1.1.1.

CLASIFICACIN DE LOS ANTIBIOGRAMAS

B-lactmicos: Penicilinas, monobactam
Glicopptidos: Vancomicina
Aminogliccidos: Gentamicina, Amikacina
Macrlidos: Eritromicina, Azitromicina, claritromicina
Quinolonas: Ciprofloxacino, Levofloxacino
Tetraciclinas
Sulfonamidas y trimetoprim: bactrin, exazol.
1.1.2. MTODOS
1.1.2.1.
MTODO DE DIFUSIN
1.1.2.1.1. MTODO DEL ANTIBIOGRAMA DISCO-PLACA
1.1.2.1.1.1. CONCEPTO:
Es una prueba de inhibicin o resistencia de los
microorganismos, enfrentndolos con medicamentos
que se encuentran impregnados en pequeos discos.
1.1.2.1.1.2. FUNDAMENTO:
El antibiograma disco-placa basado en el
trabajo de Bauer, Kirby y colaboradores es uno
de los mtodos que el National Committee for
Clinical

Laboratory

recomienda

para

la

Standards
determinacin

(NCCLS)
de

la

sensibilidad bacteriana a los antimicrobianos.

Este proceso consiste en depositar, en la
superficie de agar de una placa de petri
previamente inoculada con el microorganismo,
discos de papel secante impregnados con los
diferentes antibiticos. Tan pronto el disco
impregnado de antibitico se pone en contacto
con la superficie hmeda del agar, el filtro
absorbe agua y el antibitico difunde al agar.
El antibitico difunde radialmente a travs del
espesor del agar a partir del disco formndose
un gradiente de concentracin. Transcurridas
18-24 horas de incubacin los discos aparecen
rodeados por una zona de inhibicin. La
concentracin de antibitico en la interfase
entre bacterias en crecimiento y bacterias
inhibidas se conoce como concentracin crtica
y se aproxima a la concentracin mnima

inhibitoria (CMI) obtenida por mtodos de

dilucin.

1.1.2.1.1.3. INDICACIONES
El antibiograma est indicado cuando se asla una
bacteria responsable de un proceso infeccioso y no
puede predecirse su sensibilidad, especialmente si se
sabe que este tipo de bacteria puede presentar
resistencia a los antimicrobianos ms habituales.
Estas pruebas de sensibilidad tambin son tiles en
estudios epidemiolgicos ya que el resultado del
antibiograma puede ser considerado como el primer
marcador epidemiolgico de que se dispone. El
mtodo de disco-placa es fcil de realizar, rpido y
barato. Es una metodologa aplicable a una amplia
variedad de bacterias, fundamentalmente bacterias
aerobias no exigentes de crecimiento rpido como:
Enterobacteriaceae
Pseudomonas spp.
Stenotrophomonas maltophilia,
Burkholderia cepacia,
Acinetobacter spp.
Staphylococcus spp.
Enterococcus spp.
Adems, con ligeras modificaciones, puede ser
aplicado a:

Haemophilus spp.
Neisseria gonorrhoeae
Streptococcus pneumoniae
Streptococcus spp

1.1.2.1.1.4. DISCOS DE ANTIBITICOS

Se deben guardar a 4C
Dejarlos a temperatura ambiente 1 hora

antes de utilizarlos
El deterioro de los discos ocurre si son
sometidos a humedad o a frecuentes

fluctuaciones de temperatura
En el caso de utilizar dispensador, ste
debe tener una tapa muy ajustada y un

desecante, que ser substituido cuando

por exceso de humedad cambie de color

el indicador
El
dispensador

debe

mantenerse

refrigerado cuando no se vaya a utilizar.

1.1.2.1.1.5. FACTORES QUE INFLUYEN EN EL AGAR
pH: el rango va desde 7.2 a 7.4
Variacion de cationes divalentes:
Profundidad de Agar: la profundidad
recomendada de la capa de agar es de 3
a 5 mm.
1.1.2.1.2. MTODO DEL EPSILON TEST
1.1.2.1.2.1. CONCEPTO:
Es una variante del mtodo de difusin en agar que
presenta la ventaja de ser una tcnica cuantitativa.
1.1.2.1.2.2. FUNDAMENTO
Este mtodo se basan en la determinacin del
crecimiento del microorganismo en presencia
de

concentraciones

crecientes

del

antimicrobiano, que se encuentra diluido en el

medio de cultivo (caldo o agar). Las primeras
determinaciones

se

realizaron

empleando

bateras de tubos con caldo de cultivo con un

rango

determinado

(macrodilucin).

Esta

de

antimicrobiano

metodologa

es

muy

engorrosa, por la cantidad de material y de

manipulaciones necesarias para su realizacin.
La aparicin de un sistema de inoculacin
mltiple para placas de agar populariz el
mtodo de dilucin en agar, en el que cada
placa,

con

una

cierta

antimicrobiano,
simultneamente

concentracin

permite
un

gran

de

inocular
nmero

de

microorganismos.
Tradicionalmente estos mtodos se han venido
usando para la determinacin de la CMI y la
concentracin mnima bactericida (CMB) de los
antimicrobianos.
1.1.2.1.2.3. INDICACIONES

Los mtodos de dilucin se consideran de

referencia para la determinacin cuantitativa
de la actividad de los antimicrobianos. Son los
mtodos indicados cuando, adems de la
actividad

inhibitoria,

se

quiere

determinar

tambin la actividad bactericida.

Los mtodos de dilucin se utiliza para su
aplicacin a microorganismos de crecimiento
no exigente como:
Staphylococcus spp
Enterococcus spp
Listeria spp
Enterobacterias
Pseudomonas spp.
Acinetobacter spp.
S. maltophilia
Adems

tambin

son

aplicables

los

organismos fastidiosos como:

Haemophilus spp.
Neisseria spp.
Streptococcus spp
En comparacin con los mtodos de difusin,
los mtodos de dilucin son tcnicamente ms
complejos y casi siempre ms caros.
1.1.2.1.2.4.
1.1.2.2.
1.1.2.3.

MTODOS DE DILUCIN:
MTODO DE DIFUSIN Y DILUCIN APLICADOS A

BACTERIAS ANAEROBIAS
1.1.2.4.
OTRAS BACTERIAS DE CRECIMIENTO DIFICIL

1.1.3. INTRODUCCIN:
El panorama actual de las resistencias de los microorganismos a los
antimicrobianos hace ineludible su determinacin, incluso en
aquellos casos en los que la sensibilidad se considera universal y no

se han descrito, por el momento, mecanismos de resistencia. Cada

laboratorio de microbiologa establecer segn su estructura,
demanda asistencial y Poltica de Antibiticos un esquema de
organizacin y tcnicas de trabajo que aseguren la realizacin e
informacin posterior de los antibiogramas.
Por el momento no existe un mtodo universal que reproduzca las
condiciones

en

las

que

se

encuentra

un

microorganismo

produciendo una infeccin y, por tanto, la situacin ideal en las que

deben desarrollarse las pruebas de sensibilidad.
En el presente procedimiento se recogen los mtodos bsicos ms
utilizados y aceptados para el estudio de la sensibilidad, as como
los criterios para su interpretacin y control.