Universidad de Guayaquil

Facultad de Ciencias Qumicas

Laboratorio de Instrumental I
PRCTICA N 10
TEMA: DETERMINACIN ESPECTROFOTOMTRICA DE VITAMINA B12
OBJETIVO:

COMPROBAR POR ESPECTROFOTOMETRA LA CONCENTRACIN

DE LA VITAMINA B12.

MARCO TERICO
Las vitaminas son nutrientes que el organismo no puede sintetizar, se
necesitan en pequeas cantidades, para el metabolismo normal de otros
nutrientes y como el organismo no las puede sintetizar por si solo estas deben
ser adquiridas por los alimentos.
Las vitaminas no producen energa y por tanto no implican caloras. Intervienen
como catalizador en las reacciones bioqumicas provocando la liberacin de
energa. En otras palabras, la funcin de las vitaminas es la de facilitar la
transformacin que siguen los sustratos a travs de las vas metablicas.
Las vitaminas se dividen en 2 grandes grupos:

Vitaminas Hidrosolubles: En este grupo estn aquellas que son

solubles (se disuelven) en cuerpos lquidos (agua). Esta caracterstica
hace que el consumo diario sea ms estricto, ya que el lavado y la
coccin de los alimentos produce la prdida de las vitaminas, siendo
inferior la cantidad consumida. As tenemos: Vitamina C, Vitamina B1,
Vitamina B2, Vitamina B3, Vitamina B5, Vitamina B6, Vitamina B8,
Vitamina B9, Vitamina B12.

Vitaminas Liposolubles: Son aquellas que son solubles (se disuelven)

en cuerpos lpidos (grasas). Suelen encontrarse en alimentos grasos y
son almacenados en los tejidos adiposos del cuerpo. Tambin se
acumulan en el hgado, es decir que existe una reserva vitamnica
corporal que permite periodos de tiempo sin ingreso de las vitaminas.

Aqu contamos con: Vitamina A, Vitamina D, Vitamina E, Vitamina K.

Importancia

Las vitaminas son nutrientes necesarios para la regulacin de muchas

funciones diferentes del cuerpo. Son importantes para la formacin de tejidos,
clulas de la sangre, material gentico, hormonas y sustancias qumicas para
el sistema nervioso. Son necesarias para la vista, la memoria, huesos, dientes,
y reforzar nuestro sistema inmunitario.
Las vitaminas pueden ser catalizadores o coenzimas. Como catalizadores, se
unen con las protenas para producir enzimas que, a su vez, producen
reacciones qumicas esenciales dentro del cuerpo. Como coenzimas, actan
como portadores qumicos de una clula del organismo a otro.
El cuerpo humano slo puede producir un tipo de vitamina natural, que es la
vitamina D. Las otras deben ser ingeridas a travs de la dieta o suplementos.
Principales fuentes de vitaminas

Fuentes de vitamina E: Aceites y verduras

Fuentes de vitamina A: Yema de huevo, productos lcteos, crema,

manteca y hortalizas amarillas

Fuentes de vitamina C: Ctricos, patatas, verduras, fresas, brcoli y

meln

Fuentes de vitamina D: Yema de huevo, luz proveniente del sol, queso y

yogurt

Fuentes de vitamina B1: Levadura, hgado, cereales integrales, carne

vacuna, espinaca y cerdo

Fuentes de vitamina B2: Verduras, leche, hgado, legumbres en general

Fuentes de vitamina K: Verduras

Verdura B6: Cereales, yema de huevo

cido flico: Frutas, hgado, vegetales

cido pantotnico: Carne, leche, hortalizas

Biotina: Huevo, leche, cereales

Niacina: Hgado, carne, pescados, legumbres y man

Todas estas vitaminas son fundamentales para el correcto funcionamiento y

crecimiento del organismo.
EQUIPOS Y MATERIALES:

EQUIPOS
GENESYS 20
Balanza
Analtica

MATERIALES
Matraces
Volumtricos
Pipetas Volumtricas

REACTIVOS
Solucin estndar de vitamina
B12ug/ml
Agua destilada

Pipetas automticas

Muestra de vitamina B12

PROCEDIMIENTO:
o PREPARACION DE LA CURVA DE CALIBRADO:
Pesar directamente en un matraz de 25 ml, en balanza analtica, 20 mg de
Cianocobalamina (B12), adicione agua destilada, disuelva completamente y
enrase con el agua destilada.
A partir de esta solucin tome 5 alcuotas de:

Nivel 1
Nivel 2
Nivel 3
Nivel 4
Nivel 5

ALICUOTA

VOL. DILUCION

0,4
0,8
1,2
1,6
2,0

10 ml
10 ml
10 ml
10 ml
10 ml

CONCENTRACION
g/ml
10
20
30
40
50

ABS.
0,169
0,345
0,531
0,724
0,837

y = 0,018x - 0,0063
R = 0,9995
o PREPARACION DE LA MUESTRA:
De una muestra que contenga Vitamina B12 inyectable, que tenga una
concentracin de 1000 g de vitamina B12/ml, tome una alcuota de la
muestra y transfirala a un matraz volumtrico de 10 ml, de tal forma que la
concentracin final de la dilucin preparada sea de 30 g/ml, enrase
utilizando agua destilada.
CONC.
g/ml
30
30
30

ABS.
0,580
0,573
0,556

o PARTE INSTRUMENTAL:
Lea las Absorbancias de las diluciones de trabajo y de la dilucin de
la muestra preparada a una longitud de onda de 361 nm.
Use agua destilada como blanco.

ACTIVIDADES:
Con los datos obtenidos en las diferentes mediciones de los estndares
de trabajo, grafique la curva de calibrado y obtenga la Ecuacin de la
recta y el valor de R.
Realice los clculos necesarios para llegar a obtener la concentracin de
la muestra entregada. Aplique la estadstica (Promedio, Desviacin
estndar, Coeficiente de Variacin)

GRFICO DE LA CURVA

CURVA DE CALIBRADO
1
f(x) = 0.02x - 0.01
R = 1

0.8
0.6
ABSORBANCIA

0.4
0.2
0

10

20

30

40

50

60

CONCENTRACIN

CLCULOS
C 1= ?
y=0,018 x0.0063

V 1=0,270 ml
x=

yb
m

0,580+0,0063
x=
=32,57
0,0018

C 2=32,5732,1831,23

V 2=10 ml

C 1 V 1=C 2V 2

x=

0,573+0,0063
=32,18
0,0018

0,556+0,0063
x=
=31,23
0,0018

C 1=

C2V 2
V1

C 1=

32,57 x 10
=1206
0,270
32,18 x 10

CONCLUSIN
Se pudo concluir que la concentracin de la muestra es mayor que la que se
declara en la etiqueta.
BIBLIOGRAFA:
http://www.inkanat.com/es/arti.asp?ref=deficiencia-vitaminas
http://www.sanar.org/vitaminas/fuentes-de-vitamina