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desordenado. Para evitar esto las placas una vez inoculadas deben incubarse en
posicin invertida para que el agua de condensacin permanezca depositada sobre
la tapa de la placa y se evapore por la temperatura de incubacin.
Nota. Recuerde que debe trabajar al lado de la llama de un mechero y que debe flamear
tanto la boca de los tubos de ensayo como el asa o aguja de inoculacin antes y despus
de cada inoculacin para destruir todos los grmenes contaminantes de las superficies de
esos objetos. Tan pronto como aprenda el procedimiento correcto para transferir los
cultivos, usted, debe desarrollar ms velocidad para llevar a cabo estos ensayos; puesto
que, cualquier retardo en el re-taponamiento de los tubos incrementa grandemente las
oportunidades de contaminacin.
recomendable
para
cultivar
microorganismos
aerbicos
Objetivo de la prctica:
Emplear las diferentes tcnicas para la siembra de microorganismos.
Familiarizarse y dominar las diferentes tcnicas
para la siembra de
microorganismos.
Establecer contrastes entre las distintas tcnicas y medios de siembra de
microorganismo.
Materiales
Cubre-objetos.
Caldo nutritivo.
Agar nutritivo inclinado.
Agar Kliger o T.S.I inclinado.
Agar nutritivo en placas.
Cultivos en agar nutritivo (en placas).
Agar Mc Conkey en placas.
Cultivos en caldo nutritivo.
Cultivo poli-microbiano en caldo nutritivo.
Metodologa:
1. Se suministrar a cada grupo de estudiantes cultivos en crecimiento en
medios slidos (placas con agar nutritivo) y en medios lquidos (caldo
nutritivo).
2. As mismo se suministrar a cada grupo medios estriles de crecimiento
slidos (placas con agar nutritivo, agar nutritivo inclinado, agar TSI) y
lquidos (caldo nutritivo) en cada una de las cuales se realizar la siembra
de los microorganismos en crecimiento anteriormente suministrados.
3. Tome la aguja, o el asa de inoculacin (dependiendo el medio y la tcnica
de siembra) como si fuera un lpiz y esterilice ponindola verticalmente a
la llama del mechero hasta que toda su longitud se ponga al rojo vivo.
4. Deje transcurrir unos segundos, antes de tomar el inculo, para que se
enfre el alambre de platino y evitar matar los organismos.
5. Con la mano izquierda, tome la cpsula de Petri que contiene al
microorganismo y colquela al frente del mechero, tome la pequea
porcin de una colonia aislada y coloque la cpsula en su posicin original.
6. Tome con la mano izquierda, un
Preguntas a investigar:
1. Quin fue Alfred Mac Conkey? y Cul fue su aporte a las tcnicas de
siembra microbiolgica?
2. Por qu las placas se invierten ante de llevarlas a incubacin?
3. Por qu es necesario esterilizar el asa o la aguja antes de realizar una
siembra?
4. Cul es la composicin del agar nutritivo? y Por qu es un medio de
crecimiento universal?
5. Cuntos instrumentos de transferencia microbiolgica pueden
emplearse?
6. Nombre las tcnicas de transferencia microbiolgica y diga las ventajas
de crecimiento se realiza.
Bibliografa consultada
PRESCOTT, L.; HARLEY, J.; KLEIN, D. Agud Aparicio, Jos Luis (Traductor);
Gamazo de la Rasilla, Carlos (Revisor) Microbiologa, Mc Graw-Hill, Madrid,
Espaa.
COLLINS, C. Mtodos microbiolgicos, Editorial ACRIBIA, S.A. Zaragoza, Espaa, 5ta
edicin.
HARLEY, J.; PRESCOTT, L. 2002. Laboratory Exercises in Microbiology, 5ta edicin.
The McGrawHill Companies.