variacin numrica, se considera una reproduccin lo toma de otros individuos enfermos. De esta
sexual por el intercambio de material nuclear, que es forma la enfermedad se transmite de individuos
lo esencial de la sexualidad. enfermos a otros sanos por la picadura del
mosquito. El plasmodio, una vez en la sangre,
Cuando falta agua, se rodea de una membrana pasa al interior de los glbulos rojos donde se
gruesa, donde permanece con vida latente, pudiendo divide por esporulacin y destruye las clulas
resistir largas temporadas hasta que nuevamente haya sanguneas.
agua, este proceso se conoce como enquistamiento.
Fig. 26 Diferentes especies de protozoos. 1) Paramecio; 2) Stentor; 3) Ciliado sp.; 4) Vorticela; 5) Ameba.
HONGOS MICROSCPICOS
MA
Los hongos son capaces de descomponer algunos materiales fabricados y usados por
el hombre a partir de materiales de origen orgnicos (vegetal y animal); reciclan por
tanto estos materiales como si se tratara de la materia orgnica que forma parte del
ecosistema (biodeterioro).
Por otra parte, desde hace cientos de aos el hombre ha utilizado diferentes
especies de hongos para la transformacin de alimentos, un claro ejemplo son las
levaduras utilizadas en la elaboracin de la cerveza y del vino (Saccharomyces), de
los quesos (algunas especies de Penicillium), del pan, etc.
Las bacterias y los hongos son los microorganismos que, junto a los productores,
permiten la existencia del ciclo de la materia en la biosfera. Su funcin es
descomponer la materia orgnica procedente de restos vegetales, cadveres y
excrementos, convirtindola en materia inorgnica que vuelve a ser utilizada por los
productores.
Muchos de los elementos qumicos que componen los materiales terrestres estn
sometidos a unos circuitos cclicos que consisten, bsicamente, en que pasan de
formar parte de materia inorgnica inerte a formar parte de materia constitutiva de
seres vivos y de stos, posteriormente, de nuevo a materia inorgnica inerte,
cerrndose el ciclo. Estos ciclos de la materia son los ciclos biogeoqumicos.
Combustin CO2
Vegetales Descomponedores
P Fotosntesis Respiracin
e (Bacterias
C
t a Hongos)
r r Compuestos
b
l orgnicos
e n
o
Consumidores
Compuestos
orgnicos
Una parte muy importante del carbono, puede tardar millones de aos en
incorporarse al medio inerte. Es el caso del carbono que llega a formar parte del
petrleo y del carbn mineral. Este carbono puede volver al ciclo por combustin de
estos combustibles fsiles.
Cuando un organismo muere, el nitrgeno de los restos orgnicos, como son las
protenas y los cidos nucleicos, por accin de bacterias y hongos presentes en el
suelo, se convierte en amoniaco o in amonio (amonificacin).
Otros grupos de bacterias del suelo oxidan los iones amonio a nitritos y
finalmente las bacterias nitrificantes oxidan los nitritos a nitratos. Los nitratos son ya
fcilmente absorbidos por las races de las plantas y utilizados para formar molculas
nitrgenadas (protenas y cidos nucleicos). Mediante las cadenas trficas posteriores,
el nitrgeno asimilado en estas molculas del vegetal pasa a los animales.
Bacterias y
hongos
Animales
Bacterias Sustancias
Suelos nitrogenadas
fijadoras
de orgnicas:
Nitrgeno Nitratos
nitrgeno -Protenas
atmosfrico Nitritos
de los
suelos Sales - cidos
amoniacales nuclicos
Vegetales
Algas
La mayora de los microorganismos son inocuos para los dems seres vivos.
Muchos de ellos incluso se han adaptado a las condiciones especiales que tienen los
tejidos de los animales viviendo en ellos, en su piel, en sus conductos digestivos o
respiratorios; son la denominada flora normal. Sin embargo, los microbios ms
conocidos son aquellos que producen enfermedades infecciosas en las plantas, en los
animales y en la especie humana. Estos son los microorganismos patgenos.
Robert Koch (1843-1910) fue el primero en comprobar que una bacteria era la causante de una enfermedad
infecciosa, el carbunco en ovinos. Estableci cuatro postulados que constituyen la base de las investigaciones
mdicas para establecer el tratamiento de las infecciones:
Otros aportes de la labor investigadora de Koch fueron el descubrimiento de los cultivos en medios slidos
y el descubrimiento de los agentes causantes de la tuberculosis (llamado desde entonces bacilo de Koch) y
del clera.
V AS DE INFECCIN
Una vez dentro, los microbios tienen que reproducirse, ya sea en una lesin
superficial, ya sea en un tejido especfico al que son conducidos por va linftica o
sangunea. En esta primera fase tienen que superar los mecanismos defensivos del
hospedador, lo que incluye la inflamacin, la detencin en los ganglios linfticos y su
eliminacin de la sangre por accin de los fagocitos. Si consiguen superarlos, se
desarrolla la enfermedad. El tiempo que transcurre desde que penetran hasta la
manifestacin de los sntomas de enfermedad se denomina perodo de incubacin.
* Produccin de toxinas
Las toxinas son sustancias venenosas de bajo peso molecular, que pueden ser
excretadas al medio (exotoxinas), como la del botulismo o el ttanos, o retenidas
dentro de la clula (endotoxinas). Estas toxinas pueden provocar daos locales,
cuando son muy especficas, o difundirse y causar lesin sistmica.
7. BIOTECNOLOGA
Se llama marea negra al vertido masivo de petrleo debido a un accidente durante el transporte del petrleo
en grandes barcos.
Es posible utilizar bacterias que digieren los hidrocarburos que forman el petrleo y los transforman en
sustancias qumicas nada o menos contaminantes. Aunque generalmente cada tipo de bacteria utiliza una
clase de hidrocarburo, se intenta combinar las caractersticas de varias bacterias para conseguir una bacteria
recombinante capaz de transformar muchos hidrocarburos diferentes.
Los iones metlicos de los elementos pesados (por ejemplo, mercurio, cinc, nquel, cobre, plomo) movilizados
por la accin humana a distintos ecosistemas constituyen el tipo de contaminacin ms grave del planeta.
Los efectos contaminantes de los metales pesados superan en cuanta la suma de todos los dems tipos de
contaminacin qumica.
Gracias a la ingeniera gentica se han desarrollado bacterias que pueden vivir en presencia de metales
pesados y eliminarlos mediante diversas reacciones qumicas.
Antibiticos
La palabra antibitico designa a aquellas sustancias que, producidas por determinados microorganismos,
pueden acabar con la vida de otros.
En 1929, Alexander Fleming descubri estas sustancias. Estaba trabajando con Staphylococcus aureus y su
cultivo se contamin con un hongo del gnero Penicillium, de forma que las colonias rodeadas por ste
moran. Fleming supuso que el hongo produca alguna sustancia antibacteriana, por lo que hizo un filtrado,
descubriendo as, la penicilina. Fue incapaz de purificarla, dado que era qumicamente inestable, lo que se
hizo aos ms tarde, gracias al desarrollo de un proceso industrial adecuado.
Desde 1945 se han aislado cientos de antibiticos producidos por hongos del gnero Penicillium y bacterias
de los gneros Bacillus y Streptomyces.
El gran problema de la actualidad es que han comenzado a desarrollarse a un ritmo alarmante cepas de
patgenos resistentes a antibiticos e, incluso, cepas multirresistentes a varios antibiticos simultneamente,
por lo que hay que encontrar otros nuevos, o modificar los existentes para que recobren su eficacia, lo que
constituye el gran reto de la biotecnologa.
Hormonas
Las personas que sufren diabetes mellitus deben inyectarse insulina varias veces al da. Hasta 1983 la
insulina que utilizaban las personas diabticas era insulina de cerdo purificada (diferente de la humana). Desde
esa fecha se utiliza insulina obtenida por ingeniera gentica: se ha introducido el gen de la insulina humana
en la bacteria Escherichia coli, que la produce en cantidades masivas y con las mismas caractersticas. La
insulina es la primera protena fabricada por ingeniera gentica y comercializada.
Tambin por ingeniera gentica se obtiene la hormona del crecimiento.
Otras hormonas como la testosterona y progesterona, hormonas sexuales masculina y femenina, utilizada
sta ltima en la fabricacin de frmacos anticonceptivos se obtienen de la fermentacin de ciertas levaduras.