Introduccin

a la ingeniera
gentica
G UA D I DCTI CA
 Introduccin
a la ingeniera
gentica

N DICE

1 Introduccin 3

2 Gentica, introduccin gentica

y biotecnolgica 4

2.1. Conceptos bsicos de gentica. 5

2.2. Tecnologa del ADN recombinante e Ingeniera Gentica. 6

3 Biotecnologa:
aplicaciones de la ingeniera gentica 7

3.1. Aplicaciones industriales. 7

3.2. Aplicaciones agroalimentarias. 8
3.3. Aplicaciones al medio ambiente. 10
3.4. Aplicaciones en salud. 11
3.5. Clonacin. 13
3.6. Aplicaciones en investigacin. 13
3.7. Proyecto genoma humano. 13
3.8. Impacto de la tecnologa del ADN. Consideraciones ticas y morales. 13

4 Orientaciones didcticas 15

4.1. Educacin primaria. 15

4.2. Educacin Secundaria Obligatoria. 17

G UA D I DCTI CA 2

2
Gentica, Ingeniera gentica y Biotecnologa
La gentica es la ciencia biolgica que estudia la
herencia biolgica, es decir, la transmisin de los ca-
racteres hereditarios a la descendencia, as como de
las molculas responsables de sta.
El conjunto de mtodos y tcnicas que se em-
plean para procesar, estudiar y modificar el ADN
de los seres vivos (tecnologa del ADN recombi-
nante) y sus aplicaciones en distintos campos es lo
que se conoce como Ingeniera gentica. Sus
aplicaciones son:
introducir nuevos genes en un genoma para dar
una nueva caracterstica
eliminar algunos genes existentes en un genoma
para eliminar una caracterstica indeseable
modificar la informacin contenida en un gen
determinado
cambiar las pautas de expresin gnica
clonar seres vivos o alguno e sus rganos o teji-
dos
creacin de especies de animales y plantas
transgnicos (OGM, organismos modificados ge-
nticamente) para mejorar o aumentar la pro-
ductividad agrcola o ganadera, utilizacin de se-
res vivos como biorreactores, etc.
Hasta la ltima mitad del siglo XX la mejora gentica
de plantas y animales se llevaba a cabo mediante
G UA D I DCTI CA
Introduccin
a la ingeniera
gentica
cruzamientos selectivos de distintas variedades de
una especie (hibridacin) con la finalidad de conse-
guir que dichos organismos presentaran caractersti-
cas que mejoraran la produccin.
Desde 1970 se han desarrollado las tcnicas cono-
cidas como tcnicas de ingeniera gentica o tecno-
loga del ADN recombinante. Permiten manipular
(procesar, modificar) el ADN de cualquier organis-
mo: aislar fragmentos, secuenciarlos, modificarlos,
combinarlos con otros de origen diferente, introdu-
cirlos en otro ser vivo Esto es posible gracias a
que todos los seres vivos utilizan las mismas mol-
culas para almacenar su informacin hereditaria,
desde las bacterias hasta las clulas de los organis-
mos animales y vegetales ms complejos. Incluso
los virus, en la frontera entre la vida y la materia
inerte, poseen el mismo lenguaje o cdigo gentico.
La Biotecnologa consiste en la utilizacin de los
seres vivos o sus productos para obtener o modifi-
car otros productos o para dirigir un proceso. El tr-
mino biotecnologa fue aplicado por primera vez en
1919 por Karl Ereky, ingeniero agrnomo hngaro.
Actualmente implica el procesamiento deliberado
del material gentico para la fabricacin o modifica-
cin de un producto, mejora de especies, desarrollar
microorganismos con caractersticas definidas para
un uso concreto o para aplicacin a la salud huma-
na, por nombrar algunos ejemplos.
4
 Introduccin
a la ingeniera
gentica

2.1. Conceptos bsicos de gentica.

ADN: cido desoxirribonucleico

Macromolcula formada por C, H, O, N y P, que se encuentra en el interior de las

clulas. Determina las caractersticas de una clula, como su estructura, la produc-
cin de insulina, de pigmentos, toxinas, etc. y dirige su formacin. Las caractersti-
cas del ADN, y de las protenas que se pueden formar a partir de l, se heredan
de los progenitores.
El ADN est constituido por unas unidades sencillas llamadas desoxirribonucletidos. Hay cuatro ti-
pos distintos que nicamente difieren en la base nitrogenada que poseen: adenina (A), guanina
(G), citosina (C) y timina (T). Una molcula de ADN puede tener millones de nucletidos formando
dos hebras que se unen entre s de forma complementaria (A con G y C con T), retorcindose en
forma de doble hlice. La secuencia de stos constituye la informacin gentica.

El ADN es transmitido de generacin en generacin gracias a su capacidad de autoduplicarse (re-

plicacin). Cada molcula de ADN es capaz de copiarse a s misma. Cada clula hija recibe una
copia idntica de dicha molcula.

ARN: cido ribonucleico

Macromolcula de menor tamao que el ADN, formada por ribonucletidos de adenina (A), citosina (C), guani-
na (G) y uracilo (U), que sustituye a la timina (T). Copia la informacin del un gen del ADN utilizndolo como
molde. Traslada la informacin del ADN a los ribosomas, donde se fabrican las protenas.

Gen Cromosoma

Estructura observable en las clulas eucariotas du-

Porcin de ADN con informacin
rante el proceso de divisin celular. Est formado
para la elaboracin de una protena
por ADN unido a protenas encargadas de darle
o la regulacin de este proceso.
soporte y de colaborar en su expresin.

Protena

Macromolcula de forma globular o fibrilar, cuyas unidades bsicas denominadas aminocidos forman cadenas.
Cada protena posee una funcin determinada en los organismos y se diferencian unas de otras en el nmero
de aminocidos y su secuencia (orden de estos), la cual est determinada por la informacin contenida en uno
o varios genes. Un slo cambio en la secuencia podra variar la funcin de la protena en un organismo.
Aminocido: Molculas simples constituidas por C, H, O, N y S. Existen 20 aminocidos distintos que formen protenas. Cada aminoci-
do posee unas caractersticas qumicas que influyen en la estructura y funcin de la protena de la que forman parte.

Las protenas llevan a cabo mltiples funciones en las clulas: crean estructuras celulares (citoesqueleto, prote-
nas de membrana) o de los tejidos (colgeno); forman las fibras musculares (contrctiles); intervienen acele-
rando las reacciones qumicas necesarias para la vida (enzimas); activan funciones en numerosos rganos
(hormonas); intervienen en los procesos de defensa del organismo frente a las infecciones (anticuerpos); pro-
ducen toxicidad a algunos organismos (toxinas, como Bt); algunos dan color a ciertas estructuras (pigmentos);
transportan sustancias como oxgeno (hemoglobina) o grasas (lipoprotenas).

G UA D I DCTI CA 5

2.2. Tecnologa del ADN recombinan-
te e Ingeniera Gentica.
Se conoce como tecnologa del ADN recombinante
a una serie de tcnicas que permiten cortar, aislar,
pegar, multiplicar y secuenciar fragmentos especfi-
cos del ADN de cualquier organismo. A continuacin
mencionamos las ms importantes.
2.2.1. Secuenciacin del ADN.
Permiten conocer la secuencia de nucletidos del
ADN, es decir el orden en que se encuentran en la
molcula (representados por sus bases nitrogena-
das A, C, G, T).
Se utiliza una molcula de
ADN que se quiere secuenciar
y se procede a obtener varias
copias de distinto tamao de
esa molcula. Se utilizan mez-
clas de nucletidos normales y
nucletidos modificados (que in-
terrumpen la sntesis de la mol-
cula), ms cebadores marcados
radiactivamente; los fragmentos
obtenidos se separan mediante electroforesis en gel. Se revelan
en una pelcula de rayos X y se observan los fragmentos ordena-
dos por tamaos, permitiendo leer el orden en el que estn
dispuestos los nucletidos.
Una vez secuenciado se pueden identificar las re-
giones con informacin para la sntesis de prote-
nas, las regiones que regulan su expresin y de-
ducir la secuencia de aminocidos de la protena
a la que da lugar.
2.2.2. Sntesis de molculas de ADN recombinante.
El ADN recombinante es una molcula de ADN forma-
da por la unin de un gen elegido por producir una ca-
racterstica de inters y una molcula de ADN que ac-
ta como transportadora (vector). Las herramientas
bsicas para esta tcnica son las enzimas de restric-
cin, que cortan el ADN en lugares conocidos, y las li-
gasas de ADN, que unen sus extremos. Las enzimas
de restriccin actan como tijeras que cortan la mol-
cula de ADN por lugares especficos, mientras que las
ligasas son como el pegamento que permite volver a
unir fragmentos a los extremos rotos.
G UA D I DCTI CA
Introduccin
a la ingeniera
gentica
El proceso est explicado con ms detalle en una
transparencia.
2.2.3. Sntesis de ADN complementario (ADNc).
Permite obtener una molcula de ADN sintetizada arti-
ficialmente usando como molde un ARN mensajero
(ARNm) mediante la enzima transcriptasa inversa.
Es til para obtener genes de clulas eucariotas (ani-
males, vegetales, levaduras) que suelen estar inte-
rrumpidos por
fragmentos de
La enzima transcriptasa inversa es de origen
ADN que no vrico y supone la excepcin al dogma de la
tienen informa- biologa molecular que explica el flujo de la in-
cin para la sn- formacin gentica desde el ADN al ARNm y
tesis de la pro- de ste a las protenas. Los retrovirus pueden
obtener un ADN en la clula infectada partir
tena (intrones).
del ARN del genoma vrico y as dirigir la ma-
As se pueden
quinaria celular para la fabricacin de mlti-
conseguir genes ples copias de dicho virus. Los virus de la
sin interrupciones gripe son retrovirus.
para ser incluidos
en microorganis-
mos y que sean stos los que fabriquen el producto,
como es el caso de las bacterias productoras de insuli-
na humana.
1 2
ADN ARN m Protena
3
1. Transcripcin: sntesis de ARNm
2. Traduccin: sntesis de protenas
3. Transcripcin inversa (virus): sntesis de ADN a partir de la
informacin contenida en el ARN vrico.
2.2.4. Sntesis de ADN sinttico o artificial.
Obtencin de pequeos ADN de secuencia conoci-
da mediante un proceso escalonado de adicin de
nucletidos. Se realiza automticamente en sinteti-
zadores de ADN que producen cadenas de unos
100 nucletidos. Permite disear molculas de
ADN (por ejemplo, los cebadores para la sntesis de
ADN en la PCR). La secuencia de nucletidos se co-
noce a partir de la secuencia de aminocidos de la
protena cuyo gen se quiere obtener.
6

2.2.5. Hibridacin de cidos nucleicos.
Para encontrar la localizacin de un gen en un
cromosoma se aade una sonda (fragmento de
ADNc monocatenario o ARN) marcada radiactiva-
mente con la secuencia complementaria del gen
que queremos identificar. El aumento de tempe-
ratura puede desnaturalizar el ADN (se separan
las hebras de la doble hlice) y al disminuirla se
renaturaliza (se vuelven a unir). Si la sonda se
une a una hebra complementaria, al revelar la
radiografa se observa el lugar (locus) donde se
encuentra el gen en el cromosoma. Permite la
realizacin de mapas cromosmicos e identificar
la localizacin de los genes que producen enfer-
medades o cualquier otra caracterstica.
2.2.6. Clonacin de ADN.
El proceso de clonacin del ADN consiste en la ob-
tencin de muchas copias idnticas de dicho frag-
mento. Etapas en la clonacin de un gen:
1. Aislamiento y obtencin del gen: digestin con
endonucleasas de restriccin, separacin de
fragmentos por electroforesis e identificacin del
gen mediante hibridacin. Tambin se pueden
obtener mediante la sntesis de ADNc o de ADN
sinttico a partir de la secuencia de aminocidos
de la protena cuyo gen se desea clonar.
2. Seleccin del vector de clonacin. Depende del
tamao del gen que se quiere clonar y de la c-
lula donde se quiere introducir, normalmente la
bacteria Escherichia coli. Puede ser un plsmi-
do, un virus bacterifago o cromosomas artificia-
les de bacterias (BAC) o de levaduras (YAC).
3. Formacin del ADN recombinante por el proce-
dimiento descrito.
4. Inclusin del ADN recombinante en una clula
hospedadora. En bacterias, mediante el proceso
G UA D I DCTI CA
Introduccin
a la ingeniera
gentica
de transformacin bacteriana (captacin de mo-
lculas de ADN presentes en el medio de culti-
vo) o transduccin (utilizando un virus bacteri-
fago lisognico). En eucariotas, muchas clulas
vegetales pueden recibir ADN externo mediante
la bacteria Agrobacterium tumefaciens portado-
ra del plsmido Ti. Es frecuente utilizar levadu-
ras, cuyo genoma est bien estudiado y son f-
ciles de cultivar (Saccharomyces cerevisiae) o
en clulas animales en cultivo mediante mi-
croinyeccin o usando pistolas de genes que
disparan proyectiles recubiertos de ADN.
5. Comprobacin de la expresin del gen clonado
y seleccin de las clulas hospedadoras que lo
llevan. Adems del gen clonado, suelen llevar
genes marcadores, como genes de resistencia a
antibiticos (slo sobrevive en el cultivo las bac-
terias transformadas) o mediante sondas radiac-
tivas complementarias al gen clonado.
2.2.7. Libreras o genotecas de ADN.
Coleccin de fragmentos de ADN (genes) de un or-
ganismo, aislados e identificados, incluidos individual-
mente en bacterias con el fin de preservarlos y que
est disponibles para su utilizacin. Cada clon de bac-
terias almacena uno de los genes de ese ser vivo.
2.2.8. Reaccin en cadena de la polimerasa (PCR:
polymerase chain reaction)
Tcnica (y mquina) que permite obtener mltiples
copias de un fragmento de ADN (amplificacin).
Fue desarrollada por Kary Mullis en 1985. Es el paso
previo a cualquier aplicacin de dicha molcula: es-
tudio de ADN de restos arqueolgicos o fsiles
(ADN antiguo), criminologa, medicina forense, in-
vestigacin, biotecnologa
6
 Introduccin
a la ingeniera
gentica

Biotecnologa:
3
Aplicaciones de la ingeniera gentica
Ya hemos definido con anterioridad qu es y qu beneficios aporta la biotecnologa. La mejor manera de abor-
dar este enorme campo es ofrecer al docente ejemplos concretos, que, seguro, atraigan ms la atencin y el in-
ters de los discentes.

En la mayora de las aplicaciones biotecnolgicas se utilizan microorganismos. El papel de la ingeniera gentica

es mejorar las caractersticas de stos para optimizar los procesos.

3.1. Aplicaciones industriales

Industrias alimentarias: levaduras

Los microorganismos ms utilizados son las levaduras pertenecientes a la especie Saccha-

romyces cerevisiae. Se usan en la fabricacin del pan, la elaboracin del vino y la cerveza;
tambin para el enriquecimiento proteico de piensos y como complemento diettico, es-
pecialmente la levadura de cerveza, aunque tambin se emplean algas del gnero Spiru-
lina y hongos del gnero Fusarium.

De la levadura Saccharomyces cerevisiae se est explotando su potencial biotecnolgi-

co por su poder fermentador, para desarrollar el sabor y aroma en la industria de la cer-
veza o de la panadera.

Produccin de enzimas para detergentes: lipasas y proteasas

Hoy en da las enzimas forman parte de los procesos industriales y de las actividades domsticas. Por ejem-
plo, al lavar la ropa las enzimas son las que hacen el trabajo sucio de sacar las manchas.

Efectivamente, el detergente en polvo tiene enzimas que remueven selectivamente las manchas de aceites,
protenas o almidones de la ropa. Las enzimas son biocatalizadores, protenas que aceleran los procesos de
degradacin, transformacin o fabricacin de sustancias.

Las enzimas que se usan industrialmente son producidas en grandes cantidades por bacterias y hongos
que se cultivan en tanques fermentadores. Estas enzimas se vienen usando desde hace ms de 40 aos
con el objetivo de reemplazar a los compuestos sintticos, minimizar el uso del agua y el consumo de
energa, ya que antes las manchas slo podan ser eliminadas con blanqueadores y altas temperaturas. La
mayora de las enzimas que estn hoy en el mercado han sido mejoradas por tcnicas de ingeniera de
protenas o provienen de microorganismos genticamente modificados para optimizar su proceso de fa-
bricacin. Muchas de estas enzimas proceden de bacterias adaptadas a vivir a pH bsico (9 a 10) y ter-
mfilas, capaces de alcanzar su mxima actividad a temperaturas superiores a 60C.

G UA D I DCTI CA 7
 Introduccin
a la ingeniera
gentica

Produccin de enzimas para fab

ricacin de papel: Xilanasa

Enzima que facilita el proceso de blanqueado de la pasta de papel por la eliminacin de

lignina. Se consiguen con cultivos de cepas de hongos modificados, a travs de la fermen-
tacin por Trichoderma reesei hongo que sintetiza celulasas y hemicelulasas (Xilanasas)
disminuyendo as la utilizacin de blanqueadores qumicos contaminantes.

Produccin de espesantes: xantn

La bacteria Xanthomonas campestris produce el xantn, con mltiples aplicaciones industriales como agen-
te emulsificante y espesante. Para hacer ms rentable el proceso de produccin industrial, se estn dise-
ando cepas manipuladas de esta bacteria para que pueda usar como fuente de carbono desechos de in-
dustrias, como el suero lctico procedente de las queseras.

Produccin de adhesivos

Se estn intentando producir adhesivos biolgicos por ingeniera gentica.

Por ejemplo, se aisl el gen de una protena adhesiva del mejilln (Mytilus
edulis), y se ha logrado expresar en microorganismos. Se espera que de
tener xito, esta protena adhesiva pueda emplearse en adhesivos para
dentistas y mdicos.

Obtencin de caucho Obtencin de melaninas

Se han iniciado estudios para
ver la viabilidad de obtener
caucho por ingeniera gentica,
a partir de genes de la planta
productora Hevea brasiliensis.
Las melaninas, usadas para bronceadores, protectores solares de plsticos,
etc., se suelen obtener de modo qumico o por procedimientos ineficien-
tes de extraccin de organismos. Se han localizado y aislado los genes de
sntesis de melanina en la bacteria del suelo Streptomyces antibioticus, y
se han transferido a otras bacterias ms fciles de manejar, logrndose
en ellas su expresin.

3.2. Aplicaciones agroalimentarias

Mejora gentica de microorganismos

En la industria alimentaria se han secuenciado los genomas de varias bacterias responsa-

bles de la produccin de derivados lcteos como Lactococcus lactis, Lactobacillus acido-
philus, Lactobacillus bulgaricus o Streptococcus thermophilus, o probiticos como Bifido-
bacterium breve o Bifidobacterium longum. Muchos de estos proyectos han servido
para determinar qu genes son importantes para llevar a cabo los procesos metablicos
de inters industrial o para producir aditivos alimentarios como edulcorantes artificiales
y aminocidos con el propsito de incrementar la eficiencia y reducir su coste.

G UA D I DCTI CA 8
 Introduccin
a la ingeniera
gentica

Biofertilizantes

Para mejorar la capacidad biosinttica de vegetales se utilizan microorganismos fijadores de nitrgeno como
alternativa al uso de nitratos. Se enriquecen los suelos con Rhizobium (bacteria simbionte en las races de le-
guminosas, donde forma ndulos) y bacterias nitrificantes para aumentar la produccin vegetal y disminuir la
contaminacin producida por los fertilizantes convencionales. Se estn intentando conseguir la formacin de
ndulos simbiontes en otros cultivos mediante la introduccin de los genes implicados en el proceso de fija-
cin de nitrgeno en otras plantas que no pertenecen a la familia de las leguminosas

Insecticidas naturales: maz transgnico

El Bacillus thuringiensis es una bacteria natural del suelo, produce una toxina (protena Bt) txica para cier-
tos insectos que ocasionan plagas en los cultivos, como el escarabajo barrenador del maz (Ostrinia nubila-
lis) o el escarabajo colorado de la patata. Ha sido utilizada durante aos como bioinsecticida al ser inofensi-
va para otros insectos, animales y humanos.

con informacin para sintetizar la protena Bt al genoma de la semilla del maz, producindose plantas re-
sistentes a ciertas larvas de insectos.

secticida, al ser rociados los cultivos con ellas. Cuando los insectos se alimentan de las plantas ingieren
las bacterias y las toxinas.

Arroz dotado con vitamina A

El Arroz Dorado es un arroz modificado genticamente para acumular en su embrin betacaroteno y otros
carotenos, que son precursores de la vitamina A. Este betacaroteno extra es el que le otorga un caractersti-
co y peculiar color dorado, y da origen a su nombre. Este arroz acumula 1,6 mg/kg de provitamina A.

El Arroz Dorado pretende aportar vitamina A extra a las poblaciones que no consumen la suficiente canti-
dad de esta vitamina imprescindible en su dieta diaria. De este modo, el Arroz Dorado contribuir paliar la
avitaminosis en los pases en vas de desarrollo.

Plantas transgnicas

Ya hemos mencionado el ejemplo del maz resistente a plagas de insectos. En otros cultivos tambin se ob-
tienen nuevas caractersticas por ingeniera gentica para mejorar su produccin: algodn resistente a lepi-
dpteros; retraso de maduracin en el meln y en el tomate; soja, acelgas, trigo y alfalfa resistente a
herbicidas En muchos de los casos se emplea para su modificacin el plsmido Ti de la bacteria Agro-
bacterium tumefaciens.

Se han conseguido plantas transgnicas con distintas capacidades: resistencia a plagas, retraso en la madu-
racin del fruto, vegetales enriquecidos con protenas animales (arroz dorado) o productores de molculas
de inters industrial (Arabidopsis thaliana produce polmeros plsticos biodegradables)

Las principales plantas transgnicas son: soja, maz, algodn, arroz, colza, patata, tomate, tabaco, cla-
vel. Algunas de sus modificaciones se nombran en la pelcula: claveles azules, patata con vacuna
contra el clera

G UA D I DCTI CA 9
 Introduccin
a la ingeniera
gentica

3.3. Aplicaciones al medio ambiente

Biorremedacin

Los organismos hidrocarburoclsticos son bacterias y hongos capaces de degradar petrleo utilizn-
dolo como mtodo de subsistencia, la ingeniera gentica trabaja en la mejora de sus procesos me-
tablicos de degradacin. Siendo muy tiles para la eliminacin de petrleo en caso de desastres
ecolgicos o en la limpieza de tanques en refineras de petrleo. Algunas especies importantes en
el proceso de biorremediacin causado por hidrocarburos son: Pseudomonas, Nocardia, Acineto-
bacter, Aspergillus o Mucor.

Se utilizan tambin microorganismos tradicionales o mejorados genticamente, como las bacterias del g-
nero Pseudomonas, para la eliminacin de pesticidas xenobiticos (que no existen de forma natural), de
metales pesados procedentes de la minera y la industria y de residuos industriales.

Biodegradacin: Produccin de plsticos biodegradables

Ciertas bacterias como Ralstonia eutropha producen unos grnulos de reserva a base de sustancias que
muestran notables propiedades termoplsticas y elsticas. Otro ejemplo de bacteria utilizada para la produc-
cin de estos bioplsticos es Alcaligenes eutrophus. Se han diseado cepas de bacterias con los genes de
biosntesis de estas sustancias, y ya hay empresas que fabrican estos plsticos biodegradables para fabrica-
cin de envases transparentes como el cristal, fabricar tejidos, o para usos especiales, como dispositivos
mdicos. Es posible que en un futuro los precios sean competitivos y que se puedan ir sustituyendo los
plsticos sintticos y contaminantes por los bioplsticos, biodegradables y dependientes de biomasa y re-
cursos naturales renovables

Biocombustibles: biogs y biodisel

Estos biocombustibles (etanol, metanol, biodisel, metano, hidrgeno) se obtienen a partir de la bio-
masa, es decir, de la materia de origen animal o vegetal, y se emplean como combustibles para ve-
hculos a motor o para producir electricidad (centrales trmicas de ciclo combinado). El etanol se
obtiene por fermentacin de los hidratos de carbono contenidos en el maz o la patata. El biodisel
se obtiene a partir de los aceites producidos por algas o plantas como la soja, en muchos casos
modificada genticamente.

Eliminacin de residuos humanos: depuracin de aguas

Se utilizan bacterias mejoradas genticamente para optimizar los procesos de compostaje en el que los mi-
croorganismos degradan la materia orgnica de los residuos o de la basura mediante fermentaciones y se
obtiene el compost, un producto utilizable como sustrato para cultivos vegetales.

G UA D I DCTI CA 10
 Introduccin
a la ingeniera
gentica

3.4. Aplicaciones en salud

Terapia gnica: tratamiento contra el cncer

La terapia gnica es una forma de combatir una enfermedad de origen gentico mediante la prevencin, tra-
tamiento y curacin por medio de la insercin de genes no causantes de la enfermedad o que modifiquen
la expresin de los genes patgenos. Enfermedades como el cncer, el Alzheimer, el Parkinson o la diabetes
son objetivos en la investigacin en terapia gnica.

El cientfico espaol Bernat Soria ha conseguido clulas secretoras de insulina a partir de un cultivo de clulas
embrionarias de ratn. Esta aplicacin podra suponer un importante avance en la lucha contra la diabetes.

Otro ejemplo es la insercin de genes supresores de tumores, como el p53, que codifica una protena re-
guladora del crecimiento celular y aparece mutado en la mayor parte de los cnceres.

Existen dos formas de aplicar terapia gnica. Ex vivo: se extrayen clulas del paciente, se modifican median-
te un gen clonado y se implantan las clulas transgnicas en el rgano afectado para que se multipliquen y
desarrollen de forma normal su funcin. In vivo, se inyecta en sangre el gen teraputico para que alcance
las clulas afectadas o, incluso, introducindolo directamente en el tejido afectado.

Diagnstico clnico

Se utilizan sondas de ADN, que son fragmentos de ADNc marcados, complementarios de una de las he-
bras del gen buscado. Se utilizan para la prevencin y diagnstico del cncer o para detectar la presencia
de patgenos.

Obtencin de protenas de mamferos insulina.

Organismos transgnicos: hormona crecimiento

Insulina humana: La insulina es una hormona
proteica constituida por 51 aminocidos. La insulina
es el primer caso de protena producida por inge-
niera gentica, aprobada para uso en humanos
desde 1982. En la actualidad, varios laboratorios
farmacuticos producen insulina humana, tanto a
partir de bacterias (Escherichia coli) como de leva-
duras (Saccharomyces cerevisiae), y sin ningn
riesgo para la salud. Actualmente se est estudian-
do su obtencin a partir de pncreas de vacas o
cerdos mediante ingeniera gentica.
Hormona del crecimiento: En un campo ar-
gentino, ya pasta la segunda generacin de vacas
clones y transgnicas. Son dos terneras, copias de
una vaca llamada Pampa Mansa, que haba naci-
do en agosto de 2002. Tienen en su interior un
gen que, al expresarse, har que los animales pro-
duzcan en su leche la hormona de crecimiento
humano (STH o GH), que servira para tratar el
enanismo hipofisiario.

G UA D I DCTI CA 11
 Introduccin
a la ingeniera
gentica

Obtencin de rganos. Cerdos transgnicos y ratones knockout

En los transplantes de rganos procedentes de animales, como en el de corazn, se est investigando en la

produccin de cerdos transgnicos, cuyas caractersticas inmunitarias hayan sido alteradas para evitar el re-
chazo, principal problema que aparece en el postoperatorio.

Otro caso interesante es el de la produccin de animales knockout, cuya caracterstica es que han sido
modificados para introducirles un alelo mutante que no es funcional. De esta forma se puede investigar los
efectos de la falta de expresin del gen no mutado y de terapias para rectificar su defecto. Un caso fre-
cuente es el de los ratones con el gen p53 inactivado, gen supresor de tumores.

Obtencin de vacunas: hepatitis B

Fue la primera vacuna obtenida por recombinacin. La causa fue la aparicin

del virus VIH, causante del SIDA, que elimin la posibilidad de utilizar el plas-
ma de enfermos de hepatitis para obtener la vacuna contra el virus de la he-
patitis B. Una vez clonado el virus VHB se obtuvo el gen por tcnicas de re-
combinacin. Se utilizan levaduras para clonar dicho ADN recombinante y
extraer y purificar los antgenos responsables de la inmunidad frente al virus.

Fue autorizado su empleo en 1986 y su eficacia es igual a la vacuna obteni-

da a partir de plasma humano.

Produccin de hemoglobina humana en cerdos

Recientemente se est empleando la tecnologa de ingeniera gentica para la produccin de animales

transgnicos (ratas, cerdos) que puedan sintetizar Hb humana, lo que se logra a travs de la introduccin
de genes de Hb humana en los cigotos inmediatamente despus de la fertilizacin. En estudios en cerdos
transgnicos se ha observado que la Hb producida es estable y su produccin se transmite a la prxima ge-
neracin. A partir de la sangre del cerdo puede separarse la Hb humana de la animal de forma fcil por
tcnicas de cromatografa.

Produccin de anticoagulante en leche: cabras transgnicas

Se ha conseguido unir al gen de la b ca- Gen codificador de la casena

de la leche

sena de la leche un gen anticoagulante

(Atryn) para conseguir un frmaco fcil
de obtener en la leche de cabra. El
transgn se incorpora por microinyec-
cin a un embrin de cabra. Posterior- +
mente se inplanta en el tero de la ca- Embrin inyectado
con el transgn Cabra productora de Leche con el
leche con el anticoagulante
bra nodriza. Los animales que se anticoagulante
Transgn
obtienen son seleccionadas para obte-
Gen codificador
ner descendencia de cabras producto- del anticoagulante

ras del anticoagulante en su leche

G UA D I DCTI CA 12

3.5. Clonacin
La clonacin consiste en la obtencin de copias idn-
ticas de una molcula o de un ser vivo. Se pueden
clonar genes (paso imprescindible en cualquier apli-
cacin de ingeniera gentica), clulas (para cultivos diar rutas metablicas, por ejemplo), obtencin de
celulares), tejidos, rganos e, incluso, seres vivos.
En biotecnologa aplicada a la agricultura, se pueden
producir plantas completas a partir de una clula
modificada genticamente. En aplicaciones indus-
triales es muy frecuente la clonacin de levaduras.
La clonacin de clulas animales permite realizar
cultivos de tejidos en el laboratorio. Es de mucho in-
ters el cultivo de clulas madre, especialmente
de clulas madre embrionarias que, al no estar an
diferenciadas, tienen activados todos sus genes y,
por tanto, son totipotentes.
La obtencin de organismos clnicos se inaugur
con la creacin de la oveja Dolly, en 1996, por un
equipo de investigadores del Instituto Roslin de
Edimburgo. En su caso se utiliz una tcnica de
transferencia nuclear de clulas de glndula mama-
ria cultivadas in vitro a un ovocito no fecundado cu-
yo ncleo haba sido extrado.
Actualmente se obtienen animales clnicos mediante
dos tcnicas. Por disgregacin de clulas embriona-
rias (de manera semejante a la que da lugar a los ge-
melos idnticos) y por transferencia del ncleo desde
una clula embrionaria a un ovocito enucleado, de tal
forma que al fusionarse ambas clulas, el clon se
comporta como si fuera un cigoto que, al desarrollar-
se, dar lugar a un nuevo individuo. De esta forma se
obtienen actualmente terneros clnicos.
3.6. Aplicaciones en investigacin.
Las huellas genticas de ADN permiten la aplicacin
de las tcnicas de ingeniera gentica en medicina
forense de gran utilidad en investigacin policial, la
realizacin de pruebas de paternidad, etc. a partir de
pequeas muestras de tejido, sangre, pelos
G UA D I DCTI CA
Introduccin
a la ingeniera
gentica
Tambin es importante su aplicacin para estudios
evolutivos (estudio de ADN antiguo, presente en canti-
dades muy pequeas en restos fsiles), estudios de
migracin, estudios arqueolgicos, mutagnesis dirigi-
da (la fabricacin de organismos mutantes para estu-
ARN en grandes cantidades (transcripcin in vitro) para
investigacin en biologa molecular, etc.
3.8. Proyecto genoma humano.
Este programa, iniciado por la empresa Celera Ge-
nomics en 1990, tena la finalidad de secuenciar el
genoma completo de la especie humana. Las tcni-
cas de ingeniera gentica han permitido completar
dicha secuencia en el ao 2003. La secuencia con-
tiene unos 3.000 millones de nucletidos, y se cree
que existen aproximadamente unos 40.000 genes.
El conocimiento de los genes humanos, su estructu-
ra y localizacin, abre una inmensa puerta a la in-
vestigacin de enfermedades, del envejecimiento,
de la interaccin entre genes, descubrir e identificar
nuevos genes
3.9. Impacto de la tecnologa del ADN.
Consideraciones ticas y morales.
Los avances alcanzados tanto en investigacin como
en las aplicaciones de la tecnologa del ADN han
abierto una puerta a la esperanza a la humanidad:
diagnstico, prevencin y curacin de enfermeda-
des, eliminacin del hambre y la malnutricin en el
mundo, correccin de los daos producidos al me-
dio ambiente, aumento de la produccin de alimen-
tos con reduccin del impacto ambiental que supo-
ne la enorme extensin de cultivos a nivel
planetario y el empleo de fitosanitarios, obtencin
de combustibles alternativos a los tradicionales, eli-
minacin de residuos
Sin embargo, se plantean un gran nmero de interro-
gantes de difcil respuesta. En primer lugar, porque
an no existen estudios concluyentes que demues-
13

tren los supuestos efectos negativos, ni mucho me-
nos los que podran aparecer a largo plazo (recorda-
mos que la ingeniera gentica y sus aplicaciones
arrancan en la dcada de los 70 en el pasado siglo
XX). En segundo lugar, porque existen intereses multi-
millonarios que se encuentran en manos de unas po-
cas empresas biotecnolgicas y la legislacin an es
vaga, especialmente en algunos pases en que llega a
ser inexistente. Quin pone lmites a las prcticas de
estas empresas? Quin legitima sus investigaciones
y actuaciones? La respuesta no es sencilla, pues bus-
carla corresponde a la sociedad entera.
La biotica puede ayudarnos a indagar en los pro-
blemas ticos planteados por la investigacin bio-
mdica y la biotecnologa cuando stos influyen y
afectan a la propia vida, la humana y la del resto
de seres vivos.
SUGERENCIAS
Las patentes de los genes modificados, son
patrimonio de la humanidad? son los meca-
nismos que permiten a las empresas finan-
ciar sus carsimas investigaciones?
Provocarn los monocultivos transgnicos
prdida de biodiversidad?
Los organismos modificados genticamente
(transgnicos), pueden afectar al medio am-
biente? con qu fin son diseados?
Estas y otras muchas preguntas tendrn una respuesta
muy distinta segn quien las conteste.
G UA D I DCTI CA
Introduccin
a la ingeniera
gentica
Como profesores, ser muy interesante fomentar el
dilogo y el espritu crtico de nuestros alumnos si
somos capaces de suministrar la suficiente informa-
cin, desde todos los puntos de vista y desde todos
los agentes implicados, como para establecer deba-
tes en el aula que completen y doten de significado
los contenidos relacionados con la ingeniera genti-
ca y la biotecnologa.
Sugerimos, pues, la consulta en la bibliografa que
aportamos y la visita a las pginas web de las em-
presas biotecnolgicas, las asociaciones ecologistas
y de defensa de los derechos del ciudadano y de
los consumidores, as como las de los organismos
de investigacin y administrativos. Basta escribir en
cualquier buscador trminos tan sencillos como
transgnico, biotecnologa, agricultura, ADN recombi-
nante, clonacin
La tecnologa terminator, que produce semi-
llas estriles, produce dependencia de las
multinacionales de semillas?
Qu fines de la clonacin, la investigacin
con clulas madres, la seleccin de embrio-
nes, pueden considerarse ticos?
Es respetable la idea de la eugenesia?
14