TIPOS DE CLULAS

IMPORTANTES
EM BIOPROCESSOS

Clulas
Clulas Vivas: classificao
Clulas importantes em Bioprocessos

Estrutura-funo, crescimento e reproduo

Como trabalham - metabolismo
Como podemos modific-las? Modificao
gentica
Equacionamento: Balano de massa

Exemplo de um Biorreator

Clulas Importantes em Bioprocessos

Microbianas

Animais

Vegetais

Teoria Celular da Biologia

A palavra clula surgiu em
1665 (Robert Hooke)

A clula a unidade bsica de

qualquer organismo
(unidades menores que as
clulas no so vivas)

Cultura: populao de clulas

cultivadas em um meio.

Todos os organismos so
compostos por clulas
(unicelulares ou pluricelulares)

Os organismos vivos se
reproduzem, ingerem ou obtem
seus alimentos a fim de produzir
energia e sintetizar compostos
qumicos para as estruturas
celulares e excretam
substncias.

Organismos
Pro: antes; Eu: verdadeiro; karyon: ncleo
Clulas
eucariticas

Ncleo separado do
citoplasma:
membrana nuclear

Eucariticos

Clulas
procariticas

Material nuclear
disperso no
citoplasma

Procariticos

Estrutura das Clulas: Clula Animal

Estrutura das Clulas: Clula Vegetal

Clulas adquirem e utilizam energia

Plantas: realizam a Fotossntese

Luz

Fotossntese

6 CO2

6 H2O

C6H12O6

Energia para o
metabolismo celular

6 O2

Respirao
aerbica

A maioria das clulas respiram, convertendo energia de

compostos orgnicos para CO2, H2O e ATP.

Estrutura das Clulas Procariticas

Clula de Bactria

Estruturas Celulares
Membrana
plasmtica

Citoplasma

Material
Nuclear

Estabelece a fronteira entre o

meio intracelular e o meio
extracelular.

Material fluido do interior das

clulas.

Informao gentica
armazenada como DNA.

Classificao dos organismos vivos

Organizao: 7 nveis

Taxonomia

Reino, diviso, classe,

Sistema formal de organizao,

classificao e nomenclatura

Espcie
Coleo

de

espcie

Cepa
cepas

com

caractersticas similares

em

Descendentes

de

uma

colnia em uma cultura pura

Classificao
Arranjos

ordem, famlia, gnero,

grupos

(relaes evolutivas)

Nomenclatura
Binomial: gnero
espcie

Ex:Saccharomyces cerevisiae ou Saccharomyces cerevisiae

nica

NOMENCLATURA PARA MICROORGANISMOS

TAXONOMIA
Sistema binomial

Bacillus subtilis

Gnero
(primeira letra: maiscula)

B. Albus
B. coagulans

Sempre em itlico
Pode-se adicionar letras
ou nmeros para especificar
uma determinada linhagem
EX: E.coli B/rA e E. coli K12

Espcie
(letras em minsculo)

Taxa
Reino
Diviso
Filo
Classe
Subclasse
Ordem
Famlia
Gnero
Espcie

Organismo
Gato
Animal
Chordata
Vertebrata
Mammalia
Eutheria
Carnvora
Felidae
Felis
Felis domesticus

Bactria
Eubacteria
Gracilicutes
Scotobacteria
Spirochaetales
Leptospiraceae
Leptospira
Leptospira interrogans

Organismos
Pro: antes; Eu: verdadeiro; karyon: ncleo

Clulas
eucariticas

Clulas
procariticas

Ncleo separado do
citoplasma: membrana
nuclear

Eucariticos

Material nuclear
disperso no citoplasma
Procariticos

Classificao atual dos reinos: trs domnios

nfase: informaes moleculares

Eucariontes

Organismos multicelulares, com extensiva

diferenciao de clulas e tecidos (plantas e
animais) ou unicelulares, com reduzida ou
nenhuma diferenciao (algas, fungos e
protozorios).

Eubactria

Procariontes com composio qumica

similar dos eucariontes (a maioria das
bactrias e cianobactrias)

Arqueobactria

Procariontes com
(metanognicas,
haloflicas).

composio distinta
termoacidfilas
e

Cianobactrias
Fototrficos
oxignicos,
vulgarmente
denominados algas azuis- esverdeadas

Fototrficos
Organismo que obtm energia da luz e utiliza
dixido de carbono como nica fonte de
carbono.

Metanognicas
Arqueobactrias anaerbias que produzem gs
metano a partir de CO2 e H2.

Termoacidfilas
Vivem em ambientes com altas
temperaturas e acidez.

Haloflicas
Arqueobactria aerbia requerem
ambiente com 17 a
23% de NaCl para um bom
crescimento.

ARCHAEBACTERIA
Similar s eubactrias por microscopia
No apresentam peptidoglicanos
Sequncias de nucleotdeos no RNA ribossmico distintas das
observadas nas eubactria
Composio lipdica da membrana citoplasmtica distinta da

apresentada pelas eubactria

Capaz de sobreviver em ambientes com condies extremas
Apresentam metabolismo no usual

Principais grupos de microganismos

utilizados em biorreatores

Fungos: eucariotos
Leveduras: fungos unicelulares
Bolores: fungos multicelulares

Bactrias: procariotos

Principais grupos de microganismos

Bactrias - Procariotos
Eubactrias
Esferas
Bastonetes
Espirilos

Arqueobactrias
Composio qumica diferente
Atividade ambiente no usual
Alta T e pH

PROCARIONTES
Pequenos e de organizao simples (no possui organelas)
Possui duas regies:
Citoplasma
Nucleoplasma
No citoplasma
Grnulos:
Ribossomos
Sntese de protenas
Possui
- parede celular (proteo)
- membrana celular (barreira seletiva)

Clula de E. coli

Estrutura de uma clula de bactria

PROCARIONTES
- Tamanho: entre 0.5 e 3 micrmetros
- Crescem rapidamente (tempo de duplicao de 30 min a horas)
- Utilizam vrias uma variedade de nutrientes como fonte de carbono
(carboidratos, protenas e CO2)

Coccus

Bacilos

Vibrion

Espirilo

Tamanho e Forma das Bactrias (0,5 a 3mm)

Coccus
Diplococcus
Streptococcus

Sarcina

Staphylococcus

Formas de Bactrias: Bacilos

Tamanho e Forma das Bactrias

(0,5 a 3mm)

Bacilo simples
Diplobacilo

Streptobacilo

Cocobacilo

Tamanho e Forma das Bactrias

(0,5 a 3mm)

Vibrio

Espirilo

Espiroqueta

Formas Latentes de
Microrganismos Procariticos
Esporos e Cistos

Tcnica de colorao de Gram

Clulas Gram-positivas:
Retm o corante (violeta)

Clulas Gram-negativas:
(vermelha-safranina)

Tcnica de Esfregao

Paredes das Bactrias

Gram +

Paredes celulares mais rgidas

10-80 nm

Gram -

8 nm
3 nm
Porinas: protenas especiais
canais de difuso por onde passam
molculas

Peptidoglicanos Polissacardeos Estruturais

Mureina - do latim murus muro ou parede

Estrutura da parede celular de uma bactria Gram-positiva

Acares:
NAM: cido-N-acetilmurmico
NAG: N-acetilglicosamina

Estrutura da parede celular de uma bactria

Gram-positiva

cido teicico: polmero de ribitol fosfato ou glicerol

fosfato que ocorre na parede celular de bactrias Gram-positivas

Peptidoglicanos Polissacardeos Estruturais

Mureina - do latim murus muro ou parede

Estrutura da parede celular de uma bactria

Gram-negativa

Porinas: protenas especiais canais de difuso por onde passam

molculas

Endotoxinas - Lipopolissacardeo
O-antgeno

Regio
central

Lipdio A: parte
toxicamente ativa
da endotoxina.

Lipdio A

Penicilina: inibe a execuo de um dos passos

finais na sntese enzimtica das peptidoglicanas

pelos microrganismos sensveis penicilina.

Diferenas Intrnsecas na Estrutura do Envelope

Celular de Eubactrias

Clulas Gram-positivas

Clulas Gram-negativas

Parede celular rgida e espessa

Membrana externa

Ribossomo

Espao periplasmtico

Membrana citoplasmtica

Membrana citoplasmtica

Camadas de peptidoglicano
(polissacardeos + aminocidos)

Camada de peptidoglicano

Ex: Bacillus subtilis

Ex: Escherichia coli

Eucariontes

EUCARIONTES
Ncleo bem definido
membrana com poros de 40 a 70 mm
Presena de mais de um cromossomo (genes
organizados com ncleoprotenas)
Retculo endoplasmtico :
Rede irregular
localizao preferencial dos ribossomos

Mitocndrias:
Reaes enzimticas que utilizam oxignio para gerao
de energia
Lisossomas e vacolos
Organelas que isolam vrias reaes qumicas

FUNGOS

Aspergillus

Rhizopus

Saccharomyces

Penicillium

EUCARIONTES - FUNGOS
Leveduras
(Yeast)

Bolores
(Molds)
Penicillium

Saccharomyces cerevisiae
Produo de vinho, cerveja,
fermento de po

Produo de antibiticos,
Aditivos alimentares, enzimas

Aspergillus

MORFOLOGIA DOS FUNGOS

Leveduras (1 a 5 mm x 5 a 30 mm)
Unicelulares
Leveduras no tem flagelos nem
outros meios de locomoo

Produo de Etanol

Reproduo da Leveduras por Brotamento

Fungos Bolores
Multicelulares

Penicillium

MORFOLOGIA DOS FUNGOS

Bolores (multicelulares, 25mm)

Esporngiforos: hifas areas

que produzem esporos dentro
de esporngios

Rizides: hifas semelhantes a

razes. Hifas vegetativas que
tambm penetram no substrato

MORFOLOGIA DOS FUNGOS

Bolores (multicelulares, 25mm)

Septo:
formado
pela
invaginao da parede
celular entre as clulas que
formam um longo filamento.

Formao e Localizao de Esporos Fngicos

EUCARIONTES CLULAS ANIMAIS

Clulas removidas de tecido animal podem ser cultivadas em um meio nutritivo
Fora do corpo do doador
Crescimento em nmero de clulas e tamanho
Oportunidade de estudar doenas como o cncer, determinar compatibilidade
para transplante de rgos
Produo de biomolculas importantes como:
Hormnios de crescimento
Vacinas virais
Anticorpos monoclonais

EUCARIONTES CLULAS ANIMAIS

Maiores dificuldades:
-Clulas maiores e mais complexas que a maioria dos microoganismos
- Velocidade de crescimento lenta quando comparada aos microorganismos
- Frgeis: Possuem somente uma delicada membrana plasmtica, sem a
presena de parede celular.

-Requerimentos nutricionais no esto completamente elucidados

- Normalmente so parte de um tecido celular
- A maioria das clulas animais crescem aderidas em superfcies

EUCARIONTES CLULAS ANIMAIS

Maiores dificuldades:
-Clulas maiores e mais complexas que a maioria dos microoganismos
- Velocidade de crescimento lenta quando comparada aos microorganismos
- Frgeis: Possuem somente uma delicada membrana plasmtica, sem a
presena de parede celular.

-Requerimentos nutricionais no esto completamente elucidados

- Normalmente so parte de um tecido celular
- A maioria das clulas animais crescem aderidas em superfcies

Clula animal
Clulas mais complexas

Possuem sistemas segregados por membranas, com diferentes

funcionalidades

Produo de Anticorpos Monoclonais: Hibridomas

Imunizao do
camundongo
Linhagem
de mieloma
Extrao de
linfcitos
Fuso com polietileno glicol
(formao de hibridomas)
Cultivo

Seleo e
clonagem de
clulas individuais
Hibridomas no
secretores do
anticorpo desejado

Hibridomas secretores
do anticorpo desejado

Descarte
Produo de
AcM pela
expanso dos
clones

Anticorpos
Monoclonais
purificados

Fonte: Adaptado de JAIN, E.; KUMAR, A.. Biotechnology Advances, v. 26, p. 46-72, 2008

EUCARIONTES CLULAS DE PLANTAS

Fonte de vrios componentes qumicos:
- frmacos
- aromas
Normalmente so metablitos secundrios
- pigmentos
(no associados ao crescimento)
- fragrncias
- agroqumicos

Ao invs de se cultivar a planta como um todo cultura das clulas das plantas em
suspenso
Pormas clulas de plantas
10 a 100 maiores que bactrias e fungos
Metabolismo mais lento custo na manuteno da esterilidade do processo
Clulas tendem a se agregarem sedimentao
Mais sensveis ao cisalhamento que as clulas microbianas
processo metablico mais complicado
Geneticamente instvel

VRUS
Consiste de uma molcula de cido
nuclico envolvida por uma cobertura
protica (capsdeo).

Fora das clulas: vrions

Bacterifagos:
infectam bactrias
Especfico para um tipo de clula hospedeira
Bactrias DNA
Vegetais RNA

Animais RNA ou DNA

Caracterizao dos Microrganismos

Populao Microbiana - muitas espcies diferentes
Quais os tipos de m.o. presentes?

Isolamento Enumerao identificao

Na natureza: m.o. existem em

culturas mistas

Determinao das caractersticas

de um m.o. Cultura pura

Isolamento e cultivo de culturas puras

Meio de cultura
material
nutriente

Tcnica de
semeadura em
superfcie

Inculo
amostra de
microrganismo

Tcnica de
esgotamento
por estrias

Incubao

Contagem de
colnias

TCNICA DE ESGOTAMENTO POR ESTRIAS

Escherichia coli

Salmonella enterica ser. enteritidis

http://www.fam.br/microrganismos/metodo_semeadura_de_bacterias.htm

Colnia de fungos
http://www.e-escola.pt/site/topico.asp?
topico=276&ordem=2&canal=5

Colnia do fungo do gnero Penicillium:

organismos que produzem a penicilina
http://www.unificado.com.br/
calendario/09/penicilina.htm

Conservao de Culturas Puras

Refrigerao

4 a 10 oC

Nitrognio lquido

- 196 oC

Freezers

-70 a 120 oC

Liofilizao

Congelamento
desidratao