Detección de Mastitis Documento Nuevo Corregido 2017b (Reparado)

DETECCIN DE MASTITIS SUBCLNICA MEDIANTE EL RECUENTO DE
CLULAS SOMTICAS POR MTODO AUTOMATIZADO EN TRES

CATEGORAS DE HATOS LECHEROS, EN VALLEDUPAR CESAR
ERIKA QUINTERO HENAO

EDUARDO VILA FERNANDEZ
LUIS EDUARDO NOBLES CABAS
BACTERIOLOGA Y LABORATORIO CLNICO

UNIVERSIDAD DE SANTANDER UDES
VALLDUPAR
2016

ERIKA QUINTERO HENAO

EDUARDO VILA FERNANDEZ
LUIS EDUARDO NOBLES CABAS
Trabajo de grado presentado para optar por el ttulo de Bacteriologa y

Laboratorio Clnico
DIRECTOR:
TANIA MELISA DAVID
Bacteriloga
Esp. Pedagoga
ASESORA:
EMIR RUEDA RUEDA
BACTERIOLOGIA Y LABORATORIO CLINICO

UNIVERSIDAD DE SANTANDER UDES
VALLEDUPAR
2017
NOTA DE ACEPTACIN
_________________________________________
_________________________________________
_________________________________________
_________________________________________
_________________________________________
Firma del presidente del Jurado
_________________________________________
Firma del jurado
_________________________________________
Firma del jurado
Valledupar, 2016
DEDICATORIA
Agradezco primeramente a Dios, por ser el

sustento de mi vida, por darme fortaleza en
aquellos momentos de
adversidades, y la
sabidura para afrontar de buena manera

todos los obstculos que se me presenten.
Por brindarme la oportunidad de iniciar y
culminar mi carrera universitaria.
A mi madre Ladys M. Fernndez, quien ha
formado la persona que soy, que con su
ejemplo de perseverancia y constancia ha
velado por mi bienestar y educacin, siendo
un apoyo indispensable en mi vida.
A mi hermano Kevin David vila, por haberme
escuchado y brindarme su apoyo en todos
aquellos
momentos
de
dificultad
en
el
transcurso de mi carrera.
A todos ustedes, les dedico el trabajo y
esfuerzo puesto para la realizacin de esta
tesis
Cuando sabes lo que quieres y lo quieres

con
suficiente
fuerza,
siempre
vas
encontrar la forma de obtenerlo. Jim Rohn.
Eduardo Andrs vila Fernndez
DEDICATORIA
Agradezco primeramente al Dios de los cielos

(Jesucristo), por sus gratas bendiciones en los
momentos tristes y felices de la vida; porque
nunca
apart
su
mano
sobre
m,
por
brindarme fortaleza en las adversidades, por

ensearme a levantar despus de caer y por
ser l, la piedra angular que con su fiel
compaa y a pesar de mis defectos, no alej
de m, su gloriosa y singular presencia.
Agradezco a l, por dirigir el inicio y el final
de mi carrera universitaria, siendo l la razn
principal de este triunfo.
Fate de Jehov de todo tu corazn, Y no te apoyes
en tu propia prudencia. Reconcelo en todos tus
caminos, Y l enderezar tus veredas
(Proverbios 3: 5-6)
A mi Familia Nobles Cabas porque nunca

dejaron de luchar y perseverar en oraciones,
oraciones cargadas de propsitos, sueos,

compromiso, sacrificios, ayuno y F. Por
inculcar en m vida valores, dignidad y
sencillez, frutos de una excelente educacin.
Le agradezco a ellos porque me ensearon,
que basta solo con un: Gracias!- para ser
feliz.
Mil gracias a ellos, por haberme credo y
apoyado.
Hoy somos lo que ayer no fuimos, maana seremos
lo que hoy no somos.
Una situacin difcil es una oportunidad para que
des lo mejor de ti
"De
una frustracin, podra nacer la superacin" Solo
depende de ti!
Lnoc Allan P
DEDICATORIA
Agradezco
primeramente
poderoso, por su infinito amor
Dios
todo
y darme la
sabidura de avanzar por caminos que me

llevan hacer mejor persona, por darme la
oportunidad de culminar mi carrera que ser
para el servicio de l y de la comunidad, por
darme fortaleza cuando muchas veces quise

caer, por proteger mi caminar, porque ha sido
mi fuete de vida, sustento y nada me ha
faltado en este trayecto.
A mis padres Manuel Quintero y Rosa Henao,
porque son el motor que impulsan mi vida por
su ejemplo, lucha y dedicacin, son los
mejores padres que Dios me pudo regalar, su
constancia
por
la
vida,
sus
esfuerzos,
paciencia, y sobre todo el gran amor que me

han dado, gracias por su apoyo sin ustedes
no sera lo que soy ahora, son mi ejemplo a
seguir, de no detenerme nunca ante cualquier
circunstancia que se me presente en la vida.
A mis hermanos Yordi Quintero Henao y Muela
Quintero
Henao
que
me
inspiraran
superarme, son parte de mi corazn, gracias

por su apoyo, de ustedes tambin es este
logro.
A mi novio Leonardo Palmezano que tambin
ha sido mi amigo en este trayecto, gracias
por
tu
apoyo,
por
ser
mi
compaero,
alentarme, y brindarme tu amor.

Gracias
a cada persona con la que
he
trazado en este caminar, de cada uno,

siempre me llevare algo bueno, pues me han
ayudado a forjar como persona.
Erika Johana
Quintero Henao
AGRADECIMIENTOS
A nuestros padres que estuvieron constantes en nuestras vidas, brindndonos siempre
su apoyo y entusiasmo para salir adelante en cada una de las etapas en nuestra
carrera.
A los directivos de la Universidad de Santander UDES, por los conocimientos
adquiridos y por impulsarnos a culminar con xito nuestra carrera.
A los docentes porque en el transcurso de estos aos fueron pieza fundamental en este
camino de aprendizaje, por todos sus conocimientos, consejos, motivacin, regaos,
esfuerzo, dedicacin, cario, amistad para formarnos como profesionales integrales.
A TANNIA MELISA DAVID, Bacteriloga. Docente Universitaria de Santander UDES.
Por su direccin, orientacin y paciencia en la ejecucin de este proyecto.
A ELIA MERCEDES FRAGOSO AMAYA, Bacteriloga. Por su apoyo incondicional en
el desarrollo organizacional del mismo.
Al Laboratorio de leche CDT Ganadero del Cesar, por su apoyo incondicional en la
realizacin de las pruebas de laboratorio.
Finalmente a todas aquellas personas, que de una u otra forma colaboraron en la
realizacin de este proyecto.
TABLA DE CONTENIDO
Pg.
INTRODUCCIN................................................................................................................
1.
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA....................................................................
1.1. Descripcin del problema............................................................................................

1.2 Justificacin....................................................................................................................
2.
Objetivos......................................................................................................................
2.1. General:.......................................................................................................................
2.2 Especficos:.....................................................................................................................
3.
MARCO TERICO....................................................................................................
3.1. Antecedentes................................................................................................................
3.2
Bases tericas..............................................................................................................
3.2.1 Leche cruda..................................................................................................................

3.2.2 Produccin y secrecin de la leche..............................................................................
3.2.3 Calidad de la leche.......................................................................................................
3.2.4 Mastitis bovina.............................................................................................................
3.2.5 Clasificacin de la mastitis..........................................................................................
3.2.6 Mtodos de deteccin de la mastitis bovina................................................................
3.3 Bases legales...................................................................................................................
4.
MATERIALES Y MTODOS....................................................................................
4.1. Clasificacin de la investigacin.................................................................................

4.2. Poblacin de estudio y muestra...................................................................................
4.2.1. Criterios de inclusin...................................................................................................
4.2.2. Criterios de exclusin..................................................................................................
4.3. Sistema de variables.......................................................................................................
4.4. Diseo metodolgico.....................................................................................................
5.
RESULTADOS Y DISCUSIN..................................................................................
6. CONCLUSIONES............................................................................................................
7. RECOMENDACIONES...................................................................................................
9. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS..............................................................................
GLOSARIO..........................................................................................................................
ANEXOS..............................................................................................................................
LISTA DE FIGURAS
Pg.
Figura 1. Anatoma de la ubre.........................................................................................31
Figura 2. Arco reflejo neuro-hormonal de la eyeccin de leche......................................32
Figura 3. Desarrollo de la enfermedad............................................................................41
Figura 4. Mtodo fluoro-opto electrnico (Fossomatic).................................................43
Figura 5. Nevera con geles refrigerantes para la conservacin de muestras..................50
Figura 6. Histograma de frecuencia de los hatos lecheros con niveles de recuento de
clulas somticas.............................................................................................................60
Figura 7. Histograma de frecuencia de RCS en hato grande-mastitis subclnica...........62
Figura 8. Histograma de frecuencia de RCS en hato mediano-Mastitis subclnica........63
Figura 9. Histograma de frecuencia de RCS en hato pequeo-Mastitis subclnica........64
Figura 10. Comparacin en el Recuento de Clulas Somticas Cuarto Sano............65
Figura 11. Comparacin de RCS de 3 hatos en la categora de Mastitis Subclnica. 66
Figura 12. Comparacin de RCS de 3 hatos en la categora de Mastitis Clnica......68
Figura 13. Comparacin de RCS de 3 hatos en la categora de Infeccin severa......69
LISTA DE TABLAS
Pg.
Tabla 1: Factores que influyen en el recuento somtico de la leche................................39
Tabla 2. Diagnstico de un cuarto segn el conteo de clulas somticas........................39
Tabla 3. Operacionalizacin de las variables...................................................................50
Tabla 4. Cumplimiento de las variables evaluadas en instalaciones fsicas....................58
Tabla 5. Cumplimiento de las variables evaluadas en el manejo del animal...................59
Tabla 6. Cumplimiento de variables evaluadas con respecto a la condicin del
ordeador.........................................................................................................................61
Tabla 7. Cumplimiento de las variables evaluadas en condicin higinica sanitaria......62
LISTA DE ANEXOS
Pg.
ANEXO 1. ENCUESTA..................................................................................................88
ANEXO 2. TOMA DE MUESTRA................................................................................89
Anexo 3. CADENA DE CUSTODIA.............................................................................90
ANEXO 4. MANEJO DEL COMBIFOSS FT................................................................91
ANEXO 5. CARTILLA ANDRAGOGICA....................................................................92
ANEXO 6. Informes de Resultados AL-F-24 del LCL...................................................93
ANEXO 7. HISTOGRAMA DE FRECUENCIA DE RCS EN HATOS LECHEROS...94

Quintero, E.; Nobles, L.; vila, E. Universidad de Santander, carrera 6 No 14-27
Valledupar, Cesar, Colombia. Lenochi2009@gmail.com
RESUMEN
La calidad higinica de la leche tiene una relacin directa con altos recuentos de
clulas somticas (RCS), los cuales indican una mastitis subclnica y est a su vez
asociada con las prcticas de ordeo. El RCS es ampliamente utilizado como un
indicador del estado de salud de la ubre y la calidad de leche, siendo una herramienta
muy valiosa en la toma de decisiones para la implementacin de medidas de prevencin
y control de la mastitis. El objetivo de esta investigacin fue detectar mastitis subclnica
en vacas lactantes mediante el RCS por mtodo automatizado en tres categoras de hato
lechero en el municipio de Valledupar, efectuando un anlisis descriptivo de las
variables influyentes en la calidad sanitaria de la misma, mediante la aplicacin de una
encuesta; Logrndose detectar mastitis subclnica con base a los resultados obtenidos
de los dos muestreos realizados (14.1% hato grande, 5.2% hato mediano y pequeo del
3.8%) e identificando los factores que influyeron de forma directa en los altos RCS
(ordeo de vacas viejas con largos tiempos de lactancia, la deficiente higiene personal
del ordeador durante dicha actividad en concomitancia a la falta de formacin o
capacitaciones orientadas a buenas prcticas de ordeo (BPO) para el personal de
ordeo).
Palabras claves: calidad, leche, sanidad, glndula mamaria.
DETECTION OF MASTITIS SUBCLINICAL THROUGH THE COUNTING

METHOD FOR AUTOMATED SOMATIC CELLS IN THREE CATEGORIES
OF DAIRY CATTLE, IN VALLEDUPAR CESAR
Quintero, E.; Nobles, L.; vila, E. Universidad de Santander, carrera 6 No 14-27
Valledupar, Cesar, Colombia. Lenochi2009@gmail.com
ABSTRACT
The hygienic quality of milk has a direct relationship with high somatic cell counts
(SCR), which indicate subclinical mastitis and is associated with milking practices. The
RCS is widely used as an indicator of udder health status and milk quality, being a very
valuable tool in the decision making for the implementation of measures of prevention
and control of mastitis. The objective of this investigation was to detect subclinical
mastitis in lactating cows by SCR by automated method in three categories of dairy herd
in the municipality of Valledupar, carrying out a descriptive analysis of the variables
influential in the health quality of the same, through the application of a poll;
Subclinical mastitis was detected on the basis of the results obtained from the two
samples (14.1% large herd, 5.2% small and medium herds of 3.8%) and identifying the
factors that directly influenced the high RCS (milking of old cows with Long lactation
times, poor personal hygiene of the milker during that activity in conjunction with the
lack of training or training aimed at good milking practices (BPO) for milking staff).
Key words: quality, milk, health, mammary gland.
INTRODUCCIN
El siguiente trabajo de investigacin enmarca una de las primordiales

enfermedades del ganado lechero, como lo es la mastitis subclnica debido a que es la
principal causante de ocasionar grandes prdidas econmicas en la produccin lechera,
en el valor nutricional y sanitario de la leche, as como en la calidad de los derivados

lcteos (Anderson y Hunt, 2010).
La mastitis subclnica es considerada un proceso multifactorial donde se
conjugan factores propios del animal, relacionados con el agente causal, ambientales y
de manejo, donde se incluye el ordeo, el cual juega un papel determinante en la
presencia de la enfermedad, ya que un 70 a 80% de los casos de mastitis son debidos a
tcnicas inadecuadas de ordeo, caracterizada por condiciones higinico sanitarias, falta
de desinfeccin pre y pos-ordeo y ordeos prolongados.
Esta infeccin, es usualmente causada por bacterias que invaden la ubre, se
multiplican y producen toxinas que son dainas para los tejidos y la calidad de la leche,
que a su vez afecta al productor lechero a travs de los costos directos (leche rechazada,
costos del Mdico Veterinario Zootecnista y medicamentos) e indirectos (reduccin del
rendimiento de leche durante la lactancia, alteracin de la leche debido al incremento
del clulas somticas, requerimiento de tiempo extra para el tratamiento, elevada tasa de
desecho que reduce a una prdida del potencial gentico y muertes) (Gonzales et al.,
2003).
La calidad de la leche tiene una relacin directa con altos recuentos de clulas
somticas (RCS), los cuales estn enlazados con la mastitis subclnica y la mastitis
ntimamente con las prcticas de ordeo (Bardales, 2016). GF
La mastitis subclnica tiene efectos negativos en la produccin y la calidad de la
leche, se estima que es responsable de un 20% de la disminucin de la capacidad de
produccin (Bardales, 2016). sta se controla con un ordeo correcto, el cual depende
de las prcticas de ordeo, del equipo de ordeo funcional y de una rutina de ordeo
adecuada. Por lo tanto, un programa de mejora para producir leche con buena calidad
higinica debe partir de un buen proceso de ordeo para prevenir o controlar la mastitis.
Bardales, (2016) afirma que por cada vaca con mastitis clnica, existe de 10 a 20 con
mastitis subclnica.
Por todo lo antes expuesto, y conociendo que esta enfermedad no posee una
sintomatologa tan evidente, nos hemos propuesto la realizacin del presente trabajo que
tiene como objetivo: Detectar mastitis subclnica en vacas doble propsito lactantes
mediante el recuento de clulas somticas por mtodo automatizado en tres categoras
de hato lechero en el municipio de Valledupar.
1. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
1.1. Descripcin del problema
La mastitis subclnica, es una enfermedad infecciosa compleja de alto costo

econmico que puede producir grandes prdidas del ganado lechero, es la principal
causa de las prdidas econmicas dentro de un hato, donde la afeccin de la ubre genera
trastornos en el desempeo de la produccin, que se traducen de forma negativa en
el aspecto econmico; debido a la disminucin en la produccin, reduccin en la calidad
del producto, costos generados por tratamientos y servicios veterinarios. Adems, la
forma subclnica de la mastitis es el tipo ms frecuente e importante debido a su
presentacin casi imperceptible y de fcil diseminacin (Pinzn et al., 2009). La rutina
de ordeo representa un papel de vital importancia para controlarla. Pinzn (2007)
afirma:
Por esto, el incremento en la prevalencia de la mastitis subclnica debido a
inapropiadas prcticas en la rutina de ordeo, conducen a un incremento en la
diseminacin de la enfermedad dentro del hato, que repercute en altos costos
para el productor que complica el control de la enfermedad y tambin dificulta
lograr un producto de calidad competitiva (p.14).
Bray y Broaddus (como se cit en Perulactea, 2016) piensa que la mastitis
bovina es uno de los principales problemas de la ganadera lechera a nivel mundial,
considerndose el mayor problema del sector lcteo incluyendo la industria. El consejo
nacional de mastitis de Estados Unidos (1996) estim que las prdidas en este pas y
Canad suman dos mil y mil millones de dlares al ao, respectivamente, y un promedio
de 200 dlares/vaca/ao. El 70-80% de todas las prdidas estn asociadas con la mastitis
subclnica y slo del 20-30% se deben a mastitis clnica. En Cuba, estudios llevados a
cabo en la dcada del 80 indican prdidas del 12% de la produccin total y de $
129.04/vaca/ao (Fustes et al., 2010).
La mastitis subclnica se considera como una enfermedad compleja y es

producto de la interaccin de varios factores relacionados en el animal, el medio
ambiente y los microorganismos (Philpot, 2009). El incremento en la prevalencia de la
mastitis subclnica debido a inapropiadas prcticas en la rutina de ordeo relacionado a
Buenas Practicas Ganaderas (BPG), conducen a un aumento en la diseminacin de la
enfermedad dentro del hato que repercute en altos costos para el productor que complica
el control de la enfermedad y tambin dificulta lograr un producto de calidad
competitiva (Rodrguez et al., 2009).
Se estima que un tercio de todas las vacas lecheras estn afectadas por cualquier
forma de mastitis en uno o ms cuartos mamarios. Esta enfermedad constituye un
importante problema tanto para la salud pblica como para la economa del sector
lechero en general. Los clculos mundiales recientes han revelado que la mastitis
representa $ 3.750 millones (30%) del costo total de todas las enfermedades en el
ganado lechero (Centro Nacional de Sanidad Agropecuaria [CENSA], 2010).
Durante varios aos se ha venido hablando en Colombia sobre la mastitis como
el principal factor depresor de la cantidad y la calidad de la produccin de leche. Sin
embargo, los ganaderos parecen ignorar el problema de la mastitis o lo consideran como
un efecto transitorio dado por la escasa presentacin de casos de mastitis clnica en los
hatos y el poco compromiso de llevar a cabo procesos tecnificados para el control y la
prevencin de la enfermedad. Martnez, (2006) afirma que en Colombia, la frecuencia
de mastitis subclnica por vaca en hatos de la sabana de Bogot, es alta, debido a que se
han reportado estudios en los cuales las prevalencias fueron del 39% al 58,8% durante
el ao 2005. Por esta razn se requiere urgente medidas tendientes a disminuir la
frecuencia de esta enfermedad en vacunos puesto que constituye prdidas directas para
los productores y disminuye la calidad del producto para la industria lechera. De igual
manera, es relevante mencionar que se han desarrollado estudios para medir el impacto
sanitario de mastitis bovina, determinado una prevalencia en hatos, desde el 22% en el
departamento del Meta, hasta el 100% en Bolvar, y en el departamento de Caldas, se
detect en vacas una prevalencia de mastitis sub-clnica en el 64,4% y el 36,5% de los
cuartos mamarios.
Prez (como se cit en CONtexto Ganadero, 2013) veterinario de la Universidad
Nacional de Colombia, expresa que la mastitis es la culpable de la poca competitividad
de Cundinamarca en los mercados locales y en los nacionales, pues un estudio
realizado en el departamento por el claustro universitario, revel que este padecimiento
afecta el 28% del hato en esta zona del pas, lo que traducido a litros deja en evidencia
una prdida diaria de 4 millones de litros. Teniendo en cuenta que la Mastitis bovina es
una enfermedad que ha ido creciendo al transcurrir de los aos en Colombia, el Instituto
Colombiano Agropecuario ICA (2011), a travs de la Direccin Tcnica de Vigilancia
Epidemiolgica, ha diseado un sistema de alerta temprana de enfermedades de control
oficial y de presentacin inusual en el pas. Este sistema tiene como fin ltimo realizar
la atencin inmediata por parte del ICA garantizando la inocuidad de los productos, la
sanidad de los animales mediante la prevencin, el control y la erradicacin de sta
enfermedad (Instituto Colombiano Agropecuario [ICA], 2011).
El departamento del Cesar es uno de los entes territoriales con actividad
econmica en el sector agropecuario, con un 23% de participacin en el producto
interno bruto (PIB) departamental por su vocacin ganadera, contribuyendo as en el
sostenimiento econmico de la misma, razn por la cual es indispensable mantener unos
ndices de calidad higinica en la leche que contribuyan a la competitividad de la
cadena en la regin (CODECIYT, 2008). Para el ao 2014, se hicieron alrededor de 880
visitas, en donde se analizaron 50 mil muestras de leche en el Centro de Desarrollo
Tecnolgico que posee uno de los tres laboratorios habilitados por Corpoica, como
laboratorio de referencia para el sistema de pago de la leche. En el informe que se
entreg, los resultados arrojaron altos RCS, siendo significativo para problemas de
Mastitis Subclnica (Polo, 2015). Snchez (como se cit en Polo, 2015) afirma que en
Colombia desde 2012, existe una reglamentacin para el pago del litro de la leche, y
sta se hace dependiendo la calidad de la misma. Eso dio lugar para que al cierre del ao
anterior se incrementara la productividad por sanidad.
En Valledupar se producen 1500.000 litros/da de leche, de los cuales 45.000
litros no se consumen debido a los altos recuentos bacterianos, generando as perdidas
econmicas cercanas a los 7.800 millones de pesos al ao (Cesar en cifras, 2009). Se
han logrado identificar que dichas perdidas econmicas que normalmente ocurren en un
70-80% se deben no solo a los altos recuentos bacterianos sino a la presencia de mastitis
subclnica y clnica, la cual, se refleja en altos conteos de clulas somticas que es el
indicador ms importante de la sanidad de la ubre, y a la vez de productividad del hato,
incidiendo en prdidas cercanas al 30% de produccin tanto en volmenes de leche
como en su composicin. (Cesar en cifras, 2009).
Formulacin del problema: Se puede identificar Mastitis subclnica en los tres hatos
analizados, mediante el RCS?
1.2 Justificacin
La mastitis es la enfermedad ms costosa del ganado lechero, debido al desgaste
epitelial cada vez que una infeccin ataca al tejido mamario, an las mastitis subclnicas
pueden producir prdidas significativas en la produccin. Debido a que las infecciones
subclnicas son ms comunes y generalmente pasan desapercibidas por un largo periodo
de tiempo, pueden producir prdidas econmicas que los pocos casos de mastitis clnica.
(Pea y Leal, 2010).
Dirksen (como se cit en Pinzn et al. 2009) afirma que la mastitis subclnica es
en la actualidad la forma predominante de mastitis a nivel del hato. La fase subclnica
puede convertirse en mastitis clnica, en ello estriba su importancia, junto al peligro que
representa para la vaca y la prdida de la produccin lechera. Es posible que las mastitis
subclnica se cure espontneamente, pero no siempre es previsible tal eventualidad
(Pinzn et al., 2009). Se estima que se pierde en cada hato ms del 12% de la
produccin lechera por ao, lo que equivale a $ 47.520.000 a causa de esta enfermedad
(Cern et al., 2008).
Para el diagnstico de la mastitis subclnica el recuento de clulas somticas
(RCS) mediante mtodos opto-electrnicos;
ha demostrado ser una excelente
herramienta como indicador de salud de la ubre y se ha usado para estimar la reduccin

en la produccin de leche asociada a este tipo de mastitis (Durr et al., 2009).
Philpot y Nickerson (como se cit en Mangandi, 2008) afirman que el RCS es la
medicin ms ampliamente utilizada para supervisar el estado inflamatorio de las
glndulas mamarias y puede ser realizada en la leche de cuartos individuales, vacas
individuales, el hato completo y de un grupo de hatos. Estudios previos en bovinos han
reportado incrementos en el RCS debido a infecciones en la glndula mamaria que
desencadenan en mastitis (Sharif, 2010).
El recuento de clulas somticas es hoy, un indicador de calidad de la leche
cruda que acepta o rechaza el producto, para ciertos pases cuando la cifra es superior a
450.000 clulas/mL hasta de 750.000 cel/ml. Independientemente de estos valores la
industria espera y bonifica las leches con menos de 250.000 cel/mL porque obtiene
mejor rendimiento industrial, sabor de los productos y mayor duracin en el mostrador
(Velsquez, 2012).
Es necesario hacer nfasis en el control de la mastitis bovina, en un programa

integrado que involucre la salud de los animales, el sistema de manejo durante el
ordeo, las condiciones ambientales del alojamiento y del ordeo, las caractersticas y
condiciones de funcionamiento del equipo de ordeo, el control de los microorganismos
causantes y el nivel de capacitacin de las personas responsables del ordeo (Pinzn,
2007). De igual manera se han identificado diversos factores influyentes en la calidad de
la leche, como el clima, la temperatura, humedad, as mismo la nutricin y el estado de
lactancia del animal que afectan la composicin fsico qumica y la calidad
microbiolgica de la leche cruda, en donde priman factores ambientales (Benavides et
al., 2011).
Segn Cotrino (como se cit en Mndez y Osuna, 2007) afirman que uno de los
elementos esenciales para controlar la mastitis subclnica, es el personal encargado del
ordeo. Es de vital importancia la capacitacin de los operarios que efectan el ordeo
en todas las prcticas concernientes al cuidado de los animales, manejo adecuado de la
leche, aseo y esterilizacin de los equipos y en general, todos los aspectos que
garanticen la salubridad de la glndula mamaria.
Partiendo de lo mencionado anteriormente, nace la necesidad de realizar una
investigacin que permita identificar casos de mastitis subclnica en vacas doble
propsito en tres hatos lecheros del departamento del Cesar, categorizados como:
pequeo, mediano y grande; mediante el RCS por el mtodo citometra de flujo, debido
a que ha demostrado ser una herramienta que permite evaluar el grado de dao del
tejido glandular reflejado en la alteracin de los cuartos mamarios, aunque muchas
veces no son visibles las lesiones, manifestado en la concentracin de clulas somticas
halladas en la leche.
2. Objetivos
2.1. General:
Detectar mastitis subclnica en vacas doble propsito lactantes mediante el recuento de

clulas somticas por mtodo automatizado en tres categoras de hato lechero en el
municipio de Valledupar.
2.2 Especficos:
- Identificar los factores que influyen en el recuento de clulas somticas
mediante la aplicacin de una encuesta para el anlisis de variables intervinientes a
nivel de hato.
- Analizar la matriz leche cruda bajo el parmetro de Conteo de clulas
Somticas para la deteccin de mastitis subclnica en vacas lactantes de tres hatos
lecheros
- Definir estrategias encaminadas al manejo del ganado vacuno y transferirlas a
nivel de hato basado en los recuentos de clulas somticas y los factores identificados
3. MARCO TERICO
3.1. Antecedentes
Trujillo y colaboradores, llevaron a cabo un estudio descriptivo de corte y un
muestreo no probabilstico por conveniencia en siete fincas de ganado de leche
localizadas en el oriente antioqueo, en el cual, se realiz la prueba cualitativa de

California Mastitis Test (CMT), con el fin de determinar la prevalencia de mastitis por
cuarto y por vaca en 290 vacas lactantes. A la leche proveniente de los cuartos positivos
mayores a trazas, se les realiz recuento de clulas somticas (RCS), cultivo y
antibiograma. La prevalencia de mastitis subclnica por cuarto fue de 19,9% (228
cuartos) y 11 cuartos (0,95%) presentaron mastitis subclnica. El promedio del RCS
para todos los cuartos fue de 1.105.733 cl/ml. En los 226 cultivos, Streptococcus
dysgalactiae fue la bacteria ms comn (29,5%), le siguieron Estafilococos coagulasa
negativo (ECN) (23%) y Staphylococcus aureus (10,3%). La frecuencia de patgenos
contagiosos fue 37,8%, y de ambientales fue 49,3% (Trujillo et al., 2011).
En el Laboratorio de la Industria Lctea Trbol- Loma Plata -Paraguay.
Sandoval y colaboradores, analizaron 140 muestras de leche cruda provenientes de tres
tambos, estas fueron recolectadas en el mes de junio del 2009 y sometidas a
determinaciones fsico-qumicas, teniendo en cuenta las recomendaciones sugeridas por
los mtodos analticos oficiales para su control. La leche cruda fue analizada a travs de
los siguientes mtodos: determinacin de la Cantidad de Clulas Somticas con el
equipo Fossomatic, as como la prueba del alcohol, acidez en grados Dornic (D),
determinacin de niveles de materia grasa, protena, lactosa y slidos totales utilizando
el equipo MilkoScan. Los resultados obtenidos permitieron comprobar que los
elevados contenidos de clulas somticas inciden sobre la composicin fsico-qumica
de la leche. Se observ que, de las 140 muestras recolectadas 64 de ellas (45,7%)
presentaron elevada carga de clulas somticas (> 200.000 cel/mL). De las muestras con
elevado contenido de clulas somticas, 20 muestras (31,25%) presentaron disminucin
en los niveles de grasa, 18 muestras (28,12%) presentaron disminucin en los niveles de
protena, 7 muestras (10,94%) presentaron disminucin en los niveles de lactosa y 31
muestras (48,44%) presentaron disminucin en los niveles de slidos totales. Por otra
parte, se observ que 12 muestras (18,75%) presentaron disminucin de la acidez, sin
embargo, todas las muestras analizadas resultaron estables a la prueba de alcohol.
(Sandoval et al., 2011).
Guzmn (2003) realiz un estudio transversal para investigar la calidad de leche
de pequeos productores, pertenecientes a las provincias de Valdivia, Osorno y
Llanquihue, Dcima Regin, Chile. Se seleccionaron al azar 150 pequeos productores
de leche asociados a 42 Centros de Acopio Lechero (CAL) a los cuales se les realiz
una encuesta entre los meses de abril y mayo de 2002. El objetivo del estudio fue
investigar los principales factores de manejo que estn asociados a altos Recuentos de
Clulas Somticas (RCS) en la leche de estanque de rebaos de pequeos agricultores.
Los datos de la encuesta fueron ingresados a una planilla electrnica Microsoft Excel
junto con el valor promedio y mximo de los RCS de los ltimos dos meses anteriores a
la encuesta. Los RCS no siguieron una distribucin normal, para lo cual fueron
transformados a logaritmo natural (LN). Los anlisis estadsticos fueron llevados a cabo
en el programa computacional SPSS 8.0. Se calcul la correlacin de Pearson entre el
LN de los RCS de los valores promedio y valores mximos de los dos meses previos a
la encuesta y los factores de manejo realizados por los pequeos agricultores. Los
factores de manejo que en la correlacin obtuvieron valores de P 0,20 fueron
ingresados a un modelo de regresin mltiple. En la regresin se fueron eliminando
regresivamente del modelo los factores de manejo que obtenan valores de P > 0,05. As
el modelo final est constituido por factores de manejo con significancia P < 0,05.
3.2 Bases legales
ISO 13366-1: 2008 proporciona orientacin sobre las condiciones de

funcionamiento para el recuento de clulas somticas, tanto en la leche cruda y se
conservan qumicamente, usando contadores de clulas somticas fluoro - opto electrnicos en los que sea una tcnica de disco giratorio o citometra de flujo es
aplicada en la seccin de conteo. La orientacin es aplicable al recuento de clulas
somticas en la leche de vaca cruda. La orientacin tambin es aplicable a la leche cruda
de otras especies, tales como cabra, oveja y bfalo, si se cumplen los requisitos
especificados.
Segn la resolucin 000012 de 2007 del Ministerio de Agricultura, la calidad
higinica de la leche se define como la condicin que hace referencia al nivel de higiene
mediante el cual se obtiene y manipula la leche. Su valoracin se realiza por el recuento
total de bacterias. Desde el punto de vista de la sanidad animal, los animales deben
encontrarse libres de brucelosis, tuberculosis y enfermedades zoonticas; sin
alteraciones del aparato genital, inflamaciones y heridas perceptibles en la ubre.
La legislacin sanitaria establece que los hatos con ganaderas identificadas con
enfermedades a travs de la leche, deben desarrollar un programa de saneamiento para
acceder a la comercializacin de la leche (Decreto 616 de 2006 Ministerio de
Agricultura).
La calidad higinica y sanitaria, est determinada por factores de orden
microbiolgicos influenciados por la prctica de aseo, desinfeccin e higiene ambiental
al momento del ordeo (Hurtado, 2009). El Decreto 616 de 2006, describe la prctica de
ordeo (artculo 6), las condiciones de conservacin, tratamiento de la leche y tambin
lo requisitos microbiolgicos (artculo 19). Este Decreto es adems la reglamentacin
bsica y gua para la certificacin de las Buenas Practicas Ganaderas (BPG).
3.3 Bases tericas

3.3.1
Vaca
Mamfero rumiante bvido, hembra, de unos 150 cm de altura y 250 cm de
longitud, cuerpo muy robusto, pelo corto, cabeza gruesa provista de dos cuernos curvos
y puntiagudos, hocico ancho, papada en el pecho, y cola larga con un mechn en el
extremo; de l se aprovechan la leche, la carne y la piel.
Por analoga, llamamos ganado doble propsito a aquel que tiene la propiedad de
producir leche y carne. El sistema puede enfatizarse hacia la produccin de carne o
hacia la produccin de leche. (Cabrera, 2006).
3.3.2 Produccin y secrecin de la leche
La glndula mamaria es el rgano responsable de la produccin y secrecin de la
leche, (Trujillo, 2002). La glndula est dividida en cuatro cuartos, donde cada uno de
stos es una unidad funcional independiente para la produccin de leche, siendo los
cuartos posteriores responsables de un 60% de la produccin en comparacin con los
cuartos anteriores (40%). (Ruegg 2000, Wattiaux 2002). Al interior de la glndula se
encuentran los alvolos, quienes son los responsables de la produccin de leche (Tllez,
2000).
La secrecin de leche desde las clulas alveolares de la ubre es un proceso
continuo. Por el contrario, la eyeccin de la leche se produce por impulsos, cuando el
recin nacido mama o durante el ordeo. Por lo tanto, la leche que se elabora se tiene
que almacenar temporalmente en algn sistema de espacios huecos con una elevada
capacidad de distensin, formado por una porcin alveolar y una porcin de cisternas.
La primera porcin est formada por los espacios huecos de los alvolos y los conductos
galactforos menores (Engelhardt y Breves 2005). La glndula est dividida en cuatro

cuartos, donde cada uno de stos es una unidad funcional independiente para la
produccin de leche, siendo los cuartos posteriores ms desarrollados que los cuartos
anteriores (Ruegg, 2001).
Figura 1. Anatoma de la ubre
Fuente: Ruegg, 2001
Para obtener leche de la porcin alveolar se necesita el efecto de la oxitocina que

provocar el descenso de la leche alveolar hacia las cisternas. La leche alveolar tiene
que ser llevada hasta la porcin de la cisterna antes de que se pueda ordear. Este
proceso se llama eyeccin de la leche. La oxitocina (hormona para la secrecin de la
leche), producida en el hipotlamo y es transferida de este a la hipfisis posterior, no a
travs del sistema vascular, sino a travs de los axones del sistema nervioso (Hafez y
Hafez 2000, Engelhardt y Breves 2005).
En una hembra durante la lactancia, los estmulos visuales y tctiles asociados
con el amamantamiento o el ordeo, inducen la liberacin de la oxitocina a la
circulacin. La oxitocina causa la contraccin de las clulas mioepiteliales (clulas
musculares lisas), que rodean los alvolos de la glndula mamaria, provocando la
secrecin de la leche. (Hafez y Hafez 2000).
Figura 2. Arco reflejo neuro-hormonal de la eyeccin de leche
Fuente: Ingalls, 2000
El estmulo se transmite por la mdula espinal, la mdula oblonga y el tlamo

hasta llegar al hipotlamo, donde provoca un incremento de la secrecin de la oxitocina
almacenada en el lbulo posterior de la hipfisis (Madrigal y lvarez, 2004). A travs

del torrente circulatorio la hormona llegar hasta la glndula mamaria y se une a
receptores especficos de las clulas mioepiteliales y clulas de musculatura lisa de los
conductos galactforos menores. La contraccin de los podocitos aumenta la presin de
los alvolos, con lo que la leche que contienen es impulsada hacia los conductos
galactforos menores; desde ellos, la contraccin de las fibras musculares lisas har que
la leche fluya a las cisternas glandulares y del pezn. El tiempo transcurrido entre el
inicio del estmulo mecnico de la ubre y la eyeccin de la leche se denomina tiempo de
latencia, que es de un minuto aproximadamente. El efecto de la oxitocina dura cinco a
siete minutos, perodo en el cual el nivel de la hormona en el plasma sanguneo va
disminuyendo a causa de la descomposicin de la oxitocina provocada por la enzima
oxitocinasa. (Engelhardt y Breves 2005).
3.3.3 Leche cruda
De acuerdo con el Decreto 616 del 2006 expedido por el Ministerio de Salud y
Proteccin Social, la leche est definida como el producto de la secrecin mamaria
normal de animales bovinos, bufalinos y caprinos lecheros sanos, obtenida mediante
uno o ms ordeos completos, sin ningn tipo de adicin, destinada al consumo en
forma de leche lquida o a elaboracin posterior y que no ha sido sometida a ningn tipo
de termizacin ni higienizacin. (Ministerio de Salud y Proteccin Social, 2006).
Es un producto destinado para la alimentacin humana, definida como un
producto integral proveniente del ordeo total e interrumpido de una hembra lechera,
sana y bien alimentada y no agotada, recogida de forma limpia y que no contiene
calostro; mientras que para la Federacin Internacional lechera (F.I.L), la leche es el
producto de la secrecin normal de la mama, obtenido por uno o varios ordeos, sin
ninguna adicin o substraccin. (Cabrera, 2006).
3.3.3.1 Calidad de la leche.

Una leche de calidad es aquella que posee una composicin (grasa, protena,
lactosa, vitaminas y minerales) de excelencia, que presenta recuentos microbianos bajos
(higinica), est libre de patgenos y no tiene contaminantes fsico-qumicos. Una leche
de calidad es un requisito indispensable para el logro de productos de buena calidad,
donde el hato es el primer condicionante para este proceso (Fernn, 2010).
La calidad de la leche implica analizar cantidad, componentes y factores
contaminantes como bacteriolgicos, presencia de residuos y clulas somticas (Rivas
et al; 2001), siendo este ltimo, uno de los parmetros de calificacin de la leche cruda
(Jnosi y Baltay, 2004) y un medio para conocer el estado de salud de las ubres en
animales de produccin de los hatos ganaderos, por ser considerado un indicador de
mastitis bovina (Rivas et al; 2001), en base a que refleja la respuesta inmune y la
presencia de infeccin (Barkema et al; 2009), lo que puede perjudicar la produccin y
daar las caractersticas de los lcteos (Rivas et al; 2001), pudindose prevenir
manteniendo el bienestar de los animales y el control de enfermedades (Hernndez y
Bedolla, 2008).
Al referirse al control de calidad de leche, se habla del uso de anlisis aprobados
para asegurar la aplicacin de buenas prcticas, normas y reglamentos relativos a los
productos lcteos (FAO, 2012), todo ello diseado para asegurar que se puedan cumplir
con las normas aceptadas para la composicin qumica y pureza, as como las
concentraciones de distintos microorganismos. (Jnosi y Baltay, 2004).
La calidad de la leche implica grandes costos a nivel de toda la cadena de
produccin, comercializacin y consumo (Rivas et al; 2002), resaltando la necesidad de
tener un sistema de control de calidad para la industria lechera, siendo as para el
productor, procesadores, consumidor, pblico y organismos gubernamentales de leche

quienes esperan tanto un precio razonable de acuerdo con la calidad como las garantas
para la salud poblacional; lo que es posible a travs de una institucin con pruebas de
calidad nutricional, funcional y sistemas de aseguramiento de inocuidad de acuerdo a
las normas nacionales o internacionalmente aceptables. (FAO, 2012).
3.3.3.1.1 Calidad higinica de la leche

La calidad higinica hace referencia a todas aquellas prcticas de manejo en
finca que lleva consigo el control de mastitis, la enfermedad ms costosa del hato
lechero por el impacto que tiene en la disminucin de la produccin (Cotrino, V., 2003).
Producir leche con buena calidad higinica resulta sumamente complejo ya que el
producto a manejar es extremadamente delicado a la manipulacin durante su
recoleccin (Urdaneta, J., 2005).
3.3.3.1.1 Factores que afectan la calidad higinica de la leche
Los factores que afectan e influyen, con la calidad higinica de la leche en un
alto porcentaje son las actividades del hombre en el proceso de ordeo, la raza, la
individualidad de la vaca, el estado de salud, la poca del ao, el estado de lactancia, la
presencia de medicamentos, las prcticas de alimentacin y de manejo. (Serrano, 2004;
Cabrera, 2006).
Figura 3. Factores de riesgo.
Fuente: Ruegg, 2006
Para Guifarro (2005), la calidad higinica engloba la salud pblica desde el

punto de vista de la ausencia de microorganismos, suciedades, olores, sabores extraos,
antibiticos y restos qumicos.
3.3.3.2 Calidad sanitaria de la leche

La calidad sanitaria est relacionada con la puesta en prctica de planes de
control y/o erradicacin de infecciones que puedan significar riesgo para el consumidor,
el personal de la finca y/o los animales. La calidad sanitaria es bonificada siempre y
cuando los animales estn libres de enfermedades como la fiebre aftosa y la brucelosis
(Serrano, 2004). La calidad sanitaria de la leche no puede reducirse a vacunar y estar
certificado como finca libre de Brucelosis y tuberculosis; en los pases reconocidos
como grandes productores de leche y derivados lcteos, la calidad sanitaria de la leche
es cuantificable con la medicin de clulas somticas. (Benavides, D., 2011).
3.3.3.2.1 Recuento de Clulas Somticas (RCS)
El recuento de clulas somticas es uno de los indicadores de la calidad de la
leche. Cuando este ndice se incrementa, lo hace en respuesta a bacterias patgenas
como Staphylococcus aureus, causante de mastitis. Utilizar los datos de RCS como
herramienta de manejo en la lucha frente a las mastitis en los hatos requiere una
interpretacin apropiada. La mastitis es una enfermedad muy costosa y depende, en gran
medida, de un manejo e higiene apropiados. Cuando los productores ven los resultados
de RCS pueden estar tentados a prestar ms atencin a los animales con niveles muy
elevados, puesto que son los ms impactantes. Sin embargo, las vacas con niveles de
RCS moderadamente elevados (entre 200 mil y 500 mil/mL) suelen ser ignoradas. El
seguimiento debera enfocarse en el tratamiento de nuevos ndices de infeccin, ndices
de recuperacin e ndices de infeccin en el periodo seco. (CONtexto ganadero, 2015).
Para el diagnstico de la mastitis subclnica el RCS, ha demostrado ser un
excelente indicador y se ha usado para estimar la reduccin en la produccin de leche
asociada a este tipo de mastitis (Durr et al., 2008).
Ms del 98% de las clulas somticas que se encuentran en la leche provienen de

las clulas blancas que ingresan a la misma en respuesta a la invasin bacteriana de la
ubre. Un alto conteo de clulas somticas se asocia con la prdida de la produccin de
leche. Un conteo de clulas somticas mayor de 200.000 cel/mL indica la presencia de
mastitis subclnicas. Los conteos de clulas somticas por debajo de 400.000 cel/mL son
tpicos de los hatos que poseen buenas prcticas de manejo, pero que no hacen un
particular nfasis en el control de la mastitis. Los hatos que poseen un programa de
control efectivo de la mastitis poseen en forma consistente conteos por debajo de las
100.000 cel/mL. Recuentos de clulas somticas mayores de 500.000 cel/mL indican
que un tercio de las glndulas se encuentran infectadas y que la prdida de leche debido
a mastitis subclnica es mayor de 10% (Wattiaux, 2011).
Tabla 1. Estado de cuarto de ubre
Rango de clulas somticas
0-200.000
200.000-500.000
500.000-1.000.000
>1.000.000
Interpretacin
Cuarto sano
Mastitis subclnicas
Mastitis clnica
Infeccin seria-severa
Fuente: Hernndez & Bedolla, 2008
Sin embargo, se deber tener en cuenta la interpretacin de conteos de las clulas

somticas, especialmente cuando existen otros factores externos ( Tabla 2), que puedan
elevar el nmero de las mismas, ejemplo: el estrs, la estacin del ao, la edad, la etapa
de lactancia, daos en la ubre (golpes, heridas, etc.) y algunas causas indirectas como
funcionamiento de la mquina de ordeo (vaco, pulsaciones, etc).
Tabla 2: Factores que influyen en el recuento somtico de la leche
Factores
Relativo a mastitis
Fisiolgicos y farmacolgicos
Asociados a estrs
Fisiopatolgicos
Fuente: Adaptado de Saran y Chaffer (2000).
Causas
Patgenos, Toxinas, Traumas
Periodo de lactacin, Raza, Drogas,
Veterinaria, Periodo de celos
Cambios de alimentacin, Transporte,
Manejo, Ordeo
Enfermedades metablicas
3.3.4 Mastitis bovina

La mastitis es la enfermedad infectocontagiosa ms comn de las vacas lecheras,
especialmente la raza Frisona, ya que es una de las razas ms utilizadas para producir
leche. La mastitis se define como la inflamacin de la glndula mamaria que
generalmente se presenta como una respuesta a la invasin por microorganismos y se
caracteriza por daos en el epitelio glandular, seguido por una inflamacin clnica o
subclnica, pudiendo presentarse con cambios patolgicos localizados o generalizados,
dependiendo de la magnitud del dao. Es una enfermedad multifactorial ya que la
infeccin depende de los grmenes, las condiciones ambientales, y las caractersticas de
la vaca. Tiene un impacto negativo en la calidad y la cantidad de leche producida,
produciendo prdidas para el sector ganadero. Si no se trata a tiempo, se puede convertir
en crnica, y hacer que la vaca se tenga que sacrificar (Snchez, 2010).
3.3.5 Clasificacin de la mastitis
3.2.5.1. Mastitis clnica
Es un proceso inflamatorio principalmente de origen infeccioso de la glndula
mamaria, producido por varias clases de microorganismos. En Colombia, por lo menos
en el 85% de los casos, involucra bacterias de los gneros Streptococcus spp y
Staphylococcus spp. El resto pueden ser producidas por otras bacterias como E.coli,
Pseudomonas spp, Corynebacterium spp y por mohos y levaduras. (Cotrino, 2010).
La mastitis clnica ocasiona anormalidades e inflamacin en la ubre o cambios
en la leche (grumos) a simple vista (Czar y Caiz, 2009), ocasionando dolor al animal y
fiebre, prdida en la produccin de leche, anorexia, diarrea, cojera, debilidad, prdida de
la produccin durante el tratamiento mdico. A nivel fisiolgico el sistema inmune de la
vaca responde a la invasin bacteriana enviando glbulos blancos al cuarto infectado

para combatirla (Wolter, 2010).
Dentro de la mastitis clnica Salvador y Abner (2005) la clasifica de la siguiente
manera: Mastitis ambiental y Mastitis gangrenosa
3.2.5.4 Mastitis subclnica
Es un proceso inflamatorio que no produce los signos tpicos de inflamacin,
calor, dolor, tumefaccin, rubor, ni cambios macroscpicos de la secrecin lctea. Este
tipo de inflamacin es la ms frecuente y la que produce mayor dao econmico. Para
detectar este tipo de mastitis es necesario emplear mtodos especiales de diagnstico,
puede alcanzarse por medio de Cultivos bacteriolgicos, la Prueba California para
Mastitis (CMT), Prueba Wisconsin para Mastitis (WMT) y el Recuento de Clulas
Somticas por mtodos opto-electrnicos (Fossomatic y Counter Coulter). (vila y
Blanco, 2006; Aliaga, 2008; Carrin, 2009; Cotrino, 2010).
La mastitis subclnica ocurre cuando un patgeno infecta uno o ms cuartos,
pero no causa suficiente dao a los alvolos (Ruegg, 2006), no es fcilmente visible por
el operario, aunque todos los cuartos de la vaca se ven normales y la leche tiene
apariencia normal, con aproximadamente 500.000 unidades formadoras de colonia por
mililitro (UFC/mL) (Pinzn, 2008), pero hay cambios importantes en la composicin de
la leche. En las mastitis subclnicas, una gran proporcin de las glndulas afectadas no
se identifican fcilmente por palpacin manual de la ubre, ni por el examen visual con la
paleta de fondo oscuro (Wolter, 2010).
El efecto de esta enfermedad en la productividad del hato es generalmente
subestimado debido a que el nmero de animales subclnica mente enfermos usualmente
es mayor que el nmero de animales clnicamente enfermos. La inhabilidad de
identificar enfermedad subclnica y la larga duracin de estos sndromes permite que

estas enfermedades tengan un impacto considerable en la productividad del hato;
generalmente este problema sigue un curso predecible con varios niveles para una
potencial intervencin preventiva. (Ruegg, 2001).
Figura 4. Desarrollo de la enfermedad.
Fuente: Adaptado de Ruegg, 2001
3.3.6 Mtodos de deteccin de la mastitis bovina

El diagnstico de mastitis en una vaca se fundamenta en el reconocimiento de
los elementos bsicos de un proceso inflamatorio de origen infeccioso, presencia de
clulas polimorfonucleares y aislamiento del agente etiolgico que coloniza la glndula
mamaria (Cotrino, 2003).
3.2.6.1 Mtodos de conteo electrnico celular
Los mtodos electrnicos tienen en la actualidad una aplicacin universal, sobre
todo en laboratorios de control lechero o dedicados al diagnstico o investigacin de la
mastitis, utilizndose aparatos de recuentos celulares como el BactoScan FC,
Fossomatic (Foss Electric, Dinamarca), y el Counter Coulter (Coulter, Inglaterra) (Saran
y Chaffer, 2006; Bedolla, 2008).
3.2.6.2 Mtodo fluoro-opto-electrnico Fossomatic
El mtodo es el ms utilizado en la industria lechera para medir el RCS y utiliza
un equipo denominado fossomatic (Figura 5), el cual est basado en la tincin
fluoromtrica del material nuclear y posee alta correlacin con la microscopa ptica,
por lo que proporciona una medida segura en el recuento de clulas somticas.
(Echeverri et al., 2010).
La citometra de flujo es una metodologa que por su seguridad y velocidad

permite la cuantificacin de un gran nmero de clulas, produciendo mayor exactitud en
los resultados y precisin en la identificacin, es una alternativa para un mayor control
en cuanto a clulas somticas y bacterianas en leche, por sus ventajas frente a mtodos
tradicionales como la citologa convencional, en cuanto a su rapidez de operacin como
tambin la identificacin de clulas viables de las no viables (Rivas et al., 2001).
Figura 5. Mtodo fluoro-opto electrnico (Fossomatic)
Fuente: Adaptado de Bedolla, C., 2007
Fundamento
Durante el proceso de medicin se tien las clulas somticas con un colorante
fluorescente para obtener una reaccin slo con el DNA de las clulas, generalmente
bromuro de etidio. Las partculas sucias y los glbulos de los lpidos no se suman al
nmero de las clulas somticas. La muestra pasa por una membrana de poros finos
frente a una luz especial y un detector registra cada clula somtica. Entre cada muestra
el aparato limpia su sistema de flujo para evitar el efecto del arrastre de una muestra a
otra y mide con alto grado de precisin y exactitud el RCS. Adems, ofrece la
posibilidad de registrar los datos automticamente. (Echeverri et al, 2010).
3.2.6.3 DeLaval Cell Counter

El DeLaval Cell Counter (DCC) es un equipo porttil, que funciona con batera
y posee un medidor ptico de clulas somticas de la leche. Esto permite estudiar el
estado de salud de la ubre de la vaca, tambin posibilita el estudio de los estndares
higinicos en la leche del tanque. El equipo utiliza casettes los cuales succionan
cantidades pequeas de leche, la leche se mezcla con reactivos que llegan al ncleo de
las clulas somticas, lo cual permite su conteo, mediante un sensor de fluorescencia.
Esto se traduce en el nmero de clulas somticas en leche, el cual aparece rpidamente
en la pantalla del equipo. Su principio es similar al utilizado por el equipo Foss y
programa datos precisos sobre el estado de salud de la ubre de la vaca lechera . (Bedolla
et al., 2007).
3.2.6.4 Prueba de California para Mastitis (CMT)
La Prueba de California para Mastitis (CMT, por sus siglas en ingls) ha sido
empleada durante dcadas y sigue siendo la prueba ms utilizada a nivel de campo para
el diagnstico de mastitis en el ganado bovino lechero. Es una prueba sencilla que es
til para detectar la mastitis subclnica por valorar groseramente el recuento de clulas
de la leche. No proporciona un resultado numrico, sino ms bien una indicacin de si
el recuento es elevado o bajo, por lo que todo resultado por encima de una reaccin
vestigial se considera sospechoso. La Prueba de California es un mtodo de diagnstico
que posee una sensibilidad del 97% y una especificidad del 93%. (Bedolla et al., 2007;
Medina y Montaldo, 2003).
3.2.6.5 Prueba de Wisconsin para Mastitis (WMT)
La Prueba de Wisconsin para Mastitis (WMT), fue diseada para el uso en el
laboratorio, y es utilizada para estimar el contenido de clulas somticas de muestras de
leche fresca mezclada o leche de tanques de enfriamiento, as como para muestreo de
vacas individuales. Se utiliza una solucin similar a la que se emplea con la prueba de
California, pero en contraste con esta ltima, los resultados se miden cuantitativamente
dependiendo de la viscosidad, no cualitativamente como en la CMT (Fernndez, 1997;
Bedolla et al., 2007).
3.2.6.6 Prueba de Whiteside
La mezcla de leche con una solucin de NaOH al 4% ocasiona que la leche se
gelifique formando grumos que son visibles. Los grumos sern ms grandes conforme
la leche contenga mayor nmero de clulas somticas. Para hacer ms visible la
reaccin es conveniente usar una placa de acrlico negra que puede tener dibujada 4
cuadros de 3cm x 3cm, uno por cada cuarto (Prez et al., 2005).
4. MATERIALES Y MTODOS
4.1. Clasificacin de la investigacin

Esta investigacin es de tipo descriptiva basada en un muestreo no probabilstico por
conveniencia.
4.2. Poblacin de estudio y muestra
La poblacin objeto de estudio, estuvo enmarcada en 513 vacas doble propsito
lactantes, en tres categoras de hatos lecheros ubicados en el departamento del Cesar.
Muestra: Se muestre el 30% de la totalidad de la poblacin de estudio, obteniendo

171 muestras, distribuidas por hato, en 78 muestras para el grande, 65 para el mediano y
28 para el pequeo.
4.2.1. Criterios de inclusin.

-Hatos lecheros ubicados en el departamento del Cesar
-Vacas con ms 4 das en leche
- Ganado que no presente tratamientos con simbiticos
-Vacas sin lesiones en ubre y pezn
4.2.2. Criterios de exclusin.
-Hatos lecheros no ubicados en el departamento del Cesar
-Vacas con menos de 4 das en leche
-Vacas con tratamiento con simbiticos
-Vacas con lesiones en ubre y pezn
4.3. Sistema de variables

Tabla 1. Operacionalizacin de las variables
Variable
Leche
Vaca
lactante
Recuento
de clulas
somticas
RCS
Sanidad
animal
Definicin
Nivel de
medicin
Criterio de clasificacin
Sustancia lquida y blanca

que segregan las mamas
de las hembras de los
mamferos para alimentar
a sus cras y que est
constituida por casena,
lactosa, sales inorgnicas,
glbulos de grasa y otras
sustancias
(Cabrera, 2006).
Cualitativa
nominal
Apta
No apta
Estado de mayor atencin

del animal, debido a que
su organismo est
sometido a exigencias
metablicas; al mismo
tiempo se debe recuperar
y preparar nuevamente
para concebir (Tllez,
2000).
Cuantitativa
discreta
Edad mnima (3 aos)

Edad optima (3-4 aos)
Edad mxima (>4 aos)
Cuantitativa
continua
Rango aceptado: 0-200.000

clulas/mL
Cualitativa
nominal
Sano
Enfermo
Indicador del estado

general de salud de la
glndula mamaria de la
hembra lactante, el cual
es ampliamente utilizado
para el control de la
calidad higinica en
produccin lechera
(Durr et al., 2008).
Aspectos relacionados
con la salud de los
animales, tanto de los
animales productores de
alimentos, como las de
los animales de compaa
y silvestres (Ruegg,
2001).
4.4. Diseo metodolgico
Para ejecutar el trabajo de campo fueron planteadas cinco etapas, las cuales,
consistieron en una encuesta encaminada a evaluar la aplicacin de Buenas Prcticas de
Ordeo a nivel de hato, toma, transporte y procesamiento de muestras a nivel de
laboratorio, definicin de una estrategia de intervencin generada a partir de resultados.
Las muestras fueron recolectadas en tres categoras de hatos lecheros que cumplan con el
criterio de (grande, mediano, pequeo) en el municipio de Valledupar, y por aceptacin de
participacin del propietario donde se realiza el ordeo rutinario de los animales en forma
manual, y transportadas al laboratorio Calidad de Leche (LCL) del Centro de Desarrollo
Tecnolgico del Cesar (CDT).
Etapa 1. Encuesta
Basado en el manual de Buenas Prcticas de Ordeo (BPO) de Olancho (2010), se

dise una encuesta encaminada a determinar los factores influyentes en la calidad sanitaria
y si los hatos participantes en el estudio aplican las BPO (Ver Anexo 1).
Etapa 2. Toma y transporte de las muestras.

Durante esta etapa se recolectaron las muestras de leche cruda en los tres hatos
participantes en el estudio, mediante un muestreo por conveniencia se eligieron las vacas
doble propsito que cumplan con los criterios de inclusin, tomando 60 mL de leche por
vaca a vaca, de los cuatro cuartos de la ubre, obteniendo una cantidad total de 8,550 mL
(3,900 mL hato grande, 3,250 mL hato mediano y 1,400 mL hato pequeo) de leche
evaluadas para el estudio.
Las muestras de leche cruda fueron recolectadas despus de realizar una limpieza
previa a la ubre de la vaca, con agua clorada para el caso del hato grande y solucin
desinfectante yodoforos para el caso de los hatos mediano y pequeo, durante el primer
ordeo que se realiz en horas de la maana y bajo la eliminacin de los primeros chorros.
Estas se tomaron en recolectores tipo click con capacidad de 70 mL dejando un espacio de
cabeza o burbuja de aire, utilizando el conservante bronopol (Bactericida) bajo
movimientos de inversin de abajo hacia arriba hasta su completa disolucin, las muestras
fueron identificadas externamente bajo la codificacin del animal y llevando a
conservacin en neveras con geles refrigerantes para garantizar la temperatura de la
muestra entre 4-6 C, con control de temperatura.
Se identificaron las muestras bajo la codificacin del animal, generndose un
registro en el formato de toma de muestra (Ver Anexo 2)
En el momento de tomar las muestras de leche, el responsable de empacar las
muestras, toma el recipiente designado como Control de Temperatura, llenndolo con
leche hasta la muesca; la muestra control y las de anlisis se almacenaron inmediatamente
en el centro de la nevera con geles refrigerantes con el fin de proporcionar la temperatura
ideal para la conservacin de las muestras (Figura 5). Esta temperatura se verific antes de
empacar con un termmetro de punzn, generando registro en la Cadena de Custodia de las
muestras (Ver Anexo 3).
Figura 3. Nevera con geles refrigerantes para la conservacin de muestras
Fuente: Nobles L., vila, E., Quintero, E., 2016. (Laboratorio Calidad de Leche)
Las muestras empacadas en cavas fueron transportadas de forma inmediata en un

tiempo mnimo de 2 horas entre la toma y recepcin en el laboratorio de leche cruda LCL
del Centro de desarrollo tecnolgico del cesar CDT, con el fin de ser procesadas a nivel de
laboratorio.
Pasado un mes, se realiz un segundo muestreo en los 3 hatos, con el mismo
nmero de vacas (171) tomadas en el primer muestreo; de las cuales, solo 27 coincidieron,
considerndose stas, como un re-muestreo de acuerdo a la lista de identificacin bovina.
Etapa 3. Anlisis de laboratorio.
Una vez entregadas las muestras al laboratorio, estas fueron verificadas bajo las
especificaciones de ingreso, las cuales cumplieron en su totalidad (muestras libres de suelo,
partculas contaminantes, separacin de muestras y/o coagulacin). Las muestras fueron
analizadas bajo el conteo de clulas somticas contenidas por mL bajo el mtodo
normalizado ISO 13366-1: 2008 (IDF 148-1,2008) por citometria de flujo, con el equipo
Combifoss plus 200H (Unidad Fossomatic FC).
Fase I: Preparacin de la muestra por Fossomatic FC
Las muestras se ubicaron en bao de mara a 42C, durante 10 minutos o el tiempo

necesario hasta alcanzar la temperatura de 40C, invirtindose suave y repetidamente
durante el calentamiento. Posteriormente se verific la temperatura interna de la muestra, a
40C con el termmetro de punzn. Se mezclaron homogneamente las muestras con
movimientos de mano por inversin de tres a seis veces, suavemente antes de realizar la
medicin.
Previo al alistamiento, se procedi a la preparacin de los reactivos bajo los siguientes
procedimientos:
Solucin Stock (Reagent D): Disolver 125 mL de Fossomatic Clean (Reagent D) en 1,25
L de agua desionizada, calentada a unos 60C.
Solucin de Buffer/diluyente: Colocar 250 mL de solucin de stock en un recipiente con
88,5g de Fossomatic Buffer. Aadir agua desionizada hasta 2,5 litros. Para acelerar el
proceso calentar a 40 - 60C.
Lquido de limpieza/portador/solucin en blanco (SHEATH-RINSE): Mezclar 100 mL
de solucin de stock con agua desionizada hasta llevarla a 20 L. Aadir 2 g de NaCl a la
solucin de 20 L, agitar bien.
Fase 2: Manejo del Combifoss (Unidad Fossomatic FC)
El modo de operar el equipo CombiFoss para el anlisis sanitario de las muestras de
leche cruda, se describen en el protocolo establecido por el laboratorio (Anexo 4).
ETAPA 4: Anlisis e interpretacin de resultados
De acuerdo a la aplicacin de la Encuesta, se hizo un Anlisis descriptivo de las
variables influyentes a nivel del hato, teniendo en cuenta los aspectos relacionados a la
aplicacin de las Buenas Prcticas de Ordeo (BPO) en las fincas productoras de leche, las
cuales, involucran la planificacin y realizacin de una serie de actividades que contribuyen

con el cumplimiento de los requisitos mnimos para producir leche apta para el consumo
humano y su adecuado procesamiento en la elaboracin de productos lcteos.
Basado en los resultados obtenidos de Conteo de Clulas Somticas, estos fueron
tabulados en hojas de clculo y grficas de frecuencia del programa de office, Microsoft
Excel 2013, bajo el anlisis cualitativo de Rangos (Alto - Medio y Bajo) para la
Clasificacin del estado de la Ubre de la Vaca con Mastitis Clnica, Subclnica y estado
normal y la clasificacin de Hatos (Pequeo, Mediano y Grande).
ETAPA 5: Definicin de estrategia
La estrategia de Intervencin se bas en los resultados de la encuesta y los Conteos
de Clulas Somticas, con el fin de aplicarse post-ordeo, a travs de un medio visual
denominada Cartilla Andragogica (Ver Anexo 5), generndose el registro de entrega a nivel
de hato de los Informes de Resultados AL-F-24 del LCL (Ver Anexo 6) y la transferencia
de los mismos al ordeador.
5. RESULTADOS Y DISCUSIN
ANLISIS DE LA CALIDAD SANITARIA DE LA LECHE CRUDA
Basado en la encuesta, se pudo evidenciar que no se aplican las BPO y se

identificaron las variables que influyen y las de mayor importancia en los RCS de los tres
hatos lecheros, siendo un criterio predominante para determinar la calidad de la leche segn
Pavel & Gavan, 2011, el Inadecuado sellado de pezones al terminar el ordeo, condiciones
higinico sanitario deficiente, avanzada edad del animal, nmero de partos, largo tiempo de
lactancia y lesiones significativa en la ubre y pezones. El porcentaje se encuentra
influenciado estadsticamente por la edad adulta de los animales con un 98.11%, debido a la
presencia de ms infecciones (Reichmuth, 1975), y a pesar que los bovinos estn libres de
mastitis clnica, el parmetro aumenta con los aos y partos (Pavel & Gavan, 2011;
Skrzypek et al., 2004).
A continuacin se presentan los resultados delas variables influyentes de la encuesta
planteadas:
Instalaciones Fsicas
De acuerdo a la tabla 4, se presenta el incumplimiento de los aspectos que hacen
referencia a las instalaciones fsicas. En los hatos de grande y mediana categora, no se
evidencia reservorio o pila de cemento con agua clorada para la correspondiente limpieza y
desinfeccin de la ubre y utensilios de trabajo, con un porcentaje de falta de 66.6% que
equivalen a los dos hatos mencionados anteriormente. La falta de aplicacin de esta
prctica, influye en la obtencin de leche de buena calidad higinica al no disponer en el
local de ordeo de un depsito de agua clorada en material de cemento y de fcil limpieza,
esto, repercute de manera directa al convertirse en una fuente de contaminacin

microbiolgica contra la sanidad del animal y su producto al comprometerse la ubre como
de igual manera las glndulas mamarias. Una investigacin realizada con rebaos
comerciales ha demostrado que las medidas higinicas durante el proceso de ordeo,
bsicamente lavado de ubres y desinfeccin de pezones post-ordeo, junto con la terapia de
secado y la limpieza de utensilios de ordeo con soluciones cloradas pueden reducir la
prevalencia de mastitis en un 50% en un ao y ms de un 70% en tres aos (Kingwill et al.,
2009). Cuhigen (2007), afirma que el uso de agua clorada es uno de los factores de mayor
importancia dentro de la higiene y el cuidado animal, por lo que es necesario verificar la
calidad de la misma con una frecuencia de al menos dos veces al ao.
Tabla 2. Cumplimiento de las variables evaluadas en instalaciones fsicas.

INSTALACIONES
Local de ordeo con piso de cemento
Reservorio o pila de cemento con agua clorada
para limpieza y desinfeccin de ubre y utensilios
de trabajo
Local de ordeo con techo (teja o zinc)
SI: Cumple totalmente, el 100%. NO: No cumple
Nmero de Hatos
SI
3
1
NO
0
2
Manejo del animal

De acuerdo a los resultados obtenidos en la tabla 5, se observa que, en las variables
evaluadas sobre el manejo del animal, hubo un porcentaje de incumplimiento del 33,3% en
el hato grande, que no realiza de manera correcta el sellado de los pezones al terminar el
ordeo, convirtindose esta, en una fuente de entrada para microorganismos causantes de
mastitis. Bakerma (2002) (citado por Cuberlo, 2007) observ que las prcticas de manejo
que ms afectaron la variacin en los RCS (Recuento de Clulas Somticas) entre hatos de
diferentes categoras, fueron la desinfeccin de los pezones con un sellador luego del
ordeo, el incumplimiento del tiempo recomendado para el proceso de extraccin total de la

leche (6-7 minutos) y el inadecuado proceso de ordeo con relacin al manejo rpido y
suave para evitar as retencin de leche en la ubre del animal.
En este estudio el 100% de los hatos, no excluyen en el proceso de ordeo, a vacas
viejas y con largo tiempo de lactancia. Butendieck (2009) afirma que, las clulas somticas
aumentan con la edad y el estado de lactancia del animal, al final de la lactancia y en las
primeras semanas posteriores al parto se puede producir un aumento del RCS
independientemente del nivel de infeccin de la glndula mamaria. Novoa, (2003) indica
que la prevalencia de infecciones subclnicas se incrementa a medida que el periodo de
lactacin progresa (Nacional Mastitis Council, 1995 Citado por Novoa, 2003). El 66,6% de
los hatos, no excluyen de manera temporal para el proceso de ordeo a vacas que presentan
lesiones o traumatismos tanto en ubre y pezn. Butendieck (2009) refiere que las lesiones
de la ubre pueden aumentar temporalmente los RSC incluso sin que exista infeccin de la
glndula mamaria, debido a que el tejido afectado es susceptible a la infeccin, por lo tanto,
es importante prevenir traumatismo de la ubre. En este estudio, el 33,3% de los hatos
incumplieron con la prctica de arreado del animal con tranquilidad y buen trato durante el
proceso del pre-ordeo. Serna (1969) (citado por Novoa et al., 2003) afirma que, dentro de
las operaciones de manejo animal, el ordeo es la ms delicada y la que reviste mayor
importancia e influencia en la presentacin de mastitis que sufre la vaca, en conjunto con
otros factores predisponentes.
Tabla 3. Cumplimiento de las variables evaluadas en el manejo del animal.
MANEJO DEL ANIMAL
Limpieza y desinfeccin de la ubre antes del

ordeo
Nmero de Hatos
SI
NO
Inmovilizacin y estimulacin de las vacas

Adecuado sellado de los pezones al terminar el
ordeo
Cantidad recomendada de tiempo (6-7 minutos)
para la extraccin total de la leche
Ordeo correcto, suave y rpido para evitar
retencin de la leche
Exclusin en el proceso de ordeo a vacas viejas
y con largo tiempo de lactancia
Excluyen temporalmente para el proceso de
ordeo a vacas con traumatismos o lesiones en
ubre y pezones
Arreado del animal con tranquilidad y buen
trato
3
2
0
1
Condicin del ordeador

Los aspectos evaluados en esta condicin se presentan en la tabla 6, y se encuentra
que el 100% de los (3) hatos analizados, incumplen en el lavado de mano antes, durante y
despus de cada ordeo, no poseen un adecuado atuendo o ropa para realizar tal actividad,
no reciben formacin o capacitaciones orientadas a las Buenas Practicas de Ordeo. Saran
y Chaffer, (2000) indican que las manos del operario son un medio para transmitir los
microorganismos de la mastitis. Su contaminacin puede ocurrir cuando se extrae el primer
chorro de leche, en el manejo de pezoneras, o tocando cualquier objeto contaminado en el
hato. El ordeador influye sobre muchos de los factores y en consecuencia sobre la calidad
higinica de la leche. Tambin puede contaminar directamente la leche (Walstra et al.,
2001), convirtindose en factores predisponentes que afectan la sanidad animal y la calidad
higinica de la leche.
Tabla 4. Cumplimiento de variables evaluadas con respecto a la condicin del
ordeador.
CONDICIONES DEL ORDEADOR
Nmero de Hatos
SI
NO
Lavado de mano antes, durante y despus de

cada ordeo
Adecuado atuendo o ropa para realizar el ordeo
Formacin o capacitaciones orientadas a las
actividades que comprenden las Buenas
Practicas de ordeo
Higinica sanitaria
De acuerdo a la tabla 7, se hace referencia al cumplimiento de las variables

evaluadas en condicin higinica sanitaria. En donde se observ un incumplimiento del
33.3% en un hato (grande), con respecto a la variable: ambientes higinicos, secos,
confortables y adecuada condicin climtica para las vacas. El incumplimiento de stos
factores medioambientales, afectan la calidad de la leche como la sanidad del animal,
debido a que el medio ambiente de la vaca es un reservorio importante para los organismos
que pueden causar mastitis, por lo que existen una serie de factores que no se deben perder
de vista por su vital importancia en la trasmisin de tales microbios: cama y alojamiento,
clima y poca del ao, equipo de ordeo y manejo del ordeo (National Mastitis Council,
1995 Citada por Novoa, 2003). En este estudio, el 33,3% de los hatos, se evidenciaron
animales domsticos en la sala de ordeo (perros y gatos), adems de que no cuenta con
certificacin animal ICA, responsable de velar por la sanidad agropecuaria a fin de prevenir
enfermedades (Brucelosis, Fiebre aftosa, Tuberculosis, Leptospirosis, etc.) y plagas que
puedan afectar la ganadera nacional. Las buenas prcticas de higiene y sanidad son el
reflejo de las excelentes condiciones del ordeo y el adecuado control sobre las ubres y el
entorno realizado por parte de los empleados. La imperfeccin, puede dar lugar a una
deficiente productividad y un bajo nivel nutritivo de la leche (Bennett 2000). Se puede
sealar que la calidad higinica de la leche cruda es el efecto de las condiciones del entorno
que rodea a la vaca y a sta en el momento del ordeo, en consecuencia, la contaminacin

de la leche en este trabajo, en su mayora es debida a las malas prcticas de higiene en la
rutina de ordeo tales como el secado de los pezones, desinfeccin antes y despus del
ordeo que favorecen el aumento de los recuentos de clulas somticas, incrementando de
esta manera los casos de mastitis y disminuyendo la calidad del producto (Grootenhuis et
al., 1979; Harmon, 1994; Mansilla, 2001; Pearson y Greer, (1998), citados por Fara et al.,
(2005). La National Mastitis Council (1990) Citada por Fara et al., (2005), estima que
entre un 70 a 80% de los casos de mastitis son debidos a tcnicas inadecuadas de ordeo,
caracterizada por pobres condiciones higinico-sanitarias, falta de desinfeccin pre-ordeo
y ordeos prolongados. Todos estos factores correspondientes a la higiene del ordeo
pueden afectar la salud de las ubres.
Tabla 5. Cumplimiento de las variables evaluadas en condicin higinica

sanitaria.
CONDICIN HIGINICO SANITARIA
Ambientes higinicos, secos, confortables y

adecuada condicin climtica para las vacas
Ausencia de animales (perro, gato) en la sala de
ordeo
Certificacin de sanidad animal ICA
Limpieza y desinfeccin adecuada de los
utensilios de trabajo (Yogos, Filtros de aluminio,
Baldes plsticos)
Rutina de limpieza y desinfeccin de las
Instalaciones
Nmero de Hatos, con cumplimiento total, y no

cumplimiento
100% SI
0% NO
2
1
2
2
3
1
0
Galton et al., 1988 Citado por Cuberlo, 2007 argumentan que una eficaz higiene
preordeo depende de una serie de factores, tales como la limpieza y secado de los pezones
y el material utilizado para secar los pezones. Adems, la calidad de la leche y la salud de la
ubre, pueden ser afectadas por estas prcticas pre ordeo. La limpieza, secado y
desinfeccin adecuada de los pezones inmediatamente antes del ordeo reduce los
recuentos de bacterias, as como la presencia de bacterias coliformes y especies de
Staphylococcus y tambin los sedimentos en la leche (Pankey et al., 1987, citado por
Cuberlo, 2007).
Anlisis en el Recuento de Clulas Somticas

Basados en los RCS de los diferentes hatos (grande, mediano y pequeo), se
encontraron variaciones en los resultados obtenidos, dependiendo del tamao del hato.
Evidencindose altos RCS en el hato de mayor tamao, con un porcentaje de 52,6% con
respecto a los 78 animales que se les realiz el anlisis. En el hato mediano se present un
porcentaje de 18,5% y para el hato pequeo 32.2%. (Figura 6). Cabe destacar, que en el
hato grande se present un mayor porcentaje (37,2) de RCS superiores a 200.000 cl/mL de
leche, siendo indicativo de Mastitis subclnica, en comparacin con el recuento de los hatos
de mediana y pequea categora. Consecuente a todo este anlisis, se encontr un
porcentaje presuntivo de mastitis e infeccin severa del 36,2% correspondiente a 62
animales afectados (vacas paridas), y el 63,7% correspondieron a conteos inferiores de
200.000 cl/ml de leche, para un total de 171 animales muestreados. lo que indica que
menos de la mitad de la poblacin estimada padece de mastitis, pero que el porcentaje de
frecuencia es bastante alto, puesto que al analizar a travs de una encuesta las variables
influyentes sobre las condiciones higinico sanitarias en cada una de las fincas
muestreadas, se determin con mayor frecuencia un incumplimiento en el hato grande
(Figura 7), presentando falencias al no utilizar toallas o papel peridico y soluciones

desinfectantes para la limpieza de los pezones antes, durante y despus del ordeo.
Figura 4. Histograma de frecuencia de los hatos lecheros con niveles de recuento de

clulas somticas.
A continuacin y basado en los resultados obtenidos de los altos Recuento de

Clulas Somticas, mayores de 200.000 cel/mL, siendo indicativos de mastitis subclnica
(MS) para los tres hatos lecheros (Figura 6), se generaron las siguientes graficas de
frecuencia:
En el hato grande, 29 vacas (37,1%) de un total de 78, presentaron RCS entre
205.000-478.000 cel/mL, los cuales se consideran como indicadores de mastitis subclnica
(Figura 7). Las 49 restantes, se mantuvieron entre cuarto sano (47,4%), mastitis clnica
(10,3%) e infeccin severa en un 5,1% (Anexo 7), De igual manera se puede observar, que
14 animales de los 29, superaron el rango de 400.000 cel/mL, conteos que pueden superar
los 500.000 cel/mL, que llevaran a los animales a una infeccin ms avanzada como es la
mastitis clnica, al no someter en tratamiento continuo a estas vacas afectadas. Con base a
la encuesta realizada hubo un porcentaje de incumplimiento del 33,3% en el hato grande,
que no realiza de manera correcta el sellado de los pezones al terminar el ordeo, de igual
manera no excluyen de manera temporal para el proceso de ordeo a vacas que presentan
lesiones o traumatismos tanto en ubre y pezn e incumplen el proceso de lavado de mano
antes, durante y despus del ordeo.
Figura 5. Histograma de frecuencia de RCS en hato grande-mastitis subclnica.
Estos resultados no se alejan de lo reportados por Trujillo et al., (2011) al determinar

la prevalencia de mastitis subclnica en hatos lecheros de ordeo manual en la regin
Litoral Oriente en Antioqueo, quienes encontraron una prevalencia de 41.9% equivalente a
41.9 vacas afectadas de 1,077. Resultados similares hallaron vila et al., (2010) al
comparar el estado de salud de ubres y la calidad sanitaria de la leche en tanque de dos
grupos de vacas, uno ordeado a mano (G1) y el otro mecnicamente (G2) en el sistema
doble propsito localizado en el estado de Morelos, Mxico; encontrando en G1 una tasa de
prevalencia de mastitis subclnica de 57% (8/14). De la misma forma Alburquerque, (2005)
al determinar la incidencia de mastitis subclnica en vacas lecheras en produccin en el
Valle de Tumbes y Zarumilla, utilizando la prueba Whiteside, encontr de 300 vacas
evaluadas, 172 con mastitis subclnica equivalente al 57.33% de incidencia.
Estos resultados difieren de lo mencionado por Cortes, (1988) Citado por vila et
al., (2010) quien encontr en la regin de Puente de Ixtla, Morelos, Mxico, para ganado
ordeado a mano, una prevalencia de mastitis subclnica del 45%.
En la Figura 8, el hato mediano, comparado con el hato grande, se observ una
diminucin en el recuento de clulas somticas, presentndose en 12 vacas paridas con un
porcentaje de 18,5 % con rangos entre 258.000-476.000 cl/mL de leche, las 53 restantes
(81,5 %) dieron resultados negativos para mastitis, interpretndose como cuartos sanos.
(Anexo 7).
Figura 6. Histograma de frecuencia de RCS en hato mediano-Mastitis subclnica.
En la Figura 9, se puede observar, que en el hato pequeo, se recolectaron 28

muestras de leche de vaca para su respectivo anlisis de clulas somticas. De las 28
muestras recolectadas, el anlisis de recuento de clulas somticas demostr que solo 8 de
los resultados, presentaron un RCS, con un rango entre 239.000-492.000 cl/ml de leche,
con un porcentaje equivalente de 28,6%. En el Anexo 7, se puede observar que el 3,6% (1
vaca) present altos RCS superior a 500.000 cl/mL y el 67,9% correspondi a vacas sanas
con recuentos menores de 200.000 cl/ml. Se concluy que el alto conteo de clulas
somticas indicativo de mastitis subclnica y clnica en este hato, se debi a 3 vacas en edad
adulta con un intervalo entre 10-11 aos, lo que permite clasificarlo como un factor que
influye en el alto RCS. Butendieck, (2009) afirma que las clulas somticas aumentan con
la edad y el estado de lactancia del animal.
Figura 7. Histograma de frecuencia de RCS en hato pequeo-Mastitis subclnica.
Comparacin estadstica del RCS en el primer y segundo muestreo de las tres

categoras de hatos lecheros (grande, mediano y pequeo).
Resultado de las 27 (55.1%) vacas de un total de 171 en los 3 hatos lecheros, las
cuales coincidieron durante el segundo re-muestreo realizado a los 30 das posteriores al
primero.
La Figura 10, muestra el total de 27 animales muestreados, que coincidieron con la
identificacin bovina de los tres hatos lecheros en el primer y segundo muestreo, se realiz
el RCS, de los cuales 6 (22.2%) de ellos, resultaron negativos a mastitis subclnica;
categora que va de 0 a 200,000 clulas por mL de leche. National Mastitis Council, (como
se cit en Eugenia 2010) afirma que el recuento de clulas somticas para la leche normal
es casi siempre menor a 200.000 clulas / mL (menor para vacas de primera lactancia),
mientras que hatos con un RCS mayor de 200.000 clulas/mL indican la presencia de
mastitis subclnica.
Figura 8. Comparacin en el Recuento de Clulas Somticas Cuarto Sano
En la figura 11, se puede observar, que 6 vacas, equivalentes al 35,2%, oscilan entre
un RCS de 456.000-500.000 cel/mL de leche, siendo mayor en el anlisis del segundo
muestreo para 4 animales con un conteo mayor de 481.000 cel/mL, lo que indica, la alta
probabilidad de llegar a mastitis clina. As mismo se aprecia que en el primer y segundo
muestreo, el 62,9%, correspondi a 17 vacas que mantuvieron segn los resultados
obtenidos similitud con el segundo RCS en un rango >200.000 cel/mL y <500.000 cel/mL
de leche, Estos resultados coinciden con lo mencionado por Wattiaux (2011), quien afirma
que un conteo de clulas somticas mayor de 200.000 cl/mL indica la presencia de mastitis
subclnica, si los resultados son semejantes en ms de dos oportunidades. Esto confirma

que la mastitis, en cualquiera de sus dos formas de presentacin, afecta a ms del 50% de
los animales del hato en un momento dado de su periodo de produccin (Saran y Chaffer,
2000).
Estos resultados coinciden a un estudio realizado por Mendez, V., y Osuna L. (2007)
en la regin del Alto de Chicamocha (departamento de Boyac), donde confirmaron altos
RCS en hatos lecheros, mediante la aplicacin de un primer y segundo muestreo
consecutivos, con rangos que variaban entre 273.444 cl/mL y 298.034 cl/mL de leche,
con porcentajes de 48,58% vacas de la totalidad muestreada, siendo indicativo de mastitis
subclnica.
Figura 9. Comparacin de RCS de 3 hatos en la categora de Mastitis Subclnica
En la figura 12, se observa que slo 1 (3,7%) vaca, del total de las muestras remuestreadas (27) en el hato grande, present un RCS significativo para mastitis clnica,
notndose un acenso bruco de 530.000 cel/mL en el segundo muestreo, en compasin con
el primero de 523.000 cl/mL de leche. Basados en este anlisis y en la regla que describe
que, por cada caso de mastitis clnica, hay 40 con mastitis sub-clnica, nos permite hacer
relevancia a los diferentes resultados obtenidos entre rangos superiores a 200.000cl/mL de
leche, los cuales seran indicativos para mastitis sub-clnica a nivel del hato.
Aunque de acuerdo a la encuesta aplicada a los diferentes hatos y a las
manifestaciones clnicas que presentan los animales en determinado momento, no s afirma
que la vaca presente una infeccin grave como tal, si no, que los altos recuentos se deban a
diferentes factores higinicos-sanitarios, estrs del animal, edad, tiempo de lactancia etc.,
que intervienen en los altos RCS.
Resultados similares han sido reportados por Echeverri y Jaramillo (2010), quienes
realizaron un anlisis comparativo de dos metodologas diagnsticas de mastitis, entre ellas
el RCS por fossomatic, encontrando 2 casos de mastitis clnica de 104 muestras de leche
analizadas.
Figura 10. Comparacin de RCS de 3 hatos en la categora de Mastitis Clnica
En la descripcin grafica de los resultados obtenidos en los tres hatos lecheros,

(Figura 13) se observ que, de las 27 vacas muestreadas, 3 (11%) provenientes del hato
grande, presentaron RCS que oscilaban entre 1.556.000 a 2.695.000 cl/mL de leche en el
primer como segundo muestreo de las mismas. los cuales se consideran como indicadores
de infecciones severas o crnicas de la ubre.
Figura 11. Comparacin de RCS de 3 hatos en la categora de Infeccin severa
Por ltimo, y basado en el anlisis de los resultados de Recuento de Clulas

Somticas y los factores identificados a nivel de hato, se defini una estrategia de
intervencin directa post-ordeo, teniendo en cuenta que se tienen estrategias encaminadas
antes y durante el ordeo para obtencin de leche inocua pero prevaleciendo los casos de
mastitis. Esta estrategia se encuentra encaminada a realizar:
-
Desinfeccin de pezones post-ordeo

Terapia de secado
Enfatizar rutina de Ordeo Higinica
Duracin de tratamiento en caso de presentarse casos clnicos
Servicio regular de Prevencin y Control de Mastitis
Lo anterior se encuentra consignado en una cartilla tipo andragogica, la cual, fue entregada
a los ordeadores y socializada In-situ en el momento del ordeo.
6. CONCLUSIONES
Segn los objetivos planteados y los resultados obtenidos en la investigacin, se

pudo llegar a las siguientes conclusiones:
Basados en la encuesta y los resultados obtenidos se pudieron identificar los
factores que influyen de forma directa en los altos recuentos de clulas somticas en los tres
hatos lecheros participantes en el estudio, entre los cuales, se encuentran el incluir en el
ordeo vacas viejas con largos tiempos de lactancia y/o traumatismos en ubres y pezones,
como tambin la deficiente higiene personal del ordeador durante el desarrollo de dicha
prctica, el no disponer de reservorio con agua clorada destinada para la limpieza y
desinfeccin de los utensilios de trabajo y ubre del animal, en concomitancia a la falta de
formacin o capacitaciones orientadas a BPO para el personal de ordeo.
De acuerdo a los resultados de laboratorio, obtenidos del primer y segundo
muestreo, se pudo detectar mastitis subclnica en vacas lactantes de las tres categoras de
hatos lecheros, en los porcentajes por hato de 14.1% en el grande, 5.2% en el mediano y
para el pequeo del 3.8% bajo el parmetro de Conteo de Clulas Somticas realizado por
recuento automatizado, basado en estos resultados y las caractersticas del hato es necesario
realizar peridicamente anlisis de leche total y de vaca a vaca en produccin, debido a que
este comportamiento se presenta al tener vacas con mastitis clnica.
Por ltimo, y con el fin de entregar los resultados a los productores y ordeadores
por hato, se dise y entreg una cartilla de tipo andraggica como estrategia para la
intervencin directa post-ordeo y se socializ In-situ en el momento del ordeo con el fin
de corregir practicas inapropiadas en el hato, en conjunto con los resultados generados por
el laboratorio.
7. RECOMENDACIONES
Teniendo en cuenta la problemtica identificada y los resultados obtenidos, se

recomienda continuar trabajos de investigacin relacionados al tema de la mastitis
subclnica y clnica, bajo el desarrollo de:
Programas de deteccin y control de mastitis, debido a que el
productor por lo general no reconoce la presencia del problema, por su naturaleza

subclnica y desconoce el impacto que tiene sobre la produccin de leche.
Un seguimiento de aquellos hatos que arrojaron resultados positivos
para el diagnstico de mastitis subclnica, con el fin de minimizar la propagacin de

esta enfermedad y as disminuir las prdidas econmicas para el productor y para
los transformadores de leche cruda.
Evaluaciones de las condiciones, en la cual, se realiza el ordeo en

los diferentes hatos, debido a que esta es una de las principales fuentes de
contaminacin y entrada de microorganismos a la ubre, por lo tanto debe
implementarse buenas prcticas de ordeo.
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GLOSARIO
Bioseguridad: disciplina encargada de prevenir accidentes biolgicos, qumicos y

fsicos, siguiendo un conjunto de normas en laboratorios, clnicas, hospitales e
industrias.
Bovinos (Bovinae): Son una subfamilia de mamferos placentarios que pertenece a
la familia Bovidae. Utilizado como la fuente principal de protenas por medio de su
carne y leche.
Bromuro de Etidio: Es un agente intercalante comnmente empleado para teir
cidos nucledos en diversas tcnicas moleculares y citogenticas. Es un compuesto
mutagnico conocido
Clulas somticas: Estn constituidas por una asociacin de leucocitos y clulas
epiteliales. Los leucocitos se introducen en la leche en respuesta a la inflamacin
que puede aparecer debido a una enfermedad o, a veces, a una lesin. Las clulas
epiteliales se desprenden del revestimiento del tejido de la ubre.

Fossomatic: Equipo con alta capacidad completamente automatizada de contar
clulas somticas, basado en el Principio de Citometra de flujo.

Hato: Terreno rural destinado a la cra del ganado
Leche: Es el producto de la secrecin mamaria normal de animales bovinos,
bufalinos y caprinos lecheros sanos, obtenida mediante uno o ms ordeos
completos, sin ningn tipo de adicin, destinada al consumo en forma de leche
lquida o a elaboracin posterior.

Leche Cruda: Leche que no ha sido sometida a ningn tipo de calentamiento, es
decir su temperatura no ha superado la de la leche inmediatamente despus de ser
extrada de la ubre (no ms de 40 C).

Mastitis: Es la enfermedad infectocontagiosa ms comn en el ganado bovino y se
define como la inflamacin de la glndula mamaria que generalmente se presenta
como una respuesta a la invasin por microorganismos y se caracteriza por daos en
el epitelio glandular, seguido por una inflamacin clnica o subclnica.

Mastitis clnica: Es un proceso inflamatorio principalmente de origen infeccioso de
la glndula mamaria, producido por varias clases de microorganismos.

Mastitis subclnica: Es aquel proceso inflamatorio que no produce los signos
tpicos de inflamacin, calor, dolor, tumor, rubor, ni cambios macroscpicos de la
secrecin lctea.
Slidos Totales: La leche est constituida por dos grupos de sustancias

principalmente, el agua y los slidos totales o materia seca. Los constituyentes
distintos al agua se llaman slidos totales y abreviadamente se designan como S.T.
(protenas, azcares, materia mineral, vitaminas, enzimas, grasa). La leche est
compuesta en un 85-90% por agua, el 10-15% restante es lo que se conoce como
slidos totales.
Glndulas mamarias: rganos que, en todos los mamferos, producen leche para
la alimentacin de sus cras o hijos durante los primeros meses o semanas de vida.
Bronopol: Es un compuesto qumico antimicrobiano altamente activo cuya frmula
qumica es 2-bromo-2-nitropropano-1,3-diol.
BPG: Buenas Practicas Ganaderas.
CORPOICA: Corporacin Colombiana de Investigacin Agropecuaria.
ICA: Instituto Colombiano Agropecuario.
ANEXOS
ANEXO 1. TOMA DE MUESTRA
ANEXO 2. CADENA DE CUSTODIA
ANEXO 3. CARTILLA ANDRAGOGICA
ANEXO 4. INFORMES
DE
RESULTADOS AL-F-24
DEL
LCL
ANEXO 5. HISTOGRAMA DE FRECUENCIA DE RCS EN HATOS LECHEROS
Histograma de fecuencia hato grande

Mastitis Clinica
800000
600000
Muestreo
400000MC
Recuento de clulas somticas
200000
0
Cdigo bovino
Histograma de frcuencia hato grande

Infeccin Severa
3000000
2500000
2000000
1500000
1000000
500000
0
Muestreo IS
Histograma de frecuencia hato mediano

Cuarto Sano
200000
150000
100000
Muestreo CS
50000
0
Cdigo bovino
Histograma de frecuencia hato pequeo

Cuarto Sano
300000
200000
100000
0
Codigo externo del Bovino
Muestreo CS

Detección de Mastitis Documento Nuevo Corregido 2017b (Reparado)

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DETECCIN DE MASTITIS SUBCLNICA MEDIANTE EL RECUENTO DE

CLULAS SOMTICAS POR MTODO AUTOMATIZADO EN TRES

ERIKA QUINTERO HENAO

BACTERIOLOGA Y LABORATORIO CLNICO

DETECCIN DE MASTITIS SUBCLNICA MEDIANTE EL RECUENTO DE

ERIKA QUINTERO HENAO

Trabajo de grado presentado para optar por el ttulo de Bacteriologa y

BACTERIOLOGIA Y LABORATORIO CLINICO

Agradezco primeramente a Dios, por ser el

sabidura para afrontar de buena manera

Cuando sabes lo que quieres y lo quieres

encontrar la forma de obtenerlo. Jim Rohn.

Eduardo Andrs vila Fernndez

Agradezco primeramente al Dios de los cielos

brindarme fortaleza en las adversidades, por

A mi Familia Nobles Cabas porque nunca

oraciones cargadas de propsitos, sueos,

una frustracin, podra nacer la superacin" Solo

poderoso, por su infinito amor

sabidura de avanzar por caminos que me

darme fortaleza cuando muchas veces quise

paciencia, y sobre todo el gran amor que me

superarme, son parte de mi corazn, gracias

alentarme, y brindarme tu amor.

a cada persona con la que

trazado en este caminar, de cada uno,

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA....................................................................

1.1. Descripcin del problema............................................................................................

3.2.1 Leche cruda..................................................................................................................

4.1. Clasificacin de la investigacin.................................................................................

DETECCIN DE MASTITIS SUBCLNICA MEDIANTE EL RECUENTO DE

Palabras claves: calidad, leche, sanidad, glndula mamaria.

DETECTION OF MASTITIS SUBCLINICAL THROUGH THE COUNTING

Key words: quality, milk, health, mammary gland.

El siguiente trabajo de investigacin enmarca una de las primordiales

en el valor nutricional y sanitario de la leche, as como en la calidad de los derivados

1. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

1.1. Descripcin del problema

La mastitis subclnica, es una enfermedad infecciosa compleja de alto costo

La mastitis subclnica se considera como una enfermedad compleja y es

ha demostrado ser una excelente

herramienta como indicador de salud de la ubre y se ha usado para estimar la reduccin

Es necesario hacer nfasis en el control de la mastitis bovina, en un programa

Detectar mastitis subclnica en vacas doble propsito lactantes mediante el recuento de

localizadas en el oriente antioqueo, en el cual, se realiz la prueba cualitativa de

3.2 Bases legales

ISO 13366-1: 2008 proporciona orientacin sobre las condiciones de

3.3 Bases tericas

galactforos menores (Engelhardt y Breves 2005). La glndula est dividida en cuatro

Fuente: Ruegg, 2001

Para obtener leche de la porcin alveolar se necesita el efecto de la oxitocina que

Figura 2. Arco reflejo neuro-hormonal de la eyeccin de leche

Fuente: Ingalls, 2000

El estmulo se transmite por la mdula espinal, la mdula oblonga y el tlamo

almacenada en el lbulo posterior de la hipfisis (Madrigal y lvarez, 2004). A travs

3.3.3.1 Calidad de la leche.

productor, procesadores, consumidor, pblico y organismos gubernamentales de leche

3.3.3.1.1 Calidad higinica de la leche

Para Guifarro (2005), la calidad higinica engloba la salud pblica desde el

3.3.3.2 Calidad sanitaria de la leche

Ms del 98% de las clulas somticas que se encuentran en la leche provienen de

Fuente: Hernndez & Bedolla, 2008

Sin embargo, se deber tener en cuenta la interpretacin de conteos de las clulas

3.3.4 Mastitis bovina