UNIVERSIDAD AUTNOMA DE AGUASCALIENTES

DEPARTAMENTO DE FISIOLOGA Y FARMACOLOGA

CENTRO DE CIENCIAS BSICAS

MANUAL DE PRCTICAS DE LABORATORIO

Materia: Fisiologa General

Carrera: Mdico Veterinario Zootecnista
Semestre: Segundo
 UNIVERSIDAD AUTNOMA DE AGUASCALIENTES
DEPARTAMENTO DE FISIOLOGA Y FARMACOLOGA
CENTRO DE CIENCIAS BSICAS

REGLAMENTO Y MEDIDAS DE SEGURIDAD A SEGUIR EN LOS

LABORATORIOS DE PRCTICAS DOCENTES

Sobre el uso del laboratorio:

Con anterioridad a la realizacin de la prctica, los alumnos debern leer el texto

completo de la misma, y llevar por escrito los pasos experimentales a desarrollar.

El uso de bata es obligatorio durante todo el desarrollo de la prctica.

Est prohibido comer, fumar, beber o masticar chicle dentro del laboratorio.

Usar guantes de ltex desechables y cubre-bocas cuando se trabaje con muestras

biolgicas y /o material patolgico.

Se deber informar inmediatamente al profesor o al tcnico de laboratorio de

cualquier accidente que ocurra durante la prctica.

Slo se llevarn a cabo los procedimientos descritos en los instructivos de la

prctica.

Al terminar cualquier experimento el profesor o el tcnico indicarn a los

estudiantes donde deben colocarse los residuos segn su naturaleza (peligrosos,
punzocortantes, biolgico-infecciosos,etc.).

Los alumnos siempre consultarn al profesor responsable, instructor o tcnico

encargado, para aclarar cualquier duda.

Antes de retirarse del laboratorio los alumnos debern dejar limpio su lugar de
trabajo.

Recomendaciones en caso de contaminacin con materiales biolgico infecciosos.

1. Retirar la ropa contaminada y colocarla en un contenedor de material biolgico-

infeccioso, lavar la zona contaminada con abundante agua y jabn, y luego desinfectar
con alguna solucin antisptica.
2. Si se ocasion alguna herida, oprimir suavemente la zona circundante a la misma
hasta que salgan algunas gotas de sangre, y luego proceder como en el paso anterior.
Acudir a revisin mdica de manera inmediata, y despus en caso de que se presente
cualquier sntoma de infeccin.
3. En caso de derramamiento de alguna muestra biolgica, desinfectar el rea con
hipoclorito de sodio al 5%. Depositar los material biolgico-infecciosos utilizados en
los contenedores correspondientes.

Recomendaciones en caso de shock y traumatismo.

No dar de beber a la persona. No sobrecalentarlo. Solicitar ayuda mdica de inmediato.

Sntomas: piel plida, fra y hmeda, de color moteado. La respiracin es dbil o
profunda, pero irregular; apata y nusea.
1. Acostar a la persona. Colocar una cobija debajo si la superficie est fra o hmeda,
pero NO moverla si tiene (o se sospecha ) de alguna lesin en cuello o espalda.
2. Si la persona accidentada presenta alguna lesin en la cabeza, elevarle el cuello y
hombros.
3. Elevarle las piernas 30 centmetros a menos que le cause dolor o tenga una lesin.
4. Cubrirla suavemente con una cobija.

Recomendaciones en caso de envenenamiento por ingestin.

Inmediatamente llamar al centro de salud ms cercano y solicitar ayuda mdica,

informando detalladamente sobre la naturaleza de la sustancia txica ingerida. Guardar
el recipiente en el que se encontraba la sustancia txica y guardar el vmito en caso de
presentarse. Observar la respiracin cuidadosamente.

Recomendaciones en caso de shock elctrico.

No tocar a la persona directamente mientras se encuentre en contacto con la corriente

elctrica. Solicitar ayuda mdica de inmediato.

1. Tratar de desconectar la corriente quitando el fusible o desenchufando el cable

elctrico. Si eso no es posible , subirse sobre algo seco (una cobija, tapete de hule,
peridicos, etc.) y jalar o empujar a la persona accidentada con una tabla o palo seco.
2. Si es necesario comenzar a darle respiracin artificial inmediatamente, y segn el
caso, dar tratamiento para quemaduras, shock y traumatismo.
 DEPARTAMENTO DE FISIOLOGA Y FARMACOLOGA
CENTRO DE CIENCIAS BSICAS
PROGRAMA DE PRCTICAS
LABORATORIO DE FISIOLOGA
MEDICO VETERINARIO ZOOTECNISTA
AGOSTO - DICIEMBRE
2007

CARRERA:
SEMESTRE:
MAESTRO:

PRCTICA MATERIAL FECHA

BIOLOGICO PROBABLE
ANATOMA MACROSCOPICA DE LA RATA 6 MACHOS Y
HEMBRAS
FISIOGRAFO
POTENCIAL DE ACCIN COMPUESTO 2 RANAS
MUSCULO ESQUELETICO 3 RANAS
UNIN NEUROMUSCULAR 3 RANAS
MUSCULO LISO 1 CONEJO
MUSCULO CARDIACO 3 TORTUGAS
CICLO CARDIACO
CONTROL SIMPATICO Y PARACIMPATICO 1 PERRO
DE LA PRESIN ARTERIAL
FORMACIN DE ORINA 1 PERRA
MODELO MECNICO DEL PULMN ---
 ANATOMIA MACROSCOPICA DE LOS SISTEMAS DE ORGANOS

INTRODUCCION:

Para estudiar muchos fenmenos fisiolgicos que intervienen en la funcin del

organismo humano, se emplean mtodos que desde luego, no pueden aplicarse al hombre.
Casi siempre los fisilogos utilizan animales que van desde primates hasta las formas ms
elementales de vida animal, tanto en enseanza como en investigacin. La prctica que
ahora se presenta, permite que el estudiante empiece a conocer a la rata como modelo
experimental de mamfero, se percate de la anatoma macroscpica de los principales
sistemas de rganos y adquiera prctica en ciertas manipulaciones para otros experimentos.

La rata constituye un excelente modelo de estudio desde el punto de vista anatmico y

en gran parte fisiolgico, debido a la considerable similitud que tiene con el ser humano.

OBJETIVOS:

1) Manejo de la rata en el laboratorio.

2) Observaciones bsicas en la rata anestesiada.
3) Aprender a aplicar inyecciones subcutneas, intramusculares e intraperitoneales.
4) Identificar y disecar los diferentes rganos que conforman a cada sistema orgnico
(msculo esqueltico, cardiovascular, respiratorio, digestivo, excretor, reproductor,
endocrino e inmune)
5) Correlacionar los diferentes sistemas de rganos con sus respectivas funciones.

MATERIAL:

1) Rata, 2) jaula para rata, 3) balanza para animales pequeos, 4) mesa de

disecciones, 5) hilo camo doble cero, 6) algodn, 7) cmara de anestesia, 8) mascarilla
para anestesia, 9) ter etlico, 10) jeringas de 1 y 10 ml, 11) solucin salina isotnica, 12)
estuche de disecciones, 13) tubo para ventilacin pulmonar, 14) aguja metlica del # 18 con
punta de plstico, 15) guantes de tela, 16) corazn de res.

MANEJO DE LA RATA ALBINA

Durante hace muchas generaciones las ratas de laboratorio se han habituado a ser
manejadas por el hombre. Recuerde pues, que si ste es su primer contacto con la rata
albina, el novicio es usted. Las ratas muerden, sin embargo, las criadas en el laboratorio
raramente lo hacen mientras no se les trate mal. Las siguientes maniobras le permitirn
manejar las ratas sin riesgo. La cola es un apndice muy conveniente para el manejo del
animal y permite levantarlo sin hacerle dao. Incluso, cuando se sujeta de la cola, la rata
trata de alejarse; en este estado inmvil y ocupada en otra cosa, se sujeta poniendo el dedo
ndice y el dedo medio de la otra mano alrededor de la cabeza y extendindolos por debajo
de la mandbula inferior y no sobre la garganta, pues la rata no suele comprender por qu
debera cooperar con quien intenta estrangularla.
 Es aconsejable no levantar las ratas por la cola, pues son bastante giles para girar
en el aire y trepar por su propia cola. No es muy sorprendente, que una rata en estas
condiciones se sienta inclinada a morder. Doblando un poco la mano que sujeta a la cabeza,
el cuerpo de la rata queda acostado sobre la palma de la mano. No debe agarrarse o
apretarse el cuerpo del animal con los otros dedos, pues esta presin resulta molesta y
puede desencadenar movimientos de defensa. No es tiempo perdido, sino muy bien
invertido, aquel que se gasta en manejar a la rata, pasndola de una jaula a otra, o de ah a
la mesa, acostumbrndose tanto el animal como el estudiante al conocimiento mutuo.

Una rpida comparacin entre la rata y alguno de sus compaeros mostrar de

inmediato ms diferencias que similitudes. Las diferencias ms notables son el tamao y el
peso. El peso que guarda relacin con el tamao, es un parmetro til para dosificar
frmacos y comparar fenmenos fisiolgicos en distintas especies. Para pesar a la rata,
conviene una balanza de resortes con un rango 0 a 2 000 g. y una exactitud del orden de 1
g. Siempre debe pesarse el animal de experimentacin y anotar el sexo y la edad en la hoja
de resultados.

ANESTESIA

En esta prctica se utilizar el ter etlico como anestsico. El ter es un lquido

voltil y muy inflamable por lo que cuando se utiliza debe haber una ventilacin adecuada
y no deben existir llamas libres en el laboratorio ni se debe fumar. Como cmara de
anestesia se usar un frasco de boca ancha con tapa, en cuyo fondo se ha colocado un trozo
de algodn empapado con ter etlico y se coloca una malla de alambre sobre el algodn.

Antes de anestesiar a la rata deber tomar en cuenta lo siguiente: una buena

anestesia requiere de una vigilancia constante y estrecha. Por lo tanto, en cada prctica la
responsabilidad debe recaer en un solo estudiante. Dicha funcin pues, ser rotatoria entre
los miembros del grupo en las distintas prcticas. El estudiante que resulte anestesista en
algn experimento, ser responsable del nivel de anestesia durante la duracin del mismo y
no deber en ningn momento relegar esta responsabilidad a otro miembro del grupo.

Pese a la rata y observe y retenga en su memoria las caractersticas de la rapidez y la

profundidad de las respiraciones. Meta al animal en el frasco de anestesia tapndolo
inmediatamente. Observe como disminuye la frecuencia y la profundidad de las
respiraciones al irse instalando la anestesia. Cuando la rata se ha quedado dormida squela
inmediatamente y contine la anestesia con la mascarilla de anestesia (frasco pequeo con
algodn humedecido con ter en el fondo). Mantenga la anestesia humedeciendo de cuando
en cuando el algodn con algunas gotas de ter.

Debe vigilarse continuamente el plano de anestesia para que el animal no se

despierte ni llegue a un plano tan profundo que las respuestas fisiolgicas por estudiar dejen
de presentarse. Ya que la funcin fundamental de la anestesia es la abolicin del dolor,
determine la respuesta a los estmulos dolorosos pinchando las orejas o la cola y buscando
reflejos de flexin o cualquier otro movimiento. Otro buen criterio para conocer el nivel de
anestesia (profunda, superficial o quirrgica) es la observacin de la frecuencia y
profundidad de la respiracin. Para esto, usted ya tomo nota de la frecuencia y profundidad
de las respiraciones en la rata despierta, y esas caractersticas se comparan con los cambios
que muestra la respiracin al instalarse la anestesia. Cuando los movimientos respiratorios
son muy lentos y superficiales, la anestesia es demasiado profunda. Si la respiracin se hace
rpida y profunda, la anestesia es demasiado superficial. En caso de anestesia demasiado
profunda, esta puede progresar hasta provocar la muerte del animal. Si se juzga que la
anestesia ha ido demasiado lejos, retire la mascarilla. Acerque o retire la mascarilla segn
las necesidades. Mdase el tiempo que se requiere para profundizar la anestesia hasta que
aparezca una respiracin lenta y poco aparente, mdase luego el tiempo para que el nivel
pase al correspondiente a una respiracin rpida y profunda (anestesia superficial). Se deja
que la rata se estabilice en un plano medio (quirrgico) que deber mantenerse en los pasos
siguientes.

Los dems aspectos de la prctica, no deben distraernos al punto de que la

mascarilla quede lejos de los animales hasta que ste se despierte.

INYECCIONES

Aunque la inyeccin de sustancias qumicas y medicamento puede hacerse por

mltiples vas, aqu practicaremos las siguientes: subcutnea, intramuscular e
intraperitoneal.

a) Inyeccin subcutnea. Si la rata est despierta se necesitan dos personas, una

que sujeta al animal y la otra que aplica la inyeccin. Al llegar a este punto se supone que
usted es capaz de manejar al animal sin riesgos de ser mordido por l. Por lo tanto, para
aplicar la inyeccin subcutnea, el animal estar sujeto por el cuello con los dedos ndice y
medio de una mano y recostado sobre la palma de la misma, despus con la mano libre
tome las extremidades posteriores del animal y extindalas lo suficiente hasta evitar
movimientos, la presin que ejerza sobre ellas no debe lastimar al animal. El compaero
prepara la jeringa con solucin salina isotnica, a una dosis de 0.1 ml/100 g de peso
corporal. Proceda a exponer la rata al compaero que va a inyectar. Este, levantar un
pliegue de la piel en el sitio escogido e introducir la aguja de la jeringa hasta llegar al
espacio subcutneo en donde inyectar el lquido de la jeringa. Se saca la aguja y se frota el
lugar de la inyeccin para cerrar el orificio hecho por la aguja. Cada integrante del equipo
debe realizar varias inyecciones subcutneas de prctica sobre la rata anestesiada, hacerse
luego de una rata despierta y realizar cuando menos una inyeccin subcutnea exitosa.

b) Inyeccin intramuscular. Sujete al animal segn se describi, tome una de las

extremidades inferiores y exponga el muslo en forma lateral. El estudiante que aplicar la
inyeccin ya tendr la jeringa con la dosis de solucin salina preparada (0.1 ml/100 g. de
peso corporal); a continuacin palpara el muslo para reconocer la zona de mayor masa
muscular y colocando la aguja en posicin oblicua al muslo, la introducir
aproximadamente hasta la mitad de la masa muscular y lentamente introducir la solucin.
Saque la aguja en la misma direccin en la que fue introducida.

c) Inyeccin intraperitoneal: Sujete al animal con una mano y con la otra tmela
de las patas posteriores y extindalas de tal manera que el abdomen del animal quede tenso
y expuesto al compaero que realizar la inyeccin. El compaero que inyecta deber
identificar el cuadrante inferior izquierdo del abdomen, ya que en esta zona no hay rganos
vitales, excepto el intestino delgado. Aplique la punta de la aguja en el sitio escogido y con
un movimiento rpido introduzca la aguja con la jeringa, previamente preparada, a travs
de la pared abdominal, al hacerlo se percibe claramente cuando la pared cede al empuje de
la aguja. Tenga cuidado de introducir solamente la punta de la aguja en la cavidad
peritoneal, ya que existe el riesgo de perforar el intestino. Una vez en el peritoneo, inyecte
la solucin y saque la aguja en la misma direccin en la cual entr. Los lquidos inyectados
en el peritoneo no tienen que estar a la temperatura del cuerpo, pero es mejor calentarlos.

Cada integrante del grupo debe practicar cada tipo de inyeccin sobre la rata
anestesiada y luego cuando menos una en una rata despierta.

SISTEMAS DE RGANOS

Como el hombre, la rata posee diferentes sistemas de rganos (msculo-esqueltico,

cardiovascular, urinario, respiratorio, digestivo, nervioso, endocrino, reproductor, inmune y
hematopoytico. Desde muchos puntos de vista, puede considerarse que estas divisiones
son arbitrarias, pues la funcin total del organismo requiere de la actividad integrada de
todos los sistemas.

En la presente prctica no se sigue el orden mencionado anteriormente, ya que la

comodidad de diseccin y la conveniencia de observar ciertos rganos mientras el animal
todava vive obligan a proceder diferente. Sin embargo, una vez que se ha terminado, se
revisar toda la anatoma de la rata y se harn esquemas simples de los sistemas de rganos
para compararlos con los esquemas de texto referentes al ser humano.

Continuando con la anestesia es la misma rata, extindala boca arriba sobre la mesa
de disecciones, amarre las patas con hilos del doble cero y sujtelas a los lados de la mesa.

Anatoma externa de la rata: Proceda a identificar las diferentes estructuras

externas. En la cabeza, identifique las ventanas nasales, vibrisas, labio leporino, boca,
incisivos superiores e inferiores, el pabelln auricular y meato auditivo externo. En las
extremidades anteriores los dedos y el pulgar vestigial. Identifique sobre el trax y el
abdomen las lneas mamarias. En la parte baja del abdomen localice la abertura del
prepucio y el escroto en el macho y en la hembra la abertura urinaria, la vulva y el orificio
genital, y en ambos casos el ano. En las extremidades posteriores observe los cojinetes
plantares, la rodilla y el muslo. Finalmente observe la cola con sus escamas.

Diseccin de la rata: Con la rata an anestesiada, se hace una incisin en la lnea

media a travs de la piel de la superficie ventral, desde el ngulo anterior del maxilar
inferior hasta la snfisis del pubis. Se separan los bordes de la piel y se retraen hacia los
lados. A continuacin se introduce la punta de las tijeras directamente en la lnea media en
el extremo inferior de la caja torcica a un lado del apndice xifoides. Al abrir la cavidad
torcica los pulmones ya no pueden funcionar, por lo que debe suspenderse la anestesia. El
efecto del ter residual en la rata, bastar para mantener un nivel aceptable de anestesia y
evitar que la rata perciba los estmulos dolorosos. El sistema nervioso central pronto deja
de funcionar en condiciones de anoxia y la muerte se produce rpidamente.
 Sistema respiratorio y sistema cardiovascular. Apoyndose en el esquema de las
figura 39, abra la cavidad torcica. Para esto, use como referencia el orificio hecho a nivel
del apndice xifoideo y pegndose lo ms posible a la pared costal, crtela hacia arriba
siguiendo primero una de las lneas mamarias (a un lado del esternn), hasta la clavcula del
mismo lado. Repita la maniobra en el lado opuesto. Levante y separe la parrilla costo-
esternal. Esta maniobra deja expuesta toda la cavidad torcica. Observe los pulmones que
se han retrado y el corazn que contina latiendo. El animal hace algunos intentos por
respirar. Observe la contraccin de los msculos respiratorios, en especial el abombamiento
y aplanamiento del diafragma que separa el trax del abdomen.

Meta el hocico de la rata en el tubo de ventilacin pulmonar y sople con cuidado.

Observe la distensin pulmonar. Quite el tubo y note como el aire sale de los pulmones.
Observe los latidos del corazn conforme progresa la anoxemia en el animal.

Identifique el timo sobre el corazn y la cara anterior de la parte baja del cuello.
Seprelo y comente con sus compaeros las funciones de este rgano.

Siguiendo la lnea media extienda hacia arriba la incisin, desde la cavidad torcica
hasta el maxilar inferior. Identifique en el cuello las glndulas salivales submaxilares y
sublinguales y los ganglios linfticos. Extrpelos. Localice la trquea y sgala hacia abajo
desde la laringe hasta su divisin en bronquio derecho e izquierdo y contine, si es posible,
hasta los bronquiolos pequeos, que corresponden a cada segmento grande del pulmn.
Evite cortar los grandes vasos cardiacos. Una vez expuestos los lbulos pulmonares, corte
un fragmento pequeo del pulmn y exprmalo fuertemente entre los dedos. Perciba la
sensacin tctil de crepitacin. Corte otro fragmento pequeo y junto con el anterior
pngalos en un vaso con agua. Observe si flotan o se hunden.

Identifique la glndula tiroides (Fig. 45), localizada por abajo de la laringe delante
de la trquea. Corte la traquea transversalmente un poco por debajo de la glndula tiroides y
brala longitudinalmente hacia arriba incluyendo la laringe. Obsrvela cuidadosamente e
identifique la epiglotis y las cuerdas vocales. Con una tijera fuertes corte por el centro la
mandbula inferior.

Identifique el nacimiento de la aorta y los vasos que emergen del cayado; diseque la
aorta torcica hasta el diafragma (figuras 45 y 41).

Observe las venas yugulares en el cuello y sgalas hacia abajo. Identifique

sucesivamente la subclavia, la vena cava superior y la aurcula derecha. Diseque la vena
cava inferior desde el diafragma al corazn. Observe el nervio frnico derecho a un lado de
la vena cava inferior y sgalo hasta su penetracin en la mitad derecha del diafragma.

Extirpe el corazn, los pulmones y los grandes vasos (Fig. 45), lvelos con agua y
colquelos sobre la tabla de disecciones.

Diseccin del corazn de res. Identifique la arteria aorta y crtela

longitudinalmente hasta llegar al ventrculo izquierdo abrindolo tambin. Identifique las
valvas de la vlvula artica. Localice la vlvula aurculo-ventricular izquierda (mitral) con
sus valvas y msculos papilares y cuerdas tendinosas. Abra la aurcula izquierda e
identifique la desembocadura de las venas pulmonares, Identifique en la aurcula derecha la
desembocadura de las venas cavas inferior y superior. Abra la aurcula y el ventrculo
derechos. Identifique la vlvula aurculo-ventricular derecha (tricspide) y la emergencia
de la arteria pulmonar desde el ventrculo derecho. Observe la disposicin de las valvas de
la vlvula pulmonar.

Corte el corazn transversalmente, identifique el tabique interventricular y observe

la diferencia en el grosor de las paredes de los ventrculos derecho e izquierdo.

Sistema digestivo. Abra la cavidad abdominal siguiendo la lnea alba. Observe

como el diafragma divide a ambas cavidades. Corte el msculo diafragma evitando cortar el
esfago. Con la ayuda de las Figs. 29, 35 y 36 identifique las estructuras de la cavidad
abdominal.

Observe la lengua y la faringe bucal hasta la epiglotis. Introduzca un estilete por la

faringe e identifique el esfago y el estmago. Con los dedos jale suavemente hacia fuera el
intestino delgado e identifique el duodeno el yeyuno y el leon. Identifique el bazo y
comente con sus compaeros sus funciones. Localice el ciego y el apndice vermiforme del
intestino grueso e identifique sus diversas porciones hasta llegar al ano.

Estudie el hgado, encuentre las vas biliares y siga su trayectoria hasta su

desembocadura en el intestino delgado. Note la ausencia de la vescula biliar.

El pncreas tiene la forma de numerosas masas tisulares diseminadas en el

mesenterio del intestino delgado junto con los respectivos conductos secretores. Observe a
contra luz, como estos confluyen en la parte alta del intestino delgado donde desembocan.

Corte el transversalmente el esfago a nivel de la faringe y diseque todo el tubo

digestivo hacia abajo. Corte el diafragma respetando el esfago, y ayudndose con los
dedos y tijeras, jale y desprenda suavemente el estmago, y los intestinos delgado y grueso
hasta llegar al ano. Corte transversalmente a nivel del recto. Mida y compare las longitudes
de los intestinos delgado y grueso.

Una vez que ha disecado el tubo digestivo y el hgado, colquelos en la mesa y

dispngalos lo ms parecido a como se encontraban en el animal.

Sistema urinario. Con la maniobra anterior, queda expuesta la pared posterior de la

cavidad abdominal. Ayudndose de los esquemas de las Figs. 35 y 36, localice los riones
y encima de ellos a las glndulas suprarrenales. Identifique en ambos riones la pelvis
renal, los urteres y su desembocadura en la vejiga. Trate de identificar la arteria y vena
renales.

Extirpe un rin, crtelo en dos longitudinalmente y observe como la pirmide renal

se proyecta en la pelvis (Fig. 34). Separe del cuerpo las diferentes estructuras del sistema
excretor y organcelas sobre la mesa.
 Sistema reproductor (Figs. 35 y 36). Los rganos de la reproduccin dependern,
claro est, del sexo del animal. En el macho pueden encontrarse los testculos en el
abdomen o en el escroto. Identifique la cabeza, cuerpo y cola del epiddimo y el conducto
deferente hasta la uretra interna. Identifique las vesculas seminales y la prstata ventral.
Diseque un testculo, bralo en dos y se observe su contenido.

Si la rata es hembra, los ovarios se localizarn en ambos lados de la pared posterior

del abdomen, justo por debajo de los riones. Identifique los ovarios, las trompas de
Falopio y los cuernos uterinos hasta su desembocadura en la vagina. Diseque un ovario y
trate de identificar los folculos ovricos. Observe los pequeos oviductos y como estos se
continan con los respectivos cuernos uterinos (tero bicorne).

Sistema nervioso. Para exponer el sistema nervioso central proceda de la siguiente

manera: con unas tijeras fuertes, corte la cabeza del animal entre el agujero occipital y la
primera vrtebra cervical. Para retirar la calota, identifique el agujero occipital e introduzca
una de las ramas de la tijera, de tal manera que la porcin superior del hueso occipital
queda entre las ramas. Teniendo cuidado de no lastimar al cerebelo y dems tejido
nervioso, corte lateralmente, hacia arriba y adelante (del occipucio hacia el hueso frontal)
los huesos del crneo. Repita la maniobra en lado opuesto. De esta manera, la calota queda
prcticamente desprendida. Levntela hacia la nariz y seprela del crneo. As, el cerebro
queda expuesto, pero unido al crneo por la base. Para separar el cerebro de la base del
crneo, seccione transversalmente los bulbos olfatorios y los nervios pticos que se
encuentran inmediatamente por debajo, pegados a la base del crneo. Levante con cuidado
la masa enceflica de adelante hacia atrs y observe a la glndula hipfisis (o pituitaria) en
el piso del crneo y fija a l por su cubierta de meninges. Identifique el tallo hipofisiario
que une a la glndula con el hipotlamo. Al seguir levantando el cerebro, el tallo
hipofisiario se rompe, as como los nervios de los diferentes pares craneales. Contine
levantando el cerebro hasta llegar al agujero occipital. El cerebro ha quedado desprendido
del crneo. Colquelo sobre la mesa y con la ayuda de la Fig. 49, proceda a identificar los
hemisferios cerebrales, el cerebelo, la glndula pineal, el bulbo raqudeo, el puente y el
hipotlamo. Haga un corte transversal e identifique los ventrculos cerebrales. Para extraer
la mdula espinal, proceda a cortar transversalmente los huesos da la columna vertebral,
entre las vrtebras lumbares 3 y 4. Con una jeringa de 10 ml y una aguja del # 18 unida a un
tubo de plstico del mismo calibre, proceda a inyectar agua a presin en el canal raqudeo
de abajo hacia arriba. La mdula saldr intacta. Identifique los diferentes niveles medulares,
la emergencia de los nervios perifricos y la cola de caballo.

Extirpe uno de los ojos del animal, abra la esclertica y con cuidado extraiga el
cristalino. Mire a travs de l y vea como las imgenes se observan invertidas.

RESULTADOS:

En el dorso de cada hoja, haga un esquema de cada uno de los siguientes sistemas
de rganos: cardiovascular, respiratorio, digestivo, excretor, reproductor, nervioso,
endocrino e inmune), Identifique a cada uno con los nombres de los respectivos rganos
que los conforman.
 De una breve explicacin de la funcin de cada uno de los sistemas.

BIBLIOGRAFA

Armstrong G.G. Anatoma Macroscpica de los Sistemas de rganos. En: Manual de

Prcticas de Fisiologa. Editorial Interamericana. Mxico. pp 3-12. 1970.

Chiasson R.B. Laboratory Anatomy of the White Rat. WM. C. Brown Company
Publishers. Iowa. 1978.

Hebel R, and Stromberg M.W. Anatomy of the Laboratory Rat. Williams and Wilkins Co.
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Olds R.J. and Olds J.R. A Colour Atlas of the Rat. Dissection Guide. Wolfe Medical
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Quintanar Stephano J.L. Anatoma Macroscpica de los Sistemas de rganos. En: Manual
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Suckow M.A. (Ed). CRC Press Boca Raton. 1998.

van Dongen J.J., Remie R., Rensema J.W. and van Wunnik G.H.J. Anesthesia of the
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Techniques in the Behavioral and Neural Sciences Vol. 4.. Huston J.P. (Ed). Elsevier.
Amsterdam. pp 61-95. 1990.

Waynforth H.B. and Flecknell P.A. Administration of Substances. In: Experimental and
Surgical Techniques in the Rat. Academic Press. London. pp 1-67. 1992.
Wells T.A.G. The Rat. A dissection manual. Dover Publication, Inc. New York. 1964.

Revisado: Enero 31, 2003 Dr. Andrs Quintanar Stephano

 -- EL FISIOGRAFO--

OBJETIVOS:

1. Describir los diferentes elementos que conforman el FISIOGRAFO y conocer

las caractersticas funcionales de cada uno de ellos.

2.- Aprender a operar el FISIOGRAFO:

a) Manejando un canal. En esta prctica, utilizando el transductor migrafo tipo C

para hacer una curva de calibracin con pesas de valor conocido.
b) Comprobando la funcin de la UNIDAD DE DESPLAZAMIENTO DEL
PAPEL.
c) Manejando el ESTIMULADOR.

INTRODUCCIN

EL FISIOGRAFO ( fisios= funcin, grafos= escritura), es un aparato diseado para

registrar grficamente fenmenos fisiolgicos. Con l se pueden registrar, dependiendo del
nmero de CANALES, desde un fenmeno aislado empleando un canal, o bien registrar 2,
3 o 4 variables fisiolgicas simultneamente. En nuestro laboratorio contamos con el
FISIOGRAPH FOUR B (NARCO BIO-SYSTEMS) que tiene cuatro canales. EL
FISIOGRAFO nos permite reconocer y caracterizar los diversos componentes de un
fenmeno fisiolgico, as como los cambios que este sufre a travs del tiempo, por ejemplo,
en el estudio de las propiedades del msculo cardaco nos permite caracterizar la sstole y
la distole, su duracin, as como determinar cambios en la fuerza de contraccin cuando se
somete a traccin, o bien, observar el efecto del nervio vago sobre la frecuencia cardiaca y
fuerza de contraccin, etc. Ahora bien, cuando se emplean varios canales simultneamente,
se hace con el objeto de estudiar las relaciones que existen entre diferentes fenmenos
fisiolgicos y las caractersticas cambiantes de stos a travs del tiempo, por ejemplo, al
estudiar las funciones del corazn podemos hacer el registro simultneo del
electrocardiograma, ruidos cardiacos, presin auricular derecha y presin de la arteria aorta,
analizando primero las caractersticas del registro de cada canal y comprendiendo su
significado funcional, para despus pasar a establecer las relaciones que existen entre los
diferentes fenmenos. As, el registro simultneo de diferentes fenmenos, nos permiten
obtener una visin de conjunto de la funcin cardiaca a travs del tiempo.

En el proceso de captura de un fenmeno fisiolgico, hay tres componentes bsicos

que componen el sistema de registro. Cada uno tiene una funcin especial y caractersticas
distintivas. Estos componentes son: EL TRANSDUCTOR, EL PROCESADOR Y EL
REPRODUCTOR. A la combinacin de estos tres elementos se le llama CANAL DE
DATOS o CANAL DE REGISTRO, ms simplemente CANAL. Fig. 1.
EL TRANSDUCTOR o RECOLECTOR, detecta la informacin proveniente del
medio ambiente y la convierte en una seal elctrica (transduccin), la cual es ms
fcilmente manejada o procesada que la informacin original. EL PROCESADOR o
AMPLIFICADOR recibe la seal transducida y opera con ella. La operacin puede
consistir en amplificar, atenuar o extraer la raz cuadrada, o el logaritmo o algn otro
procedimiento matemtico para producir una seal aceptable para el reproductor. En la
mayora de los casos una menor distorsin de la amplificacin de la seal transducida en
todo lo que se requiere. EL REPRODUCTOR o SISTEMA DE REGISTRO es el
dispositivo que convierte la seal en una forma adecuada para que sea percibida por
nuestros sentidos.

Un ejemplo familiar de este sistema de tres elementos es el reproductor de discos

compactos. El transductor es el detector ptico de los rayos laser reflejados desde la
superficie del disco compacto, convirtindolos en seales elctricas, las cuales pasan a
travs de una conexin adecuada al amplificador. El amplificador o procesador aumenta la
seal a una intensidad tal que pueda ser reproducida por la bocina. La bocina o los
audfonos constituyen el reproductor que convierte la seal elctrica en ondas sonoras, las
cuales son percibidas por los rganos sensoriales, en este caso el odo.

ELEMENTOS DE UN CANAL:

TRANSDUCTOR (TRANSDUCER). Los transductores son dispositivos que

convierten una forma de energa en otra forma de energa. Existen transductores para
convertir casi cualquier fenmeno fisiolgico conocido en seales elctricas proporcionales
y apropiadas para ser procesadas y registradas por el fisigrafo. Fig. 1a.

ACOPLADOR DEL TRANSDUCTOR (TRANSDUCER COUPLER o

PREAMPLIFICADOR). El acoplador se usa para conectar el transductor o la seal que
viene del sujeto o preparacin experimental al AMPLIFICADOR DEL CANAL. El
acoplador se usa tambin para variar la sensibilidad y calibrar el sistema. Fig. 1b.

AMPLIFICADOR DEL CANAL (CHANNEL AMPLIFIER). El amplificador del

canal aumenta la seal del acoplador para proporcionar el incremento requerido en la
intensidad de la seal para mover el motor de la plumilla (reproductor). Adems contiene
los controles e interruptores necesarios para procesar seales adicionales. Fig. 1c.

MOTOR DE LA PLUMILLA o REPRODUCTOR (PEN MOTOR). El motor de la

plumilla convierte la seal que sale del amplificador del canal en un registro de tinta que
puede ser rectilneo o curvilneo. Las excursiones verticales de la plumilla a travs del
papel que se est deslizando son proporcionales a la actividad fisiolgica. Uno de los
reproductores ms tiles en el laboratorio de fisiologa es la PLUMILLA DE REGISTRO
montada sobre un galvanmetro de Darsonval. Esto se debe a que la mxima rapidez de
cambio de muchos fenmenos fisiolgicos no exceden la rapidez de respuesta de la
plumilla que se desliza sobre el papel de registro. As, usando una plumilla entintada, se
obtiene un registro grfico instantneo el cual describe la amplitud y curso temporal del
evento fisiolgico. Fig. 1d.

OPERACIN DEL FISIOGRAFO

Antes de seguir adelante es necesario hacer las siguientes consideraciones:

 a) Todos los interruptores de encendido-apagado de los AMPLIFICADORES
(Fig.1c) se encuentran en la parte inferior izquierda de las unidades
individuales (botn rojo).
b) Todos los interruptores que inician o interrumpen el registro del evento
fisiolgico (Fig. 1c) se localizan en la parte inferior derecha de los
AMPLIFICADORES (botn blanco).

Las perillas de control se operan girndolas. Cuando se giran en sentido de las

manecillas del reloj; esto es, de izquierda a derecha se incrementa el tamao de las ondas
(aumenta la amplitud) o bien haciendo que la plumilla se mueva hacia arriba. La rotacin
en contra de las manecillas del reloj reduce la amplitud. Todos los tinteros, cables y
conexiones son semejantes. Ninguna conexin errnea puede hacerse. Cualquier unidad
opera normalmente en cualquier abertura o no opera en ninguna abertura del fisigrafo.

PROCEDIMIENTO

Para poner el fisigrafo en condiciones de registro haga las siguientes maniobras:

1.- Suba las plumillas con la PALANCA DE LAS PLUMILLAS. Fig. 2
2.- Coloque un paquete de papel de registro bajo las plumillas e inserte el papel en
las guas correspondientes.
3.- Baje la PALANCA DE TENSIN DEL PAPEL (Fig. 2), as como la palanca de
las plumillas, permitiendo que la punta de las mismas se pongan en contacto con el papel.
4.- Cheque que los TINTEROS (Fig. 2) estn a la mitad de su capacidad y elevados
de tal manera que el nivel de tinta quede justo por arriba de la superficie del papel del
fisigrafo.
5.- La tinta se hace fluir colocando el dedo ndice sobre el agujero del tintero y
apretndolo.
6.- Asegrese de quitar el dedo antes de dejar de presionar.

De esta manera el fisigrafo queda listo para trabajar cuando el INTERRUPTOR

PRINCIPAL se encienda. El interruptor est localizado a la izquierda de la UNIDAD DE
CONTROL DEL DESPLAZAMIENTO DEL PAPEL. El foco rojo adyacente indica que el
fisigrafo est encendido o apagado. (Fig. 2).

REVISIN DEL DESPLAZAMIENTO DEL PAPEL

Gire la perilla de CONTROL DE LA VELOCIDAD DE DESPLAZAMIENTO

DEL PAPEL (PAPER SPEED) (Fig 2) y observe el movimiento del papel de registro. Para
controlar la velocidad con la que se desplaza el papel, gire la perilla a la velocidad deseada,
la cual puede ser desde 0.0025, 0.01, 0.025, 0.05, 0.1, 0.25, 0.5, 1, 2.5, 5.0 y 10 cm/seg. El
papel esta rayado en forma cuadriculada con las rayas verticales separadas 0.5 cm. entre si.
Las rayas horizontales son de tres tipos y alternadas entre si; unas delgadas cuya distancia
entre ellas es de 1 mm, una gruesa cada 0.5 cm. y otra ms gruesa cada 2.5 cm, las cuales se
toman como referencias para facilitar la lectura de la amplitud de los registros. Localizada a
un lado del interruptor principal se encuentra la perilla del CONTROL DE INTERVALOS
DE TIEMPO (TIME MARKER). Seleccione en orden creciente los puntos 1, 5, 30 y 60
seg. y observe como que la PLUMILLA DE TIEMPO (5 plumilla), se desplaza hacia
arriba con cada intervalo elegido. Verifique los intervalos usando su reloj. Fig. 2.

A la derecha de la PLUMILLA DE TIEMPO se encuentra un pequeo botn rojo

llamado MARCADOR DE EVENTOS (EVENT MARKER), el que al ser presionado
provocar que la PLUMILLA DE TIEMPO se desve hacia arriba. Oprima este botn para
probar su operacin. El marcador de eventos permite sealar puntos especficos en el papel
durante el registro del fenmeno fisiolgico.
Usando varios grupos de Intervalos de tiempo y el Control de la velocidad del papel,
verifique la operacin de la unidad.

OPERACIN DE UN CANAL DE REGISTRO

AMPLIFICADOR (CHANNEL AMPLIFIER) Fig. 3

1. Gire completamente en favor de las manecillas del reloj la perilla de

VARIABLE (Fig. 3), el cual se encuentra superpuesta a la perilla de
SENSIBILIDAD (Amplificacin) (MV/CM).
2. Ponga la perilla de AMPLIFICACION MV/CM en 1000.
3. Ponga la palanca de POLARIDAD (POLARITY) en positivo (+).
4. Encienda el botn rojo (POWER).
5. Con la perilla de CONTROL DE POSICIN (POSITION) desplace la
PLUMILLA DE REGISTRO a una LINEA BASAL (generalmente al centro de
los extremos del desplazamiento vertical de la PLUMILLA).
6. Con la perilla de CONTROL DE POSICIN desplace la plumilla 1.5 cm hacia
abajo de la lnea basal.
7. Gire la perilla de MV/CM al punto de ADJ 3 cm. La plumilla se desplazar 3 cm
hacia arriba (1.5 cm por arriba de la lnea basal).
En caso de que la plumilla sobrepase o no llegue a los 3 cm, con un desarmador
gire el TORNILLO de ADJ hacia la derecha para subir la plumilla o gire a la
izquierda para bajar la plumilla.
8. Repita la maniobra de poner la perilla MV/CM en 1000 y ADJ 3 cm
alternativamente y gire el tornillo de ADJ hacia donde sea necesario hasta que el
desplazamiento de la plumilla sea de 3 cm exactamente. De esta manera el
amplificador queda calibrado.
9. Gire la perilla del FILTRO (FILTER) al punto apropiado para eliminar (filtrar)
el ruido (frecuencias) indeseables que pueden entrar y alterar o impedir el
registro adecuado de los fenmenos bajo estudio.

CALIBRACIN DEL PREAMPLIFICADOR (ACOPLADOR) (TRANSDUCER

COUPLER 7173)

Una vez calibrado el amplificador con el reproductor, proceda a:

1. Gire la perilla MV/CM al punto 2 MV/CM (mxima amplificacin).

2. Gire el botn de posicin y coloque la plumilla de registro en la lnea basal
apropiada.
 3. Encienda el botn blanco de REGISTRO (RECORD).
4. Restablezca la lnea basal utilizando la perilla de BALANCE DEL
PREAMBPLIFICADOR.
Con estas maniobras se han ajustado funcionalmente el amplificador con el acoplador y el
reproductor, de tal manera que las seales elctricas que pasen del acoplador al
amplificador sern proporcionales a la magnitud de las seales elctricas que salen del
acoplador.
5. Apague el botn blanco (RECORD) del amplificador.
6. Conecte el transductor migrafo tipo C (Miograph Transducer Type C) al
acoplador con un cable conector No. 9.
7. Si la magnitud de la seal por registrar es conocida, gire la perilla MV/CM al
punto adecuado. Si no es as, gire la perilla al punto 1000 MV/CM.
8. Encienda el botn de RECORD.
9. Calibre el sistema de registro del fisigrafo utilizando las unidades adecuadas de
deflexin de la plumilla.

NOTA: El registro de una seal conocida se llama calibracin del registro. Ningn registro
puede considerarse completo sin que la calibracin de amplitud y tiempo.

CALIBRACIN DE UN REGISTRO

ELEMENTOS ACCESORIOS TILES DEL FISIOGRAFO

ESTIMULADOR S1-10 (Fig. 4)

Instalacin.- El estimulador puede instalarse en cualquier compartimiento del

fisigrafo. Antes de instalarlo asegrese de que las clavijas del estimulador y el enchufe
del fisigrafo estn limpios y bien alineados. Una vez instalado se pueden dar estmulos
que son automticamente indicados por una deflexin hacia arriba de la plumilla de tiempo
(5a. plumilla).

1. Ponga el interruptor CONT-OFF-SINGLE (estmulos continuos- apagado-

estmulos nicos) en la posicin OFF.
2. Gire la perilla de voltaje (VOLTS) a 0 voltios.
3. Ponga el interruptor ON-OFF (encendido-apagado) en la posicin ON. Prender
el foco adjunto.
4. Gire la perilla de frecuencia (FRECUENCY) y el MULTIPLICADOR (X) en
los puntos deseados y la palanca de CONT-OFF-SINGLE en la posicin CONT
(continuo).
5. Gire el control de duracin (DURATION) y el multiplicador en los puntos
aplicado. Pulsos de corta duracin pueden requerir voltajes altos para producir
la respuesta deseada.
6. Ponga el control de voltaje (VOLTS) y el multiplicador en los puntos deseados.
Estos determinarn el voltaje de los estmulos. Normalmente el control del
voltaje debe iniciarse desde 0 y avanzar lentamente hasta lograr la respuesta
deseada.
7. Coloque el interruptor MONOPHASIC-BIPHASIC en la posicin apropiada.
En la posicin monofsica indica uni directa desde la unidad de aislamiento del
estimulador con las terminales de salida, y proporciona un pulso en una sola
direccin; en la posicin bifsica, indica unin desde el capacitor de la unidad de
aislamiento del estimulador con las terminales de salida. Los pulsos bifsicos
reducen la polarizacin del electrodo ya que los promedios de las corrientes
positivas y negativas son iguales.
8. El estimulador debe ser probado antes de que los electrodos sean conectados.
Coloque el interruptor CONT-OFF-SINGLE en la posicin SINGLE. Un pulso
nico ser aplicado a travs de las terminales de salida. La lmpara de nen
indicar que un pulso ha salido por los postes de salida. Si el estimulador est
instalado en el fisigrafo, la plumilla de tiempo indicar el estmulo con una
deflexin momentnea hacia arriba.

Cuando el interruptor se coloca en la posicin CONT (continuo):

a) Un tren de pulsos se esta aplicando a travs de las terminales de salida.
b) La lmpara de nen prendera por cada pulso dado.
c) La plumilla marcadora de tiempo se desplazara hacia arriba y se
mantendr en esa posicin durante el tiempo que dure el tren de pulsos.
9. Conecte los cables estimuladores en los postes de salida, y el otro extremo a los
electrodos de estmulo. Observe la polaridad. ROJO (+), NEGRO (-).
10. Aplique estmulos colocando el interruptor CONT-OFF-SINGLE en cualquiera
de las posiciones; CONT para pulsos continuos, o en SINGLE para pulsos
aislados. Ponga el interruptor en la posicin OFF cuando no se desee estimular.
Si tiene duda de que el estmulo se est aplicando de una manera efectiva al
sujeto de experimentacin, desconecte los electros de estmulo y con los dedos
hmedos de una mano presione ligeramente sobre los electrodos e incremente
lentamente el voltaje hasta que perciba los estmulos.
11. Disparador externo:

a) TRIG IN: Para usar un disparador externo, coloque el interruptor CONT-

OFF-SINGLE en la posicin OFF. Conecte el disparador externo en el
enchufe TRIG IN usando un fono conector. El estimulador acepta pulsos
disparados desde dispositivos externos y generarn un pulso por cada
pulso recibido. Cuando un tren de pulsos es aplicado, el correspondiente
tren de pulsos es producido con la duracin y voltaje controlados por los
botones del estimulador. El pulso externo debe ser un pulso positivo de
al menos 5 volts y 20 microsegundos de duracin.
b) TRIG OUT: El estimulador puede utilizarse para sincronizar otros
aparatos tales como: otro estimulador, un osciloscopio o una cmara.
Cuando un disparo es requerido, conecte el TRIG OUT usando un fono
conector a un mecanismo disparador del aparato externo. La seal de
TRIG-OUT es un pulso positivo de 20 volts y 50 microsegundos de
duracin de una fuente de 10 kilohom por cada estmulo aplicado a las
terminales de salida.
 Cada miembro del grupo deber familiarizarse con la operacin de todos los
controles del fisigrafo antes de proceder con los experimentos del laboratorio. Cuando
estos conocimientos sean completos, el fisigrafo puede apagarse usando el interruptor de
la lnea principal. Eleve la polea de tensin del papel y la palanca de las plumillas. Las
plumillas deben quedar limpias, esto se efecta haciendo la operacin contraria al llenado
de las mismas, es decir, presionando el recipiente que contiene la tinta primero y despus
tapando con el dedo ndice el orificio de entrada de la tinta y dejando de presionar
lentamente el recipiente.

ESTIMULADOR S1-10
 OPERANDO EL ESTIMULADOR S1-10

1. El estimulador puede instalarse en cualquier

compartimiento del Fisigrafo. Antes de instalarlo
asegrese de que las clavijas del estimulador y el
enchufe del Fisigrafo estn limpios y bien alineados.
Una vez instalado se pueden dar estmulos que son
automticamente indicados por una deflexin hacia
arriba de la plumilla de tiempo (5a plumilla).
2. Ponga el interruptor CONT-OFF-SINGLE (CONT =
CONTINUOS, OFF = APAGADO, SINGLE =
AISLADOS) en la posicin APAGADO.
3. Gire la perilla de voltaje (VOLTS) a 0 voltios.
4. Ponga el interruptor ON-OFF (encendido-apagado) en
la posicin ON. Prender el foco ROJO adjunto.
5. Gire la perilla de frecuencia (FRECUENCY) y su
multiplicador (X) en los puntos deseados y la palanca
de CONT-OFF-SINGLE en la posicin CONT
(continuo).
6. Gire el control de duracin (DURATION) y su
multiplicador en los puntos deseados. Pulsos de corta
duracin pueden requerir voltajes altos para producir
la respuesta deseada.
7. Ponga el control de voltaje (VOLTS) y su multiplicador
en los puntos deseados. Estos determinarn el voltaje
de los estmulos. Normalmente el control del voltaje
debe iniciarse desde 0 y avanzar lentamente hasta
lograr la respuesta adecuada.
8. Coloque el interruptor MONOPHASIC-BIPHASIC en la
posicin apropiada. En la posicin monofsica indica
unin directa desde la unidad de aislamiento del
estimulador con las terminales de salida, y proporciona
un pulso en una sola direccin; en la posicin bifsica,
indica unin desde el capacitor de la unidad de
aislamiento del estimulador con las terminales de salida.
Los pulsos bifsicos reducen la polarizacin del electrodo
ya que los promedios de las corrientes positivas y
negativas son iguales.
9. El estimulador debe ser probado antes de que los
electrodos sean conectados. Coloque el interruptor
CONT-OFF-SINGLE en la posicin SINGLE. Un pulso
nico ser aplicado a travs de las terminales de salida.
La lmpara de nen indicar que un pulso ha salido por
los postes de salida. Si el estimulador est instalado en el
Fisigrafo, la plumilla de tiempo indicar el estmulo con
una deflexin momentnea hacia arriba.
10. Conecte los cables estimuladores en los postes de salida, y el otro
extremo a los electrodos de estmulo. Respete la polaridad de los
postes y cables; ROJO (+) y NEGRO (-).

11. Aplique estmulos colocando el interruptor CONT-OFF-SINGLE en

cualquiera de las posiciones; CONT para pulsos continuos, o en
SINGLE para estmulos aislados. Ponga el interruptor en la posicin
OFF cuando no se desee estimular.

Si tiene duda de que el estmulo se est aplicando de una manera

efectiva al sujeto de experimentacin, desconecte los electros de
estmulo y con los dedos hmedos de una mano presione
ligeramente sobre los electrodos e incremente lentamente el voltaje
hasta que perciba los estmulos.

Peso Desplazamiento
(g) vertical del registro (g)

x y

0
________________________________
5
________________________________
10
________________________________
20
________________________________
40
________________________________
50
________________________________
100
Con los datos obtenidos haga una grfica en papel cuadriculado, en
la que al eje de las x correspondan los valores crecientes de las
pesas y al eje de las y a los valores verticales mximos del registro.
Una los puntos y observe la recta que se forma.
 POTENCIAL DE ACCION COMPUESTO

INTRODUCCIN

La funcin principal de las fibras nerviosas es la conduccin del impulso nervioso

(potencial de accin). En el caso de la fibras sensoriales (aferentes) el potencial de accin
es generado en la terminal nerviosa perifrica y es conducido hacia la terminal nerviosa
central. El potencial de accin en las fibras motoras (eferentes) es generado en el cono
axnico y es conducido hacia la periferia hasta su efector. Conduccin ortodrmica
significa la conduccin del impulso nervioso en la direccin adecuada. La conduccin
antidrmica significa lo opuesto.

Los nervios perifricos estn constituidos por un grupo heterogneo de fibras

nerviosas. La heterogeneidad de las fibras nerviosas se debe tanto a sus caractersticas
geomtricas (dimetro), histolgicas (presencia o ausencia de mielina), pertenencia
(somticas o autnomas), funcionales (sensoriales o motoras). Tambin son heterogneas
en cuanto a propiedades de excitabilidad como sera la magnitud del estmulo umbral y la
duracin de su perodo refractario, tanto absoluto como relativo. Considerando todas estas
caractersticas las fibras nerviosas pueden ser clasificadas de diversas maneras. La
clasificacin ms general las clasifica como A (alfa, beta, gamma y delta), B y C. Otra
clasificacin, la cual es utilizada principalmente para fibras sensoriales musculares, las
clasifica en fibras tipo Ia y Ib, II, III y IV.

Independientemente del tipo de fibra nerviosa, la generacin y la conduccin del

potencial de accin tiene los mismos principios. La generacin del potencial de accin es
debida a un potencial electrotnico producido ya sea por actividad sinptica o por el
estmulo aplicado directamente sobre la terminal nerviosa, libre en muchos casos, o
asociada a una estructura con caractersticas especficas. Este potencial electrotnico activa
canales inicos operados por voltaje generando corrientes catinicas entrantes y salientes
que se propagan a travs y a lo largo de la membrana (axolema) y de los lquidos
intersticial e intracelular (axoplasma). Los responsables de las corrientes inicas son
canales de sodio y de potasio operados por voltaje que se activan de manera secuencial,
produciendo corrientes inicas que dan lugar al cambio transitorio del potencial de
membrana conocido como potencial de accin, el cual una vez producido, con
caractersticas todo o nada, se propaga a lo largo de la fibra nerviosa activando
automticamente a los canales inicos, influidos por el campo elctrico del mismo
potencial de accin. El potencial de accin es conducido tanto activamente como
pasivamente, la conduccin pasiva se realiza en segmentos de membrana que carecen de
canales inicos operados por voltaje, en la conduccin pasiva intervienen los canales
inicos.

Cuando un nervio es dispuesto sobre electrodos de registro y se aplica un estmulo

de magnitud suficiente, es posible registrar la suma (por sumacin espacial) de los
potenciales de accin de todas las fibras que lo constituyen (potencial de accin
compuesto). El registro obtenido de esta manera (electroneurograma) muestra diversos
componentes que corresponden a los diferentes tipos de fibras que constituyen al nervio y
que son separados en base al estmulo umbral y en base a la latencia relativa (debido a su
diferente velocidad de conduccin) con que aparecen.
Adems de investigar el tipo de fibras que constituyen al nervio, este modelo es til para
ilustrar conceptos fisiolgicos relacionados con las propiedades de excitabilidad de las
fibras nerviosas y de otros tejidos excitables, investigar el efecto de frmacos y
xenobiticos sobre la conduccin nerviosa, estudios sobre regeneracin y enfermedades
degenerativas (desmielinizantes), etc.

OBJETIVOS

1) Determinar el estmulo umbral para diferentes poblaciones de fibras nerviosas.

2) Investigar el estmulo mximo para una poblacin de fibras nerviosas.
3) Reclutar espacialmente diferentes tipos de fibras nerviosas.
4) Determinar la velocidad de conduccin de diferentes tipos de fibras nerviosas.
5) Determinar los parmetros de excitabilidad de reobase y cronaxia para un tipo de
fibras nerviosas.
6) Observar el efecto de los anestsicos locales (xilocana) sobre la conduccin nerviosa.

MATERIAL Y METODOS

Material y equipo

Material biolgico: Rana (aunque tambin pueden emplearse otras especies como la rata o

el gato

Material. 1) Instrumental de diseccin y disectores de vidrio. Es importante contar con

pinzas y tijeras finas (aunque no indispensable) 2) Cmara para nervio, de preferencia de

lucita 3) Estimulador 4) Osciloscopio equipado con amplificador AC/DC. Pueden utilizarse

amplificadores acoplados a convertidores analgico/digital si se cuenta con tal equipo 5)

Microscopio estereoscpico (puede ser suficiente una lupa).

Soluciones. 1) Ringer rana. (puede ser suficiente solucin salina isotnica) 2) Solucin de
Xilocana al 2%.

1) Obtencin del nervio citico de rana. La rana es sacrificada por decapitacin, en

seguida se destruye la mdula espinal, utilizando para ello un estilete. Esta ltima maniobra
es con el fin de evitar los reflejos motores medulares durante la diseccin del nervio. Se
abre cavidad abdominal hasta visualizar la pared posterior, donde podrn distinguirse la
columna vertebral y las ltima races nerviosas que emergen de ella, y de las cuales se
origina el nervio citico. Se procede a la diseccin del nervio citico, desde su origen en la
mdula espinal hasta el tobillo (figura 1A-G). El nervio se refiere con un trozo de hilo en su
extremo proximal, se corta y se diseca hasta su emergencia hacia la parte posterior, donde
se hace un orificio para poder pasarlo hacia la parte posterior, se voltea a la rana y se
prosigue con la diseccin del nervio citico hasta la altura de la rodilla, donde se divide en
dos ramas principales, ambas pueden ser disecadas, o bien optar por una de ellas, siguiendo
su trayecto hasta la altura del pie de la rana. Es conveniente obtener la mayor longitud
posible del nervio, que en ranas de mediano tamao sobrepasa los 60 mm. Se recomienda
manipular al nervio con disectores de vidrio, evitando al mximo tocarlo con metales. Una
vez separado el nervio es conveniente retirar restos de vasos sanguneos y el tejido
conectivo extraneural con el fin de evitar contactos deficientes con los electrodos de
registro.

A B C

D E F G

Figura 1. Secuencia de fotografas que ilustra la obtencin del nervio citico de la rana. A:
vista de la parte inferior del cuerpo de la rana despus de haber retirado las vsceras
abdominales; B: Acercamiento que ilustra las ltimas races nerviosas, donde se origina el
nervio citico; C: lustracin de la manera como se refiere el nervio citico para su
diseccin; D: ilustracin de la pared posterior de la cavidad abdominal con el nervio citico
referido; E: ilustracin del nervio citico disecado hasta la altura de la rodilla; F: en este
caso se ha seleccionado el nervio tibial, cuya diseccin se contina hasta el tobillo (G).

2) Montaje de la preparacin en la cmara para nervio. Una vez obtenido el

nervio, se coloca sobre los electrodos dispuestos en la cmara, cuidando de que estos se
encuentren limpios (Figura 2 A-B). Se vierte un poco de Ringer o solucin salina sobre el
fondo de la cmara y en seguida se sella con la tapa (aplicando un poco de vaselina). El
sello de la cmara es importante para que el nervio se mantenga hmedo durante todo el
curso de la prctica.
3) Procedimiento para la estimulacin y registro. Una vez que se ha montado el
nervio citico en la cmara para nervio, se procede a conectar los electrodos para
estimulacin y para registro (Figura 2A-D). Los electrodos para estimulacin se conectan al
extremo proximal (ms grueso) del nervio y los electrodos para registro se conectan al
extremo distal (ms delgado).

A B

C D u

o
e

Figura 2. Fotografas que ilustran las caractersticas de la cmara para nervio y su

disposicin para el estmulo del nervio y registro del electroneurograma. A: cmara de
lucita y la placa para sellarla despus de colocar el nervio; B y C: nervio montado sobre los
electrodos de estmulo y registro; D: dispositivo para la estimulacin y el registro (e:
estimulador; u: unidad aisladora de estmulos y o: oscilocopio).

REGISTRO DE DATOS

1. Determinacin del estmulo umbral y el estmulo mximo. Se selecciona un

estmulo cuya duracin sea de 0.01 ms. Se selecciona la escala de la base de tiempo del
osciloscopio en 0.5 ms/divisin. Se incrementa de manera gradual la amplitud del estmulo
hasta obtener la respuesta mnima observable (en el caso de utilizar un osciloscopio la
escala de la amplitud para esta maniobra debe de ser de 0.5 a 1 mv/divisin). Cuando se
obtenga el estmulo umbral se cambia la polaridad del estmulo para seleccionar el tipo de
corriente (andica o catdica) ms adecuada a utilizar. En seguida se aplican estmulos de
amplitud creciente y se miden las amplitudes de las respuestas obtenidas (podr ser
necesario modificar la escala de la amplitud en el osciloscopio). Con estos resultados
construya una grfica: amplitud del estmulo versus amplitud de la respuesta. Con esta
grfica se ilustran los conceptos de estmulo umbral, estmulo mximo, subumbral, y
supraumbral. Nota: cuando la magnitud del estmulo es suficientemente grande aparecern
varios componentes (distinguidos con latencias diferentes) en nuestro registro. Se
recomienda hacer el anlisis en el primer componente, el cual corresponde a la poblacin
de fibras ms rpidas. Describa sus observaciones en la hoja de resultados
2. Determinacin de los parmetros de reobase y cronaxia. Con el componente
que aparece primero. Se selecciona un estmulo con 5 ms de duracin y se busca la
amplitud del estmulo que nos dar la respuesta mnima (estmulo umbral), en seguida se
reduce gradualmente la duracin del estmulo y se busca la amplitud necesaria para la
respuesta umbral. De esta manera se obtienen varios puntos. Con estos datos construya una
grfica: duracin del estmulo versus amplitud del estmulo. En esta grfica (curva de
excitabilidad) se analizan los conceptos de reobase, cronaxia y estmulos subumbrales y
supraumbrales. Describa sus observaciones en la hoja de resultados.

3. Determinacin de la velocidad de conduccin. Se aplica un estmulo mximo

de corta duracin y se selecciona el primer componente del registro para la determinacin
de este parmetro. Se aplican estmulos mximos variando la distancia entre los electrodos
de estimulacin y los electrodos de registro (los electrodos de estimulacin pueden irse
acercando gradualmente a los electrodos de registro o viceversa. Se construye una grfica:
distancia entre electrodos versus latencia. En esta grfica se calcula la velocidad de
conduccin y se demuestra adems que esta es constante a lo largo de la fibra nerviosa.

4. Identificacin del tipo de fibras en base a su velocidad de conduccin. Con la

escala de la base de tiempo del osciloscopio seleccionada en 1.0 ms/divisin seleccionado
un estmulo de duracin de 0.05 ms se procede a ir incrementando gradualmente su
amplitud hasta observar el mayor nmero de componentes posibles, se mide la latencia de
cada uno de ellos y se calcula su velocidad de conduccin. Esta maniobra ilustrar (en base
a su velocidad de conduccin) los principales grupos que constituyen el nervio citico de la
rana. Calcule las diferentes velocidades de conduccin y pase los datos a la hoja de
resultados.

5. Efecto de los anestsicos locales sobre la conduccin nerviosa. Finalmente, se

procede a colocar un trozo de algodn impregnado con xilocana al 2% entre los electrodos
de registro y los de estimulacin (se recomienda colocarlo en la parte media del nervio). Se
selecciona un estmulo mximo y se estimula repetitivamente con una frecuencia de 0.1 Hz,
midiendo la amplitud del potencial de accin compuesto cada minuto hasta la desaparicin
de la respuesta. Se grafica el tiempo versus la amplitud de la respuesta, esta grfica nos
ilustrar el curso temporal del bloqueo con este anestsico local. Despus de haberse
obtenido el bloqueo completo, el nervio se retira de la cmara y se coloca en un vaso de
precipitado conteniendo un volumen suficiente de Ringer o solucin salina, dejndolo unos
5 minutos, tiempo despus del cual se retira y se vuelve a colocar sobre la cmara de
registro. Se vuelve a estimular y se observar la recuperacin de la respuesta, lo cual ilustra
el efecto reversible del bloqueo con la xilocana.

RESULTADOS

Describa y discuta las observaciones realizadas y enumere las conclusiones

correspondientes a cada objetivo.
BIBLIOGRAFA

1) Guyton, A.C. and Hall, J.E. Membrane Potentials and Action Potentials. In Textbook of
Medical Physiology. 10a ed., Saunders. Philadelphia. pp 52-66. 2000.
2) Ganong, W.F. Excitable tissue: Nerve. In: Review of Medical Physiology. 20a edition.
Lange Medical Books/McGraw-Hill. New York. pp 49-61. 2001
3) McCormick, D.A. Membrane Potential and Action Potential. In Fundamental
Neuroscience. (Zigmond, M., Bloom, F., Landis, S., Robertis, J. and Squire, L. eds). Ist.
ed. Pp. 129-154. Academic Press, London UK.
4) Koester, J. and Siegelbaum, S.A. Propagated Signaling: The Action Potential. In
Principles of Neural Science.(Kandel, E., Schwartz, J. and Jessell, T. eds.). 4th. ed., pp.
150-170. Mc Graw Hill.
 PROPIEDADES DEL MUSCULO ESQUELETICO

INTRODUCCIN

El msculo esqueltico se caracteriza por presentar estriaciones transversales

cuando se observa con el microscopio. Las fibras individuales son relativamente largas en
relacin a su dimetro y contiene muchos ncleos a lo largo de toda la fibra. Cada clula
(fibra) muscular est rodeada de una membrana, el sarcolema, y grupos de fibras
musculares se agrupan formando haces o fascculos musculares que se mantienen unidos
por tejido conectivo. Los fascculos se agrupan para formar los msculos. (Fig. 1)

La caracterstica ms notable del msculo esqueltico es la capacidad que tiene de

contraerse (acortarse) y al hacerlo producir tensin y trabajo. Los msculos esquelticos
estn unidos al esqueleto y su contraccin causa que los huesos articulados se muevan y
realicen todos los movimientos corporales. La energa para la contraccin se deriva de la
degradacin del trifosfato de adenosn (ATP) que desencadena una cascada de eventos
fisicoqumicos que involucran el deslizamiento de los filamentos de la contraccin (actina y
miosina) dentro del msculo. Como en cualquier proceso bioqumico, la temperatura juega
un papel muy importante en estas reacciones.

Cuando una fibra muscular es activada por un impulso nervioso proveniente de una
motoneurona, la fibra se contrae completamente (RESPUESTA TODO O NADA). La
graduacin de la contraccin tan caracterstica del msculo completo, est determinada por
variaciones en el nmero de fibras musculares que participan en la contraccin. Bajo
circunstancias normales, la fuerza de la contraccin se lleva a cabo dependiendo del
nmero de fibras que se activan. Siempre debe tenerse en mente que la relacin entre fibras
musculares que inerva una neurona motora es mayor que la unidad; es decir, una
motoneurona inerva siempre ms de una fibra muscular, la relacin de inervacin vara para
cada unidad motora desde 1/100 hasta 1/600 en el msculo esqueltico.

En un animal experimental en el que la activacin del msculo se lleva a cabo por la

aplicacin directa de estmulos elctricos, se pueden demostrar muchas de las
caractersticas fundamentales del msculo esqueltico. Aunque un amplio espectro de
estmulos pueden emplearse, los que ms fcilmente se controlan son los elctricos.

Si los electrodos se insertan directamente en la masa muscular y se aplican

estmulos aislados de intensidad creciente, se llegar al estmulo umbral, que se caracteriza
por provocar una contraccin dbil debido a que nicamente se estimulan las fibras
musculares ms excitables. Si se contina incrementando la intensidad de los estmulos, las
contracciones musculares (sacudidas simples) sern de mayor fuerza hasta llegar a un
estmulo de intensidad tal que ya no provocar incremento en la fuerza de las contracciones
(estmulo mximo). Mayores incrementos en la intensidad de los estmulos (estmulos
supramximos), no incrementarn la fuerza de las contracciones.
 Es sabido que no todas las fibras musculares tienen el mismo umbral de excitacin y
que la contraccin mxima de un msculo durante una sacudida, ocurre solo cuando la
dispersin de la corriente estimulante (estmulo mximo) alcanza el umbral de todas las
fibras del msculo. Por lo tanto, un incremento de la intensidad de los estmulos ms all de
un cierto punto (estmulos supramximos), no provocarn una mayor fuerza de contraccin,
ya que todas las fibras se estn contrayendo.
Hay que hacer notar que la contraccin no ocurre inmediatamente despus de la
aplicacin del estmulo. Es decir, se requiere un cierto tiempo para que el acople
excitacin-contraccin ocurra. A este pequeo intervalo de tiempo entre la aplicacin del
estmulo y la aparicin de la sacudida se le llama periodo de latencia.

El efecto de la carga sobre el msculo puede ser fcilmente demostrada en la

preparacin muscular. Una propiedad fundamental de las fibras musculares en general es
que, dentro de ciertos lmites, al incrementar la longitud de reposo de un msculo este se
contrae con mayor fuerza. Este fenmeno es semejante a la Ley de Starling del corazn.
As, estmulos aislados de intensidad mxima darn lugar a sacudidas ms intensas (dentro
de ciertos lmites), cuando antes del estmulo se ha incrementado la tensin de reposo del
msculo. Naturalmente que una tensin de reposo que jale tanto a la fibra, provocar
separacin de los miofilamentos en la sarcmera, y diminuir la capacidad de contraccin
del msculo.

Dependiendo de la carga contra la que tiene que contraerse, el msculo puede

contraerse de dos maneras: a) si el msculo mueve una carga una cierta distancia, la
contraccin se llama isotnica (del gr. isos=igual y tono=tensin) y b) si el msculo se fija
por los extremos para impedir el acortamiento durante la contraccin, se le llama
contraccin isomtrica (del gr. isos=igual y metro=medida). Durante los movimientos
corporales, las contracciones musculares son generalmente combinaciones de ambos tipos y
depende de si los huesos articulados son movidos o no.

Si en lugar de estmulos nicos se aplican al msculo estmulos repetitivos, se

producir una serie sucesiva de sacudidas. Si la frecuencia es lo suficientemente alta, el
msculo no alcanzar a relajarse entre los estmulos y si estos son de mayor frecuencia, las
contracciones se fundirn en una contraccin sostenida, llamada contraccin tetnica, la
cual ejerce una fuerza mucho mayor que la sacudida simple. Se cree que durante la
sacudida simple, el msculo no es capaz de liberar toda la energa almacenada en sus fibras
aunque todas estn participando en la contraccin.

Un fenmeno interesante puede, algunas veces, observarse durante la etapa inicial

de un tren de sacudidas simples. Al aplicar un estmulo nico de intensidad mxima, el
msculo se contrae. Con estmulos sucesivos se ir contrayendo ms intensamente por
pequeos incrementos, apareciendo el registro grfico de la plumilla parecido a una
escalera. Por esta razn al fenmeno se le ha llamado fenmeno de la escalera o treppe. Se
cree que este incremento en la contractilidad puede deberse al ligero incremento en la
temperatura de las fibras musculares durante las contracciones sucesivas. Otra teora
postula que el Ca++ liberado no es completamente reabsorbido al retculo sarcoplsmico,
quedando pues, mas Ca++ libre en el citosol incrementando as la fuerza de contraccin.

Las fibras musculares no pueden permanecer contradas por tiempo indefinido al

estar realizando un trabajo. Despus de un corto tiempo de estimulacin, el msculo pierde
la capacidad para ejercer tensin. Se ha demostrado que esta prdida de la contractilidad se
debe a la acumulacin de productos de desecho y a la deplecin de energa almacenada, es
decir el msculo presenta fatiga muscular. Aunque un corto perodo de descanso dar lugar
a que la circulacin remueva los productos de desecho, un tiempo mucho mayor se requiere
para la sntesis de nuevos compuestos ricos en energa. En general, la fatiga muscular
depende la frecuencia de estimulacin; se presenta pronto con estmulos frecuentes y ms
lentamente con estmulos de menor frecuencia.

OBJETIVOS

Examinar las propiedades del msculo esqueltico cuando se estimula directamente. Para
llevar a cabo lo anterior se debern realizar las siguientes mediciones:

Con estmulos aislados:

1) Estmulo umbral para la contraccin
 2) Estmulo mximo para la contraccin mxima (sacudida simple)
a) Periodo de latencia
b) Tiempo de contraccin
c) Tiempo de relajacin
d) Duracin de la sacudida simple
e) Fuerza de la contraccin de la sacudida simple
f) Estmulos supramximos
3) Efecto de la tensin de reposo sobre la fuerza de contraccin
4) Fatiga con estmulos aislados

Con estmulos repetitivos

a) Fenmeno de la escalera
b) Suma de las contracciones
c) Contraccin tetnica
d) Fatiga tetnica

MATERIAL Y EQUIPO
1) Fisiografo (un canal) 2) Migrafo tipo C 3) Tornillo de tensin 4) Juego de pesas
esas 5) Electrodos de estmulo de tipo alfiler 6) Cable estimulador 7) Tabla para rana 8)
Soporte universal 9) Regla 10) Estilete 11) Disectores de vidrio 12) Hilo camo doble
cero 13) Canalizador de pulsos 14) Ringer rana y 15) Estuche de disecciones.

PROCEDIMIENTO

Calibre un canal del Fisigrafo utilizando un transductor migrafo tipo C, de tal

manera que 2.5 cm = 100 g.
Preparacin muscular (Fig. 2). Destruya el cerebro y la mdula espinal de una rana.
Colquela sobre la tabla para rana y proceda a retirar la piel de la pata izquierda. Con los
disectores de vidrio diseque el msculo gastrocnemio en toda su longitud. Amarre el
tendn de aquiles (porcin distal) con un hilo doble cero de unos 15 cm de longitud, deje
un pequeo espacio entre el hilo y el tendn para que el hilo no se resbale durante las
maniobras experimentales. Con la solucin de Ringer rana mantenga hmedo el msculo a
lo largo del experimento. Corte el tendn entre el nudo del hilo y su insercin en el hueso
calcneo y eleve el msculo gastrocnemio. Antes de fijar la rana a la tabla, pase un hilo
doble por cada uno de los orificios que la atraviesan. Tome a la rana y pase la pata por las
asas dejadas por los hilos dobles hasta llegar a la porcin proximal de la tibia (rodilla). Jale
los hilos fuertemente para que la rodilla y los huesos de la pierna queden firmemente
apretados a la superficie de la tabla. Fije los hilos a los sujetadores que se encuentran a los
lados de la misma. Tome el cabo suelto del hilo amarrado al tendn y haga un nudo
dejando una pequea asa e introdzcala en la palanca del transductor. Inserte los electrodos
de estmulo de alfiler en los extremos distal y proximal de la masa muscular.
MANIOBRAS EXPERIMENTALES
Estmulo umbral para la contraccin. Conecte los electrodos de alfiler al estimulador,
va cables del estimulador. Ajuste la sensibilidad a aproximadamente 2.5 cm de amplitud
del registro = 100 g. Aplique una ligera tensin al msculo con el tornillo de tensin. Ponga
el deslizamiento del papel a una velocidad de 2.5 mm/seg, comience a estimular con pulsos
de 2 mseg. de duracin. Utilizando estmulos aislados, incremente lentamente la intensidad
de los estmulos iniciando con 0 voltios hasta observar la primera contraccin (sacudida
simple). Este es el estmulo umbral.

Estmulo mximo para la contraccin mxima. Contine incrementando la intensidad de

los estmulos hasta que las sacudidas alcancen la mxima amplitud. Al estmulo mnimo
que alcanzo a provocar la mxima fuerza de contraccin se la llama estmulo mximo.
Contine incrementando la intensidad de los estmulos y observe que estos ya no
provocarn mayor intensidad en la amplitud de las sacudidas. A los estmulos de intensidad
mayor que ya no incrementaron la amplitud de las contracciones, se les llama estmulos
supramximos. Con los resultados de voltaje y amplitud de las sacudidas llene la Tabla 1.
Con los datos de la Tabla 1, haga una grfica en donde la variable independiente (abscisas)
es el voltaje aplicado con cada estmulo y la variable dependiente (ordenadas) la amplitud
de las correspondientes sacudidas.
TABLA 1. Efecto de la intensidad del estmulo sobre la magnitud de la contraccin
muscular. Estmulo umbral, estmulo mximo, estmulos supramximos, sumacin
espacial.
INTENSIDAD AMPLITUD DE LA
DEL ESTMULO RESPUESTA

Duracin de la sacudida simple. Con estmulos de 2 ms de duracin y el voltaje del

estmulo mximo ponga a deslizar el papel a una velocidad de 10 cm/seg. Mientras el papel
se est deslizando, aplique unos 3 estmulos aislados y pare el papel. Mida la duracin de la
sacudida simple. Identifique en el mismo trazo el periodo de latencia, el tiempo de
contraccin y el tiempo de relajacin.

Fuerza de la contraccin. Con la calibracin de la amplitud del registro de 2.5 cm = 100

g, calcule en el mismo registro la fuerza de la contraccin de la sacudida simple.

EFECTO DE LA TENSIN DE REPOSO SOBRE LA FUERZA DE

CONTRACCIN

Ajuste la sensibilidad del registro si es necesario (mayor o menor sensibilidad debe

utilizarse dependiendo de la fuerza del msculo). Con el tornillo de tensin disminuya la
tensin del msculo hasta que el hilo que une el msculo con el transductor ejerza la
mnima tensin. Escoja el estmulo mximo y aplicando estmulos aislados inicie la
estimulacin con una tensin de reposo muy ligera. Incremente la tensin progresivamente
y en cada vuelta del tornillo de tensin estimule al msculo. Contine incrementando la
tensin de reposo y aplicando los estmulos correspondientes hasta que la amplitud del las
contracciones alcance un mximo y empiecen a disminuir. Mida la tensin de reposo y la
amplitud de la respuesta al estmulo en cada vuelta del tornillo. Con los resultados de
tensin de reposo y amplitud de la sacudida, llene la Tabla 2. Con los datos de la Tabla 2,
haga una grfica en donde la variable independiente (abscisas) es la tensin de reposo y la
dependiente (ordenadas) la amplitud de las sacudidas. Calibre el registro con una pesa de
magnitud adecuada y exprese la tensin de reposo y la fuerza de las contracciones en
gramos. Determine en la grfica la tensin de reposo que dio lugar a la mxima fuerza de
contraccin y la tensin de reposo en la que las contracciones empiezan a ser ms dbiles.

TABLA 2. Efecto de la tensin de reposo sobre la fuerza de las contracciones.

TENSIN DE REPOSO AMPLITUD DE LAS
CONTRACCIONES

FATIGA DE LA CONTRACCIN CON ESTMULOS AISLADOS

Ajuste la velocidad del papel a 0.10 cm/seg. Aplique al msculo una tensin de reposo
adecuada, seleccione el estmulo mximo de 2 ms de duracin y aplique un estmulo cada 2
segundos hasta que se aprecie una disminucin clara de la fuerza de contraccin. Grafique
la altura de la contraccin versus al tiempo como una medicin de fatiga(*).

Con cuidado desmonte la preparacin muscular y vuelva a montarla en la otra pata.

Antes de continuar con el siguiente objetivo, encuentre el estmulo mximo y la tensin

de reposo adecuada.

EFECTO DE ESTIMULOS REPETITIVOS

Ajuste la sensibilidad para poder registrar sacudidas musculares con una amplitud
adecuada. Ajuste la tensin de reposo al punto donde obtuvo la mxima contraccin en el
punto anterior. Seleccione el voltaje del estmulo mximo. Con la velocidad del papel a 0.1
cm/seg estimule al msculo con varias frecuencias iniciando con 2 estmulos/seg durante 3
seg. Detenga el papel, seleccione 5 estmulos/seg, ponga en marcha el papel y estimule
durante 3 seg. Pare el papel y repita las maniobras con frecuencias de 7.5, 10, 20, 25 y 50
estmulos/seg. Observe como las sacudidas no regresan al nivel de reposo, aumentan de
intensidad y se van fundiendo en una sola contraccin cuando aumenta la frecuencia de
estimulacin. Determine la frecuencia con la que se alcanza la contraccin tetnica.
Calibre el registro usando una pesa adecuada y determine la relacin en gramos entre una
sacudida simple y la contraccin tetnica. Determine si el msculo presenta signos de
fatiga (*).

FATIGA DE LA CONTRACCIN DURANTE LA ESTIMULACIN TETNICA

Ajuste el desplazamiento del papel a 0.1 cm/seg. Seleccione el estmulo mximo. Ponga
la perilla de frecuencia del estimulador en 25 pulsos/seg y estimule el msculo nuevamente
durante dos minutos. Repita el procedimiento una vez ms para observar la fatiga de las
fibras musculares.

(*)Aunque es difcil definir la fatiga, suponemos que esta existe cuando la tensin ha cado
un 37% de su valor inicial.

RESULTADOS:

1. Umbral de la contraccin____ voltios.

2. Voltaje del estmulo mximo____ voltios.
3. Duracin del periodo de latencia____seg.
4. Duracin de la sacudida simple_____seg. Duracin del perodo de
contraccin_____seg. Duracin del periodo de relajacin ____ seg.
5. Fuerza de contraccin mxima de la sacudida simple_____ g.
6. Tensin de reposo en la cual se obtuvo la fuerza de contraccin mxima____g
7. *Tiempo de fatiga con estmulos aislados_____ min.
8. Fuerza mxima de la concentracin tetnica______ g.
9. Relacin de la sacudida simple-ttanos ______
10. *Tiempo de fatiga con el estmulo tetnico____ seg.

CUESTIONARIO

1. Qu es el umbral de contraccin?
2. Qu es un estmulo mximo?
3. En relacin con la contraccin isotnica e isomtrica, diga que tipo de contraccin
ocurre durante la caracterizacin de la sacudida simple y que tipo de contraccin
cuando se increment la tensin de reposo.
4. Utilizando la grfica intensidad del estmulo-fuerza de la contraccin, explique la
sumacin espacial.
5. Describa brevemente la relacin que hay entre el efecto de estmulos repetitivos con
la suma de las contracciones.
6. Mencione las causas de la fatiga muscular.
7. Que elementos del msculo esqueltico se piensa que son los responsables de la
tensin pasiva?
8. Explique las causas del fenmeno de la escalera.
Diga porque en esta prctica se utiliza el estimulador elctrico.

BIBLIOGRAFA

1) Andrew B.L. Muscle and Nerve. In: Experimental Physiology. Churchill

Livingstone. Edinburgh. pp 19-57. 1972.
2) Ganong F.W. Skeletal Muscle. In: Review of Medical Physiology. Lange Medical
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3) Guyton C.A. and Hall J.E. Contraction of Skeletal Muscle. In: Textbook of Medical
Physiology. Saundres. Philadelphia. pp 87-94. 2000.
4) Hoff H.E. Geddes L.A. Properties of Skeletal Muscle. In: Experimental Physiology.
Baylor University (Ed). Houston. USA. pp III-1-III-9. 1971.
5) Martin D.E. Neuromuscular Physiology. Electrical Stimulation of Nerve and
Muscle Tissues. In: Laboratory Experiments in Human Physiology. Narco Bio
System Inc. (Ed). Huston. pp 45-54. 1975.
6) Quintanar Stephano J.L. Propiedades del Msculo Esqueltico. En: Manual de
Prcticas de Fisiologa General. Universidad Autnoma de Aguascalientes (Ed).
Mxico. pp 91-96. 1989.
7) Schottelius B.A. Thomson J.D. Schottelius D.D. Stimulus-Response relationships in
Skeletal Muscle. Nerve. In: Physiology Laboratory Manual. Mosby. Saint Louis. pp
31-40. 1978.
8) Schottelius B.A. Thomson J.D. Schottelius D.D. Mechanical Behaviour of Skeletal
Muscle. Nerve. In: Physiology Laboratory Manual. Mosby. Saint Louis. pp 41-52.
1978.
9) Schottelius B.A. Thomson J.D. Schottelius D.D. Capacity of the Muscle to do
Work. Nerve. In: Physiology Laboratory Manual. Mosby. Saint Louis. pp 53-57.
1978.
10) Sherwood L. Muscle Physiology. In: Human Physiology; From Cells to System.
Brooks/Cole. USA. pp 239-258. 2001.
 LA PREPARACIN NEUROMUSCULAR

INTRODUCCIN

Las contracciones de un msculo pueden variar de intensidad. Un potencial de

accin nico en una fibra muscular induce una contraccin dbil y de corta duracin
llamada sacudida simple, y es incapaz de hacer un trabajo si esta ocurre en un msculo
ntegro. En el msculo ntegro, las fibras musculares estn dispuestas de tal manera que al
contraerse actan sinrgicamente produciendo contracciones de intensidad variable (mucho
ms fuertes que la sacudida simple de una sola fibra). En otras palabras, la fuerza ejercida
por el mismo msculo puede variar dependiendo del peso del objeto que se quiere mover.
La gradacin de las contracciones musculares dependen de 1) el nmero de fibras
musculares que se contraen y 2) la tensin desarrollada por cada unidad motora al activarse.

El nmero de fibras que se contraen dentro de un msculo depende del nmero de

unidades motoras activadas. Cada msculo est inervado por un cierto nmero de neuronas
motoras (motoneuronas). Cuando una neurona motora entra a un msculo se ramifica en
varias terminales nerviosas, y cada terminal nerviosa inerva a una fibra muscular
individual. As, una neurona motora inerva a varias fibras musculares y cuando esta se
activa, todas las fibras musculares que inerva se estimulan y se contraen simultneamente.
Al conjunto de una motoneurona con las fibras musculares que inerva se llama unidad
motora. Las fibras musculares de una unidad motora se distribuyen en la masa muscular,
as, al contraerse simultneamente provocarn una contraccin dbil pero uniforme de todo
el msculo. Cuando se requiere de una contraccin muscular dbil, solo unas pocas
unidades motoras se activarn, mientras que requerimientos de mayor fuerza, requerirn de
la participacin de un mayor nmero de unidades motoras. La manera ms conveniente
para estudiar las propiedades de la unidad motora es la preparacin neuromuscular.

La contraccin gradual del msculo esqueltico se puede lograr ya sea

incrementando el nmero de motoneuronas activadas simultneamente (sumacin espacial)
o incrementado la frecuencia de descarga de las motoneuronas individuales (sumacin
temporal).

La unin neuromuscular. La contraccin muscular esqueltica est bajo el control

del sistema nervioso. El paso de la informacin de la terminal nerviosa al msculo ocurre
en una estructura especializada llamada unin neuromuscular, sinapsis neuromuscular o
placa motora terminal. (Fig. 1).

El mecanismo por el cual la motoneurona activa a la fibra muscular a travs de la unin

neuromuscular, es el siguiente (Fig. 1):
1. Al llegar el potencial de accin a la terminal nerviosa en la unin neuromuscular, el
potencial de accin provoca un incremento en la conductancia al calcio, el cual
ingresa a la terminal nerviosa.
 2. En el interior, el calcio induce la migracin de las vesculas sinpticas ricas en
acetilcolina (ACh) hacia la superficie de la membrana de la terminal que ve hacia la
hendidura sinptica y se fusiona con ella. Esta fusin permite que la ACh sea
liberada al espacio sinptico, fenmeno conocido como exocitosis.
3. Desde el espacio sinptico la ACh difunde hasta la placa motora terminal en la
membrana muscular (membrana postsinptica) en donde se une a sus receptores
especficos.
4. La interaccin ACh-receptor, abre canales de sodio y en menor nmero canales de
potasio, incrementando la entrada de sodio y la salida de potasio, lo que despolariza
localmente a la membrana de la placa motora. Si dicha despolarizacin alcanza el
umbral de disparo de la fibra muscular, se desencadena un potencial de accin que
viaja por el sarcoplasma hacia ambos extremos de la fibra y al interior de la misma
por los tbulos T.
5. A nivel de la triada, el potencial de accin en los tubulos T provoca que el
retculo sarcoplsmico libere al calcio almacenado, el cual difunde e interacta con
los miofilamentos de actina de la sarcmera desencadenando el proceso de la
contraccin muscular. Al mecanismo por el que el potencial de accin muscular
desencadena la contraccin de la fibra, se le llama acople excitacin-contraccin.

La transmisin del impulso nervioso a travs de la unin neuromuscular puede ser

inhibido o facilitado por ciertas drogas. El curare y el falxedil son ejemplo de drogas
bloqueadoras, las cuales actan compitiendo por los receptores de la ACh en la membrana
de la placa motora. La prostigmina por el contrario, facilita el paso de los impulsos a travs
de la unin por medio de la inactivacin de la enzima acetilcolinesterasa, enzima que
degrada a la ACh, permitiendo as, que esta acte ms tiempo sobre sus receptores.

La unin neuromuscular, tambin es muy sensible a la fatiga y a su medio ambiente

qumico. Estmulos repetidos de alta frecuencia inducen una disminucin de la respuesta
contractil. A este fenmeno se le ha llamado Inhibicin de Wedensky, y se debe a que la
velocidad de liberacin y degradacin de la ACh excede a la velocidad de su sntesis en las
terminales nerviosas (fatiga nerviosa).

OBJETIVOS

Caracterizar las propiedades de la unin neuromuscular esqueltica de la rana,

realizando las siguientes maniobras:

1. Estimular al nervio citico con estmulos aislados para encontrar los estmulos
subumbral, umbral, mximo y supramximos capaces de provocar la contraccin
mnima y mxima respectivamente del msculo gastrocnemio.
2. Estimular al msculo directamente con estmulos aislados para encontrar los
estmulos subumbral, umbral, mximo y supramximo.
3. Caracterizar las contracciones musculares al estimular repetitivamente al nervio.
4. Comparar el tiempo de fatiga de la unin neuromuscular y el tiempo de fatiga del
msculo.
5. Observar el efecto del bloqueo de la unin neuromuscular sobre la actividad
muscular.

MATERIAL Y REACTIVOS

Biolgico: Rana

Equipo: 1) Fisiografo (un canal) 2) Transductor migrafo tipo C 3) Estimulador elctrico

4) Canalizador de pulsos 5) Electrodos de estmulo de ganchillo y de alfiler 6) Juego de
pesas 7) Estativo 8) Tornillo de tensin 9) Estuche de disecciones 10) Disectores de vidrio
11) Estilete 12) Hilo fuerte 13) Jeringa de 3 ml.

Soluciones: 1) Ringer rana a temperatura ambiente 2) Tubocurarina (1 mg/ml) (Sigma).

Calibre el canal del fisigrafo con un transductor migrafo tipo C. Utilizando una
pesa adecuada, calibre la amplitud del registro a 2.5 cm = 50 g.

Preparacin neuromuscular

Destruya el cerebro y la mdula espinal de una rana y colquela sobre la mesa de

disecciones. Corte circularmente la piel de la porcin proximal de uno de los muslos. Jlela
hacia abajo para retirar toda la piel del muslo y de la pierna (sale como si fuera un caletn).
Con los disectores de vidrio diseque el msculo gastrocnemio en toda su longitud. Amarre
el tendn de Aquiles (porcin distal) con un hilo doble de unos 15 cm de longitud, deje un
pequeo espacio entre el hilo y el tendn para que el hilo no se resbale durante las
maniobras experimentales. Con la solucin de Ringer rana mantenga hmeda la
preparacin a lo largo del experimento. Corte el tendn entre el nudo del hilo y su insercin
en el hueso calcneo y eleve el msculo gastrocnemio. Coloque a la rana en decbito
ventral. Con cuidado y utilizando los disectores de vidrio diseque, a todo lo largo del muslo
el nervio citico, localizado entre los msculos semimembranoso y glteo. Antes de fijar la
rana a la tabla del estativo, pase un hilo doble por cada uno de los orificios que la
atraviesan. Tome a la rana y pase la pata por las asas dejadas por los hilos dobles hasta
llegar a la porcin proximal de la tibia (rodilla). Jale los hilos fuertemente para que la
rodilla y los huesos de la pierna queden firmemente apretados a la superficie de la tabla.
Fije los hilos a los sujetadores que se encuentran a los lados de la misma. Tome el cabo
suelto del hilo amarrado al tendn y haga un nudo dejando una pequea asa e introdzcala
en la palanca del transductor migrafo. Inserte los electrodos de estmulo de alfiler en los
extremos distal y proximal de la masa muscular. Con cuidado monte el nervio citico sobre
los electrodos de ganchillo, teniendo cuidado que el electrodo no toque ningn otro tejido
de la rana .

Establezca la velocidad del papel a 0.25 cm/seg y realice las siguientes maniobras:

1) Determinacin de los estmulos de intensidad subumbral, umbral, mxima y

supramxima del nervio a travs de su efecto sobre la contraccin muscular
(sumacin espacial).

Con el tornillo de tensin ajuste la tensin del msculo y estimule el nervio con
estmulos nicos de 2 mseg de duracin y con voltaje creciente, desde cero hasta
observar las respuestas mnima y mxima del msculo. Anote la intensidad de los
diferentes estmulos aplicados y la magnitud de las contracciones. Con los datos
llene la Tabla 1 e identifique los voltajes de los estmulos; umbral, mximo y
supramximos.

2) Determinacin de los estmulos de intensidad subumbral, umbral, mximo y

supramximo estimulando directamente al msculo (sumacin espacial).
Estimule directamente al msculo con estmulos nicos de 2 mseg de duracin y
con voltaje creciente desde cero hasta observar las respuestas mnima y mxima del
msculo. Anote la intensidad de los diferentes estmulos aplicados y la magnitud de
las contracciones. Con los datos llene la Tabla 2 e identifique los estmulos umbral,
mximo y supramximo.

3) Efecto de estmulos repetitivos (sumacin temporal del msculo).

Con el estmulo mximo del nervio, estimule al nervio con frecuencias de 3, 5, 7.5,
10, 15, 20 y 25 pulsos/seg durante 3 seg en cada punto. Permita que la preparacin
descanse 5 seg entre cada tren de estmulos. Note la suma de las contracciones y
determine si se han presentado el ttanos y la fatiga.

4) Fatiga de la unin neuromuscular (efecto de estmulos repetitivos):

 Asegrese de que el canalizador de pulsos este conectado al nervio

a) Seleccione en el estimulador, estmulos de 2 mseg de duracin, cero de

frecuencia y el voltaje del estmulo mximo al nervio.
b) Iniciando con 0 de frecuencia, incremente gradualmente la frecuencia de los
estmulos hasta alcanzar una contraccin tetnica sostenida. Mantenga el
ttanos hasta que la fuerza de la contraccin del msculo haya cado a la
mitad de la amplitud mxima.
c) Rpidamente ajuste el voltaje del estmulo mximo al msculo y cambie la
palanca del canalizador de pulsos para que los estmulos pasen directamente
al msculo. Observe como se incrementa la amplitud de la contraccin
tetnica. Esta mayor capacidad de respuesta del msculo a la estimulacin
directa se debe a que la unin neuromuscular se ha fatigado. Para
comprobarlo, cambie al voltaje del estmulo mximo al nervio y cambie el
canalizador de pulsos para estimular al nervio y observe como la amplitud
de la contraccin tetnica disminuye an ms. Pase de nueva cuenta a
estimular el msculo directamente y observe el resultado.

Con cuidado desmonte la preparacin neuromuscular y vuelva a montarla en la otra pata.

Antes de continuar ajuste la tensin de reposo del msculo y encuentre el estmulo mximo
del nervio y del msculo capaces de provocar una contraccin muscular mxima. Calibre el
registro de tal manera que 2.5 cm de amplitud = 50 gr. Ajuste la velocidad del papel a 0.1
cm/seg.

5) Bloqueo de la unin mioneural:

a) Con la jeringa, vierta directamente sobre la masa muscular la solucin
tubocurarina y espere 2 o 3 minutos para asegurarse de que la droga se haya
difundido al interior de la masa muscular.
b) Estimule directamente al nervio con estmulos de 2 mseg. de duracin y
frecuencia de 2/seg durante 3 seg cada 10 seg. Observe la respuesta
contrctil conforme avanza el tiempo y contine estimulando hasta que ya
no haya ms contracciones.
c) Con el canalizador de pulsos pase a estimular directamente al msculo con
el estmulo mximo del msculo y observe la amplitud de las contracciones.
Como un control, reestimule al nervio con el mismo voltaje usado en el
msculo. Observe el bloqueo completo de la unin neuromuscular.

RESULTADOS:

TABLA 1. Respuesta contrctil del msculo a la

estimulacin nerviosa en la preparacin neuromuscular.
Determinacin de los estmulos: umbral, mximo y
supramximo.
 VOLTAJE AMPLITUD DE LA
CONTRACCIN

Con los datos de la Tabla 1, haga una grfica con el voltaje en las abscisas y la
amplitud de las contracciones en las ordenadas. Exprese la amplitud en gramos. Seale en
la curva los estmulos subumbrales, umbral, mximo y supramximos.

TABLA 2. Respuesta contrctil del msculo a la

estimulacin muscular directa. Determinacin de los
estmulos: umbral, mximo y supramximo.
VOLTAJE AMPLITUD DE LA
CONTRACCIN

Con los datos de la Tabla 2, haga una grfica con el voltaje en las abscisas y la
amplitud de las contracciones en las ordenadas. Exprese la amplitud en gramos. Seale en
la curva los estmulos subumbrales, umbral, mximo y supramximos.

Complete las siguientes datos.

Fuerza de contraccin (en gramos) de la sacudida simple al estimular el
nervio_____g; al estimular el msculo____g
Fuerza de la contraccin mxima durante el ttanos al estimular el nervio_____g; al
estimular el msculo______g.
Relacin de la fuerza de contraccin en ttanos/sacudida simple al estimular el
nervio________.
Tiempo de la fatiga de la unin neuromuscular ________s.
Tiempo de la fatiga muscular ______s.

CUESTIONARIO

1) Explique porque al incrementarse la intensidad del estmulo al nervio se incrementa

la amplitud de las contracciones.
2) Explique porque al incrementarse la intensidad del estmulo al msculo se
incrementa la amplitud de las contracciones.
 3) A qu se debe que la intensidad del estmulo umbral sea diferente en el nervio y en
el msculo?
4) Por qu al incrementarse la frecuencia de los estmulos al nervio se obtiene una
mayor fuerza de contraccin en comparacin con la de la sacudida simple?
5) Cuales son las causas de la fatiga de la unin neuromuscular y cuales las de la
fatiga muscular?
6) Explique el mecanismo de accin del curare en el bloqueo de la unin
neuromuscular.
7) Investigue los efectos de la toxina botulnica, del veneno de la araa viuda negra y
el gas mostaza sobre la unin neuromuscular.
Investigue en que consiste la enfermedad autoinmune conocida como Mistenia
gravis.

BIBLIOGRAFA

1) Andrew B.L. Muscle and Nerve. In: Experimental Physiology. Churchill

Livingstone. Edinburgh. pp 19-57. 1972.
2) Ganong F.W. Neuromuscular Transmission. In: Review of Medical Physiology.
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3) Guyton C.A. and Hall J.E. Excitation of Skeletal Muscle; A. Neuromuscular
Transmission and B. Excitation-Contraction Coupling. In: Textbook of Medical
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4) Hoff H.E. Geddes L.A. The Nerve-Muscle Preparation. In: Experimental
Physiology. Baylor University (Ed). Houston. USA. pp IV-1 IV-6. 1971.
5) Martin D.E. Neuromuscular Physiology. Electrical Stimulation of Nerve and
Muscle Tissues. In: Laboratory Experiments in Human Physiology. Narco Bio
System Inc. (Ed). Huston. pp 45-54. 1975.
6) Quintanar Stephano J.L. Caractersticas Fisiolgicas de la Unin Mioneural. En:
Manual de Prcticas de Fisiologa General. Universidad Autnoma de
Aguascalientes (Ed). Mxico. pp 101-105. 1989.
7) Sherwood L. Neuromuscular Junction. The Peripheral Nervous: Efferent Division.
In: Human Physiology; From Cells to System. Brooks/Cole. USA. pp 231-236.
2001.
 MOTILIDAD DEL MUSCULO LISO INTESTINAL AISLADO

INTRODUCCIN

En el organismo, el msculo liso se encuentra en una gran variedad de

localizaciones, entre las que destacan: 1) el tubo digestivo 2) las paredes de los vasos
sanguneos 3) las vas areas, especialmente bronquolos 4) el tracto genitourinario 5) los
msculos ciliar e iris en el ojo 6) los msculos piloerectores y 7) conductos glandulares
exocrinos.

Los msculos esqueltico, cardiaco y liso tienen similitudes y diferencias

fundamentales, las cuales sern mencionadas aqu y demostradas en el curso de la prctica.
El msculo liso puede experimentar contracciones lentas y sostenidas espontneas (sin
estimulacin nerviosa); el msculo intestinal que se emplea en esta prctica se contraer
por horas si el medio qumico que lo baa semeja las condiciones del medio interno del
organismo. Todos los msculos lisos tienen un tono intrnseco o una tensin de reposo al
que se superponen las contracciones musculares. Esto contrasta con el msculo esqueltico,
en el que la denervacin provoca prdida del tono. El msculo liso (al igual que el msculo
cardiaco) esta bajo el control exclusivo del sistema nervioso autnomo a travs de las
divisiones simptica y parasimptica que lo inervan. Al igual que en el msculo esqueltico
y cardiaco, la contraccin muscular del msculo liso se basa en la interaccin de los
filamentos de actina y miosina, aunque la bioqumica de la contraccin en el msculo liso
es ligeramente diferente, dando lugar a algunas de las propiedades contrctiles propias del
msculo liso. El nombre de msculo liso se debe a que no presenta la organizacin estriada
de los filamentos de actina y de miosina en las sarcmeras tpicas del msculo esqueltico y
cardiaco.

Los msculos lisos se dividen en dos categoras: a) msculo liso de multiunidades y

b) msculo liso unitario (tambin llamado visceral o sincicial). En esta prctica
estudiaremos el msculo liso unitario, en el que la activacin espontnea (intrnseca,
inherente) o la estimulacin elctrica de una pequea rea de masa muscular resulta en la
contraccin de toda la masa. Los mejores ejemplos de este tipo de msculos son los
localizados en el tubo digestivo, tero y vejiga y los dems conductos genitourinarios.
Estos tejidos presentan zonas con propiedades de marcapaso (como las del corazn), que
dan lugar a las contracciones musculares rtmicas. La actividad contrctil puede ser
afectada por el sistema nervioso que se sobrepone. El msculo liso de multiunidades no se
contrae espontneamente y depende de la inervacin motora para contraerse. Un ejemplo
de esto es el msculo piloerector de la base de los pelos en la piel, el que al ser estimulado
y contraerse induce la conocida piel de gallina. El msculo ciliar, el iris y el msculo de
los grandes vasos sanguneos son tambin ejemplos de msculo liso de multiunidades.

El msculo liso intestinal est ricamente inervado por plexos nerviosos que rodean
las capas longitudinal y circular. Una parte de este tejido exhibe contracciones circulares y
longitudinales, en adicin a las contracciones peristlticas. El msculo responde al
estiramiento incrementando su longitud pero tendiendo siempre a mantener el contenido
bajo presin constante o en un estado de contraccin isotnica (tono basal). El msculo liso
tambin responde a cambios en la temperatura, cuando esta aumenta, disminuye el umbral
elctrico para la contraccin muscular e incrementa la frecuencia (ritmicidad) y amplitud de
las contracciones. La estimulacin elctrica intensa a menudo da lugar a contracciones
sostenidas.

Los diferentes rganos viscerales reaccionan de una manera diferente a un mismo

estmulo qumico. Por ejemplo, la epinefrina (adrenalina) deprime la ritmicidad del
msculo liso intestinal, provocando relajacin, mientras que en otros lugares como en el
msculo liso arteriolar, induce una contraccin intensa. Por otro lado la acetilcolina (ACh),
en pequeas cantidades incrementa la amplitud de las contracciones intestinales y a
mayores cantidades produce una contraccin sostenida.

OBJETIVOS
1) Observar y registrar las contracciones rtmicas espontneas del msculo liso
intestinal aislado de conejo y b) estudiar los cambios en el tono, frecuencia y
amplitud de las contracciones rtmicas en respuesta a las siguientes condiciones:
2) Efecto de drogas que mimetizan y bloquean las acciones del sistema nervioso
parasimptico y simptico.
3) Efectos de cambiar la temperatura del medio
4) Efectos de la hipoxia

MATERIAL Y MTODOSUIPO

1) Fisigrafo (un canal), 2) migrafo tipo B, 3) Pesa de 5 gr, 4) estativo y tornillo de

tensin 5) hilo y estuche de disecciones, 6) llaves de paso, 7) caja de Petri, 8) solucin de
ACh (1 mg/ml), 9) solucin de adrenalina (1 mg/ml), 10) solucin de prostigmina (0.5
mg/ml) 11) solucin de atropina (1 mg/ml), 12) Sistema de perfusin para rgano aislado
de mamfero (Fig. 1) conformado por:
a) Bao Mara a 38 C con bomba de perfusin y mangueras de conexin
b) Termmetro
c) Refrigerante
d) Solucin Ringer para mamfero a 38 C con recipiente de reserva
e) Solucin de Ringer para mamfero a 4 C
f) Solucin de Ringer para mamfero a 40 C
g) Sistema de oxigenacin (aireacin) (bomba de aire para pecera)
h) Cmara para msculo liso con tapn y tubo en Y con mangueras y pinzas
i) Recipiente para solucin de desecho

PROCEDIMIENTO

Analice, identifique y estudie en la Figura 1 cada una de las partes que componen el
sistema para mantener vivo el intestino aislado de conejo (in Vitro).

Encienda y calibre un canal del Fisigrafo con un migrafo tipo B, de tal manera que
5 gr desplacen la plumilla 4 cm. Ajuste la velocidad del papel a 0.5 cm/seg. Cheque la
plumilla de tiempo y seleccione una marca por segundo. Levante la palanca de las
 plumillas, pare el desplazamiento del papel y proceda o obtener el intestino delgado de
un conejo. Disponga adecuadamente del cadver del conejo.

Obtenga un tramo de 20 cm de intestino delgado de un conejo y colquelo

rpidamente en la caja de Petri llena de Ringer precalentado y aireado. Crtelo en tramos de
unos 3 cm de longitud. Tome un tramo y con una aguja curva pase en cada extremo y de
dentro hacia fuera de la pared intestinal un hilo delgado (10 cm de largo) teniendo cuidado
de no ocluir la luz intestinal. Con uno de los hilos haga una asa corta (0.5-1.0 cm). Despus
de seguir las instrucciones de la nota*, proceda a montar rpidamente el intestino en la
cmara de rgano aislado segn se ilustra en la Fig. 1. Observe como el asa de hilo se
engarza en el ganchillo del tapn del fondo de la cmara, mientras que el otro se engarza en
el ganchillo del migrafo. Cheque continuamente que el bao tenga una temperatura de 38
C y que el sistema de aireacin trabaje adecuadamente.

*Nota: Llamaremos llave (1) a la que une al recipiente de Ringer con la cmara de
intestino y llave (2) a la que drena el paso de la cmara de intestino con el recipiente de
desecho. Con la llave 2 cerrada, abra la llave 1 y llene la cmara para msculo hasta la
marca de 50 ml. El Ringer fluir por gravedad. Asegrese que el sistema de aireacin est
burbujeando en el Ringer de la cmara. Proceda a montar el fragmento de intestino segn se
explica en el prrafo anterior.

PRECAUCIN: El msculo liso es extremadamente sensible a la sobre distensin.

Si la tensin de reposo del msculo es muy grande, pierde sus propiedades contrctiles y su
ritmicidad. Asimismo, es muy sensible a cambios en la temperatura, desecacin e hipoxia
de tal manera que cambios extremos de estas variables deterioran rpidamente la
preparacin.

Con una velocidad del papel de 0.1 cm/seg y la plumilla de tiempo a una marca por
cada 30 segundos obtenga el registro de la actividad contrctil espontnea del msculo liso.

Reajuste la sensibilidad del Fisigrafo si es necesario.

1) RITMICIDAD INHERENTE
Continuando con las condiciones anteriores, con el tornillo de tensin incremente
gradualmente la tensin sobre el msculo y obtenga un registro adecuado. A las
contracciones y relajaciones regulares se les llama movimientos pendulares y son
producidos por las fibras musculares mismas (miognicos). Estos movimientos son
diferentes de los movimientos peristlticos, los cuales dependen de la inervacin de la
pared intestinal (neurognicos). Aplique tensin suficiente hasta observar contracciones de
algunos centmetros de amplitud. Centre el registro sobre el papel. Una vez estabilizado el
registro, obtenga un registro control durante 4 minutos. Determine la amplitud y la
frecuencia de las contracciones. Cheque la temperatura y la oxigenacin (puede ser
necesario esperar algunos minutos para que las contracciones se estabilicen).
2) EFECTO DE LAS DROGAS SIMPATICAS Y PARASIMPATICAS:

a) Efectos de la acetilcolina (Ach)

Con la velocidad del papel a 0.1 cm/seg y la plumilla de tiempo en 1 marca cada 30
seg, obtenga un registro control de 2-3 minutos (registro basal). Cambie la velocidad del
papel a 0.5 cm/seg y la plumilla de tiempo a 1/seg. Vierta en la cmara de intestino 0.5 mg
de Ach. Al mismo tiempo que vierte el frmaco, otro compaero presionar el botn
marcador de eventos. Registre el efecto durante 2 minutos. Pare el registro y lave el
msculo cambiando la solucin de Ringer abriendo primero la llave 2 para que salga la
solucin de desecho. Cirrela y abra la llave 1 hasta que se llene la cmara hasta la marca
de 50 ml, espere dos minutos y repita el lavado. Deje unos minutos para que se restablezca
la ritmicidad basal**. Cheque continuamente que el sistema de burbujeo trabaje
adecuadamente. Antes de continuar al punto b) determine en el registro lo siguiente: 1)
periodo de latencia, 2) el cambio de tono muscular, 3) amplitud de los registros y 4)
frecuencia de las contracciones.

**Nota: Se siguen las mismas indicaciones de lavado despus de registrar los

efectos de cada frmaco.

b) Efectos de la adrenalina
Con la velocidad del papel a 0.1 cm/seg y la plumilla de tiempo en 1 cada 30
segundos, obtenga un registro control de 2-3 minutos. Incremente la velocidad del papel a 1
cm/seg y ponga la plumilla de tiempo en 1/segundo y vierta en la cmara de intestino 0.1
mg de la solucin de adrenalina. Registre los cambios en el tono basal, amplitud y
frecuencia de las contracciones. No olvide sealar simultneamente con el botn marcador
de eventos para determinar el perodo de latencia. Observe el efecto durante 6-8 minutos,
pare el fisigrafo, proceda a lavar la preparacin dos veces segn se describi y cuantifique
las variables sobre el registro. Espere a que la preparacin recupere la ritmicidad basal.

c) Efectos de la prostigmina
Obtenga un registro control de 2 minutos y vierta 0.05 mg de la solucin de
prostigmina en la cmara de intestino y registre los cambios en el tono basal, amplitud y
frecuencia de las contracciones durante 3-4 minutos. Sin lavar el msculo agregue 0.1 mg
de la solucin de Ach a la cmara de intestino. No olvide sealar simultneamente con el
botn marcador de eventos para determinar los periodos de latencia. Determine si ocurre un
mayor incremento en el tono basal, intensidad y frecuencia de las contracciones. Lave el
msculo 3-4 veces y espere hasta que se recupere la ritmicidad basal.

d) Efectos de la atropina
Obtenga un registro control de 2 minutos y vierta en la cmara 0.05 mg de la
solucin de atropina. Registre los cambios en el tono basal, amplitud y frecuencia de las
contracciones durante unos 5-8 minutos. Sin lavar el msculo agregue 0.5 mg de la
solucin de Ach a la cmara de intestino. No olvide sealar simultneamente con el botn
marcador de eventos para determinar los periodos de latencia. Registre los cambios en el
tono basal, amplitud y frecuencia de las contracciones durante unos 4-5 minutos. Lave 2-3
veces y espere a que se recupere la ritmicidad basal. Observe: a) el efecto bloqueador de la
atropina sobre la actividad muscular y b) si el efecto de la atropina es ms duradero que el
de los dems frmacos.

3) EFECTO DE LA TEMPERATURA:
Obtenga un registro control de 2 minutos y anote la temperatura en la cmara para
msculo liso. Apague la bomba de perfusin, vace la cmara del msculo y vierta Ringer a
4 C. Anote la temperatura y registre los cambio en el tono basal, amplitud y frecuencia de
las contracciones durante unos minutos. Vace la cmara y llnela con Ringer a 40 C.
Anote la temperatura en la cmara y registre los cambios en el tono basal, amplitud y
frecuencia de las contracciones durante 1 minuto. Encienda la bomba de perfusin, lave la
preparacin dos veces y espere a que la ritmicidad basal se restablezca.

EFECTO DE LA HIPOXIA:
Obtenga un registro control de 2 minutos y desconecte la bomba de aireacin.
Observe el efecto de la hipoxia sobre el tono basal, amplitud y frecuencia de las
contracciones. Cuando el efecto se haya hecho aparente, conecte nuevamente el sistema de
oxigenacin y vea si se recupera la ritmicidad basal.

Apague el fisigrafo y desmonte el sistema del canal de registro. Apague el bao

Mara y la bomba de aireacin. Desmonte la preparacin y lave y limpie todo el material
que haya utilizado.

Con los registros obtenidos en cada objetivo, llene la siguiente tabla:

TABLA 1. RESUMEN DE LOS DATOS

PROTOCOLO TONO BASAL AMPLITUD FRECUENCIA
EXPERIMENTAL
RITMICIDAD
INHERENTE

BASAL
ACETILCOLINA
BASAL
ADRENALINA

BASAL
PROSTIGMINA

BASAL
ATROPINA

BASAL
ATROPINA+Ach

BASAL (38oC)
TEMPERATURA

BASAL
HIPOXIA

CUESTIONARIO

1) Enumere los diversos lugares en donde se encuentra el msculo liso e identifique el

tipo de msculo liso que corresponde a cada uno de ellos (msculo liso unitario,
msculo liso de multi-unidades).
2) Explique en que consiste el fenmeno de plasticidad del msculo liso
3) Que son los movimientos pendulares intestinales y cual es su origen?
4) Cmo se producen las ondas peristlticas intestinales?
5) Describa el mecanismo de control de los movimientos intestinales por el sistema
nervioso.
6) Describa el mecanismo de accin de la Ach sobre la motilidad del msculo liso
intestinal.
7) Sobre que msculos lisos se cree que la Ach tiene efecto vasodilatador?
8) Describa el mecanismo de accin de la adrenalina sobre la motilidad del msculo
liso intestinal.
9) Si en el sistema nervioso simptico postganglionar solo se libera noradrenalina en
sus terminales nerviosas, como se explica el efecto de la adrenalina sobre el
msculo liso intestinal?
10) Describa el mecanismo de accin de la prostigmina
11) Que es la atropina, cual es su mecanismo de accin y cuales son sus efectos a nivel
intestinal y a nivel cardiaco?
12) Explique porque es ms persistente el efecto de la atropina.
Explique el objetivo que tiene el suministro de oxgeno, mantenimiento de la
temperatura, la solucin Ringer y el sistema de lavado del dispositivo experimental.

BIBLIOGRAFA
1) Andrew B.L. Mammalian Intestinal Muscle in Vitro. In: Experimental Physiology.
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8) Quintanar Stephano J.L. Propiedades del Msculo Liso. En: Manual de Prcticas de
Fisiologa General. Universidad Autnoma de Aguascalientes (Ed). Mxico. pp
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9) Sherwood L. Muscle Physiology. Smooth and Cardiac Muscle In: Human
Physiology; From Cells to System. Brooks/Cole. USA. pp 270-278. 2001.
 PROPIEDADES DEL MUSCULO CARDIACO

CONOCIMIENTOS PREVIOS:

Para comprender la presente prctica, es necesario que el alumno domine conceptos

tericos como los siguientes:

1) Diferencias entre sincicio (sincitio) estructural y sincitio funcional

2) Unin comunicante del tipo Nexo
3) Potencial de membrana en reposo y potencial de accin
4) Papel de los iones Na+, K+ y Ca++ en el potencial de membrana en reposo y en el
potencial de accin del msculo cardaco
5) Inervacin y efectos del sistema nervioso autnomo sobre el corazn
6) Ritmicidad inherente o automatismo cardiaco
7) Perodo refractario.

INTRODUCCIN:

Por la disposicin del sus elementos contrctiles en el sarcoplasma, los msculos

cardaco y esqueltico son de tipo estriado. En el msculo cardiaco al igual que en el
msculo liso, las fibras musculares forman un sincicio funcional. El carcter sincicial est
dado por la presencia de uniones intermembranales de tipo nexo (uniones comunicantes),
localizadas entre las membranas de los discos intercalares de dos fibras adyacentes. Las
uniones tipo nexo, son sitios de baja resistencia elctrica que permiten el paso de la
corriente despolarizante de una fibra a otra permitiendo la conduccin del potencial de
accin de una fibra a la siguiente.

Debido a lo anterior, un potencial de accin que se origine en cualquier lugar del

miocardio, viajar a las fibras adyacentes, teniendo como consecuencia la contraccin de
carcter todo o nada de la masa muscular.

Al igual que el msculo esqueltico, el msculo cardiaco tambin se caracteriza por

la capacidad que tiene de incrementar la fuerza de contraccin de sus fibras (dentro de
ciertos lmites), cuando se incrementa la longitud de reposo (distole). A este fenmeno se
le conoce como Ley de Frank-Starling del corazn..

El msculo cardiaco posee varios tipos de fibras musculares, aqu mencionaremos

las fibras de trabajo y las fibras del sistema de excitacin y conduccin. Las fibras de
trabajo auriculares y ventriculares son las responsables de mover la sangre y hacerla
circular por las cavidades cardiacas y la circulacin general, mientras que las del sistema de
excitacin y conduccin del corazn son las que se encargan de generar los impulsos
cardiacos (automatismo, ritmicidad inherente) y conducir los impulsos cardiacos a todo el
corazn de una manera tal que el corazn se contrae de una manera sincronizada,
convirtindolo en una bomba eficiente. Esta sincrona en la contraccin del corazn,
permite distinguir dos fases de la actividad cardiaca fcilmente identificables; la sstole
(contraccin) y la distole (relajacin). La propiedad del automatismo y la actividad
contrctil que la acompaa, se aprecia mejor cuando el corazn est fuera del cuerpo
siempre y cuando el corazn se encuentre inmerso en un medio ambiente adecuado. Tanto
las fibras de trabajo como del sistema de excitacin y conduccin del corazn estn bajo el
control del sistema nervioso autnomo.

Como se mencion, en el corazn existe un conjunto de fibras musculares

modificadas. Este sistema, tiene la propiedad de autoexcitase ms frecuente que el resto de
las fibras cardiacas. Esta especializacin les permite generar potenciales de accin con
mayor frecuencia que el resto de tejido cardiaco. Debido a esta propiedad, a este tejido se le
llama sistema de excitacin y conduccin del corazn, que se distribuye por todo el corazn
de la siguiente manera: 1) Nodo-senoauricular (Nodo S-A), 2) fibras auriculares
internodales, 3) nodo aurculoventricular (Nodo A-V), 4) haz de His y 5) fibras de
Purkinje.

De estas estructuras, el nodo S-A. es el que genera el mayor nmero de potenciales

de accin por unidad de tiempo, de modo que la frecuencia con la cual se contrae el
corazn, depende de la frecuencia de descarga de esta estructura, razn por la cual se le
llama marcapaso cardaco.

El tejido marcapaso se comporta de esta manera debido a que sus fibras presentan
un potencial de membrana inestable, originada por las propiedades del sarcolema para la
conductancia inica.

Adems, la actividad de la fibras de trabajo y de las fibras del sistema de

conduccin, es modulada por las caractersticas qumicas y fsicas del medio extracelular,
entre las que destacan diversos iones con los siguientes efectos:

1) El incremento de la concentracin extracelular de potasio:

a) Disminuye la frecuencia cardiaca.
b) Disminuye la velocidad de conduccin del potencial de accin especialmente
a nivel del Nodo A-V
c) Provoca arritmias y fibrilacin cardacas, ya que favorece la aparicin de focos
ectpicos
d) Disminuye la fuerza de contraccin
e) Provoca inexcitabilidad de las fibras y conduce al paro cardaco en distole

2) La disminucin en la concentracin extracelular de potasio:

a) Hiperpolariza a las fibras y las torna inexcitables.
3) El incremento en la concentracin extracelular de calcio:
a) Disminuye la frecuencia cardiaca.
b) Incrementa la fuerza de contraccin de la fibras.
c) Provoca relajacin incompleta.
d) Conduce al paro cardaco en sstole (rigor de calcio).
4) La disminucin en la concentracin extracelular de calcio:
a) Incrementar la excitabilidad de las clulas y su tendencia a descargar
espontneamente.
 b) Incrementa la frecuencia cardiaca.

Cambios en las caractersticas fsicas del medio extracelular, producen los siguientes
efectos:

1) El incremento en la temperatura del lquido extracelular, incrementa la intensidad del

metabolismo celular y la cintica de los sistemas enzimticos y en consecuencia incremento
en la frecuencia y fuerza de contraccin del corazn. La disminucin de la temperatura
causa efectos opuestos

Adems de los factores anteriores y como se coment anteriormente, la actividad cardiaca

es modulada por el sistema nervioso autnomo de la siguiente manera:

a) La inervacin parasimptica llega al corazn por medio de los nervios vagos y su

estimulacin provoca disminucin de la frecuencia cardiaca y de la fuerza de contraccin,
pudiendo llegar al paro cardiaco. Dicho efecto es mediado por la acetilcolina (ACh), la cual
induce hiperpolarizacin de las fibras cardacas al incrementar la conductancia al in
potasio.

b) La inervacin simptica proviene de los ganglios cervicales y su estimulacin

incrementa la frecuencia y la fuerza de contraccin del corazn, as como la velocidad de
conduccin del potencial de accin. Los efectos simpticos son mediados por la
noradrenalina (adrenalina), la cual incrementa la conductancia del sarcolema a los iones de
sodio y de calcio.

A diferencia del msculo esqueltico, las fibras cardiacas son incapaces de sufrir
tetanizacin; esto se debe a que los cardiocitos poseen un perodo refractario prolongado,
lo que constituye un factor de seguridad que protege al corazn contra la aparicin de focos
ectpicos, fibrilacin y tetanizacin.

Al perodo refractario se le puede definir como una fase de la actividad elctrica de

las fibras cardiacas, durante la cual, cualquier estmulo elctrico (o potencial de accin) no
importa cun intenso sea, no es capaz de producir una respuesta elctrica propagada
adicional, es decir no se producir un nuevo potencial de accin (periodo refractario
absoluto; desde la fase 0 a la fase inicial de la fase 3 del potencial de accin). El periodo
refractario relativo es la etapa del potencial de accin durante la cual un estmulo de
intensidad mayor puede provocar un nuevo potencial de accin. Este periodo se extiende
desde el final del primer tercio, hasta casi el final del tercer tercio de la fase de
repolarizacin (fase 3 del potencial de accin).

OBJETIVOS:

El alumno examinar las propiedades del msculo cardaco midiendo:

1) La duracin de la sstole, la distole y el ciclo cardiaco
2) El efecto de la carga diastlica (Ley de Frank-Starling)
3) El efecto de la estimulacin del nervio vago derecho sobre la actividad cardiaca
 4) El bloqueo del sistema parasimptico por la atropina
5) El perodo refractario del corazn
6) El efecto de la temperatura sobre la frecuencia cardiaca
7) El efecto de las drogas simpticas y parasimpticas sobre la actividad cardiaca
8) Efecto de los iones sobre el corazn
9) El automatismo en el corazn aislado

MATERIALES Y REACTIVOS:

Biolgico: Tortuga

Equipo:

1) Fisiografo (un canal)

2) Transductor migrafo tipo B o C
3) Estimulador electrnico
4) Cables: a) Principal, b) del No. 9 y c) de salida del estimulador
5) Electrodos de estmulo de ganchillo y de alfiler
6) Juego de pesas
7) Estativo y tornillo de tensin
8) Estuche de disecciones: bistur, tijeras, tijeras finas, pinzas de diseccin con dientes,
pinzas de diseccin con dientes fina, disectores de vidrio y estilete metlico
9) Serrucho quirrgico
10) Hilos: camo doble cero e hilo delgado
11) Tabla de disecciones para tortuga

Soluciones:

1 Solucin de adrenalina (1 mg/ml)

2 Solucin de acetilcolina (1 mg/ml)
3 Solucin de CaCl2 0.5 M.
4 Solucin de KCl 0.5 M.
5 Ringer tyrode glucosado a 5, 15 y 25C.
6 Solucin de sulfato de atropina (1 mg/ml).

Cristalera:

1) Tres vasos de precipitado de 100 ml

2) Caja Petri
3) Cinco jeringas de 5 ml con aguja

MTODOS:

Calibre un canal del Fisiografo con un acoplador 7173. Con el sistema de pesas
calibre la amplitud del registro de tal manera que 10 g = 1 cm. Recuerde que dependiendo
de las caractersticas contrctiles del corazn, se puede cambiar la sensibilidad del registro.
Si esto es necesario, no olvide volver a calibrar la amplitud del registro.

Destruya el encfalo y la mdula espinal de una tortuga con el estilete. Una vez
sacrificado el animal, serruche los istmos que unen el plastrn con el caparazn. Coloque la
tortuga en decbito dorsal y con los hilos de camo doble cero fije las patas a los extremos
de la tabla de disecciones. Utilizando tijeras, bistur y pinza de diseccin con dientes, con
cuidado desprenda el plastrn a partir del cuello, teniendo cuidado de no lastimar al
corazn. Una vez que ha descubierto el trax, observe el corazn latiendo por debajo del
pericardio. Con cuidado corte el pericardio y exponga al corazn teniendo cuidado de
respetar el frenulum (ligamento que une la punta del corazn con el pericardio). Con el
corazn expuesto, observe e identifique la sstole (contraccin) y la distole (relajacin) y
con su reloj cuente la frecuencia cardiaca. Anote el resultado en la hoja de respuestas.

Pase un hilo delgado de unos 20 cm de longitud por abajo del corazn y amarre
fuertemente el frenulum (deje una pequea masa de pericardio para evitar que el hilo se
resbale cuando se aplique tensin al rgano). Corte el frenulum separndolo del pericardio
y jale el hilo hacia arriba. Sujete el otro extremo del hilo al ganchillo del migrafo e inicie
el registro de la actividad contrctil del corazn.

Con una velocidad del papel a 0.25 cm/seg inicie el registro de la actividad
contrctil del corazn. Presione el botn de Record del amplificador del canal y con el
tornillo de tensin aplique una tensin suficiente al corazn de modo que obtenga registros
de 35 cm de amplitud.

Duracin del ciclo cardiaco, de la sstole, de la distole y medicin de la frecuencia

cardiaca.
Ponga la unidad del desplazamiento del papel a 10 cm/seg. y haga 4 registros del
ciclo cardiaco. Pare el registro. Para evitar la desecacin del corazn y mantenerlo en
buenas condiciones, humedzcalo continuamente (cada 2 min) vertiendo sobre l solucin
de Ringer a temperatura ambiente. Evite tocar el hilo.

Para medir la duracin de la sstole y de la distole, identifique sobre el registro el

inicio de la contraccin cardiaca y llmelo punto A, que es el punto donde el trazo inicia
su desplazamiento hacia arriba. Llame punto B al inicio de la relajacin, que es el punto
ms alto del registro y donde inicia el descenso de la plumilla (el punto B coincide con la
terminacin de la sstole y el inicio de la distole). Identifique con una C el punto donde
termina la distole y que coincide con el inicio de la siguiente sstole. Proyecte los puntos
sobre el eje del tiempo y proceda a hacer la medicin de:

a) Duracin de la sstole_______ seg

b) Duracin de la distole ______ seg
c) Duracin del ciclo cardiaco _______seg
d) Frecuencia cardiaca ________ latidos/ min
e) Fuerza de contraccin______ mm, ______ g
 Haga las operaciones correspondientes

Pase los datos a la hoja de resultados.

Efecto de la carga diastlica (Ley Frank-Starling):

Disminuya la tensin sobre el corazn de tal manera que la amplitud de los registros
sean ahora de aproximadamente de 5 mm. Baje la lnea basal lo ms que pueda; ponga la
unidad del desplazamiento del papel a 0.2 cm/seg. Despus de tomar 3 o 4 registros
empiece a incrementar la tensin sobre el corazn dando media vuelta al tornillo de tensin
entre cada latido. Observe cmo aumenta la fuerza de contraccin conforme aumenta la
tensin. Invierta el proceso cuando obtenga una contraccin de amplitud mxima,
disminuyendo la tensin del tornillo poco a poco hasta alcanzar la lnea basal y una
amplitud de las contracciones semejantes a las primeras. Con los datos obtenidos llene la
Tabla 1 de la hoja de resultados.

Efecto de la estimulacin al nervio vago derecho:

Para exponer el nervio vago derecho, haga una incisin a lo largo de la lnea media
del cuello. Esta maniobra expondr la trquea y por abajo de ella el esfago. En paralelo
con estas estructuras, corre el nervio vago y la arteria cartida primitiva. Localice la arteria
cartida derecha y el nervio vago sin tratar de separarlos, ya que esto puede daar el nervio.
Diseque una porcin del paquete vasculo-nervioso de aproximadamente 2 cm y mntelo
sobre los electrodos de ganchillo. Con el cable estimulador conecte los electrodos al
estimulador, cuidando de que el electrodo catdico (rojo) quede hacia el corazn.

Seleccione en el estimulador un estmulo de 2 mseg de duracin, y un voltaje de 10

voltios. Aplique estmulos repetitivos de frecuencia creciente iniciando con 2/seg, para
continuar con 5, 15 20 y 25 estmulos/seg. Cuide de que cada tren de estmulos sea de 3
seg, dejando descansar al nervio 10 seg entre cada tren de estmulos. Ponga la velocidad del
papel a 1.0 cm/ seg y determine el efecto de la estimulacin vagal cuantificando la
frecuencia cardiaca con cada tren de estmulo. Determine con cual frecuencia se alcanz el
paro cardiaco. Pase los datos a la hoja de resultados.

Efecto de la atropina sobre la estimulacin parasimptica del corazn.

Del registro anterior, seleccione el tren de estmulos que haya tenido un efecto
importante sobre la frecuencia cardiaca y antes de estimular, vierta sobre el corazn unas
gotas de sulfato de atropina y espere unos minutos para que la droga bloquee los
receptores de ACh. Ponga la velocidad del papel a 0.5 cm/ seg, estimule nuevamente al
nervio y observe el efecto sobre la frecuencia cardiaca.
Anote los datos en la hoja de resultados

Periodo refractario:
 Inserte los electrodos de alfiler en el corazn; uno un poco por arriba del centro del
corazn y el otro cerca del pex. Por el otro extremo conctelos al canalizador de pulsos de
la manera apropiada (asegrese que el estimulador no est mandando estmulos). Cheque
que la amplitud de los registros sea adecuada. Ponga la velocidad del papel a 5 cm/ seg.
Seleccione en el estimulador estmulos a 10 voltios y 2 ms de duracin. Utilizando
estmulos nicos y un desplazamiento del papel a 5 cm/seg, proceda a estimular el corazn
de tal manera que un estmulo coincida con el inicio de la sstole, otros a la mitad y otros al
final de la misma, y otros ms al inicio de la distole, a la mitad y al final. Observe las
extrasstoles (latidos adicionales) y determine en que momento del ciclo cardiaco se
presentaron. Determine el periodo refractario, el cual puede ubicarse en el registro en el
momento que se logre la primera extrasstole al inicio de la distole. Pase los datos
pertinentes a la hoja de respuestas.

Efecto de la temperatura:

El msculo cardaco es extramadamente sensible a la temperatura y en especial el

nodo S-A. Las siguientes maniobras demostrarn lo antes mencionado.
Haga los ajustes necesarios para obtener un registro de amplitud adecuada. Ponga la
amplitud del desplazamiento del papel a 0.1 cm/seg.
Mida la temperatura de la tortuga y antela sobre el registro.
Obtenga un registro control y determine la frecuencia cardiaca. Haga registros de 4
min en cada temperatura. Vierta sobre el corazn solucin Ringer, a 5C. Anote la
temperatura sobre el trazo y determine la frecuencia. Ahora vierta Ringer a 15C. Anote
sobre el registro la temperatura y la frecuencia cardaca. Repita los mismos pasos con
Ringer a 25C.

Efectos de algunas drogas y iones sobre el corazn:

Una vez que el corazn se ha recuperado y la temperatura del Ringer es la del medio
ambiente, haga los ajustes necesarios para obtener un registro adecuado. Mantenga la
velocidad del desplazamiento del papel a 0.05 cm/seg. Obtenga un registro control de dos
minutos para cada maniobra.

1) Aplique 10 gotas de una solucin de ACh (1mg/ml) diluida 1:1000, observe el

efecto y lave con suficiente Ringer
2) Aplique 10 gotas de una solucin de adrenalina (1mg/ml) diluida 1:100, observe el
efecto y lave con suficiente Ringer
3) Aplique 10 gotas de CaCl2 0.5 M, observe el efecto y lave con suficiente Ringer
4) Aplique 10 gotas de KC1 0.5 M, observe el efecto y lave con suficiente Ringer.

Describa los efectos de cada maniobra sobre las caractersticas contrctiles del corazn y
pase los datos a la hoja de resultados.

Automatismo del corazn in vitro:

Una vez que el corazn se ha recuperado, retire el hilo del transductor y con tijeras
finas diseque el corazn. Ya que el la tortuga el marcapaso cardiaco se encuentra en el seno
venoso, cuando extirpe el corazn respete los grandes vasos que llegan y salen del rgano.
Coloque el corazn en una caja de Petri con Ringer a temperatura ambiente y observe los
latidos cardiacos, luego con las tijeras corte un segmento auricular con el seno venoso
incluido, un segmento auricular solo y un segmento ventricular. Observe las contracciones
espontneas y cuantifique la frecuencia cardiaca de cada segmento. Estimule
mecnicamente a los segmentos y observe si se pueden inducir extrasstoles.

Pase sus datos a la hoja de resultados.

RESULTADOS:

Frecuencia cardiaca del corazn in situ_____latidos por min

Duracin del ciclo cardiaco, de la sstole, de la distole y medicin de la frecuencia

cardiaca:
a) Duracin de la sstole_______ seg
b) Duracin de la distole ______ seg
c) Duracin del ciclo cardiaco _______seg
d) Frecuencia cardiaca ________ latidos/ min
e) Fuerza de contraccin______ mm, ______ g

Haga las operaciones correspondientes

Efecto de la carga diastlica (Ley Frank-Starling):

TABLA 1. EEFECTO DE LA TENSIN DE REPOSO DOBRE LA FUERZA DE

CONTRACCIN DEL CORAZN (LEY DE FRANK-STARLING)
TENSIN DE REPOSO AMPLITUD DE LAS CONTRACCIONES

Mm g mm g
Con los datos de la Tabla, haga dos grficas. En la primera grafique los gramos de tensin
en el eje de las abscisas y en el de las ordenadas la fuerza de contraccin en gramos. En la
segunda, grafique en las abscisas nmero de veces que cambi de tensin y en las
ordenadas la tensin de reposo y la fuerza de contraccin en cada punto. Haga las
operaciones correspondientes para convertir mm de amplitud a g de fuerza.

Efecto de la estimulacin al nervio vago derecho:

1) Frecuencia de estimulacin: 5 pulsos/seg; Frecuencia cardiaca_______latidos/min
2) Frecuencia de estimulacin: 15 pulsos/seg; Frecuencia cardiaca_______latidos/min
3) Frecuencia de estimulacin: 20 pulsos/seg; Frecuencia cardiaca_______latidos/min
4) Frecuencia de estimulacin: 25 pulsos/seg; Frecuencia cardiaca_______latidos/min
5) Frecuencia de estimulacin que provoc paro cardiaco:_______pulsos/seg

Efecto de la atropina sobre la estimulacin parasimptica del corazn:

Frecuencia cardiaca basal: _______latidos/min

Efecto de la atropina sobre la frecuencia cardiaca estimulando al vago_______latidos/min

Periodo refractario:

Duracin del periodo refractario absoluto______seg

Duracin del periodo refractario relativo_______seg

Efecto de la temperatura:

Temperatura del Ringer basal:_______oC; Frecuencia cardiaca______latidos/min

Temperatura del Ringer: 5 oC; Frecuencia cardiaca______latidos/min
Temperatura del Ringer:15 oC; Frecuencia cardiaca______latidos/min
Temperatura del Ringer: 25 oC; Frecuencia cardiaca______latidos/min

Efectos de algunas drogas y iones sobre el corazn:

1) Frecuencia cardiaca basal_____latidos/min; ACh ______latidos/min

2) Frecuencia cardiaca basal_____latidos/min; Adrenalina ______latidos/min
3) Frecuencia cardiaca basal_____latidos/min; CaCl2 ______latidos/min
 4) Frecuencia cardiaca basal_____latidos/min; KCl 0.5M_______latidos/min.

Automatismo del corazn in vitro:

1) Frecuencia cardiaca del corazn aislado______latidos/min

2) Frecuencia del senovenoso______latidos/min
3) Frecuencia auricular______latidos/ min
4) Frecuencia ventricular_____latidos/min

CONTESTE LAS SIGUIENTES PREGUNTAS

1. Haga un esquema del corazn en donde incluya al sistema de excitacin y

conduccin del corazn con sus respectivos nombres
2. Encuentre y escriba el significado de los siguientes trminos: cronotropismo,
badmotropismo, inotropismo y dromotropismo
3. Que es el marcapaso cardiaco?
4. A que se debe el automatismo cardiaco?
5. Que rea del corazn inerva el nervio vago derecho?
6. Que rea del corazn inerva el sistema nervioso simptico izquierdo?
7. Cual es el sitio de menor velocidad del potencial de accin cardiaco?
8. Porque al incrementarse la tensin de reposo se incrementa la fuerza del corazn
(Ley de Frank-Starling)
9. Cual es el mecanismo de accin de la ACh sobre el corazn? y cual su efecto?
10. Cual es el mecanismo de accin de la adrenalina sobre el corazn? y cual su
efecto?
11. Cual es el mecanismo de accin de la atropina sobre el corazn? y cual su efecto?
12. Qu relacin temporal hay entre la sstole auricular y la sstole ventricular?
13. Que es un foco ectpico del corazn
14. Por qu el exceso de potasio produce paro cardiaco en distole?
15. Que es una extrasstole cardiaca?

Revisado: Marzo 18, 2003

Dr. Andrs Quintanar Stephano

 CORRELACION ENTRE ELECTROCARDIOGRAMA, PRESION
AORTICA, PRESION AURICULAR DERECHA Y RUIDOS CARDIACOS
DURANTE EL CICLO CARDIACO

INTRODUCCION

El corazn, es una bomba cuya funcin consiste en mantener a la sangre en

movimiento continuo por el sistema cardiovascular. En realidad, el corazn est constituido
por dos bombas conectadas en serie, una derecha y otra izquierda. La bomba derecha
formada por la aurcula y el ventrculo derecho, impulsa la sangre a travs de los pulmones
y hacia el ventrculo izquierdo. La aurcula y el ventrculo izquierdo que forman la bomba
izquierda impulsa la sangre a travs de la circulacin general y hacia el ventrculo derecho.
Ambos ventrculos funcionan como bombas intermitentes que dejan de bombear para
llenarse y dejan de llenarse para bombear. El sistema de excitacin y conduccin del
corazn esta dispuesto de tal modo que ambas bombas se llenan y vacan al mismo tiempo.
El periodo durante el cual los ventrculos se llenan se conoce como distole, y el periodo
durante el cual los ventrculos bombean (vacan) se llama sstole. En conjunto, la sstole y
la distole constituyen el ciclo cardiaco y es la unidad repetitiva de la funcin cardiaca.
De la anatoma del corazn recordar que entre las aurculas y los ventrculos se
encuentran las vlvulas tricspide y mitral, que evitan el reflujo de sangre de los ventrculos
a las aurculas durante la sstole ventricular. Asimismo, que entre las arterias aorta y
pulmonar y los ventrculos se encuentran las vlvulas artica y pulmonar, que evitan el
reflujo de sangre de las arterias a los ventrculos durante la distole ventricular. El cierre de
las vlvulas en cada ciclo cardiaco da lugar a los ruidos cardiacos.

Electrocardiograma. El registro de la actividad elctrica del corazn que acompaa

al latido cardaco se conoce como electrocardiograma (ECG). Antecediendo a la
contraccin de las aurculas y los ventrculos se presenta una serie de ondas elctricas
complejas, las cuales estn relacionadas con su excitacin y recuperacin. Las cuatro
cavidades del corazn de mamfero se contraen de una manera coordinada, como
consecuencia de la actividad elctrica del tejido de excitacin y conduccin del corazn,
que inicia en el marcapaso localizado en el nodo seno-auricular (nodo S-A). As los eventos
se inician aqu, y la onda de excitacin elctrica viaja a travs de las aurculas dando lugar a
la contraccin auricular. Localizado en la parte postero-inferior derecha de la pared
interauricular se encuentra el nodo aurculo-ventricular (nodo A-V). La onda de excitacin
proveniente de las aurculas activa el nodo A-V, el cual enseguida propaga la onda de
excitacin por las fibras especializadas del haz de His hacia los ventrculos. El haz de His
se contina con una serie de fibras, llamadas fibras de Purkinje que se distribuyen y activan
a toda la masa del msculo ventricular. El resultado de esta onda de excitacin del
ventrculo da como resultado la sstole ventricular.

Ya que el cuerpo est compuesto de lquidos conductores (conductor de volumen),

para registrar el ECG no es necesario colocar los electrodos directamente sobre el corazn.
As, los electrodos pueden colocarse sobre la superficie del cuerpo para detectar las ondas
electrocardacas. Es importante designar la posicin de los electrodos sobre la superficie del
cuerpo, porque la dispersin de la excitacin y la recuperacin sobre todo el corazn,
involucra direccin. Dependiendo de la localizacin de los electrodos, los registros tendrn
caractersticas propias de la localizacin particular. En un registro empleando electrodos
estndar para la derivada bipolar D II, se pueden identificar tres ondas que se reconocen
claramente y que acompaan cada ciclo cardaco. La primera onda, pequea hacia arriba, se
llama onda P y es el potencial que proviene de las aurculas y que precede a la contraccin
auricular. Despus de la onda P, se presenta una onda en forma triangular, con pequeas
ondas negativas en la base. Este complejo es conocido como onda o complejo QRS. La
onda QRS es el potencial que se origina en los ventrculos y precede a la contraccin
ventricular. La tercer onda que se puede reconocer, llamada onda T, tiene forma de cpula
y puede ser hacia arriba o hacia abajo, ocurre justo antes de la distole ventricular y es la
onda caracterstica de la repolarizacin ventricular. Una onda de recuperacin similar
ocurre despus de la sstole auricular, pero es de poca amplitud y generalmente es opacada
por la presencia de la onda QRS. Cuando se observa se le llama onda Pt u onda Ta.

De mxima importancia en el ECG, son las relaciones de tiempo entre las

diferentes ondas. Estas relaciones dependen de las condiciones del corazn y una
terminologa especial ha sido aplicada a este estudio.

INTERVALOS RANGO DE DURACIN

PR o PQ 0.12 - 0.20 seg

QRS 0.06 - 0.10 seg
QT 0.39 - 0.43 seg
ST 0.32 - .

lntervalo P-R: Se mide desde el principio de la onda P hasta el principio de la onda

Q (si Q no existe se mide hasta el inicio de la onda R y si R no existe, se mide hasta el
inicio de la onda S y representa el tiempo que transcurre desde el principio de la excitacin
de las aurculas, hasta el principio de la excitacin ventricular.
lntervalo QRS: Se mide desde el principio de Q hasta el final de S y representa el
tiempo que tardan los ventrculos en despolarizarse.
Intervalo Q-T: Se mide desde el principio de la onda Q hasta el final de la onda T y
representa el tiempo total de la despolarizacin y repolarizacin ventricular.

Presin arterial. La presin sangunea resulta de la accin de bomba del corazn

contra una resistencia perifrica variable, as como de un reservorio elstico. La presin
sangunea vara en relacin con el volumen sanguneo relativo, la elasticidad del sistema
arterial, la resistencia perifrica, la frecuencia cardiaca y el volumen sistlico, siempre y
cuando el volumen sanguneo relativo permanezca constante. La importancia del reservorio
elstico radica en que cierta cantidad de la energa de la contraccin cardiaca se convierte
en energa almacenada cuando parte de la sangre expulsada durante la sstole es retenida
bajo presin en el reservorio arterial expandido. Durante la distole, la sangre es impulsada
a travs de las arterias para mantener el flujo capilar durante todo el ciclo cardiaco. A causa
de esto, la presin en el rbol arterial es mxima durante la sstole (120 mmHg), pero no
caer a cero durante la distole (80 mmHg), debido al rebote elstico de los vasos y cierre
de la vlvula artica. La magnitud de la cada en la presin, depender de la diferencia entre
la oposicin al flujo por la resistencia perifrica y la frecuencia y volumen de sangre
bombeada al sistema arterial. El final de la eyeccin queda sealada por una muesca
pasajera en la curva de presin producido por el cierre sbito de las vlvula artica. A esta
muesca se le llama muesca dicrtica, y es seguida por la onda dicrtica. La diferencias
entre la presin sistmica y la pulmonar radican en la menor magnitud del sistema
pulmonar: sistlica 25 mmHg y diastlica 10 mmHg.

Presin auricular derecha. La presin auricular se eleva durante la sstole auricular

y contina elevndose durante el periodo de contraccin isovolumtrica ventricular, cuando
las vlvulas A-V protruyen hacia la aurcula. Cuando las valvas de las vlvulas A-V se
jalan hacia abajo por la contraccin ventricular, las presin cae rpidamente y luego se
eleva cuando la sangre del retorno venoso llena las aurculas antes de que abran las vlvulas
A-V en la fase temprana de la distole ventricular. El regreso de las vlvulas A-V a su
posicin relajada tambin contribuye a esta elevacin de la presin al reducir la capacidad
auricular. Los cambios de presin auricular se transmiten a las grandes venas en donde se
pueden reconocer las tres ondas caractersticas en el registro de la curva de presin
auricular. La onda a, que se debe a la sstole auricular. La onda c que se debe a la presin
causada por el abultamiento de la vlvula tricspide hacia la aurcula durante la contraccin
isovolumtrica del ventrculo derecho. La onda v se debe al flujo sanguneo continuo hacia
la aurcula durante la distole auricular y termina cuando la vlvula tricspide se abre al
inicio de la distole ventricular.

Ruidos cardiacos. Normalmente en cada latido del corazn se pueden distinguir dos
sonidos o ruidos cardiacos distintos. El primero es de tono bajo y de relativa larga duracin.
El segundo es de un tono ms agudo y de menor duracin. Usualmente ambos se pueden
distinguir claramente con un estetoscopio o un recolector de sonidos adecuado (micrfono
de contacto), colocado en el quinto espacio intercostal izquierdo. Estos ruidos se escuchan
de manera parecida a lo siguiente: pon y tac. El primer sonido (pon) se debe
principalmente a las vibraciones que resultan del cierre de las vlvulas aurculo-
ventriculares (A-V). Se cree que este ruido tambin se debe la contraccin muscular. El
segundo ruido (tac) esta dado principalmente por las vibraciones que resultan del cierre
sbito de las vlvulas artica y pulmonar.
Los ruidos cardiacos estn directamente relacionados con la accin de bomba del
corazn. Con una frecuencia cardiaca lenta, se puede mostrar que el segundo ruido es
coincidente con la muesca dicrtica de la curva de presin artica. La onda c del registro
de la presin auricular nos permite demostrar que el primer ruido cardiaco se asocia
primeramente con el cierre de las vlvulas A-V. Tambin, el ECG nos permite relacionar
ms fcilmente el momento del primer ruido cardiaco durante el ciclo cardiaco. Debe
recordarse que los eventos elctricos del corazn preceden a los eventos mecnicos. As, la
onda P precede a la sstole auricular dando lugar a la onda a de la curva de presin
auricular, mientras que el complejo QRS, es inmediatamente seguido de la sstole
ventricular y la onda T ocurre justo antes de la distole ventricular. Resumiendo; El
complejo QRS coincide con la sstole ventricular y el cierre de las vlvulas A-V con la
contraccin temprana ventricular. Por lo tanto, el primer ruido cardiaco se asocia con la
onda R del ECG. Al final de la sstole las vlvulas artica y pulmonar se cierran dando
lugar al segundo ruido cardiaco. Ya que la onda T precede a la distole ventricular el
segundo ruido se asocia con la onda T. De esta manera, el registro de la muesca dicrtica de
una arteria cercana al corazn, estar cronolgicamente relacionada con el segundo ruido
cardiaco y la onda T.
OBJETIVOS

General:
Establecer las relaciones ms importantes entre el ECG, la presin arterial, la
presin auricular derecha y los ruidos cardiacos durante el ciclo cardiaco.

Particulares:
1. Registrar la actividad elctrica del corazn (electrocardiograma) reconocer las
diferentes ondas electrocardiogrficas, medir los intervalos indicados y establecer
las relaciones que hay entre las ondas del ECG con las otras variables durante el
ciclo cardaco.
2. Registrar la presin arterial directamente de la aorta, medir la presin sistlica y
diastlica, reconocer la muesca dicrtica y relacionar los cambios de la curva de
presin con el resto de las variables durante el ciclo cardaco.
3. Registrar y medir directamente la presin auricular derecha, reconocer las ondas a, c
y v y relacionarlos con las otras variables del ciclo cardaco.
4. Registrar los ruidos cardacos (fonocardiograma), reconocer el 1 y 2 ruido y
establecer su relacin con el cierre de las valvulas A-V, la muesca dicrtica y las
dems variables registradas.
5. Observar y palpar los latidos cardacos directamente del corazn (trax abierto).
6. Inducir y observar directamente el aleteo y fibrilacin cardiaca

MATERIAL Y EQUIPO

Biolgico: Perro

Equipo:
1. Fisigrafo (4 canales)
2. 2 transductores de presin P 1000 A
3. 2 cables conectores # 9
4. 2 acopladores 7173
5. 2 acopladores DC-AC
6. Estimulador con electrodos de ganchillo
7. Ventilador pulmonar
8. Cable para ECG
9. Selector de derivadas
10. Micrfono para ruidos cardacos
11. Mesa de ciruga para perro
12. Estetoscopio
13. Pentobarbital sdico
14. Solucin salina isotnica heparinizada
15. 2 catteres
16. 3 Jeringas de 10 ml
17. Cnula traqueal
18. Hilo camo del cero
19. Gasa
 20. Instrumental ciruga
21. Segueta
22. Tijera para costillas
23. Solucin de KCI 0.5 M.

NOTA: Conforme vaya obteniendo el registro calibrado de cada canal, apague el botn de
RECORD y no lo encienda hasta que tome el registro de todas las variables
simultneamente.

PROCEDIMIENTO

1. De su prctica del ECG prepare el canal 1 del fisigrafo y conecte los cables para
obtener un registro electrocardiogrfico en DII. Utilice electrodos de aguja. Una vez
logrado el registro apague el botn de RECORD.

Antes de pasar al procedimiento quirrgico para el registro directo de la presin arterial

y la presin auricular, calibre los canales 2 y 3 del Fisigrafo utilizando los transductores de
presin P100 A.

Los siguientes puntos explican el procedimiento para utilizar el transductor de

presin LINEAR CORE P1000A unido a un acoplador TRANSDUCTOR COUPLER
7173, y un amplificador CHANNEL AMPLIFIER 7070.

Calibre el canal 2 del Fisigrafo (ver prctica del Fisigrafo). Una vez calibrado el
acoplador con el amplificador y el reproductor, gire la perilla de MV/CM del amplificador
a 20 MV/CM, apague el botn de RECORD del amplificador y proceda a calibrar el canal
con el traductor de presin P100A.

NOTA: El transductor es muy sensible por lo que hay que asegurarse de que el
transductor est sobre una superficie firme y as evitar las vibraciones que puedan
modificar la seal.

1. Conecte las vlvulas A y B en el transductor (vlvulas de tres vas) (Figura 1).

2. Asegrese de que ambas vlvulas estn abiertas a la atmsfera.
3. Conecte la salida lateral de la vlvula A a una jeringa de 10 ml llena de solucin
salina heparinizada sin burbujas de aire. Conecte un catter de unos 40 cm de
longitud a la otra salida de la llave A. Gire la llave de control del flujo de la vlvula
A de tal manera que se conecten la jeringa con el transductor.
4. Inyecte suavemente la solucin hacindola pasar por el transductor hasta que
escurra por la llave B que esta abierta a la atmsfera. Inyectando suavemente,
golpee ligeramente el transductor para asegurar que no queden burbujas de aire en
el transductor. Cierre la vlvula B.
5. Gire la llave del control del flujo de la vlvula A para conectar la jeringa con el
catter. Purgue el catter con la solucin heparinizada.
6. Gire la llave del control del flujo de la vlvula A para que se conecten directamente
el catter con el transductor. De esta manera el transductor est abierto a la
 atmsfera. Asegrese que la punta del catter este a la altura del transductor. De lo
contrario no se podr calibrar el transductor adecuadamente.
7. Con el botn de RECORD del amplificador apagado, conecte el transductor al
Fisigrafo con un cable conector del # 9.

NOTA: El acoplador, el amplificador y el reproductor deben estar calibrados, asegrese

de que el transductor est abierto a la atmsfera y que no est conectado con el sujeto de
experimentacin (NO DEBE HABER PRESION SOBRE EL TRANSDUCTOR).

8. Usando la perilla de POSITION del amplificador, lleve la plumilla de registro a 2.5

cm por abajo de la lnea central.
9. Gire el control de AMPLITUDE del transductor, completamente en contra del
sentido de las manecillas del reloj.
10. Prenda el botn de RECORD del amplificador.
11. Con el botn de BALANCE del acoplador regrese la plumilla a la lnea escogida en
el paso 8.
12. Gire el control de AMPLITUDE del transductor completamente en favor de las
manecillas del reloj.
13. Gire el control ZERO ADJUST del transductor para regresar la plumilla de registro
a la lnea basal del paso 11. La perilla de ZERO ADJUST se encuentra situada en la
parte posterior del transductor.

NOTA: Asegrese de que no se est ejerciendo ninguna presin sobre el transductor.

14. Coloque la palanca de PULSATILE-MEAN en posicin PULSATILE.

15. Active la palanca de CALIBRATE 100 mmHg del transductor y mantenindola
presionada gire la perilla de AMPLITUDE para regresar la plumilla de registro a 3
cm por arriba de la lnea basal.
16. Suelte la perilla de CALIBRATE y asegure que la plumilla de registro regrese a la
lnea basal. Repita el procedimiento si es necesario. El registro est ahora calibrado
de tal manera que 100 mmHg equivalen a 3 cm de desplazamiento de la plumilla.
17. En la vlvula A, gire la llave del control del flujo para que se conecten la jeringa y
el catter y prguelo haciendo pasar solucin salina heparinizada.
18. Apague el botn de RECORD del amplificador.

Cateterizacin de la artria cartida.

1. Pese al animal y anestsielo con pentobarbital sdico utilizando una dosis de 40

mg/kg de peso/va endovenosa.
2. Inserte una cnula traqueal y asegrela en su lugar llenando el manguito con agua.
3. Rasure la cara anterior del cuello y haga una incisin en la lnea media de
aproximadamente 15 cm. Localice a ambos lados de la traquea las cartidas
primitivas y disquelas. Localice el nervio vago derecho localizado en la vaina de la
arteria cartida. Utilizando una pinza roma, separe al nervio de la arteria en una
longitud de unos 4-5 cm aproximadamente, coloque una ligadura sin apretar
alrededor de la arteria y otra alrededor del nervio vago derecho y djela como
referencia.
 4. Localice la arteria cartida primitiva izquierda y separe el nervio de la arteria en una
longitud semejante a la anterior.

Insercin del catter arterial.

1. Una vez disecada y expuesta la arteria cartida izquierda, coloque tres ligaduras sin
anudar alrededor de la misma. Cuide de no lesionar la arteria. La ligadura ceflica
(distal), se anuda fuertemente para ocluir la arteria completamente. Las ligaduras
media y proximal, se anudan sin apretar y servirn para fijar el catter intra arterial
una vez que se haya insertado.
2. La longitud del catter debe ser del tamao suficiente para que al desplazarlo por la
arteria la punta quede a nivel del cayado de la aorta.
3. El ayudante aplica traccin a las ligaduras ceflicas y proximal para ocluir el flujo
de sangre en el pequeo segmento de cartida que queda entre las ligaduras. Con
unas tijeras pequeas, el cirujano hace una pequea incisin en la arteria, apenas
suficiente para introducir en direccin del corazn el catter.
4. Una vez que la punta del catter ha quedado en el cayado de la aorta, amarre las
ligaduras central y proximal. Lo apretado de los nudos no deben ocluir ni
parcialmente el catter ya que si esto ocurre el registro de la presin no se podr
realizar adecuadamente. Cuide que no haya escurrimiento de sangre. Si esto ocurre
apriete un poco ms las ligaduras.
5. Antes de conectar el catter con el transductor, inyecte un poco de solucin salina
heparinizada al animal para remover cualquier cogulo que se haya formado en el
catter. Esta maniobra se repite cuantas veces sea necesario para desprender y evitar
la formacin de cogulos.
6. Gire la llave de la vlvula A para conectar el catter con el transductor y encienda el
born de RECORD del amplificador para iniciar el registro de la presin arterial.
7. Ajuste la perilla de FILTER del amplificador si la plumilla no est registrado con un
trazo claro.

NOTA: Si la plumilla de registro no responde adecuadamente, la cnula puede estar pegada

a la pared arterial o puede estar tapada con un cogulo. Cheque que la posicin del catter
sea la correcta, as como la orientacin de la llave de la vlvula A.

NOTA: Cuando no este haciendo registro eleve las plumillas y la palanca del motor del
papel.
8. Apague el botn de RECORD del amplificador.

Una vez que ha calibrado el canal 3 del Fisigrafo, proceda a calibrar el transductor
de presin P1000A siguiendo las indicaciones anteriores.

Cateterizacin de la vena yugular externa para registrar la presin venosa central

Para cateterizar la aurcula derecha se procede a localizar la vena yugular externa derecha.
1. Tomando como referencia el borde derecho de la herida del cuello, con una tijera
fuerte separe los msculos adheridos a la piel del cuello. Haciendo esto llegar a la
vena yugular externa adherida a la cara interna de la piel.
 2. Disquela en una longitud de unos 4-5 cm y pase dos ligaduras por debajo.
3. Una vez anudada la ligadura ceflica, haga un orificio en la vena y pase el catter en
direccin del corazn.
4. Anude el hilo para fijar el catter a la vena.
5. Asegrese de que la longitud del catter sea el adecuado para que la punta del
mismo quede justo en la luz de la aurcula derecha.
6. Proceda a registrar la presin auricular encendiendo el botn de RECORD del
amplificador.
7. Si es necesario reajuste la sensibilidad del amplificador para observar mejor el
registro.

Fonocardiograma

Una vez calibrado el canal 4 del Fisigrafo proceda a colocar al sujeto el micrfono para
los ruidos cardiacos de la siguiente manera:
1. Pase una banda de hule (perforada) alrededor del trax del animal
2. Identifique la proyeccin del corazn sobre el trax y coloque el micrfono sobre el
rea de la pared que corresponde al pex del corazn.
3. Teniendo cuidado de no apretar excesivamete el micrfono (se puede romper o bien
no se podrn captar los ruidos cariacos), proceda a fijarlo con la banda de hule.
4. Conecte el enchufe del micrfono a la entrada del preamplificador DC-AC 7170.
Tambin se puede utilizar el preamplificador Hi-Gain Coupler 7171. Para cualquier
preamplificador que se use, deber ponerse la ganancia en X10 y la constante de
tiempo en 0.3.
5. Mueva la palanca de ON OFF/CAL del preamplificador a la posicin ON
6. Antes de encender el amplificador ponga la perilla de sensibilidad en 100 MV/CM y
el FILTER en 100Hz.
7. Encienda el botn de RECORD del amplificador y proceda a registrar los ruidos
cardiacos.

Estimulacin del nervio vago derecho.

1. Con la ligadura de referencia del nervio vago jale al nervio y coloque sobre el los
electrodos de estmulo de ganchillo cuidando que el electrodo negativo quede hacia
el corazn.
2. Conecte los cables de los electrodos al estimulador respetando su polaridad.
3. Con la ayuda del ECG, seleccione en el estimulador pulsos de 0.2 ms de duracin y
un voltaje y frecuencia tales que solo induzcan bradicardia.

PROCEDIMIENTO

Medicin de la presin arterial

Ponga el papel a 0.25 cm/seg y encienda el botn de RECORD del canal 2 para
registrar la presin arterial. Observe la subida y la cada de la presin sangunea. Con una
velocidad de papel de 2.5 cm/seg tome otro registro. Identifique la muesca dicrtica y mida
las presiones sistlica y diastlica.
Registro simultneo del ECG, presin arterial, presin auricular derecha y ruidos cardiacos
durante el ciclo cardiaco

1. Ponga la plumilla de tiempo en 1/seg y la velocidad del papel en 0.5 cm/seg.

2. Encienda el botn de RECORD de los 4 canales para obtener el registro simultneo
de las variables.
3. Una vez que las variables se estn registrando adecuadamente, incremente la
velocidad del papel a 2.5 cm/seg y obtenga unos 20 registros.
4. Continuando con las mismas condiciones de registro incremente la velocidad del
papel a 10 cm/seg y obtenga unos 20 registros.
5. Continuando con las mismas condiciones de la velocidad del papel, estimule al
nervio vago para disminuir la frecuencia cardiaca. Obtenga otros 20 registros y pare
el registro.

RESULTADOS

1. Identifique en el registro electrocardiogrfico las ondas electrocardiogrficas P, Q,

R, S y T, y la duracin de los intervalos PQ, QRS, QT y ST en el registro tomado a
2.5 cm/seg.
2. Identifique en el registro de presin arterial: a) la presin sistlica, b) la presin
diastlica, c) la muesca dicrtica, d) la sstole y e) la distole. Correlacione con el
registro electrocardiogrfico el momento en que ocurre: a) el complejo QRS y el
inicio de la elevacin de la presin la presin diastlica, b) la onda T y el inicio de
la cada de la presin y la muesca dicrtica.

Una. vez calibrado el canal 2 del fisigrafo y dispuestos los cables para registrar el
EKG, obtenga 10 registros en la derivacin II y proceda a identificar las ondas P, Q, R, S y
T, mida los voltajes de cada una y los intervalos antes mencionados. Establezca las
relaciones que hay entre las ondas electrocardiogrficas y las variables de los objetivos
anteriores durante el cielo cardaco.

OBJETIVO 3

Una vez calibrado el canal No. 4 del fisigrafo y el micrfono colocado

adecuadamente en el animal, proceda a registrar los ruidos cardacos. Identifique el ler. y
2o. ruido ayudndose con los "fono" y los estetoscopios, y establezca la relacin que hay
entre las dems variables registradas.

OBJETIVO 4

Despus de haber analizado y medido cada una de las variables aisladamente y

hecho la correlacin entre ellas, se procede a abrir el trax y exponer el corazn para que
puedan ser apreciados los movimientos cardacos as como los movimientos de expansin y
retraccin pulmonares.
 Inyecte 10 ml de solucin de KCI 0.7 M por va endovenosa y observe el aleteo y
despus la fibrilacin ventricular.

RESULTADOS:

PRESION AORTICA:

Calibracin cm mm/Hg.
Presin sistlica mm/Hg.
Presin diastlica mm/Hg.
Presin media mm/Hg.
Presin diferencial mm/Hg.

Identifique la apertura de las vlvulas sigmoideas articas. Identifique el cierre de

las vlvulas sigmoideas articas.

PRESIN VENOSA CENTRAL:

Presin sistlica:
Presin distlica:

Identifique en el registro las ondas a, c y v y relacione la onda a con la onda P del

ECG, la onda c con la contraccin isovolumtrica y el primer ruido cardiaco y la onda v con
el segundo ruido cardiacoicular y, la sstole auricular, al mismo tiempo que observa el
registro de ambas curvas de presin. Establezca la relacin de los cambios de presin
auricular en el EKG.

EKG.

Identifique las ondas Q, R, S, T, y P. Mida la frecuencia cardaca. Mida el voltaje de cada

onda.

Onda P

Onda Q

Onda R

Onda S

Onda T

Establezca la relacin de la onda "a" de la presin auricular, con la onda P del EKG.
El complejo QRS con la sstole artica.
Mida los intervalos PQ QRS, y QT y diga qu significa cada uno de ellos.
FONOCARDIOGRAMA:

En el registro de los ruidos cardacos identifique el lo. y 2o. ruidos, ayudndose con
el estetoscopio. Ahora relacione el primer ruido, con la sstole artica y la muesca dicrtica
con el 2o. ruido. Asimismo, identifique el primer ruido con la onda C auricular.
 PRESIN SANGUNEA Y SU CONTROL SIMPTICO Y PARASIMPTICO

INTRODUCCIN

La presin sangunea (PS) es la fuerza que la sangre ejerce contra las paredes de los
vasos sanguneos, y resulta de la accin de bomba del corazn contra una resistencia
perifrica variable as como de un reservorio elstico. La PS vara en relacin con el
volumen sanguneo relativo, la elasticidad del sistema arterial, la resistencia perifrica, la
frecuencia cardiaca y el volumen sistlico, siempre y cuando el volumen sanguneo relativo
permanezca constante. La importancia del reservorio elstico radica en que cierta cantidad
de la energa de la contraccin cardiaca se convierte en energa almacenada cuando parte de
la sangre expulsada durante la sstole es retenida bajo presin en el reservorio arterial
expandido. Durante la distole, la sangre es impulsada a travs de las arterias para mantener
el flujo capilar durante todo el ciclo cardiaco. A causa de esto, la presin en el rbol arterial
es mxima durante la sstole, pero no caer a cero durante la distole debido al rebote
elstico de los vasos y al cierre de la vlvula artica. La magnitud de la cada en la presin,
depender de la diferencia entre la oposicin al flujo (resistencia perifrica), el volumen de
sangre bombeado al sistema arterial cada latido y la frecuencia cardiaca. Si la presin
arterial se est registrando, el final de la eyeccin sangunea al sistema arterial, queda
sealada por una muesca pasajera en la curva de presin producido por el cierre sbito de la
vlvula artica. A esta muesca se le llama muesca dicrtica.
La PS esta bajo el control del sistema nervioso autnomo. La activacin de la
divisin parasimptica, reduce la presin sangunea por disminucin de la frecuencia
cardiaca. Por otro lado, la activacin de la divisin simptica aumenta la presin sangunea
al incrementar: a) la fuerza de contraccin, b) la frecuencia cardiaca y c) la resistencia
perifrica. Aunque existen otros factores humorales (hormonales) que participan en la
regulacin de la PS, el sistema nervioso autnomo es el ms importante.
El centro nervioso ms importante para el control de la PS se localiza en la
protuberancia y el bulbo raqudeo y se le denomina centro vasomotor o cardiorregulador.
Aqu se integran los reflejos cardiovasculares ms importantes como el reflejo del seno
carotdeo en el que impulsos aferentes desde los presorreceptores (receptores de presin)
del seno carotdeo y del arco artico, mandan en cada sstole impulsos por los nervios
glosofarngeos y nervios vagos respectivamente, hasta el bulbo. Despus de ser integrados,
los impulsos son trasmitidos desde el centro vasomotor por las ramas cardiacas del sistema
parasimptico (nervios vagos) o simptico al corazn, al que inhibirn o excitarn
respectivamente. Al estimular mecnicamente al seno carotdeo se mimetiza un incremento
de la presin sangunea, la seal nerviosa viaja por los nervios correspondientes hasta el
centro cardiorregulador el cual responde por un lado, activando al sistema nervioso
parasimptico, que disminuye de la frecuencia cardiaca, y por el otro inhibiendo el tono
simptico, que disminuye la resistencia perifrica.
Cuando el nervio vago es estimulado directamente la frecuencia cardiaca disminuye
y si la intensidad del estmulo es lo suficientemente grande puede producir paro cardaco.
Cuando esto ocurre, la presin sangunea comenzar a caer. La rapidez con la que la
presin sangunea cae refleja el grado de la resistencia perifrica. Por otro lado, si la
frecuencia cardiaca disminuye, la fuerza de contraccin en cada latido ser mayor debido al
mayor volumen diastlico final (Ley de Starling). Con una frecuencia cardiaca disminuida,
la muesca dicrtica es ms claramente visible.
 Ya que el sistema parasimptico es colinrgico, sus efectos pueden ser mimetizados
por drogas que inhiben a la enzima acetilcolinesterasa, permitiendo que la acetilcolina
(ACh) permanezca actuando por ms tiempo, prolongando as, sus efectos en el sitio de
liberacin. Por lo tanto, la administracin de prostigmina (un inactivador de la enzima
acetilcolinesterasa), remedar un incremento de la actividad vagal, lo que se traduce en una
disminucin de la frecuencia cardiaca y cada de la presin arterial. La administracin de la
ACh u otras drogas colinrgicas producirn efectos similares. Por otro lado, tambin
existen drogas que pueden bloquear las acciones de la ACh, como la atropina, alcaloide
derivado de la planta llamada bella dona, la cual tiene una gran afinidad por los receptores
colinrgicos post ganglionares, localizados en los rganos efectores de la divisin
parasimtica del sistema nervioso autnomo. De esta manera, se dice que la atropina es un
bloqueador por competencia de la ACh.
La actividad perifrica del sistema nervioso simptico es mediada por los
neurotransmisores noradrenalina (norepinefrina) y adrenalina (epinefrina), de tal manera
que drogas que alteren su sntesis, secrecin, recaptura, o bien, compitan con los receptores
simpticos correspondientes, alterarn los efectos de este sistema sobre la presin arterial.
Efectos muscarnicos y nicotnicos de la ACh. Histricamente se observ que la
administracin de muscarina (extrada del hongo amanita muscaria) a un sujeto de
experimentacin, mimetiza las acciones del sistema nervioso parasimptico a nivel de sus
efectores perifricos (efectos colinrgicos). Por otro lado, tambin se sabe que la nicotina
mimetiza los efectos de la ACh al actuar especficamente a nivel de los receptores
colinrgicos de las neuronas post ganglionares simpticas y parasimpticas del sistema
nervioso autnomo. En base a lo anterior, los efectos de muchas drogas se clasificaron
como muscarnicos o nicotnicos. Actualmente estos trminos se utilizan poco, pero una
demostracin de la accin muscarnica y nicotnica de la ACh es de inters fisiolgico
debido a que pone en evidencia el papel de la ACh en el mecanismo de la transmisin
sinptica de la neurona pre a la post ganglionar en ambas divisiones del sistema nervioso
autnomo (la divisin simptica como parasimptica) y del nervio post ganglionar
parasimptico al efector.
Hay que recordar que el sistema nervioso parasimtico es totalmente colinrgico, es
decir la ACh es el neurotransmisor tanto a nivel ganglionar como perifrico, mientras que
el simptico es colinrgico en la sinpsis de la neurona pre a la post ganglionar, y
noradrenrgico (adrenrgico) en las terminales post ganglionares (periferia). Si la ACh se
administra a un animal normal, la PS sangunea cae. Sin embargo si el animal es
previamente atropinizado, bloqueando as el efecto perifrico de la ACh, esta no tendr
efecto a nivel de los efectores post ganglionares parasimpticos. As, poco efecto se
observar en la presin arterial (PA) y en la frecuencia cardiaca, es decir, los efectos
muscarnicos de la ACh se han bloqueado.
Si se utilizan grandes dosis de ACh en un animal atropinizado, las sinpsis de las
neuronas ganglionares de ambos sistemas seguirn siendo sensibles a la ACh. Sin embargo,
ya que los receptores colinrgicos de los efectores de la divisin parasimptica han sido
bloqueados con la atropina, el efecto de la ACh se observar solo en la divisin simptica,
es decir un incremento de la PA y de la frecuencia cardiaca, provocada por la activacin de
los ganglios simpticos, que a su vez inducen libracin de noradrenalina y adrenalina a
nivel de las terminales nerviosas post ganglionares. Esta respuesta demuestra los efectos
nicotnicos (ganglionares) de la acetilcolina.
OBJETIVOS

1) Registrar en un perro la presin arterial (PA) directa (cateterizacin arterial)

2) Determinar las presiones arterial sistlica, diastlica y media
3) Reconocer en el registro la muesca dicrtica
4) Inducir el reflejo del seno carotdeo
5) Describir los efectos de la estimulacin vagal sobre la PS
6) Estudiar el efecto de drogas parasimpticas (ACh y prostigmina) y simpticas
(adrenalina) sobre la presin arterial
7) Reconocer el efecto bloqueador de la atropina sobre el nervio vago
8) Observar los efectos nicotnicos de la ACh

MATERIAL Y EQUIPO

Material Biolgico: Perro

Equipo:
1) Fisigrafo (1 canal), 2) Transductor de presin P 1000-A con llaves de 3 vas, 3)
Cable conector # 9, 4) Acoplador 7173, 5) Estimulador con electrodos de estmulo de
ganchillo, 6) Mesa de ciruga para perro, 7) Pentobarbital sdico, 8) Solucin salina
isotnica heparinizada, 9) Dos catteres (para arteria y vena), 10) Jeringas de 10 y 3 ml, 11)
Cnula traqueal, 12) Hilo camo del cero, 13) Gasa, 14) Instrumental ciruga, 15)
Solucin ACh (1 mg/ml), 16) Adrenalina (1 mg/ml), 17) Prostigmina (1 mg/ml), 18)
Atropina (1mg/ml), 19) Solucin de KCI 0.5 M.

PROCEDIMIENTO

Antes de pasar al procedimiento quirrgico calibre un canal del Fisigrafo (ver prctica
del Fisigrafo). Una vez calibrado el acoplador, con el amplificador y el reproductor,
gire la perilla de MV/CM del amplificador a 20 MV/CM, apague el botn de RECORD
del amplificador y proceda a calibrar el canal con el traductor de presin P1000-A.
Calibracin del transductor P1000-A

NOTA: El transductor es muy sensible por lo que hay que asegurarse de que el
transductor est sobre una superficie firme y as evitar las vibraciones que puedan
modificar la seal.

1. Conecte las vlvulas A y B en el transductor (llaves de tres vas) (Figura 1).

2. Asegrese de que ambas vlvulas estn abiertas a la atmsfera.
3. Conecte la salida lateral de la vlvula A a una jeringa de 10 ml llena de solucin
salina heparinizada sin burbujas de aire. Conecte un catter de unos 40 cm de
longitud, a la otra salida de la misma llave A. Gire la llave de control del flujo de la
vlvula A de tal manera que se conecten la jeringa con el transductor.
4. Para purgar el transductor inyecte suavemente la solucin salina hacindola pasar
por el mismo hasta que escurra por la llave B que esta abierta a la atmsfera.
 Inyectando suavemente, golpee ligeramente el transductor para asegurar que no
queden dentro burbujas de aire. Cierre la vlvula B.
5. Gire la llave del control del flujo de la vlvula A para conectar la jeringa con el
catter. Purgue el catter con la solucin salina heparinizada.
6. Gire la llave del control del flujo de la vlvula A para que se conecten directamente
el catter con el transductor. De esta manera el transductor est abierto a la
atmsfera. Asegrese que el catter y la punta estn a la altura del transductor ya
que de lo contrario no se podr calibrar el transductor adecuadamente.
7. Con el botn de RECORD del amplificador apagado, conecte el transductor al
Fisigrafo con un cable conector del # 9.

NOTA: El acoplador, el amplificador y el reproductor deben estar previamente

calibrados. Asegrese de que el transductor est abierto a la atmsfera (NO DEBE
HABER PRESION SOBRE EL TRANSDUCTOR).

8. En el transductor, mueva la palanca de PULSATILE-MEAN a la posicin

PULSATILE.
9. Usando la perilla de POSITION del amplificador, lleve la plumilla de registro a 2.5
cm por abajo de la lnea central.
10. Gire el control de AMPLITUDE del transductor, completamente en contra del
sentido de las manecillas del reloj.
11. Prenda el botn de RECORD del amplificador.
12. Con el botn de BALANCE del acoplador regrese la plumilla a la lnea escogida en
el paso 9.
13. Gire el control de AMPLITUDE del transductor completamente en favor de las
manecillas del reloj.
14. Gire el control ZERO ADJUST del transductor para regresar la plumilla de registro
a la lnea basal del paso 9. La perilla de ZERO ADJUST se encuentra situada en la
parte posterior del transductor.
15. Active la palanca de CALIBRATE 100 mmHg del transductor y mantenindola
presionada gire la perilla de AMPLITUDE para regresar la plumilla de registro a 3
cm por arriba de la lnea basal.
16. Suelte la perilla de CALIBRATE y asegure que la plumilla de registro regrese a la
lnea basal. Repita el procedimiento si es necesario. El registro est ahora calibrado
de tal manera que 100 mmHg equivalen a 3 cm de desplazamiento de la plumilla.
17. En la vlvula A, gire la llave para que se conecten la jeringa con el catter arterial.
18. Apague el botn de RECORD del amplificador.

Cateterizacin de la artria cartida.

1. Pese al animal y anestsielo con pentobarbital sdico (Anesesal) utilizando una

dosis de 40 mg/kg de peso/va endovenosa.
2. Inserte una cnula traqueal y asegrela en su lugar llenando el manguito con agua.
3. Rasure la cara anterior del cuello y haga una incisin en la lnea media de
aproximadamente 15 cm de longitud. Localice a ambos lados de la traquea las
cartidas primitivas y disquelas. Localice el nervio vago derecho localizado en la
vaina del paquete arteriovenoso (vago-cartida). Utilizando una pinza roma, separe
 al nervio de la arteria en una longitud de unos 4-5 cm, coloque una ligadura sin
apretar alrededor de la arteria y otra alrededor del nervio vago derecho y djelas
como referencia.
4. Localice la arteria cartida primitiva izquierda y separe el nervio de la arteria en una
longitud semejante a la anterior.

Insercin del catter arterial

1. Una vez disecada y expuesta la arteria cartida izquierda, coloque tres ligaduras sin
anudar alrededor de la misma. Cuide de no lesionar la arteria. La ligadura ceflica
(distal), se anuda fuertemente para ocluir la arteria completamente. Las ligaduras
media y proximal, se anudan sin apretar y servirn para fijar el catter arterial una
vez que este se haya insertado en la cartida.
2. La longitud del catter debe ser del tamao suficiente para que al desplazarlo por la
arteria la punta quede a nivel del cayado de la aorta.
3. El ayudante aplica traccin a las ligaduras ceflica y proximal para ocluir el flujo de
sangre en el pequeo segmento de cartida que queda entre las ligaduras. Con unas
tijeras pequeas, el cirujano hace una pequea incisin en la arteria, apenas
suficiente para introducir en direccin del corazn el catter.
4. Una vez que la punta del catter ha quedado en el cayado de la aorta, amarre las
ligaduras central y proximal. Lo apretado de los nudos no deben ocluir ni
parcialmente el catter ya que si esto ocurre el registro de la presin no se podr
realizar adecuadamente. Cuide que no haya escurrimiento de sangre. Si esto ocurre
apriete un poco ms las ligaduras.
5. Antes de conectar el catter con el transductor, inyecte un poco de solucin salina
heparinizada al animal para remover cualquier cogulo que se haya formado en el
catter. Esta maniobra se repite cuantas veces sea necesario para desprender y evitar
la formacin de cogulos en el sistema.
6. Gire la llave de la vlvula A para conectar el catter con el transductor y encienda el
botn de RECORD del amplificador para iniciar el registro de la PA.
7. Ajuste la perilla de FILTER del amplificador si la plumilla no est registrando con
un trazo claro.

NOTA: Si la plumilla de registro no responde adecuadamente, la cnula puede estar

pegada a la pared arterial, puede estar tapada con un cogulo o los nudos quedaron
muy apretados. Cheque que la posicin del catter sea la correcta, as como la
orientacin de la llave de la vlvula A.

NOTA: Cuando no este haciendo registro eleve las plumillas y pare el movimiento
del papel.

Catetrizacin de la vena femoral

1. Rasure la cara interna de un muslo del animal.

2. Por palpacin identifique el curso de la arteria femoral y por encima de ella haga
una incisin en la piel de unos 5-6 cm.
 3. Con diseccin roma separe la arteria de la vena femoral en una longitud de unos 4-5
cm y pase dos ligaduras por debajo de la vena.
4. Una vez anudada la ligadura distal y haciendo traccin suave con la ligadura
proximal para exponerla, haga un orificio en la vena y pase el catter en direccin
del corazn unos 10-15 cm.
5. Anude el hilo para fijar el catter a la vena.
6. Utilizando un equipo de venoclisis, inicie la perfusin de una solucin de cloruro de
sodio al 0.9% a razn de 30 gotas por minuto. La administracin de la drogas ser
por esta va.
7. Cubra la herida con una gasa y cheque continuamente que el animal est respirando
regularmente. Identifique el plano de anestesia probando los diferentes reflejos y
observando las caractersticas del animal como se describen en la tabla de Guedel.

Con el sistema registrando la PA, inicie el protocolo experimental

1) Medicin de la PS sangunea y la frecuencia cardiaca (FC)

a) Ponga el papel a 0.25 cm/seg. Observe la subida y la cada de la presin. Con una
velocidad de papel de 5 cm/seg, tome unos 10 registros y determine la frecuencia
cardiaca. Tomando coma base la calibracin de 3 cm de desplazamiento de la
plumilla=100 mmHg, determine las presiones sistlica, diastlica y del pulso. Si es
necesario ajuste los controles de AMPLITUD y POSITION para obtener un mejor
registro. Si hacen ajustes, la recalibracin es necesaria.
b) Identifique en el registro la muesca dicrtica. Con una pinza hemosttica haga
presin gradual sobre el catter que conduce el transductor. Note la disminucin en el
tamao de la muesca dicrtica, luego una disminucin en la amplitud del pulso.
Utilizando la frmula para la presin arterial media (PAM) determnela y pase sus
resultados a la hoja de respuestas (PAM= presin diastlica +1/3 de la presin del
pulso).
c) Mueva en el transductor la palanca a la posicin MEAN y mida la presin arterial
media. Compare y diga si hay diferencias en las mediciones calculada y registrada.
Regrese la palanca a la posicin de PULSATILE. Pase sus resultados a la hoja de
respuestas

2) Reflejo del seno carotdeo

El reflejo del seno carotdeo generalmente se deprime por las sustancias anestsicas y
en ocasiones es difcil observarlo en la anestesia profunda.

a) Con la velocidad del papel 0.25 cm/seg tome un registro control. Un compaero
indicar con el botn marcador de eventos el momento en que inicia la induccin del
reflejo.
b) Para inducir el reflejo, aplique presin a ambos senos carotdeos del perro
presionando fuertemente con los dedos ndice y medio hacia dentro y hacia arriba y
abajo en el punto del cuello donde se juntan la rama horizontal y vertical del hueso
mandibular inferior. Simultneamente, con los dedos pulgares presione fuertemente
hacia adentro los glbulos oculares para obtener accin vagal adicional (reflejo
 culovagal). Si no se obtuvo el reflejo, repita el procedimiento despus de la
administracin de prostigmina.
c) Mida la frecuencia cardiaca y las presiones sistlica, diastlica y media antes y
despus de la estimulacin de los senos. Identifique las caractersticas de la muesca
dicrtica. Pase sus resultados a la hoja de respuestas.

3) Efectos de la estimulacin vagal

a) Exponga el nervio vago derecho y mntelo sobre los electrodos de ganchillo.

Asegrese de que el polo negativo (negro) quede del lado cercano al corazn. En el
estimulador, elija los siguientes parmetros: Voltaje, 10 voltios. Duracin del
estmulo, 2 msg. Frecuencia, 10 estmulos/seg.
b) Con la velocidad del papel a 0.25 cm/seg, tome un registro control de 1 minuto y
luego estimule el nervio vago por unos pocos segundos. Modifique la intensidad del
estimulo para obtener una disminucin de la presin arterial y la frecuencia
cardiaca.Determine el periodo de latencia entre la estimulacin vagal y los cambios
en el registro. Repita la maniobra varias veces y determine los cambios en las
presiones sistlica, diastlica y media. Observe la mayor claridad con la que se
registra la muesca dicrtica. Determine si se produce escape ventricular.

4) Efectos de las drogas parasimpticas

El sistema nervioso parasimptico es colinrgico y como se observ al estimular el

nervio vago, uno de sus efectos es disminuir la frecuencia cardiaca y en consecuencia la PS
(aunque tambin existen vasodilatadores colinrgicos).

a) Efecto de la ACh. Ponga el desplazamiento del papel a 0.5 cm/seg y despus de

obtener un registro control, administre 5 g de ACh por Kg de peso del animal/va
endovenosa. Determine la frecuencia cardiaca y las presiones sistlica, diastlica y
media. Comprelas con el registro control. Pase sus observaciones a la hoja de
resultados.

b) Efectos de la prostigmina La prostigmina es un frmaco parasimpaticomimtico que

acta bloqueando la accin de la enzima acetilcolinesterasa. Del objetivo 3,
seleccione un estimulo de intensidad y frecuencia que hayan producido bradicardia e
hipotensin moderada. Repita el procedimiento varias veces para obtener un registro
control adecuado.
Inyecte 1 mg de prostigmina por cada 8 kg de peso y observe los efectos sobre la FC
y la PS.
Observe tambin los efectos de la prostigmina sobre el dimetro pupilar, salivacin,
motilidad intestinal, flatulencia y defecacin.
Repita las maniobras para observar el reflejo del seno carotdeo-oculovagal. Observe
como en estas condiciones es ms fcil su induccin. Vierta sus observaciones en la
hoja de resultados.

c) Efectos sinrgicos de la prostigmina y la Ach. Inyecte 2 g de ACh/Kg de peso del

animal/va endovenosa y observe como se potencia el efecto de ambas drogas sobre
 la FC, PA, miosis, salivacin, motilidad intestinal, flatulencia y defecacin. Compare
la magnitud de los efectos inducidos por la aplicacin de ambas drogas cuando se
administraron aisladamente. Observe como se requiere de menor dosis de ACh para
obtener un efecto mayor sobre las diversas variables.
Repita la estimulacin vagal usando la intensidad de estimulo que previamente
disminuy la frecuencia cardaca y determine si el efecto hipotensor es mas intenso.
Vierta sus observaciones en la hoja de resultados.

5) Efectos de la adrenalina sobre la PA y la FC

Recalibre su sistema de registro de tal manera que 2 cm de deslazamiento de la

plumilla equivalgan a 100 mmHg.
Incremente la velocidad del registro a 0.5 cm/seg
Obtenga un registro control e inyecte 0.5 mg de adrenalina por va endovenosa.
Observe y cuantifique los efectos sobre la FC, PA y PAM. Vierta sus observaciones
en la hoja de resultados.
Antes de continuar, permita que la presin arterial y la frecuencia cardiaca regresen
a los valores basales.

Recalibre el registro a 3cm = 100 mmHg

6) Efectos de la atropina

a) Con la velocidad del papel a 0.5 cm/seg obtenga un registro control

b) Con una intensidad de estimulo adecuada, estimule el nervio vago por algunos
segundos para encontrar el efecto hipotensor y bradicadizante de la estimulacin
vagal.
c) Inyecte por va intravenosa 1 mg de atropina por cada 8 Kg de peso del animal y
espere algunos minutos.
d) Con los parmetros de estimulacin anteriores, estimule el nervio vago cada 15
segundos hasta que observe el efecto bloqueador de la atropina sobre la
estimulacin vagal.
7) Efectos muscarnicos y nicotnicos de la Ach

a) Con la velocidad del papel a 0.5 cm/seg, inyecte 500 g de acetilcolina por va
endovenosa y registre los cambios sobre la PA y FC (note que esta dosis de
acetilcolina es 100 veces mayor que la empleada para inducir bradicardia e
hipotensin).

Terminacin del experimento

1) Sacrifique al animal inyectando 30 ml de solucin de KCl 0.5M por va

endovenosa.
2) Desprenda el papel de registro y apague el Fisigrafo.
3) Destinte las plumillas, desconecte los cables del equipo y regrselo a su lugar
4) Retire del animal la cnula traqueal y los catteres arterial y venoso
 5) Disponga del animal adecuadamente
6) Recoja el material, lvelo y regrselo al personal responsable
7) Limpie la superficie de trabajo

RESULTADOS

1. Frecuencia cardiaca:______________ latidos por minuto.

2. Frecuencia respiratoria:_______________respiraciones por minuto.
3. Presin sangunea: Sistlica_____ mm Hg; Diastlica________mmHg; Presin
arterial media: a) del registro_______ mm Hg, b) calculada________mm Hg.
4. Efecto mximo del reflejo del seno carotdeo sobre la PA_________mmHg,
FC________ latidos por minuto. Periodo de latencia ________seg.
5. Efecto de la estimulacin vagal sobre la FC, PA y PAM:
a) FC________latidos/min. Presin sistlica________mmHg, Presin
diastlica________mmHg. Presin media_________mmHg.
b) Escape ventricular: Si_________ No________
c) Describa las diferencias en la muesca dicrtica entre el registro control y el
efecto del vago.
d) Determine el periodo de latencia (intervalo de tiempo entre la aplicacin del
estmulo y la aparicin de la respuesta).
6. Efectos de la ACh sobre la FC, PA y PAM
a) Frecuencia cardiaca: Control______latidos/min. Efecto mximo de la
ACh_______latidos/min.
b) Presin arterial sistlica: Control________mmHg; Efecto mximo de la
ACh______mmHg.
c) Presin arterial diastlica: Control________mmHg; Efecto mximo de la
ACh______mmHg.
d) PAM: Control________mmHg; Efecto mximo de la Ach________mmHg
e) Periodo de latencia_____seg.

7. Efectos de la atropina sobre la FC, PA y PAM

a) Frecuencia cardiaca: Control________latidos por minuto; Efecto de la
atropina________latidos por minuto
b) Presin arterial sistlica: Control________mmHg; Efecto de la atropina
_______mmHg.
c) Presin arterial diastlica: Control________mmHg; Efecto de la
atropina_______mmHg.
d) PAM: Control________mmHg; Efecto de la atropina________mmHg
e) Periodo de latencia_____seg.
8. Efectos nicotnicos de la ACh sobre la FC, PA y PAM en el animal atropinizado:
FC________latidos/min. PA: Sistlica_______mmHg, Diastlica_______mmHg.
PAM_______mmHg

Conteste las siguientes preguntas:

1) Explique a que se debe la muesca dicrtica.

2) Explique la relacin que hay entre la PA, gasto cardiaco, resistencia perifrica
3) Diga porque disminuye la presin arterial cuando disminuye la frecuencia cardiaca.
4) Haga un esquema de las vas nerviosas que median el reflejo del seno carotdeo.
5) Haga un esquema del sistema nervioso autnomo con sus divisiones simptica y
parasimptica. Indique el tipo de neurotransmisor que se libera en cada uno de sus
segmentos y donde se localizan los receptores muscarnicos y donde los nicotnicos.
6) Describa los efectos de ACh sobre la presin arterial y la frecuencia cardiaca y
explique el mecanismo de acciones de la ACh sobre las clulas cardacas.
7) Describa brevemente el mecanismo de accin de la atropina
8) Describa: a) los efectos de la atropina sobre la presin arterial y la frecuencia
cardiaca y b) diga que ocurri cuando se estimul el nervio vago del animal
atropinizado.
9) Describa los efectos de la adrenalina sobre la presin arterial y la frecuencia
cardiaca
10) Describa el mecanismo de accin de la adrenalina sobre las clulas cardacas.
11) Describa el mecanismo por el cual se produjo incremento de la frecuencia cardiaca
y la presin arterial en el animal atropinizado cuando se administraron 500 g de
ACh.

Dr. Andrs Quintanar Stephano Mayo 2006

 ALGUNOS FACTORES QUE DETERMINAN LA FORMACIN
DE ORINA EN EL PERRO

INTRODUCCIN

Los riones son rganos reguladores y excretores. Gracias a su capacidad excretora

de agua y solutos (orina), los riones son capaces de regular el volumen y composicin de
los lquidos corporales dentro de limites muy estrechos, esto a pesar de una amplia
variacin en la ingesta de agua y alimento. Como una consecuencia de su papel
homeosttico, los tejidos y clulas del cuerpo son capaces de llevar a cabo sus funciones
normales en un medio ambiente relativamente constante. Las funciones ms importantes de
los riones incluyen las siguientes: 1) La regulacin del volumen y osmolalidad de los
lquidos corporales, 2) regulacin del balance electroltico, 3) regulacin del equilibrio
cido-base, 4) excrecin de productos del metabolismo y substancias extraas y 5)
produccin de hormonas.

Los riones regulan la composicin de los lquidos corporales por los siguientes
procesos: a) filtracin, b) reabsorcin y c) secrecin y excrecin. Muchos factores afectan
el volumen y la composicin de la orina. El flujo sanguneo arterial entra a los glomrulos
bajo presin haciendo que el agua y ciertos solutos sean filtrados hacia el espacio de
Bowman (filtrado glomerular) y al sistema tubular de la nefrona, en donde ocurren los
procesos mencionados. As, el filtrado experimenta cambios conforme fluye por el sistema
tubular. Cambios en la presin arterial y en la cantidad de lquido y concentracin de los
solutos en la sangre modifican la cantidad y concentracin de solutos de la orina formada a
travs del tiempo. Algunas de estos cambios ocurren en respuesta a la presencia de
hormonas, tales como la aldosterona, encargada de reabsorber de Na+ y secretar K+ y la
hormona antidiurtica (tambin llamada vasopresina) encargada de reabsorber el agua de
los tbulos colectores.

Se entiende por excrecin a la eliminacin de una sustancia del cuerpo, en este caso,
en la orina. Una sustancia es excretada si pasa al sistema tubular formando parte del filtrado
glomerular y no es reabsorbida, o bien, es excretada por secrecin activa del espacio
peritubular a la luz tubular.

Existen muchos factores que determinan el volumen y la composicin de la orina y

que invariablemente actan sobre la intensidad de filtracin glomerular, o sobre la
intensidad de reabsorcin tubular. Por lo tanto, cualquier factor que altere la intensidad de
filtracin glomerular o de resorcin tubular, sern los mismos factores que desempean
papel importante en el establecimiento del ritmo de eliminacin de volmenes lquidos.

Entre los factores que determinan la tasa de filtracin glomerular est la presin
arterial, que aumenta la presin de filtracin, con el consecuente aumento del filtrado
glomerular y del volumen lquido eliminado. Por otro lado, un aumento en la presin
coloidosmtica del plasma disminuir la presin de filtracin, lo que a su vez producir una
disminucin del filtrado glomerular y una disminucin del volumen lquido eliminado.
 Por otro lado, cambios en la capacidad del epitelio tubular para reabsorber
sustancias desde el lquido tubular, tambin afectar el volumen de orina formado. As, en
condiciones normales toda la glucosa es reabsorbida, por lo que no se detectar en la orina;
sin embargo, cuando la carga tubular de glucosa aumenta ms all de cierto lmite
(transporte mximo), esta aparecer en la orina (glucosuria), adems, al aumentar su
concentracin en el sistema tabular ejercer presin osmtica, lo que retiene agua en el
sistema tubular, teniendo como resultado final un aumento en la excrecin de agua (diuresis
osmtica).

La presencia de hormona antidiurtica (ADH o vasopresina, sintetizada en los

ncleos suprapticos y paraventiculares del hipotlamo y secretada por la neurohipfisis),
induce un incremento en la permeabilidad al agua del epitelio de los tbulos colectores,
dando lugar a la produccin de una orina concentrada y de poco volumen. La ausencia de
ADH tendr el efecto opuesto (diabetes inspida).

OBJETIVOS:

1. Determinar los efectos de cambios en la presin sangunea sobre el flujo urinario

(formacin de orina)
2. Determinar los efectos de la adrenalina sobre la presin y el flujo urinario
3. Observar el efecto de un incremento del volumen sanguneo sobre la formacin de
orina
4. Observar el efecto de incrementar la presin osmtica del plasma y del lquido
tubular sobre la intensidad de formacin de orina
5. Inducir diuresis osmtica
6. Observar el efecto de la hormona antidiurtica sobre la intensidad de formacin de
orina
7. Observar el efecto diurtico de la droga furosemide

MATERIAL:

Biolgico: Perra

1) Fisigrafo (2 canales), 2) Dos acopladores 7173, 3) Transductor de presin P-

1000-A, 4) Transductor cuentagotas, 5) Estimulador electrnico, 6) Cables del estimulador,
7) Canalizador de estmulos, 8) Electrodos de ganchillo, 9) Cable de lnea principal, 10)
Dos cables conectores del # 9, 11) Cnula traqueal, 12) Tres jeringas de 10 ml con aguja,
13) Tres jeringas de 2.5 ml, 14) Tres jeringas de 1 ml, 15) Estuche de disecciones, 16)
Hilos camo del doble cero, 17) Gasas, 18) Cuatro catteres (2 para ureteros, 1 para arteria
y 1 para vena), 19) Tres vasos de precipitado; de 20, 50 y 100 ml, 20) Tubos de ensayo de 5
y 10 ml, 21) Tres goteros, 22) Equipo de venoclisis, 23) Estuche para la determinacin de
la glucosuria 24) Tubo en Y
Soluciones:

1) Pentobarbital sdico, 2) Mil ml de solucin de NaCl al 0.09%, 3) Adrenalina (1

mg/ml), 4) ADH (10 neurohipfisis de rata), 5) Solucin salina al 10%, 6) Solucin de
glucosa al 25%, 7) Furosemide (20 mg/2 ml), 8) Estuche para determinacin de cloruros
(Nitrato de plata al 2.9%. Dicromato de potasio al 20%).

PROCEDIMIENTO:

Calibre 2 canales del Fisigrafo; en un canal monte el sistema para registrar la

presin arterial directa utilizando el Trasnductor P-1000-A). En el otro canal monte el
sistema para el Trasnductor cuentagotas.

Antes de pasar al procedimiento quirrgico para el registro directo de la presin arterial,

calibre un canal del Fisigrafo utilizando un transductor de presin P1000-A.

Calibre un canal del Fisigrafo (ver prctica del Fisigrafo). Una vez calibrado gire
la perilla de MV/CM del amplificador a 20 MV/CM, apague el botn de RECORD del
amplificador y proceda a calibrar el canal con el traductor de presin P1000-A.

Calibracin del transductor P1000-A

NOTA: El transductor es muy sensible por lo que hay que asegurarse de que el
transductor est sobre una superficie firme y as evitar las vibraciones que puedan
modificar la seal.

1. Conecte las vlvulas A y B en el transductor (vlvulas de tres vas) (Figura 1).

2. Asegrese de que ambas vlvulas estn abiertas a la atmsfera.
3. Conecte la salida lateral de la vlvula A a una jeringa de 10 ml llena de solucin
salina heparinizada sin burbujas de aire. Conecte un catter arterial, de unos 40 cm
de longitud, a la otra salida de la misma llave A. Gire la llave de control del flujo de
la vlvula A de tal manera que se conecten la jeringa con el transductor.
4. Inyecte suavemente la solucin salina hacindola pasar por el transductor hasta que
escurra por la llave B que esta abierta a la atmsfera. Inyectando suavemente,
golpee ligeramente el transductor para asegurar que no queden burbujas de aire en
el transductor. Cierre la vlvula B.
5. Gire la llave del control del flujo de la vlvula A para conectar la jeringa con el
catter. Purgue el catter con la solucin salina heparinizada.
6. Gire la llave del control del flujo de la vlvula A para que se conecten directamente
el catter con el transductor. De esta manera el transductor est abierto a la
atmsfera. Asegrese que el catter y la punta estn a la altura del transductor ya
que de lo contrario no se podr calibrar el transductor adecuadamente.
7. Con el botn de RECORD del amplificador apagado, conecte el transductor al
Fisigrafo con un cable conector del # 9.

NOTA: El acoplador, el amplificador y el reproductor deben estar previamente

calibrados. Asegrese de que el transductor est abierto a la atmsfera y que no est
conectado con el sujeto de experimentacin (NO DEBE HABER PRESION
SOBRE EL TRANSDUCTOR).
 8. En el transductor mueva la palanca de PULSATILE-MEAN a la posicin
PULSATILE.
9. Usando la perilla de POSITION del amplificador, lleve la plumilla de registro a 2.5
cm por abajo de la lnea central.
10. Gire el control de AMPLITUDE del transductor, completamente en contra del
sentido de las manecillas del reloj.
11. Prenda el botn de RECORD del amplificador.
12. Con el botn de BALANCE del acoplador regrese la plumilla a la lnea escogida en
el paso 9.
13. Gire el control de AMPLITUDE del transductor completamente en favor de las
manecillas del reloj.
14. Gire el control ZERO ADJUST del transductor para regresar la plumilla de registro
a la lnea basal del paso 9. La perilla de ZERO ADJUST se encuentra situada en la
parte posterior del transductor.
15. Active la palanca de CALIBRATE 100 mmHg del transductor y mantenindola
presionada gire la perilla de AMPLITUDE para regresar la plumilla de registro a 3
cm por arriba de la lnea basal.
16. Suelte la perilla de CALIBRATE y asegure que la plumilla de registro regrese a la
lnea basal. Repita el procedimiento si es necesario. El registro est ahora calibrado
de tal manera que 100 mmHg equivalen a 3 cm de desplazamiento de la plumilla.
17. En la vlvula A, gire la llave del control del flujo para que se conecten la jeringa
con el catter arterial.
18. Apague el botn de RECORD del amplificador.

Cateterizacin de la artria cartida.

1. Pese al animal y anestsielo con pentobarbital sdico utilizando una dosis de 40

mg/kg de peso/va endovenosa.
2. Inserte una cnula traqueal y asegrela en su lugar llenando el manguito con agua.
3. Rasure la cara anterior del cuello, del abdomen y de una ingle
4. Haga una incisin en la lnea media del cuello de aproximadamente 15 cm. Localice
a ambos lados de la traquea las cartidas primitivas y disquelas. Localice el nervio
vago derecho localizado en la vaina de la arteria cartida. Utilizando una pinza
roma, separe al nervio de la arteria en una longitud de unos 4-5 cm
aproximadamente, coloque una ligadura sin apretar alrededor de la arteria y otra
alrededor del nervio vago derecho y djela como referencia.
5. Localice la arteria cartida primitiva izquierda y separe el nervio de la arteria en una
longitud semejante a la anterior.

Insercin del catter arterial

1. Una vez disecada y expuesta la arteria cartida izquierda, coloque tres ligaduras sin
anudar alrededor de la misma. Cuide de no lesionar la arteria. La ligadura ceflica
(distal), se anuda fuertemente para ocluir la arteria completamente. Las ligaduras
media y proximal, se anudan sin apretar y servirn para fijar el catter intra arterial
una vez que se haya insertado.
 2. La longitud del catter debe ser del tamao suficiente para que al desplazarlo por la
arteria la punta quede a nivel del cayado de la aorta.
3. El ayudante aplica traccin a las ligaduras ceflicas y proximal para ocluir el flujo
de sangre en el pequeo segmento de cartida que queda entre las ligaduras. Con
unas tijeras pequeas, el cirujano hace una pequea incisin en la arteria, apenas
suficiente para introducir en direccin del corazn el catter.
4. Una vez que la punta del catter ha quedado en el cayado de la aorta, amarre las
ligaduras central y proximal. Lo apretado de los nudos no deben ocluir ni
parcialmente el catter ya que si esto ocurre el registro de la presin no se podr
realizar adecuadamente. Cuide que no haya escurrimiento de sangre. Si esto ocurre
apriete un poco ms las ligaduras.
5. Antes de conectar el catter con el transductor, inyecte un poco de solucin salina
heparinizada al animal para remover cualquier cogulo que se haya formado en el
catter. Esta maniobra se repite cuantas veces sea necesario para desprender y evitar
la formacin de cogulos.
6. Gire la llave de la vlvula A para conectar el catter con el transductor y encienda el
botn de RECORD del amplificador para iniciar el registro de la presin arterial.
7. Ajuste la perilla de FILTER del amplificador si la plumilla no est registrado con un
trazo claro.

NOTA: Si la plumilla de registro no responde adecuadamente, la cnula puede estar

pegada a la pared arterial o puede estar tapada con un cogulo. Cheque que la
posicin del catter sea la correcta, as como la orientacin de la llave de la vlvula
A.

NOTA: Cuando no este haciendo registro eleve las plumillas y la palanca del motor
del papel.

Catetrizacin de la vena femoral

1. Rasure la cara interna de un muslo del animal.

2. Por palpacin identifique el curso de la arteria femoral y por encima de ella haga
una incisin en la piel de unos 5-6 cm.
3. Con diseccin roma separe la arteria de la vena femoral en una longitud de unos 4-5
cm y pase dos ligaduras por debajo.
4. Una vez anudada la ligadura distal y haciendo traccin suave con la ligadura
proximal para exponerla, haga un orificio en la vena y pase el catter en direccin
del corazn unos 10-15 cm.
5. Anude el hilo para fijar el catter a la vena.
6. Utilizando un equipo de venoclisis, inicie la perfusin de una solucin de cloruro de
sodio al 0.9% a razn de 30 gotas por minuto. La administracin de la drogas ser
por esta va intravenosa (IV).
7. Cubra la herida con una gasa y cheque continuamente que el animal est respirando
regularmente. Identifique el plano de anestesia probando los diferentes reflejos y
observando las caractersticas del animal como se describen en la tabla de Guedel.
Cateterizacin de los ureteros

Abra la cavidad abdominal desde el apndice xifoides hasta la snfisis del pubis,
rechace las visceras con una gasa e identifique la vejiga, riones y ureteros. Asle uno de
los ureteros y pase dos ligaduras por debajo. Anude la ligadura ms distal del uretero y
proceda ha hacer una pequea incisin en el uterero e inserte un catter en direccin del
rin. Una vez que el catter ha sido introducido, sujtelo con la ligadura proximal. Repita
la maniobra en el uretero opuesto. Disponga los catteres ureterales de tal manera que
desemboquen en un tubo en Y (Fig. 1) y colecte la orina en un vaso de precipitado de 500
ml. Interponga la malla del transductor cuentagotas entre el tubo en Y y el vaso de
precipitado y proceda a registrar en el Fisigrafo el flujo urinario midiendo el nmero de
gotas de orina por minuto
Si el flujo de orina es muy lento o no hay, inyecte lentamente solucin salina al
0.9% a travs de la vena, para estabilizar el flujo urinario.

Con el registro simultneo de la presin arterial y el flujo urinario inicie el protocolo

experimental. Una vez que ambos sistemas estn trabajando, mantenga la velocidad del
papel a 0.05 cm/seg, durante todo el experimento

MANIOBRAS EXPERIMENTALES:

1. Efecto de la presin sangunea (P.A.) sobre el flujo urinario (F.U.)

NOTA. Dado que lo que en esta prctica lo que importa son los cambios en la presin
arterial media, mueva la palanca del transductor para medir la presin media

Cuente el nmero de gotas de orina durante 5 minutos y saque el promedio por

minuto. Este es el flujo urinario por minuto control. Determine la presin sistlica,
diastlica y media.

a) Efecto del estmulo vagal sobre la P.S. y el F.U.

Estimule el nervio vago con una frecuencia de pulsos de 25/seg y 2 mseg de
duracin; ajuste el voltaje para obtener una cada de presin de aproximadamente 50
mmHg, mantenga el estmulo durante 2 minutos. Cuente el nmero de gotas por
minuto. Pase los datos a la hoja de resultados.

b) Efecto de la adrenalina sobre el flujo urinario

Una vez que se ha estabilizado la presin arterial y el flujo urinario, tome un
registro control durante 5 minutos e inyecte por va venosa 0.5 ml de adrenalina.
Determine los cambios de presin arterial y el nmero de gotas de orina por minuto.
Pase los datos a la hoja de resultados

2. Efecto del volumen sanguneo sobre el flujo urinario

Tome un registro control de la presin arterial y del flujo urinario y proceda a

prefundir a chorro 100 ml de solucin salina isotnica. Determine los cambios en la presin
arterial y el flujo urinario y antelos en la hoja de resultados.
3. Efecto de cambiar la presin osmtica de la sangre sobre el flujo urinario

Tome un registro control de la presin arterial, del flujo urinario y determine la

concentracin urinaria de NaCl.

Determinacin de los cloruros. Considerando que 20 gotas equivalen

aproximadamente a 1 ml, con un gotero vierta 10 gotas de orina en un tubo de ensaye. Con
otro gotero aada una gota de dicromato de potasio al 20%. Con otro gotero aada gota a
gota solucin de nitrato de plata al 2.9% y agitando el tubo de ensayo cuente el nmero de
gotas de nitrato de plata que se tienen que aadir hasta que el color de la solucin vire de
color amarillo claro a un color pardo.

Cada gota de nitrato de plata que tuvo que aadir equivale aproximadamente a 1 g
de NaCl por litro de orina. La cantidad total de NaCl en una muestra de orina se calcula de
la siguiente manera:

NaCl (g) = volumen de la muestra de orina por el nmero de gotas de nitrato de

plata que se aadieron/1000.

Inyecte 100 ml de solucin NaCl al 10%, determine los cambios en la presin

arterial, el flujo urinario y la concentracin urinaria de NaCl.

4. Diuresis osmtica

Determine la presin sangunea y el flujo urinario basal y la presencia de glucosa en

la orina control (utilice el equipo de Clinitest).

Inyecte lentamente 25 ml de glucosa al 25% y determine los cambios en la presin

arterial y en el flujo urinario. Cuando el flujo de orina sea ms intenso, repita la prueba de
glucosa en orina. En la hoja de resultados describa los cambios de presin y del flujo
urinario ocurridos a travs del tiempo. Determine la concentracin de glucosa en la orina.

5. Efecto de la hormona antidiurtica sobre la formacin de orina

Determine la presin sangunea y el flujo urinario basal e inyecte el homogenizado

de neurohipfisis de rata (homogenizar 4 neurohipfisis de rata en 1 ml de solucin salina
isotnica). Determine los cambios en la presin arterial y flujo urinario. Pase los resultados
a la hoja de respuestas.

6. Efectos del furosemide

Una vez restablecido el flujo urinario basal, determine la presin arterial y el flujo
urinario y proceda a inyectar por el catter venoso 20 mg de furosemide. Determine los
cambios en la presin sangunea y el flujo urinario. Pase los resultados a la hoja de
respuestas.
 Sacrifique al animal con una sobredosis de pentobarbital sdico, y disponga de el
adecuadamente. Recoja, lave y limpie el material utilizado y la superficie de trabajo.

RESULTADOS:

1. Efecto de la presin sangunea sobre el flujo urinario

CONTROL ESTMULO VAGAL

P.A.________ F.U.________ P.A._______ F.U.______

Observaciones

2. Efecto de la adrenalina sobre el flujo urinario

CONTROL ADRENALINA

P.A.________ F.U.________ P.A._______ F.U.______

Observaciones

3. Efecto del volumen sanguneo sobre el flujo urinario

CONTROL VOLUMEN SANGUINEO

P.A.________ F.U.________ P.A._______ F.U.______

Observaciones

4. Efecto de cambiar la presin osmtica de la sangre sobre el flujo urinario

CONTROL PRESIN OSMTICA (NaCl)

P.A.________ F.U.________ P.A._______ F.U.______

NaCl en orina________g NaCl en orina_________g

 Observaciones

5. Diuresis osmtica

GLUCOSURIA CONTROL DIURESIS OSMTICA (GLUCOSA 25%)

________________mg ______________mg

Observaciones

6. Efecto de la hormona antidiurtica sobre la formacin de orina

CONTROL ADH

P.A.________ F.U.________ P.A._______ F.U.______

Observaciones

7. Efectos del furosemide

CONTROL FUROSEMIDE

P.A.________ F.U.________ P.A._______ F.U.______

Observaciones

8. Conteste lo siguiente:

1) Haga el esquema de una nefrona

2) Seale en la nefrona las diferentes presiones que determinen la presin de filtracin
3) Qu factores determinan la intensidad de filtracin glomerular
4) Cmo se determina experimentalmente la intensidad de filtracin glomerular
5) Explique el significado de aclaramiento renal
6) Describa la cadena de eventos que ocurren despus de inyectar intravenosamente un
gran volumen de lquido
7) Explique las caractersticas de la diuresis despus de la inyeccin de NaCl al 10%
8) Explique la diuresis osmtica producida por la glucosa
9) Por qu ocurre glucosuria en la diabetes mellitus no tratada
 10) Explique la regulacin del equilibrio hdrico por el sistema de la hormona
antidiurtica.
11) Que es el transporte tubular mximo
12) Describa la regulacin de las concentraciones plasmticas de sodio y de potasio por
el sistema renina-angiotensina-aldosterona

Revisado: Mayo 8, 2003 Dr. Andrs Quintanar Stephano

 MODELO MECNICO DEL APARATO RESPIRATORIO;
LA VENTILACIN PULMONAR

INTRODUCCIN

Ventilacin pulmonar significa intercambio de aire entre la atmsfera y los alveolos

pulmonares. Este intercambio de aire se lleva a cabo gracias a los gradientes de presin que
se crean entre los alveolos y la atmsfera durante la inspiracin y espiracin pulmonar.
Normalmente los pulmones tienen una tendencia a colapsarse (retraerse), esta
tendencia est dada por las propiedades elsticas del pulmn y por la tensin superficial de
los lquidos que recubren a los alveolos. En condiciones normales, en el espacio
intrapleural existe una presin negativa (con respecto a la atmosfrica) que distiende y evita
el colapso pulmonar; a esta presin se le denomina presin intrapleural. En los alveolos
tambin existe una presin llamada presin intraalveolar o intrapulmonar que
precisamente antes de la inspiracin y antes de la espiracin es igual a la atmosfrica.
Durante la inspiracin, la actividad de los msculos inspiratorios distiende la
cavidad torcica; las presiones intrapleural e intrapulmonar disminuyen paralelamente, de
tal manera que la presin intrapulmonar se hace negativa con respecto a la atmosfrica,
estableciendo un gradiente de presin que permite que el aire entre a los pulmones
Al dejar de actuar los msculos inspiratorios los pulmones tienden a colapsarse,
creando un aumento en la presin intrapulmonar, lo que invierte el gradiente de presiones,
provocando que el aire se desplace ahora de los alveolos hacia la atmsfera.
El modelo mecnico del pulmn (Fig.1) est constituido por un recipiente rgido
transparente (frasco de vidrio sin fondo) que representa al trax. El extremo ancho del
frasco se asla del medio con una membrana elstica que representa al msculo diafragma.
En la boca del frasco se inserta un tapn de hule con dos orificios por el que se atraviesan
dos tubos; en el extremo intratorcico de uno de ellos se ata un globo que representa a los
pulmones, mientras que el resto del tubo incluyendo el extremo que queda por fuera,
representa a las vas respiratorias (nariz, trquea, bronquios, bronquiolos, etc.). El otro tubo
(intratorcico) que queda entre el globo y la pared del recipiente (cavidad pleural) nos
permitir extraer el aire intrapleural y medir los cambios de presin durante la respiracin.
En el extremo exterior de cada tubo se conectan sendos tubos en Y con sus
respectivas mangueras. En el tubo que conecta al globo, una de las mangueras se utiliza
para modificar la resistencia de las vas areas, mientras que la otra se conecta a un
transductor de presin. En el tubo que conecta con la "cavidad pleural", una de las
mangueras nos servir para crear presin negativa en dicha cavidad y la otra, conectada a
un transductor de presin, para medir los cambios de presin intrapleural (Fig. 1)
OBJETIVOS

1) Conocer las estructuras del sistema respiratorio y su funcionamiento durante la

ventilacin pulmonar
2) Medir los cambios de presin intrapleural e intrapulmonar durante un ciclo
respiratorio normal
3) Comprender cmo afecta a la ventilacin pulmonar un aumento en la resistencia de
las vas respiratorias
4) Medir la presin mxima que puede alcanzar un sujeto normal en inspiracin y
espiracin forzada.

MATERIAL

1) Fisigrafo 2) dos transductores de presin P-1000-A 3) mangueras de plstico 4) llaves

de 3 vas 5) frasco de vidrio de 3.5 litros sin fondo 6) membrana de hule 7) globo 8) tubos,
9) tubos en Y 10) ligas 11) tapn de hule con dos orificios, 12) estativos.

MANIOBRAS EXPERIMENTALES

Calibre dos canales del fisigrafo con sendos transductores de presin (P-1000-A),
de tal manera que 1 cm = 10 mm de Hg. Conecte uno de los transductores con una de las
mangueras del tubo en Y que corresponde a la va area. El otro transductor se conecta con
el tubo en Y del espacio intrapleural. Identifique sobre el papel a que presin corresponde
cada uno de los registros.
Abra la pinza del tubo que va al espacio intrapleural y aspire el aire, esto har que el
globo se infle. nflelo hasta que llene la cuarta parte de la cavidad torcica. Cierre la pinza
para separar el espacio intrapleural de la atmsfera. Lea y anote la presin intrapleural en
reposo. Observe el tamao del globo y la posicin que ha adoptado el diafragma.
 Lentamente proceda a jalar (inspiracin) y a empujar (espiracin) el diafragma hacia
fuera y hacia adentro del trax. Observe los cambios de volumen del globo durante la
inspiracin y la espiracin. Lea y anote los cambios en las presiones intrapulmonar e
intrapleural. Mueva el diafragma en ambos sentidos, un poco ms rpido que antes. Anote
los cambios de presin intrapulmonar e intrapleural a esta nueva velocidad. Explique las
diferencias que se observan en las presiones intrapulmonares e intrapleural cuando se
respira con una frecuencia frecuencia.

EFECTO DE AUMENTAR LA RESISTENCIA EN LAS VAS AREAS

Mueva lentamente el diafragma en ambos sentidos y cierre gradualmente las pinzas

de tornillo sobre el tubo que une el pulmn con la atmsfera.
Con ello se intenta simular el aumento de la resistencia al paso del aire como ocurre
en las enfermedades de las vas respiratorias, como ocurre durante la obstruccin parcial de
la nariz en el resfriado. Lea y anote los cambios que produce el aumento de resistencia de
las vas areas sobre las presiones intrapulmonar e intrapleural durante el ciclo respiratorio.

PRESIONES INTRAPULMONARES E INTRAPLEURALES DURANTE EL

CICLO RESPIRATORIO

Inspiracin. Abra completamente la pinza de la va respiratoria y deje que el

modelo adopte su posicin respiratoria normal de reposo. Cierre completamente la va
respiratoria y saque el diafragma lo ms posible sin romper el modelo (inspiracin forzada
mxima). Manteniendo el diafragma en esta posicin se leen y anotan las presiones
intrapulmonar e intrapleural. Dejando el diafragma en esta posicin de inspiracin mxima,
abra un poco la pinza para dejar entrar un poco de aire al globo y cirrela inmediatamente.
Repita la maniobra 5 veces de tal manera que en la quinta etapa la presin intrapulmonar se
vuelva igual a la atmosfrica. Leas y anote las presiones intrapulmonar e intrapleural
despus de cada admisin de aire.

Espiracin. Cuando las presiones intrapulmonar y la atmosfrica se han

equilibrado, cierre otra vez la va respiratoria y empuje el diafragma para provocar una
espiracin forzada mxima. Se observan y anotan las presiones intrapulmonar e intrapleural
que ahora corresponden al principio de una espiracin contra una va area cerrada. De
nuevo y tambin por etapas, abra y cierre la pinza rpidamente para permitir la espiracin.
Procure tambin que sean 5 las etapas hasta que se alcance la presin de reposo, es decir,
que la presin intrapulmonar sea igual a la atmosfrica. Observe y anote las presiones, tanto
intrapulmonar como intrapleural en cada una de las etapas.
En la hoja de resultados grafique los cambios de presin intrapulmonar e
intrapleural de tal manera que el eje de las ordenadas corresponda a las presiones
intrapulmonar (lnea contnua) e intrapleural (lnea punteada). En el eje de las abscisas se
ponen las 5 etapas en que se dividi la inspiracin y la espiracin. Note el paralelismo de
los cambios de las presiones intrapulmonar y la intrapleural en cada una de etapas en que se
dividi el ciclo respiratorio.
MEDICIN DE LA PRESIN DURANTE UNA ESPIRACIN Y UNA
INSPIRACIN FORZADA

Desconecte del modelo pulmonar la manguera de uno de los transductores y

colquela en la boca de uno de los estudiantes. Indquele que haga una espiracin mxima
teniendo cuidado de no hacer presin con las mejillas, es decir, se debe mantener la glotis
abierta. Determine en el registro la presin espiratoria mxima alcanzada. Se le indica
ahora que realice una inspiracin forzada mxima. Mida y anote las presin mxima
alcanzada durante la espiracin y la inspiracin forzada. Fueron iguales las presiones
durante la inspiracin y espiracin mximas? Compare los resultados con los datos del libro
de texto.

RESULTADOS

MECNICA DE LA REPIRACIN
ESTADO DEL MODELO PRESIN PRESIN
DEL PULMN INTRAPULMONAR INTRAPLEURAL
Reposo (pulmn distendido)
Inspiracin lenta
Espiracin lenta
Inspiracin rpida
Espiracin rpida

EFECTO DEL AUMENTO EN LA RESISTENCIA DE VAS RESPIRATORIAS

PRESIN PRESIN
INTRAPULMONAR INTRAPLEURAL
Reposo (mayor resistencia)
Inspiracin
Espiracin

PRESIN INTRAPULMONAR E INTRAPLEURAL

DURANTE EL CICLO RESPIRATORIO
PRESIN PRESIN
INTRAPULMONAR INTRAPLEURAL
Inspiracin mxima (vas
respiratorias cerradas)
Etapa 1
Etapa 2
Etapa 3
Etapa 4
Etapa 5 (vas respiratorias
abiertas
Espiracin mxima (vas
respiratorias cerradas)
Etapa 1
Etapa 2
Etapa 3
Etapa 4
Etapa 5 (vas respiratorias
abiertas)

Presiones intrapulmonar e intrapleural en las diferentes etapas del ciclo respiratorio

Comparacin de las presiones intrapulmonar e intrapleural del modelo con las del humano
(compare con los datos del libro de texto)

EXPERIMENTAL TEXTO

Esfuerzo inspiratorio mximo:

Presin intrapulmonar _____________________mm Hg _______________mm Hg

Esfuerzo expiratorio mximo:

Presin intrapulmonar ___________________mm Hg _________________mm Hg

En el estudiante las presines espiratoria e inspiratoria mximas fueron:

Espiracin mxima _______mmHg

Inspiracin mxima _______mmHg

CUESTIONARIO

1) Cuando se saca el aire del espacio intrapleural, el pulmn ______________

y el diafragma _______________ Explique la causa de este fenmeno.
 2) Durante la inspiracin, la presin intrapulmonar es __________ la presin
atmosfrica; pero el final de la inspiracin, cuando ya no fluye aire, la
presin intrapulmonar es ___________________ la presin atmosfrica.
3) Durante la espiracin, la presin intrapulmonar es __________________ la
atmosfrica; pero al final de la espiracin, cuando ya no fluye aire, la
presin intrapulmonar es _______________ la presin atmosfrica.
4) La presin intrapleural siempre es ____________ respecto a la
intrapulmonar.
5) La diferencia absoluta de presiones intrapulmonar e intrapleural permanece
constante o vara durante el ciclo respiratorio.
6) Si el espacio intrapleural no fuera independiente de la atmsfera, qu le
pasara a la cantidad de aire que entra y sale de los pulmones?

BIBLIOGRAFA

1) Armstrong G.G. Modelo Mecnico del Pulmn. En: Manual de Prcticas de

Fisiologa. Editorial Interamericana. Mxico. pp 159-164. 1970.
2) Ganong W.F. Pulmonary Function. In: Review of Medical Physiology. Lange
Medical Books/McGraw-Hill. New York. pp 617-634. 2001.
3) Guyton C.A. and Hall J.E. Pulmonary Ventilation. In: Textbook of Medical
Physiology. Saunders. Philadelphia. pp 432-443. 2000.