Metabolisme

Porfirin dan
Pigmen empedu

Bambang Prijadi
Dicky Faizal Irnandi
LABORATORIUM BIOKIMIA-BIOMOLEKULER
FAKULTAS KEDOKTERAN UNIBRAW

Learning Objectives
Identify the two amphibolic intermediates from which heme is synthesized.

Name the key regulated enzyme of hepatic heme biosynthesis.

Indicate which steps in the conversion of heme to bilirubin are cytosolic

and which are mitochondrial.
Understand the causes and general clinical pictures of the various
porphyrias.
Explain the biochemical nature of jaundice, name some of its causes, and
suggest how to approach determining its biochemical underpinnings.
Explain what is meant by direct bilirubin and indirect bilirubin.

Ikterus/Jaundice
Secara awam, dikenal sebagai
penyakit kuning

Secara klinis, dibedakan

berdasarkan penyebab
Anamnesis, pemeriksaan fisik, Laboratorium
(darah, faeces, urine)

Ikterus merupakan bagian dari

metabolisme Porfirin dalam tubuh

PORFIRIN:
Porfirin adalah Senyawa siklik gabungan dari 4 cincin
pirol dan dihubungkan oleh jembatan metenil ( -CH= )
SENYAWA INI DAPAT BERIKATAN DENGAN
LOGAM Fe ATAU Mg
Fe + porfirin heme
heme + protein hemoprotein

Mg + porfirin Khlorofil

Ikatan Porfirin + logam

Metaloporfirin

HEMOPROTEIN TUBUH :
Oxygen
transport
and
storage

HEMOGLOBIN (Hb)
TRANSPORTASI O2/CO2
MIOGLOBIN PADA OTOT
(MUSCLE)

Electron
transport

SITOKROM TRANSPORTASI
ELEKTRON/PROTON
SITOKROM P450 UNTUK
XENOBIOTIC/HIDROKSILASI
RACUN
KATALASE ENZIM
MENGELIMINASI H2O2

4X+

CH

HC

CH

HC
8

IV

HC

6
P

A=ASETAT (-CH2COOH)

b
5

II
P

2
I

A
IV

II

III
P

PORFIN (C20H14N4)
P=PROPIONAT (CH2-CH2COOH)

IV

II

CH

III

CH

PYROLE RING

N
H

METENIL

HC

III

UROPORFIRIN III (ASIMETRIS = P-A)

UROPORFIRIN I

(SIMETRIS A-P)

PORFIN (C20H14N4)

b 4

7g
6

GUGUS SAMPING (Menentukan Nama Senyawa)

. ASETAT (A)

: CH2-COOH

. PROPIONAT (P)

: CH2-CH2-COOH

. METIL (M)

: CH3

. VINIL (V)

: CH=CH

A
A

P
P

UROPORFIRIN III

P
P

UROPORFIRIN I
M

KOPROPORFIRIN I

KOPROPORFIRIN III

UROPORFIRIN AND KOPROPORFIRIN

CHARACTERISTIC OF PORPHYRIN
PROPHYRIN HAS COLOUR, ABSORBS SPECTRUM OF LIGHT,

600

400

200

Log. ABSORBTION

ESPECIALLY l 400 nm ( SORET BAND)

l nm

IF PORPHYRIN DISSOLVE IN STRONG ACID/ORGANIC

SOLVENT THEN EXPOSE TO UV LIGHT, RED COLOUR

WILL BE OBSERVED

APLICATION : CANCER PHOTO THERAPY

CANCER PHOTO THERAPY

HEMATOPORFIRIN/
OTHER PORFIRIN

ARGON LASER
FOCUS ON CANCER

CANCER CELL

FREE RADICAL &

KILL CANCER CELL

O2.
OH.

O2

FREE RADICAL
REACTION

BIOSINTESIS PORFIRIN DAN HEME :

TERJADI DI SEMUA SEL, TERUTAMA DI
SUMSUNG TULANG.
PROSES REAKSI TERJADI DI MITOKONDRIA
DAN SITOPLASMA

BAHAN BAKUNYA :
. ASAM AMINO GLISIN
. SUKSINIL - KoA
. Ko enzim PIRIDOKSAL FOSFAT

PORPHYRIN BIOSYNTHESIS (HEME)

PORPHYRIN
BIOSYNTHESIS
(HEME)

DECARBOXILATION OF UROPORPNYRINOGEN

REAKSI SINTESIS PORFIRIN :

KoA
1.

ASAM AMINO b-KETO ADIPAT

GLISIN + SUKSINIL-KoA
ALA-Sintase

ASAM AMINO b-KETO ADIPAT

CO2

ASAM a-AMINO
ALA-Sintase

LEVULINAT

(AMLEV = ALA)

2 H2O

2. 2 MOL. AMLEV

PORFOBILINOGEN (PBG)
Amlev. Dehidrogenase

3.

4 Mol. PORFOBILINOGEN

HIDROKSI METIL BILAN

Uroporfirinogen I sintase

(PBG)

SPONTAN
4.

(Pra zat pertama dari pirol)

UROPORFIRINOGEN I

HIDROKSI METIL BILAN

Uroporfirinogen I sintase & Uroporfirinogen III

kosintase
UROPORFIRINOGEN III

5.

UROPORFIRINOGEN I

CO2

UROPORFIRINOGEN III

Uroporfirinogen dekarboksilase

KOPROPORFIRINOGEN I
6.

CO2

KOPROPORFIRINOGEN III

Koproporfirinogen oksidase

CO2

PROTOPORFIRINOGEN IX
7.

Protoporfirinogen oksidase

O2

PROTOPORFIRIN III
Fe++

Ferrokelatase
HEME
GLOBIN

REAKSI 1 TERJADI DIDALAM MITOKONDRIA

( HEM )

HEMOGLOBIN

REAKSI 2 s/d 5 TERJADI DIDALAM SITOPLASMA

REAKSI 6 dan 7 TERJADI DIDALAM MITOKONDRIA.
ALA SINTASE MERUPAKAN ENZIM KUNCI ( KEY ENZYME ).

HEME SYNTHESIS
REGULATION
HEME WORKS THROUGH
APOREPRESOR MOLECULE
(NEGATIVE FEEDBACK)

HEME REGULATION:
ALA SINTASE INCREASE
WITHOUT HEME, &
AND DECREASE IF HEME
IS PRESENT
OTHER MOLECULE INHIBITS
ALA SINTASE :
GLUCOSA
STEROID
HEMATIN

MOLECULE THAT REGULATES HEME SYNTHESIS

GLUCOSE INHIBITS ALA-SINTASE SYNTHESIS

STEROIDS UMPLIFY DRUG EFFECT THAT

INHIBITS ALA-SINTASE SYNTHESIS

HEMATIN

UMPLIFY DRUG EFFECT THAT

INHIBITS ALA-SINTASE SYNTHESIS

PORFIRIA
SEKELOMPOK PENYAKIT KETURUNAN/HEREDITER YANG BERHUBUNGAN
DENGAN SINTESIS HEME
SEBAB : KELAINAN SINTESIS (MUTASI GENE) ENZIM-ENZIM YANG

MENGKATALIS SINTESA HEME

PORFIRIA :
KELOMPOK I : > KELAINAN ENZIM PD TAHAP AWAL SINTESIS HEM
> TERJADI PENUMPUKAN ALA & PBG

NEUROTOKSIK NYERI ABDOMEN

KELOMPOK II : > KELAINAN ENZIM-ENZIM PADA TAHAP AKHIR
> TERJADI PENUMPUKAN PORFIRIN DI JARINGANJARINGAN DAN KULIT
KULIT PEKA TERHADAP CAHAYA (fotosensitif)

PORPHYRIA
DNA MUTATION

(GENE OF THE ENZIME FOR HEME SYNTHESIS)

FIRST STEP ENZYME ABNORMALITY

LAST STEP ENZYME ABNORMALITY

INCREASE OF
INCREASE OF
ALA & PBG PORPHYRINOGEN (SKIN/TISSUE)

NEUROPSYCIATRIC
DISORDER

SPONTANEOUS OXIDATION OF
PORFIRINOGEN
TO PORFIRIN

PHOTOSENSITIVE

TABLE : TYPE, ENZYME & AND CLINICAL SYMPTOM

OF PORPHYRIA

HIDROKSIMETILBILAN

4 NH3

Uroporfirinogen I sintase
Uroporfirinogen III Kosintase

CONGENITAL
SPONTAN
ACUTE INTERMITTEN
ERYTHROPOETIC
PORFOBILINOGEN
UROPORFIRINOGEN
III
UROPORFIRINOGEN I
PORFIRIA
( PBG )
Uroporfirinogen I
Sintase (PBG-deaminase)

4 CO2
2H2O

Uroporfirinogen-dekarboksilase

4 CO2

ALA-Dehidratase
KOPROPORFIRINOGEN I

2X A.L.A

KOPROPORFIRINOGEN III

PORFIRIA
HEREDITERY
CUTANEA
TARDA
Steroid
COPROPORFIRIA
KOPROPORFIRINOGEN
III
Glukosa
Koproporfirinogen
Oksidase

Hematin
PROTOPORFIRINOGEN III

A.L.A
CO2
GLISIN

ALA-sINTASE

PORFIRIA
VARIGATA

Induksi
Kelat-Fe

SAS

6H

PROTOPORFIRIN III
Fe++

Ferrochelatase

SUKSINIL-KoA
MITOKONDRIA

Protoporfirinogen
Oksidase

APOREPRESOR

HEME PROTOPORF

KATABOLISME HEME
SETIAP 120 HARI ERITROSIT/Hb DIPECAH.
ERITROSIT HEMOGLOBIN HEME Fe+++ + GLOBIN + BILIRUBIN

PEMECAHAN TERJADI DI SEL-SEL RES (HEPAR, LIEN & SUMSUM

TULANG), OLEH SEL-SEL MAKROFAG.

PADA ORANG DEWASA, 70 Kg, SETIAP HARI 6 GRAM Hb DIPECAH.

1 GRAM Hb MENGHASILKAN 35 MG BILIRUBIN TIAP HARI
DIHASILKAN 250 350 MG BILIRUBIN.

KATABOLISME HEME
RECOGNITION
SITE

SEL DARAHMERAH
(UZUR)
Struktur membr. Berubah
Aktifitas enz. Hilang
Konformasi Hb berubah
Metabolit abnormal
Perubahan kadar elektr.
NUKLEUS

HEME
GLOB.

LISOSOME
SEKUNDER

AA
HAPTOGLOBIN

LISOSOME
PRIMER

BILIRUBIN
RES

SEL MAKROFAGE

KEHEPAR

DI

RES :

ERI TUA / RUSAK

DIMAKAN OLEH MAKROFAG

ERI

Hb

HEME + GLOBIN

GLOBIN

ASAM AMINO
HAPTOGLOBIN

HEM DI OKSIDASI OLEH SISTEM HEMOKSIGENASE, MENGHASILKAN :

Fe++

Fe++ +

(HEMIN)

BILIVERDIN (TETRA PIROL LINEAR/TERBUKA)

Fe+++ lepas

DARAH

BILIVERDIN DI OKSIDASI
(pigmen hijau)

TRANSFERIN
BILIRUBIN

HEPAR
DARAH

(pigmen kuning merah)

SIFAT BILIRUBIN INI : - SANGAT TOKSIK TAK LARUT DALAM AIR, TETAPI
DAPAT MENEMBUS JARINGAN OTAK
BILIRUBIN + ALBUMIN

BILIRUBIN ALBUMIN DARAH HEPAR

DI HEPAR
:
ALBUMIN
DILEPASKAN, DIGANTI DENGAN LIGANDIN agar tidak kembali
BILIRUBIN-LIGANDIN MASUK KE SEL HAPATOSIT, KEMUDIAN DI
KONJUGASI-KAN DENGAN ASAM GLUKORONAT OLEH ENZIM URIDIN

DIFOSFOGLUKORONIL TRANSFERASE (UDP-GLUKORONIL TRANSFERASE).

HASILNYA : BILIRUBIN DIGLUKORONIDA (bilirubin konjugasi) dan
BILIRUBIN TAK TERKONJUGASI.
UDP-GLUKOSA DEHIDROGENASE

UDP-GLUKOSA

UDP-GLUKORONAT

2 NAD
UDP-GLUKORONAT

2 NADH + 2 H+

UDP-GLUK.TRANSFERASE

BILIRUBIN MONOGLUKORONIDA+UDP

+
BILIRUBIN

UDP-GLUKORONAT

UDP-GLUK.TRANSFERASE

BILIRUBIN DIGLUKLORONIDA+UDP

+
BILIRUBIN MONOGLUKORONIDA
2 mol. BILI. MONOGLUKORONIDA

BILI. DIGLUKORONIDA + BILIRUBIN

DISMUTSE

BILIRUBIN DIGLUKORONIDA DISEKRESI KE DALAM EMPEDU, SECARA

AKTIF DITERUSKAN KE USUS.

DI USUS :
DI ILEUM & COLON, KONJUGASI DILEPASKAN.

BILIRUBIN DI REDUKSI OLEH BAKTERI USUS menjadi

UROBILINOGEN / STERKOBILINOGEN.
UROBILINOGEN /
STERBILINOGEN

Sebagian di SEKRESI MELALUI FESES

Sebagian di REABSORPSI MASUK KE HEPAR:

sebagian di OKSIDASI MENJADI

BILIRUBIN LAGI KONJUGASI
lagi DAN SETERUSNYA.
SIKLUS ENTEROHEPATIK

Sebagian lagi PEREDARAN DARAH

HEPAR PEREDARAN DARAH SISTEMIK
KE GINJAL TERUS KE URINE.

Hb CATABOLISM AND BILIRUBIN EXCRETION

LIVER

R E S

LIGANDIN

Hb

HEME +GLOBIN

BILIRUBIN
BILIRUBIN

UDP GLUKORONIL
TRANSFERASE

A.A

BILIVERDIN

HAPTOGLOBIN

UROBILINOGEN
GINJAL

UROBILINOGEN
INTESTINE
BILI.DIGLUK
BILI.

UROBILIN
(URINE )

RED

COLON

STERKOBILIN ( FESES )

HIPERBILIRUBINEMIA
KADAR BILIRUBIN DARAH >> 1 mg/dl
PENYEBAB :

1. PRODUKSI BILIRUBIN MENINGKAT dan

HEPAR NORMAL.
2. HEPAR ADA KERUSAKAN GAGAL MENGEKSKRESI
3. SUMBATAN SALURAN EKSKRESI.

BILIRUBIN TERTIMBUN DALAM DARAH KE JARINGAN-JARINGAN,

TERUTAMA KE KULIT DAN SKLERA MATA TERJADI JAUNDICE = IKTERUS.

NILAI AMBANG BILIRUBIN DARAH : 2 - 2,5 mg/dl

TEST UNTUK BILIRUBIN :

VAN DEN BERG, DENGAN MEMAKAI DASAR REAKSI EHRLICH.
ASAM SULFANILAT DIAZO + BILIRUBIN
( diazo Ehrlich )

SENYAWA KEMERAHAN
1. LANGSUNG BEREAKSI DENGAN REAGENT EHRLICH

DIRECT RECTING : DIRECT BILIRUBIN = BILIRUBIN KONJUGASI

2. TIDAK LANGSUNG BEREAKSI SETELAH DITAMBAH DENGAN

METHANOL TEST (+) : BILIRUBIN TAK TERKONJUGASI
= UNCONJUGATED BILIRUBIN = INDIRECT BILIRUBIN.

HIPERBILIRUBINEMIA BERDASAR JENIS BILIRUBINNYA :

I. UNCONJUGATED HYPERBILIRUBINEMIA :
I.1. IKTERUS NEONATORUM FISIOLOGIKUM :
-. BERSIFAT SEMENTARA
-. CAUSA : SISTEM KONJUGASI HEPAR MASIH BELUM
SEMPURNA, AKTIVITAS ENZIM UDP-GLUKORONIL TRANSFERASE MASIH RENDAH.
-. UNCONJUGATED BILIRUBIN (FREE BILIRUBIN = BILIRU-

BIN ALBUMIN) DALAM DARAH

I.2. SINDROMA CRIGGLER NAJJAR TIPE I (IKTERUS NON HEMOLITIKUS KONGENITAL) :
-. PENYAKIT KETURUNAN

-. CAUSA : AKTIVITAS UDPGLUKORONIL TRANSFERASE (-)

I.3. SINDROMA CRIGGLER NAJJAR TIPE II : lebih ringan dari tipe I
I.4. SINDROMA GILBERT :
CAUSA - KELAINAN PADA LIGANDIN
- AKTIVITAS ENZIM UDP-GLU RENDAH

II. CONJUGATED HYPERBILIRUBINEMIA :

CONJUGATED BILIRUBIN LARUT DALAM AIR DAPAT
DIKELUARKAN MELALUI URINE WARNA URINE SE
PERTI EMPEDU CHOLURIC JAUNDICE
II.1. SINDROMA DUBIN JOHNSON (IKTERUS IDIOPATIK) :
=. SISTEM EKSKRESI EMPEDU TIDAK SEMPURNA
II.2. SUMBATAN SALURAN EMPEDU.

PEMBAGIAN BERDASAR KEADAAN KLINIS :

1. NEONATORUM JAUNDICE = IKTERUS NEONATORUM

2. HAEMOLYTIC JAUNDICE = IKTERUS HEMOLITIK

3. HEPATIC JAUNDICE = IKTERUS HEPATIK
4. OBSTRUCTIVE JAUNDICE = IKTERUS SUMBATAN

SEBAB-SEBAB BILIRUBIN DARAH MENINGKAT :

1. PEMECAHAN HEMOGLOBIN / HEM MENINGKAT :
MISAL : -. MALARIA
-. KELAINAN SEL DARAH MERAH HbF >>
LAB. : * BILIRUBIN ALBUMIN ( FREE BILI. = BILI. INDIREK )
* UROBILIN URINE

STERKOBILIN FESES

* BILIRUBIN URINE (-)

2. KEMAMPUAN KONJUGASI HEPAR < / :

MISALNYA PADA BAYI PREMATUR SINTESIS UDP-GLUKORONIL
TRANSFERASE KURANG.
LAB. : - BILIRUBIN INDIREK
- STERKOBILIN FESES dan UROBILIN URINE
ICTERUS NEONATORUM PHYSIOLOGICUM :
-. BILA KURANG DARI 1 MINGGU BILIRUBINNYA SUDAH HILANG.

-. BILA BILIRUBIN LEBIH DARI 1 MINGGU B A H A Y A :

ENCEPHALOPATHIA KERN ICTERUS

3. SUMBATAN SALURAN EMPEDU :

> KARENA BATU, CACING, CIRRHOSIS HEPATIS.
> LAB. : BILI. DIREK
. STERKOBILIN FESES ATAU (-)
BILI. URINE (+)

. UROBILIN URINE ATAU (-)

4. KERUSAKAN SEL HEPAR :

> TERJADI PADA HEPATITIS.
> SEL RUSAK / SAKIT ISI SEL JADI BOCOR KELUAR
MASUK KE SINUSOID HEPAR KE PEREDARAN DARAH

SISTEMIK.
> LAB. : . BILIRUBIN DIREK & INDIREK
. UROBILIN URINE

KADAR NORMAL DALAM DARAH :

BILIRUBIN DIREK

: 0,1 - 0,4 mg/dl

BILIRUBIN INDIREK : 0,2 - 0,7 mg/dl

. BILIRUBIN URINE (+)

. STERKOBILIN

SELAMAT BELAJAR, SEMOGA SUKSES