Documento descargado de http://www.revclinesp.es el 10/02/2017.
Copia para uso personal, se prohbe la transmisin de este documento por cualquier medio o formato.
en dmontrant son effet sur les symptmes
et les du
Iasme, fonction hevatique, etc. V1s a v1s des
psultats ex1.rimentaux, qui s2ront commu-
on cet se produit
a travers la mocl!ficatwn causee dans la fiare
intestinale; cclle-ci, a carbono, que creemos puedan ser de inters
tion soit tra vct'S l'elaboratwn de tox1ques,
joue certainemcnt _un rle
production de la cnTlwse hepabque.
LA REACCION DE LA ANTRONA EN LA
DETERMINACJON DE LOS HIDRATOS DE
CARBONO
F. GRA:\DE, A. UTRERA
lnstiiuto dt :\fd1cas. :\fadri!l . Directo.
l'mfpsor C. J
La casi totalidad de los mtodos empleados
habitualmente para la determinacin de la glu-
cosa en los lquidos biolgicos se basan en el
poder reductor de este glcido. Por ello, dichos
mtodos pueden dar valores anormalmente ele
vados al computar como glucosa otras sustan-
cias reductoras que suelen acompaar a sta.
Aunque muchos de los mtodos empleados en
la actualidad evitan este inconveniente
al uso de desproteinizantes adecuados, es inte-
resante en ciertos casos disponer de un mto-
do exacto que permita la determinacin de los
hidrocarbonados sin depender del poder reduc-
tor de los mismos.
La reaccin de los hidratos de carbono con
la antrona, descrita recientemente por DHEY-
wooo, ofrece en este sentido un gran
ya que se trata de una reaccin extremada-
mente sensible y especfica que puede ser apli
cada a todos los hidratos de carbono, sean o no
reductores, y permite la valoracin de los po-
sin necesidad de recurrir a la previa
h1drolisis de los mismos. Estos y otl os motivos
dado lugar a que en la literatura de los
aos se hayan publicado algunos tra-
baJos relacionados con la aplicacin de esta
reaccin a la determinacin de los hidratos de
carbono en distinto::; productos biolgicos. En
tre estos trabajo::; debemos mencionar los de
MORRIS (194.8), SEIFTER y cols. (1950) y ZIPF y
WALDO (1952) .
Nuestro inters por el mtodo de la antrona
inicialmente al buscar un proce-
dimiento para la determinacin del alucgeno
en pequeas muestras de tejidos y eno condicio-
nes en las que los mtodos habitualmente em-
LA REACCION DE LA ANTRO N A 17
pleados no daban resultados bastante satisfac-
torios.
Al estudiar la aplicacin del mtodo de la an-
trona a nuestro problema tuvimos ocasin de
realizar algunas observaciones acerca de la
reaccin de esta sustancia con los hidratos de
para quienes se preocupen ror estas cuestio-
dans la nes, y que damos a conocer en el presente tra-
bajo.
D8SCRIPCI(:-.; DE T.OS EXPERI\11::\TO>; .
lilodos. - La antrona utilizada <'n uuPst! os expen-
mentos fu preparada a partir de antraquinona, si-
guiendo el mtodo descrito en Orgrulic Synt111 sis (vol. 1,
pgina 60 l. Las primer as m u es tras fu eron preparadas
tn el Instituto Ibys por los seores y
cu:ya colaboracin agradecemos; las dems, fueron pre
paradas <'n nuestro laboratorio.
La solucin de antrona se prepar, segn y \\"AL-
t)(), di!<olviendo O 2 gr. del producto puro <'n la mezcla
fra de 5 c. c. de agua y 95 c. c. de sulfrico concen-
tl ado. El sulfrico debe ser pursimo, habiendo obteni-
do resultados sati.sfactorios con <'1 de la marca Probus,
y J. C. DE YA. calidad para anlisis. La solucin de antrona se pre-
par nueva cada dia aunque puede conservarse cuatro
o cinco das sin que se modifiquen los resultados. Las
l llt'> r.z.
Di.lz. de hidrato de ca1bono utilizadas fueron en to-
dos los casos de marcas conoci<las y de calidad "pur-
sima" o para anlisis. En t odos los casos las muestras
fueron desecadas cuidadosamente, en vaco, sobre sulf-
rico, antes de preparar las soluciones correspondientes.
Estas se hicieron en gene1-al a partir de una solucin
madn conserva da en la nevera, de la que por dilucin
S<' pr<'paraba ca<la dia la solucin a utilizar.
Dl'b<' tenerse gran cuidado en el Sl cado d<'l material
d<' viril io, quP no debe hac erse nunca con papel de Iil
lro o paos. T odo el material utilizado por nosotros fu
S<'cado a la estufa despus del lavado habitual.
Como aparatos de mPdida utilizamos el colodmetro
fotoelctrico de Evelyn y el espectrofotmetro de Co-
leman.
R ESULTADOS.
A continuacin exponemos los resultados de
nuestras observaciones, que agrupamos en una
serie de captulos de acuerdo con los distintos
problemas examinados.
a) Influencia del calentamiento.
La reaccin de la antrona requiere para su
produccin la elevacin de la temperatura de
la mezcla durante algn tiempo . Generalmente
se admite que el calor producido al mezclar la
solucin sulfrica de antrona con la solucin
acuosa que se analiza, basta para hacer mar-
char la reaccin. Sin embargo, algunos autores
opinan que el desarrollo de calor puede no ser
bastante uniforme, lo que puede influir sob1 e la
intensidad del color de la reaccin.
E studiamos el desarrollo de calor en las con-
diciones de nuestras determinaciones introdu-
ciendo directamente un termmetro en el tubo
del colormetro en donde se mezclaban :3 c. c. de
la solucin a analizar con 6 c. c. de solucin sul-
frica de antrona. El desarrollo de calor en el
Documento descargado de http://www.revclinesp.es el 10/02/2017. Copia para uso personal, se prohbe la transmisin de este documento por cualquier medio o formato.

18 REVISTA CLINICA ESPAOLA 15 O<'tub 1e 1953

tubo mantenido al aire puede verse en la figu- Los tubos de Evelyn conteniendo la solucin
ra 1, que reproduce una de las observaciones del hidrato de carbono en un volumen total de
realizadas. 3 c. c. se colocan en una gradilla adecuada. Con
Siguiendo esta misma tcnica se realizaron una bureta se aaden a cada tubo los 6 c. c. de
una serie de 118 determinaciones con cantida- la solucin de antrona en sulfrico, agitando el
des de glucosa que entre 2 y 50 mi- tuvo vivamente para que la mezcla se efecte.
crogramos para el volumen total de 9 c. c. (3 de Tan pronto se ha verificado dicha mezcla se
lleva el tubo al bao a 80 grados, anotando exac.
tamente el tiempo y mantenindolo all quince
1
minutos, al cabo de los cuales se le lleva de nue-
110 f - 1 J vo a ot ro bao con agua corriente. El mtodo
10o't
i

1
! 1 requiere d os personas: una, para ir poniendo el
sulfrico en los tubos, y otra, para anotar la
90
\ , 1 entrada en el bao a 80 grados y cuidar de sa-
\ 1
1
1
1
carlos cuando han pasado exactamente los quin-
ce minutos de calentamiento. Este procedimien-

70 \ 1
1
1 to es un poco ms complicado que otros proce-
dimientos que han sido descritos, pero es el
6 \ 1
1
que nos ha dado resultados ms constantes. St
se dejan los tubos en un bao hasta que se ha

''
1
1 puesto el reactivo de antrona en todos ellos lle-
l 1
1 nos satisfactorios.
JO
S
: 1
"
1
;o
l
/S
t das.
Fg. l.-Desarrollo de calo< al mezclar 3 <'. <" de
:uuosR con 6 c. c. de solucin de antrona en sulfrico en
un tubo de Evelyn.
Ordenadas: en gra dos.
)Iinutos tran>:curridos el momento de m<'z
clar la" soluciones.
Temperatura exterim: 25
solucin acuosa de glucosa y 6 de solucin
sulfrica de antrona ) . El color fu medido en
el fotoc:olormetro, pasados treinta minutos
usando el filtro 620.
Los resultados fueron en general excelentes
para cada serie de determinaciones, pero los
valores variaban de un da para otro ms de
lo que pareca conveniente. Se pens en que es-
tas diferencias podan estar ocasionadas por
modificaciones en el calentamiento de la mez-
cla y se ensay entonces otro mtodo capaz de
permitir mantener ms constantes las condicio-
nes en cuanto a la temperatura de la mezcla.
Siguiendo lo sealado por otros autores prac-
ticamos la adicin de la solucin de antrona en
sulfrico a la solucin que contiene el hidrato
de carbono, mientras los tubos de Evelyn que
contienen esta solucin se hallan sumergidos en
un bao de agua a temperatura ambiente. Los
tubos son sacados luego del bao de agua y lle-
vados a otro en el -cual el agua se mantiene a
una temperatura ms elevada. Se hicieron una
serie de ensayos para establecer las condiciones
ptimas de la reaccin, de los que se dedujo
que la temperatura del bao ms conveniente
era la de 80 grados, mantenida durante quince
minutos. El procedimiento finalmente adapta-
do fu el siguiente:
vndolos todos a la vez al bao caliente, se ob-
tienen resultados que hemos considerado me-
1
1
En la tabla I presentamo!-> los valores obtem-
Jo
dos con este procedimiento para una serie de
muestras de glucosa determinadas en distintos
b) D esarrollo de color y su relacin co11 la
C'Oncentracin df'l hlrofo de carbono.
El producto de la reaccin entre la antrona y
los hidratos de carbono tiene color azul, pero
como la solucin de antrona tiene un tono ama-
rillento, el color del lquido que se observa cuan-
do la reaccin se hace con pequeas cantidades
de glcido adquiere un tinte verdoso.
Se realiz el estudio del color en el espectro
visible utilizando el espectrofotmetro modelo
Coleman, midiendo la absorcin entre 400 y 750
milimicras, con intervalos de 25 milimicras. El
resultado de estas medidas se presenta en la fi-
gura 2, en la que se reproducen la curva de ab
sorcin luminosa de la solucin de antrona al
0,2 por 100 en sulfrico ms un 50 por 100 de
su volumen de agua bidestilada y la de un pro
blema que contiene 50 microgramos de glucosa
en un volumen total de 9 c. c. (3 de solucin de
glucosa y 6 de reactivo de antrona).
El estudio de la curva muestra que el pro
dueto de la reaccin tiene su mximo de absor
cin en 625 milimicras. P or esta razn emplea
mos sistemticamente para nuestras determina
ciones en el colormetro de Evelyn el filtro 620.
De acuerdo con lo observado por MORRIS, he
mos encontrado que el desarrollo de color pue
de medirse tambin con el filtro 540 de Evelyn,
pero se obtiene entonces una menor sensibili
dad, como puede verse en la figura 3.
De acuerdo con las observaciones de este
autor hemos encontrado que el desarrollo de
Documento descargado de http://www.revclinesp.es el 10/02/2017. Copia para uso personal, se prohbe la transmisin de este documento por cualquier medio o formato.

TOll(\ L1 LA REAOOJON DE LA ANTRON A 19

N t MERO 1

olor sigue la ley de Beer, existiendo buena pro- losa da una intensidad de color mucho mayor.
por lo menos hasta la cantidad La glucosa ocupa una posicin intermedia. Los
de 150 microgramos de glucosa en el volumen poliglcidos muestran un desarrollo de color
total de 9 c. c., como puede ver se en la figura 4. que es comparable al de los monoglcidos que

41
r
1,2

D,l
1,0
45 /
!/
V

0,8

oJ /

Lv /

0,5
4J /
0.1 V I/ .


0,1
1 1
/0 20 JQ

F ig. 3.-Desarrollo de color en la reaccin entr e la ant rona

y la glucosa.
F otocolorimetro de Evelyn. Filtro, 620 y 540. V olu men t o-
tal, 9 c. c. (3 c. c. de solucin de glucosa y 6 c. c. de reac-
tivo de a n trona) . Bao a 80 grados, 15 minutos.
Ordenadas: Coeficiente de extincin.
500 600 Abscisas: Microgramos de glucosa p or tu bo.
Fig. 2.-Curva de absorcin de la r eaccin de la antrona a Lecturas con el filtro 620.
(bnflo a 80 grados, 15 minutos). + Lecturas con el filtro 540.
X 6 c. c. de solucin sulfrica de antrona. -r 3 c. c. de
agua bidestilada.
1 6 c. c. de solucin sulfrica de antrona. + 3 c. c. de so-
lucin acuosa C'Onteniendo 50 microgramos de g lucosa.
S
1 1 :
1 ! 1 1 ;,
Ordenadas: Coeficien te de extincin .
t
1 1 1 7
Abscisas: Longitud de onda en m !lim icras. IJ
- 1 1
1
i 1 /
Espectrofot:netro Coleman.
/
11
1 1
/
11
1 1
' 1
1
I.D r
e) I nfluencia de la clase de hidrato de carbono 1 1 1 1
1
sobre el desar rollo de color. 1 / 1

La reaccin de la antrona, segn se ha indi- 1

1 / . 1

1 / 1
cado ya, es comn a todos los hidratos de car- 1
1
1 / 1
bono, pero la cantidad de producto coloreado ' 1
1
resultante puede variar de un glcido a otro. '
Ya en 1946 observ MORRIS que la misma can- T _/ 1
tidad en peso de glucgeno y de glucosa dan D.J
:/ 1
'
una ligera diferencia de intensidad de color. El ., l./;' 1 1

glucgeno da por trmino medio un 11 por 100 / 1 1

ms de color que la glucosa. La galactosa, en

cambio, slo da un 54 por 100 del color des-
arrollado por una cantidad igual de glucosa.
Estas observaciones nos movieron a estudiar
sistemticamente el desarrollo de color de los
distintos hidratos de carbono a nuestro alcan-
ce, siguiendo la tcnica antes descrita.
En la figura 5 reproducimos los valares ob-
tenidos con una serie de hidratos de carbono.
. Como puede verse, los monosacridos reac-
cionan con la antrona con tres grados diferen-
tes de intensidad. La galactosa y la mannosa
desarrollan menos color, mientras que la levu-
Fig. 4.-Relacin entre d e sarrollo de color y cantidad de
g lucosa .
Volu:nen total, 9 c. c. (3 c. c. de solucin gl ucosa y 6 de
r eactivo de antrona). Lectur as, fotocolorimetro de Evelyn.
Filtro 620, 15 minutos de b a o a 80 grados.
Ordenadas: Coeficiente de extincin.
Abscisas : Micr ogramos de g lucosa p or t ubo.
los componen. As, la inulina da aproximada-
mente la misma intensidad de color que la le-
vulosa, mientras que el almidn y el glucgeno
dan una intensidad de color comparable a la de
la glucosa.
Documento descargado de http://www.revclinesp.es el 10/02/2017. Copia para uso personal, se prohbe la transmisin de este documento por cualquier medio o formato.

20. REVISTA OLIN IOA ESPAOLA 115 octubre 1953

que 100 microgramos de glucosa dan un color

equivalente a 106 microgramos de glucgeno.
La purificacin del glucgeno por disolucin en
agua caliente seguida de precipitacin por al-
cohol y secado cuidadoso del producto, no mo-
dific sensiblemente el resultado.

d) Sobre el mecanismo de la reaccin.

M#
Fig. 5.-Color producido por la antrona con diferentes hi-
dratos de carbono.
Volumen total; 9 c. c. (3 c. c. de solucin de hidrato de car-
bono y 6 c. c. de reactivo de antrona).
Bao 80 grados, 15 minutos. Lectura, fotocolorlmetro tle
Los datos publicados hasta el presente con
respecto al mecanismo de la reaccin de la an-
trona hacen depender sta de la formacin de
furfural o un derivado del mismo (SATTLER v
fZERBAN; ZIPF y W ALDO) . .
Es interesante sealar a este respecto que la
reaccin de la antrona con el furfural no es
exactamente comparable a la que da con los
hidratos de carbono. En su primera publicacin
seal DREYwooo, en efecto, que el color verde
de la reaccin suele virar a ocre con rapidez.
Hemos ensayado la reaccin del furfural con
la antrona empleando una muestra de furfural
recin destilado y hemos observado tambin
este fenmeno, que no se da con los hidratos
de carbono.

Evelyn. Filtro 620.
-- -+
.1 .e/r .- j T-
Ordenadas: Coeficiente de extincin. f-
Abscisas: Cantidad total de hidrato de <'arbono en mi{'ro-
gramos por tubo !5 - f- - -
-- - - -- f- Rpmncuo
Los disacridos se comportan de manera un

,7V
poco ms compleja. La maltosa, por ejemplo, da 1,3
el mismo color que la glucosa, lo que hace pen-
sar que tanto los di como los poliglcidos com-
puestos de glucosa tienen el mismo desarrollo jv __
de color. Sin embargo, la trehalosa, que es como
la maltosa, un diglcido compuesto de dos mo- / 1
lculas de glucosa, da mucho menos color que lj
aqulla. La diferencia entre la maltosa y la tre- 0.9 )1
halosa consiste nicamente en el modo de unin 0,8 /
de las dos molculas de glucosa, que forman
un enlace 1-4 en el caso de la maltosa, y un 0.1 // ... .
[._/
v
enlace 1-1 en el caso de la trehalosa. As, pues, //:
[/6
es posible que no slo sea importante la natu- -/- 1 - -

raleza de los monosacridos que componen el di- 0.5 j / ,__

glcido, sino tambin la forma de estar unidos.
La lactosa da un color intermedio que viene // /
.../
./
.,

a corresponde aproximadamente a la mezcla de V V V

O.J .// IAra.b
glucosa y galactosa que la constituye. La sa-
carosa, en cambio, parece dar ms color del que
corresponde a la levulosa y la glucosa que la
v/
.......
...v V
-
constituyen. (),/ ) _.,/ /
Nuestros resultados no coinciden exactamen- V
te con los de MORRIS en lo que respecta a la re-
lacin entre el desarrollo de color del gluc-
Fig. S.-Comparacin del color producido con la antrona
geno y la glucosa. Los valores que hemos ob- por dos pentosas (xllosa y arabinosa), una metllpentosa
tenido indican que el glucgeno desarrolla, en (ra:rmosa) y una hE'xosa (glucosa).
efecto, un poco menos de color que la glucosa. Volumen total, 9 c. c. (3 c. c. de solucin de hidrato de car
bono y 6 c. c. de reactivo de antrona). Baf'ro a 80 grados,
Mientras MORRIS encuentra que 100 microgra- 15 minutos.
LE'duras colorlmetro, foto elctrico de Evelyn. Filtro 20-
mos de glucgeno dan el mismo color que 111 0rdenadas: Coeficiente de extincin.
microgramos de glucosa, encontramos nosotros Abscisas: Micromoles de hidrato de carbono por tubo.

-- ----
Documento descargado de http://www.revclinesp.es el 10/02/2017. Copia para uso personal, se prohbe la transmisin de este documento por cualquier medio o formato.

ToMO Ll LA REACCION DE LA ANTRON A :n

;-<()MERO 1

A fin de obtener algn dato ms acerca de
esta cuestin, realizamos una serie de experi-
mentos en los que estudiamos comparativamen-
te el color por dos pentosas: la
l-arabinosa y la d-xilosa; una hexosa, la el-glu-
cosa, y una metilpentosa, la ramnosa.
Los resultados de estos experimentos se re-
cogen en la figura 6, cuyos valores son cifras
medias de dos experimentos coincidentes rea-
lizados en diferentes das.
Es fcil otservar que el color desarrollado
por las pentosas, referido a igual concentracin
molecular, es mucho menor que el desarrollado
por la ramnosa o la glucosa.
Por la accin de los cidos, las pentosas for-
man furfural , mientras que la metilpentosa
debe formar metil-furfural, y la hexosa, hidro-
ximetil furfural , segn se expresa en las frmu-
las siguientes (ver BERNHAUER, HURD e ISEN-
HOUR, WOLFRON y cols.).
las pentosas y las hexosas pudiera ser, por tan-
to, detido a este hecho.
Es digno de tenerse en cuenta que dentro de
las pentosas el color desarrollado es mucho me-
nor para la arabnosa que para la xilosa a igual
concentracin molar. En 1932 observaron HURD
e ISENHOUR que en :resencia de cido sulfrico
al 32 por 100 la arabinosa se transforma
furfural en un 45 por 1CO, mientras que la xi-
losa en iguales condiciones da un 70 por 100
de dicho producto. Es interesante que los co-
lores desarrollados ror estas dos pentosas en
nuestros experimentos se encuentran entre s
en proporcin anloga a la que acabamos de
sealar.
Los resultados indican, por tanto, que en el
mecanismo de la reaccin de los hidratos de car-
bono con la antrona debe intervenir, en primer
lugar, la clase de derivado furfurlico formado,
y en segundo lugar, la proporcin del mismo
que se rroduce en las condiciones de la reaccin.

CHO
e) La aplicacin clel mtodo ele la antrona a la
H.C.OH CH-CH deternnacin del glucgeno.
HOC.H HC C.CHO Uno de los aspectos ms tiles de la reaccin
de la antrona es su aplicacin a la determina-
H .C.OH o cin del glucgeno, puesto que permite prescin-
CH,OH dir de la hidrolisis, que de otra manera es ne-
cesaria.
r('ntosll . Furfural.
En 1950, SEIFTER y cols. describieron un m-
todo para la determinacin del glucgeno em-
CHO pleando la reaccin de la antrona, que encierra
H.C.OH notables ventajas de sencillez y exactitud.
CH-CH Hemos realizado una serie de ensayos para
HCOH aplicar la reaccin de la antrona a la determi-
e C.COH nacin del glucgeno en el hgado y el msculo
HOCH de rata. El mtodo que hemos adoptado final-
H,C O
HOCH mente no se diferencia de modo fundamental
del que SEIFTER y cols. llaman mtodo indirec-
CH, to. El trozo de hgado o msculo (hasta 100 mi-
l\1et llpen ligramos del primero y 200 del segundo) se pe-
san rpidamente con balanza de torsin y se
CHO llevan a un tubo de centrifuga :::alocado en bao
hirviente en el que hay 1 c. c. de KHO al 30 por
HC.OH 1GO. Se deja en el tao unos veinte a treinta
CH CH minutos, agitando de vez en cuando hasta que
HOC"H el tejido est completamente disgregado y la
C C.COH
IICOH / solucin sea perfectamente homognea. Se deja
HCOH O enfriar y se aade 1,25 c. c. de alcohol absolu-
HCOH to, mezclando bien y llevando a bao caliente
para coagular el glucgeno, hasta que se inicie
CH,OH
la etullicin del alcohol. Se deja enfriar y se
Hexosn. H id I"OXimetll furfu ral. centrifuga el tuto quince minutos a 3.000 re-
voluciones por minuto.
Si se admite que los productos formados por Se decanta el tubo invirtindolo sobre parel
la accin del cido sobre los azcares son los de filtro. Se aade luego 1 c. c. de agua desti-
acabamos de sealar, tendremos que con- lada caliente, lavando Cien las paredes del tubo
clUir que el color desarrollado por el furfural al y disolviendo el glucgeno, que se vuelve a pre-
rea:cionar con la antrona es menor que el pro- cipitar con alcohol, repitiendo la centrifugacin
cuando sta reacciona con el metil o el y la decantacin. Esta maniobra es convenien-
hldroximetilfurfural. te, sobre todo cuando se trata de trozos de
La diferencia entre el color desarrollado por msculo (diafragma de rata. por ejemplo) que
Documento descargado de http://www.revclinesp.es el 10/02/2017. Copia para uso personal, se prohbe la transmisin de este documento por cualquier medio o formato.

22 REVISTA CLINICA ESPA!VOLA 16 octubre 1953

han sido incubados en un medio que contiene
elevada concentracin de glucosa. En estos ca-
sos hemos encontrado til lavar tambin en
Ringer sin glucosa el msculo, y secarlo luego
con papel de filtro, antes de pesarlo.
El precipitado de glucgeno se disuelve final-
mente en un volumen de agua destilada calien-
te de unos 10 c. c., tomando dos fracciones, de
3 c. c. cada una, para hacer la determinacin
con 6 c. c. de reactivo de antrona, segn se dijo
anteriormente.
El mtodo se compar con el clsico de Gooo,
KRAMER y SoMOGYI, encontrando en general ex-
celente acuerdo, como -:uede verse en la tabla II
que reproducimos a continuacin. Los valores
son medias de dos determinaciones paralelas.
En la determinacin del glucgeno utilizamos
sistemticamente para la lectura colorimtrica
dos soluciones patrn de glucgeno, purificado
y desecado como se ha dicho anteriormente. De
esta manera los valores vienen expresados en
cantidades de glucgeno y no en el equivalente
de glucosa, como se expresa frecuentemente.
DISCUSIN.
Los datos que hemos dado indican que el m-
todo de la antrona constituye un procedimiento
sensible especfico y exacto para la determina-
cin del material hidrocarbonado en los produc-
tos biolgicos. Su aplicacin a la determinacin
de la glucemia da resultados satisfactorios se-
gn han demostrado ZIPF y WALDO, y puede
constituir un mtodo de gran utilidad por su
sencillez. Creemos, sin embargo, que el mayor
valor del mtodo est en su aplicacin a la de-
terminacin del glucgeno.
Los dos mayores inconvenientes P!'cticos del
mtodo de la antrona estn sin duda en la ne-
cesidad de vigilar con gran exactitud la tempe-
ratura durante el desarrollo del color y en el
manejo de la solucin sulfrica. Esta ltima
dificultad ha sido obviada por LoEwus, que em-
plea una solucin de antrona en acetato de eti-
lo, aadiendo luego por separado el cido sul.
frico.
El hecho de que la antrona reaccione con t 0
dos los hidratos de carbono hace que esta reac.
cin sea til sobre todo en aquellos estudios en
que se desee conocer la cantidad total de hidro-
carbonados, pero no importa saber cules son
los glcidos individuales presentes. Si el proble.
ma que interesa es el ltimo sealado, enton.
ces es preciso recurrir a otros procedimientos
capaces de permitir la individualizacin de los
diferentes hidratos de carbono.
Por lo que respecta al mecanismo de la reac-
cin, los datos de la literatura (ZIPF y W ALDo)
y nuestras observaciones indican que se trata
de la condensacin del derivado furfurlico
con la forma enlica tautmera de la antrona
o antranol. Nuestras observaciones indican que
los derivados metlicos del furfural (metil-fur-
fural e hidroximetilfurfural) dan muy aproxi-
madamente el mismo color ror mol.
El menor desarrollo de color observado en
las pentosas podra explicarse por el hecho de
que formen furfural y no su derivado metlico.
La semejanza entre la cantidad de calor pro-
ducida y la cantidad de furfural formada por
estas pentosas puede ser una indicacin ms
en este sentido.
No es fcil comprender la diferencia entre
las distintas hexosas, en lo que re::l,ecta a la
cantidad de color producida, que no podemos
explicar con los datos que poseemos. La dife-
rencia en la intensidad de color desarrollado
por las distintas hexosas con la antrona hace
que su aplicacin a mezclas de las mismas slo
pueda realizarse de modo cuantitativo si se co-
noce la proporcin en que stas se encuentran.
La mayor utilidad del mtodo en el anlisis
bioqumico est, como hemos dicho, en que per
mite determinar la glucemia sin ser afectado por
las sustancias reductoras no azcares y en la
determinacin del glucgeno. Su utilidad es
tambin evidente para demostrar la presencia
de otros hidrocarbonados no reductores y para
establecer la cifra total de hidratos de carbono
en un problema.

TABLA I
DESARROLLO DE COLOR DE LA REACCTON DE LA ANTRONA LA GLUCOSA MEDIDO EN EL FOTOCO-
LORIMETRO DE EVEYN. FILTRO 620
Volumen total, 9 c. c. (3 c. c. solucin problema y 6 c. c. solucin antrona en sulfrico). Calentamiento en bao a 80
grados, quince minutos.
COEFICIENTES DE EXTINCION

Cantidad total de glucosa por tubo en microg't'amos

Experimento 10 20 30 o 50 60 100 150
---- ---
l. 0,0901 0,1772 0,2716 0,369 0,.35 0,561 1,000 1,488
2. 0,1871 0,2924 0,382 0,495 0,585 0,939 1.426
3. 0,1135 0,2041 0,3100 0,385 0,502 0,()06 0,930 1,398
4. 0,1010 0,2007 0,3080 0,395 0,512 0,602 0,921 1,347
5. 0,0996 0,1990 o,3010 0,367 0,.91 0,598
---- -
0,101
--- ---
1,415
Medias.... ..... 0,193 0,296 0,379 0,487 0,590 0,947
Documento descargado de http://www.revclinesp.es el 10/02/2017. Copia para uso personal, se prohbe la transmisin de este documento por cualquier medio o formato.

To:JO LI PERFORACIONES GASTRODUODENALES 23

NO'MPJRO 1

TABLA li The values obtained indicate that the anth-

COMPARACION DE LOS VALORES OBTENIDOS EN rone reaction is produced by the condensation
LA DETERMINACION DE GLUCOGENO HEPATICO DE
R,ATA POR EL METODO DE LA ANTRONA Y EL DE
of anthranol with methyl furfural or hydro-
GOOD, KRAMER Y SOMOGYI xylmethyl furfural.
Cifras de glucgeno en por 100 de peso fresco de tejido.
m!SAM.MENFASSUNG
M todo
Experimento Mtodo de Good, Krame1
de antrona y Somogyl Man untersuchte die Antronreaktion mit
der Kohlehydrate, wobei besonders auf die
l. 1,70 1,77 Faktoren aufmerksam gemacht wird, die bei
2. 1,56 1,74 der Anwendung der besagten Reaktion zur
3. l,ISO 1,69 quantitativen Bestimmung von Gluciden be-
4. 1,49 1,46 rcksichtig werden mssen.
15. 1,94 1,69
2,64 2,03
Beschrieben wird weiterhin die Verwendung
6.
7. 2,66 2,62 dieser Methode zur Glykogenbestimmung in
8. 2,42 2,72 den Geweben.
9. 2,64 2,39 Die erzielten Resultate zeigen an, dass die
10. 1,92 1,82 Antronreaktion dadurch entsteht, dass das
11. 3,21 3,152
12. 3,25 3,52 Antranol durch das Methylfurfural oder Hy-
13. 3,54 3,41 droxymethylfurfural kondensiert wird.
14. 3,62 3,51

Medias.... ..... .. 2,43 2,42

On fait une tude de la raction de l'antrone

RESUMEN.
Se hace un estudio de la reaccin de la an-
trona con los hidratos de carbono, sealando
algunos de los factores que es preciso tener
en cuenta para la aplicacin de dicha reaccin
a la determinacin cuantitativa de los glcidos.
Se describe tambin la aplicacin del mto-
do a la determinacin del glucgeno en los te-
jidos.
Los datos obtenidos indican que la reaccin
de la antrona es producida por la condensacin
del antranol con el metil furfural o el hidroxi-
metilfurfural.
BIBLIOGRAFIA
avec les hydrates de carbone, en signalant
les facteurs dont il faut tenir compte pour
l'application de cette raction a la dterminai-
son quantitative des glycides.
On dcrit galement l'application de la m-
thode a la dterminaison du glucogene dans les
tissus.
Les rsultats obtenus indiquent que la rac-
tion de l'antrone est produite par la conden-
sation de l'antranol avec le mthyle-furfural ou
1'hyroximthyle-furfural.

BllRNHAUER, K.-C'hemie und Blochemie der Zuckerarten.

Berlln, 1933.
DRI'NWOOD, R.-Anal. Cheml., 18, 499, 1946. HIPERAMILASEMIA EN LAS PERFORA-
H.- Organlc Synthesls, 1, 60,
Gooo, C. A. , KRAMI!lR, H. y SOMOOYI, M.-J. Biol. Chem., 100, CIONES GASTRODUODENALES
485 1933.
C. D. e I SI':NHOUR, L. L.- J. Am. Cheml. Soc., 54, 317,
C. PERA BLANCO-MORALES.
LollWus, F. A .-Anal. Chem., 24, 219, 1952.
MORRIS, D. L.-Sclence, 107, 254, 1948. Mdico Interno.
L. Y ZERBAN, F. \V.-Science, 108, 207, 1948. Servicio de Aparato Digestivo. Jefe: Doctor GARC BAR.'\.
L. y ZERnAN, F. W.-J. Am. Chem. Soc. , 72, 3.814.
S., DAYTON, S., NOVIC, B. y MUNTWYLI!!R , E.-Arch. C. ASENSIO BRETONES.
Z ochem ., 25, 191, 1950
R. E. y WALOO, A. L.-J . Lab. Clln. Med., 39, 497, 1952. Farmacutico Interno.
OLFh RON, M. L., SCHULTZ, R. D. y CAVALII'!RI, L . F .-J. Am .
C em. Soc., 70, 1114, 1948. Servicio de Qulmica. Jefe: Doctot CXI'AY.
Casa de Salud Valdecllla (Santander).

SUMMARY
anthrone reaction to carbohydrates is
stud1ed. Sorne of the factors to be borne in
when that reaction is applied to quanti-
tative determinations of glucides are pointed
out.
.The. application of the method to the deter-
mmabon of glycogen in the tissues is likewise
described.
I
La determinacin de la amilasemia para el
diagnstico de las pancreatitis agudas es con-
siderada, desde hace algunos aos, como el m-
todo complementario eficacsimo que, junto a
la valoracin adecuada del cuadro clnico, pue-
de darnos las seguridades que precisamos en
las dudas que siempre trae consigo un proceso