MANEJO Y CUIDADO DEL ANIMAL DE LABORATORIO: RATN

I.

EL

RATN,

MARCO TERICO

SUTAXONOMA

USO

COMO

ANIMAL

DE

LABORATORIO
TAXONOMA

Clase: Mammalia
Familia: Muridae
Gnero: Mus
Especie: Mus musculus.

Ventajas de su uso como animal de laboratorio:

De fcil cuidado y mantenimiento, por su pequeo tamao.

Bajos costo de manutencin.
Cepa definida.
Diversidad de caractersticas especficas que sirven como modelo.
Eficiencia reproductiva.
Por su vida relativamente corta es excelente para su uso en
ensayos

crnicos

de

toxicologa,

microbiologa,

farmacologa, etc.
Corto tiempo de generacin.
Desventajas:
Dificultad en la recoleccin de material biolgico.
Dificultad la administracin de drogas.
Dificultad en las tcnicas quirrgicas.

Figura N1 Ratn Albino

virologa,

Fuente: Bioterio Central CNPB del INS. 2007

CARACTERSTICAS GENERALES DEL RATN

El ratn domstico es una especie cosmopolita, se adapta a una gran
variedad de condiciones ambientales, desde zonas muy fras hasta
regiones tropicales. En general, las especies prefieren ambientes ms
secos que hmedos.
El ratn es un mamfero de sangre caliente, de hbitos nocturnos y su
comportamiento est influenciado por feromonas. Posee un agudo
sentido de la audicin, por lo que se alteran rpidamente con los ruidos,
es por ello que hay que tener cuidado con los equipos que se utilizan.
Su sentido del olfato est muy desarrollado, no slo para detectar
comida y depredadores, sino tambin para percibir un orden social.
Su visin es muy pobre y no pueden percibir los colores. En la rbita del
ojo posee unas glndulas con forma de herradura llamadas glndulas
Harderianas, cuando el ratn est en estrs, excreta en la zona
periocular una sustancia de color marrn llamada porfirina.
El sistema social depende de la densidad de poblacin, viven en grandes
colonias y el rango social est bien desarrollado. Generalmente, son

muy dciles a excepcin de algunas cepas exocriadas que mantienen su

agresividad, al igual que sus antecesores salvajes.
Por su pequeo tamao son muy susceptibles a cambios ambientales,
puesto que una variacin de la temperatura entre 2 a 3C, puede afectar
su temperatura corporal y modificar su fisiologa.

COMPORTAMIENTO DEL RATN

El ratn es un animal sociable y se mantiene en grupos sin ningn
inconveniente, estos grupos deben formarse rpidamente luego del
destete.
Sin embargo, los machos de algunas cepas comienzan a mostrar su
agresividad entre la sptima y dcima semana de edad, aun cuando
estos grupos se hayan establecido al destete. En el grupo de machos
existe uno dominante que puede ser muy agresivo. Las hembras
generalmente no pelean, incluso cuando se hayan agrupado siendo ya
adultas.
El acto de comer es cclico, con un pico mximo durante el periodo de
oscuridad. El mayor consumo de agua es durante las horas de
oscuridad. El consumo de alimento y agua vara entre las cepas de
ratones.
El ratn generalmente divide su caja en reas especficas para dormir,
comer, orinar y defecar.
Las hembras parturientas construyen un nido y permanecen mucho
tiempo cerca de l o sobre las cras.
SISTEMA REPRODUCTIVO

La hembra es polistrica continua. Tras el parto, a las 14 - 28 horas se

produce un estro frtil, por lo que puede utilizarse el estro posparto. Hay
que tener en cuenta que la lactancia y gestacin simultneas puede
retrasar entre tres a cinco das la implantacin del embrin.
Al nacer el ratn pesa entre uno y dos gramos, nacen con los ojos y
odos cerrados, sin pelos y son muy activos. Al tercer da comienza a
observarse el desarrollo del pelaje, llegando a cubrirse totalmente desde
los siete a diez das. A los 12 das empiezan abrir los ojos y el conducto
auditivo externo, entre los das 13 y 14 inician a ingerir alimento slido
y agua del bebedero.
Generalmente se les desteta a los 21 das de edad con un peso de
aproximadamente 11 a 14 gramos (bioterio central del CNPB/INS).
Cuando no se ha utilizado el estro posparto, empiezan a ciclar a los
cinco das postdestete. El ciclo estral tiene una duracin de cuatro a
cinco das, en tanto que el celo dura 12 horas.
Las

hembras

monogmicos

reproductoras
o

poligmicos

pueden
(de

convivir
harn).

en

apareamientos

Los

apareamientos

monogmicos consisten en el aislamiento de un macho y una hembra a

lo largo de su vida reproductiva, equivalente a un ao o a una cantidad
de partos que oscila entre los cinco y los ocho. La pareja de
reproductores va a permanecer junta procreando, con un promedio de
ocho a diez cras por camada.
En el caso de los apareamientos poligmicos, un macho es confinado
junto con un nmero superior de hembras para incrementar la
reproduccin.
Las poblaciones endocriadas se obtienen por el cruzamiento de
hermanos con hermanas luego de 20 generaciones como mnimo. Las

poblaciones de animales exocriados se obtienen apareando individuos no

aparentados entre s y se les denomina stock.

BIOTERIO DE PRODUCCIN
Estructura fsica y organizacional especialmente diseada para la cra y
mantenimiento de animales de laboratorio. De ubicacin exclusiva, fuera
del alcance de peligros sanitarios. El objetivo principal de tener un
bioterio es asegurar la procedencia de animales sanos para que no
interfieran en los trabajos cientficos de las diferentes reas de
investigacin, fabricacin de vacunas, antgenos y su control.
Los determinantes de un bioterio para un buen desempeo son:
Aspecto de infraestructura.
Animales definidos.
Personal capacitado.

BIOTERIO DE EXPERIMENTACIN
Destinado solamente para alojar animales durante el tiempo que dure
un estudio o una investigacin. Se debe tener en cuenta que existan
instalaciones con barreras sanitarias establecidas para la proteccin de
las personas as como de los animales, con el equipamiento necesario y
los procedimientos normativos operacionales correspondientes para
dichos fines.
DISEO DE UN BIOTERIO
Un elemento importante para el cuidado y uso de animales, son las
instalaciones diseadas construidas y mantenidas apropiadamente,
adems, que faciliten una operacin segura, eficiente y econmica.
Para el diseo de un bioterio se tendr presente:
Actividades por realizarse.
Relacin de estas actividades con el espacio y con las necesidades
ambientales.

Los bioterios deben estar construidos con paredes y pisos recubiertos

por material de fcil lavado, resistente a la aplicacin de desinfectantes;
techos lisos, uniformes, fciles de limpiar y con bordes sanitarios;
cierres hermticos en las puertas y con factores controlados, entre ellos,
los ambientales (temperatura, humedad, ventilacin, presurizacin) y
fsico-qumicos (iluminacin, ruido, sanitizantes, etc.).
Las instalaciones debern contar con condiciones fsicas y de diseo, que
aseguren la eficacia de su funcionamiento ya que los animales de
laboratorio requieren satisfacer los fines de la investigacin, y es por ello
que debern estar ubicados en reas apropiadamente adecuadas, para
alojarlos y cuidarlos. Existen dos tipos de distribucin interna de las
reas, segn la American
Association for Laboratory Animal Science (AALAS) y la diferencia entre
ellas radica en la disposicin del acceso y salida de las salas.
Bioterio convencional o de corredor nico: el trnsito es mediante una
nica puerta, la cual comunica hacia un corredor comn de acceso y
salida.
Bioterio con dos corredores de acceso: en donde se separan el acceso y
retorno de la sala, los cuales se efectan por corredores independientes,
diseado para albergar animales de mayor calidad. Se separan dos
reas bsicas, una destinada a la preparacin del material y el otro es el
corredor de retorno destinada a la limpieza de materiales.

II.

EL RATN: SU MICROAMBIENTE Y MACROAMBIENTE

Figura N 5

El investigador podr decidir, de acuerdo con sus necesidades, dnde

ubicar a los animales empleados, teniendo en cuenta que el lugar brinde
las condiciones ambientales y de manejo ptimos que aseguren la salud
y la comodidad de especmenes, de modo que sus patrones metablicos
y de comportamiento se mantengan normales y estables, dando
respuestas confiables.
Los principales factores ambientales que afectan a los animales pueden
clasificarse en:
Climticos: temperatura, humedad, ventilacin, etc.
Fisicoqumicos: iluminacin, ruido, composicin
sanitizantes, lecho o cama, etc.

del

aire,

Habitacionales: forma, tamao, tipo y poblacin de las jaulas, etc.

Nutricionales: dieta, agua, esquema de administracin.
Microorganismos y parsitos.
Situacin experimental.

MICROAMBIENTE
El microambiente, es el ambiente fsico inmediato que rodea al ratn,
tambin llamado confinamiento o encierro primario, est limitado por el
permetro de la jaula o caja, cama, alimento y agua de bebida; deben
contribuir a la salud de los animales, y evitarles todo estrs, por lo que
deber asignrsele, a cada uno, un espacio adecuado que le permita
movimientos y adopciones de posturas normales, preservando a su vez
las mnimas condiciones de higiene y de proteccin contra insectos,
roedores y otras plagas.
El microambiente lo conforman la caja o jaula, el alimento, el agua, as
como el mantenimiento de las condiciones de higiene de cada uno de
ellos.
CAJA O JAULA
Los ratones se alojan en cajas o jaulas especialmente diseadas para
facilitar su bienestar, pueden ser de metal o de plstico (polipropileno,
policarbonato, poliestireno y polysulfano), provistas de tapas de acero
inoxidable con o sin filtro.
El poliestireno es transparente y resiste al autoclavado y a la mayora de
desinfectantes. El poliestireno y el polipropileno no resisten temperatura
elevadas.
La altura de las paredes de la caja no debe ser menor de 12,7 cm.

Debe tener las siguientes caractersticas:

Proporcionar espacio adecuado, ser cerrado, seguro y protegerlo de las
amenazas externas.
Ser adecuado en ventilacin.
Ser resistente al lavado, desinfeccin y esterilizacin frecuente.
Permitir la observacin del animal.
Tener pisos y paredes fciles de limpiar (superficies lisa) y con tapa
removible de rejas o perforada.
Mantenerse en buenas condiciones de uso.
Facilitar el acceso de los animales al agua y alimento.
No presentar bordes cortantes o proyecciones que puedan causar
lesiones.
RECOMENDACIONES DE ESPACIO (DENSIDAD ANIMAL)
El nmero de animales por jaula estar en relacin con el tamao
corporal (edad del ratn, estado pre y postnatal) evitndose la
sobrecarga.
El tamao de las jaulas o cajas debe ser apropiado; por ejemplo, en el
caso de ratones adultos, se requiere una superficie mnima de 80 cm 2
por animal.
El requerimiento mnimo es que el animal disponga de espacio suficiente
para moverse y para expresar las posturas normales de conducta y
sociabilidad, debe tener fcil acceso al agua y alimento y debe tener un
rea suficiente con material de lecho limpio y sin obstculos para
moverse y descansar.

En la siguiente tabla se muestra las recomendaciones del espacio

asignado a roedores alojados en grupos; si se alojan individualmente o
exceden los pesos listados, podran requerir de ms espacio, de acuerdo
con el criterio profesional y de experiencia.

LECHO O CAMA

Los lechos sern de material absorbente tal como la viruta de madera,

la coronta molida del maz (marlo), etc.; libres de polvillo, alrgenos y
sustancias txicas. Deben ser esterilizables.
La viruta ms adecuada es la de pino blanco, seguida por la de tornillo.
Se debe tener especificaciones de calidad de la viruta para su
adquisicin, tales como:
No ser nocivo.
Capacidad de absorcin
No se recomienda el uso de viruta procedente de cedro o caoba.

AGUA DE BEBIDA
El agua debe ser potable y suministrarse libremente durante toda la vida
del animal, puede ser en frascos bebederos de vidrio o de policarbonato.
El agua debe ser acidificada, esterilizada mediante autoclave o por
mtodo de filtracin.

ALIMENTO: DIETAS Y REQUERIMIENTOS

El alimento es el material primario a partir del cual se van a formar y
renovar los tejidos y estructuras corporales, tanto las nuevas como las
ya existentes, que deben ser reemplazadas debido al proceso de
desgaste. La nutricin es determinante en los estados sucesivos de
crecimiento y produccin de los animales, de ah que haya alimentos
especficos para cada especie y hasta para cada etapa de su vida.
Luego de su adquisicin, se debe tener cuidado en el transporte,
almacenamiento y manipulacin del alimento para reducir al mnimo la
introduccin de enfermedades, parsitos y vectores potenciales de
enfermedades (por ejemplo insectos y otras plagas) y contaminantes
qumicos.
Se debe contar con un procedimiento para la adquisicin de alimento y
los requisitos que este debe reunir, tales como:
Composicin, que deber cubrir las necesidades de crecimiento,
gestacin, lactancia y mantenimiento del ratn.
Debe ser agradable al paladar (palatable) y digestible.
Tener fecha de elaboracin y caducidad.
Certificado de anlisis qumico proximal y microbiolgico por cada lote.
Estar libre de harina de pescado, aditivos, drogas, hormonas,
antibiticos, pesticidas y contaminantes patgenos.
El alimento en forma de pellet debe tener la consistencia requerida,
para evitar perdida del alimento y el animal pueda consumirlo.

MACROAMBIENTE
El macroambiente es el espacio inmediato al microambiente y es la sala
de alojamiento en su mbito general.
La alteracin de los factores del macroambiente producir cambios en el
modelo animal y con ello, la modificacin del tipo de respuesta, y
aumento de la variabilidad de los resultados entre o dentro de los
laboratorios de experimentacin.
AIRE Y VENTILACIN
Los ambientes destinados a la produccin de animales, en su interior,
deben poseer ventilacin con presin positiva de aire respecto a los
pasillos o reas exteriores, manteniendo las gradientes de presin, de
tal forma que se evita el ingreso de patgenos desde el exterior.
En caso de poseer un bioterio de doble pasillo con locales centrales
(circulacin limpia y sucia), la gradiente de presin ser del limpio hacia
el sucio.
La ventilacin es importante para controlar la humedad, calor, gases
txicos. Se debe generar entre 15 a 20 recambios de aire / hora.

Los sistemas de aire acondicionado o ventilacin no podrn ser

compartidos con otras reas, sern exclusivos para el sector bioterio y
con factores controlados de temperatura y humedad.
TEMPERATURA Y HUMEDAD RELATIVA
Las exigencias de temperatura para ratones son de 20 a 25 C y la
humedad relativa ambiental entre 40 y 70%.
Las condiciones ambientales en que se cran y experimentan los
animales influyen decisivamente en las respuestas a los diferentes
tratamientos.
Si se requiere respuestas estandarizadas, las condiciones en que se
mantienen los animales deben ser fijas.
INTENSIDAD DE LUZ Y TIPO DE ILUMINACIN
Los ambientes de crianza deben contar con la luz artificial, provista de
lmparas fluorescentes tipo luz da, con incidencia oblicua, con una
iluminacin mxima de 323 lux a un metro del piso; de forma tal, que
todas

las

jaulas,

independientemente

de

su

ubicacin,

reciban

intensidades similares de luz.

La iluminacin debe distribuirse adecuadamente a travs de la sala de
alojamiento y ser lo suficiente para las prcticas de mantenimiento,
inspeccin y bienestar de estos, sin causarles signos clnicos a los
animales. Tambin debe proporcionar condiciones seguras de trabajo
para el personal.
La iluminacin es importante para la regulacin del ciclo estral y
reproductivo. Se recomienda 12 horas luz/12 horas oscuridad, lo cual se
programa con un reloj temporizador.

RUIDO
Los ratones son muy sensibles al ruido y pueden percibir frecuencias de
sonido que son inaudibles para el ser humano, por lo que el personal
debe tratar de minimizar la generacin de ruido innecesario. El ruido
excesivo e intermitente se puede minimizar capacitando al personal en
modos alternativos a las prcticas que producen ruido. Los radios,
celulares, alarmas y otros generadores de sonido, aun con auriculares o
audfonos, no deben usarse en las salas de alojamiento de animales. Se
permite un nivel mximo de ruido de 85 decibeles, si estos son mayores
tiene efectos nocivos como estrs y problemas de fertilidad.
OLOR
El olor es otro factor que afecta al ratn, es por ello que no se debe
utilizar desinfectantes que emanen olores, que sean irritantes y mucho
menos desodorizantes, dentro de los ambientes del bioterio.
La percepcin de amoniaco en el ambiente es un indicador de saturacin
del lecho, por lo que se recomienda tener programas de cambio de lecho
segn la poblacin que se maneje.
Por ejemplo, se conoce que el hombre es capaz de percibir 100 ppm de
amoniaco del ambiente del ratn y ste puede percibir desde 25 ppm de
amoniaco.

III. VALOR BIOLGICO

El aprovechamiento de una protena aislada no depende de su origen,
intervienen muchos factores ms, como son la combinacin con otras

protenas, otras molculas o nutrimentos, adems de los procesos de

digestin, absorcin, o el hecho de que algunos aminocidos puedan
estar en formas qumicas no utilizables, etc. El trmino calidad
proteica se refiere a la capacidad de una protena de la dieta para
incorporarse en las protenas corporales y se puede estimar a travs de
varios indicadores, dentro de los que se destaca el valor biolgico o
calificacin qumica. El valor biolgico est definido como la proporcin
en que se encuentra un aminocido indispensable limitante con respecto
al patrn de referencia. Por definicin, se entiende como aminocido
limitante a aquel en el que el dficit es mayor comparado con la protena
de referencia, es decir, aquel que, una vez realizado el clculo, da un
valor qumico ms bajo. La protena de referencia es una protena
terica definida por la FAO la cual tiene la composicin adecuada para
satisfacer correctamente las necesidades proteicas, la FAO ha propuesto
a la protena del huevo y la protena de la leche humana como protenas
de

referencia.

Se

han

fijado

distintas

protenas

de

referencia

dependiendo de la edad, ya que las necesidades de aminocidos

esenciales son distintas en las diferentes etapas del crecimiento y
desarrollo humano. Las protenas de los cereales son en general
severamente deficientes en lisina, mientras que las de las leguminosas
lo son en aminocidos azufrados (metionina y cistena). Las protenas
animales

tienen

en

general

composiciones

ms

prximas

la

considerada ideal.
En la dieta de los seres humanos se puede distinguir entre 2 tipos de
protenas, las de origen animal y las de origen vegetal. Dentro de las
primeras, las que provienen de huevo, leche y derivados lcteos son
consideradas como de excelente calidad; otras carnes (tejido muscular)
como el pescado, res y aves contienen protenas de buena calidad. De
las protenas vegetales, la protena del frijol de soya es considerada de

buena calidad, la contenida en cereales, harinas y la mayor parte de

tubrculos y races vegetales est clasificada como de mediana calidad,
y la mayora de las frutas y verduras contienen protena de baja calidad.
Las protenas de origen vegetal, tomadas en conjunto, son menos
complejas que las de origen animal.
Prcticamente todos los alimentos contienen protenas, aunque no en la
misma concentracin. En el medio no especializado y hasta en muchos
textos de nutricin existe la idea, la cual es errnea, de que es
importante el origen de la protena, es decir, animal o vegetal. Si bien,
las protenas de origen animal son de mejor calidad, esto no quiere decir
que las vegetales no se puedan aprovechar, o que su calidad se vea
desmerecida.

El valor biolgico (BV) es una escala de mediciones utilizadas para

determinar qu porcentaje de una fuente dada de nutriente es utilizada
por

el

cuerpo.

La

escala

para

fuentes

proteicas

es

la

ms

frecuentemente aplicada. Valor biolgico es derivado tomando en cuenta

una protena ingerida como medida base, calculando el nitrgeno
contenido en ella (ingreso) versus el nitrgeno excretado (salida). Los
BV tericos ms altos de algunas fuentes de alimentos son iguales al
100%. En sntesis BV se refiere a que tan bien y que tan rpido el
cuerpo puede realmente usar la protena que se consume.
El BV se usa particularmente para protenas ya que el cuerpo no
almacena los excesos de aminocidos como las grasas y carbohidratos
que si pueden ser almacenados en el cuerpo. Por lo tanto la dieta diaria
deber proporcionar siempre bastante protena, y de apropiada calidad,
para suplir la necesidad corporal.

El aminocido ms restrictivo determina el BV de la protena entera. Si

el cuerpo necesita, por ejemplo 1 g de fenilalanina diariamente y el
alimento suplementa 500 g de protena, pero solo 0.5 g de fenilalanina,
entonces el BV de la protena es muy bajo. Solo una fraccin de la
protena puede ser usada, el resto tiene entonces que ser eliminada por
el cuerpo.
Un BV bajo puede ser compensado por el consumo de otras protenas.
Por ejemplo cuando una protena es baja en leucina, el BV es bajo.
Cuando se combina esta protena con una con alto contenido de leucina,
el BV combinado ser ms alto que la primera protena sola. En la
combinacin el otro aminocido puede ser limitante, por lo tanto se
debe determinar un nuevo BV. Nunca se puede aadir dos valores
biolgicos para obtener uno nuevo. El nuevo valor en una combinacin
ser determinado por el aminocido ms restrictivo de la combinacin.
El valor biolgico BV es muy importante para vegetarianos y veganos,
quienes no consumen protena animal. En general protenas animales
tienen ms BV que protenas vegetales, debido a la semejanza de
humanos y animales. Vegetarianos y veganos debern seleccionar
ingeniosamente fuentes de protena para obtener as un alto BV.

Tabla 3: Valores biolgicos de algunos alimentos

Producto

Valor Biolgico

Huevo entero

93.7

Leche

84.5

Pescado

76.0

Carne

74.3

Sojas

72.8

Arroz, refinado

64.0

Trigo, entero

64.0

Maz

60.0

Frijoles, secos

58.0

La protena de la clara de huevo es considerada por tener uno de los

perfiles ms altos de aminocidos para la nutricin humana. Protenas
vegetales generalmente tienen bajo contenido de algunos aminocidos
esenciales tal como lisina y metionina. La protena de soya es una de las
mejores protenas vegetales, sin embargo, la diferencia ms prominente
es la proporcin del contenido de azufre de aminocidos sulfurados
esenciales como metionina. La protena de la clara de huevo tiene
aproximadamente tres veces ms metionina que las encontradas en
protena de soya.

EVALUACIN BIOLGICA EN RATAS

Sabemos:
%N =

NV14100
m1000

%N =

0.123.514100
1.021000

%N =

0.123.514100
1.021000

%N =3.2255

P=3.22556.25
%P=20.1594

Valor biolgico (VB): Este Parmetro se calcul a partir de la frmula:

[ESCRIBE LA FORMULA JHONAS, PORFAVOR]