Conciencia Tecnolgica

ISSN: 1405-5597
contec@mail.ita.mx
Instituto Tecnolgico de Aguascalientes
Mxico

Medina Valtierra, Jorge; Sato Berru, Roberto Y.; Frausto Reyes, Claudio
La Espectroscopia Raman molecular y su aplicacin ambiental
Conciencia Tecnolgica, nm. 23, 2003
Instituto Tecnolgico de Aguascalientes
Aguascalientes, Mxico

Disponible en: http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=94402305

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 La Espectroscopia Raman molecular y su aplicacin ambiental
Jorge Medina-Valtierra
Departamento de Ingeniera Qumica y Bioqumica, Instituto Tecnolgico de Aguascalientes, Av. A. Lpez Mateos
1801 Ote., Fracc. Ojocaliente, Aguascalientes 20256, Ags., Tel: 9105002, fax: 9700423.

Roberto Y. Sato-Berru, Claudio Frausto-Reyes

Centro de Investigaciones en Optica, A.C., Unidad Aguascalientes. Prol. Constitucin No. 607, Fracc. Reserva de
Loma Bonita, Aguascalientes 20200, Ags.

RESUMEN
La espectroscopia Raman es una herramienta analtica que ha cobrado auge en los ltimos tiempos debido a las
caractersticas y ventajas que presenta. Esta tcnica detecta y cuantifica molculas orgnicas e inorgnicas a bajas
concentraciones. En este artculo se presentan las bases tericas de esta tcnica de anlisis as como un ejemplo de su
uso en la deteccin de contaminantes en el medio ambiente.

Palabras clave: Espectroscopia Raman, pesticidas, extraccin y deteccin.

Dispersin de la radiacin sin cambio en la longitud de onda

Si un haz de radiacin de baja energa como la luz visible, interacciona con los tomos de una molcula, la
mayora de los fotones son dispersos en todas direcciones a consecuencia de un choque elstico sin prdida de
energa. A este fenmeno se le conoce como Esparcimiento Rayleigh [1].

Figura 1. Interaccin de un haz de luz con tomos

de una molcula sin cambios en la radiacin.

Este fenmeno ocurre cuando el dispersador es ms pequeo que la longitud de onda de la luz. En el caso del
esparcimiento de los rayos solares en el mar, la diferencia entre la longitud de onda del color azul y

el tamao de la molcula de agua es de aproximadamente 1000 veces.

Aunque este fenmeno es muy interesante y tiene aplicaciones diversas en el estudio de sistemas pticamente
activos como en la absorcin y polarizacin de la luz, en espectroscopia no tiene aplicaciones prcticas.

Transferencia de energa de los fotones hacia los enlaces tomo-tomo

Al mismo tiempo que se suscita el esparcimiento tipo Rayleigh se genera un fenmeno muy peculiar que es el
esparcimiento de radiacin pero con diferentes longitudes de onda (e) , mayores y menores a la longitud de onda del
haz incidente (o) [2]. En este fenmeno llamado Efecto Raman hay un intercambio de energa entre fotones y
molculas como veremos ms adelante. Sin embargo, este tipo de esparcimiento descubierto por C.V. Raman en
1923 es muy dbil en comparacin con el esparcimiento Rayleigh. Para aumentar la intensidad de la radiacin
Raman y poderla detectar y usar con fines prcticos las molculas se irradian con un rayo lser de cierta frecuencia.
La interaccin de la energa asociada en el rayo lser (E) con las molculas da como resultado una distorsin
momentnea de los electrones distribuidos alrededor de los enlaces moleculares

Figura 2. Distorsionamiento de la nube

electrnica por influencia de un haz energtico.

De una gran cantidad de fotones esparcidos (aproximadamente107), uno de ellos cede energa (hLser) a la
molcula, promovindola a un estado virtual que tiene un corto perodo de vida. La molcula se relaja de una manera
instantnea a un estado vibracional excitado y la emisin de un fotn con una energa menor y por consiguiente
con una longitud de onda mayor que la del lser. Este fenmeno se esquematiza en la figura 3.

Estado virtual
Esparcido anti-Stokes
Esparcido Stokes
Energa

Excitacin

Excitacin

Estado inicial de la vibracin

Figura 3. Descripcin del estado virtual del

esparcimiento tipo Raman.

Una molcula tiene diferentes tipos de enlaces e inclusive un mismo enlace puede presentar diferentes estado o
modos de vibracin. El tijereteo y el estiramiento en una molcula trimolecular se sealan en la figura 4 [3]. Por
consiguiente, cada modo emitir un fotn diferente lo que da como consecuencia un abanico de longitudes de onda
(e), todas mayores a la longitud de onda del lser usado.

Figura 4. Dos modos diferentes de vibracin

en una molcula tri-atmica
 Este tipo de esparcimiento Raman se le conoce como Stokes. El esparcimiento Anti-Stokes es similar pero en este
caso cuando se da la interaccin entre el fotn y la molcula que se encuentra en un estado vibracional excitado,
cediendo energa al fotn el cual se emite desde la molcula con una longitud de onda menor a la del lser. Este
abanico de longitudes de onda se muestra en la figura 5.

Figura 5. Abanico de longitudes de onda

emitidos en el esparcimiento tipo Raman.

Fue en los aos 60 que aparecieron los primeros equipos lser (haz de luz monocromtica y coherente de gran
intensidad) cuando este efecto encontr aplicaciones prcticas por la principal razn de que la seal Raman se
intensifica hasta en 1 milln de veces lo que di como nacimiento a la Espectroscopia Raman.
Se sabe que los tomos y las molculas absorben o desprenden energa solamente en paquetes discretos que son
mltiplos de un valor mnimo. La diferencia de energa entre los fotones incidentes y los fotones esparcidos
inelsticamente es exactamente igual a la energa de la vibracin involucrada. En el caso de un elemento o de una
molcula diatmica comnmente slo se tiene un tipo de vibracin activa y por lo tanto slo se tiene un modo de
vibracin que es simtrica, as tambin un solo pico. Una molcula cualquiera presenta varios
modos de vibracin que pueden ser simtricos o asimtricos con respecto a los elementos de simetra. Por lo tanto
una molcula presenta varios picos pero en intensidad y posicin nicos lo cual sirve para identificar los elementos y
compuestos qumicos, bioqumicos y material biolgico.
En trminos de mecnica cuntica, lo cual es una cucharada de otra sopa, el fenmeno del esparcimiento Raman
es visto como la excitacin de un sistema atmico o molecular a un estado virtual de energa menor que las
transiciones electrnicas, pero con una coincidente desexcitacin y un consecuente cambio en la energa vibracional
[4] (ver la figura 3).
Una vez que se elimina la radiacin Rayleigh por medio de filtros hologrficos, el espectro Raman est
compuesto por lo general slo de la seal Stokes que son longitudes de onda mayores a la del haz incidente (seal
positiva). En el eje de las abscisas se grafica la diferencia entre el nmero de onda de la radiacin Raman y el
nmero de onda de la radiacin lser. En el eje de las ordenadas se grafica la intensidad relativa.

= o -e

Se debe aclarar que i =1/i. As que, los picos obtenidos de la seal Raman en realidad son corrimientos
respecto a la o.
El valor inicial del espectro al nmero de onda usado o, define al cero en esta escala (o-o).
A continuacin se presenta un espectro Raman del aire donde sobresalen, como era esperado, los picos del N2 y
del O2. Estos compuestos presentan principalmente dos picos cada uno que corresponde a una vibracin intensa.
Se sabe que no importa el tipo de excitacin que se use como lser, para una misma vibracin molecular siempre
se tendr el mismo valor del corrimiento y por lo tanto la misma posicin en el espectro Raman. Como cada longitud
de onda o frecuencia (), lleva asociada su energa, as; para diferentes lseres se obtendrn diferentes intensidades
de la seal Raman para un modo de vibracin molecular ya que la intensidad es proporcional a o4.
Intensidad, uni. arbitrarias

Corrimiento Raman (), cm-1

Figura 6. Espectro Raman del aire.
Por otro lado, si en la muestra de aire estuviera presente un contaminante, sus picos caractersticos saldran en el
espectro Raman dentro de la escala de corrimiento presentada.

Contaminacin y extraccin simulada con pesticidas

En estos experimentos, el sistema Raman usado fue un Espectrmetro Micro-Raman Renishaw, modelo 1000B,
el cual esta equipado con un diodo lser de 830 nm y 500 mW, monocromador 600 lneas/mm, filtro hologrfico,
cmara CCD con 576x384 pixeles y un microscopio Leica para la visualizacin de las muestras. En la figura 7 se
muestra el sistema.

Figura 7. Equipo Raman comercial con haz lser UV

Un pedazo de cscara de tomate se coloc en un vial en contacto con metanol, observndose que el solvente
adquiere una coloracin rojiza. Las fases se separaron, desechndose el material slido y colocando la fase lquida en
otro vial. Por un lado, se tom 0.5 ml del extracto para su anlisis, el cual nos sirvi como referencia. Otra porcin
del extracto (0.5 ml) se contamin con 0.5 ml de la solucin de malatin (M) y 0.2 ml de la solucin de metil-
paratin (MP). Despus de agitar brevemente las muestras, una pequea porcin de cada una de ellas se coloc en el
substrato de aluminio para su anlisis en el sistema Raman. Los espectros se obtienen una vez que el metanol se
evapor a temperatura ambiente.
En la figura 8 se observa el espectro Raman del -caroteno, obtenido con el sistema Raman al analizar una
gota del extracto de referencia (no contaminado) sobre el substrato de aluminio.
 1155.1

1523.2
Intensidad (u.a.)

1003.7
197.3

950.9
521.3

1274.9

1447.4

200 400 600 800 1000 1200 1400 1600 1800

-1
Corrimiento Ram an ( cm )

Figura 8. Espectro Raman del -caroteno

En la figura 9 se observa el espectro Raman de dos pesticidas en la matriz del extracto de cscara de tomate. En
este espectro se observan los picos ms intensos y caractersticos del MP (857, 1347 y 1590 cm-1) y del M (655 cm-1)
conjuntamente con el espectro Raman del -caroteno. Las mediciones se realizaron a las mismas condiciones
experimentales. Aunque cabe sealar que no se us ninguna tcnica adicional para concentrar en un volumen
reducido a los pesticidas, aunque esto podra aumentar la sensibilidad del mtodo de anlisis propuesto.
1155.1

1524.9
Intensidad (u.a.)

1003.7

1347.1
857.6
655.1

1278.4
961.5
193.7

1590.1
1443.9
519.5
586.4
394.5

200 400 600 800 1000 1200 1400 1600 1800

-1
Corrim iento Raman ( cm )

Figura 9. Espectro Raman del extracto de

cascara de tomate contaminado con malatin

Como se puede apreciar en la figura 9 los picos caractersticos del -caroteno son ms intensos que de los
contaminantes, lo cual ocasiona que estos ltimos no se aprecien muy bien. Se puede realizar una sustraccin de
espectros para disminuir y en algunos casos hasta eliminar el espectro que no es de inters. La figura 10 muestra el
espectro Raman resultante de la figura 9, despus de una sustraccin y correccin de la lnea base. En este espectro
se pueden apreciar con mayor definicin los picos ms intensos y caractersticos del MP y del M.
Con respecto al extracto contaminado de tomate, el hecho de poder diferenciar y an separar en el espectro
Raman del -caroteno los picos caractersticos de los pesticidas usados, es un primer paso en la investigacin de
deteccin de pesticidas a bajas concentraciones. Un estudio ms formal puede ser la contaminacin controlada de
frutas y la extraccin del pesticida as como la cuantificacin de varias concentraciones [5]. O bien, la adicin de
estndares y aplicando la estadstica en la interpretacin de resultados. Una vez que se domine este aspecto, se
pueden analizar muestras reales de verduras y frutas e incluso de tejidos adiposos humanos [6].
 Intensidad (u.a) 1345.3

655.1

1111.1
857.6

1590.1
588.2

400 600 800 1000 1200 1400 1600 1800

-1
Corrimiento Raman ( cm )

Figura 10. Espectro Raman del extracto

contaminado

Los resultados obtenidos para los pesticidas considerados, demuestran que las bandas Raman son fcilmente
discernibles, y que cada espectro Raman individual, puede servir como una huella digital para cada compuesto. Es
de notar que uno o unos pocos picos caractersticos son suficientes para proporcionar identificacin espectral de un
compuesto qumico

REFERENCIAS
[1] Ferraro J. y Nakamoto K. (1994). Introductory Raman spectroscopy, Academic Press, San Diego, California, 11
p.
[2] Colthup N.B., Daly L.H. y Wiberly S.E.
(1990). Introduction to infrared and Raman spectroscopy, Academic Press, San Diego, California , 368 p
[3] Herzberg G. (1991). Molecular spectra and molecular structure. Infrared and Raman spectra of polyatomic
molecules, Krieger, Malabar, Florida, Vol. 2. 239 p.
[4] Garrell R.L (1989). Surface-enhanced Raman spectroscopy. Anal. Chem. 61(6), 401A-411A.
[5] Adou K., Bontoyan W.R. y Sweeney P.J. (2001). Multiresidue method for the analysis of pesticide Residues in
fruits and vegetables by accelerated solvent extraction and capillary gas chromatography. J. Agric. Food
Chem. 49(9), 4153-4160.
[6] Clement R.E., Yang P.W. y Koester C.J. (1999). Environmental analysis. Anal. Chem. 71, 257R-292R.