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396726155

1999 B-2004 B

UNIVERSIDAD DE GUADALAJARA
CENTRO UN IVERSITARIO DE CI ENCIAS BIOLOGICAS Y AGROPECUARIAS

PRODUCCIN EN MASA DEL ROTFERO Brachionus plicatilis


ALIMENTADO CON 4 DIFERENTES MICROALGAS, PARA SU USO
COMO ALIMENTO VIVO DE LARVAS DE PECES MARINOS.

TRABAJO DE TITULACIN EN LA MODALIDAD DE


TESIS
QUE PARA OBTENER EL TITULO DE
LIC ENC IA DO EN BIOLOGA
PRES E NTA

ALBERTO CARBAJAL LPEZ


Las Agujas, Zapopan, Jalisco. Septiembre de 2008

Universidad de Guadalajara
-Centro Universitario de Ciencias Biolgicas y
Agropecuarias
Coordinacin de Titulacin y Carrera de Licenciatura
en Biol<!ga
818 /

c_ c_ BIOLOGIA

C_ ALBERTO CARBAJAL LPEZ


PRESENTE

Manifestamos a usted que con esta fecha ha sido aprobado su tema


de titulacin en la modalidad de: Tesis e Informes opcin Tesis con el titulo:
"PRODUCCIN EN MASA DEL ROTFERO Brachionus pHcatils ALIMENTADO
CON 4 DIFERENTES MICROALGAS, PARA SU USO COMO ALIMENTO VIVO DE
LAS LARVAS DE PECES MARINOS" para obtener la Licenciatura en Biologa_

Al mismo tiempo le informamos que ha sido aceptado como Director I a de


dicho trabajo el/la: DR. ARTURO f_ MUHLIA MELO y el Asesor/a es el/la:
M en C. JUAN CARLOS PREZ U. y el/la: DR. EDUARDO JUAREZ CARRILLLO.
Sin ms por el momento, le envo un caluroso saludo.

ATENTAMENTE
"PIENSA Y TRABAJA"
Las Agujas, Zapopan., 18 de Septiembre del 2006.
"2006. Ao del Bicentenario del natalicio del Benemrito de las Amricas.

Don enito Jurez Garca"


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,---;?i,%->-,,

DR. C
LOS LVAREZ MOYA
\-';_fr___ :J
PRESIDENTE DEL COMIT DE TITULACIN ..;" ..
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(-_A-=-r-~~DRA. LAURA
ADALUPE MEDINA CEJA
SECRETARIO DEL COMIT DE TITULACIN

\:.._, --. J

r. ~"i~'~'~:. e: :J. c.~.::ti<A DE


:.::t1,:c;_:~" :~- Si~~X/A

Las Agujas, l.apopan, Jalisco, Mxico. C.P. 45110. M 39-82. Tels. (01-33) 3mt 150, 36820374, ext 3254. Fax.. 37771159

FOR\1 ..\ f

Dr Fi;:o Mar:it' Huerta Martinez

Presidente o:el COmft de Tiluf.acin.

Licenciatura en Biolog ia.


CUCBA.
Ptesante

Nos pemitrmos 1nfQrrna.r a ust.od que habtendo revisa.da eE trabajo de t1tua.cn_


mod~lidad tesL>, oon el titulo: "PRODUCCIN EN MASA DIOL ROTIFERO
Brac1>1onus pl"'81flis ALrr..tENTAOO CON 4 OIFERENTES MCROALGAS, PARA su
USO COMO ALIMENTO VrvO DE LARVAS DE PECES MARINOS' que cealiz el

pasante Alberto Carv-dial Lpe:z con nmero d ediSo 396726155 consideramos


que ha quedado debtdamertte concluido. por lo q-ue ponemos a su consicleracin el
escrito final para autorizar so impresin.
Sin otra particular quedamos de UQte COI'! un_cordtal saludo.

Atentc:irnente
Guadalaj.a,a. Jalisco. 28 de noviembre de 2007.

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. ~ .,/.;,>;,;: )

/-,'/..:. 'Jv '.)7/aJ;Ul/o8

Ci:I
Centro de Investigaciones Biolgicas de Noroeste

Director de tesis: Dr. Arturo Muhia Melo


Asesor de tesis: M.C. Juan Carlos Prez Urbiola
Asesor Interno: M.C. Eduardo Jurez Carrillo

A mis padres y abuelos

RESUMEN
Se estudi la produccin del rotfero Brachionus plicatilis utilizando como dietas 4 especies
de microalgas: Chaetoceros calcitrans (CH), !sochrysis galbana (ISO), Tetraselmis suecica
(TE) y Nannochloropsis oculata (NA). Los cultivos de rotferos se llevaron a cabo en

tanques cilindro-cnicos de fibra de vidrio, con una capacidad de 190 l. El agua de cultivo
fue mantenida a una temperatura constante de 28C, salinidades de 25 - 30 %u, e
iluminacin constante. Las microalgas fueron cultivadas en bolsas de 35 l. utilizando el
medio f/2 formulado por Guillard y Ryther (1962). Las densidades de los cultivos fueron
calculadas por medio de conteos diarios de clulas, y se aliment a los rotfcros con 35 l.

diarios de microalgas por tanque. De igual manera se realizaron conteos diarios de rotferos
para estimar las densidades alcanzadas con los diferentes tratamientos, obtenindose un
promedio de 150 rotferos/ml, el anlisis estadstico no encontr diferencias significativas
(p>0.05) en las densidades entre los distintos tratamientos. El efecto de la dieta en el
tamao de los organismos fue otra variable estimada en el presente estudio, no
encontrndose diferencias significativas (p> 0.05). La productividad de cada dieta fue
calculada estimando el nmero de rotferos obtenidos por cantidad de alimento.
Encontrndose que fue mayor el peso orgnico proporcionado en las dietas CH e ISO (p>
0.05), pero obteniendo una mayor productividad con las dietas TE y NA (p> 0.05).

NDICE
Pgina

l. Introduccin.................................................................

2. Antecedentes. . . . . . . . .. . . . . . . ... . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. .. . . . . . . ...

11

2.1. Los Rotferos como Alimento Vivo en la Acuicultura...........

13

3. Justificacin. ..................... ............ ....... .......................

17

4. Objetivos. . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. .. . .. .. .. ..

18

4.1. Objetivo General. . .. . . . . . . . . . . . .. . . .. . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . .. . . . . . . ...

18

4.2. Objetivos Particulares................................................

18

4.3. Hiptesis. ..............................................................

18

5. Metodologa. ................. ..... ..... ........ ....... .....................

19

5.1. Material y Mtodos. .. .. .. .. .. .. ...... .. .. .. .. .. .... .. .. .. .... .. .. ....

19

5.1.1. Cultivo de Microalgas. ............... ................... .....

19

5.1.2. Cultivo de Rotferos. .........................................

21

5.2. Diseo Experimental. ... . .... ......... ...... ..... ........ ...... ......

22

5.3. Procesamiento y Anlisis de Muestras. ......................... ..

23

5.3.l. Tamao de los Rotferos. ....................................

24

5.3.2. Anlisis Bromatolgico. ........ ...... .... .......... ..... ...

24

6. Resultados. . . . . . . . .. . . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . .

28

6.1. Cultivos de Microalgas. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ... . . . . . . . . . . ..

28

6.2. Cultivos de Rotferos. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

31

6.3. Resumen de los Resultados. ................. ............ ........ .....

34

7. Discusin. . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . ..

36

8. Conclusiones .....

38

9. Bibliografia..... .

39

INDICE DE TABLAS
TABLA

PGINA

l.

Peso orgnico de las clulas de las microalgas utilizadas como alimento para los
rotferos. ............... .....................
. ........................................................ 29

2.

Concentraciones celulares y peso orgnico de microalgas por racin diaria de los


diferentes cultivos ................................................................................................ 34

3.

Longitudes medias, concentraciones de rotferos/ml en los tanques de cultivo,


concentraciones microalgales en los tanques de rotferos (millones de clulas/ml), y
rendimiento obtenido en los rotferos alimentados con las diferentes dietas
.................. 34

4.

Contenidos nutricionales (en mg/g de peso seco) de las diferentes microalgas.

5.

Contenidos nutricionales (en mg/g de peso seco) de los rotferos alimentados con las
diferentes dietas: ................................................................................................... 35

..35

INDICE DE FIGURAS

FIGURA

PGINA

1.

Estructura interna de un rotfero ............................................................................... 14

2.

Rotferos
Brachionus
plicatilis,
tomada
de
http://www.microscopyuk.org.uk/mag/wimsmall/extra/rotifl.html en lnea el 20 de febrero de 2008 .
..................... ...... 15

3.

Chaetoceros calcitrans, tomada de


http://wwwJib.noaa.gov/korea/korean_aquaculture/algal.htm en lnea el 20 de
febrero de 2008 ....................................................................................................... 20

4.

lsochrysis galbana, tomada de


http://www.lib.noaa.gov/korea/korean_aquaculture/algal.htm en lnea el 20 de
febrero de 2008 ....................................................................................................... 20

5.

Tetraselmis suecica, tomada de http://www.empco.org/micro/aquar:ia.php en lnea el


20 de febrero de 2008 ............................................................................................... 21

6.

Nannochloropsis oculata, tomada de


http://comenius.susqu.edu/bi/202/CHROMALVEO LA T A/H ETER OKONT A E/eusti
gmatophyta.htm en lnea el 20 de febrero de 2008.
. ...................................... 21

7.

Concentraciones de las diferentes microalgas cultivadas (en millones de clulas por


ml) para alimentar a Jos rotferos. Chaetoceros calcitrans (CH), /sochrysis galbana
(ISO), Tetraselmis suecica (TE) y Nannochloropsis oculata (NA) ......................... 28

8.

Peso orgnico por racin diaria (en gramos) de las diferentes microalgas con que se
alimento a los rotferos. Chaetoceros calcitrans (CH), Jsochrysis galbana (ISO),
Tetraselmis suecica (TE) y Nannochloropsis oculata (NA) .................................... 30

9.

Longitudes de rotferos (expresadas en micras) alimentados con diferentes


microalgas. Chaetoceros calcitrans (CH), lsochrysis galbana (ISO), Tetraselmis
suecica (TE) y Nannochloropsis oculata (NA) ...................................................... 31

10.

Densidades de rotfcros (expresadas en rotferos por ml) encontradas en los tanques


de cultivos alimentados con las diferentes dietas monoalgales, Chaetoceros

calcitrans (CH), Isochrysis galbana (ISO), Tetraselmis suecica (TE) y


Nannochloropsis oculata (NA) .............................................................................. 32

11.

Produccin de rotferos (expresada en millones de rotferos por g. de alimento)


encontradas en los tanques de cultivos alimentados con las diferentes dietas
monoalgales, Chaetoceros calcitrans (CH), Isochrysis galbana (ISO), Tetrasebnis
suecica {TE) y Nannochloropsis oculata (NA) ...................................................... 33

l. INTRODUCCIN

En Ja actualidad, la acuicultura es una actividad que puede ayudar a satisfacer las altas
demandas de alimentos a nivel mundial. El cultivo de peces marinos es una alternativa para
satisfacer dichas demandas, las cuales cada vez son ms dificiles de cubrir ya que van en
aumento y debido a la creciente sobre explotacin de los recursos marinos.

Los recursos marinos han sido explotados desde la antigedad pero debido al constante

aumento de la poblacin humana, la explotacin pesquera se incrementa constantemente


para satisfacer la demanda del recurso. As, se tiene que durante el ao 2002 la produccin
pesquera se estableci en 133 millones de toneladas (FAO, 2004). Hoy en da la alternativa
ms viable para lograr un incremento y satisfacer la creciente demanda de este recurso
pesquero se sustenta en la acuicultura, que desde 1987 ha representado un 78.3 o/o del
aumento en la produccin pesquera (Tuker y Jory, 1991). Actualmente esta actividad
representa alrededor del 42. 7 o/o de la pesquera, y no deja de ser la nica va para lograr el
incremento de esta produccin (FAO, 2004).

En los ltimos 30 aos la acuicultura aument del 3,9 por ciento de la produccin total en
peso en 1970 al 29,9 por ciento en 2002. Este crecimiento sigue siendo ms rpido que el
logrado en cualquier otro sector de produccin de alimentos de origen animal (F AO, 2004).

La prctica de la acuicultura, a pesar de ser una actividad ms sofisticada y costosa que la


pesca, sigue en aumento debido a que los recursos acuticos naturales tienen su limite de
produccin ya que soportan solo una determinada tasa de explotacin (Russell-Hunter,
1970; Ye, 1999) la cual ya ha sido alcanzada en el caso de muchas poblaciones o incluso ha
sobrepasado los limites de su explotacin sustentable (Martnez-Crdova, 1993; Pcdini,
2000).

Por este motivo, el crecimiento de esta prctica ha estimulado una gran cantidad de estudios
que han favorecido el desarrollo de nuevas tecnologas en varias reas relacionadas con la
domesticacin de organismos acuticos de inters comercial, como en el mejoramiento
gentico, el control o la prevencin de enfermedades, el manejo del ambiente de cultivo y
la nutricin (O'Abramo et al., 1997; Martnez-Crdova, 2002).

El desarrollo tan acelerado de Ja acuicultura en todo el mundo, con una tasa anual de
crecimiento promedio cercana al l O o/o, se debe en parte a que se ha conseguido cerrar el
ciclo biolgico de la mayora de las especies que se cultivan comercialmente. Esto es muy
importante ya que ha permitido la disponibilidad de larvas y juveniles a lo largo de todo el
ao, permitiendo la planificacin de los ciclos de produccin y la posibilidad de seleccionar
tanto a los organismos reproductores como a las larvas, independientemente de las
fluctuaciones del medio natural de donde se sola obtener la semilla (Lavens y Sorgeloos,
1996), y por consecuencia, la proteccin de los ecosistemas y las pesqueras tradicionales.

Hoy en da, an cuando existen numerosas especies de peces marinos de importancia


comercial, todava faltan estudios que permitan tener un mayor conocimiento para la
reproduccin de especies en cautiverio. Aunque hay varias alternativas para el cultivo de
peces no siempre son las ms adecuadas debido a que las especies son muy diferentes y
tienen caractersticas especficas y, por lo tanto, es necesario desarrollar tcnicas de
infraestructura y metodologas para la induccin al desove y supervivencia de !as larvas. La
finalidad de estas tcnicas es lograr un nivel ptimo de aprovechamiento de los mtodos y
diseos de infraestructuras empleadas en el manejo y produccin de especies de
importancia comercial (lvarez-Lajonchere y Hemndez-Molejn, 2001).

Una de las principales causas que detienen el progreso en el cultivo comercial de muchos
animales marinos es la falta de organismos juveniles o "semilla" (Droop, 1975; Hostmann,
1985), produccin que a su vez se ve detenida por la falta de alimento de calidad para estos,
especialmente microalgas y rotferos en cantidades adecuadas. Este es un problema muy
frecuente que requiere atencin pues la falta de alimento en las primeras etapas de vida es
el principal cuello de botella en la produccin de peces marinos (Sarma y Nandini, I 997).

BIBUOTECA CUCBA
9

En el presente trabajo se pretende colaborar con las tecnologas de cultivos de apoyo para
el ptimo desarrollo larvario de peces marinos haciendo nfasis en Ja produccin masiva y
la calidad alimenticia del rotfero Brachionus plicatilis ya que el cultivo larvario de muchas
de las especies de peces cultivadas depende del abastecimiento de rotferos como alimento
vivo (Snell 1991), y de la utilizacin de este organismo como biocapsula, es decir como un
vehculo para proporcionar ciertos nutrientes a los peces.

10

2. ANTECEDENTES

Aunque desde la antigedad el hombre ha utilizado los recursos acuticos

Ydesarrollado la

acuicultura de muy diferentes organismos, el desarrollo de las tecnologas base para el


cultivo de peces marinos es muy reciente, tiene su origen en los aos 70, especficamente
desarrolladas para el cultivo de salmn mediante el empleo de jaulas flotantes_ Este aspecto
motiv la participacin de piscicultores europeos quienes evaluaron el potencial de la
produccin de otras especies como:

la dorada europea Spants aurata y lubina

Dicentrarchrus labrax as como del rodaballo Scophthalmus maximus del Mediterrneo.


Obteniendo de este ltimo una produccin de 15,000 toneladas mtricas por ao (Sorgeloos
y Sweetman, 1993).

Mientras que en los aos 70 los cultivos dependan casi completamente de la captura de
larvas y juveniles silvestres para su engorda en estanques, tanques y jaulas, durante las
ltimas dcadas se han domesticado completamente muchas especies (Lavens y Sorgeloos,
1996). Esto implica altas demandas de alimento vivo el cual debe ser de calidad ya que el
desarrollo y crecimiento de los organismos cultivados depende en gran medida de la
naturaleza y el contenido bioqumico del alimento proporcionado.

El cultivo larvario de muchos peces marinos depende del abastecimiento de rotferos como
alimento vivo (Sncll, 1991), los rotferos son muy importantes pues toman la energa que
las microalgas obtienen de la luz solar y la transfieren en forma de energa qumica a los
peces. Ya que el fitoplancton vivo es la mayor fuente de alimento para los organismos
filtradores (Walne, 1974; Epifanio, 1979; Laing y Millican, 1986) su cultivo es esencial
para la alimentacin de los rotferos utilizados en el cultivo larvario de peces.

La calidad nutricional del rotfero Brachionus p/icati/is (Hirata, 1965) para el cultivo
larvario de peces, depende de la transferencia de nutrientes del fitoplancton o las levaduras
al animal (Whyte, 1990). Aunque, la composicin qumica proximal del rotfero y su dieta

11

puede ser diferente, se sabe que las unidades constitutivas de macronutrientes, en especial
los cidos grasos, son trasferidos (Watanabe et al., 1983). Por ello es importante
proporcionarles una dieta que cubra las necesidades alimenticias de los peces.

Los rotferos son capaces de sintetizar cidos grasos polinsaturados 113, pero a niveles que
son insuficientes para las demandas del desarrollo de las larvas de peces, por lo tanto, la
acumulacin de estos cidos grasos en los tejidos del rotfero depende de fuentes exgenas
como las microalgas que se le proporcionan como alimento al rotfero.

El contenido de cidos grasos de los rotferos es en extremo importante ya que los cidos
grasos polinsaturados n3, particulannente el cido eicosapentaenoico (EPA 20:5 n3) y el
docosahexaenoico (DHA 22:6 n3), son esenciales para el desarrollo larvario de muchas
especies de peces marinos (Scott y Middleton, 1979; Watanabe et al., 1983; Ben-Amotz et
al., 1987) puesto que estos no los pueden sintetizar por si mismos y necesitan obtenerlos
directamente una vez que inician la alimentacin exgena. Por ejemplo, el cido
docosahexaenoico (DHA 22:6 n-3) es esencial para el desarrollo del cerebro y la retina de
Jos peces marinos (Bell y Dick, 1991; Mourente et al., 1991; rvtourente and Tocher, 1992,
1993; Tochcr et al., 1992; Sargent et al., 1993), los peces con deficiencias de DHA pueden
mostrar anormalidades en su comportamiento debido a limitaciones neurolgicas y visuales
(Navarro y Sargent, 1992).

El alto contenido de los cidos grasos esenciales como el cido eicosapentaenoico (EPA,
20: 5 n-3) y el docosahexaenoico (DHA, 22:6 n-3) en algunas microalgas como
Nannochloropsis oculata para el primero, e Isochrysis para el segundo, las hacen un

excelente alimento para incrementar el contenido de cidos grasos de Jos rotferos (Lavens
y Sorgcloos, 1996). La microalga Chaetoceros calcitrans, perteneciente al grupo de las
diatomeas, posee al igual que todo su grupo un alto contenido de EPA.

Dada la importancia de los cidos polinsaturados y especialmente los n3 PUF A para los
organismos marinos, es importante incorporarlos en su dieta (Langdon, 1980; Langdon y
Waldock, 1981; Webb y Chu, 1982). fsoch1:i-sis galbana, Pavlova lutheri y Tetraselmis

12

suecica se encuentran entre las microalgas ms apropiadas para ser utilizadas como dieta
debido a sus niveles de cidos grasos polinsaturados (Femndez, 1989).

Por otro lado, adems de que los rotfcros cumplan con los requerimientos nutricionales de
las larvas de peces es importante poder suministrar a las larvas el alimento vivo en
cantidades suficientes y de manera constante, por esta razn el alimento y el manejo de los
rotferos es de gran importancia en su cultivo.

13

2.1.

LOS

ROTFEROS

COMO

ALIMENTO

VIVO

EN

LA

AC UICULTURA

La produccin

de a limento

vivo es

indi spensable para el cultivo de muchas de


las

especies

de

inters

comercial o

cientfico. Para la primera alimentacin de


muchas de

las

especies

marinas

es

~;:.--- Ojo

necesario que dicho al imento tenga las


siguientes caractersticas: que sea menor

Maxila
Gnadas

de 400 m (que es la ta lla de los nauplios


de artemia). ser rico en cidos grasos

Estomag~--~~~~~

esenciales. y poder ser producido en

Vejiga ---~~~~
Ano --~;;t<(;~

grandes cantidades (Bamab. 1989). No

Nefridio

son muchos los organismos mari nos que


rene n

ests

protozoarios

cual idades.

ciliados.

ciertos

copepoditos

de

algunas especies de coppodos. y algunas

Ua

0. 1 mm

larvas trocforas y veligeras de diferentes


invertebrados.

cumplen

con

las

caractersticas necesarias para ser usados

Fig. l. Estructura interna de un rotfero.

como ali mento vivo (Barnab. 1989).

Los rotferos. aunque no siempre forman parte de l zooplancton marino. han sido uti lizados
con mucho xito como alimento vivo de larvas de peces mari nos (Sarma. 1996) y de ms
de 18 especies de crustceos (Ful ks y Main. 199 1).

14

Los rotferos com ponen un phylum de metazoarios microscpicos filtradores. estos


organismos son los metazoarios ms pequeos y estn conformados por un nmero fijo de
clulas (al rededor de 1000) desde que eclosionan hasta su muerte. Durante el crecimiento
del organismo dichas clulas no se multiplican. solo incrementan su tamao. Los rotferos
se alimentan de pequeas partcu las suspendidas en la colum na de agua las cuales filtran
por medio de una corona de cilios que presentan en la parte anterior de su cuerpo. Dicha
corona ciliada les sirve tambin para su locomocin. aunque muchas especies pasan su vida
fijadas al substrato.

El rotfero Brachionus plicatilis es una especie


planctnica que mide entre 125 y 300 m de
longitud. Esta especie puede reproducirse tanto
sexualmente

(reproduccin

mctica) como

asexualmente. por medio de partenognesis


(reproduccin amctica) en la que las hembras
producen

clones.

copias

genticamente

idnticas a s mi smas.

En algunos casos los acuicultores inducen la


reproduccin mctica para obtener quistes en
los que los rotferos permanecen en estado de
latencia. anlogos a los de artemia. los cuales
son muy tiles para almacenarse o para ser
transportados.
Fig . 2. Rotferos Brachionus plicatilis.

Brachionus plicatilis es ampliame nte utilizado para la primera alimentacin de muchos


organismos (no solo de peces sino tambi n de muchas especies de crustceos) y a lgunas de
las caractersti cas que lo hacen ideal para este fin se en listan a continuacin:

Su pequeo tamao (<300 m)

15

Baja velocidad de nado


Se mantiene siempre en Ja columna de agua

Capacidad de ser cultivado a grandes densidades (hasta 2000 ind/ml)


Elevada tasa reproductiva
Amplio rango de salinidades
Puede ser usado como biocapsula, ya que es fcilmente eruiquecido con cidos
grasos, antibiticos, etc. para servir como un vehculo que transfiera dichas
sustancias a sus depredadores.

16

3. JUSTIFICACIN

Una limitante muy importante en los cultivos de peces marinos es la falta de juveniles,
debido a que su produccin se ve limitada por la falta de suministros constantes de alimento
vivo para su cultivo larvario. El contenido bioqumico del alimento proporcionado a los
organismos cultivados es de suma importancia ya que estos componentes son utilizados
para obtener energa y para la produccin de tejidos durante el crecimiento. Debido a esto
es importante conocer los mejores medios para producir la mayor cantidad de alimento vivo

de calidad, as como conocer la calidad nutricional de este, lo cual se investig en el


presente estudio haciendo nfasis en el tipo y cantidad de alimento proporcionado a los
rotferos.

17

4. OBJETIVOS

4.1 OBJETIVO GENERAL


Determinar cual dicta (Chaetoceros calcitrans, Jsochrysis gal ha na, Tetraselmis suecica o
Nannochloropsis oculata) es la ms apropiada para la produccin en masa de rotferos de
calidad.

4.2 OBJETIVOS PARTICULARES


4.2.1. Conocer Jos contenidos nutricionales del rotfero Brachionus plicatilis alimentado
con diferentes dietas monoalgales.

4.2.2. Determinar si la dieta tiene efecto en el tamao de los rotferos.

4.2.3. Determinar si la dieta tiene efecto en la densidad poblacional.

4.2.4. Conocer cual dieta proporciona un mejor rendimiento en la produccin en masa de


rotferos.

4.3 IDPTESIS
Las densidades poblacionalcs, el tamao de los individuos, y los valores nutricionales de
los rotferos para ser usados como alimento vivo de larvas de peces marinos estn en
funcin del tipo de microalga utilizada para su cultivo, de las densidades de esta, y de su
calidad nutricional.

18

5. METODOLOGA

5.1. MATERIALES Y MTODOS


Los experimentos se realizaron en el Laboratorio de Nutricin Experimental ubicado en el
Centro de Investigaciones Biolgicas del Noroeste (CIBNOR) en La Paz, Baja California
Sur, Mxico, entre agosto y octubre de 2005, en una sala especial para el cultivo de
rotfcros, la cual cuenta con lneas de distribucin de aire comprimido, de agua dulce y
agua marina. Dicho laboratorio cuenta tambin con equipos de aire acondicionado para el
control de las temperaturas.

5.1.1. CULTIVO DE MICROALGAS


Las cuatro especies de microalgas utilizadas como dietas para los rotferos fueron
cultivadas en el Laboratorio de Microalgas del C!BNOR. Los cultivos, de tipo
semicontinuo, se realizaron en bolsas de 35 litros con agua marina filtrada a una micra,
desinfectada con hipoclorito de sodio al 0.2 o/o y posteriormente neutralizado con tiosulfato
de sodio. El medio de cultivo utilizado fue el F/2 .{Guillard y Ryther, 1962), adicionado con
0.03 g de silicatos por litro para el caso de Chaetoceros ca/citrans. La salinidad del agua se
mantuvo a 3 7 %0.

19

MIC ROALGAS UTILIZADAS

Las mi croalgas Chaetoceros calcilrans (CH), lsochrysis galbana (ISO). Tetraselmis

suecica (TE) y Nannochloropsis oculata (NA). fueron utilizadas en este trabajo debido a
s us

caractersticas

nutricionales.

compatibil idad

con

los

cultivos

de

rot feros.

disponi bilidad. y por su fcil cultivo. A continuacin una breve descripcin de dichas
microalgas.

Cltaetoceros ca/citrans
Esta diatomea perteneciente a la clase Bacillariophyceae posee un
tamao de 3 a 7 micras y presenta cuatro largas celas. El rango de
temperaturas ptimo para su crecimiento es de 17 a 26 C. Presenta
un color caf oscuro y se caracteriza por su alto contenido de cido
eicosape ntaenoico (EPA). por lo que ha sido utilizada ampliamente
en la acuicultura.
Fig. 3. Chaetoceros calcitrans.

lsocl1rysis galbana

Perteneciente al grupo de las Haptotitas. Jsochrysis es una microalga que presenta clulas
subesfricas a fus iformes. biflage ladas. con dimensiones de 6 a 8 micras. Su rgano ms
importante es e l haptonema circundado por pequeos relieves. Es un
flagelado de color amarillo que habita en c limas templados.
Conocida tambin como lsochrysis ..Tahiti.. (Laing. 1986). s u
crecimiento ptimo se encuentra a una temperatura que vara de 16 20 C. a una salinidad de 25 - 28 o/oo y una iluminacin de 4000 lux.
Debido a su tamao y a que es un flagelado desnudo. es fci lmente
digerible por los consum idores. Su a lto valor nutritivo le sita entre
las especies ms importantes para ali mentacin de organismos
filtradores marinos. Es destacable su alto contenido de cido
docosahexaenoico (DHA).

Fig. 4. lsochrysis galbana.

20

Tetraselmis suecica

Es una microalga comprimida elipsoidal. perteneciente a las


Prasinophyceae. Esta especie presenta cuatro flagelos. y mide de 7 9 micras de dimetro y de 1O - 16 de largo y un color verde bri llante.
Es una especie eurihalina y posee una pared celular delgada formada
principalmente de carbohidratos que la hace un poco ms dificil de
digeri r que otras microalgas. Crece bien en e l rango de temperatura
de 18 - 22 C. pH de 7.5 - 8.0 y salinidad de 25 - 30 o/oo. Por estas
razones. es una especie de considerable potencial de culti vo a gran
escala
Fig. S. Tetraselmis suecica.

Nannoc/1/oropsis ocu/ata

Estos organismos pertenecientes a la c lase Eustigmatophyceae


presentan clulas esf ricas de 2 a 4 micras. Presentan un color verde
oscuro y el rango de temperaturas pti mas para su crecimiento es de
11 a 16 C. Esta especie ha s ido ampliamente uti lizada en la
acuicultura. aunque en algunos casos las caractersticas de su pared
cel ular y su pequeo tamao, no la hacen viabl e para a limentar a
a lgunos organ ismos filtradores debido a que son dificiles de digerir y
sus nutrientes pueden no ser asimi lados.

Fig . 6. Nannochloropsis oculata.

21

5.1.2. CULTIVO DE ROTFEROS

Se inici un cultivo semicontinuo de rotferos de la cepa de Brachionus plicatilis que se


mantiene en el Laboratorio de Nutricin Experimental del CIBNOR. Dicho cultivo se llev
a cabo en tanques translcidos, cilindro-cnicos, de fibra de vidrio, con una capacidad de
190 litros. Los cultivos fueron alimentados diariamente con 35 litros de microalgas, dicho
volumen representa el recambio diario para cada tanque.

Para el proceso de recambio se utiliz un tamiz de 80 micras y los rotferos retenidos se


regresaban al tanque de cultivo. Se realizaron recambios totales semanalmente.

Las temperaturas se mantuvieron a 28 C y la salinidad entre 25 y 30 %0. La iluminacin


del laboratorio fue constante.

Los parmetros como densidad poblacional, temperatura y salinidad se tomaron


diariamente.

5.2. DISEO EXPERIMENTAL

El experimento consisti en mantener cuatro cultivos semicontinuos de rotferos a lo largo


de tres meses, de agosto a octubre de 2005. Dichos cultivos se realizaron en 4 tanques de
fibra de vidrio, con una capacidad de 190 litros. El experimento se dividi en tres periodos
de un mes. Estos periodos fueron considerados como tres replicas para su anlisis.

Cada tanque de rotferos se aliment con una diferente dieta monoalgal, stas fueron
cultivadas en el Laboratorio de Microalgas del CIBNOR.

22

Las Especies de microalgas cultivadas para alimentar a los rotferos fueron: Chaetoceros

calcitrans (CH), /sochr,vsis galbana (ISO), Tetraselmis suecica (TE), Nannochloropsis

oculata (NA).
El alimento fue proporcionado a los rotferos en una racin diaria de 35 litros de microalgas
a lo largo del experimento. La cantidad promedio de clulas microalgales por mililitro de
cada dieta se cont en un hematocitometro. De igual manera las densidades poblacionales
de rotferos fueron estimadas diariamente por medio de conteos en un estereoscopio.

Se tornaron muestras de rotferos cada semana para ser fotografiados y evaluar su tamao
midindolos con un analizador de imgenes. Fueron medidos 50 organismos de diferentes
muestras.

De igual manera se tomaron las muestras al final de cada repeticin, por medio de un tamiz
de 100 m de luz de malla para realizar los anlisis bromatolgicos de los rotferos.

Para obtener muestras de microalgas para los anlisis bromatolgicos estas fueron
centrifugadas a 3500 rpm durante 5 minutos.

5.3. PROCESAMIENTO Y ANALISIS DE MUESTRAS

La produccin de rotferos y microalgas se estim por medio de conteos directos al


estereoscopio y al microscopio respectivamente, adems se tomaron muestras en cada
repeticin del experimento para verificar la composicin proximal tanto de las dietas como
de los rotferos y evaluar sus tallas bajo los distintos tratamientos.

Los datos se analizaron con el programa estadstico SigmaStat. Los resultados de los
diferentes tratamientos se compararon mediante pruebas de anlisis de varianza de una va,
despus de verificar que se cumplieron los supuestos de nonnalidad (con la prueba de
Kolmogorov Smirnoff) y de igualdad de varianzas.

23

Las diferencias entre tratamientos se discriminaron mediante Ja prueba a posteriori de


Tukey (Zar, 1984).

5.3.1. TAMAO DE LOS ROTFEROS


Para estos anlisis se tomaron fotografas con una cmara Olimpus BX41 montada en un
microscopio de campo oscuro y contraste de fases. Posteriormente se midieron los rotferos
en las fotografas con el analizador de imgenes Image Pro. Soio se tomaron las longitudes
de rotferos grvidos y se midieron incluyendo el huevo que estos portaban.

5.3.2. ANLISIS BROMATOLOGICOS

Estos anlisis fueron realizados en el Laboratorio de Bioqumica Fisiolgica del CIBNOR,


tanto para el caso de las microalgas como para el de los rotiferos.

PREPARACIN DE LAS MUESTRAS (MICROALGAS _Y ROTIFEROS)

Las muestras se pesaron en un tubo Eppendorf de 2 mL, los tubos se identificaron con una
marca que permanece durante todo el anlisis. Una vez pesados se colocaron en un ultra
congelador a -70C. Las muestras se liofilizaron con ayuda de una liofilizadora (Virtis
Benchtop ES) a -5lC y con un vaco menor a Jos 80 barrs, durante 20 horas. Una vez
pasado ese tiempo se comprob que las muestras estuvieran completamente deshidratadas y
se procedi a obtener su peso seco, en la obtencin de los pesos se utiliz una balanza
analtica (Ohaus, Analytical Plus, mod. AP 250-D).

Las muestras liofilizadas fueron rehidratadas con 1 mL de solucin isotnica (solucin


salina = 35o/o de NaCl) fra y homogeneizadas con ayuda de un homogencizador (JKA,
Ultra-Turrax TS.O 1), procurando siempre mantener las muestras en hielo para conservar su
integridad.

24

PROTENAS
Para determinar las protenas de las muestras, se utiliz el mtodo de Bradford (1976) el
cual se basa en la reaccin de los grupos amino libres con el azul Cromassie en presencia
de cido fosfrico y metanol. El complejo formado por la protena y el colorante provoca
un desplazamiento en la absorcin mxima del colorante desde 465 a 595 nm. La absorcin
es proporcional a la concentracin de protena (albmina en suero bovino) de manera lineal
desde lg a 140g usando una solucin reactiva comercial (BioRad #500-0006).

Una alcuota de IOL del homogeneizado se puso a digerir en 90L de NaOH O.IN
durante 120 minutos, posteriormente se tomaron IOL del digerido, se puso en un tubo de
vidrio limpio y se agreg un mililitro de reactivo de Bradford, se dej reaccionar 5 1ninutos
y posterionncnte se tomaron las lecturas al espectrofotmetro (Spectronic Gencsys 11) a 595

nm.

Se utiliz una solucin estndar con una concentracin de 5mg/ml de albmina bovina, la
cual se diluye

en proporcin 1:2 en solucin salina hasta tener

concentr~ciones, de 2.5,

1.25, 0.625, 0.3125, 0.15625 y 0.078125 mg/ml de protena y solucin salina como blanco.

La concentracin de protenas se calcul:

Conc. de Protenas (mg/g)

(Abs.Sol.Prob. x FO) I (m x peso de la muestra)

Donde: FO es el factor de dilucin y m es la pendiente en la curva tipo.

CARBOHIDRATOSTOTALES
Para la determinacin de carbohidratos totales se utiliz la tcnica de Roe, et al., 1960. Para
le medicin de estos, se tomaron 0.2 mL de homogeneizado de cada muestra y se
mezclaron con 0.2 mL de cido Tricloroacetico (TCA) al 20o/0 en tubos Eppendorf de 0.65

25

ml, esto con la finalidad de precipitar protenas que interfieren en la medicin de


carbohidratos. Los tubos se centrifugaron a 3600 rpm (1376 g) por 10 minutos a 4C en una

centrifuga refrigerada (Eppendor 5810 R). Se recuper el sobrenadante en tubos Eppendorf


de 0.65 mL limpios. 0.1 mi de sobrenadan te se coloc en un tubo de vidrio, se le agreg 1mi
de solucin de antrona 0.1 /o diluida en H2 S04 al 72o/o. Se calientan a bao mara a 90 C
durante 5 minutos y se enfran en bao de hielo. Se ley su absorbancia en un
espectrofotmetro (Spectronic Genesys II) a 620 nm.

Curva tipo: La solucin estndar de carbohidratos contiene 5mg/ml, se preparan diluciones


en proporcin l :2, en 5001 de TCA, quedando concentraciones de 5, 2.5 1.25, 0.625,

0.3125, 0.15625, 0 .. 078125 mg/ml de carbohidratos.


La cantidad de carbohidratos se calcul con la siguiente relacin:

Conc. de carbohidratos (mg/gr)

(Abs.sol.prob.x FO)/ (m x Peso de la muestra)

Donde: m es la pendiente en la curva tipo y FO es el factor de dilucin

LPIDOS TOTALES

Se utiliz el mtodo de la sulfafosfovainillina (Bames y Balckstock, 1973). Una alcuota de


0.025mL (25L) de cada muestra, se puso en tubos de vidrio, se les a.t,Tfeg 0.25mL de
cido sulfrico concenirado y se incubaron a bao mara a 90C, por 10 minutos. Los tubos
se enfriaron en bao de hielo, posteriormente se tomaron 20 L de cada tubo y se colocaron
en el fondo del pozo de una microplaca (placa clisa) de 96 pozos, se le agreg solucin
reactiva para lpidos (fosfovainillina al 0.2o/o en cido sulfrico al 80o/o) se dej incubar la
placa por 40 minutos a temperatura ambiente y se tom la lectura de la placa en un lector
de placas de BioRad (modelo 550) a 540nm. Al mismo tiempo que las muestras se hizo
reaccionar una curva de calibracin la cual se prepara de la siguiente manera:

Curva tipo: La solucin estndar de lpidos (Lin-Trol Sigma L2648) contiene 20mg/ml, de
sta se preparan diluciones en proporcin 1:2, en 1mL de solucin salina, quedando

26

concentraciones de 10, 5, 2.5 1.25, 0.625, 0.3125y 0.15625, mg/ml de lpidos. Se utiliz
solucin salina como blanco.

La cantidad de lpidos se calcul con la siguiente relacin:

Conc. de lpidos (mg/g)

(Abs.sol.prob.x FD) / (m x Peso de la muestra)

Donde: m es la pendiente en la curva tipo y FD es el factor de dilucin

27

6. RESULTADOS

6.1. CULTIVO DE MICROALGAS

La concentracin media, obtenida en los cultivos de Chaetoceros calcitrans fue de 14.32


millones de clulas/ml. (DE2.79), para el caso de !sochrysis galbana fue de 18.70

millones de clulas/ml. (DE3.63), en los cultivos de Tetraselmis suecica 1.09 millones de


clulas/mi. (DE0.62), y para Nannochloropsis oculata de 62.21 millones de clulas/mi.
(DElS.66). (Fig. 7).

140

o'

120

E
0

""'
w
u

100

80
60

40

"

20

'

+
CH

*
ISO

TE

NA

Microalga

Fig. 7. Concentraciones de las diferentes microalgas cultivadas (en millones de clulas por

mi) para alimentar a los rotferos. Chaetoceros calcitrans (CH), /sochrysis galbana
(ISO), Tetraselmis suecica (TE) y Nannochloropsis oculata (NA). Letras diferentes
indican diferencia significativa entre tratamientos (Prueba de comparaciones
mltiples de Tukey; P > 0.05).

28

La concentracin de las microalgas proporcionadas a los rotferos en las distintas dietas fue
medida por medio de conteos en un hematocitometro, dicha informacin nos dice el
nmero de clulas administradas en cada uno de Jos tratamientos, pero las diferentes
especies de microalgas tienen dinmicas poblacionales particulares, y el tamao y

la

composicin de las clulas vara para cada especie.

Para medir la cantidad de alimento proporcionado en cada dieta se utilizaron los ndices de
peso orgnico que se presentan en Ja Tabla l.

Tabla l. Peso orgnico de las clulas de las rnicroalgas utilizadas como alimento para los
rotferos.

Microalga

Peso orgnico

Chaetoceros calcitrans

33.9 pg/cel
(Lora-Vilchis y Doktor. 2001)

lsochrysis galbana

24.7 pg/cel
(Lora-Vilchis y Doktor, 2001)

Tetraselmis suecica

158.4 pg/cel
(Lpez-Elas y Voltolina, 1993)

Nannochloropsis oculata

4.4 pg/cel
(Lora-Vilchis, 2004)

29

El peso orgnico del alimento proporcionado por racin, para el caso de CH fue de 16.99
g. (DE3.31), para el caso de ISO 16.17 g. (DE 3.15), para TE 6.05 g. (DE3.46), y 9.58

g. (DE2.87) para NA. (Fig. 8).

30

'

25

,.,
~

20

ro

E" 15

o
o

a_

'
o

.,,o
0

$
o

10

o
CH

b
b

*~ ~
o

TE

ISO

NA

Microalga

Fig. 8. Peso orgnico por racin diaria (en gramos) de las diferentes microalgas con que se
alimento a los rotferos. Chaetoceros calcitrans (CH), fsochrysis galbana (ISO),
Tetraselmis suecica (TE) y Nannochloropsis oculata (NA). Letras diferentes
indican diferencia significativa entre tratamientos (Prueba de comparaciones
mltiples de Tukey; P > 0.05).

30

6.2. CULTIVOS DE ROTFEROS


Los resultados de las mediciones de la longitud de los rotferos alimentados con diferentes
dictas monoalgales fueron, para el caso de Chaetoceros calcitrans (CH), de 298.56 m.
(DE27.93), para Isochrysis galbana (ISO)

292.98 m. (DEl4.55), para el caso de

Tetraselmis suecica (TE) 294.84 m. (DE28.44), y para Nannochloropsis oculata (NA)


286.53 m. (DEl 8.16). (Fig. 9).

300

...,
E

~ 200
,
e

.3

100

CH

ISO

TE

NA

Microalga

Figura 9. Longitudes de rotferos (expresadas en micras) alimentados con diferentes


microalgas. Chaetoceros calcitrans (CH), Jsochrysis galbana (ISO), Tetraselmis

suecica (TE) y Nannochloropsis oculata (NA). Letras diferentes indican diferencia


significativa entre tratamientos (Prueba de comparaciones mltiples de Tukey; P >
0.05).

31

La media de las densidades poblacionales registradas por medio de los conteos diarios de
rotferos fue para el caso del cultivo alimentado con CH de 170.35 rotferos/ml.
(DE57.25), para ISO 130.67 rotferos/ml. (DE28.63), en el caso de TE 123.15
rotiferos/ml. (DE36.41) y 174.74 rotiferos/ml. (DE65.l 7) para NA. (Fig. IO).

350
300

'

'

l
250

b
b

200

e
:g
.,

150

O'.

100

o
50

- ~
o

o
CH

TE

ISO

NA

Microalga
Fig. 10. Densidades de rotferos (expresadas en rotferos por mi.) encontradas en los

tanques de cultivos alimentados con las diferentes dietas monoalgales, Chaetoceros


calcitrans (CH), Jsochrysis galbana {ISO), Tetraselmis suecica (TE) y
Nannochloropsis oculata {NA). Letras diferentes indican diferencia significativa
entre tratamientos (Prueba de comparaciones mltiples de Tukey; P > 0.05).

32

La produccin de rotferos alcanzada para el caso de CH, en millones de rotferos/g. de


alimento, fue de 1.90, para el caso de ISO de 1.54, para TE 3.87 y de 3.47 para NA.
(Fig. l l ).

:;;
CH

TE

ISO

NA

Microalga

Fig. 11. Produccin de rotferos (expresada en millones de rotferos por g. de alimento)


encontradas en los tanques de cultivos alimentados con las diferentes dietas
rnonoalgales, Chaetoceros calcitrans (CH), Jsochrysis galbana (ISO), Tetrase/mis
suecica (TE) y Nannochloropsis ocu/ata (NA).

33

6.3. RESUMEN DE LOS RESULTADOS

Tabla 2. Concentraciones celulares y peso orgnico de microalgas por racin diaria de los
diferentes cultivos. (McdiaDE). Letras diferentes indican diferencia significativa entre
tratamientos (Prueba de comparaciones mltiples de Tukey; P > 0.05).

CH

ISO

TE

NA

14.322.79'

18.713.64b

1.090.626

62.2118.66'

16.993.31'

16.173.15'

6.053.46b

9.582.87b

Clulas microalgales
(millones/mi)
Peso orgnico por

racin (g.)

Tabla 3. Longitudes medias, concentraciones de rotferos/ml. en los tanques de cultivo,


concentraciones microalgales en los tanque de rotferos (millones de clulas/ml.), y
rendimiento obtenido en los rotferos alimentados con las diferentes dictas. (MediaDE).
Letras

diferentes

indican

diferencia

significativa

entre

tratamientos

(Prueba

de

comparaciones mltiples de Tukey; P > 0.05).

CH

ISO

TE

NA

Long rotferos (m.)

298.5627.93"

292. 98 14.55'

294.8428.44'

286.5318.16'

Rotferos / mi

170.3557.25'

130.6728.63"

123.1536.41b

174.7465.17"

2.64

3.45

0.20

11.46

1.90

1.54

3.87

3.47

Microalgas en los
tanques de rotferos
Millones de
rotferos/ g. alimento

34

Tabla 4. Contenidos nutricionales (en mg/g de peso seco) de las diferentes microalgas.

Letras

diferentes

indican

diferencia

significativa

entre

tratamientos

(Prueba

de

comparaciones mltiples de Tukey; P > 0.05).

CH
Carbohidratos

42.550.19'

NA
18.961.58'

916.3135.14'

274.5720.47'

169.345.25 d

103.276.62 b

110.33 1.86 b

86.63 1.87'

127.679.69'

17.810.68'

26.192.20'

10.251.54'

19.030.31'

Lpidos
Triglicridos

38.631.58

TE
22.251.24'

709.8326.48 b

Protenas

ISO

Tabla S. Contenidos nutricionales (en mg/g de peso seco) de los rotferos alimentados con

las diferentes dietas. Letras diferentes indican diferencia significativa entre tratamientos
{Prueba de comparaciones mltiples de Tukey; P > 0.05).

CH

ISO

TE

NA

Carbohidratos

81.8810.29 6'

69.253.13'

98.052.86'

95.044.31 ' 6

Protenas

850.5511.19'

386.097.46 b

799.9145.57'

821.5589.84'

Lpidos

73.1710.93'

Triglicridos

61.543.767'

38.620.61 b

50.382.63 ' 6

20.072.127 b

11.371.663'

57.822.13 '

35

7. DISCUSIN

Los valores nutricionales de las microalgas empleadas en este experimento son consistentes
con los reportados por la FAO ( 1996) para las mismas especies.

Las dictas ms productivas, es decir, las que produjeron una mayor cantidad de rotferos
con menor cantidad de alimento fueron Tetraselmis suecica (TE) y Nannochloropsis

oculata (NA). Esto fue detenninado usando como referencia la biomasa del alimento
proporcionado y no su peso seco ya que este ltimo incluye las partes no asimilables de
algunas microalgas como la cubierta de slice de Chaetoceros calcitrans (CH). Para
calcular dicha biomasa se realizaron conteos celulares y se multiplico el nmero encontrado
por los pesos orgnicos por clula descritos por Lora-Vilchis (2004).

Benni y Wcmberg-Moller (1997) concluyeron tambin que TE es la dieta ms eficiente.


Estos autores comentan que el tamao relativamente grande de Tetraselmis favorece el
forrajeo por parte de los rotferos. Sin embargo, en el presente estudio se encontr que
tambin Nannochloropsis es una dicta adecuada, con una produccin de rotferos similar.
Ya que existe una diferencia importante en la talla de TE y NA, probablemente el tamao
de las clulas no sea determinante en la dieta, tal y corno concluyen estos autores. Adems
otras condiciones pueden ser determinantes como la concentracin de clulas, en relacin
con la calidad del agua. Al suministrar un exceso de alimento a los rotferos se pueden ver
afectados parmetros importantes de la calidad del agua, como son el oxgeno disuelto y la
presencia de organismos patgenos. Las microalgas muertas propician la aparicin de una
gran cantidad de bacterias que las descomponen, pudiendo ser tambin patgenas muchas
de ellas. Durante este proceso de descomposicin se consume oxgeno y se generan
desechos metablicos que pueden causar estrs en los organismos.

La calidad de agua tambin puede disminuir por la muerte de clulas debido al

shock

trmico que experimentan las microalgas al ser suministradas en los tanques de cultivo de
rotferos. Probablemente este estrs sea tolerado en diferente medida por las cuatro especies

36

utilizadas. Las microalgas, cultivadas a 18 C, se aplicaban directamente en el agua de


cultivo de rotferos que se mantena a 28 C sin algn proceso de aclimatacin, de manera
que si esto generaba mortalidades de clulas, la descomposicin de estas disminuira la
calidad del agua.

De igual manera se present un shock osmtico que podria ser significativo para algunas de
las especies de microalgas, ya que las diferentes especies utilizadas poseen caractersticas
celulares muy variadas, teniendo algunas de ellas paredes celulares como en el caso de NA
y CH o siendo desnudas como TE e ISO. Las microalgas fueron sometidas a un cambio
brusco de salinidad de 37-39 %o a 25-30 %o cada vez qut: se aplicaban en los tanques de
rotferos. Sin embargo, en el presente estudio no se evalu el efecto del shock trmico y del
shock osmtico sobre la mortalidad de las microalgas, de manera que no es posible llegar a
conclusiones sobre esto.

Finalmente, el tamao de los rotferos no fue una variable importante en los diferentes
tratamientos ya que no se encontraron diferencias significativas en la talla. Esta variable fue
controlada manteniendo la misma temperatura, la cual determina en gran medida la talla de
estos organismos (Stelzer, 2002).

37

8. CONCLUSIONES

Aunque Ja cantidad de alimento proporcionado en las dietas de Chaetoceros calcitrans

(CH) e Jsochrysis galbana (ISO) fue casi el doble al proporcionado en las dietas de

Tetraselmis suecica (TE) y Nannoch/oropsis oculata (NA), las concentraciones de rotferos


por mililitro no mostraron diferencias significativas.

Las dietas de TE y NA registraron la mayor productividad, es decir, la mayor cantidad de


rotferos producidos por alimento proporcionado.

Aunque TE y NA fueron las dictas que proporcionaban menor biomasa de microalgas, estas
produjeron la misma cantidad de rotferos que CH e ISO, y presentaron una productividad

mayor.

Es posible que TE y NA hayan generado un mayor rendimiento debido a que no se


suministro exceso de alimento, co1no probablemente sucedi con las otras dietas,
ocasionando un detrimento de la calidad del agua.

En cuanto a las longitudes de rotferos no se encontr diferencia significativa entre las


diferentes dictas

38

9. BIBLIOGRAFA

Aguilar-Medina, V. 2004. Efecto del perfil de cidos grasos de los alimentos usados para
el cultivo de larvas de mysis de Litopenaeus vannamei. Tesis de licenciatura. Universidad

Autnoma de Sinaloa. 54 p .

.lvarez-La.jonchere, L. y O. G. Hernandez-Molejon, 2001. Produccin de peces


estuarinos para un centro en Amrica Latina y el Caribe: Diseo, Operacin y Tecnologas.
The Word Aquaculture Society, Baten Rouge, LA.. 424 p.

Bardford, M. M. 1976. A rapid and sensitive mcthod for the quantitation of microgram
quantities ofprotein utilizing thc: principie ofprotein-Dye binding. Analytical Biochemistry
72: 248-254

Barnabe, G. 1989. Aquaculture. Technique et documentation. Paris. 528 p.

Barnes, H. y J. Blackstock. 1973. Estirnation of lipids in marine animals and tissues:


detailed investigation of the sulphophosphovsnillin method to total lipids. J. Exp. Mar.
Biol. Eco!., 12: 103-118.

Bell, M. V. y J. R. Dick. 1991. Molecular species cornposition of the rnajor diacyl


glycerophospholipids frorn rnuscle, liver, retina and brain of cod (Gadus morhua). Lipids.
26: 565-573.

Ben-Amotz, A., R. Fishler y A. Schnellcr. I 987. Chernical composition of dietary spccics


of marine unicellular algae and rotifers with ernphasis on fatty acid. Mar. Biol. 95: 31-36.

39

Benni, H. y T. Wernberg-Moller. 1997. Particle grazing efficicncy and specific growth of


the rotifcr Brachionus plicatilis (Muller). Joumal of experimental biology and ecology.
215: 217-233.

Castellanos, M. E., G. Garza y S. Maraon. 1999. Aislamiento, caracterizacin, biologa y


cultivo del rotfcro Brachionus plicatilis (O.

F.

Mller). Universidad Autnoma

Metropolitana. Unidad Xochimilco. Mxico D. F. 119 p.

D'Abramo, L. R., D. E. Conklin y D.M. Akiyama. 1997. Advanccs in world aquaculturccrustacean nutrition. World Aquaculture Society. Baton Rouge. Louisiana. 587 p.

Droop, M. R. 1975. The chemostat in mariculture. 101h European Symposium on Marine


Biology. 1: 71-93.

Epifanio, C. E. 1979. Comparison of yeast and alga] diets for bivalve molluscs.
Aquaculture. 16: 187-192.

FAO. Fishery department, fishing information, data and statistics unit. 2001. FISHSTAT

plus: Universal software for fishery statical time series. Versin. 2.3.2000.

FAO.

Estado

mundial

de

la

pesca

la

acuicultura.

2004.

(http://www.fao.org/sof/sofia/index es.htm) FAO. Pesca. En lnea 17 de julio de 2006.

FAO,

1996. Manual on thc production and use of live food for aquaculture.

http://www.fao.org/docrep/003/W3732E/w3732e00.HTM. En lnea Nov 2006.

Fernndez-Reiriz, M. 1989. Biomass production and variation in thc biochemical profile


(Total Protein, Carbohydrates, RNA, Lipids and Fatty Acids) of seven spccies of 1narine
microalgae. Aquaculture. 83: 17-37.

40

Fisher, T., T. Bemer, D. Iluz y Z. Dubinsky. 1998. The kinetics of photoaclimation


response of Nannochloropsis sp (Eustigmatophyceae): A study of changes in ultrastructure

and PSU density. J. Phycol. 34: 818-824.

Flores-Santana, R. 2004. Efecto de Brachionus plicatilis cultivado con tres microalgas con
diferentes contenidos de cidos grasos, sobre el crecimiento y el desarrollo de larvas de
mysis de Litopenaeus vannamei. Tesis de licenciatura. Universidad Autnoma de Sinaloa.

43 p.

Fulks, W. y K. L. Main. 1991. Rotifer and microalgae culture systems. The Oceanic Inst.,

Honolulu, USA. 364 p.

Guillard, R. R. L. y J. H. Ryther. 1962. Studies of marine planktonic diatoms. Cyclotella

nana Hustedt and Detonula conferaces (Cleve) Gran. Can. J. Microbiol. 8, 229-239.

Guillaume, J., S. Kaushik, S. Bergot, P. Metai!ler. 1999. Nutrition et alimentation des


poissons et crustaces. INRA, IFREMER. 489 p.

Hirata, H. 1965. Cultivation oflive food organisms in the Yashima Station. Saibaigyogyo
News 2:4. En: Sarma. S.S.S. y S. Nandini. 1997. Intemational Workshop on Field
Cultivation Technology of Rotifers for use as Food in Aquaculture. UNAM Campus
Iztacala, Mxico. 36 p.

Hostmann, U. 1985. The use ofmicroalgae in aquaculture. Arch. Hydrobiol. Beih. Ergcbn.

Limnol. 20: 153-156.

Laing, I., P. F. Millican. 1986. Relative growth and efficiency of Ostrea edulis L. spat fed
various alga) diets. Aquaculture. 54: 245-262.

Langdon, C. J. 1980. The nutrition of Crassostrea gigas larvae and spat fed on artificial

diets. Ph.D. Thesis, University ofWales, Great Britain. 209 p.

41

Langdon, C. J. y M. J. Waldock. 1981. The effect of alga] and artificial diets on thc growth

and fatty acid composition of Crassostrea gigas spat. J. Mar. Biol. Assoc. U.K. 61: 431448.

Lavens, P. y P. Sorgeloos. 1996. Manual on the production and use of live food for
aquaculture. FAO Fisheries Technical Paper. No.361. Roma, FAO. 295 p.

Lpez-Elas J. A. y D. Voltolina. 1993. Cultivos scrnicontnuos de cuatro especies de


rnicroalgas con un medio no ..:onvencional. Ciencias Marinas 19 (2): 169-180.

Lora-Vilchis, M. C. 2004. Evaluacin de la calidad diettica de microalgas mediante el


estudio del balance energtico de Arteniiafranciscana. Tesis doctoral. CIBNOR - La Paz.

135 p.

Lora-Vilchis, M. C. y N. Doktor. 2001. Evaluation of seven alga! diets for spat of the
Pacific Scallop Argopecten ventricosus. Joumal of the World Aquaculture Society 32 (2):

228-235.

Martnez-Crdova, L. R. 1993. Camaronicultura. Bases tcnicas y cientficas para el


cultivo de camarones peneidos. A.G.T. Editor, S.A. Mxico, D.F. 233 p.

Martnez-Crdova, L. R. 2002. Camaronicultura. Avances y tendencias. A.G.T. Editor,


S.A. Mxico, D.F. 167 p. En: Flores-Santana, R. 2004. Efecto de Brachionus plicatilis
cultivado con tres microalgas con diferentes contenidos de cidos grasos, sobre el
crecimiento y el desarrollo de larvas de rnysis de Litopenaeus vannamei. Tesis de
licenciatura. Universidad Autnoma de Sinaloa. 43 p.

Mourente, G. y D. R. Tocher. 1992. Effect of weaning onto a pelleted diet on


docosahexaenoic acid (22 : 6n-3) levels in brain of developing turbot (Scophthabnus

maximus L.). Aquaculture. 105: 363-377.

42

Mourente, G., D. R. Tocher y J. R. Sargent. 1991. Specific accumulation of


docosahexanoic acid (22 : 6n-3) in brain lipids during development of juvenile turbot

Scophthalmus maximus L. Lipids. 26: 871-877.

Navarro, J. C. y J. R. Sargent. 1992. Behavioural differences in starving herring Clupea

harengus L. Jarvae correlate with body levels of essential fatty acids. J. Fish Biol. 41: 509513.

Pedini, M. 2000. Bridging the gap: Can aquaculture meet thc additional demand for fishery
products?. FAO Aquaculture newsletter. 24: 4-9.

Roe, J. H., J. M. Bailey, R. R. Gray y J. N. Robinson. 1961. Complete removal of glycogen


from tissues by extraction with cold trichloroacetic acid solution. Thc Joumal of Biological
Chemistry. 236 (5): 1244-1246.

Russell-Hunter, W. D. 1970. Aquatic productivity. Macmillan Publishers, fnc., New York


and Lbndon. 224 p.

Sargent, J. R., M. V. Bell y D. R. Tocher. 1993. Docosahexaenoic acid and the


development ofbrain and retina in marine fish. En: C.A. Devon, J. Baksaas y H.E. Krokan
(Editors), Omega-3 Fatty Acids: Metabolism an<l biological effects. Birkhauser Verlag,
Base!, Switzerland. 139-149.

Sarma, S. S. S. 1996. Rotifer Culture Systems. En: lnternational workshop on rotifer


culture systems. UNAM Campus Iztacala, Mxico. 28-56.

Sarma, S. S. S. 1996. lnternational workshop on rotifer culture systems. UNAM Campus


Iztacala, Mxico. 56 p.

43

Sarrna, S. S. S. y S. Nandini. 1997. lntemational workshop on field cultivation technology


ofrotifers foruse as food in aquaculture. UNAM Campus Iztacala, Mxico. 36 p.

Scott, A. P. y C. Middleton. 1979. Unicellular algae as a food for turbot (Scophthalmus

niaximus L.) larvae. The importance of dietary Jong-chain polyunsaturated fatty acids.
Aquaculture. 18: 227-240.

Snell, T. W. 1991. Improving the design ofmass culture systems for the rotifer, Brachionus

plicatilis. Rotifer and microalgae culture systems. Proceeding of a U.S. - Asia Workshop.
Honolulu, HI, 1991. The Oceanic lnstitute.

Sorgeloos, P. y J. Sweetman. 1993. Aquaculture success stories. World Aquaculture. 24: 4-

14.

Stelzer, C. P. 2002. Phenotypic plasticity of body size at different temperatures in a


planktonic rotifer: mechanisms and adaptive significance. British Ecological Society,

Funtional Ecology. 16: 835-841.

Suchar, V. A. y P. Chigbu. 2006. The effects of algae species and densities on the
population growth ofthe marine rotifer, Colurella dicentra. Joumal of experimental maiine
biology and ecology. 337: 96-102.

Tamaru, C. S. y L. Cheng-Seng. 1991. Improving the Larval Rearing of Striped Mullet

(Mugil cephalus) by Manipulating Quantity and Quality of the Rotifer, Brachionus


plicatilis_ En: Rotifer and Microalgae Culture Systems. Proceeding of a U.S. - Asia
Workshop. Honolulu, HI, 1991- The Oceanic Institute.

Tocher, O.

R.,

G.

Mourente

y J.

R.

Sargcnt.

1992.

Metabolism of [I- 1-IC]

docosahexaenoate (22: 6n-3), [l- 14 C] eicosapentaenotate (20: Sn-3) and [l- 14 C] linolenate
(18 : 3n-3) in brain cells from juvenile turbot Scophthabnus maximus. Lipids. 27: 494-499.

44

Tuker, J. W. y Jory, D. E. 1991. Marine fish culture success stories. Word Aquaculture, 22

(1): 10-27.

Vzquez, R. 1994. Biochemical composition and fatty acid contcnt of fertilized eggs, yolk
sac stage larvae and fist-feeding larvae of the Senegal sole (Solea senegalensis Kaup).

Aquaculture. 119: 273-286.

Walne, P. R. 1974. Culture of Bivalve Molluscs. 50 Ycars of Experince at Conway.


Fishing News (Books) Ltd., Surrey, Great Britain. 173 p.

Watanabe, T., C. Kitajima y S. Fujita. 1983. Nutritional values of live organisms used in
Japan for mass propagation of fish: a review. Aquaculture. 34: 115-143.

Whyte, J. N. C. y W. D. Nagata. 1990. Carbohydrate and fatty acid composition of the


rotifer, Brachionus plicatilis,

fed monospecific diets of yeast or phytoplankton.

Aquaculture. 89: 263-272.

Webb, K. L. y F. L. Chu. 1982. Phytoplankton as a food source for bivalve Jarvae. En:
Pruder, G., C. J. Langdon y D. E. Concklin. Proceedings of the Second Intemational
Conference on Aquaculture Nutrition: Biochemical and Physiological Approaches to
Shellfish Nutrition, 2. Louisiana State University, Baton Rouge, LA. 272-291.

Ye, Y. 1999. Historical consumption and future demand for fish and fishery products.

Exploratory calculations for the years 2005-2030. FAO Fish. Circ. 946. 31 p.

B\BLIOiEC~ CUCB,il.,

45

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