Estudio preliminar etnobotnico, fitoqumico, de la actividad anticancerosa

y antimicrobiana de la "hierba del cncer" Cuphea aequipetala Cav. (Lythraceae).

Jos Waizel-Bucay1a, Graciela Martnez-Porcayo1, Ma. Luisa VillarrealOrtega2 , Daniel Alonso-Corts 2 y Amada Pliego- Castaeda 3.
1
Depto. de Investigacin. Escuela Nacional de Medicina y Homeopata, Instituto
Politcnico Nacional. aBecario COFAA-PEDD, IPN.
DIRECCIN POSTAL: Guillermo Massieu # 239, La Escalera, Ticomn 07320,
Mxico, D.F.
Tel. 57 29 60 00 ext. 55540, 55532; 55 86-47 41. Fax. 57543258.
Correo electrnico josewaizel@hotmail.com
Unidad de Investigacin Biomdica del Sur del Instituto Mexicano del Seguro
Social, (IMSS), Xochitepec, Morelos.
3
Hospital de Oncologa, Centro Mdico Nacional Siglo XXI. I.M.S.S. Mxico, D.F.
2

PALABRAS CLAVES: ETNOBOTNICA MDICA, FITOQUMICA, CITOTOXICIDAD,

ENSAYOS ANTIMICROBIANOS, Cuphea, LYTHRACEAE, Plantas Medicinales.
KEY WORDS: MEDICAL ETHNOBOTANY, PHYTOCHEMISTRY, CYTOTOXICITY &
ANTIMICROBIAL ASSAYS, Cuphea, LYTHRACEAE, Medicinal Plants.
RESUMEN
Cuphea aequipetala Cav. es una planta mexicana que ha sido empleada en
forma emprica en el tratamiento de diversas enfermedades y en heridas difciles
de cicatrizar ("posibles cnceres de la piel"). El anlisis fitoqumico preliminar
mostr la presencia de: Alcaloides, flavonoides y glucsidos en las fracciones
metanlica y de acetato de etilo. Los glucsidos tambin se encontraron en la
fraccin hexnica; mientras que las lactonas sesquiterpnicas solo en la porcin
metanlica; la que mostr ligera accin citotxica sobre la lnea celular de colon.
Los dems extractos no mostraron dicha actividad citotxica. Las pruebas de
eficacia antimicrobiana no exhibieron inhibicin significativa del halo de
crecimiento, al compararles con antibiticos conocidos.

ABSTRACT
Cuphea aequipetala Cav. is a mexican plant used in traditional medicine in the
treatment of different diseases and difficult wound healing (possible cancer skin).
A preliminar phytochemist analysis, in the methanolic & ethyl acetate extracts
was positive to alcaloids, flavonoids & glicosides; the last ones, were also found
in the hexanic extract. While sesquiterpene lactones were found only in the
methanolic. This one, showed small cytotoxic activity against neoplasic colon
cells. The other extracts didn't show cytotoxic activity. The antimicrobial assays
were not inhibitorialy significative as common antibiotics.
INTRODUCCIN Y DESCRIPCIN BOTNICA.
Cuphea aequipetala Cav. [Icon Pl. 4:57 pl. 382. f.2. 1797] * =
Parsonia aequipetala (Cav.) Standley, planta originaria de Mxico, habita en
lugares con climas: clido, semiclido, semiseco y templado, desde los 1000 m.
snm., en bosques: espinoso, mesfilo de montaa, de encino, pino, mixto de pino
encino y de junpero, tambin en el bosque tropical caducifolio y subcaducifolio,
en matorral xerfilo y pastizal.
Se le denomina popularmente entre otros nombres, como "alcancer,
alfilerrillo, apancholoa (nhuatl), atlanchn, cachanchillo, cordn de San
Francisco guinda, hierba del ngel, hierba del cncer, miel de abeja, mirto, mirto
morado, moyote, pantillo, pelatito, petalito, rama roja, topo de indias, tripa de
tuza".
Pertenece a la Familia botnica Lythraceae, al orden Myrtales, y es por
tanto una dicotilednea con las siguientes caractersticas: es postrada, con
ramas ascendentes, mide de 30-40 cm, de altura, con la superficie cubierta de
pelillos violceos o rojizos. Hojas opuestas. Flores pequeas con ptalos
purpreo-violceos, de 10 mm. de largo. Se le considera planta venenosa.

En el libro I, Cap. XXXVII, Francisco Hernndez (1570-76 en edicin del ao

1942), menciona al respecto del apancholoa o hierba que brota en las aguas
(Identificada como Cuphea aequipetala Cav.*), que, es de naturaleza fra, seca
y astringente, por lo cual cura la quemadura o las lceras de la boca; el agua en
la que se hayan remojado por algn tiempo las races despus de machacarlas,
colada y tomada, detiene el flujo de vientre, principalmente el de los nios, y evita
el aborto, pero ms eficazmente si se mezclan con una planta que se llama
cozticpotoncaxochitl, triturndolas y macerndolas con ella; presenta adems
otros muchsimos auxilios propios de dicho temperamento. Nace en lugares
campestres de regiones templadas como la de Tetzcoco, donde tuvimos
cuidado de pintarlo, en terrenos mojados o acuosos, de donde toma el nombre.
(Fig. # 1).
Adems en la obra antes citada de Hernndez, se refiere una breve
descripcin botnica de la especie junto con la determinacin taxonmica antes
citada, y al respecto de sus usos se comenta que: vulgarmente se usa a la planta
en forma de cocimiento como vulneraria [propia para la curacin de las heridas],
o aplicada a las heridas contusas y tumores, tambin como corroborante para las
parturientas frotando la espalda y caderas con la hierba fresca y machacada
despus del bao de temazcal, adems se dice que es algo venenosa.

* La determinacin botnica es la que se menciona en la edicin del ao 1942, y

no se menciona por quin fue realizada.

UTILIZACIN EN MEDICINA TRADICIONAL.

Informacin etnobotnica obtenida por el Bilogo Fermn Bringas C.
mediante entrevista a Reynalda Becerril, habitante del lugar de recolecta del
material vegetal utilizado en este estudio (Canalejas, en el estado de Mxico),
refiere que la planta es empleada para curar "llagas o tumores que tardan mucho
tiempo en sanar". La bibliografa consultada refiere que sus tallos y hojas
cocidas y en fomentos, han sido empleadas en Mxico en forma emprica o
popularmente, (Martnez, 1959) para desinfectar heridas contusas, en el
tratamiento de golpes, enfermedades tumorales y en heridas de la piel difciles de
cicatrizar (estas ltimas, por irritacin crnica podran desarrollar un posible
cncer). En forma de infusin por va oral ha sido usada para tratar la disentera o
la diarrea, y malestares del estmago. Las flores y hojas machacadas en el
tratamiento de las paperas, en baos pos-parto, o en baos de asiento para bajar
la temperatura por sarampin, viruela u otras causas; tambin "pueden aplicarse
directamente a las heridas, los polvos preparados a partir de las hojas o trozos
de corteza secos, o cataplasmas elaboradas con el material herbolario fresco o
bien cocciones que se aplican para lavar la lesin" (Mata et al. 1994).
Siete especies del mismo gnero tambin se utilizan en la medicina
tradicional mexicana, para aliviar el "empacho", "para enamorar", "en recada de
3

calentura", contra la cada del pelo, "en baos para seoras" etc. (Aguilar, et al.
1994). Mientras que C. carthagenesis, se emplea en el Brasil en el tratamiento de
la sfilis y contra la malaria, y en Guatemala se le refiere como remedio para
mltiples propsitos (Gonzlez, AG. et al. 1994).
ASPECTOS FITOQUMICOS:
El gnero Cuphea L. posee alrededor de 300 especies, es motivo en la
actualidad de varios estudios agronmicos por descubrirse que algunas especies
como C. viscosissima entre otras, elaboran cidos grasos de 8, 10 y 12 tomos
de carbono que almacenan en sus semillas, y que tienen importancia econmica
para la industria aceitera (Roath, WW. et al. 1993).
Tambin se reportan para el gnero, la presencia de: triterpenos, esteroles,
sapogeninas,
gluco-alcoholes,
(manitol,
beta-sitosterol,
estigmasterol,
ergosterol, beta-amirina, cido betulnico y epifriedelinol), (Gonzlez, op. cit.). D.
Martins y NF. Roque (1995) aislaron compuestos fenlicos, flavonoides,
esteroides, y glicsidos, de Cuphea aperta usada en el Brasil como
antihipertensiva. Mientras que Santos Dyac, et. al. (1995), estudiando 16 especies
de Cuphea del mismo pas, aislaron 35 flavonoides.
OBJETIVOS DE LA INVESTIGACIN:
En este estudio, se tratarn de convalidar cientficamente algunos de los
usos populares que se le dan a la especie, as como tambin se pretende
contribuir al conocimiento de su composicin qumica mediante el anlisis
fitoqumico preliminar, y la determinacin de algunos grupos de metabolitos
secundarios. Tambin se realizarn con las fracciones aisladas, ensayos de su
actividad citotxica y antimicrobiana.
METODOLOGA:
COLECTA Y DETERMINACIN DEL MATERIAL BOTNICO.
La planta fue recolectada por Fermn Bringas Contreras, en una zona de
bosque de pino-encino, a una altitud aproximada de 2400 m s. n. m, en Canalejas,
Municipio de Jilotepec en el estado de Mxico. Se depositaron ejemplares de
referencia o "vouchers" en el Herbario de la Escuela Nacional de Medicina y
Homeopata, del I.P.N. La determinacin botnica fue llevada a cabo por el
profesionista antes mencionado en colaboracin con Jos Waizel-Bucay.
ANLISIS FITOQUMICO:
El vegetal se sec al aire, a temperatura ambiente y sus hojas, flores y
tallos, se pulverizaron en molino de cuchillas. A cuarenta gramos de dicho polvo
y mediante el aparato denominado "soxhlet", se le realizaron tres extracciones de
4

ocho horas cada una, en los disolventes: hexano, acetato de etilo y metanol, las
que se concentraron a presin reducida en el rotavapor, dejando evaporar a
sequedad a temperatura ambiente.
Se realiz la identificacin de los principales grupos de metabolitos
secundarios en cada extracto: Alcaloides con los reactivos de Mayer,
Dragendorff, Wagner y prueba del cido silicotngstico. La determinacin de
glicsidos, se llev a cabo con las tcnicas de: Molish y Legal. Los Flavonoides
mediante las pruebas de Shinoda y la del cido sulfrico y las tcnicas de
Demroth, y las llevadas a cabo con los cidos brico y ctrico.
Por ltimo la identificacin de las lactonas sesquiterpnicas se realiz siguiendo
las pruebas de: Hidroxamato, Legal y la de Baljet, (Domnguez, 1979).

PRUEBAS DE CITOTOXICIDAD:
Los ensayos de citotoxicidad de tres extractos: hexnico metanlico y el
obtenido a partir de acetato de etilo, se probaron de acuerdo a protocolos
internacionalmente aceptados para evaluar la citotoxicidad de extractos
vegetales (Geran, et al. 1972 y Villarreal et al. , 1992) sobre cultivos de tres lneas
celulares provenientes de cnceres humanos: KB (Carcinoma nasofarngeo),
UISO-SQC1 (Clulas escamosas de carcinoma de crvix) y HCT-15 COLADCAR
(Carcinoma de colon). Las lneas celulares UISO-SQC1 y HCT-15 COLADCAR
utilizadas en la presente investigacin fueron donadas a la Unidad de
Investigacin Biomdica del Sur del Instituto Mexicano del Seguro Social, por el
Programa de Productos Naturales del Instituto Nacional de Cncer de los Estados
Unidos de Norteamrica, mientras que la lnea KB originalmente obtenida de
ATCC, fue donada a la Unidad antes mencionado por el Departamento de
Farmacognosia de la Universidad de Illinois.
Todas las lneas celulares cultivadas en medio RPMI adicionado de 10% de
suero fetal bovino (FBS) previamente inactivado, se mantuvieron a una
temperatura de 37 C y en una atmsfera de 5% CO 2 en aire (100% humedad). Los
cultivos celulares en fase de crecimiento exponencial (72 horas despus de su
siembra) fueron subcultivados a una densidad de 25,000 cel/ml; 2.85 ml fueron
depositados en tubos estriles y tratados por triplicado con varias
concentraciones de los extractos vegetales (1.0, 10.0 y 100 ug/ml), agregndose
un volumen de 0.15 ml de dichos extractos a cada tubo problema con suspensin
celular y 0.15 ml de DMSO (disolvente dimetilsulfxido, utilizado para redisolver
el extracto vegetal), al 10% a los tubos control.
Los cultivos fueron incubados por 72 horas, en las mismas condiciones de
temperatura y humedad. La concentracin celular se determin por anlisis de
protenas de acuerdo al mtodo de Oyama ( Oyama, 1956).
PRUEBAS DE LA ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA.
En el Hospital de Oncologa del Centro Mdico Nacional Siglo XXI, del
Instituto Mexicano del Seguro Social y siguiendo el mtodo de impregnacin de
disco de Bawer et al. (1966), se realizaron los ensayos de la actividad
antimicrobiana de las tres fracciones de la planta, con y sin diluir en el disolvente
original, comparndoseles con los siguientes antibiticos: amoxicilina,
ampicilina, carbenicilina, cefalotaxina, cefalotina, cloranfenicol, fosfomicina,
gentamicina, penicilina, sulfametoxazol-trimetopim,
contra cepas de
Staphyllococcus
aureus,
Staphyllococcus
sp.(coagulasa-negativo),
Enterococcus faecalis, Escherichia coli, y Candida albicans aisladas de
productos diversos de pacientes oncolgicos.
RESULTADOS:
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1. DEL ANLISIS FITOQUMICO.

Los resultados de la determinacin de grupos de metabolitos secundarios
se muestran en los siguientes cuadros:
GRUPO QUMICO: ALCALOIDES
PRUEBA/fraccin
METANLICA
MEYER

DRAGENDORF
WAGNER
AC.SILICOTNGSTICO.

++
+
<+

ACETATO
DE ETILO
+
++
++
+

GRUPO QUMICO: FLAVONOIDES

PRUEBA/fraccin
METANLICA
SHINODA
CIDO SULFRICO
DEMROTH
CIDO BRICO
CIDO CTRICO

ACETATO
DE ETILO
<+
+
-

+
+
-

GRUPO QUMICO: GLICSIDOS

PRUEBA/fraccin
METANLICA
MOLISH
LEGAL

ACETATO
DE ETILO
-

+
+

HEXNICA
No se
determin



HEXNICA
HEXNICA
-

GRUPO QUMICO: LACTONAS SESQUITERPNICAS

PRUEBA/fraccin
METANLICA
ACETATO
HEXNICA
DE ETILO
HIDROXAMATO
LEGAL
+
BALJET
+
Cuadro # 1. Anlisis fitoqumico preliminar de Cuphea aequipetala.
Significado de las claves: - = Prueba negativa; <+ Ligeramente positiva; + Positiva;
++ Positiva en mayor concentracin.

2. DE LAS PRUEBAS DE CITOTOXICIDAD.

B.1) Solamente se apreci ligera actividad citotxica en el extracto metanlico,
sobre la lnea celular HCT-15COLADCAR. Los dems extractos no mostraron
actividad citotxica.
3. DE LA ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA.
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3.1) Las pruebas de la actividad antimicrobiana, no mostraron inhibicin

significativa del halo de crecimiento, al compararles con antibiticos de uso
comn.
CONCLUSIN Y DISCUSIN:
De este estudio preliminar multidisciplinario se puede concluir que:
La especie elabora: alcaloides, flavonoides, glicsidos y lactonas
sesquiterpnicas, con lo cual podra esperarse alguna actividad biolgica
positiva, por lo que sera conveniente repetir los ensayos nuevamente en otras
lneas celulares cancerosas, o contra otros microorganismos, o bien colectar otra
vez la planta y realizar de nuevo la investigacin con material en fresco, es decir,
con planta recin colectada, al tiempo que con planta seca, antes de concluir de
forma definitiva que su actividad biolgica fue muy escasa, y por lo tanto que su
empleo en la medicina tradicional no pudo convalidarse cientficamente en esta
ocasin.

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Villarreal, M. L. D. Alonso y G. Melesio. 1992. Citotoxic activity of some mexican
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AGRADECIMIENTOS:
Los autores reconocen el apoyo econmico para la realizacin de este
estudio a la (entonces denominada) Direccin de Estudios de Posgrado e
Investigacin del Instituto Politcnico Nacional (I.P.N.) Proyecto # 950874, y al
Instituto Mexicano del Seguro Social. As como tambin, a la Comisin de
Operacin y Fomento de Actividades Acadmicas y al Programa de Apoyo al
Desempeo Docente del I.P.N. por la beca conferida al Dr. Jos Waizel Bucay.
Se agradece la lectura crtica al manuscrito realizada por la M. en C.
Josefina Herrera Santoyo.

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