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ARTCULO ESPECIAL
Resumen La determinacin del cortisol srico total forma parte fundamental de la exploracin bioqumica de
la funcin adrenocortical. Dado que esta hormona circula en plasma, en parte unida a protenas
de transporte y en parte en estado libre, existe la posibilidad de realizar la determinacin de sus diferentes
fracciones no solo en sangre sino tambin en orina, saliva y otros fluidos biolgicos. Es posible realizar tanto
determinaciones basales como pruebas funcionales y de esta manera evaluar la secrecin de cortisol en un
momento dado del da, estudiar su variacin circadiana y analizar su relacin con el resto de los componentes
del eje hipotlamo-hipfiso-adrenal. Las mediciones habituales de cortisol en sangre, saliva y orina reflejan los
niveles de esta hormona en el momento de la recoleccin o durante un perodo de 24 horas. Recientemente
han aparecido trabajos en los cuales se propone la determinacin de cortisol en cabello y uas como potenciales marcadores del estatus hormonal en perodos ms prolongados. El objetivo de esta revisin es realizar
una puesta al da acerca de la metodologa disponible actualmente en nuestro medio para la evaluacin del eje
adrenal, haciendo hincapi en su aplicacin para el diagnstico clnico.
Palabras clave: cortisol srico, cortisol libre urinario, cortisol salival, protena ligadora de corticosteroides,
sndrome de Cushing, insuficiencia adrenal
Abstract
A critical analysis of cortisol measurements: an update. Serum cortisol measurement is a very use
ful tool in the biochemical evaluation of adrenocortical function. Since this hormone circulates in
blood mainly linked to binding globulins but is also partially free, it can be measured not only in the blood but
also in urine, saliva and other biological fluids and tissues. Basal determinations as well as dynamic testing may
be performed to evaluate the circadian variations, to estimate the diurnal cortisol secretion and to analyze its
relations with other components of the hypothalamic-pituitary-adrenal axis. Measurements of cortisol in blood,
saliva and urine may reflect the cortisol secretion at the time of sample collection or during a 24 h span. Recently,
it has been proposed the determination of cortisol in tissues such as hair and nails like a means of evaluating
the hormonal status during prolonged periods. The aim of this paper is to update the methodology for measuring
cortisol and its usefulness for the clinical diagnosis of troubles of the hypothalamic-pituitary-adrenal axis.
Key words: serum cortisol, urinary free cortisol, salivary cortisol, corticosteroid binding protein, Cushing
syndrome,adrenal insufficiency
Aceptado: 29-VII-2013
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transportadora es reversible y sigue la ley de accin de masas. Bajo ese concepto se desarrollaron diversas tcnicas
para la determinacin de las hormonas libres considerando
que el cortisol dbilmente unido a la albmina puede ser
considerado como libre (cortisol biodisponible)9.
Una dificultad fundamental en la determinacin de
hormona libre es la perturbacin del sistema de anlisis
de equilibrio protena-ligando como ocurre in vivo. Si
una cierta cantidad de hormona inicialmente unida a
las protenas plasmticas se secuestra en el sistema de
ensayo, la concentracin del compuesto libre se altera.
El alcance de esta alteracin depende de la afinidad y
capacidad de unin de las protenas transportadoras. La
dilucin del suero y la presencia de aditivos que pueden
unirse a protenas transportadoras (conservadores, protenas, disolventes, compuestos presentes en el medio
de reaccin) son condiciones que tambin pueden alterar
el equilibrio protena-ligando en la muestra.
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Mtodo de ultrafiltracin
Se usa un dispositivo de ultrafiltracin desechable, en el
cual se coloca plasma y se centrifuga a 37 C. El suero se
equilibra 30 minutos a 37 C en un tubo de vidrio donde
previamente se evapor una solucin etanlica de cortisol
tritiado. Esta tcnica no introduce ninguna modificacin o
dilucin del suero y requiere un corto perodo de incubacin, en contraste con la dilisis que requiere dilucin de la
muestra, utiliza un buffer que puede cambiar la capacidad
de unin de suero y es de incubacin prolongada. Una de
las desventajas de la ultrafiltracin, as como de la dilisis
de equilibrio, es la necesidad de trabajar a 37 C debido a
que la afinidad de la protena depende de la temperatura.
El efecto de la temperatura en la unin de cortisol ha sido
descrito por Vogeser y Briegel que comprobaron que se
puede obtener un aumento de 80% en el cortisol libre cuando la temperatura de incubacin de la muestra durante la
dilisis de equilibrio aumenta de 37 a 41 C23. Esto explicara
el aumento de la disponibilidad de cortisol libre en la fase
aguda de enfermedades asociadas con fiebre. La eleccin
de la membrana de ultrafiltracin es crtica: debe permitir la
difusin de molculas pequeas solamente. Adems, antes
de utilizar una membrana de ultrafiltracin o de dilisis se
debe lavar con agua destilada para eliminar los agentes
conservantes. Por otra parte, el cortisol tritiado utilizado debe
tener alta pureza. De hecho, los productos de radilisis no
se unen a las protenas plasmticas o lo hacen dbilmente
y se encuentran principalmente en el ultrafiltrado. Tambin
se puede medir la fraccin libre del dializado o ultrafiltrado
usando un inmunoensayo o espectrometra de cromatografa lquida de masa. Recientemente, un inmunoensayo
automatizado basado en electroquimioluminiscencia mostr
resultados reproducibles y una buena correlacin entre la
ultrafiltracin y la dilisis de equilibrio24. La implementacin
de un inmunoensayo enzimtico propuesto por Christ-Crain
y col.25 ofrece una muy buena reproducibilidad en estas
concentraciones de cortisol (coeficientes de variacin interensayo e intra-ensayo por debajo del 10%).
Determinacin
Rango de
referencia
Cortisol plasmtico
matinal (8-9 h)
CLU 7-8 h
CLU 22-23 h
CLU 24 h
Cortisol salival
matutino
Cortisol salival
nocturno
5-25
Unidades
g/dl
80-200
hasta 28
20-100
1.9-19
ng/ mg de creatinina
ng/ mg de creatinina
g/24 h
nmol/l
Hasta 7.0
nmol/l
Aplicaciones clnicas
La medicin de cortisol en muestras aisladas puede ser de
valor en ciertas circunstancias aunque diversos factores fisiolgicos y patolgicos pueden influenciar el valor observado
y la interpretacin del mismo. La medicin se efecta habitualmente en muestras de sangre extradas entre las8-9h,
horario que se ha estandarizado clsicamente para disminuir
la variabilidad originada en los cambios circadianos. La Tabla 2 muestra un listado de las condiciones en que pueden
hallarse concentraciones bajas o elevadas de la hormona.
Valores disminuidos
(< 5 g/dl)
Valores elevados
(> 25 g/dl)
Muestras nocturnas
Embarazo
Corticoterapia Anticonceptivos
Enfermedad de Addison
Ciruga, trauma
Panhipopituitarismo
Sndrome de Cushing
Insuficiencia corticotropa
Resistencia receptor GC
aislada
Hiperplasia adrenal congnita
Posoperatorio de ciruga exitosa
por sndrome de Cushing
GC: glucocorticoides
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