BILIRRUBINA

La bilirrubina IX es un pigmento biliar amarillo anaranjado que proviene de la degradacin

enzimtica de la protoporfirina IX, mecanismo ejemplificado en la siguiente figura:

La estructura de la bilirrubina fue determinada en 1942 por cristalografa de rayos X, dicha

molcula tiene como propiedades:
Ser insoluble en agua.
Ser soluble en una variedad de solventes orgnicos.
Podemos observarla como una estructura linear tetrapirrlica.

Pero esta estructura no hace predecible la condicin de liposolubilidad, ya que las dos molculas
de cido propinico haran a la molcula altamente polar y por lo tanto hidrosoluble.
Los estudios antes mencionados confirmaron la estructura asignada a la bilirrubina, as como dos
rasgos estructurales adicionales:
Conformacin trans para los dobles enlaces C4 - C5 y C15 - C16.
Una estructura envuelta hacia adentro por formacin de puentes de hidrgeno que involucra a
los carboxilos del cido propinico con los nitrgenos del anillo pirrlico.

La molcula de bilirrubina en estado cristalino no es por lo tanto un tetrapirrol lineal, toma la

forma de una "teja lomada", estando ese "lomo" a lo largo de la lnea de los C 8, 10 y 12, en esta
configuracin los anillos A y B estn en un plano y los C y D en otro, siendo el ngulo de 98.
La conformacin de la bilirrubina en solucin acuosa a pH 7,4 no se conoce, pero la formacin de
una estructura con puentes de hidrgeno en dicho medio explicara algunas de las propiedades
nicas de la bilirrubina.

Cuando la bilirrubina se expone a la luz pasa a conformacin cis, lo cual no permite las uniones
internas de hidrgeno y se genera una forma ms hidrosoluble y por lo tanto ms rpidamente
excretable.
METODOLOGA

Los mtodos ms ampliamente utilizados son los basados en la diazo reaccin de Ehrlich
descripta en 1883; el cido sulfanlico diazotado reacciona con la bilirrubina para producir dos
azopirroles que son rojo-prpura a pH neutro o azules a pH alto o bajo.

El mtodo de Jendrassik-Grf descripto en 1938 y luego modificado por Doumas y colaboradores

(1985) da resultados para la bilirrubina srica que pueden ser comparados con el mtodo de
Lauff, actual mtodo de referencia, que utiliza HPLC; contra el cual es posible comparar la
exactitud de los ensayos de bilirrubina, de rutina, en los laboratorios.
Material de muestra:
Uso de suero o plasma heparinizado.
Evitar la lipemia, obtener la muestra en ayunas.
La bilirrubina sufre foto-oxidacin por exposicin a la luz blanca o UV.
La sensibilidad a la luz es temperatura dependiente.
Para lograr ptima estabilidad se aconseja dejar las muestras en la oscuridad y a temperatura
ambiente.