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FACULTAD DE INGENIERA

Ingeniera Ambiental y Prevencin de Riesgos

CURSO: GESTIN Y MONITOREO DE LA CALIDAD DEL AGUA

TEMA:
Principios de las metodologas de ensayos

Docente: Ing. Fernando Joaqun Rodrguez


Email: fernando.joaquin@upagu.edu.pe
INGENIERA AMBIENTAL Y PREVENCIN DE RIESGOS
Gestin y Monitoreo de la Calidad del Agua

CONTENIDOS
A. Clasificacin de Metodologas de Ensayos para la Calidad
del Agua
B. Mtodos de Ensayos Qumicos
1. Objeto y definicin del Anlisis Qumico
2. Importancia y campos de aplicacin
3. Clasificaciones del Anlisis Qumico
4. Mtodos analticos
5. El proceso analtico
6. Errores en anlisis qumico

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INGENIERA AMBIENTAL Y PREVENCIN DE RIESGOS
Gestin y Monitoreo de la Calidad del Agua

A. Clasificacin de mtodos de ensayos para la calidad del agua

Ensayos Qumicos Ensayos Fsicos

Ensayos Biolgicos Ensayos Toxicolgicos

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METODOS DE ANALISIS QUMICOS

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1. Objeto y definicin del Anlisis Qumico

Ciencia que estudia el conjunto de principios, leyes y tcnicas


cuya finalidad es la determinacin de la composicin y
estructura qumica de una muestra natural o artificial.

Conjunto de tcnicas operatorias puestas al servicio


de la Qumica Analtica.
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2. Importancia y campos de aplicacin

Importancia del Anlisis Qumico

Geologa Biologa
Ciencias
Ambientales
Qumica

Agricultura QUMICA
ANALTICA
Ingeniera

Ciencias
Sociales
Medicina

Ciencias de los Fsica


materiales

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2. Importancia y campos de aplicacin

Importancia del Anlisis Qumico en la Calidad del Agua


Origen del inters del Anlisis Qumico: Preocupacin por la calidad de agua
que consumimos, evaluar la calidad de agua requerida en las dieferentes
industrias.

Campos de aplicacin
Determinar la composicin qumica del agua para:
La gestin de su calidad. Para ello se analizan:
Que sustancias estn presentes
Las muestras de control del procesos de tratamiento
Para preparar una serie de debidas
Para evaluar que sustancias afectan o podran afectar al medio
ambiente
Actividades investigadoras.

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2. Importancia y campos de aplicacin

El Anlisis Qumico en el agua es tambin importante:


 en la formulacin y el desarrollo de nuevos productos
 en la evaluacin de nuevos procesos para la elaboracin de productos
alimentarios.
 en la identificacin del origen de los problemas, en el caso de los
productos inaceptables.

La eleccin del mtodo de anlisis depender de:


 la naturaleza de la muestra
 la forma en la cual ser utilizada la informacin obtenida.
Las muestras de control del proceso se analizan por medio de mtodos
rpidos,
Para la informacin del valor nutritivo para el etiquetado nutricional se
seleccionan mtodos de anlisis ms costosos en tiempo, avalados por
organizaciones cientficas.

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3. Clasificaciones del Anlisis Qumico

Segn finalidad
Anlisis Cualitativo: Qu?
Anlisis Cuantitativo: Cunto?
Anlisis Estructural: Cmo?
Segn tcnica
Anlisis clsico
Anlisis instrumental
Tcnicas de separacin
Segn tamao de muestra
Ultramicro-anlisis (hasta 0,001 g)
Micro-anlisis (hasta 0,01 g)
Semimicro-anlisis (hasta 0,1 g)
Macro-anlisis
Segn contenido de analito
Anlisis de trazas (hasta 0,01 %)
Anlisis de micro- componentes (hasta 1 %)
Anlisis de macro-componentes
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3. Clasificaciones del Anlisis Qumico

Segn finalidad ANLISIS QUMICO

ANLISIS CUALITATIVO ANLISIS CUANTITATIVO

Determinacin de la cantidad relativa


Identificacin de las especies de los componentes de la muestra en
que componen la muestra trminos numricos

Anlisis de agua
mineral
Bicarbonato, Sulfato, Bicarbonato 213 mg/L; Sulfato7,9 mg/L;
Cloruro, Sodio, Calcio, Cloruro 3,1 mg/L; Sodio 32 mg/L;
Magnesio, Slice Calcio 24 mg/L; Magnesio 13,9 mg/L;
Slice 14,5 mg/L
Fig 1
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3. Clasificaciones del Anlisis Qumico

El mtodo analtico es el conjunto de operaciones especficas para caracterizar


(identificar y/o determinar) un analito en una determinada muestra

Anlisis clsico Mtodos clsicos:


Basados en propiedades qumicas de los Volumtricos: se mide volumen
analitos y en sus reacciones qumicas Gravimtricos: se mide masa
con reactivos adecuados

Anlisis instrumental Mtodos Espectroscpicos: se mide una


instrumentales: propiedad ptica
Electroanalticos: se mide una
Basados en propiedades qumico-
propiedad elctrica
fsicas de los analitos

Mtodos para separar interferentes previos a


la caracterizacin del analito
Mtodos de separacin Mtodos de anlisis en s mismos, como por
ejemplo la cromatografa 11
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4. Mtodos analticos

Caractersticas del mtodo


Sensibilidad: capacidad para detectar o determinar pequeas concentraciones
de analito.
Selectividad: capacidad para originar resultados que dependen exclusivamente
del analito.
Exactitud: grado de concordancia entre los resultados y el valor verdadero.
Precisin: grado de concordancia entre resultados repetitivos.
Intervalo de linealidad: rango de concentraciones en el que se puede aplicar
el mtodo.
Rapidez: se expresa como la frecuencia de muestreo
Costes
Seguridad
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4. EL PROCESO ANALTICO

El Anlisis Qumico alcanza sus objetivos mediante el PROCESO ANALTICO, que es la


aplicacin del mtodo cientfico, implicando el proceso de la figura:

Problema

Eleccin del
mtodo analtico MTODO ANALTICO

Toma de Tratamiento Proceso de Tratamiento de


muestra de la muestra medida los datos

Valoracin de
los resultados

Informe y
conclusiones

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ETAPAS DEL PROCESO ANALTICO
4.1. Definicin del problema: En esta 1 etapa se plantea el tipo de anlisis
requerido y la escala de trabajo.

Ejemplo: Se pretende contrastar el contenido real de acido acetilsaliclico (AAS) en un producto


farmacutico con el valor suministrado por el fabricante

4.2. Seleccin del mtodo de anlisis: Etapa crucial para el xito


de los resultados finales
Consideraciones importantes:
Exactitud requerida en los resultados
Disponibilidad de tiempo y de dinero Volumetra
cido-base
Nmero de muestras a analizar NaOH
F1
Concentracin esperada del analito en la muestra
Complejidad de la muestra bajo anlisis

Buscar en la bibliografa procedimientos apropiados o, si es necesario, poner AAS F2


a punto nuevos procedimientos analticos para llevar a cabo el anlisis

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4.3. Toma de muestra o muestreo
Plan de muestreo: estrategia a seguir para garantizar que los resultados
obtenidos reflejen la realidad del material analizado.

Caractersticas que ha de cumplir la muestra:


ser representativa del material a analizar
ser homognea, lo que significa que debe ser igual en todas sus
partes.

Se reduce el error en los resultados

F1

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4.4. Tratamiento de la muestra

Son escasos los problemas que se resuelven sin necesidad de


tratamiento de la muestra

Lo habitual, es que la muestra necesite algn tipo de tratamiento, con


el fin de:

1. Preparar la forma y tamao de la muestra, as como la concentracin


del analito(s), ms adecuada para la tcnica analtica seleccionada

2. Eliminar interferencias matriciales

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Consideraciones importantes durante la etapa de
preparacin de muestra
1) La preparacin de la muestra no puede implicar prdidas de analito, ni
tampoco contaminaciones.

2) Se debe transformar el analito en la mejor forma qumica para el


mtodo analtico seleccionado.

3) Si es necesario, se eliminarn las interferencias de la matriz, mejorando as


la selectividad del mtodo.

4) No se deben introducir nuevas interferencias.

5) Debe considerarse la dilucin o preconcentracin del analito, de manera que


se halle en el intervalo de linealidad del mtodo seleccionado.

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La mayora de las tcnicas analticas: MUESTRA EN ESTADO LQUIDO

Si la muestra es slida
Si el anlisis no Almacenamiento:
Molienda: Disminucin tamao va a ser inmediato luz, T, tipo de recipientes
de partcula
Maza

Mortero
F4

F1 F5
F2

Liofilizacin previa F3

Si la muestra es lquida

Evaporacin del Si el analito es un gas disuelto en un lquido


disolvente
Doble recipiente sellado
para su almacenamiento

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MUESTRA EN ESTADO LQUIDO

Obtencin de la Preparacin de la
Eleccin del mtodo
muestra muestra

Extraccin del analito a Se encuentra el analito


No disuelto?
una fase lquida
S
Es mensurable la propiedad
analtica?

Agitacin Centrifugacin Decantacin Recogemos el lquido


el sobrenadante
Disolvente
(H2O, EtOH, Lquido
MeOH sobrenadante

Suspensin Residuo Residuo


del slido en
Muestra slido slido
el disolvente
slida

F1
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Para la determinacin de AAS en producto farmacutico mediante
volumetra cido-base

Trituracin del frmaco


y disolucin en etanol

F1 F3
F2

- En ocasiones, se requieren condiciones ms enrgicas para la


extraccin del analito a la fase lquida:

Disoluciones acuosas de:


- cidos fuertes
- bases fuertes
- agentes oxidantes
F4
- agentes reductores
- combinaciones de reactivos

Aplicacin de energa externa:


- microondas
F5
- ultrasonidos
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N. Campillo Seva
Obtencin de la Preparacin de la
Eleccin del mtodo
muestra muestra

Extraccin del analito a Se encuentra el analito


No disuelto?
la fase lquida
S
Es mensurable la propiedad
Cambio de la forma analtica?
qumica del analito
No
Especie fluorescente S
Eliminar interferencias si las
hubiere

Ej. Sulfonamida

MTODOS DE SEPARACIN
Adicionamos reactivos (para la determinacin
mediante fluorimetra)

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DEFINICIN DE RPLICAS DE MUESTRAS

El proceso de medida debe llevarse a cabo en varias alcuotas idnticas de la muestra

F2 1 mL 110 mg/dL
Finalidad

1 mL 109,6 mg/dL 1. Establecer la


variabilidad del
anlisis
2. Evitar un error grave
F1
1 mL 187,5 mg/dL
LA INCERTIDUMBRE ES
TAN IMPORTANTE
COMO LA MEDIDA
1mL 110,3 mg/dL MISMA

X SD
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4.5. Proceso de medida
La mayora de los mtodos necesitan de disoluciones estndar o patrn

VOLUMETRAS: Se mide la cantidad de equivalentes qumicos de valorante


en el punto final de la valoracin

Seal analtica = K x CA K= constante de proporcionalidad


CA= concentracin de analito

Disolucin patrn Disolucin problema

CA = 80 mg/dL CA = ?
S = 0,199 S = 0,261
F1
F2

0,199 = K 80 0,261 = 0,0025 CA


K = 0,0025 dL/mg CA = 104,4 mg/dL

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4.6. Tratamiento de los datos a travs de ecuaciones de calibracin
Curva de calibracin con patrones externos
0.6
Concentracin, Seal analtica
mg/dl 0.5
0 0,001

Seal analtica
0.4
40 0,101
80 0,199 0.3

120 0,303 0.2


160 0,401
0.1
200 0,498
0.0
0 50 100 150 200 250

Concentracin, ppm
mg/dl

Seal analtica = ordenada origen + K x CA

Seal analtica = 0,00129 + 0,0024 x CA

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N. Campillo Seva
CLCULO DE CA EN LA MUESTRA A TRAVS DE LA CURVA DE CALIBRADO

0.6 Seal analtica = 0,0013 + 0,0024 x CA

0.5
0,261 = 0,0013 + 0,0024 x CA
Seal analtica

0.4

0.3
CA = 108,2 mg/dL
0.2

0.1
Aplicacin de factores de
0.0 dilucin preconcentracin,
0 50 100 150 200 250 si procede
Concentracin, ppm
mg/dl

El mtodo de calibracin frente a patrones externos es vlido si una determinada


CA tanto en la muestra como en la disolucin estndar proporciona la misma
respuesta analtica.

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Si las respuestas analticas para un mismo valor de CA en la disolucin
estndar y en la muestra son diferentes:

Mtodo del estndar interno Mtodo de adiciones estndar

El patrn interno es una especie de referencia (R), Se agregan cantidades conocidas de analito
con propiedades qumicas y fsicas parecidas a la muestra
a las del analito (A)

SA/SR SA

CA CA aadida a la muestra

Concentracin de analito en la muestra


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4.7. Evaluacin de los resultados, informe y conclusiones

Los resultados han de ser evaluados por estimacin de su fiabilidad

El informe dirigido al solicitante del anlisis ha de:


1. Indicar claramente los resultados
2. Las condiciones experimentales empleadas
3. Limitaciones concretas de la tcnica analtica empleada

1. Concentracin de glucosa
As en orina
obtenida: 1. ND (no detectado)
x SD 2. Espectrometra de absrcin atmica con
1. Tcnica atomizacin electrotrmica (ETAAS)
espectrofotomtrica 3. LD (Lmite de deteccin): 50 ppt
2. Intervalo de linealidad,
LD, LQ

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Conclusiones

El analista puede o no implicarse en lo que se vaya a hacer con su informacin.


Como mnimo debera asegurarse que las conclusiones que se extraigan
de sus datos sean coherentes con los mismos.

1. Concentracin de glucosa:
520 1 mg/dL
1. Tcnica espectrofotomtrica
Ingreso hospitalario del individuo
2. Intervalo de linealidad,
LD, LQ

1. Concentracin de As en orina: 403


2 ng/L Envenenamiento crnico del individuo
2. Tcnica HG-AAS
3. Intervalo de linealidad,
LD, LQ

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Obtencin de la Preparacin de la
Eleccin del mtodo
muestra muestra

Extraccin del analito a Se encuentra el analito


No disuelto?
la fase lquida
S
Es mensurable la propiedad
Cambio de la forma analtica?
qumica del analito
No
S
Eliminar interferencias si las
hubiere
Estimar la fiabilidad
de los resultados Calcular los resultados Medir la propiedad analtica

Informe Conclusiones

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4. Mtodos analticos
Trminos importantes
MUESTRA: Parte representativa de la materia objeto de anlisis.
ALCUOTA: Fraccin o porcin de muestra.
ANALITO: Especie qumica objeto del anlisis.
MATRIZ DE LA MUESTRA: Especies qumicas que acompaan al analito en la
muestra.
TCNICA ANALTICA: Medio empleado para obtener informacin sobre el
analito.
MTODO ANALTICO: Secuencia de operaciones y tcnicas aplicadas para el
anlisis de una muestra.

EJEMPLO: Determinacin calcio en leche.


Muestra: Leche
Analito: Calcio: Ca2+
Matriz: grasas, lactosa, protenas, vitaminas hidrosolubles, sales minerales, etc.
Tcnica analtica: Espectrofotometra de absorcin atmica
Mtodo analtico: Implica desde la toma de muestra hasta la obtencin del
resultado final.
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4. Mtodos analticos

Trminos importantes
INTERFERENTE: Especie qumica distinta del analito que aumenta o disminuye la
respuesta del analito bajo el mtodo aplicado. (Ej. Analito: Ca 2+. Al3+ es un
interferente si la determinacin se lleva a cabo por valoracin con EDTA.
Interferencia positiva)

ENMASCARAMIENTO: Transformacin del interferente en otra especie qumica


que no es detectada con la tcnica analtica empleada.
(Ej. Al3+ + 3OH- Al(OH)3)

DISOLUCIN ESTNDAR: Disolucin conteniendo el analito en concentracin


perfectamente conocida. (Ej. Disolucin acuosa conteniendo calcio en una
concentracin exacta de 10 mg/L)

CURVA DE CALIBRADO: Grfica que representa la seal analtica monitorizada


frente a la concentracin del analito.

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5. El Proceso Analtico
El Anlisis Qumico alcanza sus objetivos mediante el PROCESO ANALTICO,
que es la aplicacin del mtodo cientfico, implicando el proceso de la figura:

Problema
Problema

Eleccin
Eleccin del
del
mtodo
mtodo analtico
analtico MTODO ANALTICO

Toma
Toma de
de Tratamiento
Tratamiento Proceso
Proceso de
de Tratamiento
Tratamiento dede
muestra
muestra de
de la
la muestra
muestra medida
medida los
los datos
datos

Valoracin de
los resultados

Informe y
conclusiones
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5. El Proceso Analtico
Etapas
1. Definicin del problema: Se plantea el tipo de anlisis
requerido y la escala de trabajo.
Cul es el problema?
Para qu se usar la informacin?
Cundo se necesita?
Qu exactitud y precisin se requiere?
2. Seleccin del mtodo de anlisis: Consideraciones
importantes:
Exactitud requerida en los resultados
 Disponibilidad de tiempo y de dinero
Nmero de muestras a analizar
 Concentracin esperada del analito en la muestra
 Complejidad de la muestra bajo anlisis
Mtodos
Buscar en disponibles
la bibliografa o estandarapropiados o, si es necesario,
procedimientos
poner a punto nuevos procedimientos analticos para llevar a cabo el
anlisis 33
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5. El Proceso Analtico
Etapas

3. Toma de muestra o muestreo


Plan de muestreo: estrategia a seguir para garantizar que los
resultados obtenidos reflejen la realidad del material analizado.
Hay que tener en cuenta:
Tipo de muestra/ Homogeneidad/ Tamao
Manipulacin y almacenamiento: contaminacin y estabilidad.

 Caractersticas que ha de cumplir la muestra:


 ser representativa del material a analizar
 ser homognea, lo que significa que debe ser igual en todas
sus partes.

Para reducir los errores en


los resultados del anlisis
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5. El Proceso Analtico
Etapas
4. Tratamiento de la muestra
Lo habitual, es que la muestra necesite algn tipo de tratamiento, con el fin
de:
 Preparar la forma y tamao de la muestra, as como la concentracin del
analito(s), ms adecuada para la tcnica analtica seleccionada
 Eliminar interferencias matriciales

Los pasos a seguir dependen del tipo de muestra:


1. Tomar una cantidad de muestra
2. Preservar la muestra
3. Disolver la muestra
4. Ajustar condiciones experimentales

Consideraciones en esta etapa


 No puede haber prdida de analito , ni contaminacin de la muestra
 Se deben hacer las diluciones o preconcentraciones necesarias para
poder aplicar la tcnica seleccionada
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5. El Proceso Analtico
Etapas
5. Proceso de medida
 El proceso de medida debe llevarse a cabo en varias alcuotas idnticas de
la muestra con el fin de:
Establecer la variabilidad del anlisis
Evitar un error grave
Tener los suficientes datos para calcular la incertidumbre de los
resultados.

 Calibracin
La mayora de los mtodos necesitan disoluciones estndar o patrn
Calibracin con estndares externos. Recta de calibrado
Calibracin por adicin estndar
Calibracin con el uso de estndar interno

 Validacin
 Comparar los resultados aplicando el mtodo a muestra de composicin
certificada
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5. El Proceso Analtico
Etapas
6. Calcular y evaluar los resultados

 Anlisis estadstico

 Los resultados han de ser evaluados por estimacin de su fiabilidad

 Escribir resultados con sus limitaciones

 Siempre se debe dar un ndice de la fiabilidad de los datos.


Determinando el lmite de confianza a un nivel de 90 95%.
Presentar la desviacin estndar absoluta indicando el nmero de
datos que se han utilizado.

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5. El Proceso Analtico
Etapas

7. Emitir informe
El informe dirigido al solicitante del anlisis ha de:

1. Indicar claramente los resultados

2. Las condiciones experimentales empleadas

3. Limitaciones concretas de la tcnica analtica empleada

4. Las conclusiones que se extraigan de los datos deben ser coherentes


con los mismos.

5. El resultado del anlisis se expresar como el valor medio obtenido de


n alcuotas, acompaado de su desviacin estndar:
X media DS (n= 5)

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6. Errores en Anlisis Qumico

Antes de comenzar un anlisis :


"Cul es el mximo error que se puede tolerar en el resultado?

Es imposible realizar un anlisis qumico de forma que los


resultados estn totalmente libres de errores o incertidumbres.

Nuestro objetivo es:


a) mantener estos errores a unos niveles tolerables,
b) estimar su magnitud con una exactitud aceptable.

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6. Errores en Anlisis Qumico

Tipos de error en datos experimentales


Error determinado (o sistemtico),
Determina que la media de una serie de datos difiera del valor
aceptado.
Afecta a la exactitud de los resultados

Error indeterminado (o al azar, aleatorio)


Determina que los datos se dispersen ms o menos simtricamente
alrededor del valor medio.
Afecta a la precisin de los datos

Error craso
Ocurre slo en raras ocasiones, siendo con frecuencia grandes, y
puede causar que un resultado sea o alto o bajo.
Conduce a resultados aberrantes, que difieren mucho de todos los
dems datos de una serie de medidas repetidas.

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6. Errores en Anlisis Qumico

Algunos trminos importantes


Precisin: indica la concordancia entre dos o ms medidas que han
sido hechas exactamente de la misma manera.
Hay varias formas de expresar la precisin:
Desviacin estndar (s)
La desviacin estndar es un trmino estadstico que se usa como una
medida de la precisin.
Para una serie pequea de datos, calculamos la desviacin estndar s de la
muestra usando la ecuacin siguiente:
N

i
( x
i =1
x) 2

s=
N 1
donde (xi x) es la desviacin respecto a la media de la medida i. La cantidad (N 1)
se llama nmero de grados de libertad. 41
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6. Errores en Anlisis Qumico

Algunos trminos importantes


La exactitud mide la concordancia entre un resultado y su valor
verdadero o aceptado, y se expresa por el error.
Error absoluto
El error absoluto E de la medida de una cantidad xi viene dada por la
ecuacin:
Eabsoluto= xi xv
donde Xv es el valor verdadero o aceptado de la cantidad.
El error absoluto tiene signo: el signo negativo indica que el
resultado experimental es menor que el valor aceptado (error por defecto) y
el signo positivo que es mayor que el aceptado (error por exceso)

Error relativo
El error relativo Er es una cantidad ms til que el error absoluto.

Erelativo= (xi xv / xv ) 100%


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Esquema resumen

Obtencin de la Preparacin de la
Eleccin del mtodo
muestra muestra

Definir y conocer el Extraccin del analito Se encuentra el analito


a la fase lquida
No disuelto?
Problema
S
Es mensurable la
Cambio de la forma propiedad analtica?
qumica del analito
No
S
Eliminar interferencias si las
hubiere
Estimar la fiabilidad
de los resultados Medir la propiedad
Calcular los resultados
analtica

Informe Conclusiones
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