@ CASH FLOu'

TE CNICA

S INS TR IJM ENTA L ES

El,LFl=
PRUEBAS SELECTIVAS PARA EL ACCESO A PLAZAS
DE FORMACION SANITARIA ESPECIALIZADA PARAi

BtLOcOS

TECNIGAS
INSTRUll,ENTALES
TEOBA
.-

c/Mont!,20-

28006

MADRI@

[8

cas]f

FLOvv

TE CNI CAS INS TR UMEN TA L E S

TECNICAS INSTRUMEI{TALES
fvotct
TEtr.A

t.

coNcf,pros Bsrcos. t[arERrAL

l. coNcEpros
t.l.

DE LABoRATORIo.

BLsrcos,

Reacciones de neutratiTacin fcido

L2. Reacciones de precjpircin

base)

i.3. Disoluciones
1.4. Unjdades del SL Mtriptos y fracciones

2. MATERIAL DE LABORATORIO
2.1. Votumen
2.2. Mt:a

TEI\A

2.

TcNIcAs EsPEcTRoscPIcAs.

r.

CONCEPTOS BSICOS

Ll. Naualeza de d eerqfa radianre

I.2. Ctasillcain de as r-cnicas opr;cas

1.j. Espectro eledromagnrico

Tipos de interaccin entre la materia y

la eerga
*_-l
^ ESPECTROSCOPIA
2ULTRAVIOLETA.VISIBLE

3, TURBIDIMETRIA Y NETELoMETRiA
4. ESpEcrRoscopLA s,{esoncr irM.

;. FiiEEIlBSFBiil
TEMA

3.

iiiioxo,

erRiA

E L LA MA

CENTRI},UGAcIN. CRoIttAToGRAf A
Y ELEcTRoFoREsIs.

2,
'.

3.
T[M.A

B: f il;,gSi;f,ii

,F

CENTRIFUGACIN
ELECTROFORESIS

cRoMATocRA,FfA

,t. MlcRoscopro. pRxpARAcrN DEL

MATERTAL pAxA MrcRoBroLocA.
t. MICROSCOPTO
t.l.

_
2.

Descripcjn

1.2. Tipos de nicroscopios

pRrpARAcN Drl-,raremer pn
r MtcRoBIoLociA
.2.1.
Concepros generales

2_2.

TEITA

5.

Mtodos de esrerilizacin

TCNrcAS DE lISUALIZACIN DE
MICROORGA.]\ISMOS EN MICROSCOPL{
1,

cLAsrFIcAcIN
VISUALTZACIN "rN vIVo"
2.L Consideraciones eeeraies

2.2. Examen en Feso

2.3. Cota pendient
2.4- Colomcin vitai
2.5. ExameD e esco ngarivo

c/ Montesa, 20 - 28006

lrn%

EO

CASH FLOvl'
3.

T CNI CAS

IN S TR UMEN TA LES

TINCIONESBACTERIANAS
3 1. Geneniidades
3.2. Tincin simple
3 3. Tinciones compuestas

4.
TEMA

6.

0
o

Tincionesdiferenciales
Tincionesesucturales

DIAGh*STICO PARASICOLGICO

MEDIOS DE CLTIVO. PRUEBAS BIOQMICAS DE IDEMIFICACIN

BACTERIANA. ANTIBIOGRAMA.

I.
2,
3.

MEDIOS DE CULTIVO

l.l.
l.2

Composicin
TiPos

I.3

Conservacin y manteniniento

PRUEBAS

BloQufl.tlc,ls

r mPltrIcAcIN

BACTERIANA

ANTIBIOGRAMAS

TEItrl 7. MARcAJI RADIAcrIvo. MToDos ELEcTRoQUMIcos.

I. MARCAJE RADTCACTIVO
l.l

2.

. Tipos de desintegraciones
1.2. Citica de la desintegracin de los istopos rdiactivos
edida de la radiacit

MToDosELEcrRoQUMIcos
2.1. Potencioetr;a
2.2. Coulolrlbietria

TEMA

8.

TCNICAS ']!tNoLGICAS.

l,

2,

INTRoDUccIN. cLAsfFIcAclN DE LAs rcNlcAs INMUNoLclcAs.

PRUEBAS DE PRECIPlrAcrN EN GEL

. FUNDAMENTOS
. TIPOS Y APLICACIONES: IDD, IE, CIE.
3. PRUEBAS DE AGLUTINACIN
. FUNDAMENTOS.ASPECTOSPR,{CTICOS.
. TIPOS
. TCNICAS
.

AGLUTTNACIN Dm.EcrA

. HEMoAcLU rrNAclN (HA,

.

AcLLnrNAclN

EN

Lmx (LA)

. TNHIBICIN DE LA AGLUTTNACIN (tHA)

. coNGLUTrNActN (coA)

4. TcMcAs coN REAcrIvos rtaRcADos

.
.
.

'

.
.
.

ENZIMOSIMUOANALISIS (EIA)
INMTINOFLUORESCENCIA

RADIONMTTNOANALISIS(RlA)

LABORATORIO CLNICO. PRINCIPIOS GENERALES. Ed. InteTamET|CANA. MCGTSW-H|I.

r,,tsoR]:onlo cLfNICO. MICROBIOLOGfA.

Ed. InGramericana. McGraw-Hill.

FtiNDAMENTos Y TCNICAS DE ANLISIS BIoQUiMtco. Ed. Donostiarra.

TcNIcAs TNSTRUMENTALES DE ANLISrS EN BIoQUiMICA. Ed. sntesis

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[Q GASH FLOvv

cNt cz s tNs rnuae Nra t e s

TE{A I

l.

coNcEpros Bslcos.

l.l.

Reacciones de netralizsci (cido

base)

. Definicin
Acido
Medio acuoso
Cualquierrnedio

Frerza de cidos y bases

Cons

fld. bsica,o.neuFa dependjendo de tas propredades

crdo - base de los iones que fornan
la sai.

jdealnos el equilibrio:

AH + H?O ) A'+ H3O*

AB

AplicaDdo la L.A.M y en medio acuos

IA

i!:-.-.-

A.+

B+

A-+ H?O <+ AH + OHB+ +

l.tHro-l

H,O <+ BOH + H*

Si

IAH]

Laez

det cjdo rbase) ser mayor cusnro

msyor sea

Los, v_alores de las- consranres esrn

rabulados
pueden expresar en tuncin
de) grado de

A'es

B*,es cido tuerte: disoluciD cida (Khj

K")

basica

. Ionizacir del agua

:,*

tuefej disotucin blica (Kr,: K K.)

K/

. A y B'_f.-nes: disotcin tige,amenre crda o

se

disociacion.

arfrero, et agua puede acruar

?:O*:aodo o cacrer
c-omo
base. para una disolucin d;
aEUa pura y
aprrcado Ia L.A.M se cumple que.

bas

lK: Kw/ K,.KJ

y B' dbiles: no se produce hjdrolisE

. Dsoluciones rguladoras
der ion comn. sesun

l,-::o:'*y.:

er
:l..fecto
Lxa' uD erecIIotjlo dbit
se drsocia menos en presencia
de oFo electoljto fuee que renga
u ion con con

tSiendo Kw et producro injco del

agua.

Definimos. pH como el )ogaritrno

nesarivo de Ia
concentracin de ororones y e9
ieu"al a '7 eD
orsolucones neutras lpH+ pOH:
t4).

Constantes de hidrlisis

il.llooY* ruy

pequea vaiacin det

aorcron de un cido o bas

Considemmos:

AH <+ A-+ H*

La disolucin de una sal e medio acuoso

puede

c rlonru"a,:o _:sooe

Las.disoluciones con alla concenE-cin

de acrdoba.e
a-eDI yju,ra de sus sales se ltaman
reguladora,. ya que

lr%

ser

AB

--+

A'+ Bt

pH por

CASH FLOr,v

IN S TRAM E N TALES

T CNI CAS

. Solubilidd

Se cumple:

Si considramos el equilibrio ante or la solubilidad de

fsall.frl

[Sal]

PlrrPlq+log-

[Acido]

lAcidol

aumenta en
solubilidad de comPestos inicos amenta
disolvcntes que en8an una consiante dielctrica ) una
polaridad de enlace altas ya que se ven fvorecidos los

La

Cpr.dd d. ttnponmi.nlo: pHFPKt I

Mirl.p!cidad d. rmPonninto: PH = pK

fenmnos de solvatacin.

La solubilidad de
1.2. Recciotes de PreciPitacin
Se basan en la

formacin dc compuestos insolubles.

Dcfrnimos:

. Prodcto

Slido en liquido: aumeta con la temPeratum

2.

Gas en llquido: disminuye con la temperatura. A

tempsatu constanto se cumPle la ley de Henry

de solubilidad (P,)

S : K. P.,

K : f(f)

Dada a sustancia Poco solublc, 4.8", cya pafe

disuelta esl disocida seg el quilibrio

3.

Llquido n llquido:

es

variable cor la tempatura.

A,B"+)mA*+nB'*
se defn P"=

[A"-]'.[B'l'=

1.3. Dlsoluciones

Cle

Defnimos disolucin como ua mezcla homognea

Depende dci

monofsica, de varios componentes (binarias, temarias,

etc).

l. La temperfrra
2. EI pH
3. Fenmenos de alsorcin
4. El cfeclo dsl ion comn (fvorcc la pecipitaciD)
5. El efe.to salino (efecto de iones no comunes que
dif cltan

si el

la

Distinguimos:

l.

Disolvente: compoDe1 en mayor Proporcin

2, Soluto: componente

Fecipitcin)

produclo de las concenFacioDes de los iones

en

meno poPorcin

Undades de concentracin

formados cs

La concentracin de una disolucin viene

. > P.: la sustancia precipita
. < P,: la sustancia se disuelve
. - P,: la disolucin est saturada

expresad

como el (peso/volumen) d soluto que existe en iert

caridad (peso^olumen) dc disolvenle o disolucin.
de Ia susrancia

l.

% (p/p): gramos de soluto po 100 granlos de disolucin

2. Fraccitr molar (X): moles del componente i pomoles totales (r/q)

Pued exprelarsc en %.

Mas - Masa

3. Molalidd (m): nolcs d soluto por kilogramo de disolvente.

l. Molaridd O0:

moles de soho por liao de disolucin.

2. Nornalided (N): cquivalentes

Ms - Volumen

' gmo

de soluto por litr'o de disolucin.

3. % (p/v): gamos de soluto por 100 ml de disolucin.

N" DE MOLES: GRAMOS

/PM

EQUIVALENTE GRAMO: PM / VALENCIA

N" DE EQUWALENTES- GRAMO: CRAMOS /PESO EQUIVALENTE- GRAMO

C/ Montesa, 20

28006

MADRID-Tfno: 9r

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 caslt

FLOW

TE CNI CAS

L^rh"olaridad.de una-disoucin de H:SO

a 9E% y

dnsidd I,84 g/mt

tpM: 98,

es:

Slporemos.una composicin cenlelimaj

tp p) del98oo,
decr. en tos 100 gramos rotes de olsoiulion
tray eA

1.4. Unidads det SI. Mriltiptos y faccones

Uoidades del SI

es

Para_

reacionar masa con volurnrn uriizmos

ta

densidad de la disolucin.

d: 1,84 g/nl = 1.840 g/l

si
100 g disolucin

-+ 98 g HrSO puro

l-840 g disolucin

)X=1.803gd,,"

-r x

1.803/98

IN S TR UMEN TAL ES

. Longitud: metro (m)

. Masa: gao (g)
. Tiempoi segundo (s)
. Corriente elcfica: amperio (A)
. Temperarura temodinm;ca: kejvin (K)
. Canridad de susrnciaj mol (M)
. Volumen: Iiro (t)
. Fuerz: newton (N)
. Energia: julio (J)
. Potenciai vatio (W)
. Plesin: Pascal (pa)
. Carga elctjcaj cutornbio (C)
. Porenciaeldrjco: vohio (V)
. Resistencia elcnica: ohnnio (S)
. Frecuencia: hertzio (Hz)

I
Cles su normatidad?

deci(d)r I0'r
centi (c): I O',

Aplicamos: N=M.vatencia

tdli

(m):

l0:

nlcro ():
nano (n):

N=18.2=36onat

pico (p): l0-r1

femto (f): I0-'5
ano (a): l0-r'

. Propiedades cotigativas
Son lropiedades que dependen slo
de nmero de
parrrcutas de sotuto.

I.

D-e(cn!o de

ta presin de \apor: cuando

se

aade un soluro no volLi a u disolvente

puro se
ooseva.que ta presin de vpor de
I disolucin
oesctende con respecto al disolvente
Drn

1"T."Tlo det pnro de ebulc;r:'el puto oe

eDUljcrn
de una disolucicjn uum.ntu .on

respeclo

3.

a_l

t0-6

I0''

del disolvente puo.

Mltiplos
deca (da): t0
hecto (h): t0:

kio (k):
mega

l0l

(M):

giga (G):

106

I0'

tta (T): 10!?

peta (P): tO'5

exa @): t0rB

Descenso del punfo de congelacin:

et punlo de
congetacron de na d'sotDcin
rspecto ai del disolvenre puro.

4. Presin osnrica:

suponemos

"r..no. .on

Factoes de

ua

disotucin

5eparada del disolvente puro por

un hembrana
sernrpermeabte. Cuado se alcan?

el equilibrio
ua diferencia de presidr enre la
lfar.ec:.
o'sotucrn y el disoJvenre. La presin
osmrjca
(l I) es el exceqo de presin que
evila la difurin
oet dtsolvenle hacia la disolucin debido
a ta

orrerencra de porenciales quimicos

C/ Montsa,20
-28006

MA%

conveiiii

. i at:ni 1.01325x tor N/m,

. I torr: l/760 atn
. I dina: 10 JN
. I erg: i0_7 J
. t D: 10-r0m
. I litoi 1000 cm.: i dl:r

 casH
2.

TCN ICAS fNS TRUMENTALES

FLOrt

}ATERIAL DE LABORATORIO

2.1, Voluman
Et material de labolatorio debc cpli tscs floioles
bsios: coDtaDcin, modicitr y raalizai& da
recciones.

Distilguimos:
Matc'ial aforado: Su funci pricipal cs la contncin
dc vol$ancs cractol.
Matrial graduadoi Su funci pinciPal cs la medici

d. lfqidos.

cpllrldd

Fanclro3 dc

El llquido oja

0<90"
e>90.

Cncavo

Convxo

ls

Cr'cfditlcs

A$lo (0)

Menbco

El llquido

Do

boja

mateialcs ms utddos son:

Vrso!

2,

Matacas fordos: coticnc vohldes cxa-ios dc

llquidos. L! cipacidad.sts indicada con cit'as

d prccipitacin

3. Bcts: s!

usan para disP3Dsar volBccs dc

llquidos. Muy utilizdas rD valoracioncs.

4.

Probetas:

sc usan pam mcli volin.cs

llquidos. No

5.

sc ca"ctcriz

dc

por su alta exactitu

Pipets: puedcn scr

5.1. dc djo: n l

pat supcrior

sc

indica

. La cPacidd
. I form de disprnsa cl volumcn
5.2. atomticas: dispcnsn volrlrDces exacto
de

6.

fquido.

Embudos: pucden scr do ltrado o decatacin

2.2.

Mt ,

Ls modida dc Ia mas cn c labotoio so caliz con

ls bala.as. ED fuoin dc los llrnites op.rativos
puedc! saf:

l. Dc p.isin (0.001 I -2 g)
2. Anlitica (0.01 mg - 1 ng)
3.

Micloballnzs (0.1 ug " l0 us)

TcA,IcAs INSTNUMEA,TATES QETI,A ] )

C/

Monts,20 - 28006 MADRID - Tfno: 91309

36

46- www.cshfloi{-oposiciones.com

E[ CASH FLOW

TECNICAS INS TR UMENTA

TEMA

ES

TcNIcAs EsPEcTRoscPIcAs
1. CONCEPTOS BSTCOS

La

es el

conjunro de fcnjcas
instrumentales basadas en lo! fenmenos de
inte.accjn de la energia con la matia Estos
lerenos pueden ser de absocin, transmisin,
especFoscopia

emkin o dispersin.

l.I.

pricipio de Ia duatidad onda_corDtscuto de

De .Boglie. Ia5 REM preqenran

(fenmenos

p;opiedades

ondrlatorias

de. refaccin. ieflexin y

difraccin, ) propiedades corpuscularcs (fenrnenos de
dispersin, absorcrdn y emision).

IIM

vista

oras

propiedades fisicas de Ia R.EV.

REFRACCIN: La REM cambia de di.reccin v

2. REFLEXIN: La REM incide sobre una

superficie que separa dos medios

y cambia

direccin
Tcnica: Microscopia.

su

3. DIFRACCIN| La REM incide sobre

ua
ruperficie y re propag en rodas las direccjones.
Se basa en el principio de Huygbens.

como onda se caacteiza por:

Londtud

de onda

(1): disrancia existete etre dos

puntos equivalntes n una onda.

Se expresa en unidades dc tongjtud (A).

punto de

Tecnica: ReFacrometria

La enega tadin1e se tansmire en forma de radiaci

eiectromagntica (REM).

La

ia REM desde el

varia su velocidad de propagacin cuando pas'a

de un nedio a oho. Se bara en Ia Ie) de Snell.

Nafuralza de ta energa radinte

Segn el

Considemn

onduiatorio. Miden cambios en Ia dieccin

Frecuenca

lv): Drnero de ondas que

pasan pur un

pulo dado cn la unidad de rien'

Se expresa en unidades de tlenrio (s-r o Hz).

Consideran ia REM como un fotn con una energia

asociada. MideD la rensidad de la REM a difereies
longitudes de onda. Inctuye la djspersin, ta absorcir
y la emisin.
Sern cosideradas en detalle ms adlante

1.3, Espectro electromagntico

Las RI-M rbarcan un gran campo de Fecucncias y

loDgirudes de onda que conslilulen et cspecno

1t

electrorlagtico,

.: v.tocidad d. t tuz(2,9979.10'0

cm/s)

La REM como comsculo (fotn) lleva asociada

cantjdd dc energia definida po Ia ecucn
d
Plr.k.

Las diaciones ms nergticas son las de menor

longirud de onda y ralor Aecuencia, y Is reos
energticas las de mayor loDgirud ae onaa y
menor
Los rayos I son capaces de producir en Ia rnareria
tanstormacloes nuclearec
Los rayos X producen rrasiciones elecrrnicas en
las

h: Ct. d. pnck (6,62. r 0,' .rgios.3)

capas intemas de los tomos,

1.2. Clsificcin de las tcics! plicas

Las tcnicas pricas

s.

basaD en

teraccin de ia R-EM con la tnateria

la medida de

la

Se dividen eni

c/

Montesa. 20

28006

MADRTD@

Ls radiaciones UV- Visjble pro\ ocan rransiciones

eiectrnicas eD las capas exremas de los torDo,.
En
algunos casos se puede producir la roiura de erlaces
para originar nuelos compuesros (reaccin
_

@ CASH FLCDW

T CNI CAS INS TR

(t

Longitud de otrda

ro-':
Ryost

101

l0?

RaYosx I

UMENTAL ES

lo'

106

IR

l0

r0

Radio

Microondas

Visible
Lonsitud de onda (nm)
500

400

Las radiaciones infrarojas poduce vaiacioes en

vibracin de las molculas

la

Las mioondas poducen variacions cn Ia rotacin de

Ias

molbulas.

Las ondas de radio producen variaciones en

momenios magnticos dc los tonos

(RMN).

1.4. Tipos de lnterccin ntre

enrga

materia

700

600

Anarillo

Azrl

Violet

La dispersjn de la luz (femeno ffsico de chques

lsticos) pede ser medjda de dos modos distintos
mediante turbidimctria y nefelometria.

los

Rojo

Naranj

Absorcln de la adiacin. S produc cuando ua

molcula o tomo interacciona con una REM cuya

energia es igual

a Ia

diferencja E"-

E'.

Los

electrones pasan del estado fuDdamental (E") al

estado excirado (E'J.
Distinguimos:
la

La REM, considerada como un fo, con ua enerpia

asocFo& al mreracctonal con ta marena pueoe
experirn;da varios ferrnenos.

.
.

Transnisin de Ia radiacin,

Disprsin de la radiacin. Cuando una REM

itemccioa con ura molcula y Do es capaz de
producf una t-sicin lectrnic4 la energla se
emplea en polariza la materia. Los electrones y el
Dcleo qued sujetos a fuerzas en sentiilo contaio

Absocin almica: EspecEoscopia

absorcin atmica (EAA).
Moleclar: EsDecEoscmia

de

tIv- Vi(ihl

Emisin de la radiacin. Sc produce cuando las

paficlas excitadas etoman a su estado
findamental emitiendo REM a ua determinada
longitud de onda.
Distinguimos:

Emisin atmica: Espectroscopia

de

enisin amica (EEA).

crendose dipolos no pernanentes qe aparecen

ctesaparecen i la misrni fi""u"n"i" ai
la de la REM incideDre, Ia cual es dispersada

molecula: EspectroscoPia

oaii"iifo'"
en

de

^Emrsin
tlDorescenc'a

todas ls direcciones-

El fenmeno de dispersin depeDde de:

l.

El tamao dc las padculas. La intensidad de

la luz dispersada aumenta segin lo hace el
dimero de las pafculas.

2.

La )" de la RM incideDte. La iniensidad de la

luz dispersa aumenta segn dismnuye ,.

3. La

concentracin

de paficulas. La luz

Mq!S!b: Pueden experimentar

enAc niveles elecfnicos

Fansiciones

taslacionales,

rotacjonales y vibncionales.
Espectros de absorcin (eisin) complejos.

!98$:

Pueden experimentar tans;c;ones entre

niveles elecFnicos traslacionales.
Espectros de absorciD (emisin) sencillos (lieas).

dhpcsada es diectamente propocjonal a la

C/ Montes, 20

28006

MADRID - Tfno: 91 309 36

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[8 CASH FLOW

T cNI c4S I NS TR UMEN TA L ES

E todos los casos los istrumentos de medida

componer de cico elemenlos bsicos:

se

van a

que en cada choqu se libean de 4 a 6 elecrrones

por.cada uo que ha incidido. Ms r.ipidos
y
sensibies.

L Frente d radiacin. proporc;ona REMS de forma

Ll. CONTn{tAi

5. Medidor- Regisrrador: La seal etcr.ica geneada

er-el delecror se a.plific mediante un procesador

Las fuentes conrinuas emite una

y lega
.
poporcjona

radiacjn cuya itensidad vaia slo de

forma g.adurl en funcin de Ia jongitd de onda.
Uril en espectroscopia LV- Visible.

senles

2. ESPECTROSCOPIA V- VISIBLE

RM monocrorntica.

2-1. MONOCROMADORES:

La

adiacin

Considermor una REM de intens;dad I" que

avresd
unE cubet cuadrada que contjene un
compuero que
absorbe energia a una . determinad. La

es

disp.esada por uD prisma o red de diaccin,

una

inrensidad de

l REM que sale de Ia cubeta es t. menor que

renda de slida seleccioa Ia longid de oda

Se

2.2. FILTROS: I ransmiren Ia REM co Ia

mrenlras que absorben el resto
Pueden ser de

Vidrio

cotoreado: el cotor det vidrio

deremina la . rransmjrida rdeja psar su
color y ab5orbe el corplemenrai;).

Inlerlerencia: consiee; en un malerial

dielcEico en!.e dos peliculas mrtjca(

tsansmitida.

nansparentes a Ia reejn esoecuat

en uns selal

elc-ica. que

DETECTORES DE -FOTONES:
Clulas fotoetctricas: cuando ta iuz
incide sobre
ur semiconduclor se produce
un
flujo de
_
elecroDes proporcionl

a la -ntenridl de l lur

rrcidenre.

Fotorubos: constan de un ctodo semicilindrco

y

un. odo encerados helmticamente

en u

reoprenre traspdrente al \acio.

Ej crodo tiee
una,peljcua de makrial foroemisor que,
al ser
rradrdoy bajo una diferencia ae porencial,
emire
u ]luJo de etecIloes proporcional
a la iiensidad
de la luz icidmre.

fotomulripticadores: so! sjmilares a

los fotorubos,
rielan uDos. elecFodos sdicionales,
dinodoq,
,
.
cotocados a ddp cada vez l'ls pos;riras
de manea

C/ Montesa, 20

28006

' A: Absorbancia
' s: Absortividad

molar. Caracterhtico de cada

compuero. depende de i lemperaru.
pH.

.
.
.

solvene \, ) de
REIi,{ incidente.

12

Coeficiele de eyrincjd motar si se e),pesa

lYmolchl

en

l: Paso pijco (iongirud jnrema de Ia cubera).

DESVIACIONES

es
proporcional a la intensidad de
ia radiacin emergenre.

Donde:

ser

4- Derectorj Recoge Ia radiacin que

sale de ta cubera

rnstorma

de Lambert- Beer

A =_ Iog T = .C.1

semrlxansparntes.

y i

Ll

deseadd

Cbeta: Conlienen I muesna. Han de

i..

d6ne transmiranci4 T.como el cociente

I t^

Por a

EI gosor del dielcrico determina la

3.

de

registrador

2.1. ceneralidades

2. Slctor de ,. Selecciona una

Fl

grficos de absorcin o ransmisj,

fente

en EAA.

medidor.

al tiempo o la ..

1.2. DISCONTINUA: Las fuentes disconfinuas

emiten
rdiaciones en forma de unas pocas Jineas
de
longjtud de onda definil

tit

a un

MADR%

1.

Carecia de morocromatismo de

la

REM

2.

incidet
Cambios qumicos en el sistema (asociacin,

3.

Alta concenacin de la sustancia absorbete

hidrlisis..)

Que colnpuestos absorben en ta regin Uv_visibte?

poreen
srupo cromforo, grupo
f.:::11j.1
:,: capaz un
ru-lcronar,arstado
de absorber RIM ene 200
)
!r., nm. La mJoria de los crornforos poseen

uno o
ms enlaces mhiples rt.asiciones
elecnicas desde
orotrales n o n hacia u orbilal r.).
son g,Lrpos fi.ncionares que
no aosorben porsi solos, pero cuando
esr unjdos un

l::g.-:fg',"'q.,:."s

cromororo. rjenen t cpacidad de

desDlalar ia
a-p-sorcin de re lruDo a longirudes
de ord; mayores
{etecroatocrmho). Los rrocromos son grupos

Paes de elec.one! Iibre.

con

EO

CASH FLOW

CAS I NS TRU M E N TA L E S

7' CNI

Aplicaciones: Cuatificacin de potenas sricas (lgs,

Efecto hpsocrmico: desplazamiento dc la banda

ferritina, PC& ASLO, FR..) tras su unin

de absorcin hacia longituds de onda menores.

anticuerpo especifico.

E&g!9_U!9ISgjr.q: aumento de la itensjdad

un

ESPECTROSCOPIA

4.

la banda de absorcin (aumento de )

ATOMICA IEAA

Efecto bipocrmlco: disminucin de Ia intensidad

de a banda de absocin (di$ninucin de e).

4.1. Conceptos bsicos

Una llama atoiza la mues!:, el 95-99% de los

toos rompen sus uniones qlmicas y qucdan n
estado fudametal, el l-5% se excita). Si se hace

2,2.Instrumentacin

pala por la llama un hz de energla de la misma

el

Los componntes de un especofotmeto son:

elemento

que

determinar este absorber enrgla

pasando a un estado excitado.

1.

Fuente de radiaciD:

."..... .. [ry !i,ri

' r ;r. V_igible ..i.

] .:l

4.2.Instrumentacin

Lmpara. de tungsteno

Lmpara d deuterio
Lrpaa de hidrogeno

(*) Las lnparas de arco llenas dc un gas (Xe, At,

Hg) a alla presin proporcionan un especao
disontinuo en la regin UV. Se usan para calibrar
los espectrofotmetros.

2.
3.
4.
5.

Selector de ,

Cubeta: de vidrio o plsrico.

l. u9d9_d9!digei!:
lcess.

Emiten una REM monocomtica a la ). del elmento a

Cuando se aplica n potencjal entse nodo y ctodo

dgunos tomos del gas de relleno (Ar, He) se ionizan )
chocaD contra el ctodo fomado por tomos dl
elemenlo a analizar. Estos tomos se excitan y al

etoma

Detecto
Medido-Registo

al

estado fundamental emiten REM

monocromiica a la , especifica de
2.

2.3. Aplicaciones

I.

Se ernplean lmparas de ctodo

ColorimFias (Biuet..)
Estudios de actividad enzimtica

2.
3. Estudio de profelnas

(A?sor

!!e4uklgl: Evita

ese

elemenlo.

la iterferercia debida a la llama.

3. eA: En ealidad es la llama. Se utilizan

(o jlujo lamilar) en los

qremadores de 'rpremezcla't

Tr, Trp, Phe).

Vaiacios del ;icoentoo.

4. Estudio de cjdos nucleicos (Ale). Cuvas

dc

qre

la

muestra nebulizada se atomiza antes de

querarse,
Se utiliza una llama caliente (Or /Acetileno).
Existe una variante de EAA si llama en la que la

muesta se calienta en caa de gmfito,

tusin.

4- Seiector de

3. TRBIDIMETRA Y NEFELOMETRA

5. DeEcto

Son dos modos distintos de medir el fcnmeno de ia

dispersin.

Turbidinetria: Mide la REM tsansmitida por

la

Se mide en un ngulo de 180" con especto la cubeta

con los mismo instrumentos utilizados para las medidas
de absorbancia,
Aplicacin: Detrnilacin de proteinas urinaias.

Nefelometrir Mide la REM dispersada por

ide

6. Medido v

INTERFERENCIAS EN EAA:

lterferencia ouimca: se produce cundo la

muesta no puedc ser atomida por la
existencia de enlaces qumicos con oEas
Ejonplo: En la detcrminacjn de Ca el fosfato
interfiee por Ia fornacin de complejos

la muestra-

ngulo d 90o con specto a la cubeta.

Mas precisa y exacta que la anterior.
Se

eD un

C/ Montesa,20

28006 MADRID

resisro

Tfno: 9l 309 36

estables. La inteferercia se anula afladiendo La.

wE\tr.cashnow-oposiciones com

l0

 CASH FLOW
).

T CNI'A

llerferencia por ionjcidnj se produce cuado

EI, pEn inlemo.actua ademas como lampon

de
radrac,on que rniimiza el fenorneno
de excircin

los

romos no pem)anecen en estdo

.rndamenrat sino que se excil enilied

REM a ja rnisma ). a Ia que absorben

Se evila adiendo a li llama sustacias mar
fcilnente ionizables o descendiendo ia
temperaira de la llama.

3.

Inreferencia

5.3. Aplicaciones
La EEA se utiliza paa ta delerminacin
de:

por la matriz: los

dholventes
orgnjcos pueden aumntar la absorcin
de los
tomos. Se evita tilizando disolvenres acuosos.

lnependientenrere la EAA es

I. Na (Ehite a 589 nm, amariito)

2. K(Emire

466 nm, vioterl

mtodo sensjble,

y muy erpecifico ya que l enerera

:11j:"1':"1'"
rene un paso de bnda

:11-ead?
nm)
con lo

S INS TR UME NTA LES

6. ESPECTROSCOPIA DE FLUORESCENCIA

n:uy e,trecho 1o,itr

que so absorben los romos de

irrrds.

6,1. CoDceptos bsicos

APLICACIONXS

I-a EAA se utiliza en Ia dtelminacin

olieoelemenrosj Cu. Zn Al, Pb,
Ca y
pricipalmenle.

Li

Un sisrema lumiDiscele es aquel capz de

b5orber
plljT.9:1.',1'yol ). y reernirirri a una r rnaor

uesplazmrento de srokes) cuaDdo el

eJecrn retoma
nvetes energricos inferiores
Los sistemas luminiscentes pueden ser:
r

FLUORESCENTES:
singiete" (1)

'"

5.1. Conceptos bsicos

'Jlclr,ro''e
(t)

Sigrete

La EEA
rcnica rhil en Ia dererminacidn
de
^es _r.lna
merales. tacimenre
ercitables {alcalinor. Es esla
l.c_rca ta llama actua como
fuete ae mairclOn y

Son molcutas pla!s con aillos romtjcos

o dobles

entaces conjugados,

cxDerr at mtsmo tiempo.

lL li*]de g*
prevra
ta muesb-a.

cn la EAA se requiere ra aromrzjcin

Los romos se exchan y emi(en

REM a uira . esDecifica

5.2.Instrunentacin

l. Fuenre de mdiacin: Se uriliz una

am fr.a
rare propao) excilando
ei i_50; de los lonos.
Anres de enfar en Ia llama la muesra
y aromrzada_

es

ebulizada

2. Cbeta
3. Slecto. de ,
4. Deteclor
5. Medido y regisrro

luorescencia defi;das se denomin

inrerfeenc

ja

La

intensidad.

de

fluorescencia depende de ia
concehrracin. del fluordforo y de
Ia iniensidad de ta
enereta de rdiacin. para disotuciones
djluidas donde
ra aDsorDahcia es <20% a Ia ), de
excirci. se cumple
que.ra concenEacin del fluorforo
es proporcionaial
ros (t ).

FOSFOR-ESCENTES:

-.a

tli

cr: aunque ta rram ftucre er coc;cnre

l1:ri
analo/patn itemo se matiene
constanre

U%

Triptete

mas

debida a las fluctuacjones de I lla.

rar-a^e_vrtarta se uriliza un pnn
L'rtemo
o Cs'l de

fluorforo.

E"l

La
++RIE8!NEIA!IN-EEA:
rmp-ortnre.es

CMont""a,:O-:SOOc

El coDjunro almim capaz de erlibir propiedades

Sinslete

(f)

0)

/q',,*"',

e energia a . ma)or que en Ia

ll

CA

CASH FLOW

T CNICAS

y competitivos siendo
prihero denEo de las

Ambos Drocesos soD simjlares

POLARIZACIN

DE

IN S TR UM ENTAL E S

FLUqRESCENCIA:

LOS

mucho ms Drobable el
condiciones del laboraiorio clinico Las tcDicas
esDecEofluorimtricas presenlan lna sensibilidad enEe

iIforos ubtotb.n It REM de fonna ms eficiente si

est Dolarizda (veclores elecFomagnticos en un nico
DIan;]. La REM de emisin fluorescenlc estar mas o
rncnos po)arizada dependicndo de la movtlidd del

esPecofotomtricas

fluorforo PrinciPalmente

I0 y 100 veces

superior

a las

lcnicas

Las medidas de polarizacin de fluorescenca son

tiles, ras una reaccin Ag_Ab, paa a cuantificacin
le frmacos, hornonas, etc S reqiere la

6.2. Instru mentacin

l.

Fucnte de adiacin: la fiente de xcitacin

emDleada es una lampara de arco de Xe. que
propot"ionu un esPecEo coDtinuo en el
jtervalo de l, de inters (300-550 nm).

Se utilizan

dos

monocromadores, uno paa selcccionm la

excitacin y otro Para seteccioDa la

l' dc

2. Selector de :

emisin. Et

segndo

se sita

a 90'

incorpocin de polaizadores, tras el selector de ', en

el esquma del espectofluorfmeto

T cN CAS TNSTRUMEA,TA LE S (TE I.IA 2)

de
con

respecto al Primero par minimiza los efectos

de fondo

3.

Cu!qt4: Se empleaD cubetas de cuarzo pulidas

por las 4 caras.

4.

D!tsglolr

Se sitla

90'con respecto a la fuente

de radiacin

5.

Medidotv reeiso

INIERERENCIAS EN EF:
A la hora

lc

ealizar medidas de fluorescencia debemos

lo

l.

Efecto de

2.

Fncnos de dispersjn: Poducidos Por

choques etsticos cod las molcuias de la

intemo: se poduce

en

disoluciones muy concen!-ada9 y produce na

disminucin de los fenmenos de emisin.

muesa

3.

del

disolvente: ciertos disolventes

intriseca GtOH)'
fluoresccncia
Dresenlan

Efectos

que oEos Pueden Producir

femenos de "quencbing" disminuyendo la
fluoescencia del florforo Por interacciD
mient-s
con

4.

1.

Efectos de la matriz: el suero y la ona Poseen

sustancias florescentes

que

Pueden

proporconar u fordo a las medidas.

6.3. Aplicaciones

La

esDectroscoDia

de

nuorescencia tiene mltlples

alicaiiones ooi medida de fluorescencia inlnseca o

fluorsccncia extrlnseca (Eas Ia incorpomcin de un
fluorforo).

C Mont"s",

ZO

ZoOe

MADRID

- Tfno: 91 309 36 46 -

tY'cashflow-oposiciones co

t2

r CN I CAS IN S TR AMENTAL ES

CASH FLOW
TEMA

Dentro de los mtodos de fraccionamiento'

l,2.Instrunentscin

se

disiinguen:

aleacin
Se utilizan centrifugas Contienen un rotor de
resislente

Tcnicas de transPorle:

debe coincidir con el eje de rotacin'

Distinguimos:

1.1. Cetr;tugacin

i2

Electrofoesis

Tcnicas cromatogfi cas

2.

2.

Vefienle analitical permite

el

Rotoes flotantes: Las padculas

se

aiustan a la IEY de Sverbelg

Iiorores angula'es: qdmiren !olmenes

mayores de muestra'

de
Tolos estos mtodos prcsentan dos posibilidades
aplicacin:

(Hg-Ti) El cento de gravedad de la pieza

1.3. Tipos de centrifugacin

clculo de

naramerros moleculares.

i.3.1. Centrfugecin diferencial : SeParacin

y
Venienre preparativa: permite el aidanienro
purifi cacin de Partculas

de

na.ticulas subcelulaf es.

bisolucin honrognea dc parhcLrlas

Menor resolucin

I.

CENTRIFUGACION

1.i.2. Centrifugacin n gradiente: Clculo de

parmeros moleculares.

iodas lar oaniculas panen del mismo Punto

oara disniuir'e en 1 gradienrc lineal de

1.1. Conceptos bsicos

insidad rsacarosar sesn sea el valor de S

L celitugacin es la separacion {v Purificacin) de

en

ls sustanciar por accin de un campo cenFituSo

En

condiciones

de idealidad, cuado todas

las

giro a la
Danrculs se desplazan respeclo al eje de

l.

misma \elocidad. se cumple la ecuacn de Sverberg:

Protenas: Gradiente d ClCs 0%

2. Acidos nucleicos: Gadiente de BLi 40%

RT.S
M=

D(l-

2. ELECTROFORESIS

v,p)

2.1. Conceptos bsicos

Relacion distintos parmetros moleculres

Pemte la sepaacin de particulas Por acci de un

camDo elctrico.

. M=Pesomolecular
. S: Coeficiente de sedimentacin.

parmetro qLre

rige

el

com;ofmiento de ua molcLla en el seno de un

carn;o elecEico es ls movilidad electroforlica tU):

Es la velocidad de sedimentacin por

ujdad de carnPo centrlfugo
Se expresa en Svedberg (S) l1S= 10-

.
,
.
.
.

El

U= f(Carga/Tamao)

D = Coeliciente de ditusin
V = Volumen especifico Pacial
p = Densidad del disolvente
R = Constante de los gases
T = Tempeatra

La carga de Ia partlcula es, a su vez, funcin

dl

disolvente y del pH medio. En el caso de rabajar con

poteinas U depende tambin de Ia iemperara
(desnaturalizacin).

9l

30q

f 4 - swr{ cashnow-oposiciones

com

13

M GASH FLOW

r C NICAS INS I:R UM EN TA L ES

realizacin de la EF viene deteminado Por Ios
marcadores (molculas pequeas coloreadas que
presentan ]lna U mima)

2.2. Tipos d lectroforesis

EF libre: sujeta a una dirsin muy gande, no es

buen maodo de sepamcin, adems reviert

'

cuaDdo cesa l campo elctrico.

4.

Tincin. fiiacin v desteido:

EF en zona: utiliza un sopofe para disminui el

fenmeno de difrsin. Los sopoles s usados

TINCIN:

Geles de alnidn y d agrosa, papel y acetato

de celulosa.
Geles de poliacrilamida.

EF e soportes tipo

Azul de metileno
Bomro de etidio

desteido- Para proteinas Puede utilizarse cido

movilidad de las molculas sobre el sopofc.

Aumenta la difusin de las bandas y por lo tato
disminye la resolucin. Ogos factores que

AN

tricloroactico (TCA).

aumentar la difusin sonl

el

DESTEIDO: Se realiza lavando

la

Negro amido

FUACIN: Evila la ditusin de las bandas en el

Como el sopofe presenta grupos ionizables, se cea un

flujo eleclroendosmtico del tampn que se opone a

contribuyen

Protenas

sopone

sucesivamente en H?O/ACH o Hro/Ciclohexno.

5.

Cuantificcin de las bandas.

EF en geles de poliacrilamida (PAGE)

La dilucin del tampn

2. MuesFas muy concntradas

3. Auen1o de ia temperatura
4. Tiempo de EF prolongado

Presenta ua diferencia tundamntal con respecto a la

EF en otios soPorts:

Cractersticas perticulares de

los soportes

tipo

U= f(cargs/tnao,

Tmalo de poro

dl gel)

Resuka til paa separar entre s cidos nucleicos.

Tamao de poro
grnde.

Permite
aplicaciones de

pueden
tansparent
Se

Composicin del qel:

por

Utiles en la
separaci de

Acrilamida

deshidratacion
lo qu permite
cuantificar las
badas por

AN.

Biscilarnida
Tmpn d EF

La

dureza del gel es funcin del

la stabiiidad mecnica)

(poporciona

% de

Bisa

suele

ser

El pocedimjento paa realizar la EF es:

1.

El reticulado del gel es tuncin del % d acrilamida

total (5-30%), de tal foma que a mayor poporcin de

Prepaacin del soporte:

Geles almidn,

rgtrosa

Grosor dc poro
controlado.
S esrabilidad
Grosor de poro no

Papel, acetato de celulosa

Con esiabilidad

acrilamida total, mayor

es

el reticulado del gl y meno

el tamao de porc.

Propiedades del eell

I.

2.
3.

Tamao de porc controlable

Estable trmica y mecnjcamente

sin

Prcsenta una est ctura hidrolica

ionizabl$, lo

grupos

que no oigina

flujo

electroendosmtico

2.

Aplicacin de la muestra

l.

Realizacin de la EF: Se proporciona una

itensidad d coniente constate. El tiempo de

C/ Montesa,20

2800 MADRID

-Tfno: 9l

4. Es FaDspaente lo que pmite densitometrados

5. Presenta un efecto concentrante, lo qle permit

aplicaciones muy finas

d mestra

aumentando

enormemete la resoltrcin de la tcnica.

309 36 46

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)4

 CASH FLOvt'

7-

CN ICAS IN STR TI E N TA L ES

PAGE en presencia de SDS:

l. La longitud del sistema

2. El gradiente de PH emPleado

deLergente que
E1 SDS tDodecilsuliaLo sdicol es un
presenta Ias sigurentes cafacter{stic!:

siendo

Desaturaliza protenas, proporcionando

1.

mismas igual forma.

Presgnia carga negativa

2.
3.

las

la

a u

efecto

focalizate.

El

pH lo

gdiente d

proporcionan

los

nfolitos

poradores:

Una olc-ula de SDS se rme

cada

.
.
.

aminocidos, proporcionando a todas las protelnas

misma carga.

.la

Poliamidas de cidos carboxilicos

Anrpli$d delg'adienle (2-12)

Cradiente

t 1

estable frenle

al

cn"po

elctrico

cDando se realiza una PAGE en presencia de SDS:

U=

ditusin nlnima dbido

(PM proteina)

3.

CROMATOGRAFiA

separacin de molculas en base a su

(FMrv
diferente disFibucin en do'lse': fase molil

Permile

ta

TCMCAS ELECTROFORTICAS:
ELECTROENFOQUE

fase estacionaria (FE)

El electroenfoque es la separacin de molculas en

3.1, Tipos de croatograna

funcin de su punto isoelctr;co Esta sePacron se

lleva a cabo n un sadiente lineal v conrinuo de pH
baio la accidn de un campo elcFico (las rolculs se
de;plazan en el gradienre de pH hasla que pH = pf)
La;esolucin de la tcnica depeDde de:

Segn

la

naturalza

'.:i :Fs,e d.yil'

.,tia eslscionart ::,i

de la fase estacioaria

Ia

cromatogafia puede ser:

,':

li.rilTcric cromatogrIiP
Clsic

Slido

Llquido

Adsorcin

Gas

lntercambio inico

Afinidad
Gas-Slido
Clsica

Llquido

Liquido

Reparto

Papel

capa fu1a

Gas'Liquido

Este tipo de comatograffa se utiliza para separar

compuestos poco polares (hidrocarburos. comPuesios
orp,nicos monofuncionales de ga numero de 'omos

CROMATOGRAFA DE ADSORCIN
Se basa en

un fenmeno de suDerficie: Adsorcin'

La FE slida se denomina adsorbente. Cancterlsticas:

l. Debe se itsoluble en la FM usada

2- No debe interaccionar qulmicamente con

de cabono).

l.iFilt*41"-q:,i,":'l : :'r:
las

lrtmia. Magesia

3.

Est fomado Por partjculas

Pequeas que

aumenlan la superficie de adsorcin

4.

En s mayora deben ser activados con calor paa

eiiminar el agua retenida

Esteroides, Alcaloides,
Estees.

sustancias a scPa:lr

Silicagel

Eferoides. Vitamias.

Fosfato clcico

Enzimas,

Proteinasr

Polinucletidos.

clorofila, xalofila.

L FM (liquido o gas) suele ser un componette de la

serie eloutrpica (clasificados segLm su polidad)

l5

"'*.,,:o_zooer"rDRID_Tfno:cl3093646_$$'w.cashfIo\+.opolciones'corn

@ CASH FL(,W

r CN I CAS I N S TRUM EN TAL E S

CROMATOGRT{FiA DE REPARTO

Distancia recorida por la sustancia

La FM (por defiricin apolr) v la FE tpor denicin

Dolar) sn fases parcialmente l,.niscibles. donde I

Distancia recorida Por el disolvent

.o.t.ncia a

seprar se

coeficiente de

solubiiiz de acuerdo a

su

r;pafo (K):
Solubilidad en fase I
Solubilidad en fase 2

Sepaacin e

Separac jn e identifi cacin

identificacin de

de aminocidos.

azcres,

Siticagel sobe placa de

K= D.pendient. d. l tem Pertur. C.rcterlstico

.,d sustnci.

vidrio

de

Wlatnan-

2.
3
4.

Debe ser inee con respecto

a la

(celulosa)
Reveladores:

S. requiere un soPoe slido quc sopota Ia pelicula

liquida de laFE. El soporte:

suslancia

Aminocidosr Ninhidrina

Reveladoes:

Lpidos:
Aalcaes: Ftalato
de p-anisidina
Aminocidos:

separar
Debe absorber y rtenr la F
Debe ser estable mecnicanente sin perjudicar el
fluio de la FN'l
Pu;de ser de varios tipos (papel, silicagel..,

Ninhidrina

cereales: Vapor de l?,

Rodamina
Espclcos:
.

PL: Reactivo de Dittmer

. CtLECh: Cl3Fe/AcH-

HrSOl

La FM (llquido o gas) suele ser u componente de la

serie mixotrpic (clzsifioados segn su capacidad para
fomar puentes de hidgeno)
Este tipo de cromatogtafia se utila paa la seParacin
de compuestos muy Polares (aminocidos, nucletidos'
hidratos de cabono).

Ms sensible y con n
desarollo ms rpido

3.3. Clssificacin de las tcnicas cromatogrficas

n base al fenmeno que hace Posible la
sepsrcin de Partculas

3,2. Tcnicas cromatogrfi cs

CROMATQCRAFiA

CROMATOGRAFIA EN COLUMNA:

PUEdE SET d

reoano o adsorcin.

Ei desarollo dc la cromarografia es desceDdenle

{la

FM desciende por capilaridady gavedad).

CROMATOGRAiA EN PAPEL Y EN CAPA FTNA:
Es una cromato$afia de repafo llquido_ liquido donde
la FE es retenida sobre el soPofe por un fenmeno de
absorcin.

El desarrollo de la comatograffa
(la FM ascjede por capilaridad).

zue)e ser ascendente

Puede ser mono o bidimensional (mayor resolucin).

Cada sustacia es identificada Por:

l.
2.

DE

PENETRABILIDAD

(EXCLUSION)
Es ua cromatogaa de reParto en columa, donde:

.
.
.

FM: Tmpn acloso (Tis 0 05 M)

FE: El tampn ocluido en el interior del sopote
soporte: Esl constituido por Pollmeros orgnico.
de alto peso molecula (Dextranos, Poliacrilamida)

Las molculas se separn en funcin de su

Bqlqebllidd en el sopore. Las n'olculas de mayor
tamao y fona ms asimEica eluyen antes, mjentras
que las de meio tamaflo y forma ms cimtrica
peDetran en el soPofe y eluyen ms tarde,

La penetrabitidad de ua Partlcula puede cuantificarse

mediate el coeficieie d distribcin (KD).

El Lso de reveladorcs especificos

La velocjdad relativa de flujo con esPecto al

&ente de la FM, Rr, caracteristica paa cada

KD=

sustanci en un sistema dado

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46

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l6

M CASH FL('W

TECNI CAS

. v. : y.sbEgD-d9-.eLuci9. voluen

Vo : Voluhen de exclusin. Volumen al que eluye

Su apliccion tundamenlal es

una molcula de penetrabilidad nula (Azul de

plrifi cacin

dextrano).

UME N TALES

de superflcie y la eiucjn se realiza con un iampn de

disita fuerza inica y/o pH a los de la FM.

al que eluye

una molcula que penetra en el gel.

L\TS TR

Vr : Volumen total de la columa. Volumen al que

eluye una molcula de penetabilidad nrxima

la

sepalacin y

de poteinas nusculares.

CRON4ATOGRAFA DE AFINIDAD

(Fericianuro potasico).
Aplicaciones:

Gomatograffa d adsorcin que se realiza en coluna.

S utiliza pam l faccionamiento de biomolculas en
bas a aDidades fnncionales, eshecbanente ligadas a

Clculo aproximado de pesos molecularcs

afinidades esfucturales.

Desalados y cambios de tampn

. FM: Tampn acuoso o disolvents ogicos.

. FE: Puede ser

2.
3.

Primers etapas de los procesos de aislamjento y

p rificacin.

l.

Intercambiador

inico

(Fosfocelulosa-

Aldolasa)

CROMATOGRAFiA DE INTERCAMBIO INICO

2.

Es una cromatogafia de adsorcin en colurna, se basa

en a ah'accin electrosttica enfe iones de

carga
oprcsta, uno de os cuals es un electsolito (parricula a
separar) y e) otro un pollmero ognico de alto peso
rDolecula,

Sopone de panetrabilidad activado (Sephaosa

+ BrCN)

Las rnolculas pueden ser retenidas en la FE de

acuerdo co diversos tipos de interaccionesi

.
.
.

. FM: Tampn de elucin (Fosfato sdico 0.1 M)

. FE: Resina o iltercambiador. Prcsenta un
reticulado pqueo pam evita fenmenos de

Afinidad (Enzima-Sustato)
Hidrofbicas
Covalentes

penetrabilidad. Puede se:

E, mtodo de elucin depende del ripo de interaccin y

r Alonlco (DIlAt- {:ehrl.ql

Ia naturaleza de la

CatinicoPotiestircnosuionado)

Mtodos generales: Vadaciones de pH y/o furza

inica, agentes desnaturlizantes.

2.

Mtodosparticllares:

La elucjn d la rnuesta puede rclizarse en gadientc

(de pH o tuera inica) o d form isocrtica.

Apljcaciones:

l.
2.
3.

Critrio de pureza negarivo

Ultimas etapas en los procesos de aislamjento
purificacin
Alisis de amiocidos

paticula a separar:

Afinidad: Adicin de un segundo ligando

que tenga mayor afinidad por la molcuia a

Covalentesi Adicin de agetes reducrores.

CROMATOCRAFIA DE ADSORCIN
Se

.
.

realiza en coiumna:

FM: Tampn acuoso

FE: Adsorbente (Hidoxiapatita o gel de iosfato

En HPLC la FM y Ia mezcla a sepa se intoducn en

Ia colunna a una presin superjo a la atnosfrica.

clcjco)

En oda! las tcnicas cromatogficas descritas hasra

ahora un aumento dc nujo de la FM supon una mayor
resolucin, perc esle riene un Imitei la estabilidad
meoinica del soporte y d la columa.

separacin de las molcula. se basa

fenrnenos

C/ Montsa,20 -28006 MADRID

-Tfno:

Distinguimos:

91 309 36

46- www.crsbflow-oposiciones.con

17

G CASH FLOW

r CNICAS IN S TR UME N TA L ES

r,:l* Fndito .i.{,r, 1}' ii:.,,lii;i.:1.;;..:-.;; Eienpo

Polimeros

Tamao
Fenmeno de superflcie

Filtracin
Adsocin

Compuestos solubles

r:

en

solventes

orurnicos

Nomal

FE: Silica co

gruPos aninicos o

catinicos, Pola,

FM: Apolar

Polaidad

Fases unidas

2.

Fase reversa

FE: Sllica con alquilsilanos. Apolar

FM: Pola (agua y metanol)

3.

variable, alta precisin de iyeccin, caPacidad de

componentes de n sistema HPLC:

auromaizacion

solventes v sistemas de bombco: La eleccin de la

FM dcperde dcl tipo de sepamcin a desarrolla.

'
.

en

mezclados

eradiente: Varios solventes

distintas proporciones en

en

funcin del tiernpo.

Ls csmcteristicas de un solvente para HPLC

iDcluyei

l.

l.

a.

QqtlDe: Sucle ser d diensiones reducidas y

acero inoxidable. Prcscnta un gran nmero de
platos tecos lo que amen1a su resolucin.

Imiscibilidad con la FE

Ausencia

de

alt resirencia qulmica y

tc.).

Alta pueza

2.

Precolumnas: Se sit enae el inyector y la

columna. Constituidas por la misrna FE que la
coiurnrta priDcipal (o natualeza similar en cuanto
a slectividad) realizzn una Purificacin previa de
la muesta- En la mayora de los casos la muestra
requie.e una prepdacjn previa (extraccin con
solventes orgnicos, Precipitacin de protnas,

3.

Elucin isocitica: Un solo solvente o mezcla

dc tarios en delcnninadas proporciones

Elucin

lntercambio inico: FE y FM polares

reactividad hacia los

adsorbenies

4.
5.

Bajo puto de ebullicin y viscosidad

Capacidad tarDponante constante en un

6.

rango de pH (2-7)
Traspalencia ptica a la longitud de ond
de trabajo

5.

Delector: Puede ser

!ry:llsbb:

fluorescencia. Requiere la "derivatizacin" do

ptesenten
aquellos complestos que
fluorescencia intrinseca.
Electrooumicos: La mus_a es oxidada o

Mcdida de absorbancia.

D E<DctrofluoimeFicos: Medid

de

no

Todos los soventes deben ser plrificados (ltIaciq

destilacin) y desgasicados a baj prcsi (vacio,
calentamicnto, agitador magntico, vibmcin
ulaasnic4 burbujeo de He).
El sisrcma de bombeo en H?LC debe presenlar:

reducida en la superficic de u$ electrodo

Pote$cial constaDte. Anlisis de

catecolamilas, cidos gnLsos Y
prostagtandins (las deivat"cin con
gnrPos elecBoactivot.

l.

Compatibilidad con anplia gama

Ll Bgtaslels8ipo!: Medida de los cambios en

et iDdice de reftaccin de la fase mvil.

de

solveDtes

2. Mnima pulsacin
3. AIta precisin y exactitud en la razn
4.

2.

Anlisis de acaes
de

flujo y proporcin de cada solveDte

Amplio rargo de flujos y tiempo minio

Cndo se emplea IIPLC como tcnica cuartitativa, es

necesaio utilizar patones fente a los cuales se hacen

d estabilizacin del mismo

las medidas.

S!g9sa5--d9--?l!!!js-C9--4!9!Er: Iyectores

l.

que consisten en un lazo (loop) me!lico de

pequeo volumen, baja presin de crga, tanao

c/ Montes3-

20

-2800 MADRID

Tfno: 9l 309 36

PFn extemo: Se jyectan en el sistema mezclas

de las sustancias separar de concentracin
clibrado (Ap."=
conocida. Recta

46

de

rvww.cashflow-oposiciooes

com

t8

 caslf FLow

TECNICAS INS TR UMEN TAL ES

cromatgrafo de gases:

(Concentracir)).

2. lAfiij!&Eg:

Se aade a la muestsa problema una

sulancia simila en una cocenFacin conocida. El

patrn es somelido a as mismas operaciones que el

problema.

compaacin de las reas de los picos

corespondientes a los diferentes compuestos.

de

pesin:
Fuente de qas con resulador
Proporciona !n flujo constante de gas portador, El
tipo d FM depende d la naturaleza del detector
emPleado.

2. Sj$!eeja!@!!!d!l!Lla_!0!e!qe:

Sisterna

automatizado que volatiliza la muestra antes de su

enb:da en la colunna, En algunos casos es
necesaria ia tansformacin de los componenes a
sepaa en derivados voltiles (itrametilsilaos)
pa Foder separlos mediante esta tcnica,

CROMATOGRAFA GAS-LOUIDO
Es una cromatogafia de repafo donde

FM: Gas inerte o gas portador (H, Nr, Ar).

Transpota las molclas de la muesta a travs de

Ia columa cromatognfi ca.
FE: Lquido no voltil embebido en un soporle
slido.

3.

Columa: Es de vidrjo o de acero ioxidable.

Contiee un sopofe slido inerte (tierra de
diaromeas sializada).

4-

Los components de Ia muestra vaporizados se repafe

entre la fase mvil y la fase estacionaria de acuerdo a
su pesin de vapor. Un compuesto co alta presin de
vapor permanece mayoritaianente en la fase gaseosa
eluyendo mas rpjdamente.
Se cunpl que:

Deleclor: Puedc ser

De conduclividad trmica: Se basa en ]os

cambios de conductividad tnica del gas
pofador (H) al pasar por el detector cada
componente que se ha separado en la

De captura electrnica: Detecta

compuestos

con afiidad electrnica. Suele emplearse para

Ko:

D
. q:

Tiepo de etencin. Es el tiempo que

transcue desde la inyccin de Ia muestsa y la

salida d la sustancia a detemina, Caracteristico

de cada compuesto.
th: Tiemlo moerto. Es el tiempo que iranscurre
desde la inyeccin de l muestra y la salida de una
sustancia que no se retiene en absoluto.

Irstrumentacin

Para gste tipo

de

comatogafia

se utiliza

determia derivados halogenados. El gas

es una mezcla de N2 -Ar.
De ionizaci a la llama: Es el ms utilizado.
El gas pofador (N2 o He) y los componentes
de la muestra ya separdos se ionizan en una
llama" los electrones son recogidos eD unos
colectores de forma que el flujo de corriente
es proporcional a la cantidd de mestra
pofador

quemada,

En el laboratorio clinico la CG se emplea en el anlisis

de metabolitos esteroideos, drogas, cidos grasos, en
sangre y orina.

l.

Eficacia: La eficacia de na columna aumenta con el nmero de platos terjcos (segmento microscpico
de la colura en el que se supone que existc un eqriiibjo perfecto del soluto enrre la FM y Ia FE) y
disminuye con la altura de los mismos.

2.
3,

Coeficient de reparto (Fctor de capcdad)

:f.

Selectividad: Se mide por la retencin relativa propjedad fennodinmica del sistema que depende de la
ntualeza de las fases y solutos y de la temperara, Un sistema es tanto ms selectivo cun1o mayor es
la separacin que consigue entre dos soiutos,
Resolucin: Es la magnitud ms importante desde el punto de vista prctico ya que depende de las es

C/ Montes,20

28006

MADRID- Tfno: 9t 309

36 46

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t9

@ CASH FLOr,v

T CNI CA S INS TR

UMEN TA LE S

TEMA 4

revolvet el cual tiene roscas para coloca

1. MICROSCOPIO

tres o cuatro objetivos

La microscopia se basa en la rDedjda de la rflexin d

Se regula medianle el tomillo nacromu'ico

(enfoque rpido) y micromFico (ajusle fino).

la REM.

microscopio ptico compuelo comptede dos

sistemas de lenres, el objetivo y el ocular, sePaados

El

Platia: Es una placa plana con un orificio

en su centro que pemite el Paso de los
rayos )uminosos, sobre la cual se coloca la
preparacin. Normalmente es mvil

1,1. Descripcin

El

de dos partes
mecnica y Ia pane

microscopio comPuesto consta

funda$enlales, que son la parte

Parte ptic: Consta de oculares

objetivos'

del

sistema de iluminacin.

ptica.

oculaes: Prximos al ojo del observador'

Conjuto de lentes que acnla como si

fuesen na sola lente convrgente.
Intercambiables (5x, lox, I00x).

monha): Tiene Por

Prico v permitir
al
sistema
dc
soporte
servi
finalidad

Pate ;ecnica lestativo

el enfoque adecuado. Comprende:

Objetivos: Prximos al objeto a xaminar.

CoDjrnto d lenfes qu acfilan como si

EI piet Base del microscoPio. De l sale un

brazo

o columa sobe el

que reposa

e)

fuesen una sola lente convergente

resto del aparaio.

tr

Los principales tipos de objetivos son:

(-

160 mm) n
cyo extlemo superio tiene una lnte
(ocular) y en el inferior va dispuesto el

Tubo: Es una pieza huca

sEco

sEco

10x

40x

INMERSION*
l00x

DISTANCIA FOCAL (nrn)

16

DTAMETRO DEL CAMPO (rnm)

0,5

0,05

OB]ETIVOS

Distncia focslr Disbncis ntre l lente y el sstma nfocdo'

* De inmersin: Entr la preparacin y el oclar se coloc, una got! de rcite que oument' la
lumnosdad de la PreParacitr.

Condensador: Es ma piezz colocada debajo

del orifico de la platina que lleva varias

letes y tiene por objelo condensar el foco
de luz sobre la pare del objeto que se va a
milar, al tjempo que grda y flra la luz.
El condensado ms usual es el de Abbe,
que se puede sub o bajar en sentido

Diafrasma

(iis): Es

interpuesto entre

la

dispositiYo
y el

f\ente de luz

condensador,

Fuente de luz: Espejo o lmpata.

Los parmetros que caraderizan un microscoPio Ptico

venical, segn se rcquiera ms o menos luz,

mdiate un tomillo de cremallera siuado

nomalmente en el brzo del estativo. El

condensador lleva generalmene acoPlado
un diafragma y ur potafilFos.

A!Ieq: La amplificaciD total obtenida

en u microscopio cs cl resultado de
muhiplica el aumento del objetivo por el
aumento del ocular.

C/ Montesa,20- 28006

MADRID- Tfno:91

309 36 46

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20

 GASH FLOW

TE CNI CAS INS TR LTMENTA L ES

Imaqen: La imagen que el ojo ve a travs

del microscopio es vinual e ivefida con

selectivos: uno azui, ente Ia lirnpara y el espejo,

que selecciona la longiod de onda de exciracin. y
otro amaillo, sobre el ocular, que selecciona la

elacin al objeto.

Poder de resolucin: Es ia caDacidad oue

longitud de onda de emisi. El efecro dt filtlo

azul en ia tuente lulninosa y del filao amari o e
el ocular es producir un c;rmpo oscuro.

tiee un micaoscopjo a un

dcterminado
aumento de poder distinguir dos puntos
muy pximos eAe s.

Depende de la abeura numrica del

objetivo y de la Iongitud de onda d la luz
utilizada en el microscopio.

Abertura numrica (A): Es la canidad de

luz que penetra en ei objetivo desd la
fuente de luz. Es un valor constanie para

A = n.sen(d)
Siendo n el indice de refraccin del medio
existente entre el objto y el objetivo y o

la

4,

Mrcroscopio elecEonlco.

Iiene el

rnismo

el mjcroscopio ptico.
como fuente de luz un filamento d

fundamnto terico que

Posee

wolframio que produce un chono de electrones

enfocado por na lenles electromagnticas. Los
ayos electnicos son pmpagados en u rubo en el
que se ha hecho el vacio, que concentrados y
propagados po campos magnticos se proyectan
sobre la prepaacin, recogindose la imagen en u
foco, y aunque no es visible puede revelarse sobre
una patalla o fotografiarse fcilmente. Su
principal ventaja es su elevado amento (>
50.000x) y su alo poder de resolucin (< l0 A)

mitad del ngulo de aberura del

objetivo.

pD^
2. PRXPARACIN
PRnpaRAarN Dtr'.r.
MAT.prar PARA
DEL MATERIAL

1.2. Tipos de microscopios

L
2.

Miqoscopio conpuesro: La observacin se ealiza

por traspaencia al atavesa el ayo de luz la

2.1. Concptos generales

muest- colocada en la !,latia.

DESCoNTAMIJACIN: Es ta etiminacin de todos

los organismos patgenos que se encuentan en el
matedal utilizado en el esrudio de una muesba, antes
de su manejo. Lo idneo es utilizar marerjat de un soto

Microscopjo de contrasle de fargs: Su esfudura es

semejante a la del microscopio odinaio, salvo
que posee un diaFagma ciculd por debajo del
condensador y en el plaro focal del objeiivo se
coioca ua placa de difaccin.
Pemite observar objetos transpaenres y no

coioreados (plaqDets, flagelos,

3.

etc.)

DESINFECCIN: Es la desruccin de todas las

fomas de vida patgenas. La accin conseguida por Ia

Mjcroscopjo de campo oscuro: En este ripo de

icroscopio el objeto queda iuminado por luz

desinfeccin es Ia antisepsia.
Puede realiza.-s por mtodos fisicos y quimicos, bjen
sobre materiales inadmados (deshfectante), bien sobre

que

Mrq9lqojiq_d!_lplerjzrj94: Se puede acoptr al

nrcroscopjo ordinario un anatizador sobre et
ocula y un pisma de Nicol debajo de la platina
para que transfonne la htz natul n luz

polaizada. Hacicdo girar el aalizador hasta que

el campo aparezca oscuro, se distinguirn ias
sustancjas birefringentes (lipidos en oria) y tos
camctees de luminosidad y coloracin existenres.

5.

Puede realizarse medianle: desinfeccin

esterilizacin.

carecen de contsastes con el campo qu ies rodea.

oblicua al coloca debajo del condensador un djsco

especial quc impide el paso de los rayos d iuz
centaes y slo pemire el paso de los perifrjcos.
El efecto s que los objetos apaecen ilumindos
sobre un fondo oscuro.

4.

uso o desechable.

Microscopio de fluorcscercia: Se ulilizan lentes

tansparenles a los rayos UV. Se ilumjna oon ulra
Impara de cuarzo

se inroducen dos filtos

C/ Montesa,20- 28006 MADRID

tejidos vivos (anrisptico).

Algunos de los desinfectantes ms usados son:

o Cloro y derivados (hipoctoriros)

o AgentesalquilaDtes(formaldehdo)
o Fenol: Fue uno de los primeros

desifectanles utilizados, actualmenre se

usa paa detmina la potncia de un

desidectante poblema

(desinfecrante

patrn). Para ello se compara el poder

germicjda a distijrtas cocentraciones. Se
defne el coeficiente de fenol como la
elacin xistenre entle el inverso de Ia
mayor diluci del desifectane problem4
que o iIibe los microorganismos en cinco
minutos de contacro, pro sl en diez y ia
mayor dilucin de fenol que se comporia de
igual modo.

Tfno: 91 309 3 46- w*w.cashflow-oposiciones.com

2t

ca

casll

T CN ICAS IN STR UME NTAL ES

FLOvt'

MTODOS OUMICOS.

Algunos dc los antispticos ns usados son:

o
o
o

o
o

Difenoles cloados
Biguanjdas
Yodo Y comPestos que lo liberan

- En caliente:

-8
por
40
al
60
del
horas, con humedd reiativa

oXIDO DE ETILENO: 20

Mercurio Y sus coPestos

Alcoholes
Agetes oxjdates Oexido de hidrgeno)

ESTERILIZCIN: Es l destruccin de todas las

formas ale vida" tanto patgenas como no, y sus formas

100.

Se utiliz Pa' esteiliza malerial que

2- En frlo:

GLUTARAI-DEHDOT lnersin asta 24 h

Hornos de caor seco

Peden ser de dos tiPos;

2.2. Mtodos de estrilizs.in

o
Se

lToDos FisICos: son de cuao tjpos:

Hono Pasteur o PoPiel:

l.

!mperatua de accin

Ticmpo de esterilizacin: Es

Autoclave:
1 Atmsfera ( 120' C / 20 minutot
2 Ansferas (134'C / 10 minulot
3 Afttsfers (144o C / 4 minutos)

Tyldalizcini 0'C duale 30 minutos'

tses dlas

tr

la sua de ios

Vapor flentc: 100'

durate

hasta que se consigc en todos los putos

del aParato.

TiemEo

Tiernpo de sesidad: l intevalo de

trempo Decesarjo pala compensaf una
levacin en la resistencia de los
microorganismos u osci)aciones de la

30

3- FILTROS DE MEMBRANA: Se utilEan par

soluciones quc no sopofen elevaciones de lemperata
(protelnas, aminocidos).

lodzates: Rayos gamma (Cobalto 60)

de

exterminjo: Desd

qu.

se

consigue la temperah[a de accin en todos

los punios hasta que se desauyal todos los
microorganismos

temPcratura n el aPar1o

3.

4. RADIACIONES:

Tje!splC9--9asi9!sa!i9!: Desde que se

alcaza la temperatura en el termme!'o

'

consecutivos.

mintos.

en el termmetso

sigrientes tiemPosi

2. CALOR }MEDO:

Ti.rnpo dc calcnmienro: Desde que lmpieza a

firncionar el apfato hasla qu alcnza la

Yz

2.

tr

es

tiemDo de@rminado, cn Profundidad

Los iiempos de funcionamicnto del homo son:

Incincraci: Matenal desechablc.

180" C durnte I hora

160" C durate 2 horas y

Homo Poupinel, cuya fuente de calor

El calor seco acta como tansportador de calorlas que

destruye los microorganismos, actuando durante un

Flameado: Asas de Platino

.
.

es

elctica.

SECO:

o
o
o

Homo Paster, cuya fuente de calo

gas.

clasican en:

l- CALOR

no

sopona alts teperaturas (plstico)

de resistencia (esporas). La accin consguida

meliante la esterilizacin es la ascpsia l
csterilacin slo se puede ealizr sobe objetos o
mateial inanimado

a 40" C durnte 3

Tjempo de en*iamiento: Desd que 5e cona la

enEada de energla hasta que descendc la
tempeEtura a 80'C y

se realiza

la apetua

Uso indusFiaL

o uV:

Estcilizacin

de

ambiertes y

superficies.

C lr,Iont"s", ZO-iOOe MADRID

Matenales qu sc pueden esleriiizar: Vi&io, porcelana,

metal.

Tfnor 91309 36 46

- wwrr'cashflow-oPosiciones

com

22

EE

EASH FLOrf

TE CNICAS INS TR

En general no utilizar para todo aquel naterial que se

oxidable, porcelana, tela, gomay medios de clrivo.

bflamable o lquido.
Ventajas: Se compam, sobre todo, con ei autoclave: Es
ms barato y de ms iicil maejo. Aunque el aire
caliente es mal conduclor del calo, liene mayor poder
de peneuacjn que el calorhmedo.
Desvenrajas: Necesiu ms emperatua riempo par
)
la ererilizacin. Relarivamenle len1o. Dreiom ms el
material. Menos tipo! d maeial a esterilizar.

Duracjn de

ia

eslerilizacin: Aproximadamenle

Venajas: Se puede estrilizar ms gama de material

qu en los homos de calor seco. Es ta forma ns rpida
de estedizar en medio hospitalaio. Es bastanre ba;ato.
No tiene ningn tipo de toxicidad.

Hay materiales que no se pueden

inoducir(plstjco, sustacias no miscibjes con el
Desventajas:

agua). No tiee poder de peneracin.

Duracin de

Ei vapor de agua saturado, caientado en un ecipjete

l-ennricamenre cerado. incremenra su presin y a I

estilizacinr Aproximadamente

Otros mtodos d sreritizacin utitizando

et

Esterjlizacin por \apo fluenle. Es un

ererilizacidn cuya lemDerrura no sobrcpa\a jo5
100'C. Se uriliza para etemenros que no soponen
lemperaturas ma)ores. por ejemplo medios de
culltvo a?ucamdos, La tcnica consisre en
rnaDtener duante 30 mintos l autoclave
emiriedo de forma continua vpor de agua por ta
ll!e de purga que \ienpre pennaneceraibiena

vez ta tempemrura, <i no qreda air en su iDlerior.

EI vapor de agua catienre esterjti4 la superficje de los

objelos en los que se deposil. pero no en profudjdad.

Achia como transpofado de calor de foma ms

iniensa que el aire catiente por etecro de la
condensacin. Adens es germjcida, por hidratacidn
de los mrcoor8aismos e hidrolisis y;oagulacin de
ias prorehas, sobre todo Ia albumina

Blellzdd4--Ju$goti!!l_L&!!latizcinl
Consisre en rnanener una lemperatura lrededor
de 60" C dranLe uos 30 minulos. repitiendo esLa

Los tiempos de funcjonamiento son:

opecin duranre nes dias consecuti\os no

abriendo ei aparalo en ere inlervato fsla indjcado
paa suslancias que puedan sopo,lar cien

Tiempo de encedido: Comprede

la

l.

UM EN TA LE S

Tiempo de epcendido con la vlwla de

dpsvaporizacj abjefaj Desde que se

teperatum. pero siempre inferior a t00" C.

cierra la tapa y se conect la fuenie de calo,

hasta que sale t vapor por Ia llave de purga
de foma conrinua (se ha etiminado el ai;c
interior y se han conseguido los too" C).

PASTEURIZACIN: Caleramieto
t hora.

Tiempo de encendido con

Se elimina las formas vegetativas microbianas pero

no xiste esteriiizacin.

la vlwla d
dr!pafu!_,!-_!Ese!La D;sd" qr,";
ciel.ra la lave de puga hasta que se
consigre l temperarura y presin

60.C duranre

I?EIUZACIN: Calentamienro a t40.C dumnre I

segundo.

oeseadas

2.

Tiempo de esteilizcin: Comprede

o
a
B

. Esterilizcin por filtracn

Tiempo de compensacin

Los mtodos aneriors estn basados en el empleo

del
calor para esterilizar. En el caso de necesirar esterilizar
sotucjones qur se deterioren po el efecto del clor,
la
unrca tonna de eserilirar a lemperarura amblenre
es la

Tiempo de exlerminio

fiempo

3. Tiempo

de seguridad

de enfriamieto: Debe durar al menos t0

minutos, sobre todo si se esrn eferilizando me.ljos

d cultivo, ya que stos hierven.
Materiales que se pueden esierilizar: Vidrio, nretal no

c/ Monresa.

20

2800 MADRT D

filtracion

Si ernpleamos un tiltro que rerenga a to:

l,croorgaismos {ta,.nao de poro -{.22_0,,15
Lm), el
liquido resultante ser esreril.

Trno: ql 309 361

";;;;;;;:;;;;;;;;r*o.

23

@ CASH FLOl,y

T CN I CAS TNS TR

UMEN TAL ES

Tincin siple con colorate fluoescente

COLOMCIN VITAL
obielivos: ConEaslar algrmas estructlras celulars con
m;vor intensidad v sin que se produzca la muere de
los'microorganismos.
CorDo colomntes se mplean aquellos muy poco o ada

txicos v a ililuciores muy altas (Azul de metileno cn

soluci;acuosa al l/500 o al l/1000)

Objetivo: Detecfar bactedas cuado se encuenfan et

mt baja cantidad o se enmascamn con restos de
clulas (sange, LCR).

Colorante: Naanj de acidia El colorante se une a

los cidos nucleicos, las bacterias se obse an de color

naada briltante los restos celulares

hematies de

color vcrde o amarillo

ProDorciona ms contraste que los mtodos anteriores.

lo que mejora Ia visin nofol8ica sin

aherar Ia
TINCIONES COMPI]ESTAS

motilidad.

Denro de estc gruPo se clulen las

3.

linciones

diferenciales y las tinciones estructurales.

TINCIONES BACTERIANAS

1,
CENERALiDADES
Previa a la tincin es necesaia cn muchas tcnicas la
fiiacin rinmovilizac;n de los microoEansmos pot

TINCIONESDIFERENCIALES

Son tinciones que permiten diferencia unas bacterias

de otas seBr s afinidad tintoial

cagulacin de sus Protefnas) de la e),ensin realizada

TINCIN DE GRAM

Fadoes:

obierivo: Podmos clasificar los gnnens segn la

.aircin o no delcoloranle de Crm (primer coloranle

Calor

+ mordiene).

Soluciones alcohlicas (metlico pulo,

edco Po, etlljco_acetona, etlico'ter
sulfico). Cada solucin tiene n tiemPo

Tolas las bacterjas fijan el colorante de Gam, peto las

cmm- jo pierden al decolora con alcohol'acetona' y

pueder tomar el colonte de fondo o segundo

especfflco de actuacin por innsin

Se suelen emplear colorates bsicos en solucin

hidoalcohlica, en algunos casos se emplea un
mordiente (aluda a fijar et color) como el cjdo fico

Primer colorante

Solucin fenicada

Mordienle

Lugol

de

violeta de gncian/cristal

o fenol.

Los coloates cidos se empiean pam colomciones de

fondo o de contrastc.

Tas lavr para eliminar el exceso de colorant la

preparcin 3e seca al aie.

Decolornt

TINCIN SIMPLE

Segundo colorunt

Solucin cuosa

Obielilo: Observa la morfologj4 la asociacin y la

cantidad de microorganismos med;ante el uso de un
Proporciona poca informacin sobrc

Ia

eslrDctura

bacteiana.

Interpreiacjn:
. Gram+: Color violeta

Coloantes: Solucitr hidtoalcohtica o fenicad de

azul de metileno, fuscia bsica. violcta de genciana.

C/

. Gram-: Color rcsa

M.rt.*Jo - 18006 MADRID - Tfno: 9t 309 36 46 - rflr'P'csshflow-oPosiciones'com

26

M CASH FLOvt'

T cNI

TINCIN DE AACTERIAS CIDO ALCOHOL

CAS

TNS TR

a M EN TA LES

Mtodo de Wirtz-ConHin: Se utiliza un primer

RESISTENTES (AAR)

colornre (Verde malqujt aJ jolo ) que ser e,iminado

del resto de ks estrLciuas nas un la\ado permirjendo

TN.JCIN DE ZIEHL-NEELSEN

ra accron de Ln seundo cotorle rSafrni

o fuscina

a10.s%).

Objetivot Diferencjar las bactedas resistntes a la

decoloracin con cido- atcoot (AAR) de las

Las endosporas se ren de color verde. nrienna\

que
resro Io hace de colorrojo.

estants,

Primr colorante

Solucin fenicada

Jtr,c]gry DE GRNULoS METACRoMrrcosl

METODO DE LOEFLER

fucsina bsic

Objetivo: Colorear los corpsclos metacromtjcos

Mordienfe

Decolorante

Calor

Geserva de fosfaro) de CorynebacreriDm diphrerjae.

Alcoho! Ctorhldrico

EI. coloranre (azut de metileo de Loeffler)

rine los
gnnulos metacromticos de azul inrenso
e;te al azut
cl:ro del refo de las esfrcturas.

30/"

Segundo colorante

clulas epireliales, elc.. queda reido de

colo zut

Objelivo: Colorer los flagelos pesenres en

creros
Colorate: Se usa luscina basica fenicada en roJucion
arcoboitca y acrdo rnco como mordienle.
A \eces .e
aiade un. colorale de conD.sie. Los flagetos
se
ooserva oe cotorrojo.

1. DIAGNOSTICO PA-R{SICOLGICO

AURAMINA.RODAMINA
Permne observar ta prcpacin con obieuvo

de:5x.

!as_ bacterias AJ{R apaecen teidas de aariljo

y.t color de fondo es oscuro tdebido a que

2.

TINctN DE FLAGELoS: MToDo DE LEJFSoN

Soluc:n hidrortcohtica
de az d lrti.no

InteDrelacin: Las bacrerias AAR rienen {rn

cojor rosa
tuerle y el fondo, o sea el reslo de baclerias.
moco,

:l-'l-*
Ieva permanganaro

potsicol.

TINCIONESESTRUCTURALES

Es ia muesta ms Fecuente.

El procesamienro debe rer rapido (<j0 minulos

oespues de Ia recogida): en caso conrrario

debe
u0lzarse conservanres 13 volmenes por
\olumen de
muesla):

TrNcN DE cpsul-As

O
o
o
o

Objelivo: Hacer visibte ta esmcrura fnucopotjsacirida

que poseen atgunos ripos de bacterjas
recubiendo Ia
Mtodo de Hiss: Sotucin acuos de crisrat viotera
t9o
y sorucron acuosa de sulfro de cobre
Las cpsrilas se tien de color violera.
mieno-as que las
cerulas o hacen de azul oscuro

INCIN DE

eJ

ESPORAS

c/ t{ontes,

20

28006

MADR@

fatcohol de potivilo)

MIF (mertjolaro _yodo_fenol)

pAF (fenot. aicohot_fonnot)

Recogida: Tres muesas recogidas con itervtos

de t_

2 dfas

Examen mjcroscpjco diecto tms

realizar una
.
sJspensn con soucones
)odadaq /crisrjes yodina.
lK, aqua desiilada).
Se ecomieda:

i.
2.

Objetivo: Visualiza ia cspora.

ormalina (fonnol al5_1090)

IVA

Concena la muesta
Realjzar de ntina tiDciones permanentes

27

EA

C}ASH FLOrv

T CNICAS TNS TR UME NTAL E S

DETECCfN DRECTA EN OTRAS MUESTRAS

Mtodos de cocenl acin

Mtodo d sdimentecn

Sspende las heces

en 10 ml de

fomalina.

1. Sangre: Giemsa (Paiudismo)

2. E)t:dados vaginales: Examen en tesco

M.zcla y fitsar.

2.

Complelar con sueo saliDo. Centrifigar 2 m a 500

c.

3.

Rcpctir

4.

Ia

(T.

vaginalis),
rdvICAS INSTRUMENTALES (TEMA 5)

operacin dcsdc 2.

Suspender

cr

formalina.

Aladi

ter. Cntifg

2-3ma5009.

5.

Recupera cl scdimento (tr / rcsiduos / formalina

/ scdinr.rto) y obseva con solucin yodada.

Mtodo d. flotlcin

l.

Centrifugar una suspensin dc l-2 ml d. heccs I m

a 500 g. Aadir 1-2 ml de sulfato de zinc al
scdimcnto,

2.
3.

Resuspender,

filrar y centritugar lm

Tomar lrna mucsta de

la

a 500 g.

superficic (asa) y

obsewar con solucin yodada.

Ticiones pemapentcs

TRICRMICO: Los midoorganismos se observan

con citoplasma de color azul- verdoso s pripua y

la

comaiina,

las inclusioes

cromatojdcs de rojo

y los

cuerpos

plpura.

HIERRO.HEMATOXILINA

Tcnicas especiales

PRLIEBA DE GR-A.HAM. Es el mtodo de

diagnstico de los oxios. Cosiste en pasar r
cinta dc c.lofn por la regin periaDal a la primera

hoa de la malana sin haber lavado la zona

prcviaftentc. Pags la cints sobrc un pofa y
observar al hicroscpico.

CRIPTOSPORIDIUM: Los quistcs sc dtectn

medite tincioDes cido-alcohol rcsistcntes
modificadas.

L
2.
3.
4.
5.

Cabol- Fucsina

Lalt co EIOH
Lav con agua
Dccoloa coD cido sullico al l%
da rDetileno como colorante d contrastc

Azul

Los quiste!

sa

obsevan de color rcsa ojo sobre fodo

al.

C/Montesa,20

28006 MADRID

-Tfnor

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2A

 CASH FL()vy

T CNI CA S I NS TR UM E N TA LES

TEMA

MEDIOS DE CLTIVO. PRUEBAS BIOOUMICAS DE IDENTIFICACIN

BACTERIANA. ANTIBIOGRAMAS.

I. MEDIOS DE CULTTVO

COMPOSICN DE LOS MEDIOS DE CULTIVO

7.

Hjdrolirados de prolenas: Inclu)en pepronas.

i$jn de came, triptonas, caseina, etc.
Proporcionan los elementos necesarios para e

Carbohidntos: Proporcioan

8. Aeentes

diferenciadores en Is pruebas bioquimicas con

objeto de determinar la capacidad de una bacteria

o
D
9.

para utilizr un determinado acar (lactosa,

Tampores o buffer: Propociona el pH adecuado
paa el desarollo de los microorganismos y, en
muchos casos, un pH estDdar a aquellos medios
en los que se emplea un cambio de pH como punto

final paa detectar

la

posible presencia

de

determinados prcductos metablicos usados en Ia

idetificacin de bacteriata. Los ms empleados
son fosfatos monosdicos y disdicos o potsicos-

4.

Aditivos nuFitivos: Son sustancias que se aaden a

los medios pam promove el desaEollo de los

micoorganismos exigentes, Comprenden ia

sage, el suero, suplcmentos vitamiicos, bases
niEogenadas, etc.

5.

Susta.cias inibidos: lnhiben

el desarrollo

de

o
o
o

Colorantes: Vede brillate, eosia, erc.

Metales pesados: Bismuto
Anr:microbianos:Neomicina,Vancomicina,

Otros: Citrato, sales biliares, selenito, erc.

en los medios por accin de

bacterias. Los ms utilizados son:

a
D

10. Sales:

La

ms utilizada es

el ClNa. A

aitas

concentraciones se comporta como una sustancia

iibidora.

IPOS DE MEDJOS
APLICACIN

DE CULTIVO SECIN

SU

Distinguimos:

MEDIOS ORINARIOS: Son empleados para el

crecimienro e :ncluso aislmieDro prjmario y
consevacin de todo tipo de grmenes sin necesidades
especiales.

Caldo nut'itivo: Extracto d came, peptoas, CINa.

La turbidez indica crecihieto

2.

Agua de pptona: Peptonas, ClNa, agua destilada.

Es un medio ms pobe qrre el caldo. Se urjiiza

las

3.

Agar nutitivo: Caldo nutitivo slido obteido por

la adicjn de aga (1,5-2%).

MEDIOS DIFERENCIALES: Son medios

de

aislamiento quc dterminan el crecimiento de un grupo

de bacterias solafi ente.
Contienen sustancias que pemiten la ideDrificacin
presuntiva de gades gnpos bacterianos.

Azul de metileno
Rojo neuro

C/ Montesa,20 -28006 MdDRID

como mcdio para la deteccin de la produccin de

indol si las peptonas son r;cas n Tp.

Indicadores de oHr Miden los cambios de pH

producidos

Asua: Es el componerte indispensabe. Debe ser

destilada para evitar la presencia de cierros iones
tales como calcio o magnesio, que pueden

Los ms utilizados son:

microorganismos no deseados. Los ms utilizados

6.

Gelatina
Silicagel

precipitar los fosfato tampn.

sacarosa, maltosa, glucosa o xilosa).

3.

solidjficanles: Ur;'rador p?n

proporcjonar consisteDci a los medios de cultivo

slidos y semislidos. Los ms uriljzados son:

un

susFato
energtico pam el desarrollo de las bacteias y al
mismo tiempo sirven como eiemenios

de

SH2

metabolismo bacteriano,

2.

Otros indicadores: Detectan sustancias especjficas.

Por ejernplo sales frricas para la deteccjn

Las sustancias ms empleadas en los medios de cultivo

Prtrpwa de bromocreso)

Tfno: 91 309 36.t6- rvn'w.cashnow-oposiciones.com

29

 CASH FLOW

T CNI CAS INS TR UMEN TA L E S

Contiene ua mezcla de peptonas, Iactosa y

Algunos de ellos soi

Medio d CLED: Permite el crecimiento

todas las enierobacterias e ihibe el velo

d
de

azul

de

Composicjn: lactos4 ciseina,

selenito cido de sodio qrre inlibe el

crecimiento de colifo.os.

Caldo Tiogliocolato (TG): Medio liquido

eiquecido para aerobios y aaerobios.
Tambin sirve como rnedio de mantenimienlo.

bromotimol y baja concentraci de electrolitos.

ConrieDe tioglicolato sdico que inhibe las

reacciones de oxido- reduccin, pePtotas, sales
y dextrosa.

Interpretacin:

.
.

Lactosa (+): Colonias verdes

Lactosa O: Colonias azuls

Medio d Ldestein-Jensn: Medio selectivo

para el

ajslamieto

Agar Macconkey: Es n medio diferccial

eiquecido

para el aislamiento e idntificacin de

enterobactias y oFos bacilos Gram G).
Contiee sales biliaes, cristal violeta (iniben el
cecimiento de Gram (+) y algunos Gram C) y

Contiene huevo coagulado, harina de patata,

gliceol, sales y vede malaquila que inhibe el

de

micobacterias.

crecimiento de otras bacterias.

lactosa,

Interpretacin:

.
.

MEDIOS SELECTMS: Permirn el aislaminro de

un ripo (gnero) de ba(terias. Suelen tener ]os mismos
componentes que los medios difefenciales, pero en

Lactosa (+): Colonias rosas

Lactosa (-): Colonias incoloras

maYo concenfrcin,

Medio Slmonella-Shisell (SS): Medio slido

MEDIOS ENRIQUECIDOS: Son nedios

aidajento que facilitan el crecimiento

de
de
nicroorganismos, especialnente patgeDos, Ios cuales

selectivo pala bacterias C;am

(')

no
fermentadoas de lactosa, como son Sahnonell
crecimiento de los
Shigella. Inhibe

en un medio nornal ctEcera poco po ser muy

colifomes

exigentes.
Algunos de ellos son:

el

Gram G) por lo q es

til

en

muestas con rna flora muy heterognea.

Interprctacin:

Agar sangre: Medio

eriquecido

de

. Lacrosa (+): Colonias

. Lactosa G):

identifi cacin bacteriana.

Composicid: Aga nutritivo como base al que
se le aade sangc, peptonas obtenidas por
dieestjn Fiptica.

rosas

Colodas blancas (Shigella)

Colonias blancas con punto egro

Intepretacin:

(Salmonella)

Medio de Thsyer-Martin: Medio

selectivo

slido paa el aislamiento de Neisseria a partir

de muestras muy contaminadas,

Es rna aga chocolate al que se le aade una

mezcla de es anlibilicos: vancomicin4
colistina y nistatina (VCN), que elimina la flora

Halo verd o marrn.

Hemlisis parcial.

bacteriana asociada en muestras no puras.

Halo Fanspaenle.
Hemlisis total

CONSERVACIN

CULTIVOS BACTERIANOS

Agar Cbocolafe: Medio efiiquecido con sangre

hemolizada paa el creciiento de cocos
Gram (-) y Haemophilus.
Proporciona os facrores V 0.{AD, temolabil) y
X Oemin4 termoestable).

Caldo Slnito: Medio liquido

selectivo
eriquecido para el aislamiento de Sainonella

C/ Mont!, 20

Sin halo.

No hmlisis.

28006 MADRID

MANTENIMIENTO DE

Refieemcin (a-8)'c

Smanrs

Cioconservacin: N: liquido, Gl50-

[-l95D.C

Liofilizacin: La

Hasta

l0
muesta

Feviament congelada se somete

anos

Hasta

subtinr acin

Tfnor 91 309 36

46

-w*'w.cashflow-oposicions.com

ti0

 CASH FLOW
2.

T CNI CAS I NS TRUf EN TA L ES

o Reactivo de Erhlich) con

fomaciD de una anillo rojo en
Kovacs

PRUEBAS BIOQUiMICAS PARA LA

IDf NTfFICACION BACTERIAN4

superflcie.

2.

un
'Prueba de la opfoqina: Se utiliza
(e
y

diferenciai impregnado con optoquina

eriste ihibicin dl creciminto bacteriano.
S: Esteplococo pneumoniae

disco
observa ri

el viraje del indicador (amarillo -+ rojo).

bacitracina: S utiliza u disco

diferencial impregnado con baciracia y re observ si
exisie inhibicin del cecimiento bacteriano.
S: Estreptococo pyogenes (grupo A)
Prueba d

la

3.

Permite

ta

diferenciacin

de

Prueba de

la

estafilococo aureus,

Ctrato: Permite

la

identificacin

de

enerobcreria. capaces de ulilizar cjtrato

como n;ca tuente de carbono. El nedio
co iee citato, fosfato d amonio y azul
de bromorimol. La unliz,trcin de citraro se

catalasa: .Pone de manifiesto Ia

pone de manifieslo por la produccin de

presencia de catalasa con produccin de oxigeno a

partir de Hro,.
Permite la difereDciacin de esaafilococos (Catalasa

f+l)

enterobacterias fermentadoras de

comPlcio rojo.

coaglasa (+), del resto de los estafilococos.

de

Ia

la

coagulasa: Pone de manifiesto la

facultad que tiene algunas bacterias de coagular el
plasma (Fibringeno -+ Fibrina).

Prueba de

Voges-Prosksur: Permitela ideniificacjn

azcares por la via aeobia. La produccin
de acetoina se pone de manifiesio al aadir
formacin de un
KOHNaftol por

R: Resto

Rojo de metioi Pernite la identificacin

de enterobaclerias fermentdoras de
azicaes por Ia via cido- mixta. El medio
contiee peptonas, glucosa y se aaden
unas gotas de rojo de metilo- La Prodlrccin
de cidos (lctico, frmico, actico) induce

R: Resto

]a
la

subproductos alcalinos (NHi) que hace'

virar el indicador (verde +azul).

los estreptococos (Cataiasa [-]).

P.uba de

la

Kliger-TSI Clriple-azucr-hirro): Permite Ia

identificacin d entrobacterias fermentadoras d
glcosa y lactosa co produccin de SH:.

oxidasa: Pone d manifiesto la

presencia de oxidasa por la oxidacin de

p- fenilendiamina (incolora -) violeta-negro).
Es positiva paia pseudomonas y neisserias y negativa
para enteobacterias y cocos Gram (+).

Composicin:

.
.
.
.
.

. Prueba IMViC: Engloba cuaFo pruebas metablicas

que pernite Ia identificacin de entrobacteias

l.

Peptonas

icas

en aminocidos azufrados

Clucosay lactosa (10 ms concentrada)

Rojo fenol (amarillo lcido] + rojo [bsico])
Tiosulfato sdico (ftiente exFa de azue)
Sales fnicas (indicadores de la produccin de

SHJ

lndol: La produccjn de indol a partir de

Trp por accin del enzima triptofanasa se

de manifiesto al aadir P'

dimetilanimobenzaldehido (Reactivo d

pone

Interpretacin:

'cronra;io | .L
Rojo

Amaillo

ti

..'::

r' r.'

Rojo

Bactedas no fermentadoras

Rojo

Bacteias fmntadoras de glucosa

Amarillo

Baceias fementdors de glucosa y lactosa

Apaici de un precipjtado nego: Poduccin de SH:

Aparicin de bbujas o

rot

a del medio: Produccin de gas (COr)

El medio TSI Onpl- azcar- hiero) contiee adms sacarosa.

C/ Montesa,20 -28006 MADRID

Tfno: 9l 309 36 46

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3l

3.

GASH FLC'W

T E C NICA

S INS TR UMENTA

ES

clinico, en sensibles, moderadarnente sesjbles /

ANTTBIOGRAT{A

resistentes o rcsistentes.

El antjbjoSrma muestra el Crado de susceptibilidad de

esii

los rnicroorganismos a los a,ltibiticos "i vitro", y

orienrado hacia el tratamienro larmacolgico.

Si la CIM de u antimicobiano para una bacteria se

puede conseguf "in vivo" a dosis teraputjcas, la
bacfeia es sensible

lllgl.bLEia: medio sljdo o

liquido para el ersayo de Ia sensibilidad de las
Se emplea el medio de

bacterias los atibiticos que cotieDe exfacto de

came y peptona de caseinajuto con almidn.

Las pruebas de snsibilidad a los antimicrobianos

deben realizrse de forma estadaizada.

IIOS

activo.

y el

antimicobiaDo se considera

En caso contraio el

antimicrobiano

se

considera inactivo y Ia baderia es esistente.

Las bacteias modndaente sensibles son aquellas

que iibe con concentraciones qu no s alcanzan "in
vivo" a dosis ieraprticas! perc pueden alcazarse coD
dosis ms elvadas tolerables (no txicas). Esta
categorla es aplicable a antimicrobianos en los qe la
diferecia entre la dosis teaputica y la dosis txic es

amplia.

Las tcnicas ms impofantes son:

INDICACIONES

DIFUSION: Tcnica cualilaliva. Los microorganismos

se clasifican en sensjbles, intemedios o resistents a un
atimicrobiano.

Estas pruebas deben realizarse:

DILUCIN: Tcnica cuantitativa. lnfoma sobre los

siguientes parnetos

. CMI (Concentracin

mnima inibidora)l

CMB (Concentracin rnima bactericida):

Concentracin de antimicrobiano que
descuye el microorganismo. Su empleo est

indicado

en el caso de

pacintes

DETECCIN ENZIMATICA:

Se

antimicrobjsnos, pricipalmente beta-lactamaia! y

Cloranfenicol acetil tsansferdsa.

Se utiliza tcnicas que poen de rnanifiesto

la

hidrlisis del aillo beta-iacrmico mediante:

La deteccin de la acidificacin de medio. EI

caDbio d pH se pone d manifiesto

mediante el uso de indicadores (ojo de
fenol).

El uso de

sstratos sintticos (nitrocefna)

que cambian de color al s! hjdfolizados.

INTERPRETACJN

Independjentemente

del

mlodo empleado

los

microorganismos sc clasifican, desde el punlo de vista

C/ Montesa!

20-

28006

Como labor de vigilancia epidemiolgica dl

laborarorio que informa sobre la evolucin de
las rsistencias.

PRIJEBAS DE DILUCIN
Estas pmebas esln estandaizadas par el estudjo de

sensibilidd

1a

de baclerias aerobias de

DILUCIN EN AGAR

CIM en un medio
slido que contiene coDcentaciones crecientes de
Consiste en Ia delerminacin de la

bets-lactamasas: Tiene inters n

baclerias como las neisserias y hemofilos.

determinan

actividades enzimticas bacterianas que inhiben los

cecimienro
rpido, en medios no enriquecidos y que crecen bien en
atmsfra ordinaria.

imunodepimidos.

Deteccin

un

principalniete.

Concentracin d antimicrobiano que inlibe

el crecidento del mjcroorgaismo. Es el
panimetro ms utilizado.

'

Cuando no se puede predecir la sensibilidad

de
microorganismo. Baclerias gram
negativas
Staphilococcus

atimicrobiano.
Incluye los siguientes pasos:

l. Prepa,-acjn del rediot Tras preparar y esteriiiza el

medio Mueller-Hinton (enftiado a 56 'C) se aaden
diluciones de antimjcrobiano (obtenidas a parti' de una
solucin madc) n Ia proporcin de asar I a 9
(dilucin I/10).
2. lp!!lq:

Debe proceder de un cuhivo joven. Las

colonias se inc\bn en un caldo que se aiusra al 0.5 de
la escala de McFarlad (103 UFOn'I) y se realiza una

dilucin I/10.
Se siembra la diluciD anterio mediante un epljcador
de Steers (posee diversas pas que estn calibradas
paa I 2 pl). Siendo el inoculo fmal de 104 UFC/ml.

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32

[0 C'as]t FLow

T CNI CAS INS TRUM EN TALES

3. Lectura de resultados: Tras incribar t8-24 horas a 37

la que se iniba

el

Se in!oducen cepas control (ATCC) cuya CMI

se

'C la CMI

set aquella en

Consiste en la deirminacin de la CIM n un medio

lquido que contiene coDcent'aciones crecientes de
antimicrobiano.
Incluye los siguientes pasosi
Preparacin del medio: Tras prepaa y esterilizar el

caldo Melle-Hiton (enfrado a 5'C) se aaden

diluciones de adinicobiano (obtenidas a part de una
solucin madre) eD la proporcin de caido I a l
(dilucin l/2).

2. IlgUlq: Dbe procder de un cultivo jovn. Las

colonias se jncubar en un caldo que se ajur al 0.5 de
la e,cala de McFarland tl03 UFC ml/ y se reala un
dilucin l/100.
Se aade I ml de Ia dilucin ante or mediate una
micropipeta a Ll de caldo. Siendo el inoculo final de
5 x l0r UFc/rl.
3. Lectura de resultados: Trs incubar 18-24 horas a 37

"C la CMI ser aquella en la que se iliba

Estas pruebas estn estandarizadas paa el estdio de la

sensibilidad de bacteias aerobias de crcimienlo rpido

(enlerobacterjas, estafi lococos, pseudomonas, etc.)

DILUCIN EN CALDO

PRUEBAS DE DIFUSION

el

crecimiento (no presete tubidez).

Adapladas convenjentemenle pueden utilizarse Para el

estudo de la sensibilidad &ente a cepas baclerianas
exigentes (neissrias, bemofi los, Pneumococot,
Srelen utilizase como mtodos cualitativos (R"

Son pnrebas d dilucin en caldo. Se realizan en

l. Fundamento: El antibitico impregnado en los

discos difunde entre el agar concenEaciotes
variables, sjendo sta Dxima cerca del disco y
disminuyendo a medida que se aleja segn una tuncin
logartmica. La distancia en la qu se irlibe el
crecimiento del microorganismo se denoina halo de
inhibicin (nm) y es inversamente poporcional a Ia

CMI.

2. Inoculo v medjo: Se prepaa una placa de

probarnumeosos atimicrobianos
en lamismaplacy de na sola vez.
Se pueden

Son pruebas semiautomaiizadas.

'

Los

est congelados o
inoculo se aade mediante

aDtimicrobianos

liofilizados.

El

agar

Mueller-Hinton (o tiptona soja).

Se toman 4-5 colonias de un cultivo puro y se icuban
a 37'C en un caldo durante 4-5 boms. La turbidez de
ajusta a 0.5 en la escala de McFarlad. Inocular la
suspensin (antes de 15-20 rninutos) con uira tomnda
escurrida por toda la placa de aga. Dejaf secar 3-i
minutos.

enFe los discos debe ser de 15 mm-

Los discos gennlnente cotienen ur slo antjbitjco

a uDa concnt?ci conocida y deben ser almacenados
de forma corecta hasta s utilizacin

S)

3. Discos de aniibltico: Se aladen Lon unas pinzas

estiles o mediante un dispensador automtico antes
de que trdn.curran l5 nrinulos. La dislaDcia m'nima

PRUEBAS DE MICRO DILUCIN

Io

y tienen aplicacin en la identificacin bacleriana.

joculadores de pliistico estdles de

solo

(4-8'C).

4. Lectura de resultados: Tas incubar 18-24 horas a 3?

'C se miden los mm de halo y se interyretan en funcin
del antibitico y dl misooganiso.
Debe aadirse un control de calidad.

5. u999_.de__er9: Pueden deberse al medio (nal

esiado), al antibitico (mala conservacin de los
discos), a u xceso de ;noculo o a ua lectura errnea
de los resultados.

Elevado coste econmico. Actualmente

se

est reduciendo ltilizando nicamente

diluciones de antimicrobiano que
conespoDden a con(enraciones crilica! que
limita la categoria de sensjble y resistente
(beak point).

.
.

En

TJN

SIIERO

aleunas sjoaciones clnicas

(endocardiris,

bacteremias en pacientes inmunodeprimjdos, etc.)

plede ser interesante determina la CMB.

La CMI y la CMB no sjepe so coincidentes. La

se define como la menor

de antimicrobiano que reduce la

diferencia entre ambas

Panl de atimiclobjaos fijo.

Es imprescindible un contol d calidad.

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CAPACIDAD BACTEzuCIDA DE

concenaacin

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tE

cast{ FLow

TE c NI e4s INS TR AMENTAL Es

poblacin al0.l% (o henos) d. la! bactcias prcrnt

rfr

!l ioculo origial.

Una dc lss tcnicrs utilizrda! pa deteint l CMB

es estudio d! a conccttlrcir bsctciicid l! tt suoro.
Esta tcnics as hboriosa y no est rtlaDddizada,
El proccso sc rcamc al:

l.

sc prepran dilucioes dobl! !.tladss del suco

dcl pcicnta cl. cst sicndo tsatldo,

2, I! ilbos sc iloculsrI con una soluoiD

ertnd.rizda dcl microorgtismo ftsponsabla dcl
proceso.

3,

Sc iDcub (37

.c

dwnt 18-24 bor.s) y

t6lc.

la

CMI.
4.

D.

los tubos c los que

!o

ha hobido cr.ciricnto

s. hrcc u c1hivo cu&tifativo

(l s ) .n modio sin

tibitico.

dcl

La

coccnfacin bactericida
srdo
corlpondc a la dilDcin quo hl conreguido un
ifccto bcEricidr dcl 99.97" (cFcimi.to dc

mcDos dc 1000 .olonie).

E r.eultdo sc corisidcr adccu.do crado 'tc sc

obticn con cl Bucro diluido al I/8-l/16 o sup.ror.

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34

EA

GASH FLOItu

TE CNICAS INS TR UM E NTAL ES

TEMA

MARCAJE RADIACTIVO. MTODOS ELECTROOUMICOS

1. ]\ARCAJE RADIACTTVO

(A-Z\/Z >1. Ncleo con exceso de neutrones.

Se

produce Ia transformacin

n-rP*+e'+v

Z: Nmero atmico. Nmero de potone!

e-:

radiacin p-

que

hay en el ncleo.

O A:

Nmero msico. Ntimero de protones y

5cr -+ TNta +

neufones que hay en el ncleo,

b'+ v

Las paficul?s p tinen mayor poder de penetracin que

las pafculas a (se paran con una lmina de pltico).

Defioirbo! istopos como aqllos tomos que tienen

el mismo valor de Z pero difieren en el nmero de
asa A,

3,

Los isropos no difieren cn su5 propiedades qumicas.

desinlegacin
caprura electrnica er
caractefstica de ncleos deficientes en neutrones. Un
elecrn (de las capas intemas K, L) es absorbido po el

La

Los ms pesados son inestabies y denden a la

esrabilidad de una form esponlnea. Exprimenran
desitegraciones lmicas orjginando paniculas

o.

La emisin ] es Ia ms peneanre. Se produce cuando

Ia desinregracir origina un tomo en esrado excilado
que piede energia para erabilizarse en un nico paso
(solo un fot), o en varios (conjunto de fotones).

son poco penetrantes

2. N'lcleos lieeros (2<60)

tr

tomo queda

4. Emisir d rryos Y

^-+zrM^r + :He'

Se desintegran

espo nea emitiendo

(,He4).

Las patlculas o posen masa

(se paran con ei air).

captura electrnica

M^ -+ zrN'-+ rN^ + Rryos

Ncleos pesrdos

Se destgn de fons

la

excitado y se desexcita gracias a la caida de electons

ms extemos hacia el hueco qe ha quedado libre. Esie
proceso se acompaa de una perdida de energia en
forma de ayos X.

TIPOS DE DESINTEGRACIONES

paniculas

por

nc)eo, Fas

elernentales, que se miten a modo d radiaci, y

tomos con caracterlsticas nuevas.

l.

Captr electrnica

2M -+ 2N^' -+ N^ + Rayq5 y

emiriendo partfculas p.Djsringuimos:

(A.-Z|,Z 1. Ncleo con exceso de prorones.

produce Ia ransformaci

Se

cb'TIcA DE LA

DESINTEGRaC]N

ISOTOPOS RADIACTTVOS

DE

Definirnosl

P"_+n+et+v

' Vlocidad

e+: radiacin B*

de desinregracin (-dN/dr)

v: antineufino
-dN/dr = lN
7N8 --) 6c3 + F*

+v

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-Tfno: 9l

309 36

46_;\n,n

"rshft;l;;;;;;;;;;

35

CASH FLOl,tl

T CN I CAS INS TR UM ENTAL ES

Nr Nmero de tomos en un instante detrmiado

N.: Nmeo de lomos iniciales
),: Constante dc dsiDtegacin

2.

cuatitativo, basadas en

. Periodo de semidesintegracin (!rr)

Es el tiempo necesaio para que la cantidad de

lomos disinuya a la mitad.

el anlisis
el compotamiento de una

Corprenden una seri de tcnicas, paa

solucin de la muestr'a cuando forma parte de una celda

electroquimica.

Las celdas constaD de dos elech'odos sumegidos en

una solucin electrolitica.

tn= Ln(2/',
POTENCIOMETRIA

La unidad de radiactividad en el Sf es el Becquerel

(Bq), equivalente a una dcsintegraciD por segundo

odt.

'H
'4c

',P
I's

urt

12

Se basa n Ia medida del potencial entse dos electrodos

en solucin. EI potencial y l concentracin del analilo
stn relacionados por la ecuacin de Nerstl

E=Eo+

Aos

Ip

5.500 Aos

87 Ds
8

Dia

2 Meses

P v^l

c",

E=Pot n.ilmddo- 25'C

E" - Pot.ncial estrdlrd. redccin
n =Nrr.o dc clcctron.s mplic.dos

l5 Aos

Pvr

0,059
log
nc*

en

l re.cin

Para medir el potencial de ra solucin, se necesita un

electrodo dicador, responde proporcionalmente a Ia
concentracin del analito, y uno de referencia que debe
mantene un potencial constante.

Rdiostopos dc tilidd cll'ic

MEDIDA DE LA RADIACIN
ELECTRODOS DE R.EFERENCIA

l. Emisi a: contador ceiser

u tubo lleno de
gas inerte que captua os iones positivos y negativos
producidos durate la radiacin. Estos sc mueven en
sentido coDtraio en un campo elctico dbil (cmara
de ionizacin). La coniente se amplificay se midc.
Es uD detector de gas que consiste eD

con respecto al

electrodo normal de hidrgeno.

Electrodo de Plat,/Cloruo de plata: Es menos

sensible a las variaciones de temperatur.

orgnico

(tiquido de centelleo) lo que produce un destello que

regisFa en el fotomutiplicado.

Electrodo saturado de calornelanos IECS): Es el

ms usado. Est fomado por mercurio y clon:ro
mecrioso (ClrHgJ en solucin saturada de CiK.

Tiene un potencil de -0,242

2.

2. Emisin B: Contador de centelleo llouido

La emisin es absobida por u producto

se

3.

Electrodo normal dc hidseno: Consia de un

elecEodo de platino e u1a solucin de CIH 1,228
N, con hidrgeno a prcsin athosfrica. Tiene un
potencial asigDado de 0,000 V.

Centelleador primario (Solvente): Tolueno o

simila
CeDtelleador secundario: PPO (2,5- difeniloxazol)
+ POPOP (2,2- p- adenilen- bis- 5- feniloxazoll).
Emite a 400 - 480 nm.

ELECTRODOS INDICADORES

tr

3. Emisip 1r Contador de centelleo slido

Los protones difunden

La emisin es absobida por n cistal d INa activado

por Talio (TI) en donde se inoduce la mestra. La

adiacin absorbida

es

detectada

por

Electodo de vidrio: Se tiliza paa la nedida del

pH juto con un ECS (pltrnetro). Consta de un
electrodo metlico en una soluc;n 0,1 M de CiH.

lravs del vidio

originando una variacin de poteDcial proporcional

a la concentacin.

el

fotomultiplicador.

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36

Eg

CASH FLOW

Electrodos selectjvos

TE CNICAS INS TRUM EN TA L E S

de vi&jo

membrnal

Penniten determinar de foma especifica la

concentracin de deteniados iones, para la
deterhinacin de potsjco se utiljzauna membana
de valinonicina,
ElecFodos en esrado slido: En ellos se utilizan
rembanas que coDtiene el analito a dete!iar
un ion de sigo opucsro que Io precjpira.

ElecFodos

de

imercambio inico tiouido:

(ontencn un soltenle inete e insoluble en

agua,

en ei que se disuelte un portador especifico del

anaiito. Se mide el potecial gecrado a !-avs de

la

inrerf9e solvente. muestra. para la

deteniaciir de Ca se utitiza un diester alifalico

fosfrico

COULOMBIMETRiA
Se basa en la nedida de la cntidad de electricidit
orjgiada Ia disotucion por et anstito a porencial
Scgn I ley de Coutomb

Q=rr
Q = Cntidd de ectricidd.

se Inid .n .utombio (flujo d. cor.i.nte d!

mp.rio po segurdo).
96500 cutonboe .qujrt., , Frldy. qu es
t
crg .tctrc d. I equiv..nrF grmo de
su.trn.i.
[ = Itcnsdd de corrienr.lA
t = Tiempo (3)

S uriliza en ta delerminacin de couros. EI

(roromero consta de un electrodo de plar
al que se
aplica ua ilensidad de cor.ienre co;.rante I; gue
hace que se hoeren iones plala a velocidad ,nbidtr
Cudo iodos los cloruos se ha combiado coD tos
ur pa de elecodos detecran el exceso d

iones plata,

este itimo y

se dcdere el

interrumpindose Ia ritulacin

El

tjempo ranscurido

concenEacin de

es

clofuos

proporcioal

TCNICA| IN|TRUMENTAT-ES (TEtu

Cr -\,tontera. 20

conmetro

28006

ia

7)

rtlOnln@

3',7

&lt

casH FLow

T CNICAS INS TR UIIIENTAL ES

TEMA

Tcnicas de netralizacin

El inmunoanlis utiliz

en general, al aticuepo

como reactivo pam cuanrifica las concentaciotes de

anfgeDo.
Dos camctristicas de los aticuepos son

Especificidad: s refiere
aticerpo para recoDocer

a la
a

capacjdad de un

ms de un antigeno.

s dene corho la tueza de una sola

unin antlgeno-anlicuerpo. Cuando el antiSeno es
multivalenle se habla de avidez, que depeDde de la
afinidad de cada una de las uniones pero es mayo
que la suma de estas,

AjCd:

CLASIFICACIN

DE LAS

Se basan en la nedida de la capacidad que tienen

algunos anticuerpos para neulraliza el efecto txico de
los microoganismos.
Se prcparan diluciones del suero problema inactivado
(caletamiento
56 'C)
se incuban con el

TCNICAS

INMIJNOLCICAS

mioorganismo (generalmente virus) en las

condiciones apropiadas. Despus se inocula n
animales de experimentacjn una cantidad igual de
Los resultados se evalan a partir de la evolucin del
animal de experimntacin
Tcnicas con reactivos msrcados

l.

Enzinoimunoanlisis (EIA)

2.
3.

Inmunofluorescenci
Rdioinmunoanlisis (RIA)

Tcncas de precipitaci en gel

L
2.
3-

lnmunoditusin doble (IDD)

La formacin de inmucomplejos oridna un reticulado

que puede exteriorizase por prccipitacin si su tamao
es suficiie. La precipitacin es mxima cando el
atigeno
el anticuerpo estn en cocentraciones
similaes y se iibe por exceso d antigeno (y de
anticuerpo, aunque menos frecuentemente):

I'ununoelecb-oforesis (IE)

Coniainmuoelectroforcsis (CIE)

Tcnicas de agltinacin

1.
2.
3.

Aglutinacin diecta
Hemaglutiacin
Aglutinacin en itex

Puede realizars.

1 En gel. Se originan lneas o

Tcnicas d fijacin del conrplemento

precipitacin sobre

acos

de

el gel que faciiitan

Estas pruebas se ealiza en dos etapas:

2.

Prneroi Se incuba el suero problma (calentado

preamente par inactivar el complemento) con el
antgeno problema y na cantidad conocida de

simple (IDR) es una tcnica muy tilizad en

la cuaticacin de aticuerpos sricos.

conplernnto (de cobaya).

Sgudo: Se aad el sistema indicador (glbulos

rojos sensibiiizzdos con el aticuerpo).

Si en el suero del paciente existen anticuerpos el

complemento se consume en la primera etapa y Do se
poduce la lish de los eritrocitos. Prueba positiva.
Si en el sero del paciente no existen anticuerpos l
complemeDto no se consume en la primera fase y se
producc la lisis de los hehaties. Prueba negativa.

Estas puebas se rcaliz n paa el diagnstico de

ubol4 citomegalovius (CMV), etc.

C/ Montess, 20

28006 MADRID

-Tfno: 9r

Tienen una aplicacin tundamentalmente

cualitativ4 aunqu la inmunodifrsi radial

TNMUNODIFUSIN DOBLE (IDD, Ochlerlony)

Es unatcnica de precipitacin en gelConsiste en poner soluciones de antigno y anticuerpo
en pocillos separados dispuesros eD una placa de aga.
El
geno y el anticuer?o difinden atavs del redio
y forma iieas de precipitacin, La iDtensida4 forma
y localizacin (prximas al pociio que est a en menor
concentracin elativa) de estas llneas nos infoma de
ia natuIaleza y concenFacin de anticuerpo.

309 36 46

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i8

M CASH FLOW

r cut c.s tNs rn uazv rtt es

Se utiliza paa enfrentar un antigeo

resto de popiedades.
La IgM es mejo anticuerpo aglutjante que la

distinros

anticuerpos y viceversa.
En u pocillo central se coloca el antigeno a esrudia

Para

en los dems pocillos, situados en disposicin adiat,

los distintos anticuerpos o disainras dilucioes de un

mismo aticuerpo (titulo). Cuando se alcanzan

propociones ptimas aparcce

Igc.
realizacir prctica de estas pruebas

Se deben emplear diariamenle conrrole, posiri!os y

negativos. En las suspensiones de ltex se deben
realiza pruebas mezclado estas con solucin
calina y observando si exisre o no aglurinacion.

precipitaci.

INMUNOELECTROFORESIS (IE)

2. Todos los

Es una electroforesis segr.;da de una i.'nunodifusin.

3.

L La

una
electrofoesis sobre el sueo del paciente. Esro
permite la sepacin de las prorelnas sricas
en generI, anticuerpos en partjcular, en

EI

suero

se

deposita sobre los pocillos det get.

2.

especificos difuden

3.

4.

La segunda fase consiste en la adicin de un

anti-ariticuerpo (o anrigeno) especlfico. S
forma un arco de precipitacin cuado el
anticuerpo y al antianticuerpo (o antigeno)

alcazan

la zona

eactjvos deben star

temperatura

Pueden producir falsos posirivos:

fase inicial consiste en realizar

fuDcin de su carga elctrica_

Sueros conraminados, muy lipmicos o con

gran canridad de fibrinqeno.

Contaminacin bactiana

de

las

suspensiones, muesrras o solucin salina.

AutoagluriDacin

de las

soiuciones
antignicas (po bajas remperaruras).

Pueden producir falsos negativos:

,
.
.

de

Suspensionesant:genicdscaducadas.
es con tratamienro aniibitico.

Pacie

Infecciones precoces

individos

imunodeprimidos.

equivalencia.

El anti"anticuerpo (o antgeno) se deposjta en

los surcos del ge

TIPOS DE AGLUTINACIN

Tiere aplicacin en el esrudio de la hidaridosis.

Se

AGLUTINACIN EN TUBO

realiza una IE del suero del paciente tente al altigeno

hjdtdico.

La aparicin del arco 5 se consider

Prueba de Widal: Es una prueba muy utilizada en el

diagnorico de fiebrc se origen desconocido y

especilico de la hidaiidosis.

CONTRAINMI]NOELECTROFORESIS

efermedades entricas.
Se mezclan diluciones seriadas de suero con artseno
problema conplero {anrigenos H y Or. Tras un pe;odo
de incubacin se lee la diluci ms alta donde xista
aglutinacin.
AplicaciD: estudio de salmonelosis y brucerosis.

(CIE)

Es una irnunodifusin dobte en el seno de un campo

elctsico.

LI

anliSeno (nomalmenre con carga negtjvar

el

anllcuerpo rnormajmenre con carq" posiliva, se sirun

en dos pocillos forzndose su migacin por accin de

Prueba de Weil-Felix: Es lna pmeba utilizada en l

estudio dc infecciones por rickesias.
Se emplea de una suspensjn de antlgeno jncompleto.
A determinadas cpas de Proleus se les elimia el
anrgeno H tProEus OX,. Las rickensia, pre.enran

u canpo elcFico. En el punto de equivatencia se

origma a Iinea de inmunoprecipitacin.

Tieoe aplicacin n la dereccin de antieenos 6enre

estreprococos del gnpo B. Haemophijus innuenzae,
elc. Su uso est descendienrlo

reaccin cruzada faglulinacin posiriv) con el

antigeno O de estas cepas.

Agltinacin del lntigeno Vi

3. RXACCIONES DE AGLUTINACIN

AGLUTINACIN EN

FTNDAMENTO. ASPECTOS PRCTICOS

lo

que son mucho ms sensibles que

28006

febriles coo la salroDelosir ) l brucelosi(.

Ios sueros se esayan fenLe a Ios anligenos Droblema,
la presencia de aglurinacin ind c qi. t" p-.t" .,

las

MADRID - Tfno: 9l

un

Aglutinacin en porta con suspensioes de ltex: Se

emplen para e diagsco de cienas infecciones

reacciones de precipjtacin, peo similaes a ellas en el

C/ Montesa,20

PORTA: Permite

diagnstico rpido.

Son recciones que difieren de la precipiracin en el

lamao del antigeno (o anricLrerpot que es paniculado.
La formacion de inmunocomplejos es visjble a sinple

vista, por

es

necesaio considea los siguientes aspecos:

las
de

ua linea

la

30S

e r -

w,nw.";shn;;;;i";;;;;

39

E CASH

r c Nt c,s INs rnuan Nrtt e s

FLOW

positiva. Es una prueba de delec(in selectiva

e"

la

fase aeuda de Ia enfermedad

Rosa de Bengrla: Se emplea como an!geno una

susDensin de brucellas (PH de 6) teid< con rosa de
d;agnsLico rPido de
Begal. Es ril para

el

brucelosis debido

a que tiene muy

Pocos falsos

positjvos y negativos.

Se emDlean como antlgenos suspensiones inactivadas'

coloreadas. Son tiles para el
nor-uiirrdu,

diagstico

no se

produce

aglutinacin. Reaccin positivaSi el suero Do contien anticuerPos antiviricos los

hematles aglutinan. Reaccin negativa.

CoNGLUTINACIN (CoA): La tCniCA d

.oaslurinacin ms utiliada es la estfiloccica Se
..fr.u putu Ia jdenrificacin de gonococo y

AcLUTh{AclN MICRoTITER

Si el suero contiene anticuerPos

reaccionan coD el antlgeno Y

infecioes tificas' Paatificas y

brucelosis,

Requierer my poca caltidad de mestra

Ia

aglutinacin se obsn'a fcilmente.

HaemoDhilus influenzae

anligeno se le aiade una

eniquecida con protema A
de
erafilococos
susDensin
(qu; fiia al estafilococo lgc por la accD constante
diando libre el delerminante antigetico). La presenia
de coaqlurinacin indica que la prueba es positrva

A ua suspensio del

I r.r.as coN
AGLUTINACIN DIRECTA: SC

PTOdUCE IA

REACTfvos MARCADoS

aglutinacin directa del microorganismo al aadir el

ENZIMOINMUNANALISIS (EIA)

Se emplea en Ia idetificacin de los esteptococos

Es la tcnica innunoanaltica ms usada actualmente

Grupot.
HEMoAGLUTINACIN (HA): Los aDtigenos se fan
a hematies que aglutinan al aadi el antjcuerpo.

Detecta ctidades de anticuerpo inferiores a I Fglml.

DesvDtajas: Fijacin poco homognea Los hematies
se estabilizan con cido tnico, slutaraldehldo o

fomalina.

por su sensibilidad y sencillez.

Se usa en grn cantidad de deteminaciones cualitativas
(lepatitis, virus HIV, etc.) y cuantitativas (marcadores
tumoales. hormonas. etc.)
Se caacteza por utilizar un macador nzimtico
(pe.oxidasa, fosfatasa alcalina) uya actividad infoma
de la concent-cin de antgeo (anticueryo).

EIA Hetosneo IELISA)

AGLUTINACIN EN LTEX (LA): LoS ANIIgCNOS SE

fijan a paficulas de ltex que aglutinan al aadi el
articuepo.
Ventajas: El tamao

y la forma de las padculas

es

constante. son biolgicamente inactiYas y la estabilidad

de unin ltex-antlgeno es total.

Se emplea en el

diagnstico

de

deteccin

de aniicuePos anti

LA AGLUTINACIN GHA):
Mchos virus tienen capaidad pa' aglutrnar hcmaties
humanos. En esta prueba se mide la capacidad de
INHIBICIN DE

inlibiciD de la HA por la presencia de anricuepos

artivficos en el suero,
El suero del paciente se icuba coD la suspensin vtal
y posteriormente se aade el sistema idicado

oo

(heaties humanos).

YY
C/ Montesa,

20

Requiere a etapa de separacin del reactivo ntcdo

no unido.
Puede ser:

Competitivo

en el diagnstico de una infeccin

por
esEeptococo tipo A.
activa
estreptolisia

aticuerpo.

salonelosis,

bucelosis, infeccin poryersinia, etc.

ASLO: Prueba d

Se realiza en fase slida donde se une el andgeno o

28006 MADRID

El

antjcuerpo (e cantidad limitante) es adsorbido

sobre una fasc siida (tubo, pocillo, etc.). se aaden
simultDearnente el antigeno problema y el antigeno
marcado de forma que ambos compitn por la unin al
anticerpo. Trs la eliminacin del antigeno no unido
(lavado) se alade el sstrato dl enzima.

la

accin se realiza una )ectura

especaofotomtrica, de forma que la conceacin de
la
producto fmal es invesaente proporcional
concentacin de andgeno.

Tas parar

-Y

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io ns'co

40

[ CASH FLOW

T CNI CAS INS TRUM EN TALES

anricuerpo marcado enziaticamente (conjugado)- Se

welve a lavar y se aade el sustaio del enzima. Tras

No ColIlpetitivo CriPo Sndwich)

Este tipo de ensayo es vlido solo pam ntignos

(sticuerpos) polivatentes.
El anticuerpo en fase slida est en exceso. Se anade el
antigeno problema Y trar lavar se aiade un segund

parar la reaccj se realiza una

oc
YY

.) co(t,

..-..

YY

lectura

espectrofolomtrica, d fona que la concenFacin de

produclo final es proporcional a la concentracin de
antgeno,

YY

rY^

AA
YY
Tras un periodo de incubacin se lava

f,IA Homoqneo

se mide Ia

No requiere la sepamcin del eactivo marcado y no

lnmunonuorescenci indirecla 0FI)

El tipo ms comn es el EMIT, ensayo competitivo

donde la actividad del enzima marcador se modifia
por la unin del antlgeno al anticuerpo. La formacjn
det imunocomplejo inactiva el ezima" por tnfo la

medid

de actividad enzimtica es

El

antfgeno unido a una lase slida se incuba con

articue.po no marcado, Fas u Periodo de incubacin
(fomacin de un inmunocomplejo no marcado) se
anade un anti-aniicuerpo marcado con fluore<cerna.

inversaeie

proporcional a la concenacin de anllgeno.

Despus de un nuevo periodo de incubacir

lavado se mide la fluorescencia.

Wstern Blot

Polarizacin de fl uorscencia

CombiDa ia elecoforesis con el ELISA.

Los antgenos son

pevimente separados por

lectroforesis (Page SDS) y transferidos la fase slida

(membna de niaocelulosa) por accin de un campo
elctico sobre la que se realiza un ELISA.

nar

Se basa en Ia disrinta polarjzacin de fluorescenci que

tAgri y una grnde

presentan una molecula pequea

iae'-4.u.).

Tras un ensayo de tipo comperitivo se mide Ia

polaizacin de fluorescencia que ser inrersamenle
propocional a la cocenlxacin d antgeno.

INMUNOFLUORESCENC1A (IF)

Estas tcnicas utilizan un arcado fluorescente

(Fluorsceina). La preparacin se observa e un
microscopio de fl uorescencia.
Distinguimos:

Estas tcnicas utilizzn un matcador radjactivo ('?5D.

En el RIA clsjco competitivo, el antgeno problema y

el aDtlgeno marcado compiteD en su unin a un

Inmunoflorescencia direct (IFD)

anticuerpo en fase slida-

antigeno, !ido a a fase slida (portaobjetos,

esfera de vidio, etc.) s pone e coniacto con el

El

aDticuerpo macado con lluoresceina.

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En la tcnica IRMA un antlgeno inmovilizado compite

con el antigno er su utin al anticuerpo marcado,

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INS TRAMEN TALE S

La erisin radiactiva cs ivcsamatc Popocionl a

la conccfci dc entf8ano.
ED

el RIA

Do ompctitivo, l snticctpo

sc te aladc cl afil8co y

polclormcnto

imovilizado

.l

aticucpo

arcado,

Lr misin diactiva

cs

dictam.lt propocionql

conccntraciD dc tigcno.

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TcilICAS I NSTRUMENTALES
TEST
TES - TEftlA

L nolaridad

l.

CONCEPTOS BASICOS. MATERIAL DE

LABORATORIO.
1.

El pH,

2.
3.
4.
5.

es:
7.

de una disolucin esi

Nmero de moles / litro de disolvente

Nmero de moles / kilo de disolvente
Nero d noles / lifo de disoluciL
Nmero de moles / moles de disolventeNmero de motes / kilo de solucin-

El mrtrz

forado se tiliza principalmente

1. -log [H.]

2. atilog [rf]
3. loe (l/iH'l)
a. Clog tl)
5. antilog (1/[Ht])

l.

2.
3.
4.
5.

Le medicin en una pipta:

1. NO

canfidad de soluto necesaria para preparr

2 litros de una disolucin 0.1 N d ClzBa (PM:

l0 ml.

208) es:

gaduacin.

5.

Es correcta cuando el menisco es tgente a la

lfnea que seala Ia graduacin.
No depende de l sihracin del menisco.

El prefijo para designar l0-12

es:

9.

Nao

cetimetros

2. I micrmeto
3. lo* m"tto.
4. l0 e metros
J. l0'ro millmetros

5.

41,6 e

La normaidd de una disolucin de HCI (PM:

36,5) al r2,s% y densidad 1060 Kg/n3 es:

Un dador de Protones-

2. Un dador de Potoes y electones

3. Ur aceptor de molculas cargadas.
4. Un acepto de Protones.
5. Un aceptor de electrones.

ll.

L pH:pKtl

Un tmpn es:

1)

C/ Montesa, 20

9N

D acuerdo con los concptos de Bronstd Lowry un cido s:

Un solucin regulador, alcanza su mrima

cpacidad d tamponamiento cuando el:

2. pH: - log (K I
3. pH:pK+l
4. pH: - log(X)
5. pK: pH +l

10,4 g
20,8 g
2,8 g

10.

lo

l.

2. 6,3 N
3. 3N
4. t2N

l0 equivaln a:

l.

2.
3.

1.3,64N

2. Mili
3. Micro
4. Pico
5. Femto

lo

Reacciones de precipitacin.

se puede realizar para volmens de 0,1 a

2. Es posible para volmenes de 100 a 500

3, Es conecta cuando el menisco queda
justamente por debajo de Ia lea de
4.

Dispensar volmenes de lquidos

Contener volmnes aproximados de liquidos.
Neutralizacioes cido - base
Contener volmenes xactos de liquidos

Un par coDjugado cido fuerie - base dbil.

2. Un par conjugado cido dbil - base lerte.

3. Una suslancia qe matiene el PH de ua
solucin alrededo de 4,3

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cast{

4.

J.

FL..ow

Un p o parE3 cojugdos cido - baJ quc

brcar que, c un cicto magaD dc la curvr dc
titulciD. cl pH vaic poco cuando s allade
tff cica catidd d. iocs OIf o f.
Un. susfancia qu. manticrc ol pH dc ua
solucin alcdedor d

12.

7.

L ldd d. prel .

l.

TE CMCAS INS TRAMEN TALES

l S'I. esl

Toniclli

2. Nowton
3, Posl
4, Ed Hg
5. Dln/c'z
13. Sobra

:-

lr rouclocs rgldort

e clrto qual

Elt constituidr por dos cidd dbics.

cido ficrtc y ofo

2. Ettd c!stituidas po! u

dbil.

3. La dihci do footo

su capaaidad

de

trponsmioto.

4, Est cotituidts por do3 cidor fucrte!.

5. Su capacidd guladort a axtiBDdc a
cualqic pH.

la.

El

rill.ro

l.

Nornlidad
Molrridad
Mollidad

2.
3.
4;
5.

do noaa por

kllo dc dbolv.Dtc .:

El cqivrtc qufnico
El Pcso rquivalal

15. Er u prop.dd coligtivs dc l, daolcloe:

f.

2,
3,
4,
5.

Dcnsibd
Colo
Olo
Aumcto d.l puto d coDglci,
Prrsin ostica.

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r cNt c.ls Ns rn uM r Nr,sr

2. Es muy til en el

TEST . TEMA 2

3.

TECNICAS ESPECTROCOPICAS

l. L REM Uv-Visible al
L

anlisis estructural de
comPuestos orgrnicos
No hay diferencias de sensibilidad respeclo a la

$rbidimeria
,1. Se aaliza

la radiacin

dispersada
muestra en un ngulo de 90"

5.

interaccionar con

tomos y molculas origina:

2.
3.

7.

TraDsiciones nucleaes

2- Emisin

tomos y las molculas

3. Diiaccin
4. Re0accin

5.

Transiciones rotacionales de

8.

la

es

un tcnica dei

Absocin

Tansiciones de electrones exteiores en los

Trnsiciones vibracioDales de

po

Proporciona espectos de lineas

La florimetria

Transiciones de electrones intemos

4.

es

Los especlros moleculrs de fluorescencia y

fosforescencia se estdian en l regin:

2.

La regin visible del espectro abarca:

l.

2.
3.
4.
5.
3.

200-380 m
200- 780 nm

l.

RadiofrecueDcias

500-800 m

9. La principal funte de energa utilizada

En Ir espectrofotometria se usal

2.
3.
4.
5.
4-

t.

2. uv-Visible
3. Microondas
4. IR
5. Rayos gamma

300-500 nm
380-800 nnl

Luz
Luz
Luz
Luz

fluorimetria

l.

polaizda
verde- arnaillenta

2.
3.
4.
5.

policomtjca
monocromtica

Rayos lser

Un grupo ahlado e

insaturado con una

bsorcin caracterstica en k rgin UVVisible se llara:

en

esi

Lmpara de tungsteno
A.co de mercurio

Aco de xenn
Lrtmpaa de deuterio

Lmpara de ctodo hueco

10. L, relrcin enlre concentracin y fluorercencia

Dieclamente proporcional
Invesamente proporcionai
Poporcional al log(F)
4. .lnversamente prcporcional al log(F)
5. No hay elacin

2.
3.

2. Balocromo
3. Cromforo
4. Hipsocrono
5. Prosttico
5.

Cul es el efecto producido por un sustituyente

sobre un cromforo si su longitud de onda de

nxima sbsorcin se desplza hscis vlo.es

que:

AumeDta con la movilidad de

4.
5.

No

Efecto hipercrmico

1as

La refeloetrfa es una tcnica

poduce emisin de REM

la luz dispersada
n8ulo de s0"
se

Es una medida de

litio compensa todas las variaciones, xceptol

Es una tcnica de absorcin

C/ Montesa,20

e u

12. En la fotomtria de llama el ptrn inlerno de

instrumen&l

qu presenfa las sieuienfes caractrsticas:

1.

paniclas

polztiza^

2. Efecto hipocrmico
3. Efecto fotoelctrico
4. Efecto batocrmico
5. Efecto hipsocrmico
6.

En l poarizcin de lluoresceci, es cirto

2. Disminuye con la movilidad de las paflcuias

3. Dismiuy la incidir sobre la muesfa luz

infriores?:

l.

ll.

28006 MADRID

2.

Velocidad de aspiracin
Velocidad de nebulizcin

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 CASH
3.
4.
5.
13.

FLOW

TCNI CAS TNS 7:R UMENTALES

n la atomizacin
vriaciones en la concentrcin de la muestra
Todas se comPensan

Eficacia

La especi ebsorbent en EAA

l.

2,
3.
4.
5.

Iones
Electrones
Atomos no excitados
Atomos excitados
Molculas

14. Las

e5:

lmprm! de ctodo hueco:

el

Tienen

ctodo dcl mismo elmento a

aalizar

2,
3

4.
5.

TieDen el nodo de Dismo clemento a analizr

Tienen un gas dc elteno fcilnente ionizablc
Se lilizan en fotometda de llam
Emitcn en la regilt del visible

15. Qe elemnto

fotohetrf

de

tendr renos sensibilided por

llm?:

2.
3.
4.
5.

EEA

se

()

no depcnd de:

EI pH

2, La tempertut
3. El disolvente
4. La concentacin
5. L longirud dc onda
22. Qu lnpars y cbels tilizrle psra nedir
190 nm?:
Tuagstcno
Tungsteno
Deuterio y
Deuterio y
Tungstcno

y vidrio
Y cuaro

vidio
cuarzo
y plstico

23. Las unldades ms cones de la bsorbnci

Do14

4. Vcr
5. Es adimnsional

Protlnas

24. Una tcnic empleada habitutlmentc par. l

detcrmincin de protelnas n oria s:

l.

Absocin

2. Refr-actometrla
3. Fluorimefia
4. Fotornetla dc llama
5. Turbidimetria
25. La refractometri

A= loe(T)
A= los(l/T)
A= lo(T'lo)
A= 2- log\T'/o,

luz UV respecto s

Mayor
Mayo

)"

basa etr ls mdid de

Dispe$in
Difraccin
Reflcxin
Nigna de las anteriores

visible tine:

y meor ecuencia
y mayor Aecc[cia

C/ Mootesa,20

se

1. Reiaccin

2.
3.
4.
5.

de )as arterjores

l,
2.

Radiacin Pasita

21. El vlor d coficiente de extiDcin molar

2.

Azcares
Aminocidos
Grupos crogenos

2.
3.
4.
5. Ningba
19-

Dilpesin de l Ediaci
Transmhi de la rdiacin
Refiaccin de la radiacin

1. Ell

No metales

Selr la respuesta correct:

l.

2.
3.
4.
5.

Metales

2. Glucosa
3. Cualquier mctal
4. Sodio y potsio
5. Oligoelemtos
18.

Absorcin pasita

17. La foroelrla de llama es el ntodo de eleccin

prs el snlisis en lquldos bolgicos de:

frecuncia

1.

2.
3.
4,
5.
determlnn fundamntalmente:

fec\encia

20. EI error por trbidez Provoca:

1. Sodio
2. Calcio
3. Potasio
,f. Litio
5. Hieo
16. En

3. Menor , y mcDor
4. M.nor , y mayo
5. Meor eergia

28006

TECNICAS INSTRUMENIALES (TEST 2)

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l:

M CASH FLOW

TE CNI CA

TEST . TEIIA 3

S INS TR AM EN TA LES

3. Agarosa
4. cl de poliacriiamida
5-

?.

Celulosa

La vlocidsd de migracin e Ia FF depend de

Ios siguienrs factores excepro:

l. Lr

electroforesis permhe I separacron de

sulancias en funcin de su:

l.

L
r.

as

3.
4.
5.

Sohbitidad

2. Carga
3. Presin de vapor
4. Punlo de fusin
5. ?roporci

2.

en la

8.

mezcla

Ls sepracin de protetnas por etecrroenfoqu

se pueden determinar
EF
3. Isoelectroenfoque
4. Inmunoelecfoforeshi
5. EFcen geles

9,

le:

l.

n presencia de

D.-sarfolla una carga negativa en el sopone y

oigh un flujo de ioes + del disolvente
hacia

Velocidad

el crodo

4. Acei;acin
5. F'rea

2.

Desarrolla una caga posjriva eD el sopone y

oigina un flujo de jones _ del disolvente
hacia

En..na.comtografi de intercambio rnco,

urilizando un rerina con cargs negatira,

3.

Desrolla una rurluhDcia inica que hace que

tos rones del disolvenre nuyan hacia el
nod y

4.

Impide

5.

isoelcr.ico
No se da habirualmer

e nodo

elcrodo

oDservnos qe:

2.
3.

4.

).

EIcido asprtico eluye despus que

rirosina

La atanjna eluye antes que la rreoina

la lisina eluye despus que el cido eturrco
La reucrna eluye entre Ia histidina y Ia arginina
La vatiDa elu)e anres que el(do aspfjco

10.

amrn0cdos. eue ocurrir

coh ,que os

2.

miocidos culo pnto isotctrico es

menor
que el pH det lnpo srdo?:

l.

elech.oliros alcanzar su punro

nmero d plaros rericos y

_4T,"]" la selectivjdad
dlsrnrnute

el numero de plalos ledricos

ta

Dismrjryle et nmero de praos reoncor

.a

Aumenla

selecri!idad
setectvldad

Precipitann

2. Se quedaa

a los

L resotucin en una cromrtogrfia liqurd, en

genera! urnenta cuaDd:

t.

5. A lln _deterninado pH se hace uDa EF de

er

a 9_,:llil" et nmero de plalos rericos y

urenta Ia selecti\idad

lpunro de aDljcacin

3. Mi$aran hacia et nodo

4. MigaraD hacia el crdo
5_ Se descornpondn

5.
I

6.

de potiacritamida

La electroendlmosis a pH alcalino

Tiempo

2.

EF bidinensional en gel

POT

El Svedbrg tiene nidades

l.

es:

2. No

1. CaJga
2. Punfo isoelcr,ico
3. Relacin caga - tamao
4. Coeficienr de repato
5. Carga a pH bsico

4.

Para determinar el peso molecular de u

proteha, el mfodo ms decado

es posible si h6y difrencias de:

3.

Carga elcrrica neta de la Danjcula

rempo
Temperantra
Frza del campo eicrrico
Tanao y forma de la partcula

Se mantienen constantes ambos parimefros

ED una cromatogrulia d penetrsbijidad:

En En t get ms litzrdo y que togra

nejores
sepsscones es:

l.

Las pafculas se separan en funciD de

su

l.

2.

2.

cel

de

almid

fase estacionaria tiene un tamao d poo

gande

Agar

C/ Montes, 20

caga

3.
-

28006

nte@

Las paficlas se separan er1 funcjn de

su

CO

GASH FLOrv

T CNI CAS INS TRAME NTA LES

2,
3.
4.
5.

polaridad

4.

Las paficulas se sepaan en funcin de

su

solbilidad

5.

Las pafculas se separan en tuDcin d

su

Es ua domatogafia de adsorcjn

La FE es slida
Se aliza eD colunma
Es na cromatografla de repano

solubilidad y tamao.
18. En

12. Idicar cual de las siguiettes afirmaciones no s

refire a cromstografi de gases:

l.

2.
3.
4.
5-

La fase estacionaria es gaseos

La fase mvil es gaseosa
lquido
La fase stacionaia suele ser

Los compuesxos se identifican e funcin del

13. En la

l.

t9.

tiempo dc retencin
Requiee la volatilizacin d la muestra

2.

1.

Refi_actomt_icos

conductimricos

3.

Los tiempos de retencin son indepeDdientes

EI volumen de elucin

molculas con carga

20- En

ms

l.

retenidas

14. La cromrtogrsfi llquida n fase reverss

caracteriza por:

de la FM con

ls cromtografia sobre ppel el mecnismo

Paticin

2. Intecambio inico
3. Adsorcin
4. IonizaciD
5. Filtracitr

se

21. Una protina cs n aDfolito que tendr cargs

polary FE polal
apolar y FE apola
apola y FE pola

negstiva neta:

l.

Tres fases

El pnimetro qu rige

l!

2. A

separacin en una

3. A
4. A
5.

cualquie pH por encima del

pl migra

culquier pH por debajo del

l.

es:

2.
3.
4.
5.

cualquie pH por encima del

pl y

en

migrara

pl y migrar

hacia el ctodo
A cualquie pH exccpto si es igual al pI

Pr
sp"racin en un

una separcin por HP[,c

l muestr:

Debe se derivatizada
Debe se volailizada
No requiere procesamiento previo
Debe ser desgasificada
Asciende por capilaridad

23. El volumn d retencitr esl

finl

La FM es slida

C/ Montesa, 20

pl y miga en

hacia el ctodo

1. Slbilidad
2. Polaridad
3. Presin de vapor
4. Moviiidad
5. Interacciones quimicas
17. L cromatogrfia en capa

debajo del

EF hacia el nodo

e3:

El prnetro qe rige I
cronstografis de rparto

A cualquier pH por
EF hacia el nodo

1. Solubiiidad
2. Polaridad
3. hesin de vapo
4. Movilidad
5. Interaccionesquftnicas

l.

de la particula con

polar y FE apoiar

cromtogrefia de adsorcin

16,

velocidad rciativa

respecio a l paltlcula

negaliva

15.

ta

de rtncin s basa en fenmenos de:

5. Las molculas ms gndes quedan

2.
3.
4.
5.

El tiempo de retencin
El volumen de exclusin

5. l-a velocidad relativa del frente

de! pH

FM
FM
FM
FM

las

respcto al frente de la FM

cluycnte

1.

Fluoimtricos
Pofenciomficos
Absocin IJV- Visible

En una cromrtografia en capa fina

2.
3.
4.

la

las

utilizan detectores:

2.
3.
4.
5.

Ls molculas con mayor carga slen antes de

la columna
furza inica del
Es peciso lontrolar

etienen

se

prrtJclas se identifican eh funcin de:

crolnatogrrfi de itrtercambio inico:

4. Solo sc

HPLC no

28006 MADRID

-Tfno:91

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l.

Voimen de fase mvil necelario paa sepaar

2.

dos soluros apolares con una fase esBcioaria

Volumen necesaio para llenar ua coluna

wwrv.cashflow-oposicions.com

@ C/ASH
3.

T CNI U8 INS TR UMEN TA L E8

Volunn dc fasc mvil neccsnio para clui un

soluto dado en u columDa cotuatjogIfica
VoumaD qua qucd, on ta columna una vcz
eluido el soluto
VoluDcn de fase astacionaia necesario para

4.
5,

lpra
24.

FLd,v

dos solutos da polaridad scmcjanta

novllldd ek trofordc gcles dQ

pollrcrihdldr cr pr.ncb de SDs de un
protin rcducd co dillotr.itol, vl.h.

deterinsd! porl

SU

cosposicin qulnica

2. Su rclacin cg^amso
3. Su fona
4. Su ta&alo
5. Su pno isolctico
25. Ls eflcscl d. u colEmh rte IIPIC se Juel
ctficar trv d. tr Diimo qua exp.si

l.

L longitud dc h cohrrms

3.

dc las
que
compolc cJ-promcdio
relloDo
El dibero edio d! poro de la6 pafiJculas quc

2. EI

4.
5.

padcar

lamaito

corlponcn el rcllco

El Dmcro dc platos tc.icos

El tiempo dg rcEcin de un cstnla conocilo

TECNICaS DE LBOMTORIO

c/ Mont,

20

(|ESt 3)

28006

MADRID@

T CN TCAS I NS TR UM EN TALES

CAH FLOW

penetra en el objetivo

TEST . TEIIA 4

7,

l.

METRIAL PARA MICROBIOLOGIA

t.

El tornillo micromtrco de un

2-

2.
3.
4.

El enfoque pido
Ajusta el ocula
Ajustar el obj.tivo
Un ajuste lmo

5.

Gmduar la ltrz

microscoPio

ur obietivo sco
ril e; el estudio dcl scdimento urinario
Es u objetivo con un dimetso de camPo

9'

10, En

E! la distancia entre el ocular y el objetivo

l.

objeto

microscopio co ur oculsr de l0
lunretos y un obetiYo de 40 aumentos' la
mplificacln total ser de:

E n

ll.

No

se producen efectos

l.

5.

esterilzcin por vaPor fluente:

Se

utiliza calor seco

se sobrcpasan los

Ls imagen obtenida por un microscopio e!:

60'C

Utiliz vapor caente

Su fuente de calor es elctsica
Su fuentc de calor es gas

Tiene un tiempo de esterilizacin ms corto

que el attoclave
Permite Ia esterilizacin de medios de cultivo

l2- Lr liltrcin

s n mtodo

til pra esterllizr:

L Medios de cultivo
2. Mcdios de cultiao con aalcaes

Real

3.

2. Disminuida
3. Virtual
4. Derecha
5. Convgente

txicos

El Horno Psteur:

2.
3.
4.

1.40x

Vidrio

4. Plstico
5. Factores de crecimiento

13. Para l esterilizacin d natrial de plstico

podrfa utilizer:

El poder de resolcln de u microscopio:

Depende de la longitud dc la luz utilizada

2. Homo Poupjel
3. H,Oz
.t. Glutaraldehido
5. Metaol

2. No depende de la longitud de la luz utilizada

3. Es el misrno paa todos los microscopios
4. No depende de la efraccin de los mcdios
5. Es idependiente de la cantidad de luz que

C/ Monts,20

El wpo de agua es de elevada PeneFabilidad

Se utiliza calor seco
No se iclyen los mdios de cultivo
El calentamiento se rcl a baja Presin

5. No

2. 50x
3. l00x
4.200x
J.400x

eslerilizacin por utoclave:

2. La presin es superioI a la aqnosfrica

3. Se alcaDznn hasta 150" C
4. No se sobrepasan los 100"C

4. Es rnhia en lm objetivo de l0 aumentos

5. Depende de la fuente de luz

2.

enfocado

6.

En

3.

2. Es Ia misma paa todos los objetivos

3. Es la distancia entre la leDle y el

rtodo de estrilizacn:

Flameado

4.
5.

La distanck focl:

de 5

4. Es uD objetivo dc illrnersin
5. Ticn a distancia fcal de 16 mm
3-

Requiee que la muestra est teida

objetos trulsparcntes

2. Vapor fluente
3. Tralafliento con xido de etileno
4 Tratamicnto cor formol al0,l%
5. Ttamiento cori raYos gamma

Es
z. Es

3.

Permite visualizar objetos biretingentes

No es

El objetivo de 100 aumentos:

l.

Es d carnPo oscuo

2.

. Perrnite visualizar
5. Utiliza lllz UV

sirve prm:

l.

El nicroscopio de contrsste d. fses:

28006 MA.DRID

Tfnor 91 309 36

46

wYw.cashflow-oposciones com

@ CASH FLOW

I cNI c4 S INs TRUME N TA L ES

l{. L, dcsinfeccini
L

'a

Asega Ia dcstrucciD dc espoas

2. Ascgua l dcstruccin dc todos los vini

3. Es suficientc paa el procesamicnto dc
4.
5.
15. No

las

muesbas
No acgura Ia destuccin de *poras
Es rs drstica que la gsteriiizaci
es un

deainfecfrte qofrnlco;

' 1. Crcsol2%
2. Fonol0,l%

3, Fonol0,l%
4. L.jta
5, Etol

TECNIC/S NSTRUMENIALES TAST

C7

yontes,

20

28006

ItADnm - rrno:

Cr

09ie46:;;;;;;;;;;;;;;

Eg

CASH FLOW
4.
5.

TEST . TEMA 5
TECNICAS DE \'ISUALIZACION DE
MICROORCANISMOS EN
MICROSCOPIA OPTICA
1.

Pra la

visuleizrcin

"in vivo"

6.

Es.ecomeDdable verlos sobr n fondo oscuro

La observacin se inicia cot objetivos de poco

7.

Nrngtna es ciefa

tcnica dc gota peDdienle en porta excvrdol

Pemite la visualizacin de microorganismos

3.

Ia

motilidad

de

4.
5.
8.

los

2.
3.
4.

Todas son cietas

cierta

Supone la muerte d los mjcoorganismos

Permite la utilizacin de cualquier color"nte
Altera la motilidad de los microorganismos
Requiere el empleo de colornles poco lxicos

y diluidos

5. Permite

la

5.

observac;n

de

9.

obsevaci de

estructras

4.
5.

microorganismos I0'

Se basa eD que el microorganismo toma el

colorate en vo y se observa ya muerlo
4. No exisrc esre lipo d ticjn
5. Es una

5.

ticin cstructal

Suelen pepamrse

en forma de solucin

ll'

alcohlica

2.
3.

28006 MAOR fD

de

los

Pgrmiten la obsevacin de microorganisfilos

No

se

realiz sobre muestras directas

Todas las bacterias toman el colorarte, pero las

bacterias Gram (-) lo pieden al decoloar con

baclerias Gram

G) pierden l

pdmer

colorante debido a su gan contenido en lpidos

Como segundo colorante se uriliza solucin
auosa de salianina
Las bacteias Gram (+) toman color vioieta
Todas son ciertas

Para la realizacin de un Gram:

1-

La muestra debe jase con alcohol- acetona

3.
4.

drante 5 minutos
La de.colorcin se realiza con alcohol metilico
Un colorante cido se utiiiz" para Ia coloracin

5.

Las bacierias Grdm (-) se tien de color violeta

colorante

a utilizar es saFanina.

La tincin de Ziehl-Neelsen,

Pueden progesivos o regesivos

Suelen utilizzrse coloranles bsicos

C/ Monlesa, 20

motilidad

Son tinciones que permiten diferenciar unas

bacterias de otras segrin su afinidad tintoial
Son ticiones simples
No requiercn ]a fijacin de la muestra

2. El priner

Sobr los colorantes utilizados n las tinciones

bacterianas sealr Ia respuesla corrects:

t.

la

alcohol- aceion

L Requiere fijacin pevia de lor mismos

l;

los

microotganismos
Es una tincin diferencia'
No permite l obseraacin de cpsulas

2. Las
3.

Pemite

resaltando

En la tincin de Gram:

1.

La observacin de microorgnismos por tincin

postvital:

2.

fondo

Sobre las tinciones difrncisles selalar

1.

La observacin d microorganismos po tincin

2.
3.
4.

el

respuesta correcta:

vihl:

l.

Requiee la facin previa de la muestra

nicroorganismos que quedan sin colorear

microorganisos
Es u mtodo ms lerto y engorroso que la
obsewacin eDtse pofa y cubre omal
es

Toda Ias anteriores

Ninguna dc las nteriores

3. Permit apreciar

2. Pemit aFeciar

Nig]]na

Calo
Alcohol mellico
Alcohol etlico

2. Colorea

Todas son ciefas

vivos sin colorear

4.
5.

microorsanismos puede

La tlcin negtiva:

utiliza como medio de montaje ClNa 0,9% o

KOH
Se

4.
5.

3.

Todas son correctas

La f'jrcin de
2.
3.
4,
5.

aMnto hasta llegar al de inmersin

3.

Los colorantes de contraste pueden se cidos

realizarse mediantei

microorgnismos":

2.

tss

rcMc.qs n tsrnuueNr,t

se

crcterizr por:

Se uuliza tucsina fenicada como

primer

colorante

Tfno: 9l 309 36 46

w$a{.cashflo\a-oposiciooes.com

IO

CASH FLOr,v

TE CNICAS

TNS TR

UMEN TAL E S

2. Se
3.
4.
5.

decolora co una mezcla de aicoholclorhidico

El fondo s colorea con azul de metilero
Tic las bacteias cido, atcohot resisreDtes

(AAR)
lods son ciefas

12. El mtodo de Kiryo:

l.
2.
3.
4.
5.
t3.

Es ua tincin paa bacterias cido- alcohol

resistenres (AAR)
Se basa eD una iincin en caliete
Utiliz un coloante cido d contste
Utiliza lgol como mordiente
Todas son ciertas

Er Ia

drteccin de bacteris por

la

tcn,ca

fuorocrmica de la Auramne- rodmina:

l.

Ls bacrerias apaecen reidas de

colorrcjo

2. Las bacterias cido- alcohol

resisrentes

aparecen tf,idas de color osado

3. Las bacterias cido- alcohol

4.
5.

resistentes

apaecen reiclas de color amaillo brillate

Debe utiliT-ase objetivo de inmersin
Se utiliza miroscopjo dc contraste de

f6es

14, La tincin de cpsutas:

I.

Se basa en la afnidd de Ia estructua

mucopolisacririda exterior prerenre en alglnas
bactenas por l coloranlc
Utiliza cristal violeta como cotoEnt
Requierc ftacin dc la mustra

2.
3.
4. No se utiliza paa la detenniaci
estafilococos

5.

de

Iodas lon ciefas

15. El lugols uritizs n ta tincin:

l.

De esporas

2. De cido-alcoho esistentc
3, De corprlsculos metacromticos
4. Negatjva
5. De CraI
TECNIC4S NSTRUMENTALES (TEU 5)

c/ Montes,20-2800 M.nnrn
-

rrn@

ll

EO

CASH FLOvt'

TCNICAS INS TR UMENTA LES

inrensamede claro alrededor de la colonia Por

herlisis total de los hemates

TEST . TEIIA 6
4.

maniesta T-hemlkis aparece un halo

ensamente claro aLededor de Ia colon;a por

Si

bemlisis parcial de los hematies

5. Todas son ciertas
6.

l.

Se hace un

blnco de dllucin de cuatro tubos

(t:10 etr cda tbo) con urie

t. Es un

suspnsn
dl
problema de bacterias. Se smbru 0'1

ni

2.
3.
4.
5.

ltino tubo en custro plcs. I,os resullado!

sor 50,90,65 y 75 colonias por Plca.La
concrtracin proximrda del problma ers:

l.7x104
2. 7Xn'
3. 7x 106
4. 7 x 107

l.

Sobr los medios de

l. Los

medios enriquccidos determi&1

Los

medios diferenciales facilitan

el

crecniento de u grupo de bacterias solamente

2.

2.
3.
4.
5.

cltivo, srlar Ir respust

el

crecimiento de microorganismos specialmente

3.
4.
5.

2.
3.
4.

Los medios selcctilos pemite cl crecimiento

de un tipo (gnero) de bactens
El medjo SS es n edio eniquecido

El

Eledio agrr sangre

no es un

4,

peptonas son ricas en Eiptfano

Todas son cigtas

5.

Ninguna es cierta

si

l.

las

Es especial paa el estudjo de tevaduras

Contiene vrde malaquita

Indica crecimiento de bacterias cido-acohol

eDriquecimiento Para

Es n medio diferencjai especlfico para el

medio diferenciai especlfico paa el

cecirniento de bongos y levaduras

medio diferencial especico paa e)

creciftiento de coos gran (-)

3. Es n

4, Es un medio que caece de peptonas

5. Contiene uevo coagulado

I0. El nedio de Thsyer- Marfin:

Solo permite el crccimiento de aerobios

Es D medio difercncial

1.

CoDtjene peptonas

Er Ull medio sclectivo

Todo es cierto

Es un medio diferencial liquido

Es un aga chocolate al que se le aade facto

V y tres atjbiticos: vancomicin4 colistina )

nistatina
3. Permite el aislamieto del pneunococo
4. Pemite el aislariento de ShigUa

Es un medio erriquecido
bacteriana

5. Tolas son ciertas

y dc identificacin

2. Permite la idertificacin d bacterias Gam G)

3. Si manifiesta d-hemlisis apaece un halo
C/ Montesa, 20

C)

cecimiento de mioobacteias

El agarsangre:

l.

Es lelectivo para el cecimiento de cocos gram

2. Es un

El caldo tioglicolto:

2.
3.
4.
5.

Se mplea para la idenlificacin y aislamiento

de enlerobacErias glam (-)
Las baclrie laclosa (-) soD de colo rosa
Las bactrias lactosa (+) son incoloras
Permite el crecimiento de cocos gam (+)
Es slectivo pa.ra E. Col

El medio de Sbourad:

9-

3. Est indicado paa producir indol

l.

Todas son ciefas

5. Es un Eedio d

Es un medio corriente y de identificacin

Est indicado para el crecimienlo de bacterias

no muy exigentes

4,

()

entobactcias Gram (+)

El aga de pepiona:

2.

hemolizda
Pemit el crecimietto de HaenoPhilus
Pe.mitc el crecimiento de cocs gam
En algunos casos Do contiene l fctor V

resistets si vira a color amarillo

medio

enriquecido
3.

sangre

El medio de Lowestitr:

8.

patgeDos

medio enriquecido con

Elagar Macconhey:

1.

5.7x103
2-

El gar chocoltei

28006 MADRID

ll.

Tfno: 91 309 36 46

El mdio Salmolla- Shisell (SS):

w$\{.c8shflon-oposiciones com

t2

Eg

CASH FLOW

l.

Es un medio selectivo pra baclerias gram

f nentadoras

2.

TEC NI CA S INS TR UMEN TA LES

Es un medjo selectivo Dara bcterias gram r_l

no ternrenradors de lacrosa

J. No es 1il si las muesns

nererogenea.

presenran flora

lry

4. La9 colonias de Salnonella son de color rosa

5. Es un medjo Iiquido enriquecimienro
12. El fnedio de Muelter- Hinto:
I. Es un medio para os nribjogranas
2. Es un medio que contiene lmjdn
3.

Contiere exracro de came

peplona

de

El agar citrato d Simmons:

Pennite la idntificaciD

de cocos

cam (+)

2. Es un medio enriquecjdo
3. Se acidifica si lac bacreriac consuen crtlalo
4. Se alcaiiiz si tas bacteias consumen ci!_ro
5. Se acidifica si ias bacterjas producen cifato
14, La prueba de la coagutrsa perEite diferenciar:

i.

Rojo de metilo

2. Voges-Proskauer
3. Indol
4. Citato d Simmons
5. Ninguna de las anteriores
19. La preba IMVIC o ncluye:
Rojo de metilo

2. Voges-Proskauer
3. indol
4. Citralo dc Simmons
5. Phe desaminasa

5.

l.

Viando el hdjcador de; rojo al arnan,,o

Tras la adicin dejreactjvo de Ko\cs

18. La presecia de triprohase en tas bacters

pone de manifisto medisnte ta prueba:

4. Pued ser slido o liquido

I3.

4.
5.

(_)

de lactosa

Esrafilococos de esreDrococos

2
j.

Esrafilococo aureus

4.
5.

estafilococos
Estreprococo agalactie de pneumococo
Baclerfas fermentadoras i tacrosa

Esreprococo tipo A di pn.olno.o.o

M resro de

20. En un anlibiogram por et rntodo de

diucjdn
en medio tiquido ta CfM viene dada por:

Eliubo cul

dilucion sea mima y no presenle

2. El tubo cuya
presenre tubjdez

dilrcin sea mxima

3. El

presente

4.

presente

los

tubo cuya ditucin sea mxima

turbidez
El tubo cuya ditucin sea mnima

turbidez

5.

Njguna de ias anteiores

TECNIC4S INSTRUMENTALES (TEST

)

15. En.un mdio KIA un becteria fermentadoa

de lactosa y glco! originar:

l.

2.

4.
5.
16.

Pico rojo y fondo amaillo

Pico y fondo rojo
Pico y fodo amarillo
Pico azul y fondo verde
Pico y fondo azles

La pruebs

de

Dacteras utiliz3n

2.

i.

4.

).
17.

Rojo de metito indica si

hidrtfi de carbono:

l.

tas

Por fermenraciD cido_ mira

Por fementacin lctica
Po la va aerobia
Vado el idicador det rojo al arnarilto
I ras Ia adicill del reacdvo
de Kovacs

prueba de Voges-proskur indlc si

tilizn hidreto, de carbon:

Decreries

tas

Por frmcntacin cido-mixta

2. Por fermenraciD lctica

3. Por Ia vJa aerobia

C/ Mots,20

2800

MADR%

no

l3

se

CASH FLOW

TCNI CA S I N S TRU NIEN TA L ES

TEST . TETIIA ?

1,

MARCAJE RADIACTIVO. METODOS

ELECTROOTJIMICOS

La determinci de Na y K con
slectivos es un tc ca:

2.
3.
4.
5.

8,

Potenciomtrica
Poiarogrfica
Conductimtsica
se

9.

FlDo ode lntano

de sodio

se

e3 muy

ll.

Electodo de vidrio
Elcctodo dc calomclanos nonal
Electrodo de calorbclaos saturado
Elect'odo de hidgeno

Electodo de AglCLAg

lectrodo d referelci?:

2.
3.
4.
5.

Electrodo
Electrodo
Elechodo
Elecbodo
Electrodo

de
de
de
de
de

Hg
Valinomicina
vilio
gota de Hg
calomelanos satuado

Gana
Son similares
se desintgrn

su ncleo:

form espontDe ye q9

1.

Tiene un exceso dc protones

Tiene un exceso de ncutones
Tiene igual nmerc dc protones y neutones
Ticne sobrccargB dc elecronel
Captua un electn

512.

Beta+

4.

Todos los anteriores

Alfa
Betz-

I.os istopos raditctivos pessdos

Cases

Cual de estos clectrodos funclona

1.

lectrodo nornal de hdrgelo tiene un

potetrcisl esigndo de:

2,

El pH
Calcio

Es un clectrodo indcador:

6.

Plrno

El

l.

1. Halurcs

t.

colombimtrier estos ! Precipitan con:

2.
3.
4.
5.

wado en la determinacin del

2.
3.
4.
5.

de clonros por

10. Cual es Is rediacn ms penetrate?:

Metales AlcaliDoteos
El pH
Metales Alcalinos
Metales pesados
No metales

El electrodo de embrn de vidrio

2.
3.
4.
5.

determicin

t.0,242V
2. -0,200 v
3. +0,200 v
4.0,000v
5. -0,001 v

tilizen par le determiscn de:

2.
3.
4.
5.

ley d:

Beer

En la
L

Los eectrodos seectivos de membrn&

l.

Maxwell

2. calcio
3. Sodio
4. Plata
5. No se prccipita

emplea un electrodo d:

3.

Nerst

s bas D

4. Fary
5. Henry

electrodos

Para determior N en muestra! biolgicas

1.

2.

Amperontrica
Coulombimtica

2. sAgClAg
3. Tetrafenilborato
4. Vidrio
5. Valiomicina

I- colombimetria

Cndo un istoPo inestable tiene un

atmico >80, se estabiiz por:

2.
3.
4.

l.

Emisin alfa
Emisin beta+
Emisin betaEmisin gaha

5-

Rayos

como
13. En

peso

ulls desintegracin bet:

A y Z aumenta

2. A y Z disminuyen
3. A Do vaiaperc si Z
4. A amefltayz dismjuye
5. A disminuyc y Z aumenta

C/Monlesa,20 - 28006 MADRID-Tfnor 91 309 36 46 - rY{w.cashnow-oPoscioncs.corn

14'

GASH FLOI,V

EA

,
..,

tn

En la csptura lecfrnlcar

Existe una ansfercncia de elecnones entre

tomos

2. Un e- y u e+ se anulan
3. Un elect_n orbitl es ebsorbido po el ncleo
4. U glecFn exlemo pasa a un lugar intemo
5, Un elecFn intemo pasa a un lgar extemo

'
,

15. La emisin alf

'
-

se mide con un

5. Ninguo

ores

de los ateriores

tO

17. L emsin gamma

La emisin bet sc nide con un contdor:

l.

De cntelleo lquido

2. De cenrelleo slido
3. ceiger
4. Culquiea de los anteiores
5. Ninguno de los anteriores

I.

mid con un contador:

se

De cenrelleo liquido

2. De cenrlleo slido
3. ceiger
4. Cualquiera de los anteriores
J. Nirguno de los anteriores

_
tt,

Los contdores d centelteo sido:

"
-

23.

4.

Contjenen un gas inete

Contienen
cristal de NaI con Tlio
Contienen POP + POPOP
Miden emisiones beta

5.

Nigun de las anteriores

19. Los coltadores de cenre eo tquido:

Contienen un gas ierte

Contienen un cdstal de NaI con Tlio
Contienen POP + POPOP

'

2.

4. Mjden eisiones gamma

5. Ninguna de las anteriores

:
^
,

contador:

De cenlelleo lquido

2. D centlleo slido
3. Geiger
4. Calquiera dc los ate

_
!
.
_
_

I
,

TECNTCAS I NS TRUME N TALE S

,0.

La misin gamms:

Posea carga

5.

Pose carga ngativa

2. Posee masa
3, Posee masa y carga
4, No posee ni masa y caga

TECN|CIS NSTRUME,NT,4LES (IES7' 7)

C/ Mont$, 20

28006

MAIRID - Tfnor

91 309 36 46

- wnw.cashflow-oposicones.com

15

[E CAS]I FLOltv

T C NICAS INS TR UM E NTA L ES

6.

TEST . TEUA A

Sobe las recciones de agltinacin sealr la

rsPesta corrects:

TECNTCAS INMUNOLOGICAS

1.

Se utilizan para delecta anticuerpos

fente

antfgenos de suPerficie bacteriaa

2. Las
l.

inmnoglobulinas que ms fcilmente

aglutinan son las IgG

sobre las reaccones de precipitacin sealar l

resPuesta correctai

3.

Requiere la utilizscin de un aparato ptico

(luPa)

Junlo con

2,
3

4.
5,

la

4. No son reacciones
5. Todas son ciefas

aglutinacin constituye las

deominadas reacciones de agregacin

Se favorecen por exceso de antigeno
Se fvorecen por exceso d anticueryo
Solo se realizan en medio slido
Todas son correctas

7.

l.

l.

lnmunoelectroforesis
Contrammunoelectloforesis
lnunoditusin dc OuchtelonY
Westem-blot o intnunoblottig
Proteinogama

2.
3.
4.
5.

Se basa en

Inmunodiirin doble

La separacin electrofortca de protelnas en

gel de poliacrilamida forma part de una
tcnic denominda:

l.

El mtodo de inmunodifusin rsdial simple:

En la deteccin d anticuerPos, pose mayor

sensibilided cuntitativa l (el):

2. ConainmunoelecFoforesis
3. Heliaglutjacin
4. Fijacin del complemento
5, ELISA

Una electroforesis de antgenos sobre garosa'

seguida de uns inmonodifusin Perpendicular a
la dircccin d Ia priner se denomira:

2.
3.
4.
5,

de agegacin

la difusin del antgeno y

el

anticuerpo
Se basa en la difusin del antigeno sobr un
agar que contiene el anticueDo
Se basa en ia ditusin del antcepo sobre un
agr que contien el antigeno
Es Lma tcnica cualitativa
Incluye una inmunoelectrofoesis

9-

InmunoelecEoforesis

2,
3.
4.
5.

Coi_iiunoelectoforesis

ED

ls inmunodifusin radial simple:

RadioinmunoeDsayo

ELISA
Westem-blot

Se pueden ve ideDtidades parciales

antlgenos

2.

Antlgeno

p!to

enFe

nticuepo deben tene distinto

isoelcFico

m5 rpidos que en una

conbainmnoelectroforesi s

La inmunoelectroforsis:

3- Los esultados son

l.

4. Se peden compar fcilmete mzclas

2.

Es una electroforesjs seguida de uDa reaccin

de aglutinacin
Es una reacil de aglutiacin seguida de una

precipitacin depende de la concentracin del

3.

eleckoloresis
Es una electroforesis de complejos antlgeno-

. complejas de artlgenos

5. La superficie delimitada po el anillo

de

componente difusible

anticuerpo

4. Detecta concenFacioes de antlgeno

5.

5. Lr

aticuerpo de 20 pglml
Utiliza anticuerpos marcados

.ontrainmunoelctroforesis (CIE):

1. se basa

en favorecer la

nunodifusin doble

con la aplicacin de ufl campo elchico

2- Permite la deteccin de anticuerpos frente

deteccin de anticuerpos frente a

candida sp
4. Tiene aplicacin cuntitativa
5. Todas son

28006 MADRID

Fijacin del complemnto

Innunoditusin radial (Mancini)
Irmunoditusin doble (Oucbterlony)
Aglutinacin en pofaobjtos
lnmunoblot

. L' rcnic,

denoninada ELISAI

l. Es un

mtodo elecfofortico para

la

determinacin de cidos nucleicos

2. Es

cielas

C/ Mon tesr, 20

2.
3.
4.
5.

Tr)?anosoma cruzii

3. Pemite la

I0. Cul de las siguientes tcnicas se utiliza part

cuanlificrr protlnas plasmticas?:

un

mtodo electrofortico pata

Tfno; 91309 36 46- w*"w.cashflow-oPosciones.con

la

l6

CASI| FLOr,v

proteiDas
radioinmuoesayo
irmunoenzimtjco
elecoirbunoensayo

3.
4.
5.

Es un
Es un ensayo
Es un

12. No

,
'
'
,
'
_

2. Utiiiza antigeno inmovilizado

3. La densidd pdca medida

deteminacin de

_
,
"
_
,
_

TECNICAS INS TRUM E NTA

es un inmnoensyo

4.
5.

1. Lahormona

L Aglutinacin
2. Tincin
3. Reaccin colorimtsica
4. Electroforesis
5. Ftuorescencia

5. Ninguno

l9'

de los atriores

La tcnica ELISA
I

se

ltiliz

para:

Detecta marcadores de la hepatjtis B

20. La inmunofluoresceci indirecta:

oxidasa
alcalina
Peroxidasa
Peroxidasa y catalasa
Peroxidasa y fosfalasa alcalina

L
j.

Peroxidasay

2.

Fosfatasa

Uriliza antgeno marcado con fluoesceia

Utiliza anticuerpo marcado con fluoresceina

Utiliza u alti- anricuepo marcado con
fluoresceia
equiere Ia utilizcin de microscopia
nuorescecia

de

Ia

4. No

conpeti(ivo:

5. proporciona ua medita inversa

l. El antlgeno (suero) intemcciona con

anticuerpos

concetrtracin de aDticue?o
dos

IECNICAS INSTRUMENTALES (TEST 8)

densidad ptjca medida es directamente

4-

proporcional a la concentrcin de aDtgeno

La densidad prica medida es inversamenre
poporcjonal a la ooncentacin de a,ltigeno
Se determina la presencia de anricuepos en

5.

El

l.

a deteminar

2. La hormora + sustrato
3. La antihormona
4. El sustrto

2. Confla una infeccin por HIV

3. La dereccin de protenas piasmticas
4. La cuanrificaci; de imu;oglobulinas
5. Todas ls anteriores

14. En el enzimoinmunoanlisis (EIA) s utilizn

cono mrcrdores los enzimas:

2. La

Es un ensayo helerogneo
Todas son ciefas

18. S dsea cuantificar tiroxina por un ELISA

conpetitivo, para lo cual se debe disponr de
tubos en lo! qe previamente se ha fijadoi

13. En lss fcnicss inmunoenzimtcas (EIA) l

formecin del inmrocomplejo Ag-Ac se mide
Porl

15. En un ELISA

es directmenie

marcado:

3. Reaccin de fijaci del complemeno

4. Enzimoinmunoalisis
5. Polarizcin de fluorescencia

l.

ES

proporcioal a la concenb-acin de anricurpo

L IruDofluoescencia
2. Radioiimunoanlisis

2.
3.
4.
5.

suero

enzim uddo modifica

su

actividad

enzinlrica

16. Er un ELISA tipo Sndwich:

l-

Se detectan antigenos

moDovalentes

2. Se utiliza un anttgeo inmovilizado

3. La densidad ptica medida es djectamente
propocional a la coDcentsaciD de antigeno
densidad ptica medida es inversamnre
proporcional a la cocenracjn de antlgeno
La fase es homognea

4. La
5.

17. Un EIA indirectol

Mide Ia concentracir de anticuerpo pesenre

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RESPUESTAS
TEST

3
4

'11

12

t3

14

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8
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TEST 2

l0

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11

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l5

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17

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4

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TEST 3
1

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TES 4
'l
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5

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4

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3

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