Centro de Formao Centro de Formao de Entre Homem e Cvado

Amares e Terras de Bouro

Oficina de Formao: Trabalho Prtico na Perspectiva dos Novos Programas de

Fsica e Qumica, Matemtica e Biologia. Uma Abordagem Experimentao
usando sensores

Formadores: Abel Ea e Fernanda Neri

Formandas: M Augusta Costeira, Maria do Carmo Longo e Tnia Santana

Maio / 2006
Amares

FACTORES QUE INFLUENCIAM

A ACTIVIDADE ENZIMTICA
Pesquisa da aco da enzima catalase
em fgado de bovino
INTRODUO

As actividades de Trabalho Experimental assumem um papel fundamental no

ensino e na aprendizagem das Cincias e, hoje em dia, cada vez mais,
preocupao de todos, tanto professores, como investigadores, a forma como o
Trabalho Experimental integrado nas actividades lectivas.
Os contedos procedimentais esto intimamente relacionados com os outros
contedos, porque por um lado apoiam os contedos conceptuais uma vez que toda
a investigao depende de um marco terico e, por outro lado, o trabalho
experimental permite ao aluno adquirir um conjunto de atitudes e valores como
sejam a organizao, a autodisciplina, o rigor, a persistncia, etc.. Para alm disso,
ensinar a pensar como fazem os cientistas, ajuda ao desenvolvimento de outras
atitudes relacionadas com a valorizao do trabalho da Cincia, das relaes
interpessoais e com o meio ambiente.
Os trabalhos laboratoriais para alm de proporcionarem a oportunidade de
manipular o material, permitem ainda ao aluno interpretar determinados fenmenos
e modificar concepes sobre determinado tema.
Pretende-se que na disciplina de Biologia 12 ano os alunos aperfeioem
competncias nomeadamente a utilizao de instrumentos pticos, sistemas
automticos para recolha de dados; por exemplo sensores, que podero associar-se
s novas tecnologias da informao.
A utilizao dos sensores ligados s calculadoras permite visualizar a
velocidade da reaco enzimtica e a comparar a velocidade destas mesmas
reaces em diferentes condies.
O trabalho experimental que nos propusemos apresentar de fcil
implementao na sala de aula, pouco dispendioso (desde que existam os sensores)
e permite no final tirar vrias concluses com base nos resultados obtidos.

Enquadramento programtico ( 12 Ano de Escolaridade )

Unidade 4 Produo de Alimentos e Sustentabilidade

1
Questo Central Como resolver problemas de Alimentao da Populao
Humana?

Sugestes metodolgicas Sugere-se que os processos de experimentao

envolvam a utilizao de sensores.

Competncias Conceptuais
Compreender a importncia biolgica das enzimas enquanto
biocatalizadores.
Compreender fundamentos biolgicos associados aos factores que
afectam a actividade enzimtica.

Competncias procedimentais
Realizar actividades experimentais para o estudo de factores que
condicionam a actividade enzimtica..

Competncias atitudinais
Desenvolver a capacidade de analisar criticamente resultados.
Valorizar os conhecimentos sobre os processos metablicos de alguns
organismos, na perspectiva de utilizao no fabrico, processamento e
conservao de alimentos.

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PLANIFICAO DA ACTIVIDADE EXPERIMENTAL

- Protocolo experimental que ser fornecido aos alunos:

Factores que influenciam a actividade enzimtica

Pesquisa da aco da enzima catalase em fgado de bovino

Objectivos:
1 Verificar a influncia das alteraes de pH na actividade
enzimtica.
2 Verificar a influncia da temperatura na actividade enzimtica.

Introduo:

Nas clulas forma-se perxido de hidrognio (H2O2) como resultado de

algumas reaces qumicas. Devido elevada toxicidade desta substncia, ela ter
de ser decomposta para evitar a destruio das clulas. O H2O2 pode ser convertido
em Oxignio tal com est evidenciado na equao seguinte:

2H2O2 2H2O + O2

Muitos organismos podem decompor o perxido de hidrognio

enzimaticamente.
As enzimas so catalizadores biolgicos que tm a funo de acelerar as
reaces, pois diminuem a energia de activao necessria para estas se
desencadearem.
So protenas globulares com estrutura terciria e possuem uma regio,
denominada centro activo, que se liga ao substrato.

A actividade enzimtica condicionada por diversos factores. Tanto as

temperaturas altas com as temperaturas baixas inactivam as enzimas, podendo a
inibio ser irreversvel. O pH baixo ou elevado tambm acarreta inactivao das
enzimas uma vez que interfere com a configurao dos centros activos.

3
 A velocidade da reaco enzimtica pode ser estudada medindo a
concentrao do produto formado. Neste caso utilizado o sensor de O2 , uma vez
que o oxignio um dos produtos finais do metabolismo do H2O2.

Material:

CBL 2
Calculadora grfica
Programa Easy Date
Sensor O2 gasoso e pH
Garrafa de Nalgene de 250 ml

5 tubos de ensaio
Suporte par tubos de ensaio
Proveta graduada de 10 ml
H2O2 a 20 volumes
Hidrxido de sdio
cido clordrico
Pina e bisturi
Almofariz com pilo
Fgado fresco e fgado cozido
Placas de Petri
H2O2 a 20 volumes
Balana

Modo de proceder:

Com a mquina de calcular

1. Ligue o sensor de O2 ao canal 1 do CBL 2. Use o cabo de ligao para ligar

a calculadora ao CBL 2.
2. Ligue a calculadora e inicie a aplicao EASY DATA.
Prima Enter.
Se a calculadora exibir Gs O2 em canal 1, continue. Se
no o exibir, seleccione o sensor manualmente.
3. Seleccione o modo de recolha de dados:

Para tal, seleccione SETUP.

Seleccione Time Graph.
Seleccione Editar.

4
Defina 5 como o tempo de recolha entre as amostras
e prima Next.

Defina 36 como o total de recolhas e prima Next.

Prima OK.
4. Prima Start, quando iniciar o registo.

Com material laboratorial

1. Numere os tubos de 1 a 5 e coloque-os no suporte.

2. Deite 10 ml de H2O2 em cada um dos tubos.
3. Acrescente 5 gotas de HCl no tubo 3 e 5 gotas de NaOH no tubo 4.
4. Verifique o pH nos tubos 3 e 4
utilizando o sensor de pH.
5. Coloque um fragmento de cerca
de 200 mg de fgado cru no
frasco de Nalgene.
6. Verta o contedo do tubo 1 no
frasco, tendo o cuidado para que
este no entre em contacto com
o fgado e coloque
imediatamente o sensor como indicado na figura.
7. Inicie o registo dos resultados logo que a soluo entre em contacto com o
fgado.

5
 8. Repita este passo de acordo com as indicaes do quadro seguinte, tendo o
cuidado de no tocar no material biolgico.

Tubo Procedimento Resultados

1 H2O2 + fgado cru

2 H2O2 + fgado cru triturado
3 H2O2 + 5 gotas de HCl + fgado cru
4 H2O2 + 5 gotas de NaOH + fgado cru
5 H2O2 + fgado cozido

Pesar o fgado Triturar o fgado

Verificar o pH Colocar em contacto os reagentes

Discusso dos resultados:

1- Compare os grficos relativos aos tubos 1 e 2. Explique os resultados

obtidos.

2 Como explica a diferena na velocidade de reaco nos tubos 2 e 3?

3 Compare os grficos relativos aos tubos 1, 3 e 4 e explique os resultados.

4- Compare os grficos 1 e 5 e explique os resultados.

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DESCRIO DA EXECUO DA ACTIVIDADE EXPERIMENTAL

O trabalho experimental que nos propusemos desenvolver de fcil

implementao na sala de aula, tanto na montagem, como na execuo por parte
dos alunos. pouco dispendioso e permite no final tirar vrias concluses com base
nos resultados obtidos.

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DESCRIO DE INSTRUMENTOS DE AVALIAO DE ALUNOS NA ACTIVIDADE EXPERIMENTAL
Grelha de observao das actividades dos alunos durante a aula experimental.

Grelha de Observao

Grupos I II III IV V VI

Parmetros de Observao N.

Manuseia correctamente o material

Cumpre as regras de trabalho no laboratrio

autnomo na execuo

Oraganiza o trabalho de acordo com o tempo

Cumpre as regras de trabalho de grupo

Tem esprito de observao

Apresenta voluntariamente as suas opinies

Analisa correctamente os resultados

Tira correctamente as concluses

Relaciona e aplica os conhecimentos

Apreciao Global
DESCRIO DO RELATRIO A PEDIR AOS ALUNOS

Os alunos devero apresentar um relatrio da actividade experimental de

grupo com a seguinte estrutura:

Capa ( Ttulo, identificao dos autores e data )

Introduo
Material utilizado
Procedimento experimental
Resultados
Discusso
Concluso
Bibliografia
CONCLUSES

Este trabalho permitiu-nos desenvolver competncias ao nvel da utilizao

de sensores e mquinas de calcular grficas e preparar estes materiais a utilizar na
situao de sala de aula.
A utilizao de sensores permite realizar experincias em que a recolha de
dados envolva intervalos de tempo muito curtos, eliminando erros acidentais,
mostrando aos alunos a utilidade da utilizao das novas tecnologias ao nvel das
cincias experimentais e no processo de ensino aprendizagem, permitindo aos
alunos aprenderem por experimentao. As mquinas de calcular permitem um
recolha de dados e visualizao dos mesmos sob forma de grfico, que facilita muito
a sua interpretao imediata, por parte dos alunos.
Nesta experincia, de implementao e execuo relativamente simples,
obtivemos os resultados esperados.

1
BIBLIOGRAFIA

JIMNEZ. Engrcia Olivares (1998 ).Procedimientos de investigacion. Madrid:

Ministrio de Educacin e Cultura : Narcea, s.a. de ediciones.

MENDES, A.M.P. ( coord.) (2002) , REBELO, D.H.V.,PINHEIRO, E.J.G.. Programa

de Biologia 12 Ano, Ministrio da Educao Departamento de Ensino Secundrio.

PINTO, A. M., FIALHO, E., MASCARENHAS, M. A., INCIO, M. J. ( 1996 ).

Tcnicas Laboratoriais de Biologia I. Lisboa: Texto Editora.