infecta a clulas especficas del sistema inmunitario, los linfocitos T CD4+, la funcin de estas clulas es activar la respuesta de los linfocitos B una vez detectado el virus por su envoltura (cpside vrica) para que stos linfocitos produzcan los anticuerpos que marcan al VIH y que sean destruidos por otras clulas como los macrfagos o NK. El VIH utiliza los mecanismos bioqumicos de los linfocitos T CD4+ para reproducirse. Al transcribir su material gentico a esta clula, ocurren muchos errores al azar que resultan en mutaciones de la envoltura de los virus de la siguiente generacin. Tantas variaciones impiden que el sistema inmunitario responda eficientemente. Estas mutaciones son resultado del proceso normal de reproduccin de los retrovirus como el VIH. (Hernndez M. et al. 2002) La prueba confirmatoria Western Blot Accutrack HIV-1 se basa en los procedimientos clsicos de Western Blot que estn previamente realizados por el fabricante (traslado de los antgenos a membranas por tcnicas electroforticas, conformando las tiras) para poder realizar las determinaciones. El fundamento de la prueba es una reaccin Ag-Ab la cual se revela con un Ab asociado a una enzima, la cual al ser estimulada con su sustrato, genera productos coloridos.
En el caso de la reaccin Ag-Ab,
los Ab generados por los pacientes infectados con el virus reaccionan con ciertos Ag de las tiras. La reaccin Ag-Ab permite que el Ab exponga su Fc la cual es reconocida por la IgG anti-Humano que se agrega en la metodologa. La IgG est acoplada a una fosfatasa alcalina la cual al entrar en contacto con su sustrato, genera la coloracin en las bandas. Para el caso de los pacientes: Toledo Ortiz Manuel y Hernndez Hernndez Omar, se tiene que son positivos para la prueba, al presentar anticuerpos contra algunas protenas vricas, las cuales se especifican en la tabla 1. Mientras que para la paciente Len Ramrez Ericka, el resultado es negativo, al no observar ninguna banda (imagen 1). En cambio, el kit InmunoComb II HIV 1 Y 2 Combfirm, es un ensayo inmunoenzimtico indirecto de fase slida (EIA). La fase solida es un peine con 12 proyecciones (dientes). Cada peine tiene 6 pares de dientes, con seis puntos de antgeno por par (3 puntos en cada diente). El diente izquierdo de cada par tiene un punto superior sensibilizado con inmunoglobulina humana (control interno), y los Laboratorio de Inmunologa Aplicada Prctica
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dos marcadores p24 y p31. El
diente derecho tiene tres puntos
de protena derivadas gp41, gp120 y
de
env gp36.
La bandeja de desarrollo tiene 6
filas (A-F), cada fila contiene una solucin reactiva lista para su uso en diferentes fases del anlisis. La prueba se desarrolla por fase, desplazando el peine de una fila a otra, con incubacin en cada una de las fases. En esta prueba se ponen en manifiesto los anticuerpos antiVIH, si estn presentes en las muestras se enlazaran especficamente a los antgenos de VIH sobre los dientes del peine. La fosfatasa alcalina unida reaccionar con componentes cromognicos y los resultados se visualizan como puntos grises en la superficie de los dientes del peine. Al observar el peine, se tiene que en los dientes 5 y 6 (correspondientes a la paciente Len Ramrez Ericka), no se observan puntos, por lo que la prueba es negativa. Sin embargo para el siguiente par de dientes (7 y 8) se observa en el izquierdo, el 7, solo un punto, correspondiente al control interno, y en el derecho se observan dos puntos: el del gp120 y gp41. Por lo que se interpreta como positivo para HIV-1. Siguiendo con el par 9 y 10, se observa algo inusual, puesto que en el 9 se observa el punto de control y adems ligeramente el correspondiente a p24, mientras en el diente 10 se aprecian el
gp120 y gp41. Este resultado no
cuadra con la tabla de interpretacin del inserto. Por lo que este dato no es confiable y la prueba debe repetirse. Finalmente los puntos 11 y 12 se observan muy similares a los pares anteriores, solo que para este caso, en el diente izquierdo (11) se observa mejor el punto para p24 (imagen 3). De igual manera, este resultado no es confiable y la prueba debe repetirse, por lo que no se puede dar un resultado certero. El error presente en estos ltimos dos resultados puede deberse muy probablemente a que el kit haba pasado su fecha de caducidad al momento de emplearlo. Conclusin. Se lograron identificar mediante dos kits distintos varios casos de probable infeccin por VIH-1, con la tcnica de western blot asociando la agrupacin de bandas que indica la generacin de anticuerpos por parte de los pacientes infectados, contra los antgenos encontrados en dichas bandas. Y mediante un ensayo inmunoenzimtico indirecto de fase slida, respectivamente. En el caso de los pacientes con una interpretacin indeterminada, es necesario repetir la prueba y que se realicen pruebas confirmatorias para descartar que sea un posible portador de VIH. Encontrar una vacuna contra el virus de Inmunodeficiencia Humana (VIH) es uno de los
compromisos de los cientficos en
la actualidad, puesto que desde su deteccin hasta ahora, ninguno de los seropositivos de los ms de 60 millones de infectados se ha curado de manera natural o con medicamentos. Bibliografa. -Hernndez M., Dimas E. (2002) La infeccin por el virus de inmonodeficiencia humana (VIH):
estudio descriptovo y experimental
del compromiso de rganos y sistemas, infecciones y Laboratorio de Inmunologa Aplicada Prctica
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neoplasias Consejo de desarrollo
cientfico y humanstico de la Universidad Central de Venezuela, Caracas, Venezuela. pp: 63-66 y 139.